ESPECTROFOTOMETRO UV VISIBLE
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1. INSTRUCCIONES ESPECTROFOTOMETRO CRUDO CAAMA O MODELO UV VISIBLE ALFANUMERICO Laboratorios Norte S R L Av Federico Lacroze 3360 1426 Buenos Aires Republica Argentina Telfax 45 53 15 97 E mail InorteVarnet com ar ESPECTROFOTOMETRO CRUDO CAAMA O MODELO UV VISIBLE ALFANUMERICO El Espectrofot metro Crudo Caama o modelo UV Visible Alfanum rico fue dise ado y desarrollado gracias a nuestra larga trayectoria en la fabricaci n de este tipo de equipamiento Dicho instrumento de alta precisi n asegura la posibilidad de medir Transmisi n Absorci n Concentraci n Factor y Cin tica de luz en sus escalas espec ficas dentro de un amplio rango del espectro visible y ultravioleta Las determinaciones dentro del rango ultravioleta representan la mayor parte en la rutina diaria de los laboratorios de an lisis cl nicos e industriales MONOCROMACION El monocromador con filtros de banda e interferenciales consigue medidas fotom tricas de gran exactitud ya que la longitud de onda de la radiaci n seleccionada de 8nm es claramente definida y reproducible Ofrecemos en este instrumento de precisi n un dise o moderno de reducidas dimensiones de gran solidez y confiabilidad por su especificidad estabilidad reproducci n de lecturas y tecnolog a de ultima generaci n Fuente luminosa Fuente regulada Monocromador Rango espectral Ancho de banda Exactitud de longitud de onda Reproductividad en2. 37 C para cubetas de caras planas paralelas de 10 mm de paso de luz y apto para Cubeta de Vaciado Autom tico 0 50 ml para cubetas normales y 0 25 para cubetas micro sin circulaci n de agua de papel t rmico 220V LISTA DE EMPAQUE Dentro del embalaje Ud deber encontrar El equipo completo Este manual de instrucciones Garant a de f brica Un sobre conteniendo 6 cubetas de caras planas paralelas pl sticas Una cubeta negra para Ajuste de Cero de Transmisi n INSTALACION Desembale cuidadosamente el aparato verifique que no existan roturas o da os causados por el transporte compruebe la lista de empaque Ante cualquier anomal a o faltante dir jase a su proveedor Conexiones el ctricas a la l nea domiciliaria El equipo se entrega con una ficha de 3 contactos Haga colocar el toma corriente en la zona en que instalar el aparato Aseg rese que la conexi n de tierra ofrezca garant a En caso de no tener una l nea a tierra con ctela a una ca er a de agua Nunca a una de gas CONTROLES DE OPERACION En el panel superior se encuentra Display de lectura LCD Teclado funcional Bot n para activar la Temperatura Perilla de Ajuste de Ganancia Porta cubetas para cubetas volumen 0 50 ml Selector de longitud de onda Led indicador de posici n de filtro En el panel posterior se encuentra Cable de alimentaci n 220V Bot n de encendido Portafusible Selector UV
3. Visible Ajuste de Cero de Transmisi n MANTENIMIENTO Consejos tiles Aseg rese que las cubetas de muestra est n perfectamente limpias y secas t melas siempre de su extremo superior para no ensuciar la zona de paso de luz Deben limpiarse del lado externo con papel tissue antes de introducirlas en el portacubetas Una vez que se usen conviene lavar enseguida las cubetas para evitar que queden adheridos a la superficie dep sitos salinos o proteicos al evaporarse el solvente Utilice s lo reactivos de calidad Transvase las soluciones con cuidado las burbujas de aire pueden provocar inexactitudes al igual que derrames de l quidos en las caras externas de las cubetas de muestra Las ralladuras y dep sitos proteicos en las cubetas de muestra pueden provocar errores de lectura importantes inspeccione con frecuencia FUNCIONES DEL TECLADO DE pag nom Retroceden o avanzan en el Men Selecci n de T cnica Tambi n incrementan o disminuyen los d gitos en la programaci n de un Factor o valor de Concentraci n Ingresa los Factores Ajusta autom ticamente el 100 de Transmisi n o el 0 000 de Abs Ajusta autom ticamente el 0 de Transmisi n En el Modo Cin tica y Cin tica Especial visualiza el resultado de los Deltas el Promedio y el Resultado Final Tambi n en el Modo Cin tica Especial selecciona la t cnica Creatinina o Amilasa Avanzan o retroceden en todas las pantallas del Men Graba un val
4. de la t cnica 15 hasta llegar a la 1 PROGRAMACION DE UNA TECNICA Seleccionar la t cnica a programar y luego presionar amp En el display aparecer la siguiente pantalla Ingrese Factor Ingresar el Factor a trav s del teclado num rico Ingrese Factor 1000 Presionar luego la tecla E y aparecer por un instante la leyenda Grabando flash Esto indica que la t cnica est siendo grabada en memoria Tec 01 F 1000 00 Para grabar las 14 t cnicas restantes proceder de la misma manera LECTURA EN CONCENTRACION Una vez programada la t cnica con las teclas E O ir a la pantalla En la pantalla ajustar el 0 000 de ABS colocando una cubeta de agua en el portacubetas y presionando la tecla 3 De esta forma se ajustar autom ticamente el 0 000 de ABS Luego presionar E hasta llegar a la pantalla Colocar ahora una cubeta con el Standard conocido Ejemplo 20 0 se observar en el display que en la tecla C dar un valor de lectura X ej 90 0 Este es el momento de ajustar el valor de Concentraci n Presionando la tecla E en el display aparecer la siguiente pantalla Ingrese Conc Mediante el teclado num rico ingresar el valor de Concentraci n Luego con la tecla quedar grabado dicho valor quedando el equipo listo para leer en Concentraci n COMO GUARDAR EL FACTOR DE CONCENTRACION EN MEMORIA Para guardar la Concentraci n en primer lugar se debe realizar un c lc
5. la longitud de onda Detector Electr nica Display Lectura simult nea Ajuste de Cero Absorbancia Transmisi n Concentraci n Factor Cin tica ESPECIFICACIONES TECNICAS l mpara de iodo cuarzo de 6V 10W estable entre 150V y 230V filtros interferenciales filtros 340 405 420 500 530 580 620 y 670 8 nm 1 5 nm 1 nm fotodiodo encapsulado en vidrio ntegramente de estado s lidos con circuitos integrados operacionales y microprocesador alfanum rico LCD con lectura en Absorci n Transmisi n Concentraci n Factor y Cin tica en Absorci n y Transmisi n Autom tico Rango 0 000 2 000 Resoluci n 0 000 a 0 999 0 001 ABS 1 0 a 2 00 0 01 ABS Rango 0 100 T Resoluci n 0 1 T Rango 0 001 9999 programable con c lculo autom tico de factor punto decimal flotante resoluci n programable Rango 0 001 9999 valor y resoluci n programable por teclado lectura de la base y tres valores de Absorbancia con c lculo de los Deltas Delta promedio y Resultado final en UI totalmente autom tico Tiempo entre Cin tica especial Teclado funcional Porta cubetas Volumen de muestra Termostato electr nico proporcional Impresora de datos incorporada Alimentaci n lecturas programable entre 1 y 60 segundos con indicaci n auditiva de terminaci n de la corrida para Creatinina y Amilasa con realimentaci n ac stica termostatizado a 25 30 y
6. VER y luego en la carpeta PI2303 para instalar los Drivers seg n el Windows que cada uno tenga Los mismos son los que comunican el equipo con la PC Una vez instalado el programa se podr utilizar el Espectrofot metro de la siguiente forma Es importante aclarar que se podr realizar el ajuste de Cero de Absorbancia y Cero de Transmisi n tanto desde el equipo como desde la PC Desde el equipo presionando la tecla 9 se ajustar el Cero de Absorbancia y con la tecla E se ajustar el Cero de Transmisi n Desde la PC en la solapa Lectura Directa hacer un click en el recuadro Ajuste 100 T para el Cero de Absorbancia y en el recuadro Ajuste 100 T para el Cero de Transmisi n Desde el equipo tambi n se pueden guardar los valores de Absorbancia de cada muestra con solo presionar la tecla E visualiz ndose en el display la leyenda Guardando muestra 1 Si se desearan borrar estas lecturas presionar la tecla E apareciendo en el display la opci n de borrar dichas muestras Desde la PC en la solapa Reactivo se podr n realizar las siguientes funciones Leer las muestras que hayan sido grabadas en el equipo haciendo click en el recuadro Lee Muestras e imprimirlas o guardarlas en la carpeta que se haya creado previamente En la ventana Archivo se encuentran las opciones guardar imprimir y salir En la misma solapa en el recuadro Reactivos se podr ingresar el nombre de los reactivos filtros factor Stand
7. ard m nimo m ximo y tambi n las observaciones que el profesional determine t cnica utilizada etc En la ventana Puerto se muestra la conexi n con el equipo En caso de cortarse la conexi n el recuadro Estado se observar en color rojo Para establecer la conexi n abrir la ventana Puerto y marcar la opci n COM14 observ ndose el recuadro Estado en color verde En el recuadro blanco se podr n ingresar todos aquellos datos referidos al paciente o que sean de inter s para el profesional Concentraci n Espectro Marca la Concentraci n en tiempo real lectura simult nea del Espectrofot metro Ejemplo 20 Transmisi n Marca la Transmisi n en tiempo real lectura simult nea del Espectrofot metro Ejemplo 100 Absorci n Marca la Absorci n en tiempo real lectura simult nea del Espectrofot metro Ejemplo 0 000 Res men En la primera pantalla en la solapa Lectura Directa se podr ajustar el 100 y el Cero de Transmisi n y leer en tiempo real la lectura en el equipo como as tambi n la Concentraci n programada sta desde el equipo En la segunda pantalla en la solapa Reactivos se podr n leer las muestras guardadas desde el equipo almacenarlas en un archivo imprimirlas y agregar las t cnicas que el profesional desee En la tercera pantalla en la solapa Cin tica se podr programar el tipo de Cin tica tiempo de incubaci n temperatura cantidad de Deltas tie
8. atura presionar el bot n rojo AJUSTE DE GANANCIA El Ajuste de Ganancia es utilizado para aumentar o disminuir la Ganancia en los diferentes filtros siempre y cuando lo necesite Por ejemplo en el filtro 340 se requiere de m s Ganancia que en el filtro 500 Una vez seleccionado el filtro colocar en el portacubetas una cubeta con agua destilada Luego con la tecla 9 ajustar el Cero Si el display muestra Ajustar entre 60 y 120 y se ha le do en Transmisi n un valor menor a 60 mayor a 120 con la perilla de Ganancia ubicada debajo del bot n de la Temperatura se ajustar el valor cerca de 100 pudiendo as ajustar 0 000 Abs autom ticamente Estos pasos deber n repetirse cada vez que se cambie de filtro mientras el mismo lo requiera LA LEY DE LAMBERT BEER Muchas de las determinaciones colorim tricas est n basadas en el cumplimiento de dicha ley que dice A ax bxc A Pendiente a x b donde A absorbancia c concentraci n b camino ptico a absortividad Adem s la absorbancia es una funci n logar tmica de la transmisi n T expresada por la ecuaci n A 2 log T De donde se deduce que en el supuesto que la reacci n a realizar y el aparato respondan a la Ley de Lambert Beer calibrando la escala en absorbancia las lecturas son directamente proporcionales a la concentraci n por la cual es necesario encontrar el valor constante de proporcionalidad a x b abso
9. de de la longitud del camino ptico Por lo tanto para determinar curvas de linealidad deben usarse cubetas con longitudes de caminos pticos id nticos Se recomienda que las cubetas que se utilicen en la determinaci n de linealidad sean las mismas a usarse posteriormente en la medici n de las muestras inc gnitas T CNICAS DE MEDICI N Una vez trazada la curva de calibraci n para realizar la medici n de la Concentraci n de una serie de muestras proceda de la siguiente manera Encienda el equipo Seleccione la longitud de onda a la que se le realizo la curva de calibraci n Coloque el blanco y ajuste el 0 de Absorci n Inserte una a una las muestras y anote los valores de absorbancia Para obtener las concentraciones se pueden presentar dos casos a Que la curva de calibraci n sea lineal en este caso bastara dividir cada valor de absorbancia por el coeficiente de proporcionalidad obtenido con el procedimiento expuesto anteriormente sobre la realizaci n de una curva de calibraci n b Que la curva de calibraci n tenga una parte lineal y otra alineal o sea totalmente alineal Para valores de absorbancia inferiores al l mite de linealidad se puede utilizar el procedimiento explicado en a Para valores superiores se deber ubicar los mismos en la curva de calibraci n y leer las correspondientes concentraciones o bien construir una tabla de valores Absorci n Concentraci n Nota normalmente el coe
10. ficiente de proporcionalidad las tablas y las curvas de concentraci n deben permanecer constantes para una determinada celda de muestras y lote de reactivos Sin embargo es conveniente realizar una curva de calibraci n por cada lote de muestras a medir DETERMINACI N DE LA LONGITUD DE ONDA CORRECTA Si Ud desconoce la longitud de onda m s correcta para realizar una medici n pruebe de la siguiente manera 1 Proceda seg n los siguientes puntos partiendo de 400 nm 485 nm y 620 nm para soluciones amarillas rojas azules respectivamente 2 Con el blanco ubique 0 ABS 3 Inserte la soluci n problema y mida ABS 4 Repita los puntos 2 y 3 con longitudes de onda crecientes hasta encontrar el punto de m xima absorbancia El valor de longitud de onda correspondiente a dicho m ximo ser el m s conveniente NOTA IMPORTANTE En el panel posterior del equipo se encuentra ubicado preset de Ajuste de 0 de Transmisi n Si colocando la cubeta negra en el portacubetas y luego presionando la tecla O el equipo no puede ajustar el 0 con dicho preset se podr corregir el ajuste llev ndolo a 0 T C mo operar con el Espectrofot metro desde la PC Pack de instalaci n Insertar el Cd de instalaci n en la CPU Abrir la carpeta Crudo y hacer doble click en Setup Exe Luego seguir los pasos de instalaci n del programa Una vez instalado el programa ingresar en la carpeta LN SRL USB Adapter DRI
11. in tica Luego presionar e A partir de este momento el equipo incubar durante 1 minuto la muestra largando autom ticamente la Cin tica Luego en la pantalla dir Fin de Cin tica Presione Selec Al presionar E el equipo pasar autom ticamente a la pantalla Selecci n de T cnica Tec 13 E Seleccionar la t cnica ya programada con las teclas o E y presionar Factor El equipo mostrar el Delta Promedio y el Resultado Final Con la tecla se podr observar el 19 2 y 3 Delta Delta 1 Delta 2 Delta 3 Para volver al Men Principal presionar a UTILIZACION DE LA TEMPERATURA Como primer paso se debe encender el sistema de termostatizaci n Para ello se debe presionar el bot n rojo ubicado a la derecha del panel frontal Al mismo tiempo se encender un Led que se prender y apagar demostrando la regulaci n de la temperatura Para seleccionar las diferentes temperaturas 25 30 y 37 C posicionarse con las teclas E o 2 en la pantalla Temperatura Temperatura C 30 Al presionar E se cambiar el valor de la temperatura que figura en el display Por ejemplo si se encontraba en 30 al presionar E pasar a 37 Si se vuelve a presionar pasar a 25 y as sucesivamente A partir de este momento el equipo controlar y mantendr autom ticamente la temperatura del portacubetas correspondiente al valor que figura en el display Para la desactivaci n del sistema de Temper
12. ionar las t cnicas que aparecen en la pantalla P F Creatinina Presionar y aparecer la siguiente pantalla 50 00 Para programar el Factor presionar la tecla E y mediante el teclado num rico ingresar el valor Luego presionar la tecla ES quedando as programado el Factor Para comenzar la t cnica presionar e Una vez finalizada la misma se podr n observar los Deltas presionando la tecla Finalizar la t cnica presionando 3 Para la Cin tica en Amilasa realizar el mismo procedimiento que el de la Creatinina PROCESO DE LECTURA DE LA CREATININA El primer Delta es le do a los 30 segundos y el ltimo a los 4 30 minutos Una vez terminada la Cin tica el equipo presentar el resultado final de la Creatinina Presionando la tecla se podr n observar los Deltas de la t cnica Al presionar la tecla E el equipo estar preparado para realizar otra Creatinina De no desearse salir con las teclas E O E En la Amilasa el equipo realiza dos lecturas al minuto y al segundo minuto Tambi n como en la Creatinina se ingresa el factor antes de empezar la Amilasa Una vez finalizada la Cin tica el equipo presentar el resultado final de la misma Presionando la tecla se podr n observar los Deltas de la t cnica Al presionar la tecla E el equipo estar preparado para realizar otra Amilasa De no desearse salir con las teclas E O E CORRIDA DE UNA CINETICA Con las teclas E o ios en la pantalla C
13. mpo entre muestras factor y observaciones varias Desde esta misma pantalla se podr comenzar la Cin tica Del mismo modo que en la solapa Reactivos se podr n almacenar los datos e imprimirlos
14. or de Concentraci n o comienza las Cin ticas Equivale al n mero 8 del teclado num rico Cambia los valores de temperatura Confirma los valores y graba los Factores MODO DE OPERACION AJUSTE DE CERO DE TRANSMISION Conectar el equipo a la l nea de alimentaci n Pulsar el bot n de encendido Una vez encendido el equipo aparecer en la pantalla la lectura simult nea de ABS Y TRANS Con el selector de filtros elegir el filtro con el que desea trabajar Por ejemplo el filtro 340 Colocar la cubeta negra en el portacubetas y presionar E ajust ndose autom ticamente el Cero de Transmisi n en el display En el caso de no poder ajustar el Cero de Transmisi n autom ticamente por corrimiento del valor en la parte posterior del equipo a la derecha se encuentra un ajuste manual del Cero Realizar dicho ajuste con un peque o destornillador hasta ajustar 0 de T en el display de lectura AJUSTE DE CERO DE ABS O CIEN DE TRANSMISION Colocar en el portacubetas una cubeta con agua destilada o blanco reactivo Presionar amp ajust ndose autom ticamente el Cero de ABS y 100 T en el display SELECCION DE TECNICAS Con las teclas E o posicionarse en la pantalla Tec 01 F 1000 00 Para la selecci n de t cnicas deber n utilizarse las teclas E o E Por ejemplo presionando se comienza con la t cnica 1 Si se sigue presionando se pasa a la t cnica 2 3 4 hasta llegar a la 15 Presionando E se parte
15. rtividad por camino ptico que es la pendiente de la curva absorbancia concentraci n Sin embargo en muchas determinaciones especialmente a concentraciones elevadas no se cumple estrictamente la Ley de Lambert Beer por lo cual es necesario realizar una curva de calibraci n Nota a absortividad molar absorbancia cuando las concentraciones y el ancho de la celda son unitarios 1 molar y 1 cm respectivamente La absortividad es un valor propio de cada sustancia y varia con la longitud de onda por consiguiente la absorbancia tambi n depende de la longitud de onda Esto nos indica que cuando se hacen determinaciones se debe fijar un valor de longitud de onda Esto nos indica que cuando se hacen determinaciones se debe fijar un valor de longitud de onda dado y trabajar siempre en ese valor pues se obtendr n valores err neos REALIZACI N DE UNA CURVA DE CALIBRACI N Encienda el equipo Seleccione la longitud de onda requerida Inserte el blanco y ajuste el 0 de Absorci n Prepare una serie de soluciones standard dentro del rango esperado de concentraciones de la inc gnita Con dichas soluciones realice una curva Absorbancia Concentraci n Si en todo existe linealidad se cumple la Ley de Lambert Beer obtenga el coeficiente de proporcionalidad entre Concentraci n y Absorci n dividiendo una absorbancia cualquiera por su correspondiente concentraci n El cumplimiento de la Ley de Lambert Beer depen
16. ulo con la siguiente formula Formula Ejemplo C 20 F 47 28 ABS 0 425 Una vez realizada esta operaci n se podr ingresar el Factor en memoria realizando el mismo procedimiento que el de PROGRAMACION DE UNA TECNICA Si se deseara utilizar este Factor en otro momento cuando se encienda el equipo se deber ajustar el 0 000 de ABS con una cubeta con agua en la pantalla Colocar luego en el portacubetas la cubeta con el standard Con la tecla E posicionar en la pantalla por ejemplo Tec 3 Factor 3000 Se deber seleccionar la t cnica programada con anterioridad utilizando las teclas E o E Ej Tec 03 y presionar la tecla E y luego con la tecla E pasar a la pantalla obteniendo as el Factor programado anteriormente con el valor de la Concentraci n calculado autom ticamente De esta manera el equipo est listo para leer cualquier muestra desconocida COMO INGRESAR UN FACTOR SIN NECESIDAD DE PROGRAMARLO Colocar una cubeta de agua en el portacubetas y presionar la tecla de z Con la tecla E desplazarse a la pantalla Presionar y aparecer la leyenda Ingrese Factor Ingresar el mismo con ayuda del teclado num rico Luego presionar E y aparecer en la pantalla el Factor programado CINETICA ESPECIAL Para realizar una Cin tica especial posicionarse en la pantalla 1 Creatinina utilizando la tecla e 2 Amilasa Al presionar las teclas E o se podr n selecc
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