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Algoritmo para el Estudio de las Disgammaglobulinemias

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1. Abbott Diagnostics Otra Nueva Joya de la Hematolog a CELL DYN RUBY Bioq Fabi n Alberto Cusinato Especialista de Producto Abbott Laboratorios Argentina Divisi n Diagn sticos fabian cusinatoWabbott com Entre las joyas del cancionero porte o figura el tango Rub que describe la cl sica ruptura tanguera de una pareja que ha llegado a su fin Ven no te vayas que apuro de ir saliendo aqu el ambiente es tibio y afuera est lloviendo Ya te he devuelto tus cartas tus retratos charlemos otro rato total despu s te vas Rub Tango de Cobi n y Cad camo Aceptemos la invitaci n de los autores y charlemos otro rato Queremos presentarles nuestra nueva joya CELL DYN RUBYTM Podemos sencillamente definir al CELL DYN RUBYTM como un analizador hematol gico multiparam trico automatizado dise ado para el diagn stico in vitro en los laboratorios cl nicos Estas son sus caracter sticas 12 Bioan lisis VELOCIDAD DE PROCESAMIENTO HEMOGRAMA DIFERENCIAL hasta 76 por hora VOLUMEN DE MUESTRA Modo abierto 150 yL cargador de muestra 230 yL REACTIVOS Solamente 4 reactivos incluyendo rebaoctos TECNOLOG A WEC Y DIFERENCIAL An lisis de gr ficas de dispersi n m ltiples MAPSS Y de 4 ngulos PLAQUETAS An lisis ptico de doble angulo no requiere reactivo adicional ni pruebas reflejo RETICULOCITOS Nuevo m todo NCCLS azut de metileno t cnica de marcado con supravtal Infor
2. ltimo un detalle m s Tal como dij ramos anteriormente el instrumento tiene la capacidad de diferenciar los eosin filos por su detector de 90D despolarizado Los eosin filos normales vistos en la polarizaci n de 90 versus despolarizaci n 90 forman una nube n tida de eventos cuyo c digo de colores es el verde ver fig 3 5 La despolarizaci n de estas c lulas se debe a los gr nulos de los eosin filos Durante la etapa intra eritroc tica un par sito de la malaria digiere y descompone la hemoglobina en sus partes constituyentes grupo hemo y globina La globina es usada por el par sito como una fuente de prote na y el grupo hemo es convertido por una enzima hemo polymerasa en hemozoina o pigmento de malaria El par sito inicia este proceso porque el grupo hemo es t xico para el par sito en tanto que la hemozoina no lo es En contraste con el grupo hemo no despolarizado la hemozoina tiene una notable habilidad para despolarizar la luz Durante el ciclo celular del par sito de la malaria los gl bulos rojos infectados con malaria se rompen y los par sitos son liberados junto con los agregados de la hemozoina dentro del plasma Los gl bulos blancos fagoc ticos en circulaci n monocitos y neutr filos ingieren la hemozoina pura liberada En consecuencia normalmente los monocitos y neutr filos no despolarizadores har n el proceso de despolarizar la luz cuando contengan agregados de hemozoina WBC 5 5
3. AN 4 Esparcimiento E E j scatter a 90 NS 5 Esparcimiento scatter a 90 D analizar 3 wF a Figura 3 3 Esparcimiento ham nico por los leucocitos Una vez obtenidos los datos de las diferentes diluciones procesadas el software realiza el an lisis de los mismos en una serie de pasos a saber A An lisis de la serie blanca Separaci n de las c lulas mononucleares polimorfonucleares Mononucleares Polimorfonus leares Mononucleares Polumorfonmclenres Separaci n Identificaci n 90 L obnilaridad YI Lobularidad 10 Complejidad 10 Complejidad Figura 34 Esparcimiento de las c lulas mononucieares y poliimorfonucieares Jul Ago 2007 13 14 Revista biandlisis Separaci n de neutr filos eosin filos Xeutr filos 0 identificaci n lara raniaridad despolarizada nularmibad despi Lobalassdad 0 Lobuilarilad Figura 3 5 Esparcimiento de neutr filos cosin filos Separaci n de las c lulas mononucleares en linfocitos monocitos y bas filos Monownucleares Monouucieares Separaci n Idemmbicaci n 0 tama o 0O lma o 10 Complejidad 10 Complejidad Figura 3 6 Esparcimiento de las celulas mononucieares Por ltimo el analizador examina el rea bajo la nube linfocitaria y por encima del umbral Toda part cula comprendida en esta zona es separada de los linfocitos mediante un umbral din mico En esta regi n pueden aparecer l
4. envolvente Como los dos l quidos viajan a una velocidad diferente no se mezclan entre s Esta geometr a especial de la celda de flujo y la velocidad de flujo del reactivo envolvente obliga a que las c lulas se dispongan en un sola hilera Este proceso se denomina enfoque hidrodin mico 1 Tobera de inyecci n de la muestra 2 Corriente del reactivo envolvente 3 Corriente de la muestra 4 Rayo l ser enfocado 5 Angulos diferentes de luz esparcida L Figura 3 2 Celda de Mujo ptica El analizador mide entonces Ambos tipos de dispersi n de luz en el ngulo de avance de 1 a 3 conocida como 0 y 7 a 11 conocida como 10 o ngulo estrecho Ambos tipos de dispersi n ortogonal lateral 70 a 110 conocida como 90 y 70 a 110 despolarizada conocida como 90D Esta tecnolog a se denomina MAPSSTM que viene del ingl s Multiangle Polarized Scattergram Separation y que significa separaci n mediante dispersi n scatter lum nico polarizado en m ltiples ngulos Para clasificar las subpoblaciones leucocitarias y obtener las alertas morfol gicas se pueden combinar estas cuatro mediciones de forma diversa Los diferentes detectores podr n caracter sticas especiales de cada elemento 0 Tama o 10 Complejidad 90 Lobularidad 90 D Despolarizado Granularidad 1 Rayo l ser enfocado 2 Esparcimiento scatter a 0 3 Esparcimiento scatter a 10
5. 2 1 63 2 01 36 4 10e3 ul BASO G R4 A N L4 R I Y 2 ib Y LOBULARITY CELL DYN RUBYTM incorpora la posibilidad de activar la alarma de ATYPDEP para que el operador se alertado sobre la presencia de este efecto Si desean leer algo m s sobre el tema les menciono dos trabajos Colin Stephen Scott 2 Deon Van Zyl 1 Eevelyn Ho 1 Daniel Meyersfeld 1 Luis Ruivo 2 Barry V Mendelow 1 Theresa L Coetzer1 2002 Automated Detection of WBC Intracellular Malaria Associated Pigment Hemozoin with Abbott Cell Dyn 3200 and Cell Dyn 3700 Analyzers Overview and Results from the South African Institute for Medical Research SAIMR ll Evaluation Laboratory Hematology 8 91 101 Thomas hHanscheid Jose Melo Cristino and Bernadino G Pinto 2001 Automated Detection of Malaria Pigment in White Blood Cells for the Diagnosis of Malaria in Portugal Am J Trop Med Hyg 64 5 6 pp 290 292 Resumiendo Durante la realizaci n del hemograma durante la rutina diaria podemos detectar pacientes que est n padeciendo de malaria mejorando as la calidad de los resultados de nuestro laboratorio sin necesidad de ninguna tarea accesoria Estamos en un nuevo siglo Estamos cambiando la visi n en el diagn stico de la hematolog a Abbott Diagnostics Jul Ago 2007 15
6. e medici n independientes El canal de hemoglobina para la determinaci n de HGB con un diodo emisor de luz como fuente luminosa con una longitud de onda de 555 nm Un detector fotom trico mide la luz transmitida El canal ptico para el gl bulos rojos y plaquetas recuento gl bulos blancos El conjunto ptico contiene los componentes que conforman el cit metro de flujo El objetivo fundamental del conjunto ptico es detectar el esparcimiento de luz a causa de las c lulas a su paso por la celda de flujo La fuente de luz es un rayo l ser de helio ne n polarizado verticalmente a 10 mW con una longitud de onda de 632 8 nm El rayo atraviesa una lente cil ndrica que cambia la forma de circular a el ptica Luego el rayo es dirigido a trav s de una ranura de 125 um que obtura los bordes externos m s d biles Este proceso genera un rayo intenso uniforme con un ancho de aproximadamente 80 um el cual permite que el flujo celular quede expuesto a la misma intensidad luminosa aunque la posici n oscile en la celda de flujo Una lente centra el haz de l ser enfocado sobre la celda de flujo de cuarzo En el cit metro de flujo la suspensi n celular es bombeada desde la c mara de mezcla a trav s de un conducto de muestra hasta una c mara de flujo especial con una peque a abertura en su extremo Seguidamente se inyecta la suspensi n sobre una corriente de l quido en movimiento r pido y exento de c lulas reactivo
7. ma los siguientes par metros Par metros leucocitarios WBC Recuento de leucocitos NEU Recuento absoluto de neutr filos N Porcentaje de neutr filos del recuento WBC LYM Recuento absoluto de linfocitos L Porcentaje de linfocitos del recuento WBC MONO Recuento absoluto de monocitos M Porcentaje de monocitos del recuento WBC EOS Recuento absoluto de eosin filos E Porcentaje de eosin filos del recuento WBC BASO Recuento absoluto de bas filos B Porcentaje de bas filos del recuento WBC Par metros plaquetarios PLT Recuento de plaquetas MPV Volumen plaquetario medio Par metros eritrocitarios RBC Recuento de eritrocitos HCT Hematocrito MCV Volumen corpuscular medio RDW Amplitud de la distribuci n del tama o de los eritrocitos R Porcentaje de reticulocitos RETC Recuento absoluto de reticulocitos Par metros de hemoglobina HGB Dosaje de hemoglobina MCH Hemoglobina corpuscular media MCHC Concentraci n de hemoglobina corpuscular media Ahora bien por qu elegir un CELL DYN RUBYTM y no otro instrumento Nuestro CELL DYN RUBYTM se caracteriza por ser un instrumento totalmente ptico Dicho de otra manera utiliza la tecnolog a MAPSSTM para el recuento y diferenciaci n de todos los elementos Perm tanme entonces una breve descripci n de la metodolog a utilizada El sistema CELL DYN RUBYTM utiliza dos canales d
8. os siguientes tipos de c lulas Eritrocitos nucleados Eritrocitos no hemolizados Plaquetas gigantes Agregados de plaquetas Todas las part culas de esta regi n quedan excluidas del recuento leucocitario y de la f rmula leucocitaria Y adem s se genera un alarma que advierte al usuario sobre la presencia de estos elementos en la muestra Para el caso de los eritrocitos no hemolizados o resistentes a la hem lisis la muestra debe ser reanalizada con la selecci n CBC hemograma completo RRBC Gl bulos rojos resistentes En este modo la diluci n para gl bulos blancos se mantiene en la c mara de mezcla 15 segundos m s que en el modo de paciente normal Este tiempo de lisis adicional se usa para romper hemolizar los eritrocitos resistentes e impedir que interfieran en el recuento WBC y en la f rmula leucocitaria Bioan lisis B An lisis de la serie roja plaquetas Los par metros eritrocitarios se calculan utilizando los datos del sensor 0 10 y 90 mientras que los par metros de las plaquetas se calculan utilizando los datos del sensor 0 y 10 Y ahora corresponde la pregunta Qu beneficios nos brinda esta tecnolog a en el uso diario El uso de una metodolog a ptica para el recuento de plaquetas tiene como principal ventaja la mejor capacidad de resolver recuentos bajos a n en aquellas situaciones d nde los contadores tradicionales no pueden hacerlo por ejemplo en el caso de un
9. paciente con gl bulos rojos microc ticos Pero esto no es todo El CELL DYN RUBYTM tiene adem s la ventaja de la esferizaci n de los gl bulos rojos evitando de esa manera variaciones en la medici n de acuerdo a la posici n en que la c lula ingresa al sistema Eso nos permite obtener un volumen corpuscular medio m s preciso y adem s una mejor correlaci n del hematocrito con el m todo de referencia Dejemos un poco la parte tencnolog a de la medici n y vayamos ahora al software del instrumento El soft del CELL DYN RUBYTM est basado en Windows lo que le va a conferir Una gran capacidad de b squeda de resultados en el registro de datos de manera r pida y flexible pudiendo aplicar m ltiples filtros simult neamente durante la b squeda Gran capacidad de gr ficos que son accesibles con s lo tocar la pantalla sensible del monitor de 17 Indicadores de stock de reactivos Videos de ayuda y manual del operador en l nea con s lo tocar una tecla Capacidad de back up de resultados en DVD Capacidad de m ltiples tipos de impresoras Windows compatibles R pido acceso a la p gina de uso exclusivo del laboratorio con resultados del diferencial de gl bulos blancos extendido que agrega a los cinco par metros cl sicos un recuento de c lulas bandas cayados linfocitos variantes granulocitos inmaduros y blastos a fin de ayudar al profesional a la hora de examinar los extendidos al microscopio Por

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