DryPlates® PS - Laboratorios MICROKIT
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1. 100 ml de por ejemplo Buff Peptone ClNa Solution pH 7 0 Pharmacopea MICROKIT RPL115 DMT206 apague la bomba en cuanto se haya terminado el l quido del embudo de filtraci n y deposite la membrana sin demora sobre la DryPlates PS prehidratada Si pre hidrat el disco con 1 ml de agua de muestra en vez de agua est ril y filtr por ejemplo 100 ml recuerde que su recuento ser en tal caso en 101 ml MODO DE EMPLEO para ambientes interiores superficies y aires y para detecci n de pat genos tras enriquecimiento 1 Puede estriar un escobill n con el que haya barrido una muestra de superficies o con un asa con caldo enriquecido sobre cualquier DryPlates previamente hidratada con 1 ml de agua est ril recuerde el disco sobre el ml de agua y no al rev s El viraje de la estr a y las colonias aisladas al final de la misma contrastar n mejor con el color de base del medio Tambi n puede dejar la DryPlates de cualquier medio previamente hidratada con 1 ml de agua est ril recuerde el disco sobre el ml de agua y no al rev s abierta durante 10 15 minutos en los puntos cr ticos de la sala para realizar una estimaci n de campo de la flora ambiental aunque es mejor usar un muestreador tipo Microflow o MBS para obtener recuentos por m de aire CONSERVACI N Y PRECAUCIONES DE USO Almacenar a temperatura ambiente ideal 15 252C no en nevera ya que en sta la humedad es m s f cil que prehidrate y estropee los disco2. as let rgicas del pat geno Las DryPlates PS obtienen un 138 214 de recuperaci n respecto a Agar Cetrimida y un 112 136 respecto a las CompactDry PS Los resultados son mucho m s r pidos desde 18h respecto a 48h 4 Antes de leer es muy importante verificar que la superficie de la placa sigue h meda Leer los resultados buscando s lo las colonias diana P aeruginosa crece con colonias amarillas verdes o azules a menudo con m rgenes lobulados si se les da tiempo para crecer que suelen desarrollar a su alrededor pigmentaciones fluorescentes de colores amarillos verdes o azules A veces dichas pigmentaciones se desarrollan mejor en la periferia de la placa donde tienen m s ox geno para generarse MODO DE EMPLEO para muestras l quidas filtradas 100 250 ml 1 2 Siga los mismos pasos que en el caso anterior pero con las siguientes salvedades Prehidrate el disco nutriente incluido en la placa con 1 ml de agua est ril o de la misma agua de muestra Recuerde a ada el disco sobre el ml de agua y no al rev s Filtrar la muestra l quida 100 250 ml por una membrana est ril de 0 45 de 0 22 um y depositar la membrana sobre el disco prehidratado de la DryPlates PS evitando la formaci n de burbujas entre ambos Evite estresar las posibles c lulas de Pseudomonas aeruginosa retenidas en la membrana es conveniente enjuagar revitalizar la membrana una vez reci n filtrada la muestra filtrando acto seguido por ella
3. e ps g 59 bikaba 3 MICRO KIT Y e Apartado de Correos P O Box 44 Bo 28210 Valdemorillo Madrid Spain Pasi n por la creatividad 12 34 91 897 46 16 Fax 34 91 897 46 41 E mail microkitOmicrokit es Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997 Web www microkit es http www laboratoriosmicrokit blogspot com COLICULT MCC COSMETIKITO COMPACT DRY PLATESO Blog http www medioscultivo com CRIOTECASD CHROMOSALM DESINFECTESTO PLAQUISO KITPRO 5S NUTRILINIA M IDENTO SEILAGUA MUGPLUS CROMOKITO DryPlates PS Detecci n precoz de Pseudomonas aeruginosa Placas preparadas de medio deshidratado en disco nutriente est riles y listas para su uso inmediato que se hidratan precisamente mediante la muestra en el momento de inocularla en fr o lo que ahorra el hervido fusi n enfriado a 452C y las 2 horas de todo este trabajo propio del medio cl sico para siembra por inclusi n en masa Extraordinaria caducidad 1 a o desde fabricaci n El Agar Cetrimida es el medio normativo para detecci n y recuento selectivos de Pseudomonas aeruginosa en agua y refrescos Normativa Europea y RD 1074 2002 para aguas de bebida envasadas cosm ticos ISO 22717 y medicamentos Pharmacopea medio N La adici n en el medio de un crom geno espec fico dise ado por MICROKIT permit a en lotes anteriores la r pida detecci n de Pseudomonas aeruginosa en s lo 18h pero la opacidad de la colonia imped a ver su confirmativa fluoresc
4. encia por lo que la detecci n precoz daba lugar a falsos positivos y a falsos negativos Ahora las colonias ya no crecen de color rojo al ser el medio Agar Cetrimida cl sico sino de tonos amarillos azules o verdes Y a menudo seg n sea el estado metab lico de la cepa aislada igualmente crecen desde las primeras 18h pero con un halo fluorescente de color amarillo verde o azul dependiendo de la proporci n de pioverdina y de piocianina de la cepa Por todo ello DryPlates PS es la herramienta que estaban esperando todas las envasadoras de agua y refrescos as como todas las f bricas de productos farmac uticos y cosm ticos para poder liberar lotes gracias a la detecci n precoz del pat geno m s lento que deben controlar y que les retrasaba hasta ahora el resultado global del laboratorio microbiol gico hasta 3 5 d as Enhorabuena por utilizar el sustituto del Siglo XXI de los medios deshidratados y de los medios preparados hidratados DryPlates PS las cepas de P aeruginosa crecen con colonias verdes amarillas o azules MODO DE EMPLEO para muestras de 1 ml a menudo con halo fluorescente que se puede 1 Con unas pinzas sacar un disco nutriente de su bolsa y colocar en la tapa concentrar al borde de la placa de una placa DryPlates reci n abierta 2 A adir al centro de la base de la placa 1 ml de la muestra l quida si es espesa realice diluciones decimales hasta que sea acuosa y dejar caer encima el disco nutriente c
5. garizado y hasta 121 respecto a otros m todos similares de placa deshidratada Dise o y fabricaci n 100 espa oles Derechos de explotaci n de la PATENTE concedidos a dos empresas Laboratorios MICROKIT S L Madrid y BC Aplicaciones Analiticas S A Barcelona tras m s de 8 a os de ensayos y mejoras en sinergia para poder ofrecerle el mejor y m s vers til producto de estas caracter sticas DryPlates es marca registrada por Laboratorios MICROKIT S L Texto elaborado el 19 de Octubre de 2013 modificado el 28 Octubre 2014 2
6. on pinzas o simplemente cerrando la tapa con disco sobre la base de la placa nunca al rev s si lo hace al rev s 1 ml de muestra sobre el disco la rapid sima difusi n de este medio le har captar mucha menos muestra que quedar alrededor del disco esperando a poder ser absorbida por el mismo durante la incubaci n dando lugar a recuentos mucho m s bajos de la realidad Cerrar la placa 3 Incubar en estufa IMPORTANTE en atm sfera h meda dejar un vaso de agua lleno en la estufa sin voltear las placas el disco abajo para que no se fugue parte de muestra durante la incubaci n Nunca incube las DryPlates directamente sobre la bandeja de la estufa intercale dos placas vac as o el tap n naranja incluido como base porta placas para poner entre la torre de placas y la base met lica de la estufa para que la DryPlate no se seque durante la incubaci n por el exceso de calor del metal igualmente no deje que la torre de placas toque la paredes de la estufa Las condiciones de incubaci n tiempo y temperatura son las est ndar 35 372C durante 1 5 d as Las cepas de P aeruginosa que no est n en estado subletal o estresado crecer n desde las primeras 18h como peque as colonias puntiformes detecci n precoz Aparezcan o no estas minicolonias en 18h siga incubando para ver su crecimiento y la formaci n de pigmentos propios de este pat geno que ya suelen aparecer a las 24 48 h y para garantizar que no hab a ni siquiera c lul
7. s nutrientes Es imprescindible almacenar en lugar muy seco y oscuro ya que la humedad y la luz da an irreversiblemente los medios de cultivo deshidratados Si trabaja en zonas de alta humedad atmosf rica almacene las DryPlates bien cerradas en su bolsa dentro de una caja herm tica tupper con sacos antihumedad ej VRB747 Otros muchos medios en DryPlates Aerobios totales en alimentos y cosm ticos en aguas en aguas oligotr ficas levaduras y Mohos E coli y dem s coliformes Enterobacterias Staphylococcus aureus Bacillus cereus Burkholderia cepacia Candida albicans Enterococos fecales Salmonella spp Listeria monocytogenes Vibrio parahaemolyticus Vibrio cholerae Flora acid l ctica Otros medios en formato DryPlates cons ltenos DryPlates PS Arriba izda y dcha detecci n precoz en s lo 18 24 h ya apuntan peque as colonias de P aeruginosa y se observa una ligera pigmentaci n amarilla sea en las colonias sea en el medio Abajo a las 48 h las colonias siguen creciendo muestran sus m rgenes lobulados y algunas muestran halo fluorescente amarillo arriba dcha y dcha verde arriba izda o azul abajo El usuario final es el nico responsable de la eliminaci n de los microorganismos seg n la legislaci n medioambiental vigente Autoclavar antes de desechar a la basura Validado en base a la Norma UNE EN ISO 16140 con recuperaciones muy superiores hasta 138 respecto al mismo medio cl sico a
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