1. Disposiciones generales
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1. O E AA A A A E A A A A A Ak El di metros es la distancia entre los fondos internos de dos soporios opuestos medida a trav s del centro de rotaci n de la cabeza de la centrifuga estando los soportes extendidos horizontaimente 1122 Tubos de centrifuga c nicos graduados conto se in dica a continuaci n De 6 a 1 0 ml en divisiones de 0 2 mi De 40a 20m en divisiones de 0 2 mi De 2049 10 0 mi en divisiones de 0 5 mi 21 julia 1977 16233 A E a rar De 10 5 a 20 0 ml en divisiones de ip rml y a 56 ml udaa marca que quede por lo menos a 13 mm del barde dei tubo 1123 Miosciador el ctrico 1124 Tuba si n de vidrio 113 Proccodimienta Se a aden 16 6 12 g de la nivos ra seg n ge trate de leiho desnujade u completa reepectivamoni o a 100 mi de agua iira tada a la iemperatora de 24 en el vaso especial del mez celador que seguidamente se pone en ste para agitar durante PO seguidos exactos Si hay necesidad inmediata de volver a emplear el vaso del mezclador puede vorterse la soluci n tulil en un vaso de precipitaci n apropiado 5e deja reposar la 50 luci n hasta que ja espuma se separe lo suficiente para poder quitar a completamente con una cuchara El periodo de reposo despu s de ja mezcla no ha de exceder de 15 minutos Despu s de separada la espuma se mezcla completamente on una cuchare durajle 5 segundos y seguidamenta se llena un tubo c nico haste la marca de 50 mL Se centrifuga du2. A e M3 Procedimiento Hd Preparaci n de la muesica iransvasar loda la muts ira de la leche en polvo a un frasco seco y lapado de un Yy tumen igual al doble aproximadamente del de a muestra mediar intimamente por rotaci n y agitaci n len el caso de que to ue pueda obtener una homogeneizaci n completa por esto procedimiento extraer con objeto de reulizar determinaciones posielas dos muestras en dos puntas lo m s distantes pusi Sie el uno del obra Mis Determinaci n Colocar le capsula destapada y ls correspondiente tapa en da estufa de desecaci n durante 1 hora a la emperatura de 102 Colocar la tapa sobre l4 c p sula y pasar a de la estufa al desecador A continkneci n eniriar a la ermperadura ambiente y posar introducir aproximadamente e de leche en polvo en la c psula tapar la capsnla y pesar ravidamente con la mayor exaciitud posible Destapar la c p suela y colocar a con su tapa en la estufa a una temperatura de 102 24 durante 2 horas Voiver a colocar la tapa poner la c psula on el desecidor dejar enfriar a temperatura ambiente y pesar r pidamento con la mayor exactitud posible Calentar la c psula abierta y su tapa a 102 pw en la estufa durante 1 hora suplementaria volver a tapar y dejar enlriar on el desecador a temperalura ambiente pesar de pUe vo Repetur la operaci n hasta que lis pesadas sucesivas no d fieran en m s de 0 0005 g La desecaci n se aceba aproxim
3. todo de c toulo de contento de agua gt Emplear da f rmula Mi y agua 5 x 100 AT Siande Mio masa en gruroos de la munsira nos Mar en grantas do da mersa Crspe s de secar 22 Metodo de calculo del extracto seco magro Erigpielr la formula LA AJ iB B x 10 Extrucio seca magro ee _ Siendo 2 masa en eramos del crisol varin gt masa eramos del crisol conteniendo sedimento B masa en gramos de la c psula vacia By z masa en gramos de la c psula con sedimento residual M s mesa en gramos de la muestra 433 M lodo de c lculo del coriltenida de grasa Grasa 100 E S E porcentaje en masa de agua fealculuda en 4 8 7 a porcentaje en masa de extracto soso magro icaleidado en 4 5 2 Para la determinaci n del contenido de agua la diivccucia entre el resultado de determinaciones paralelas no deber exce der de 9 1 g de sgua pars 100 g de mantequilla m B O del E N m 173 Para la determinaci n del conienido de extracio seco magro la diferencia entre resultados de determinaciones parulelas no deber cxceder de 0 03 g de extracto seco magro para 100 g de manieauila Lo DETECORIN DE GRASA VEGETAL EN CRASA DE LPMCHE POE CUOMATOGRATA DE CASES DE ESTEHOGI S ad Principio Los digit nidos de estero se disuelvea en una mezcia de formumida y dimetil formamida y los esteroles liberados se extraen con pentano y
4. ila secada 42 Material y nparotos 421 Balanza enul tica con una tolerancia de 0 1 me 422 Estufa de desecaci n bien ventilada y controlada con termocxtato ajustada para que funcione a una tonvucratura de PED E LIHO Capsulas metalicas de porcelana o de vidrio resis tentes a ca Corrosi n qur tengan por lo menos 2 mm de alju ra y 30 nun de di motro 21 julio 1977 B O del E N m 173 ns rr AAA AA 324 Crisoles filrantes de vidrio sintetizado Iporcsidad n mera icon matraces de Ritraci n a la trompa 425 Varia con pieza final de materjal adecuado 4 3 Rudclivos Erer de petroleo con limites de ebullici n entre 30 C y 60 Este ronclivo no dove dojar ning n residuo por evaporaci n 4 Procediricata t31 Preparacion de fa muissira Fxcepto cuando ol mez clado no so considere necesario lo muestra debe mezclarse agi tando ton una varilla o con un rcitador mec nica le M s r pidimente posille sin exceder de 1 minuto La temperatura uclomezctido deber estar compreodida normalmente entre 25 E y FOCO peon ning n caso deber exu der de 25 Antes de pesar li muestra deber ponerse siempre A la empuiratur arbjerte 442 Determinaci n de gua Secar la c psula en la estu a hasta mana constante Dejar enfriar la c psula en desccador hazta la ieruperatura ambiente 139 35 mind y pesar Pesar en la co nsi a de 5a 10 g de la muestra de mantequilla Mantener
5. 58 separan por cromatograf a de gases Si se obliene en el crom atograma un pico con el tiempo de ro tenci n del betu sitostuerol se concluye la presencia de Elusa vogrial en la muestra de grasa examinada ug Material y aparatos zai Cromat grafo de gases equipado de un detector de ionizaci n de lama con un inyector de plata o de vidrio con un sisiema de inyecci n irecte en la columna y cof un TA nsbrador 5232 Columna de cromatograf a de gases de vidrio o de acero inoxidabie en forma de U o en espiral de 6 2 m de longitud di metro interior de 3 4 mm Se recomienda el vidrio pues mgunos tipos de acero inoxidable den resultieci os err neos por alieraci n de los esterolos 52 Microjerinta capaz de proporcionar dosis de 5 10 microlitros a Recados 531 Mezcla de volumenes iguales de formanida y dimetit fourta mida XA n Pentano 533 Heleno de la columbpa fase estacionaria de gon de silicona tipo metilico estable hasta por lo menos 300 E que inprigun on ra 4 por 100 una herra de diatomeas Calcinacda lavanda af cido y sHanizade de Eraliulometr a 80 100 0 10012 de malla 534 Soluci n para el ensayo de sensibilidad 1 me de co lesttrol de 1 ni de n penta o recientemente preparato a partir dz la grasa de leche cono se describe en 54 2 3545 Soluci n para el ensayo de resoluci n de los picos 08 me de fitosterol de accite de colza y 01 me de colesterol sn 1 m de n penlano Los esteroles deben
6. la rapsa en da estufa durante una lora por lo meros Dhiar que se onlr e la c psula en desecador a la temperatura embiente do 30 35 mind y pesar Repetir el secada a intervalos de media hori Resta masa consta ct varie nn igual gt inferior e 1 5 riji ramosi Todas las pesadas se har n con urna precisi n de 0 1 THEGO An el caso de que sienente ia masa se toma la masa mingra pari el c lculo No deben smplesrse en esta dotormi naci n malioritdos absorbentes 443 Determisnaci n dal esxtracio sero magro ecar el tri sol de vidrio filirante en la estufa hasta masa constante Detar enfriar el crisol a temperatura ambiente 36 25 min Y pemr A adir de 10 s 35 nj de ter de petr leo caRente a la Ciawi que cautie el exirario seva nrincdente de la determinacion de agua de irdnrcr a que ar disiniva ja Brasa Sepurar Le mayor cantidad posible del sedimento adherido a la c psula inmilfrtando ina varilla y pasar tuantilativamente la soluci n sybre ja punia de la varilla al crisol Roprtir les ype raciones cio veres Lavar el sodirente que queda en el criani con 25 m de ter de petr leo caliebte Secar la c psula y el crisol en la estufa durante 2 horis Delar que la c psula y el crisol se enfria la tonperatura ambiente 20 35 min Y pesar Tknutir das operaciones durante periodos de 30 minutos a la ianperalura de secado haste oues la masa no disminuya M s odas las pesadas se haran con una precisi n de D mg 43 ghoda 431 M
7. limpido Dejar enfriar el matraz hasta 90 A adir 90 ml de agua destilada recientemente her vida a la misma temperatura aproximadamente y mezclar El l quido debe quedar limpido A adir de 0 6 a 0 7 g de piedra p mez y despu s 50 ml de soluci n de cido sulf rico 1N Conectar inmediatamente el matraz al aparato de destilaci n y calentarlo ligeramente hasta que los cidos grasos libres formen una capa superficial limpia Empezar a calentar y regular la Huma de modo que se recojan en el matraz aforado 110 ml de destilado en 19 21 minuios tomando como principio del periodo de destilaci n el momento en que se forma la primera gota en el refrigerante Regular el flujo de agua del refrigerante de modo que se mantenga la icimperatura del agua que sale del refrigerante a 20 fC Cuando se hayan recogido exactamente 110 ml de destilado quitar el mechero inmediatamente y sustituir el matraz aforado por un peque o vaso Mezclar el contenido del matraz aforado epittundo suavemente y sumergir el malraz en un ba o de ugua a 29 212 C durante 10 15 minutos estando la se al de no mi del matraz aforado por debajo del nivel del agua del ba o Agitar el matraz de cuando en cuando Tapar el matraz y mez clar invinti ndolo 4 5 veces sin agitar Filtrar dos 119 ml de destilado por un papel filtro seco de velocidad media idiametro 20 290 mot que se ajusta c modamente ea un embudo El fil trado dobe ser limvido el filico debe ser de tales dimen
8. ml de tamp n de desarrollo de color 63 El pH de la mezcla ha de ser 93 94 A adir 4 gotas de la siluci n BOC 83 5 y dejar 20 minutos tenperatura ambiente para desarrollo de color ipars detectar 21 julio 1977 1628 nwamente la pasteurizaci n a adir solamente 2 gotas do soluci n BACI Determinar la intensidad del color azul por uno de los si guientes m lodos al Con Tot metro Leer intensidades de color de suluci nas cn blanco y problema ftutilizando filtro con transmitancia ma xima a aproximadumente 510 nm restar la kectura de la prusba ep blanca de la del problema y expresar el resuliaco en egui vabentos fenol mediante rejerencias a la curva patr n ublontda con las eprrespondientes soluciones 6382 Generalmente gs innecesaria la extracci n con alcohol butilico cuando se utiliza el fot rirtro si se hace la extracci n con alcohol butllico como on bb cemirifugar la inuesira 5 mirulos pare romper la enrad si n Y separar el agua suspendida en la capa de alcohol Epara esla linnaiidad puede adaptarse una centrifuga Babcocl hacion do adaptadores especiales para tubos en la forma siguiente Cortar una secci n de 1 4 de grueso de un tap n de goma de di metro adecuado que juste en el fondo del vaso de cen trifugaci n Pegar dos tapones de corcho de di meiro adecuado perforar en el centro un orificio de dimensiones adecuadas para alojar un tubo ajusteadamente e introducir la secci n doble de c
9. o e o 10H 11 08 E 1 55 PI Y o y y ms A K A r x 100 x W mnn Pa a 2 Y F condidan de sacarosa l poso de la muestra axpresado en graning porcentaje de proteinas IN x 6 38 de la muestra porcentaje de materia giasa de la muestra volumen en mililitros de la muestra diluida antes de filtrar lectura polarim trica directa polarizaci n antes de la jn versi n lectura polerim trica despu s de la inversi n longitud en dec metros del tubo del polarimetro factor de inversi n cuyos valores se indican m s edolante 5 wW P F Y Fa i i li Pesando exactamente 40 g de leche condensada y utilizando un polarimetro con luz de sodio provisto de escala en grados de ngulo y un tubo de 2 cm de longitud el contenido en saca rosa de las leches condenadas normales C 9 a ap 4 1 Cs5e puede caicular con ayuda de la siguiente f rmulas B O del E N m 173 S D 12 933 0 00612 F 0 00878 P Si la medida de la polarizaci n despu s de la inversi n se dorida A u a temperatura diferente de 20 las cifras obteni das se arben multiplicar por FI 00037 T 20 2952 Cajores del factor de inversione Q Las f rmulas si evitentes den valores precisos de Q para diversas clases de juz con correcciones si es necesario para la concentraci n y la temperatura Euz de sodio y polarimetro con escale en grados de angulo O 0 8823 4 0 0006 10
10. 00001 u 10 unidades de fenol Usar esta soluci n patr n para pra parar soluciones patr n m s diluidas p diluir 5 40 30 38 mi con agua hasta 100 mi para preparar soluciones patr n qu contenga 0 5 1 0 3 10 y 58 mg o unidades de fonol mi nespeclivamente Guardar estas soluciones patr n un tefrigera dor no m s de una semana Analogamente preparar a partir de la soluci n madre 8381 soluciones patr n que contengan 20 30 y 40 unida des ne Medir tas cantidades adecuadas de las soluciones patr n de trabajo en una serie de tubos preferiblemente graduados a 5 0 y 10 0 mi para conseguir un intervalo adecuado de patrones segun se necesite que contengan O fconirol o prueba en blan col 635 1 0 30 50 10 0 20 0 200 y 4005 unidades Para aumentar el brillo de las soluciones azules y mejorar la esta bilidad de los palrones a adir 1 0 ml de soluci n de CusoO 628 a rada tubo Luego a adir 5 0 ml de tamp n de soluci n de emor 6 5 3 y diluir con agua hasta 16 0 300 a adir 4 gotas 0 08 mi de la soluci n BQC 8 251 con agua hasta 10 0 mh a adir 4 gotas 0 0 mii de la soluci n BOC 635 mezclar vo dejar desarrollar el color azti 30 minutos temperatura ambiente Leer das Intensidados de colur en el fol meotro con filiro de 610 nm restar el valor de la prueba en blanco del color de cada palr n de fenol y preparar la curva patr n debe ser una linen rectal silos patrones hen de usarse para comparaci
11. 1 1 V bl Siendo Y volumen en mililitros de la soluci n normalizada 01 Ni de alcali utilizados en la valoraci n de la muestra b volumen en mililitros de la soluci n normalizada 0 1 Ni de lcali utilizados en el ensayo on blanco t normalidad exacta de la soluci n normalizada 01 Ni de lcali Redondear el resultado a la primera cifra decimal 7 5 2 Indice de cidos grasos vol tilos insolubles indice de Folenske Indica de Polenske 10 t Vo Siendo Y volumen en mililitros de la soluci n normalizada 61 A do lcal utilizada en la valoraci n de la muestra t normalidad exacta de la soluci n normalizada 061 AD de leali Redondear el resuhado a le primera cifra decimal Continuar
12. 12 1 Principio Se entiende por contenido en calcio de la lerhe la cantidad total de calcio expresada en porcentaje en peso detorminada por el procedimiento expuesto a continuaci n que corresponde a la norma FIL 36 1966 de le Federaci n Internscional de La cheorin Este in todo se aplica a todas las leches l quidas normales asi como a las lechos recobstituidas por diluci n o disoluci n de leches concentradas o de leches desecudas El calcio total se lleva a disoluci n por precipitaci n de las materias proteicas con cido triclorosc tico El calcio contenido en el filtrado es procipitado bajo forma de oxalato c lcica que se separa por centrifugaci n y se valora con permanganata pot sico 122 Afaterial y oparatos 1221 Balanza an jitica 1222 Matraz aforado de 50 mi 122 3 Pipeta para leche de 20 ml 12 2 4 Papel filtro sin cenizag para filtraci n lenta 1225 Centrifuga que pueda deserroMar un aceleraci n cen tr fuga de 1 400 g le aceleraci n de la gravedad 1226 Tubos de centrifuga cil ndricos con fondo redondo de 20 m aproximadamente marcados a 20 mi 1227 Pipetoz de 2 y 3 mi l 122 8 Dispositivo de sif n por succi n provisto de un tubo capilar o 1229 Ba o de agua a temperaturas de ebullici n a0 Bureta gradusda en 1450 mm 12 3 Reactivos 12 4 1 Acido tricloroac tico soluci n acuosa al 20 por 100 ten peso por volumeni 16254 AI IE PEO Pd a 12 22 Acido tri
13. 2 909 0 0033 T 20 Luz verde de mercurio y polarimetro ton escala en grados de ngulo O 1 0302 0 0007 C 9 0 0089 T 20 Luz blanca con lro de dicromato y Sacarimeiro con escala SsacarimeiTica Q 2 518 00017 C H 0 0005 P 20 En las f rmulas precedentes porcentaje de ex caros lolales en da soluci n invertida seg n da lectura polarimetric F temperatura de la soluci n invertida en la lectura del polarimelPo El porcentaje de az cares totaies C en la soluci n invertida se puede caleular a partir de la lectura directa y de la varia ci n despues de la inversi n seg n el m todo habitual utili zando los valores ustales de rotaci n especifica de sacarosa de lactosa y de sacurosa invertida La correcci n 0 0008 C 9 etc tera no es exacta m s que cuando es aproximadamente para teche concentrada normal esta correcci n se nuede des preciar por ser C pr ximo Y Wariaciones en la temperatura de 207 C influyen escasamente en la lectura de la polarizaci n directa Por el contrario dife rencias de m s de 02 en la lectura de polsrizaci n deas pu s de la inversi n necesitan una correcci n La correcci n 6003 T 26 etc no es exacta m s que pera tenmperalutas comprendidas entre 18 y 22 C La diferencia entre Jos resultados de dos determinaciones efectuadas simultaneamente o una i3nmedialamente despu s de otra por el mismo analista no debe ser mayor de 9 3
14. 40 La media de los valores encontrados no debe diferir de dicho valor 445 por 100 en m s del 6 1 por 106 943 Determinaci n En un vaso de 100 mi pesar aproxima damente 40 E de la muestra bien mezclada con una aproxbnrk ci n de 10 mg a edir 50 mi de agua destilada caliente 180 90 C y mezclar cuidados mente Traesvaser cuantitativamente la mez cla a un matraz aforado de 260 mil enjuagar el veso con canti dades sucesivas de agus destilada A 60 C hasta que el volumen total sea de 120 a 150 m Mezclar y enfriar a temperatura ANL biente A adir 3 mi de la soluci n de amoniaco diluida Mezclar de nuevo y dejar reposar durante 15 mirutos Neutralizar e amoniaco a adiendo una centidad equivalente de la soluci n diluida de cido ac tico Determinar previamente la cantidad exacta de mililitros por valoraci n de la soluci n de amonlaco druida empleando el azul de bromotimol como indicador Mez clar A adir mezclando suavemente por rotaci n del m lraz ift ctinado 12 5 ml de soluci n de acetato de cinc De la misma forma que para la soluci n de acetato a adir 12 5 ml de solu ci n de ferrocianero pot sico Poner el conferido del matraz a 20 O y a adir agua destilada la 20 hasta alcanzar el en rase de 200 Inl Hasta este momento todas las adiciones de agua o reactivos deber n haberse efectuado de tal manera que se haya evitado la formaci n de burbujas de aire y por esa misma raz n todas las mezclas se habr n realiza
15. B 0 del E N m 172 21 julio 1977 18281 rr A a PLD PA a TN E F L Disposiciones gencrales PRESIDENCIA DEL GOBIERNO Metodos Ofictates de Analisis de Acciftes v Grasas Cercales y Derivados Productos L cicos y Produc tos Derivados de fa Uva establecidos por rden de 31 de enero de 1977 Continuaci n 16116 Cenimi tor aibi Material y aparatos 2100 21 C psulas de porcelana blanca de aprexiinadements 100 al de capacidad b Reactivos 2 b1 31 Soluci n 0111 N M0 6 01 N N7710 de hidr xido s dico 0201 exento de carbonato 813 2 Soluci n indicadora de fenolftele na Se disuelve un gramo de fenolftaleina en 110 mi de alcahol etilico 195 a 98 por ciento en volumen se a ade soluci n M9 N 106 de hidr xida s dico hasta que una gota d una d bil coloraci n rosa y se completa hasta 200 ml coe sgua destilada 515133 Soluci n concentrada do acetato de rosanilina Se disuelven 012 g de acetato de rosamilina en 50 ral de alcohol et lico 95 a 96 por 100 en Volumen que contenga 0 5 ml de cido slacial y se completa hasta 100 ml con alcohoi et lico 315154 Soluci n diluida de ecetato de rosanilina Se diluye un mihliiro de soluci n concentrada de acetato de rosanilina hasia 500 mi con una mezcla 4 partes ifuales on volumen de agua destilada y alcohol et lico 85 a 98 por 100 en volumen Las soluciones de acetato de rosanilina se conservan en la oscuridad en frascos herm l
16. BQC fs 8 dibremoquinona cloroimida o reac wrr iera r maera rr m de e A E a e M GOLESTERIL ERASICASTEROL B O del E N m 173 tivo de Gibbs Disoiwver 40 me BOC en polvo en 100 mf de alcohol absoluto o metanol y pasarlo a un frasco cuentagotas osctiro El reactivo permanece estable por lo menos un Mes si se guarda en congelador no usarlo dospu s de que empiece 4 ponerse pardo Guardar BQC en polvo en congelador o en desecadeor mota tia habido explosiones del reaclivo BQC guar dado en botellas en la estanteria de reactivos Comprobar los nuevos lies de BOC antes de usarlo preparendo una curva patr n con fenol y comparando la curva obtenida con la de BOC que se sade os satisfactorio Repetir la prueba al menos semes irubmnoente 36 Soluci n de sulfato de cobre para dos patrones vor 0 g Cu0sSO 5H O en agua y diluir a 100 mi 67 Aictohol butilico Usar alcohol butilica normal punto de ebaitici n 118 1187 C Para ajustar el pH mezclar 1 Hiro con su au de lamp n de desarrollo de culor Guardar ua recipiente con tap n de vidrio Disrl EA Saluci n pair n de fenol fjs Soluci n madre Pesar exactamente 1 000 e de fenol puro llevarlo a un matraz aforado de 1 litro diluido con gua Hasta 1 liro y mezclar li ml 1 m de fenol La soluci n es estable varios meses en refrigerador 6322 Patrones de trabajo Diluir 106 0 mi de la soluci n madre con agua Dasta 1 litro y mezclar E ml 10 ue 1
17. a damente en 2 horas 1064 Calculo Calendar ha hemedad mediante la f rmnda siguiende M Mo x 100 l Ms M la masa jniciai en gramos de la c psula y su tapa m s la eche en polvo utilizada pare el gnalisis Aien la masa final en gramos de la c psula y su tapa mAs l leche en polvo da masa en gramos de la ioche en polvo utilizada aHsis FEuncdad cantidad de agua i para el La diferencia entre dos determinaciones repetidas no debe sobrepasar el 0 06 por 100 de agua 10 5 Referencia 1 Morma Internacional FIL IDF 20 1964 H INDICE DE SOLUBILIDAD Leche en paiveo 111 Principio 5e eptiende por indico de solubilidad de la orhe en polvo la cantidad de sedimento expresada en volumen determinada por el procedimiento expuesto a continuaci n qu corresponde al descrito en la norma UNE 4 101 del instituto Nacional de Racionalizaci n del Trabajo Este metodo es aplicable a la leche en polvo enters O des Eesti dela 112 Material y perator 1121 Cenlrifuga con sopertes par la colocaci n de los tubos centrifugos c nicos La velocidad requerida var a como a continuaci n se indica con el diametro E LIT La Diametro Revoluciones Di meiro Havoluciones por minuta por minuta 250 milimetras 1 023 450 milimetroa sor 300 milimetros 88 500 milimetros 728 230 milimetros 316 559 milimetros T30 460 milimetros 656 600 milimetros 700
18. a noche Recoger c preciptado del digit nido de esterol por filtra ci n sobre an papel de fitro de velocidad media en un embudo Buchrer 8 cm de diametrol Lavar el precipitedo con agua aproximadamente 4 5 hasta que el filtrado no forme espuma levego lavar una Vez con 25 50 mi de etanol 05 96 por 100 vv Y despues una vez con 23 50 mi de ter dietilico 21 julio 1977 _ E _ _ _ _ r 16287 rara Hisecar ul papel ae filtro con el precipiado cn un vidrio de reloj en catula a Joz 22 durante 10 a 15 minutos Sepa rar el precipitado en forma de pelicula piegando en dos partes cl papel de fi tro Disolver en un peque o tubo de ensayo aproximadamente 0 mg de digit nido de esterol en 6 5 1 de una inezcla de voltuneara ifpuatles de formamida y dimeld formamida Calentar ligeramente si es naucesario Despu s enfriar a adir 2 5 mi de n pentano y agiiar Dejar reposar hasia que la separaci n entre las capas sea neta y usar la capa superior que conliene los osteroales liboracos para el analisis cromalografioo 43 Condiciones de la cromatograf a de gases temperatu ra de la columna 220 2504 Temperaturas del sistema de in vecci r si pueda calentarse por separado 20 40 por encima de la temperatura de a columna Gasto de nitr geno 5086 mi min Desconectar el detector y equibibrar las columnas nyrvas en esias condiciones durante 16 24 horas Conectar el detec
19. a para pipotar f POSTER RAMPESTEROL ATL a 43 Reactivos AN A POT A me mii 8 31 Tamp n hidroxido borato de bario Disolver 18 de BRA OD BR O y 8 B de HBO en agus y diluir a 1 litro con egua 6 3 2 Tamp n de desarrollo de color PH 9839115 a 235 C Disolver 6 0 g de melaborato s dico NaBOy y 20 g de NA Cl en agua y diluir a 1 l tro con agua 6 3 3 Pamp n de diluci n de color Diluir 100 mi de lomp n de desarrollo de color a 1 Hiro de apua 48 34 Sustrato tamp n Disolver 9 106 g de fenil fosfato dis dico cristalino l bre de fenol en 100 mi de tamp n bidr xido Dorsia de bario 8 3 1 los cristales de NeyC H PO deben guar darse en congelador u en desecador Si Na CH PO no est libre de fenol purificarlo como sigua Disolver 0 5 g con 4 5 mi de agu a adir 0 5 mi de tamp n hidr xido borato de bario 63 1 y dos gotas del reactivo BOC 6 35 y dejar reposar 30 minutos Extraer el color con 2 5 mi de alcohol butilico 18 3 71 y dejar fepozar hasta que el alcohol se separe Retirar el alcohol con un cuentagotas y desecharlo Diluir 1 6 mi de la soluci n acuosa a 200 ml de tamp n hidr xido borato de bario 6 2 1 Calentar la soluci n a EN C 2 minutos tepar inmediatamente y conservar en refrigerador La soluci n es estable un a o si one Figura 5 11 Esteroles del acel a de colza adicionados son recogidas con minima exposici n a a taste cion j de colesterol 6 3 5 Soluci n
20. ado de oxalato de calcio Poner eli tubo en ba o de agua hirviendo y cuando cl oxalato est complelarnente disuelto valorar con soluci n de permanganato pot sico 1 02 N hasta coloraci n rosa persistente La temperatura debe permanecer Soperior a dos 60 E durante la valoraci n 12 45 Ensayo en blanco Efectuar un ensavo en MHaneco con todos los reactivos utilizando 20 ml de agua destijada on voz de leche 325 C lculo 1 000 Contenido en calcio MOm w Vv x y K 04 3 F K wO OV t e F Y volumen en ml de MnOIK 002 N gastados en la valura ci n de la muestra Y volumen en mi de MnOj K i002 NI gastados en el ensayo blanca P peso en gramos de la muestra inicial falrededor de 20 El K coeficiente de correcci n del volumen del precipitado re sultante de la precipitaci n triciorcac tica Para leche entera 25 a 145 por 190 de materi prasak K 0 972 Para leche con 3 por 100 de materia grasa K 0 978 Para leche con 2 por 100 de materia grasa K 0 580 na 21 julio 1977 B O del E N m 173 Para kehe con 1 por 100 de mat ria erasa K 0 85 Fara leche desnatada K 0 988 La diferencia entre los resujados de dos determinaciones eleciuedeas simul ncamente o una inmodiatemente despu s de owa por el mismo analista no debe ser mayor de 0 002 g de calcio por 4 e de leche HB Referencia Lo Norma Internacional FIL IDE 24 1956 H FOSFPORO frd Se entiende por
21. bre una grafica las densidades Oplicas ob tenidas en funci n de las cantidades de f sforo presentos en las ma iraces Trazar la curva patr n que os una recta 1335 Ci lenio El comenido en fosftoro de la leche expresada en y de fosfore por 160 g de teche viene dedo por ia f rmula siguiente da A F sfaro E 50 M m mesa de fosforo expresada cn microgramos oblenida se g n 1343 y contenida en el matras de 25 mi con la muestra de aproximadamente 50 me de lecho masa de f sforo expresada en microgramos obienida se g n 1343 y contenida en el ensayo en blanco M masa de leche cxproseda en gramos empleada para la mineralizaci n Mt la diferencia entre das resuliados de dos deisrminaciones eie teadus simultaneamente o una inmodiatamente despr s de pira por e mismo analista no debe ser mayor de 6 009 g de f s foro por 150 g de leche ii Referencio ll Norma internacional FIL 1DE 42 1917 MantegiaHla i INIA E Pk ACIDEZ DE LA GRAJA 1 Principio Et indice de acidez de la materia grasa en ta tnaentequilla 24 q n mero de me ac hidr xido de pataia que so necrcaita paro neufralizar g tie maleria grasa Lu materia grasa despu s de separarla por fusi n de la ma nteqnilla se disuelve en una mezcla de alcohol ter y luogo se4titide con una soluci n alenbna vg borada 12 Mufterial y aparabas Balanza analitica Matraces erlenmeyer de 300 mi Bureta graduada contra
22. cenizas Despu s de enfriar la c pstla cubrirla con vidrio de reloj disolver las cenizas en 2 3 ml de cido clorh drico normal y diluir con agua destilada Transvazar la soluci n de las conizas a un matraz aforado de 100 mi lavar el vidrio de reloj y la c psula recogiendo las agues de livado en el matraz Completar hasta ser puros vara an lisis Prorediniente Dolorminaci n B O del E N m 173 100 ni coo asua destilada agitar y filtrar Tomar 10 mi del filirade iniradecirios en un matraz de 100 mi Completar hasta ad con agua destilada y agitar 13433 Determinaci n colorim trica del f sforo Tomar 5 mi tiliiros de la diluci n prepereda en 13432 e introducirios en un m lraz aforado de 25 mil A adir sucesivamente 2 mi de cido perclorico 2 mi de la soluci n de amidol ml de 33 soluci n de molibdato de amo nio Completar hasta 25 il con agua destilada y mezclar Es perar 3 minutos y medir la densidad optica utilizando cubeta de t cm en un espectrofutecolorimeiro a 750 nan metros Buscar en la curva patron la cantidad de f sforo contenida en el ma traz de 25 mj expresada en microgramos y correspondiente a la densidad oplica teida 134 3 4 Determinaci n de la curva pelr n En cuatro ma races aforados de 23 ml introducir 3 5 7 y 19 m de la splu ci n E Las cantidades as introducidas son iguales a 30 50 70 Y 106 microgramos de f sioro Proceder a continuaci n como en 13424 Sibrar so
23. cioroac tico Soluci n acuosa al 12 por i len poso por volurieni 1233 Oxalato am nico soluci n acuosa saturada en frio 12 34 Rojo de metilo soluci n al 0 05 por 100 lea peso por volumen en alcohol etilico del 986 por 100 ion volumen por Ya lumen 12 5 5 cido A c tico iumen por volumen 1236 Amoniuco soluci n acuosa obienida mezclando Y himenes iguales de amuniaco al 25 pur 1906 ten peso por peso y de agua destilada 123 7 Amoniac jiiiiros de amoniaco al 25 por 100 160 ml con agua destilada 1238 Acido sulf rico soluci n acuosa obtenida a adiendo 20 m de cida sul frico del 22 por 100 len peso por peso a 0 mi de sgus destilada soluci n acuosa al 230 por 100 len vo soluci n acuosa obtenida diluvendo 2 mi len peso por peso hasta 1239 Permanganato pol sico soluci n acuosa titulada 6 02 N Todos los reactivos deben ser puros para an lisis 12 4 Procedimiento 124 1 Preparaci n de la muestra ntes del analisis poner la muestra a 26 20 y mezclar con cuidado Si no se obtiene una dispersi n homog nea de la materia grasa calentar lerta mente da muestra a 30 mezclar suavemente y enfriar a 20 4 2 E 124 2 Defecaci n de la muestra En un matraz aforado de 54 mi posar exactamente alrededor de 20 e de leche con una aproximaci n de 10 mg A adir poco a poco mientras se agita una sobuci n acuosa de cido tricloroac tico al 26 por 100 y cosrtetfar haata 56 ml con e
24. con tap n esmerilado Preparar cada d a una soluci n Nueva 133 4 Soluci n de auelilbdato Disolver en agua destilada 3 g de melibdato de aroma Mo Da INTL 4 HO Completar kasia 10 mi 132 5 Soluci n acosa de fosfato monopot sico ta partir de POH K desecado durante 2 horas a 105 O que permite trazar una curva de diferencia para la determineci n del f sforo Fe sar 1 3912 e de POHER disolvor en agua destilada y completar hasta 1000 mi Isobtuci n 4 Diluir 10 mi de soluci n A hasta 110609 mi soluci n W Un ml de soluci n B 10 microgramos dea F Todes Jys roaclivgs dubrn 114 1341 Preparaci n de la muestra Antes del an tisis poner fa mueslra a 207 2 2 C y mezclar cuidadosamente 5 no se obtiene una dispersi n homogenea de la materia grasa calentar lentamente la muestra a 40 C agitar suavemente y enfriar a HP i a C 13 42 Ensayo en blanco Ffectuar un ensayo en blanco c n todos los reactivos operando como se prescribe en 134 3 3 pero reemplazando los 5 ml de la diluci n por mi de agua desti la da 13 4 134 31 Mineralizaci n por v a seca En una cdapsala de platino o de cuarzo pesar exectamente alrededor de 10 g de leche con una aproximaci n de 10 mg Evaporar hasta seque dad al ba o de agua hirviendo Despu s de la desecaci n com pleta calcinar en la mufa a une temperatura comprendida entre 500 E y 550 hasta la obtenci n de cenizas blancas 13 432 Preparuci n de la soluci n de
25. contenido en f sforo de la leche la cantidad total de f sforo expresada en porcentale en peso determinada por el procedimiento expuesto a continuaci n que corresponde a la norma FIL 42 1267 de la Federaci n internacional de Le cheria Este m todo se aplica a dodas las leches lhquidas normales asi como a las leches recoustituidas por diluci n o disoluci n de las leches concentradas o de las leches desecadas Las maeberjas orz nicas de la echo se destruyen por minera lizaci n en seco lincineracioni El f sforo se delerminis colg rim tricamente reduciendo el fosfomolibdato de amonio con diaminofenol lamidoll y midiendo la densidad ptica de la soluci n obtenida Principio NA Materimd y aparabazs 1121 Salanza analitica 1322 C psulas de platino o de cuarzo fde 55 mun de dis metro cdpruximedamcnte provista de vidrio de reloj 1423 Ra o de sgna 14 24 Pipetas de 1 2 5 y 10 mh 13 25 Matraces eforados de 25 Ml con tapones esmerilados de 100 y de 1 600 rel 1225 Horne utis 14 2 7 Estufa a 105 gt HC Man Especirafotocolorimetro 13 3 Reuctivain HAL cido clorkhidrica iHi 1 0 7 CLIJ Acido perel rico ECOJ al 95 por 00 idersidad 1 61 ernmos por ml a 20 C 1233 Soluci n de amidol Disolver en agua destilada 1 gra mo de umidol fdiclerhidrato de 2 4 diamminolenal MELO C HOH CH y 20 e de melahisulMito de sodio o pirosuifito de sodio SO NXad Completar hasta 160 mil en un matraz aforedo
26. de la porci n ensajada La diferencia entre los restuliados de doy etorininaciones paralelas no debe ser mayor de 0 1 mg de hidroxido de polasig p r 1 gcc materia grasa 1 5 ii Norma FIL IDF G A 1 59 Referencia 2 INQICE DE WEFRACCIGN Di LA CRAGA ad Principio Bi igdice de refrain de la materia grasa en la mantequilia os la raz n entro la velocidad de una us de longitud de onda determinada uz de sodio en el aire y la velocidad de esla misma luz en la materia grasa de la imundeguilla a 40 C Mediante un relraci metro apropiado se delerrina el indica de refracci n de la materia grasa obtonida por fusi n de la mantequiila 22 Material y aparatos 221 Refraci menro provisto de escala graduada en indices de refracci n que permita efectuar lecturas hasta la tercera cifra decimal y cuyos prismas pueden calentarse mediante un l quido circulante regul ndoso la Llemperatura termostalica menle con una aprox iinaci n de 1 C 2232 Luz de sodio Se puede utilizar tambi n la luz blanca 51 el refract metra tiene un di posHivo de compensaci n Cro m tica 3 Procodtmmich a Para separar la materia grasa Pundir da musvsica y dejarla reposar 2 06 3 horas a 5090 C decantar y filtrar con papel de filico seco Filirar nuevamente si el primer filtrado no est claro Utilizar la meteria grasa fundida clarificada bien mez clada sin agua Preparar y regular el refract melro seg n el modo de empleo del apa
27. do por rotaci n de matraz y no por aziteci n violenta Si se observa la presencia de burbujas de aire entes de alcanzar las 200 ml se pueden eliminar aplicando al matraz una bomba de vacio imprimi ndole un movim ento de rotaci n Papar el matraz con Un tap n seco y mezclar inti mamente satudiendo con energia Dejar reposar durante algunos minutos fitrer a continuaci n por un papel fitro seco Despre ciar los primeros 25 ml del filtrudo 9 4 3 1 Polarizaci n directa Determinar li rotaci n ptica del filtrado a 20 20 4 4232 Ilvyersi n introducir con la pipeta en un matraz graduado de 30 ml 46 ml del fiHrado obtenido de la manera it dicada antes A adir mi de cido clorh drico 8 25 N Foner el matraz en ba o de agua a 0 derante 15 minutos sumergi n dolo hasta el nacimiento del cuello Mezclar por rotaci n duran te los 5 primeros minulos ai final de los cuales el contenido deber haber alcanzado la temperatura del ba o Enfriar a 20 C y completar hasta 50 ml con agua destilada a 20 C mezclar y dejar reposar 1 hora a esta temperatura 2 4 3 3 Polarizaci n despu s de inversi n Determinar el po der rotatorio de la sofhuci n invertida a 20 t 2C feuando la temperatura del Hquido en el tubo de polarizaci n difiera en m s de 0 2 de 2 C durante la medida se debo aplicar la correcci n de la temperatura indicada on el apartedo 9 5 2 9 5 9 5 1 Caleuto Riqueza en sacarosa W Doy
28. e plala hasta que el cambio de color aparaniudo pardo persista durarie 20 segundos m7 35 Cilento El co ienido de sal Ma CH es expresado eu porcentaje por masa de DAS t v y r r A t normalidad de la soluci n de nitrato de plata v volumen en ml de soluci n de nitrato de plata utilizados en ia valoraci n Y volumen en ml de soluci n de nitrato de plata en el ensa yo en blanco A Masa en 2ramos de la muestra utilizada la diferencia enter los resultados de dos delerminaci nes pa ralelas no drber ser mevor de 0 02 gz de cloruro de sodio por 300 g de producto 26 Referencia 1 Norma FIL 124 1489 1 AGUA EXTRACTO SECO MAGRO Y BN UNA SOLA MUESTHA CRASSA 41 Principio Sc define el contenido de agua en la martequilla como la p rdida de masa expresado como porcentaje en masa sog n se determina por el procedimiento descrito Se define el contenido de extracto seco magro en la manteg Quilla como el porcentaje en masa de sustancias sesr n Se dotermins Se define el contenido de materia grasa en la mantequilla como el porcentaje en masa que se obtiehe restando de 100 el evon3nidao de agua y el del extracto seco Magro El remtenido de agua se determina gravim lricamente secan do tro cantidad conocida de mantequilla n 1022 PC Ej contenido de extracto seco magro se determina egravim tricumente despu s de extraer con ter de petr leo la grasa de ta mantequ
29. estar recientemente preparados segun el procedimiento descrito en 54 2 ALE Soluci n para el onsavo de referenci ma de Hios laro go accite de soja en dom da n Penjara Pe Jem CGR e ra parado seg n se describe en hd 2 air Gas portador nitr geno Saa Hidr geno 3749 Oxigeno o nire 34 Procecintiento 541 Preparaci n de la muestro Fungir Bproxraciduimta Le 5 eg de la muestra de nuarteguitla en ena ciliefa corriente a temperatura Inferior a 50 C hasta separaci n de las fases atuo s y grasa beparar la capa grasa por decanteci n y Cherificar fa grasa c una estufa a una tempertura de aproximadamente 46 fiitrande sobre un papel de filtro seco y evilando que pose la fase acuosa sobre el filtro 54 2 Preparaci n de esterolez Pesar en un malraz erjen meyer de 500 ml aproximadamente 15 g de materia prasa een una precisi n de 0 1 g A adir 16 wl de la soluci n de hidro xido de potasio y 20 opf de otanol 183 096 por 100 vevi Colocar ame oj matraz enrlenine cr el refrigerante de aire calentar en kano de agua hirviendo agitando peor roteci n hasta que la soluci n se haga clara y continuar Ja ebuMici n media kora TIAR A adir 66 mf de agua y luego 130 ml de etanol 63 56 por 160 dvi y levar Ja lemperntiura o aproximadamente 40 C A adir 26 mb de da soluci n ulech lica de digitopina 1 por 100 agitar y dejar enfriar Colocar el matraz en un refrigerante regulado a aproximadamente durante I horas o un
30. g de saca rosa para 10 g de leche condensada 4 4 Referencia l M rma Internacional 101 1DF 35 1966 it HUMEDAD Leche en polvo mai Principio Se entiende por homedad de la leche en polvo el contenida en agus libre es decir la p rdida de peso expresado en por centaje en peso delerminado por el procediiniento expuesto a continuaci n que corresponde al descrito on la norma FIL 26 1064 de la Federaci n Internacional de Lecheria Este m todo es aplicable a las leches en polvo enter y des patada El sgus contenida en la leche en polvo se elimina por ca lentamiento de la mucsira en una ostu a de desecaci n A Vas temperatura de 102 2 C hasta peso constante 112 Moferiul y aparatos 10 21 Balanga anal tica de sensibilidad 01 Me como mi ninia 12022 C psulas apropiadas preferentemente en aluminio h quel acero inoxidable o vidrio Las c psulas deber n estar provistas de tapas que se adapten convenientemente pero que se puedan quitar con facilidad Les dimensiones m s conve nientes son di melre aproximado 50 mm profendidad apro xiinada 25 mn 1023 Un desecador provisto de pel de s lice con indicador de humedad 134 Una estufa de desecaci n bien ventilada provista de termostato y regulada s 102 Es importante que la temperalura Sea uniforme en toda la estufa 19 2 5 Frascos provistos de tapones herm ticos para el mez clado de la leche en polvo B O del E N m 173
31. icamente cerrados con tapones de caucno 21b 4 5e toman dos c psulas de porculana blanca de una Capacidad oproximaeda de 100 ml pes ndose en cada una de ellas 1 g de leche en polvo una y otra c psules se a aden 106 mi de gua hirv ente sa agita con la extremidad aplastada de una varilla de vidrio hasia obtener un l quido perteciamente homog neo y se deja enfriar durante 10 minutos A una de las c psujes sg le e ade 1 mi de soluci n diluida de acetato de rosanilina y 58 mezcla A la otra c psula se le agrega 1 ml de soluci n de fenolf tale na y gota a gola y agitando en rgicamente todo el tiempo soluci n valorada de hidr xido s dico hasta obtener una colora ci n jgus a la primera El tiempo empleado cn la valoraci n no ha de exceder de 20 segundos y sta se ha de efectuar con una luz difusa Procedimiento 312 5 El n ynero de milililros consumidos de soluci n 0 111 N 1N m representa la acidez expresada en gramos de cido l ctico por 100 s dge leche en polvo Si se Opera con soluci n 0 1 N 1N 10 el n mero de miHlitros mubipicado por 0 9 da el mismo porcentaje de acidez Calcio aipe Rolere cia 1 instituto Nacional de Racionalizaci n del Trabajo Una nor ma ecspe ola 24 101 SD SACAROSA Determinaci n polarim trica en la leche condensada MA Se entiende por contenida en sacarosa de la leche condensada ef contenido n s3carosa 16 trenqddorinada expresado en porcen taje e
32. ido s dico en glicerina la soluci n jabonosa se diluye con agua y se acidifica con cido sulf rico Los cidos grasas volk tiles se destilen y los cidos grases insolubles se separan de los solubles por dilaci n La soluci n acuosa de cidos sofubes y la soluci n otan lica de cidos insolubles se valoran separa damente con una soluci n de lcali normalizada 16293 o PE r TA A A a a A Lol El m todo es empirico porque s lo determina una parte de estos cidos Por tanto las especificaciones referentes al proce dimiento y aparatos se deben seguir rigurosamente para obtener resultados exactos y reproducibles 7 2 Meoler al y aparatos figura 7 1 APARATO DE DESTILACI N A arihtigd Figura 7 1 Determinaci n de los ndices de Reichert y de Polenske 712 1 Matrez de fondo plano de vidrio af borosilicato de 3060 mil de capacidad A 72 2 Cabeza de destilaci n El 7 2 3 Refrigerante 0 724 Receptor que consiste en n matraz aforado con las rayas circulares de aforo a 100 y 10 mi tD 72 5 L mina de asbesto de 120 mm de di metro 6 mm de espesor con una abertura central circular de 40 a 50 mm do di metro para sostener el matraz durante el calentamiento E 728 Piedra p mez triturada que pase a trav s de un tamiz de malla circular de 1 44 mm En da figura se representan las dimensiones en mm y el montaje del aparato de destilaci n para las conexiones 56 pue da utilizar tapone
33. ivos 33 1 Soluci n valorada de nitrato de plaia 0 1 Y 232 Soluci n de cromato de polasio s 5 por 100 bovi en agua destilada 34 Procedimiento Ablandar la muestra en un fecipiontlo cerrada cajent ndela en ba o de agun a lua temperatura m s baja posible cun clhjelo de no romper la emulsi n Frecuemiemente es adoctada una temperatura comprendida entre 23 y 26 y en ningan caso la temperatura podra exceder de 39 Agiter el recipiente que conlicne la muestra a intervalos frecuentes durante el proceso do ablandamienio con cbjeto de que da muesira se mezcle hamogieneamente Sacar el recipiente del ba o de agua y ugi tarlo vigorosamente a intervalos frecuentes haste que la mues tra se haya enfriado adquiriendo una consistencia esposa y cremosa Esta operaci n puede reehzarse con un retador ntt c nico Efectuar una determinacion en blanen enmbleando Jos mismos reactivos en las mismas cantidades y siguiendo el mismo pro codimiento que se describe a continuaci n Pesar con una precisi n de 10 me 5 mg de muera e in trocducirla en un matraz erlenmeyer A adir cuidadosamente 100 mwl de agua dontilada hirviendo Dejar en reposo durante 5 16 minutos agitando por relaci n de cbando en cuando mientras se enfria a una toraperatura de 5055 C temperatura de valoraci n A tidir 2 mE de sobuci n de cromato de polasio Mezclar ag ando por rotaci n Mim ir s se asta continuamente valorar con l soluci n de nitrato d
34. la de esteroles El limite de detecci n de la grasa vegelal en la grasa de lecho no se puede indicar porque depende del contenida en beta sitosterol de ta grasa a adida es decir de la naturaleza de esta grasa 0 de la mezcla de grasas a adidas a la grasa de leche 16288 gt 21 julio 1977 B O del E Ni m 173 5 0 Referencia i Norma Internacional FIL IDF 54 1970 E a i a li ul 3H Ta t j ha BE t ril H wr f i g i i Ll z i 3 i 2 l f 5 ii 1 i h r l E 24 sl 5 A ES ME a A o ket T Figura 580 sicroles del aceite de soja 6 FOSFATASA RESIDUAL EN MANTEGUILLA 8 1 Principio El ensayo seo basa en la acci n del enzima fosfatasa sobro el substrato fenil fosfato dis dico con liberaci n del fenol y fosfato La cantidad de fenol liberada se determina por adici n de un reactivo que da color azul en presencia de fenol Figur 5 1 Esterolos de la mat ria grasa de la leche Cantidades superiores A dos equivalentes de fenol en 05 E de mantequilla indican una pasterizaci n insuficiente 6 2 Materiel y apcrotos 21 Cuchillo o esp tula de acero inoxidable 2 2 Ba o de agua a a7 36 C B23 Termometro 8 24 Pipetas de 1 ml 6 25 Embudo de 5 cm de diametro 6 28 Papel Whatman n m 42 o n m 2 8 27 Tubos graduados a 5 y 16 ml 8238 Fot metro con Hitro de lransmitencia m xima a 610 m11 8 2 8 Centrifura 8 2116 Pera de gom
35. mbudos filtrantes de di metro entre E y lo cm y fil tros iniegados de 15 cm d di metro 228 Tubo de polarimetro de 2 cm de longitud exectamen te calibrado 28 Polarimetro o sacarimelro 02 01 Polarimetro con luz de sodio o con lus verde da mPr curio U mpara de vapor de mercurio con prisma q pantalla Wratten n mero 77 A permitiendo lecturas con u a precisi n por lo menos igual a 9 05 grados de ngulo 0 2 0 2 Sacarimetro con escala internacional de az car utili zando luz blanca que pasa a irav s de un filiro de 15 m de u a soluci n Bl 6 por 1006 de dicromato pot sico o bien luz de sodio y permitiendo la lectura con una precisi n por lo menos igual a 0 1 grados de la escala sacarim trica internacional 9210 Ha o de agua a 60 t rE 3 Reactivos LL Soluci n de acetato de cinc 2 0 M Disolver 21 9 g de acotato de cinc cristalizado C H 04 An HHO y 3 ml de cido ac tico glacial en agua destilada y completar hasta 106 mml 5 3 2 Soluci n de ferrocianuro pot sico 1 0 N Disolver 10 6 gramos de ferrocianuro pol sico cristalizado FetCNlgd KE 3H30 ea agua destilada y completar hasta 100 ml 2 33 Soluci n de cido clorh drico 8 250 290 N 120 22 por ciento 9 34 Soluci n diluida de amoniaco 20102 M 3 5 por 160 935 Soluci n diluida de cido uc lico 2010 22 N 12 por ciental Procedimiento 9 4 241 Preparaci n de la muslria Fara muestras de productos rerientemente prepa
36. n poso determinado por el procedimiento expuesto a con tinuaci n que corruzpoude al descrito en la norma FIL 35 1968 de la Federaci n internacional de Lecher a t Este iv todo es aplicable a le leche condensada entera a des nalada de composici n normal preparada a partir de lecha y sacaros nicamente que no contenga sacarosa transformada Principio y El m todo se basa en el principio de inversi n de Clorget Un tratamicile suave con un cido hidroliza completlaracale la sacarosa La ia tusa y los olros az cares practicamente no se hidrolizan La cantidad de sacarosa se deduce del cambio del poder rotatorio de la soluci n Se prepera un ilitrado limpido de la mue sira sin mutarrota ci n debida la lactosa por iralamiento de la soluci n con amo n aco seguido do neutralizaci n y clarificaci n por adiciones su cesiv s de soluciones de acetato de cinc y de ferrocianuro po t sict En una parie del filrado de sacarosa se hidroliza en las cone diciones especiales que corresponden a este tipo de operaci n Partiendo de los poderes rotatorius del filtrado antes y des pu s de la inversi n se calcula la cantidad de sacarosa 9 2 Moteriai y aparatos 21 Balanza anal tica de sensibilidad 16 mi como m nimo 9422 Vasos de precipitados de 100 ml en vidrio 92 3 Matraces graduados de 200 y 50 mi 9 24 Pipetas de 10 ml 825 Probetas graduadas de 25 mi 4 2 6 Pipetas graduadas de 10 mi 92 7 E
37. n visual guar dar cs refrigerador Pregarar sentandmente una serie nueva 641 Procedimiento Tomar la muestra por debajo de la superficie con cuchitlo y Esp tula Himpi s y preceder coto sigue Pesar 1 0 g de muestra Ipreferiblemente por duplicado sobre un pedazo de papel enceredo de aproximadamente 1 pulgada cuadrada e introduir el papel con la muestra dentro del tubo An alogamente pesar otra Muestra y colocarla en un tubo como control o patr n Calentar el patr n aprozimsdamente 1 minuta a 85 90 en vaso de egua hirviendo lcubierto as el tubo entero so calienta a 85 30 y se enfr a a lemperatura ambiente A partir de esie momento fratar en la misma forma el patr n y el problema A adir 10 06 ml de susirate patr n 16 3 4 Tapar el tubo y mozciar Inmediaiamente despu s de a adir el sustrato incu ar 1 hora en ba o de agua a 37 38 mezclando o agitando el contenido de cuendo en cuando Calenlar en vaso de agua hirviendo casi 1 minuto calen lando hasta 25 80 utilizar term metro en olro tubo del mismo luma o Y forma que contenga el mismo volumen de liquidol y enfriar a temperatura ambjente en recipiente de agua fr a Pipetar on 1 ml de soturi n de n SO H O de 6 0 gr100 mi Y mezclar por completo tel pH de la mezcla debe ser de 8 0 9 1h Filtrar ise recomienda embudo de 5 cm y papel Whatman namero 42 o at n 2 y recoger 5 0 mi de filtrado en el tuba preferentemente graduado s 50 y 10 0 mi A adir 5 2
38. orcho en el vaso Despu s de centrifugar quitar casi todo el Elcohol but lico con pipete provista de pera de goma en el ex lrempe superior Filtrar dentro de la cubeta del fotometro y leer con filtro cuyo m ximo de transmitancias es aproximadamente de 650 mb HH Con petrones visuales Con muestras que prodiicen m s de 5 unidades comparar colores en tubos con los de patronos de fenol en soluci n acuosa 16 38 21 Para cuentificar resultados en los casos dudosos lp ej problemas que producen 0 5 wumi dades de color extracr con abcohol butilico 6 3 7 A adir 5 0 mi de alcohol 8 4 7 e invertir el tubo lentamente varias voces contrifugar como en la si es pecesario incrementar la trandspa rencia de la capa de alcohol y comparar el color azul con lus colores de los patrones de fenol 638 23 an logemente tratados En los problemas que se consideren muy positivos durali s e desarrollo de color Ip ej 29 unidades en los que a gokas de soluci n BQC 183 5 pueden ser insuficientes para combinar con todo el fenol pipetar proporci n adecuada de contonidos dentro de oiro tubo diluir Gesta 10 0 mi con tampen de diluci n de color 6 3 2 y a adir 2 gotas adicionales de soluci n BQC 6 351 Con cada problema diluir y tratar la prueba en blanco an logamente Si la prueba sobre la muestra diluida es todhvia muy fuertemente positiva diluir de nuevo en la misma forma hasta que el color inal est dentro del intervalo de do
39. os cotesterol 1 00 para el brasicosterol el camposterol y el beta silosteorol 546 Ensayo de referoncia Inyeciar 3 a 5 mal de la sojlici n para el onsavo de referencia 15 38 Los picos de caniposteral estigmasterol y de beta silosterol deben aparecer sobre el cro matograma dig 5H Medir las distancias de retenci n de los pios d pava el camposterol da para el esHgmasterol y d para id bota sitosterel Calcular bs tgmyus de relenci n relativos que son aproxi Tigfa eite Colesterw L0 tuprosmmedamentde 19 min Brasi asort aaa 1113 1 15 CamposterOdl o 1132 1 34 Estiaema steral 0 1144 1 46 Beta sjitostertd o 1 66 1 GH 547 Analisis Inyectar da 3 mel de la soluci n a analizar v dar al bot n del atenuedor hasta oblener un factor de ate nueci n cuetro Yeces inferior se obtiene gonoralmente en dos pases del bot n Registrar el cromatograma 5 5 Calero Sion el cromatoerama un pien Hene un licimpo de retencion ralativna igual al de heta sitostero y una shura que correspon al menes a wi 2 por 100 de la escola se conciuyeo dla presencia de bota sitosterol y la muestra de grasa exremirneda a partir de la cual se han aislado los ostercdes se considera que cor tione grasa vegetal La presencia en el cromalegrama de picas de otros fitosterales como el camporterol o el estigmasterol re fuerza esta conclusi n Por este m lodo se puede demostrar la presencia do al Mi nos un 05 por 100 de bela sitosteroi on da mezc
40. rados en los que t se pueda prever separaci n alguna apreciable de los componearnies Abrir el recipiente introducir en l el producto adherido a la tapa y mediante movimientos de arriba abajo con ayuda de una cuchara conseguir que se mezclen intimamente las capas superiores si como el contenido del fondo del reci piente Trasvasar el contenido de un bole a un frasco provisto de tap n bien adaptado Para mucsttas de productos m s antiguos y muesiras en las gut se pueda prever una separcei n de componentes calentar en ba o de agua aproximadamente a 40 C hasta que la muestra casi haya alcanzado esta temperatura abrir el recipiente y ope rar do da misma manera que arriba En el caso de un bote tras vasar el contenido a un frasco raspar el producto que se haya sdherido a las paredes y continuar la mezcla hasta que toda la masa ta homog nea Cerrar el frusco con una tapadera que se adapte purfrctamente Dejar enfriar 16282 wr 9 42 Comprobaci n del m todo Proceder como en 9 4 3 uti ligando una mezclas de 100 g de leche o 110 g de leche desnatada v de 18 z de sacarosa purs que corresponde 0 g de una leche 21 julio 1977 concentrada conteniendo el 45 por 100 de sacarosa Calcular la cantidad de sacarosa como en 2 5 14 utilizando en la formula Ih paras W F y P le cantidad de leche pesada y la Fiquezea en ma teria grasa y prote nas de esta leche y en la f rmula HI para W la cifra de
41. rante minutos a las revoluciones por minuto requeridas seg n la tabla del apartado 112 1 A continuaci n se sifona el liquido que sobrenida hasta 2 ml del nivel del sedimento teniendo cuidado de no remover este 58 vierten en el tubo 25 mi de agua destilada a 24 y se agita para dispersar el sedimento desalop ndolo si fuera necesario con un alambre e llena con agua destilada 2 C haste la marca de 50 mi se invierte y se agita para la perfecta mezcla del contenido y se centrifuga de nuevo durante 5 minutos a la velocidad requerida 58 man tene el tubo en posici n vertical de modo que el nivel superior del sedinento quede a nivel del ojo se refieren los mililitros de sedimento a la divisi n de la escala mes pr xima La dectura se efect s facilinente cuando se alista el tubo colocado gie tante de una lux fuerte Cuando se opere con leches en polvo parcialmente dusnala das las cantidades que se han de e adir a los 100 ml de agua destilada 309 segua sus porceniajos egresos las siguientes Haste ef 4 occur 10 0 gramos Desde el 41 al 98 L mioncc 30 5 gramos Desde el 94 al 213 scannen 31 06 ETAIMmOS Desde el 13 1 al 17 Paanaraannrena 1 3 Eramos Desde el 17 1 al 31 o nn 12 08 gramos Desde el 21 1 al M 9 o unmm nro 2 5 gramos M s del 34 Ye oo cccrrncoco anni 13 0 gramos 114 Referencia 1 Iimnetittto Nacional e Racionalinaci n dal Trabajo Uta mar ma csna ola 304 101 12 CALCIO
42. rato Ajustar la femperalura del liquido circulante a 10 4 GEC Calocar algunas gotas de materia grasa preparada en ja forma anteriormente descrita entre los prismas del refract metro de manera que se llene por completo el espacio con prendido entro elos Dejar transcurrir algunos minutos para que la maleria grasa alcance la temperatura de los prismas Efectuar la lectura con cuatro cifras decrmales Corregir el indice de refracci n obtenido a adiendo 0 000043 unidad de fi dice de acidez si este ltimo determinado seg n T es igual o superior 4 dos Redondear la cuarta cifre decimal Cifrado La diferencia entre dos resultads de determinaciones parf laias no debe ser mayor de 0 0002 de la unidad de indice de refracci n dt 25 Refercacia 1 F O B5 1987 4 CLORERO SODIO 21 Principio Se entiende por canlenido de sel cloruro de sodiy de la mantequilla el porcentaje en mese de la sal teloruro de sorHo determinado por el procedimiento que se describe a conti Nuiclor Bespues de fundir la manioguilla a adiendo ague hirviendo los cloruros de las mezclas se valoran con una soluci n de ni trato do plate empleando cromato de potasio como indicador seg n el procedimiento de Mobr v se calcula el contenido de sal 312 Muterial y aparnios 321 Balanza analitica 322 Matraces erlenmeyer de 250 tal de capacidad 322 Burela graduada y contrastada en divisiones de 0 1 mi iifiires 18286 pm a a Henct
43. s de caucho neoprano o silicona 0 juntas de vidrio esmerilado estandar 24 40 73 Reactivos 7 31 Glicerina id 1 26 98 por 100 ppl 7 3 2 Soluci n acuosa de hidr xido s dico 44 por 109 prp conservada en botella protegida del di xido de carbono Usar la porci n limpia libre de precipitado de carbonatos 133 Agua destilada hervida durante 15 minutos para eli minar el di xido de carbono 73 4 Soluci n de cido sulf rico 1 W 735 Soluci n acuosa de hidr xido s dico o pot sico 0 1 N exactamente normalizada 7 3 6 Soluci n indicadora elanol de 95 86 por 100 T amp T Etanol 85 98 por 100 vv neutro a la fenolftalcina El agus usada debe ser destilada o de una pureza por lo menos cuivalonte de fenolftelcina 1 por 15 en 21 julio 1977 2 cir r PI OU r Mm n 1r B O del E Ninn 173 A si 7 TA Proccdiniierte 741 Preparaci n de le iuuetstra Como en 5 4 1 742 Determinaci n del ndice de cidos grasos volalitos solubles Pesar 5 g con aproximaci n de 001 g de grasa en el matraz A A adir 20 g 18 mb de gticerina y 2 mi de soluci n de hidr xido s dico 44 por IQQ Par a adir la soluci n de hidr xido s dico usar una bureta protegida de ja entrada de di xido de carbono y limpiar la punta de la bursta desechando las primeras goles Calentar el matraz a fuego directo evitando sobrecalentar y agitando continuamente hasta que el liquido no forme ospuma y se vuelva
44. s patra nes visuales o de la curve patr n del fot metro Dejar 30 minu tos para el desarrollo de color despu s de la altima adici n de la aoluci n de BUC 625 antes de hacer la lectura final Para corregir lecturas cor diluci n multiplicar por 2 pera di lucion 53 5 por 1 para diluci n i y por 50 diluci n 1 8 seguida de diluci n 2 4 ekc 65 Calculo Cuando se utilice 110 g de mantequilla y se a adan 11 0 Iml de liquido avulliplicar el valor de la lectura por 1 1 para con vertir el resultado en equivalentes de fenol0 5 g de mantequilla valores mavores de 2 equivatlontes 0 3 g de manteguiila indican pasleurizaici n insufiriente 6 6 Referercir L A O A C Official Melhods of Analysis 11 2 Ed 1976 To INDICES DE ACIDOS CHASOS VOLATILES SOLUBLES E INSGLUALES 7 14 Principio El indice de cidos grasos vol tiles solubles lindice de Reij chert o Heichert Meissl Meliny es el n mero de mi de una sa luci n acuasa de jeali 0 1 N requerido par neutralizar los cidos grasos vol tiles solubles cn agua de 5 g de grasa en jas condiciones que se especifican El ndice de cidos grasos Yolatiles insolubles tindice de Po lenske es el n mero de ml de soluci n acuosa de lcali 0 1 M reguerido para neutralizar los cidos grasps vol tiles insolubles en agua obtenidos en g de grasa en las condiciones especi ficadas en el m todo Despu s de seponificar la grasa con una soluci n de hidr x
45. sio nes que un volumen de 15 mi lo Hene completamento Pipetar 100 ml de filtrado y pasarlos a un matraz erfenmeyer de 309 mi a adir 0 5 mi de la soluci n indicadora de fenolftaleina y ralo rar con la soluci n acunsa de lcali estandar 0 1 N hasta un color rosa persistente durante 0 5 1 minuto 7143 Ensavo en blanco Hacer un ensayo en blanco sin grasa y en Jugar de saponificar a fuego directo cslentar en ba o de agua hirviendo durante 15 minutos Ne se requerir n para la valoraci n m s de 0 5 mi de la so luci n de lcali normalizada En otro caso se deben preparar hrevas foluciones dol rcaciivo 7144 Doterminaci n del tidice de cidos grasos vol tiles in solukles Prlenskel Lavar el flire con tres porciones sucesivas de 15 m de amua destilada a la temperatura de 20 197 hu hiendo pasado previamente cade una a trav s del refrigerante del vaso peque o y del matraz aforado Poner el embudo y el filtro en el cuello de un matraz c nico limpio y seca de am ml de capacidad Disolver los cidos gresos insolubles repitiendo los lavados vsando ahora porciones de 15 mi de etanol 85 48 por 100 v v Valorar con la soluci n acuosa de lcali normalizada 0 1 M el conjunto de los lavados con etanol usando 6 5 ml de soluci n indicadora de fenolftaleina hasta un color rosa per eistente duranto 05 17 minuto 5 C lculo 7151 Indice de cidos prasos vol tiles sotubles ndice de Reichert Padises de Relehort 1
46. stada en divisiones de pE ml ird J F 13 2 12 3 13 Reactivos Los reactivos que se bidiesn deben ser do calidad pura para annlisir 131 Soluci n alcohnhca de hidr sidoa de potasio 0 1 N valorada Lhiizar alcohol etilico absetuto 132 Mezcla de vol menes iguales de alcobol etilico de 93 Uh por 100 v v o Ce alcohol desnaturalizado con melanol v da ter djelilico neuiro a la fonolftaleina 13 Soluci n neutra de fenniflalcina al 1 por 100 m v n alcohol et lico desnaturalvado con metano Alcohol recnatiralivedo con metanol 120 alcohol ab mejano Mubz uluto oy 5 14 Prorediriento Par separar la mailera grasa fundir la muestra dejaria reposar a 5000 2 3 horas decantar y Mltrar con papel de titeo soto Filtrar nuevamente si el primer filtro no esta claro Eltibivur ta materia grasa fuexbida elariticada bien mezolada En un melraz erenincyor pesar con precisi n de i mili gramo 5 PO de moteris grasa 4Padir 20 100 mi de la mezgla de alunhol et bico y ter dietdico y disolver en esta mezcla de 21 Julio 1977 A A e o O O a eee 16285 materia grasa A adir 0 1 ml ve la solucion de fenolflaleina Yalorar con la soluci n alcalina hasta que aparezca una cobr r ci n rosa p lido que persista al menas 10 segundos 15 Calcuta Yoi hAl indice de acidez r Y volumen en mu de la sobuci n alcalina riapleada E normalidad de la soluci n alcalina A gt Masa en gramos
47. ste reactiva Agitar fuertemente durante algunos segundos Dejar reposar 0 minutos Filtrar sobre papel filiro sin conizas El filtrado obtenido debe sor Himpido 1243 Precipitaci n del calcio en forma de oxalato y sepa raci n del oxatuto En un tubo de centrifuga cil ndrico de fon de redondo introducir mi del filirado limpida despu s 3 mili litros de acido triclornac tico al 12 por 100 2 mi de una soluci n ruusa saturada de oxalato de amonio dos gotas de soluci n aiconolica de rojo de metilo y 2 mi de cido ac tico al 20 por 100 Mezclar mediante apiaci n circular y a adir poco A poco soluci n de amoniaco 023 81 asla coloraci n amarillo p lido despu s sigunas gotas de cido ac tico a 20 por 100 hasta go oraci n rosa Dejar reposar 4 horas a la temperatura ambiente Diluir hasta 20 mi con agua y centrifugar 106 minutos A 1 40 g tg aceleraci n de la gravedad Mediante un disposi Hive ale succi n decantar el liquido limpido que sobrenada Lavar las paredes del tubo de centrifuegaci n sin romever el dep site de oxalato calcico con 5 ml de soluci n de amoniaco datiumdo 1237 Comninfugar B minutos a 1 400 g Decantar el liquido que sobrenada con el dispositivo de succi n Proceder a tres lavados succsivos 12 44 Valoraci n del oxalato Despu s de haber extraido can sif n el agua del ltimo lavado a adir 2 m de soluci n ctosa de cido sulf rico y 5 m de agua destilada sobre el precipit
48. tar encender la Hama y regular el gaslo de hidr geno y oxigeno a airs pora oblener una altura de Hama y una sensibilidad adecuada Poner en marcha el registradur y dejar que el papel se desenrolle a una velocidad adecuada ajustar el cero y el atenuador Bi la linea de base vs stable ei apuralo esii lato PAra usarse 54 4 Ensayo de sonsibilidad Inyectar Noa 5 mol de la so luci n para el ensayo de sensibilidad 53449 S lo aparecora an pico de colcsteroi en el cromatograma tig 514 Ajustar tl alemuador de modo que se utilice aproximadamente toda la cs vala del registrador 545 Ensayo de resoluci n de los picos Inyectar a 3 mel de la soluci n paura el ensayo de resolucion de dos picos lA m Aparecer n en el eromalograma los picos de colesterol Brasicos terol camposterol tfig 5 1 Medir las distancias de retenci n distancia desde el punto de inyecci n hasta el punto de sltura m xima del picol de Jos picos dee para el colesterol d pare el brasicosterol de para el camposterol y el d para el beta itos lera y las anchuras de da base da les picos ldimensi n de reten ci n entre las intersecciones con la l nea de base de his tangonies en los puntos de inflexi n situados en la parte anierior w pus terior del pico W a para el colesterol y Wa pura el brasicoste rol Es resoluci n de los picas expresada por la f rmula PR 2id d a Wa Wap debe ser por lo menns iguala hL Calcular los tiempos de retenci n relaliv
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