QUANTA FlashTM h-tTG IgA - Annar Diagnóstica Import
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1. Estas muestras se analizaron mediante el kit QUANTA Flash h tTG IgA Los resultados de este an lisis son los siguientes Datos cl nicos N 371 Sensibilidad y especificidad i intervalo de confianza 95 CIA QUANTA Sensibilidad 94 0 83 5 98 7 Flash Especificidad 98 1 96 0 99 3 h tTG IgA Muestras procedentes de 4 donantes de sangre 3 de ellos positivos en el ELISA y de 2 pacientes positivos a los anticuerpos de H pylori y la tiroglobulina respectivamente Las 3 muestras fueron negativas en el ELISA h tTG IgA La tabla siguiente muestra los resultados de 25 pacientes con dermatitis herpetiforme Dermatitis herpetiforme An lisis N 25 intervalo de confianza 95 CIA QUANTA Positivo 20 O 20 Sensibilidad 80 026 59 3 93 2 Flash Negativo 5 0 5 hHTGIgA j Toal 25 0 25 Las 5 muestras tambi n fueron negativas en el ELISA h tTG IgA Precisi n y reproducibilidad La precisi n del ensayo QUANTA Flash h tTG IgA se ha evaluado analizando 7 pacientes seg n el documento EP5 A2 del CLSI la tabla siguiente resume los datos obtenidos L mites de detecci n rangos lineales y notificables El l mite inferior de detecci n del ensayo de acuerdo con el documento EP17 A del CLSI es de 465 RLU aproximadamente lo que equivale a 0 3 CU El l mite superior de detecci n aproximado es de 1 000 000 RLU El rango notificable completo que va de 1 9 CU a 4 965 5 CU es linea2. como los anticuerpos anti gliadina y anti endomisio con el fin de reducir el n mero de biopsias intestinales necesarias para obtener un diagn stico El ant geno de endomisio ha sido identificado como la enzima tTG que cataliza la formaci n de uniones covalentes entre prote nas El ant geno h tTG se ha producido mediante tecnolog a recombinante y puede tener ciertas ventajas frente al ant geno de h gado de cobaya La dermatitis herpetiforme es una enfermedad de la piel que al igual que la celiaqu a est provocada por la ingesti n de prote nas del trigo La mayor a de los pacientes con DH presentan una atrofia de las vellosidades intestinales del yeyuno id ntica a la encontrada en la enfermedad cel aca y una dieta estricta sin gluten mejora tanto las lesiones intestinales como las cut neas Los m todos serol gicos actuales como los an lisis de endomisio gliadina nativa y tTG presentan un rendimiento inferior cuando se utilizan para la detecci n de la DH pues tienen una sensibilidad de tan solo el 60 75 frente a una sensibilidad superior al 95 en el caso de la celiaqu a Principios del procedimiento oe recubren con h tTG recombinante lechos de l tex paramagn tico que se guardan en el cartucho de reactivos en unas condiciones que mantienen el ant geno en su estado reactivo Cuando el cartucho de an lisis est preparado para ser utilizado por primera vez se a ade una soluci n de tamp n al tubo que conti
3. ximo durante el que los tubos del calibrador pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es 8 horas Si los calibradores destapados permanecen en el instrumento por m s de 8 horas deben desecharse Si se utilizan los mismos tubos de calibrador para m s de 4 calibraciones y o durante m s de 8 horas es posible que la calibraci n del ensayo sea incorrecta lo que producir resultados err neos 11 QUANTA Flash h tT G IgA 701102 Controles Para uso diagn stico n vitro Uso previsto Los controles QUANTA Flash h tTG IgA Controls est n destinados al control de calidad de los an lisis efectuados mediante el kit de inmunoensayo por quimioluminiscencia CIA QUANTA Flash h tTG IgA en un instrumento BIO FLASH Resumen y Principios del Procedimiento Los controles QUANTA Flash h tTG IgA Controls est n constituidos por un control negativo y un control positivo Cada uno de ellos contiene una cantidad diferente de anticuerpos IgA anti h tTG El control negativo est dise ado para evaluar la precisi n y la exactitud del ensayo a niveles muy bajos de anticuerpos El control positivo est dise ado para evaluar la precisi n y la exactitud del ensayo a niveles de anticuerpos de moderados a altos Reactivos 1 QUANTA Flash h tTG IgA Negative Control Dos 2 tubos etiquetados mediante c digo de barras con ta mp n que contiene anticuerpos IgA de suero humano contra la h tTG prediluido preparado para ser utiliz
4. 9 Trier JS Celiac Sprue N Engl J Med 325 1709 1719 1991 Strober W Gluten sensitive enterophy A nonallergic immune hypersensitivity of the gastrointestinal tract J Allergy Clin Immunol 78 202 211 1986 McMillan SA Haughton DJ Biggart JD et al Predictive value for coeliac disease of antibodies to gliadin endomysium and jejunum in patients attending for jejunal biopsy BMJ 303 1163 1165 1991 Valdimarsson T Franzen L Grodzinsky E et al Is small bowel biopsy necessary in adults with suspected celiac disease and IgA anti endomysial antibodies 100 positive predictive value for celiac disease in adults Digestive Diseases and Science 41 83 87 1996 Walker Smith JA Guandalini S Schmitz J et al Revised criteria for diagnosis of celiac disease Report of working group of European Society of Pediatric Gastroenterology and Nutrition ESPGAN Arch Diseases of Childhood 65 909 911 1990 Dieterich W Ehnis T Bauer M et al Identification of tissue transglutaminase as the autoantigen of celiac disease Nature Medicine 3 797 801 1997 Sardy M Odenthal U Karpati S et al Recombinant human tissue transglutaminase ELISA for the diagnosis of gluten sensitive enteropathy Clin Chem 45 2142 2149 1999 oblattero D Berti Trevisiol C et al Human recombinant tissue transglutaminase ELISA an innovative diagnostic assay for celiac disease Am J Gastroenterology 95 1253 1257 2000 Marietta EV Camilleri MJ Castro
5. componente 3000 8206 Calibradores QUANTA Flash h tTG IgA Calibrators n mero de componente 701101 Controles QUANTA Flash h tTG IgA Controls n mero de componente 701102 Uso del analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH 1 Consulte el manual del usuario suministrado junto con el sistema BIO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH Para obtener m s informaci n o solucionar problemas relativos al ensayo p ngase en contacto con el servicio t cnico de INOVA Diagnostics Inc en la direcci n o n mero de tel fono indicados al final de estas instrucciones de uso Para vaciar el recipiente de residuos s lidos abra el caj n de residuos Extraiga el recipiente de residuos s lidos y tire el residuo s lido no peligroso las cubetas usadas Coloque el recipiente de residuos s lidos en su lugar cierre el caj n de residuos y haga clic en S en la ventana Vaciar caj n de residuos Para sustituir los iniciadores haga clic en el bot n Inventario de vol menes F9 situado en la parte superior derecha a En la pantalla Inventario Vol menes haga clic en el bot n Iniciadores situado a la izquierda Se abrir la ventana A adir iniciadores Retirar botellas viejas b Abra y retire el caj n de residuos del instrumento BIO FLASH Tire todas las cubetas del caj n de residuos secos Haga clic en S en la ventana Vaciar ca
6. del instrumento Los residuos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formalina lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Aseg rese de limpiar siempre el instrumento seg n el procedimiento recomendado que est indicado el manual del usuario del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 2 Guarde los calibradores no abiertos a 2 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est indicado Los calibradores abiertos deben desecharse al cabo de 8 horas Procedimiento 1 2 Cada nuevo lote de cartucho de reactivos debe calibrarse antes del primer uso El software no permitir usar un lote nuevo hasta que se calibre Cada calibrador debe mezclarse suavemente antes de utilizarlo para garantizar su homogeneidad Evite la formaci n de espuma ya que las burbujas pueden interferir en la detecci n del nivel de l quido de los instrumentos Destape los dos tubos del calibrador y col quelos en una gradilla de muestras con los c digos de barras orientados hacia delante a trav s de las aberturas de la gradilla Coloque la gradilla de muestras en la bandeja de muestras del instrumento BIO FLASH y cierre la puerta El instrumento leer los c digos de barras de los tubos del calibrador e identificar el cartucho de reactivos adecuado Consulte el manual del usuario suministrado con el sistema BIO FLASH para obtener instrucc
7. indicado 2 Los controles abiertos son v lidos para 15 usos y pueden permanecer como m ximo 10 minutos en el instrumento en cada uso Si se supera cualquiera de estos l mites el control debe desecharse y debe utilizarse un nuevo control Procedimiento Nuevo lote 1 Antes de utilizar un nuevo lote de controles QUANTA Flash h tTG IgA Controls por primera vez deben introducirse en el software el nombre el lote la caducidad el valor o dosis y la DE objetivo 2 En la pantalla Resumen del instrumento haga clic en bot n Seleccionar m s opciones Ctrl M V se alado con una flecha Seleccione QC Ctrl F2 Marque el ensayo IgA tTG en la columna de la izquierda A continuaci n seleccione el material de control apropiado en la derecha TTGAN para el control negativo o bien TTGAP para el control positivo Haga clic en el bot n Nuevo QC 3 Cada grupo de control incluye una hoja de datos espec fica para cada lote Introduzca la informaci n de esta hoja de datos en el software Dicha informaci n debe comprender el nombre el n mero de lote la caducidad la dosis objetivo y la DE objetivo Haga clic en Guardar Realice este proceso para ambos controles 4 Se recomienda utilizar una vez los controles QUANTA Flash h tTG IgA Controls los d as en que se realice el ensayo 9 Cada control debe mezclarse suavemente antes de utilizarlo para garantizar su homogeneidad Evite la formaci n de espuma ya que las burbujas
8. la preparaci n de los calibradores para este producto ha sido analizado y ha producido un resultado negativo con respecto a la presencia de anticuerpos del VIH el HBsAg y el VHC seg n m todos aprobados por la FDA Sin embargo ning n m todo de an lisis puede ofrecer plenas garant as de la ausencia del VIH el VHB el VHC u otros agentes infecciosos Por ello los calibradores QUANTA Flash h tTG IgA Calibrators deben manipularse como si se tratara de material potencialmente infeccioso 4 Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados 5 Los vertidos de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente para la eliminaci n de residuos Precauciones Este producto est destinado a uso diagn stico in vitro Los calibradores QUANTA Flash h tTG IgA Calibrators est n destinados a utilizarse con el ensayo QUANTA Flash h tTG IgA No transfiera los reactivos de los calibradores a tubos secundarios Los c digos de barras de los tubos son utilizados por el instrumento para ajustar los calibradores al tipo de ensayo adecuado Los tubos de los calibradores una vez abiertos pueden utilizarse durante un m ximo de 8 horas o 4 calibraciones transcurrido este tiempo los reactivos deben desecharse Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados
9. pueden interferir en la detecci n del nivel de l quido de los instrumentos Destape los dos tubos del control y col quelos en una gradilla de muestras con los c digos de barras orientados hacia delante a trav s de las aberturas de la gradilla Coloque la gradilla de muestras en la bandeja de muestras del instrumento BIO FLASH y cierre la puerta El instrumento leer los c digos de barras de los tubos del control e identificar el cartucho de reactivos adecuado Consulte el manual del usuario suministrado con el sistema BIO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH Trazabilidad Actualmente no existe ning n est ndar internacional reconocido para la medici n de anticuerpos IgA contra la transglutaminasa tisular humana Limitaciones Estos controles est n dise ados para 15 usos La etiqueta de cada tubo de control posee una fila de 15 casillas que pueden marcarse para controlar el n mero de usos El tiempo m ximo durante el que los tubos del control pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es 2 5 horas o 10 minutos por uso Los controles destapados que permanezcan en el instrumento durante m s tiempo deben desecharse Si se utilizan los mismos tubos de control para m s de 15 usos y o durante m s de 2 5 horas en total pueden producirse resultados err neos 13 Bibliograf a ND el A p xy D p
10. LA et al Transglutaminase autoantibodies in dermatitis herpetiformis and Celiac Sprue J Invest Dermatol 128 332 335 2007 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories Centers for Disease Control National Institutes of Health quinta edici n 2007 Simbolos utilizados LO U 8g 3 31s Dispositivo m dico para diagn stico n vitro Consulte las instrucciones de uso L mites de temperatura No reutilizar Riesgos biol gicos C digo del lote Numero de cat logo Utilizar antes del tiempo indicado Fabricante Contenido suficiente para n an lisis GE t Control positivo c e 2 e r Control negativo CAL 1 Calibrador 1 CAL 2 Calibrador 2 Caja de cart n reciclable gt E gt Mantener en esta posici n QUANTA Flash es una marca comercial de INOVA Diagnostics Inc BIO FLASH es una marca comercial registrada de Biokit SA 2011 Fabricado por INOVA Diagnostics Inc 9900 Old Grove Road San Diego CA 92131 Estados Unidos de Am rica Servicio t cnico solo para EE UU y Canad 877 829 4745 Servicio t cnico fuera de EE UU 00 1 858 805 7950 support inovadx com Representante autorizado en la UE Medical Technology Promedt Consulting GmBH Altenhofstrasse 80 D 66386 St Ingbert Alemania Tel 49 6894 581020 Fax 49 6894 581021 www mt procons com 621100ESP Julio 2011 Revisi n 1
11. Positivo d bil 20 30 Positivo gt 30 La reactividad expresada en CU est directamente relacionada con la titulaci n del autoanticuerpo en las muestras de paciente Los aumentos y disminuciones de las concentraciones de anticuerpos de pacientes se reflejar n en un correspondiente aumento o disminuci n de las CU que es proporcional a la cantidad de anticuerpo El rango notificable del ensayo va de 1 9 CU a 4 965 5 CU Si el resultado de un paciente es inferior a 1 9 CU el sistema BIO FLASH indicar 1 9 CU Dado que este valor es inferior a 20 CU se considera un resultado negativo Si el resultado de un paciente es superior a 4 965 5 CU el sistema BIO FLASH indicar 4 965 5 CU Este valor se considera un resultado positivo El software BIO FLASH dispone de una opci n denominada Rean lisis autom tico Si esta opci n est seleccionada el instrumento volver a analizar de manera autom tica cualquier muestra con un resultado superior a 4 965 5 CU diluy ndola nuevamente seg n un factor de 10 y calcular las CU utilizando este factor de diluci n adicional Interpretaci n de los resultados El ensayo QUANTA Flash permite detectar peque as diferencias en la poblaci n de pacientes Cada laboratorio debe determinar su propio rango normal bas ndose en los controles y la poblaci n de pacientes que utilice de acuerdo con los procedimientos espec ficos que establezca Es recomendable que los resultados notificados por e
12. QUANTA Flash h tTG IgA 701103 Para uso diagn stico n vitro Uso previsto El QUANTA Flash h tTG IgA es un inmunoensayo por quimioluminiscencia CIA para la detecci n semicuantitativa de anticuerpos IgA anti transglutaminasa tisular humana h tTG en suero humano La presencia de anticuerpos IgA anti h tTG en combinaci n con resultados cl nicos y otros an lisis de laboratorio puede servir de ayuda para el diagn stico de dos enteropat as por sensibilidad al gluten la celiaqu a o enfermedad cel aca CD y la dermatitis herpetiforme DH Resumen y explicaci n de la prueba La celiaqu a es una enfermedad cr nica cuyas caracter sticas principales son inflamaci n y un t pico aplanamiento de la mucosa intestinal que provoca un s ndrome de malabsorci n denominado enteropat a por sensibilidad al gluten La etiolog a exacta de la celiaqu a es aun desconocida pero la gliadina la fracci n soluble en alcohol del gluten del trigo es claramente el agente t xico Inicialmente se utilizaban una serie de biopsias intestinales para diagnosticar la enfermedad cel aca M s recientemente se ha propuesto el an lisis serol gico de anticuerpos anti gliadina anti endomisio y anti tTG para identificar a los pacientes con posible enteropat a por sensibilidad al gluten y supervisar el cumplimiento de las dietas La Sociedad Europea de Gastroenterolog a Pedi trica y Nutrici n ha recomendado el uso de anticuerpos como marcadores
13. aci n cl nica del QUANTA Flash h tTG IgA CIA Los calibradores se analizan en varios instrumentos con diversos lotes de reactivos antes de efectuar la asignaci n de valores Reactivos 1 QUANTA Flash h tTG IgA Calibrator 1 Dos 2 tubos etiquetados mediante c digo de barras con tamp n que contiene anticuerpos IgA de suero humano contra la h tTG prediluido preparado para ser utilizado y de 0 3 mL de volumen de color rojo con tamp n estabilizantes de prote nas y conservantes 2 QUANTA Flash h tTG IgA Calibrator 2 Dos 2 tubos etiquetados mediante c digo de barras con tamp n que contiene anticuerpos IgA de suero humano contra la h tTG prediluido preparado para ser utilizado y de 0 3 mL de volumen de color rojo con tamp n estabilizantes de prote nas y conservantes Advertencias 1 ADVERTENCIA Los calibradores contienen una sustancia qu mica cloranfenicol al 0 02 que est clasificada como cancer gena por el Estado de California 2 Se utiliza azida de sodio como conservante La azida de sodio es una sustancia venenosa y puede resultar t xica si se ingiere o si se absorbe a trav s de la piel o los ojos La azida de sodio puede reaccionar con el plomo o el cobre de las tuber as y formar azidas met licas potencialmente explosivas Si utiliza las pilas de lavado para eliminar reactivos aclare con abundante cantidad de agua para evitar la formaci n de azidas met licas 3 Todo el material de origen humano usado en
14. ado y de 0 5 mL de volumen con tamp n estabilizantes de prote nas y conservantes 2 QUANTA Flash h tTG IgA Positive Control Dos 2 tubos etiquetados mediante c digo de barras con tamp n que contiene anticuerpos lgA de suero humano contra la h tTG prediluido preparado para ser utilizado y de 0 5 mL de volumen con tamp n estabilizantes de prote nas y conservantes Advertencias 1 ADVERTENCIA Los controles contienen una sustancia qu mica cloranfenicol al 0 0296 que est clasificada como cancer gena por el Estado de California 2 oe utiliza azida de sodio como conservante La azida de sodio es una sustancia venenosa y puede resultar t xica si se ingiere o si se absorbe a trav s de la piel o los ojos La azida de sodio puede reaccionar con el plomo o el cobre de las tuber as y formar azidas met licas potencialmente explosivas Si utiliza las pilas de lavado para eliminar reactivos aclare con abundante cantidad de agua para evitar la formaci n de azidas met licas 3 Todo el material de origen humano usado en la preparaci n de los controles para este producto ha sido analizado y ha producido un resultado negativo con respecto a la presencia de anticuerpos del VIH el HBsAg y el VHC seg n m todos aprobados por la FDA Sin embargo ning n m todo de an lisis puede ofrecer plenas garant as de la ausencia del VIH el VHB el VHC u otros agentes infecciosos Por ello los controles QUANTA Flash h tTG IgA Controls deben mani
15. ando el l quido al menos 30 veces Si se observan masas visibles de lechos contin e mezclando la soluci n 30 veces m s 4 Aseg rese de dispensar todo el l quido antes de retirar la pipeta del tubo y desecharla 4 Retire el adhesivo de la parte superior del cartucho de reactivos para descubrir los otros tres orificios 9 Coloque el cartucho de reactivos en cualquier ranura abierta de la bandeja de reactivos del instrumento BIO FLASH 4 Calibraci n del ensayo 1 Cada nuevo lote de cartucho de reactivos debe calibrarse antes del primer uso El software no permitir usar un lote nuevo hasta que se calibre 2 Consulte el apartado Calibradores QUANTA Flash h tTG IgA 701101 de este documento para obtener instrucciones de uso detalladas sobre c mo calibrar el cartucho de reactivos 3 Una vez validada la calibraci n el lote de cartuchos de reactivos en el que se ha efectuado la calibraci n estar preparado para utilizarse Programaci n y an lisis de muestras 1 Pulse el bot n Lista de trabajo de la parte superior de la pantalla y seleccione la pesta a Gradillas de la parte inferior 2 Seleccione la gradilla de muestras que se utilizar marc ndola en la pantalla o escaneando su c digo de barras con el lector manual de c digos de barras Escanee o escriba el nombre de la muestra indique el tipo de muestra elija el tipo de recipiente tubo copa y seleccione IgA h tTG en el panel del ensayo Repita esto
16. ene los lechos y estos se mezclan con el tamp n A continuaci n se coloca el cartucho de reactivos en el instrumento BIO FLASH Mediante el instrumento se prediluye una muestra de suero de paciente utilizando tamp n para muestras a adido a una cubeta de pl stico desechable Se combinan en una segunda cubeta y se mezclan pequefias cantidades del suero de paciente diluido los lechos de h tTG y el tamp n de an lisis Esta cubeta se incuba a 37 C y despu s los lechos se magnetizan y se lavan varias veces continuaci n se a ade anticuerpo conjugado con isoluminol a la cubeta y esta se incuba a 37 C De nuevo los lechos se magnetizan y se lavan repetidamente El conjugado de isoluminol produce una reacci n luminiscente al a adir a la cubeta los reactivos iniciadores La luz emitida por la reacci n se mide como unidades relativas de luz RLU mediante el sistema ptico del BIO FLASH El n mero de RLU es proporcional a la cantidad de conjugado de isoluminol ligado que a su vez es proporcional a la cantidad de anticuerpos IgA anti h tTG unidos al h tTG en los lechos El ensayo QUANTA Flash h tTG IgA utiliza una curva maestra predefinida espec fica para cada lote que se carga en el instrumento mediante el c digo de barras del cartucho de reactivos De acuerdo con los resultados del an lisis de dos calibradores se crea una curva de trabajo espec fica para el instrumento que se usa para calcular las unidades de quimioluminiscenc
17. ia CU a partir de las RLU obtenidas con cada paciente Reactivos jr El cartucho de reactivos del QUANTA Flash h tTG IgA contiene los reactivos siguientes para 50 an lisis a Lechos paramagn ticos recubiertos de h tTG conservados antes del primer uso b Tamp n de an lisis de color rosa que contiene soluci n salina tamponada con Tris Tween 20 estabilizantes de prote nas y conservantes C IgA trazadora anticuerpo anti IgA humana etiquetada con isoluminol que contiene tamp n estabilizantes de prote nas y conservante d Tamp n para muestras soluci n salina tamponada con fosfato que contiene Tween 20 2 Tamp n de resuspensi n de color rosa en un vial que contiene tamp n estabilizantes de prote nas y conservantes Advertencias 1 ADVERTENCIA El tamp n del ensayo contiene una sustancia qu mica cloranfenicol al 0 02 que est clasificada como cancer gena por el Estado de California 2 Se utiliza azida de sodio como conservante La azida de sodio es una sustancia venenosa y puede resultar t xica si se ingiere o si se absorbe a trav s de la piel o los ojos La azida de sodio puede reaccionar con el plomo o el cobre de las tuber as y formar azidas met licas potencialmente explosivas Si utiliza las pilas de lavado para eliminar reactivos aclare con abundante cantidad de agua para evitar la formaci n de azidas met licas 3 Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactiv
18. iones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH El instrumento analizar cada calibrador por triplicado Una vez analizados los calibradores el software solicitar la validaci n de la calibraci n En la pantalla Resumen del instrumento haga clic en bot n Seleccionar m s opciones Ctrl M V se alado con una flecha Seleccione Calibraci n Ctrl F3 En la ventana Calibraci n marque el ensayo deseado y haga clic en Detalles En la ventana Detalles de calibraci n que se abrir seleccione la calibraci n que acaba de efectuar La curva maestra se visualizar como una l nea discontinua y la nueva curva maestra como una l nea continua Si los resultados de la calibraci n son v lidos en la parte inferior izquierda de la pantalla aparecer un bot n de validaci n Haga clic en el bot n Validar calibraci n Una vez validada la calibraci n el lote de cartuchos de reactivos en el que se ha efectuado la calibraci n estar preparado para utilizarse Se recomienda analizar los controles QUANTA Flash h tTG IgA Controls vendidos por separado n mero de producto 701102 tras calibrar un lote de cartuchos de reactivos Trazabilidad Actualmente no existe ning n est ndar internacional reconocido para la medici n de anticuerpos IgA contra la transglutaminasa tisular humana Limitaciones Estos calibradores est n dise ados para realizar 4 calibraciones El tiempo m
19. j n de residuos Retire las botellas del iniciador de sus soportes y haga clic en el bot n Siguiente Desenrosque las botellas viejas del iniciador de sus tapones y sustit yalas por nuevos iniciadores Realice la operaci n botella a botella y respete el c digo de color de los tapones blanco blanco rojo rojo c Siga las instrucciones de la ventana que se abrir A adir iniciadores A adir botella del iniciador 2 Una vez aceptado el c digo de barras coloque el iniciador 2 en el soporte de color blanco Haga clic en Siguiente d Siga las instrucciones de la ventana A adir iniciadores A adir botella del iniciador 1 Una vez aceptado el c digo de barras coloque el iniciador 1 en el soporte de color rojo Haga clic en Finalizar Coloque el caj n de residuos en su lugar y ci rrelo 4 Para sustituir el recipiente de l quido de lavado del sistema haga clic en el bot n Inventario de vol menes F9 en la esquina superior derecha En la pantalla Inventario Vol menes haga clic en el bot n Lavado del sistema En la ventana que se abrir Afiadir l quido de lavado Retirar botellas haga clic en Siguiente Siga las instrucciones de la ventana que aparecer A adir l quido de lavado A adir botella Una vez aceptado el c digo de barras haga clic en Finalizar si es necesario 5 Para vaciar el recipiente de residuos l quidos en la pantalla Inventario Vol menes haga clic en el bot n Residuo l quido Extraiga el
20. l Se ha realizado un estudio de linealidad siguiendo el documento EP6 A del CLSI y los datos obtenidos son los siguientes Muestra Rango de an lisis CU Pendiente IC 95 Corte en eje Y IC 95 ORO 1 9 45 4 1 0 0 95 1 05 0 93 0 26 2 2 2 8 118 3 1 03 0 99 1 06 0 68 1 38 2 7 3 0 141 3 0 99 0 95 1 02 1 05 1 46 3 56 17 6 724 7 1 02 0 98 1 06 7 81 7 25 22 87 2 2 2 699 0 1 05 1 0 1 09 31 18 18 39 80 76 10 0 5 428 0 0 92 0 86 0 98 100 9 267 2 65 5 QUANTA Flash h tT G IgA 701101 Calibradores Para uso diagn stico n vitro Uso previsto Los calibradores QUANTA Flash h tTG IgA Calibrators est n destinados a utilizarse con el inmunoensayo por quimioluminiscencia CIA QUANTA Flash h tTG IgA en el instrumento BIO FLASH Cada calibrador establece un punto de referencia para la curva de trabajo utilizada en la determinaci n de los valores de las unidades de quimioluminiscencia CU para la medici n de anticuerpos IgA anti h tTG en suero Resumen y Principios del Procedimiento El QUANTA Flash h tTG IgA emplea una curva maestra predefinida espec fica de cada lote que se guarda en el c digo de barras del cartucho de reactivos Los calibradores QUANTA Flash h tTG IgA Calibrators est n dise ados para generar una curva de trabajo espec fica para el instrumento a partir de los par metros de la curva maestra con un punto de decisi n basado en las caracter sticas operativas y en la evalu
21. l laboratorio incluyan esta informaci n Los siguientes resultados se han obtenido mediante el inmunoensayo por quimioluminiscencia QUANTA FLASH h tTG IgA de INOVA Los valores obtenidos con m todos de ensayo de otros fabricantes pueden no ser intercambiables La magnitud de los niveles de anticuerpo IgA obtenidos no siempre puede correlacionarse con un t tulo de punto final Limitaciones del procedimiento 1 No todos los pacientes con celiaqu a o dermatitis herpetiforme presentan un resultado positivo con respecto a los autoanticuerpos IgA anti h tT G Adem s un resultado negativo en la IgA anti h tTG en un paciente no sometido a tratamiento puede explicarse a menudo por una deficiencia selectiva de IgA que es relativamente frecuente en la celiaqu a INOVA ofrece kits para analizar estos pacientes QUANTA Flash h tTG IgG 2 Los resultados de este an lisis deben utilizarse junto con resultados cl nicos y otros an lisis serol gicos 3 Si la resuspensi n de los lechos recubiertos de h tTG no se efect a de un modo adecuado pueden obtenerse resultados inferiores en comparaci n con los an lisis que han tenido una resuspensi n adecuada 4 Las caracter sticas de rendimiento de este ensayo no se han establecido para sustratos distintos del suero Valores esperados El l mite de detecci n del ensayo se ha determinado analizando 446 muestras caracterizadas cl nicamente extracciones simples en pacientes con un diagn stico cla
22. o deben desecharse El software BIO FLASH supervisa las fechas de caducidad de los cartuchos cargados as como las de los lotes de cartuchos de reactivos Recogida de muestras Este procedimiento debe realizarse con una muestra de suero No deben utilizarse muestras que est n contaminadas con microorganismos que hayan recibido un tratamiento a base de calor o que contengan part culas visibles No debe utilizarse suero muy hemolizado ni suero ict rico Tras la recogida el suero debe separarse del co gulo El documento H18 A3 del CLSI recomienda las siguientes condiciones de almacenamiento de muestras 1 No guarde las muestras a temperatura ambiente por m s de 8 horas 2 Si el an lisis no se efect a en un plazo de 8 horas refrigere las muestras a 2 8 C 3 Si el an lisis no va a realizarse en un plazo de 48 horas o si debe preparar las muestras para enviarlas cong lelas a una temperatura de 20 C o inferior Las muestras congeladas deben mezclarse bien despu s de descongelarse y antes del an lisis Procedimiento Materiales suministrados 1 1 1 Cartucho de reactivos para el QUANTA Flash h tTG IgA Tamp n de resuspensi n de 3 mL Pipeta de transferencia Materiales adicionales necesarios no suministrados Instrumento BIO FLASH con ordenador para manejarlo L quido de lavado del sistema BIO FLASH n mero de componente 3000 8205 Iniciadores BIO FLASH n mero de componente 3000 8204 Cubetas BIO FLASH n mero de
23. os suministrados 4 Los vertidos de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente para la eliminaci n de residuos Precauciones 1 Este producto est destinado a uso diagn stico in vitro 2 Este ensayo solo debe utilizarse con el instrumento BIO FLASH 3 Se recomienda seguir estrictamente el protocolo de resuspensi n indicado 4 Una vez abierto el cartucho de reactivos debe almacenarse en la bandeja de reactivos del instrumento La colocaci n del cartucho de reactivos en el instrumento por primera vez debe realizarse con todo cuidado para no verter los reactivos 5 Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los residuos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formalina lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Aseg rese de limpiar siempre el instrumento siguiendo el procedimiento recomendado que est indicado el manual del usuario del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 Guarde los cartuchos de reactivos no abiertos y el tamp n de resuspensi n a 2 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est indicado Los cartuchos de reactivos abiertos deben guardarse cargados en el instrumento y permanecen estables durante 20 d as tras este per od
24. pularse como si se tratara de material potencialmente infeccioso 4 Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados 5 Los vertidos de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente para la eliminaci n de residuos Precauciones 1 Este producto est destinado a uso diagn stico in vitro 2 Los controles QUANTA Flash h tTG IgA Controls est n destinados a utilizarse con el ensayo QUANTA Flash h tTG IgA 3 No transfiera los reactivos de los controles a tubos secundarios Los c digos de barras de los tubos son utilizados por el instrumento para identificar al control 4 Cada tubo de control una vez abierto es v lido para 15 usos y puede permanecer como m ximo 10 minutos en el instrumento en cada uso 5 Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los residuos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formalina lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Aseg rese de limpiar siempre el instrumento seg n el procedimiento recomendado que est indicado el manual del usuario del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 Guarde los controles no abiertos a 2 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est
25. residuo l quido y t relo Haga clic en Siguiente Una vez sustituida la botella vac a haga clic en Finalizar M todo Preparaci n del cartucho de reactivos La primera vez que se utilice el cartucho de reactivos deben perforarse los sellos de almacenamiento de los tubos de reactivos y los lechos recubiertos de h tTG deben mezclarse con tamp n de resuspensi n 1 Coloque el cartucho de reactivos en una superficie s lida Con una mano sostenga el cartucho de reactivos en su lugar Con la otra agarre con fuerza la anilla roja de la parte posterior del cartucho de reactivos y tire de ella completamente 2 Pulse las dos pesta as laterales del tap n de perforaci n parte gris y aplique presi n a la parte superior del cartucho de reactivos hasta que descienda y alcance un tope Las pesta as deber an quedar ocultas 3 Vuelva a suspender los reactivos del kit 1 Destape el vial de tamp n de resuspensi n y recoja fluido en la pipeta de transferencia suministrada Todo el contenido del vial se utilizar 2 Deslice la puerta de la tapa del cartucho de reactivos hasta la posici n abierta presionando suavemente el lateral estrecho del cartucho de reactivos y mant ngala en esta posici n Transfiera anal ticamente todo el contenido del vial al tubo de reactivo de lechos a trav s del nico orificio de la parte superior del cartucho de reactivos 3 Mezcle el contenido del tubo de reactivo de lechos aspirando y dispens
26. ro de celiaqu a o ausencia de celiaqu a y que no segu an ninguna dieta sin gluten Estas muestras 117 cl nicamente positivas y 329 cl nicamente negativas se han utilizado para ajustar el l mite de detecci n a 20 CU a fin de optimizar la sensibilidad y especificidad en los valores 92 3 y 98 2 respectivamente en este grupo de preparaci n del an lisis Comparaci n de m todos con un ensayo comercializado con el mismo fin Las muestras usadas en la comparaci n de m todos fueron las de los estudios de validaci n cl nica pacientes con celiaqu a sin celiaqu a y con dermatitis herpetiforme que se encontraban dentro del rango notificable del ensayo Dichas muestras se analizaron mediante el QUANTA Flash IgA h tTG y un ELISA destinado al mismo fin de m todos Im h Jis IgA Concordancia 96 140 intervalo de confianza 95 CIA SANTA Conc pos 100 94 7 100 Flash A OU T 755 5 B h tTG IgA Total 69 71 140 Conc total 991 A Una muestra proced a de una donante de sangre con un resultado altamente negativo en el la otra pertenec a a un paciente con dermatitis herpetiforme Sensibilidad y especificidad cl nicas El estudio de validaci n cl nica cont con 200 donantes de sangre normales 71 controles sin celiaqu a 77 muestras procedentes de un seminario sobre la tTG 27 controles con celiaqu a y 50 sin celiaqu a y 23 muestras cel acas adicionales extra das de la biblioteca de sueros de INOVA
27. s pasos para todas las muestras 3 Cargue las muestras en las posiciones seleccionadas de la gradilla de muestras y coloque la gradilla en la bandeja de muestras del instrumento 4 Cuando todos los materiales necesarios est n cargados en el instrumento el icono de inicio pasar a estar disponible en color verde en la parte superior de la pantalla Pulse el icono de inicio para comenzar la sesi n de an lisis Control de calidad Los controles QUANTA Flash h tTG IgA Controls vendidos por separado n mero de producto de INOVA 701102 contienen los controles positivos y negativos del QUANTA Flash h tTG IgA Consulte el apartado Controles QUANTA Flash h tTG IgA 701102 de este documento para obtener instrucciones de uso detalladas sobre c mo introducir el valor de la unidad y la desviaci n est ndar de cada control y c mo analizar los controles Se recomienda analizar los controles una vez los d as en que se utilice el ensayo C lculo de los resultados Para cada nuevo lote de Flash QUANTA h tTG IgA INOVA se genera en una curva maestra de cinco puntos Esta curva log stica de cuatro par metros se codifica mediante el c digo de barras de cada cartucho de reactivos Tras calibrar un cartucho de reactivos se utilizar un curva de trabajo espec fica del dispositivo para convertir las RLU a CU La reactividad del anticuerpo IgA ante la h tTG puede entonces clasificarse seg n la tabla siguiente Reactividad CU Negativo 20
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