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Change to insert re sensitivity added EFG (Sect 1)

1. Normal and clinical sera Range mg L 7 90 8680 Passing Bablok regression mg L 1 03x 1 36 linear regression R 0 9798 14 1 Cole PW Durie BGM Salmon SE 1978 Immunoquantitation of free light chain immunoglobulins Application in multiple myeloma J Immunol Meth 19 341 349 2 Pescali E Pezozoli A 1988 The clinical spectrum of pure Bence Jones proteinuria Cancer 61 2408 2415 3 Solling K Solling J Romer FK 1981 Free light chains of immunoglobulins in serum from patients with rheumatoid arthritis sarcoidosis chronic infections and pulmonary cancer Acta Med Scand 209 473 477 4 Drayson MT Tang LX Drew R Mead GP Carr Smith HD and Bradwell AR 2001 Serum free light chain measurements for identifying and monitoring patients with non secretory multiple myeloma Blood 97 2900 2902 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP Tang LX Showell PJ Drayson MT and Drew RJ 2001 Highly sensitive automated immunoassay for immunoglobulin free light chains in serum and urine Clin Chem 47 4 673 680 6 Tang LX Showell P Carr Smith HD Mead GP Drew R and Bradwell AR 2000 Evaluation of F ab 2 based latex enhanced nephelometric reagents for free immunoglobulin light chains on the Behring Nephelometer Il Clin Chem 46 6 Suppl 2000 705 pA181 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP Harvey TC and Drayson MT 2003 Serum test for assessment of patients with Bence Jones myeloma La
2. Zur in vitro Diagnostik Bestell Nr VK018 In England hergestellt von The Binding Site Group Ltd PO Box 11712 Birmingham B14 4ZB UK www bindingsite co uk Vertrieb in Deutschland und sterreich durch The Binding Site GmbH Robert Bosch Stra e 2A D 68723 Schwetzingen Deutschland Telefon 49 0 6202 92620 Fax 49 0 6202 92 62 222 e mail office bindingsite de MININEPHPLUS M und Freelite sind Warenzeichen von The Binding Site Group Ltd Birmingham UK 1 VERWENDUNGSZWECK Dieser Kit dient zur quantitativen Bestimmung der Freien Leichtkette Lambda im Serum unter Verwendung des MININEPHPLUS Die quantitative Bestimmung der Freien Leichtketten unterst tzt die Diagnose und die Verlaufskontrolle bei Multiplem Myelom Iymphozyt ren Tumoren Morbus Waldenstr m AL Amyloidose Light Chain Deposition Disease und Bindegewebserkrankungen wie z B Systemischer Lupus erythematodes SLE zusammen mit anderen Befunden aus Labor und Klinik Immunglobulin Molek le setzen sich aus zwei identischen schweren Ketten a e y oder u durch die die Immunglobulinklasse definiert wird und zwei identischen Leichtketten k oder A zusammen Jede Leichtkette ist kovalent an eine schwere Kette gebunden Die zwei schweren Ketten sind in der Gelenks Region ebenfalls miteinander kovalent verkn pft Im Serum von gesunden Individuen kommt die Mehrheit der Leichtketten in dieser Form also an die schwere Kette gebunden vor Al
3. 8 3 15 Dilution Echant 1 20 Accepter la dilution recommand e en pressant sur enter ou taper un nouveau facteur de dilution si une dilution alternative doit tre utilis e 8 3 16 Placer cuvette dans la chambre Placer la cuvette contenant le barreau aimant et les 40uL d chantillon dilu dans la chambre de lecture Descendre la cuvette jusqu au fond ainsi la cuvette sera d tect e automatiquement 8 3 17 Stabilisation en cours L chantillon dans la cuvette positionn e l int rieur de l automate est chauff pendant 90 secondes 8 3 18 Ajouter le r actif En utilisant la pipette du MININEPHPLUS aspirer le r actif latex lambda libre humaine 8 3 19 Bulle d air Aspirer une bulle d air s paratrice l aide de la pipette du MININEPHPLUS 8 3 20 Suppl mentaire Aspirer ensuite le tampon Lambda Libre 8 3 21 Ajouter le r actif D poser le contenu complet de la pipette dans la cuvette Le MININEPH d tecte l addition des r actifs la solution est agit e puis la mesure d marre 30 secondes de blanc sont n cessaires Le test durera ensuite 150 secondes Le r sultat sera ensuite affich Les r sultats seront automatiquement imprim s si l imprimante est connect e l automate 8 3 22 Si l automate affiche un r sultat sup rieur la gamme de mesure affichage de gt ou mg L XS retester l chantillon en le diluant au 1 200 900uL de diluant chantillon MININEPH 100uL d echantillon dilu au 1 20
4. Freelite Human Lambda Free Kit for use on the MININEPHPLUST For in vitro diagnostic use Product Code VK018 Product manufactured by The Binding Site Group Ltd PO Box 11712 Birmingham B14 4ZB UK www bindingsite co uk Telephone 44 0 121 436 1000 Fax 44 0 121 430 7061 e mail infoObindingsite co uk MININEPHPLUS M and Freelite are trademarks of The Binding Site Group Ltd Birmingham UK CE 1 INTENDED USE This kit is intended for the quantitation of lambda free light chains in serum on the MININEPHPLUS Measurement of free light chains aids in the diagnosis and monitoring of multiple myeloma lymphocytic neoplasms Waldenstr m s macroglobulinemia AL amyloidosis light chain deposition disease and connective tissue diseases such as systemic lupus erythematosus in conjunction with other laboratory and clinical findings 2 SUMMARY AND EXPLANATION Immunoglobulin molecules consist of two identical heavy chains a 5 e y or u which define the immunoglobulin class and two identical light chains k or A Each light chain is covalently linked to a heavy chain and the two heavy chains are linked covalently at the hinge region In healthy individuals the majority of light chain in serum exists in this form bound to heavy chain However low levels of free light chain FLC are found in serum of normal individuals due to the over production and secretion of FLC by the plasma cells Whilst the molecular wei
5. el exceso de buffer On board en el cubo de residuos Cuando acabe de cebar pulse 2 8 3 11 Bloqueo N Pipeta N Deje que el analizador pase a temperatura ambiente de funcionamiento La temperatura de funcionamiento correcta est codificada en la tarjeta de calibraci n 8 3 12 Prepare diluciones de los controles y muestras utilizando el diluyente de muestras incluido en el conjunto de accesorios est ndar MININEPH ZK500 R La diluci n de muestra recomendada para Lambda es 1 20 para preparar esta diluci n pipetee 40uL de muestra en un tubo de diluci n de muestra y a ada 760uL de diluyente 8 3 13 Prepare una cubeta MININEPH para cada muestra a ensayar Ponga una barra magn tica de agitado utilizando las pinzas suministradas con el MININEPHPLUS y luego pipetee cuidadosamente en el fondo de cada cubeta 40uL de muestra diluida 8 3 14 Identifique muestra Introduzca un c digo de identificaci n ej 1 para la primera muestra a ensayar y presione enter para continuar vea el manual de usuario para la elecci n de c digos de identificaci n 8 3 15 Diluci n de muestra 1 20 Acepte la diluci n recomendada pulsando enter o escriba un nuevo factor de diluci n si se ha de utilizar una diluci n alternativa 8 3 16 Ponga la cubeta en la c mara Coloque una cubeta con una barra de agitado y 40pL de muestra diluida en la c mara de cubeta Presione la cubeta hacia abajo cuidadosamente hasta que llegue al fondo de la c mara
6. tama o adecuado para obtener el aumento de la difusi n del rayo de luz durante la reacci n ant geno anticuerpo 4 4 1 Reactivo lambda libre humana Anticuerpo monoespec fico el cual se ha fijado a micropart culas de poliestireno Suministrado en forma liofilizada Antes de usar reconstituir con 0 75mL de agua destilada y poner en un mezclador de rodillo durante 30 minutos Conservante incluido 0 099 de azida s dica 0 05 de ProClin 0 1 de cido E amino n caproico EACA y 0 01 de benzamidina 4 2 Tarjeta magn tica lambda libre Est codificada con detalles de la curva de reacci n espec fica del respectivo lote de reactivo Es espec fica de lote y s lo se debe utilizar con el lote de reactivo indicado 4 3 Buffer suplementario lambda libre Para uso exclusivamente con el mismo lote de reactivo Lambda Libre tarjeta magn tica y controles exclusivamente El buffer suplementario contiene 0 099 de azida s dica como conservante 4 4 Controles Sueros humanos normales con cadenas ligeras libres policlonales Lambda Se suministran en forma l quida estable Conservante 0 099 de azida s dica 0 1 de EACA y 0 01 de benzamidina Los rangos de concentraciones aceptables de Lambda Libre Humana est n indicados en el Certificado de Control de Calidad espec fico de lote VINO18 QC que acompa a al kit ProClin es una marca de Rohm and Haas Corp Philadelphia PA 5 PRECAUCIONES Los sueros humanos s
7. 6 1 Serum 2 29 42 3 9 3 8 5 1 Serum 3 7 62 3 2 7 4 6 5 Intra batch data this data represents the coefficient of variation CV of twenty within run measurements at three analyte concentrations Day to day data the measurements were performed on ten separate occasions and the overall CV of the results at each concentration was calculated Inter instrument data assays were performed at three different concentrations in duplicate on each of five instruments The CV of the results at each concentration was calculated 13 2 Linearity The linearity of this assay was confirmed using a serially diluted polyclonal serum sample which gave a regression plot of y 0 91x 1 07 mg L 0 984 y measured free lambda concentration x theoretical concentration 13 3 Interference Minimal assay interference by 200mg L bilirubin 1 95 5 0g L haemoglobin 4 90 and 15000 formazine turbidity units chyle 7 41 was demonstrated using a 57 1mg L free lambda control serum 13 4 Limit of Blank and Limit of Detection The limit of quantitation and detection for this assay is defined as the lowest point of the calibration curve i e 4 91 mg L based upon a 1 20 sample dilution 13 5 Comparison 95 normal adult sera and 30 clinical adult sera from known suspected multiple myeloma and systemic lupus erythematosus patients were tested on the Freelite MININEPHPLUS and Freelite BNII assays Results were as follows
8. La dilution de l chantillon devra tre entr e en tant que 1 200 voir paragraphe 10 2 8 3 23 Une fois le test achev retirer la cuvette et presser sur enter pour proc der au test suivant 8 3 24 Lorsque tous les tests ont t r alis s pour un param tre presser sur chap esc et s lectionner un autre num ro d analyse pour la prochaine s rie de test sur un autre param tre 8 3 25 Vider le flacon d chets et jeter le c ne de la pipette du MININEPHPLUS 9 CONTROLE QUALITE Les contr les fournis doivent tre utilis s dans chaque s rie Les gammes acceptables de concentration lambda libres sont indiqu es sur le certificat de contrdle qualit joint VINO18 QC Les r sultats obtenus lors d un test ne doivent tre accept s que si les r sultats des contr les sont dans les gammes indiqu es Si la valeur d un contr le est en dehors des limites acceptables en utilisant une courbe en m moire il est n cessaire de le retester Si apr s un deuxi me test les valeurs du contr le sont toujours en dehors des limites l automate doivent tre v rifi s et le test r p t Si le probl me persiste contacter le fournisseur LOES INTERPRETATION DES RESULTATS 10 1 Les r sultats sont calcul s par l instrument et affich s en mg L Si l imprimante est connect e le r sultat est automatiquement imprim en pr cisant le num ro d identification de l chantillon et la dilution utilis e Aucun autre calcul est n cessair
9. des Reagenzes und der Magnetkarte bereinstimmt Sind die Lot Nummern identisch Ja Taste 1 dr cken und mit Schritt 8 310 fortfahren Sind die Lot Nummern unterschiedlich Nein Taste 2 dr cken und zu Schritt 8 3 7 zur ckkehren und die Daten der richtigen Lot Nummer eingeben Magnetkarte 8 3 10 Sp len 1 Ja 2 Nein Sp len Sie das Ger t durch um Luftblasen in den Schl uchen vom Systempuffer bis zur Pipette zu entfernen indem die Taste 1 gedr ckt wird bersch ssiger Systempuffer wird ber den Abfallbeh lter entsorgt Nach dem Sp len die Taste 2 dr cken 8 3 11 Opt Einheit N Pipette N Warten Sie bis das Ger t die Betriebstemperatur erreicht hat Die richtige Temperatur ist in der Magnetkarte gespeichert 8 3 12 Die Verd nnungen der Kontrollen und Proben mit dem MININEPH Probendiluens aus dem MININEPH Reagenzienzubeh r Kit ZK500 R herstellen Die Insert Code VINO18 Version 21 September 2010 Page 3 of 9 empfohlene Probenverd nnung f r Lambda ist 1 20 40uL Probe 760uL Probendiluens 8 3 13 F r jede zu messende Probe eine K vette vorbereiten Mit der Pinzette ist MININEPHPLUS Zubeh r in jede K vette ein Magnet R hrst bchen geben und mit einer Pipette 40uL der Probe auf den K vettenboden pipettieren 8 3 14 Probennummer eingeben Geben Sie die Proben Identifikation ein z B 1 f r die erste Probe und anschlie end die Enter Taste dr cken Details zu Wahlm glichkeiten bei der Proben ID Einga
10. free kappa free lambda ratio outside of the quoted range b sample is from a patient that has previously demonstrated antigen excess or c sample result does not agree with other clinical or laboratory findings 11 1 4 Each monoclonal FLC contains unique amino acid combinations It is therefore theoretically possible for certain monoclonal proteins to be undetectable by immunoassay leading to lower than expected measurements In practice this occurs extremely rarely with the Freelite assay Suspected samples should first be tested for antigen excess see section 11 1 3 above then further investigation by other laboratory methods immunofixation and serum protein electrophoresis 11 1 5 The nature of monoclonal proteins can cause a non linear response in immunoassays potentially leading to inconsistent results this can be prevented by always diluting the samples in the sequence 1 20 1 200 1 2000 1 20000 Omitting a dilution step should be avoided 11 1 6 Due to the highly variable nature of monoclonal proteins different reagent batches may react differently to the epitopes in some patient samples In these instances sample results may vary when tested using multiple batches Care should be taken when monitoring patients across multiple reagent lots We recommend wherever possible that previous and current samples are tested on new reagent lots and the results compared 11 2 Trouble shooting Problem Possible causes s Suggested ac
11. particules des lipides ou de l h moglobine ne doivent pas tre utilis s Certains types de s rums ne sont pas appropri s pour un test sur MININEPHPLUS se r f rer au paragraphe 11 1 1 8 METHODOLOGIE Note pour une interpretation compl te des r sultats le rapport kappa lambda doit tre d termin les chantillons doivent par cons quent aussi tre test s en utilisant le coffret Binding Site kappa libre Freelite sur MININEPHPLUS VK016 8 1 Mat riel fourni 8 1 1 2x 0 75mL Human Lambda Free Reagent R actif Latex Lambda Libre 8 1 2 1x3 5mL Lambda Free Supplementary Buffer Tampon Lambda Libre 8 1 3 1 x 0 5mL Human Lambda Free High Control Contr le Haut Lambda Libre 8 1 4 1x 0 5mL Human Lambda Free Control Contr le Lambda Libre 8 1 5 Carte magn tique contenant les informations pour la calibration sp cifique au lot 8 1 6 Certificat de Contr le Qualit 8 1 7 Fiche Technique 8 2 Mat riels requis mais non fourni 8 2 1 Instrument MININEPHPLUS AD500 C D E 8 2 2 Imprimante MININEPHPLUS AP1310DPK1T63 Optionnelle 8 2 3 Coffret Accessoires MININEPH ZK500 R 8 2 4 Du Tampon Embarqu 1 MININEPHPLUS On Board Buffer 1 SN107 8 2 5 Des pipettes pour r aliser des d p ts de 5 1000uL 8 2 6 Des c nes pour la pipette MININEPHPLUS appropri s Se r f rer au manuel d utilisation du MININEPHPLUS 8 2 7 Equipement pour la collecte et la pr paration des chantillons 8 2 8 Un agitateu
12. se comparen los resultados 11 1 5 11 1 6 11 2 Resoluci n de problemas Problema Causas s posible s Acci n es sugerida s Se muestra el mensaje Concentraci n de analito Ensayar la muestra a diluci n de error Blanco alto muy elevada superior repetir Muestras lip micas turbias Utilice un m todo anal tico o hemolizadas alternativo Controles fuera de rango Producto deteriorado Compruebe la fecha de caducidad Error del operario Repetir el ensayo con la diluci n de muestra correcta Muestra con valor inferior al esperado Exceso de ant geno Repetir en ensayo a una diluci n superior Comprobar si los dos resultados concuerdan 12 RESULTADOS ESPERADOS Los rangos de valores indicados a continuaci n se obtuvieron comenzando de un n mero imitado de muestras y deben considerarse nicamente como un ejemplo Se recomienda crear su propios rangos locales 12 1 Rangos de valores en suero de adultos Se analizaron los sueros de 282 sujetos sanos con edades comprendidas entre los 20 y los 90 a os con los kits Freelite de Binding Site para BN II 1 Los resultados se muestran en a tabla a continuaci n Suero adulto normal Conc media Conc mediana Rango percentil 95 Kappa libre 8 36 mg L 7 30 mg L 3 30 19 40 mg L Lambda libre 13 43 mg L 12 40 mg L 5 71 26 30 mg L Media Mediana Rango total Relaci n Kappa Lambda 0 63 0 60
13. 0 26 1 65 BN es una marca de Siemens Healthcare Diagnostics Inc 13 CARACTERISTICAS DEL RENDIMIENTO 13 1 Precisi n Lambda precision sumario valor medio intra lote d a a d a inter instrumento mg L CV n 20 CV n 10 CV n 5 Suero 1 80 54 5 1 6 7 6 1 Suero 2 29 42 3 9 3 8 5 1 Suero 3 7 62 3 2 7 4 6 5 Precisi n intra lote estos datos representan el coeficiente de variaci n CV de veinte mediciones intra lote a tres concentraciones de analito Precisi n d a a d a se llevaron a cabo los ensayos en diez ocasiones separadas y se calcul la CV total de los resultados a cada concentraci n Precisi n inter instrumento se llevaron a cabo los ensayos a tres concentraciones distintas por duplicado en cada uno de los cinco instrumentos Se calcul la CV media de los resultados a cada concentraci n 13 2 Linearidad La linearidad de este ensayo se confirm analizando una serie de diluciones de un suero policlonal que dio la recta de regresi n y 0 91x 1 07 mg L r 0 984 y concentraci n medida de lambda libre x concentraci n te rica 13 3 Sustancias interferentes En una medici n de control de 57 1mg L de lambda libre se encontraron interferencias insignificantes en 200mg L de bilirrubina 1 95 5 0g L de hemoglobina 4 90 y 15000 formazine turbidity units quilo 7 41 13 4 L mite del blanco y l mite de detecci n El l mit
14. 1 1 1 Les tests en n ph l m trie ne sont pas applicables pour des chantillons hautement lipidiques h molys s ou pour des chantillons contenant des taux lev s de complexes immuns circulants cause du degr impr visible de d viation de lumi re non sp cifique que de tels chantillons peuvent g n rer Des r sultats inattendus doivent tre confirm s en utilisant une autre m thode 11 1 2 Un diagnostic ne peut pas tre fait et un traitement ne peut pas tre donn uniquement sur la base des mesures de cha nes l g res libres L histoire clinique du patient ainsi que d autres analyses doivent tre prises en consid ration 11 1 3 Exc s d antig ne Un nombre r duit d chantillon de patient contenant de fortes concentrations en cha nes l g res libres kappa ou lambda peuvent donner des r sultats anormalement bas pour la chaine l g re impliqu e a cause d un exc s d antigene La composition en acides amin s de la chaine l g re produite par un clone individuel de cellules B influencera le niveau auquel un chantillon pourra pr senter un exc s d antigene avec les tests Freelite Dans une tr s grande majorit de cas la concentration de la chaine legere impliqu e a une valeur sup rieure aux valeurs normales 3 30 19 40mg L pour kappa libre et 5 71 26 30mg L pour lambda libre et ou la concentration de la cha ne l g re oppos e a une valeur inf rieure aux valeurs normales et ou le rapport kappa libre sur la
15. 1 20 gemessen werden wobei der Messbereich bei 4 91 98 3mg L liegt F r alle Proben die au erhalb dieses Bereichs liegen sollte folgendes Verd nnungsschema angewandt werden um den Verbrauch an Reaganz zu minimieren 7 NaCl Lambda ungefahrer Gesamtverd nnung Probe uL Diluens uL Messbereich mg L 1 20 40uL unverd nnte Probenverd nnung Probe 760uL 491 9830 1 200 100uL der 1 20 Probenverd nnung Verd nnung soot Bam 1 2000 100uL der 1 200 Probenverd nnung Verd nnung 900pL 491 9830 1 20000 100uL der 1 2000 Probenverdiinnung Verd nnung soon 49110598900 10 3 Antigen berschuss Der MININEPHPLUS berpr ft die Reaktionskinetik jeder einzelnen Probenmessung und vergleicht die Ergebnisse mit entsprechenden Grenzen die in einer Versuchsserie mittels einer umfangreichen Sammlung an Myelomproben ermittlet wurden Proben bei denen ein Antigen berschuss vermutet wird werden gekennzeichnet mg L XS und sollte in einer h heren Probenverd nnung erneut gemessen werden siehe Abschnitt 11 1 3 10 4 Verd nnte Proben sind weniger stabil als unverd nnte Proben Proben in der 1 20 Probenverd nnung sind bei 21 C 2 Stunden stabil H here Verd nnungen sollten unmittelbar nach Herstellung gemessen werden 11 GRENZEN DES TESTS 11 1 Spezifische Einschr nkungen 11 1 1 Stark lip mische und h molytische Seren sind f r die Nephelometrie ungeeignet Proben die hohe Konzentrationen an zirkulieren
16. 1 Erwachsene Normalbereich in Serum 282 normalen Individuen im Alter zwischen 20 to 90 wurden mit den Binding Site Freelite BN II Kits gemessen Die Ergebnisse sind in folgender Tabelle aufgef hrt ee Mittlere Konz Median Konz Bereich 95 Perzentile Freies Kappa 8 36 mg L 7 30 mg L 3 30 19 40 mg L Freies Lambda 13 43 mg L 12 40 mg L 5 71 26 30 mg L Mittelwert Median Gesamtbereich Kappa Lambda Ratio 0 63 0 60 0 26 1 65 BN ist ein Warenzeichen von Siemens Healthcare Diagnostics Inc 13 LEISTUNGSDATEN 13 1 Pr zision Lambda Pr zision Zusammenfassung Konz Intra assay Tag zu Tag Ger tevariation mg L VK n 20 VK n 10 VK n 5 Serum 1 80 54 5 1 6 7 6 1 Serum 2 29 42 3 9 3 8 5 1 Serum 3 7 62 3 2 7 4 6 5 Intra Assay Pr zision Diese Daten stellen den Variationskoeffizienten VK von zwanzig Intra Assay Messungen von drei verschiedenen Analytkonzentrationen dar Tag zu Tag Pr zision An 10 verschiedenen Tagen wurden Messungen durchgef hrt Der Gesamt Variationskoeffizient VK wurde pro Analytkonzentration berechnet Ger tevariation Drei verschiedene Seren mit unterschiedlichen Freie Kappa Konzentrationen wurden in Doppelbestimmung auf f nf verschiedenen Ger ten gemessen und der Durchschnittswert ermittelt 13 2 Linearit t Die Linearit t dieses Tests wurde durch Messung einer seriellen Verd nnungsreihe
17. Gerinnsel trennen um eine H molyse zu vermeiden Die Seren k nnen bei 2 8 C bis zu 21 Tage vor dem Test gelagert warden F r eine l ngere Lagerung wird empfohlen die Proben unverd nnt bei mindestens 20 C einzufrieren Wiederholtes Einfrieren und Auftauen vermeiden Keine mikrobiell oder mit Partikeln verunreinigte Proben oder h molytisches oder lip misches Serum verwenden Einige Serentypen sind f r die Verwendung auf dem MININEPHPLUS nicht geeignet siehe Abschnitt 11 1 1 8 TESTDURCHF HRUNG Hinweis Um eine vollst ndige Interpretation der Ergebnisse durchf hren zu k nnen sollte das Verh ltnis Freies Kappa Freies Lambda berechnet werden Deshalb sollten die Proben ebenfalls mit dem MININEPHPLUS Freelite Kappa Freie Leichtketten Kit Bestell Nr VK016 von Binding Site gemessen werden 8 1 Gelieferte Materialien 8 1 1 2x 0 75mL Human Lambda Free Reagent Latexreagenz 8 1 2 1 x 3 5mL Lambda Free Supplementary Buffer Zusatzreaganz 8 1 3 1 x 0 5mL Human Lambda Free High Control Freies Lambda Kontrolle High Level 8 1 4 1 x 0 5mL Human Lambda Free Control Freies Lambda Kontrolle Low Level 8 1 5 Magnetkarte mit chargenspezifischer Kalibrationskurve 8 1 6 QC Zertifikat 8 1 7 Arbeitsanleitung 8 2 Ben tigte nicht im Kit enthaltene Materialien 8 2 1 MININEPHPLUS Instrument AD500 C D E 8 2 2 MININEPHPLUS Drucker AP1310DPK1T63 Optional 8 2 3 MININEPH Reagenzienzubeh r Kit ZK500 R 8 2 4 MIN
18. INEPHPLUS Systempuffer 1 SN107 8 2 5 Pipetten 5 1000pL 8 2 6 Pipettenspitzen zur Verwendung auf dem MININEPHPLUS siehe MININEPHPLUS Bedienungsanleitung 8 2 7 Laborausstattung zum Sammeln und Vorbereiten der Proben 8 2 8 Rollmischer 8 2 9 Destilliertes Wasser 8 3 Testdurchf hrung 8 3 1 bersicht der zu pipettierenden Reagenz Volumina Reagenzien Volumen Probe 1 20 Verd nnung 40uL Freies Lambda Zusatzreagenz 100uL Freies Lambda Reagenz 40uL 8 3 2 Stellen Sie sicher dass gen gend Systempuffer 1 vorhanden ist um die Teste durchf hren zu k nnen Siehe MININEPHPLUS Bedienungsanleitung bez glich des Auff llens von Puffer 8 3 3 berpr fen Sie dass der Abfallbeh lter leer ist und sich unterhalb der Pipette befindet 8 3 4 Setzen Sie eine Pipettenspitze auf die Pipette und stellen Sie diese in den Halter zur ck 8 3 5 Das MININEPHPLUS anschalten 8 3 6 Eingabe Test Nr Nummer des Tests LAM 18 eingeben und Enter Taste dr cken 8 3 7 Magnetkarte durchziehen Diese Meldung erscheint nur wenn der Test zum erstenmal durchgef hrt wird oder die Chargen Nummer des Antiserums ge ndert werden soll Ziehen Sie die Magnetkarte von links nach rechts durch das Leseger t Die Karte so halten dass der Magnetstreifen nach oben zeigt 8 3 8 Reagenziencharge berpr fen ENTER Taste dr cken 8 3 9 LAM lot xxxx OK 1 Ja 2 Nein berpr fen Sie ob die angezeigte Lot Nummer mit denen auf dem Etikett
19. ION OF RESULTS 10 1 Results are calculated by the analyser and displayed in mg L If a printer is attached the result is automatically printed out together with the patient identification code and the sample dilution Further calculations are not necessary 10 2 All samples must be assayed first at the standard 1 20 assay dilution giving an approximate measuring range of 4 91 98 3mg L For samples measuring over the upper limit of the curve with an analyser dilution of 1 20 the following dilution series should be used to minimise reagent usage en Saline Lambda Approx Overall Dilution Sample uL diluent uL measuring range mg L 1 20 sample 40uL of neat 760uL 4 91 98 30 dilution sample 1 200 sample 100uL of 1 20 x dilution dilution Sool 4180 1 2000 sample 100uL of 1 200 p dilution dilution Sout re 1 20000 sample 100uL of 1 2000 Y dilution dilution Ur 4910 98300 10 3 Antigen excess The MININEPHPLUS monitors the reaction kinetics of each sample and compares the results with reaction limits set through testing of an extensive myeloma library Samples detected as being in excess are flagged mg L XS and need to be remeasured at a higher sample dilution see Section 11 1 3 10 4 When diluted the sample stability is not guaranteed At 1 20 sample dilution samples are stable for 2 hours at 21 C Higher dilutions should be assayed immediately after preparation 11 LIMITATIONS OF PROCEDURE 11 1 Sp
20. L amyloidosis in relation to changes in concentration of circulating immunoglobulin free light chains following chemotherapy Brit J Haem 122 78 84 10 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP and Drayson MT 2002 Serum free light chain immunoassays and their clinical application Clinical and Applied Immunology Reviews 3 17 33 11 Katzmann JA Clark RJ Abraham RS Bryant S Lymp JF Bradwell AR and Kyle RA 2002 Serum reference intervals and diagnostic ranges for free kappa and free lambda immunoglobulin light chains relative sensitivity for detection of monoclonal light chains Clin Chem 48 1437 1444 12 Bradwell AR 2006 Serum Free Light Chain Analysis 4 Edition 221 228 Publ The Binding Site Ltd Birmingham UK 13 Mead GP Carr Smith HD Drayson MT Morgan GJ Child JA and Bradwell AR 2004 Serum free light chains for monitoring multiple myeloma Brit J Heamatol 126 348 354 Kit Freelite Lambda Libre Humana para uso en el MININEPHPLus Para uso diagn stico in vitro C digo de producto VK018 Producto fabricado por The Binding Site Group Ltd PO Box 11712 Birmingham B14 4ZB UK www bindingsite co uk The Binding Site Spain S L U C Balmes 243 4 32 08006 Barcelona Tel fono 902027750 Fax 902027752 e mail info bindingsite es web www bindingsite es MININEPHPLus y Freelite son marcas de The Binding Site Group Ltd Birmingham UK 1 Este kit tiene como
21. La cubeta ser detectada autom ticamente 8 3 17 Estabilizando temperatura Hay un tiempo de espera de 90 segundos para que se acondicione la temperatura de la muestra de la cubeta en el analizador 8 3 18 A ada reactivo Aspire el reactivo Lambda humana con la pipeta manual MININEPHPLUS 8 3 19 Burbuja de aire Aspire un hueco de aire con la pipeta manual MININEPHPLUS 8 3 20 Aspirar reactivo suplementario Aspire el Buffer Suplementario Lambda Libre con la pipeta manual MININEPHPLUS 8 3 21 A ada reactivo Dispense los reactivos aspirados en la cubeta Tras la rotaci n de la barra de agitado comenzar el ensayo Despu s de 30 segundos de tiempo para el blanco el ensayo necesitar 150 segundos para su finalizaci n El resultado se mostrar e imprimir si la impresora est conectada autom ticamente 8 3 22 Si el instrumento indica que el resultado es superior al del rango de medida mostrado como gt or mg L XS vuelva a ensayar la muestra a una diluci n superior de 1 200 900pL de diluyente de muestra MININEPH 100pL de muestra diluida a 1 20 La diluci n de muestra se ha de introducir como 1 200 vea la secci n 10 2 8 3 23 Una vez finalizado el ensayo retire la cubeta y pulse enter para llevar a cabo el ensayo siguiente 8 3 24 Cuando se han terminado todos los ensayos para el par metro escogido pulse escape esc y seleccione el n mero de par metro para el siguiente grupo de ensayos 8 3 25 Vac e el cubo de resi
22. Rohm and Haas Corp Philadelphia PA 5 PRECAUTIONS Tous les s rums des donneurs humains ont subi un d pistage n gatif pour les anticorps anti VIH 1 et 2 les anticorps anti VHC et l Ag Hbs Les tests utilis s ont t clarifi s pour une utilisation en diagnostic in vitro en Europe Directive 98 79 EC Annexe Il et aux Etats Unis par la FDA toutefois ces tests ne peuvent garantir l absence totale d agents infectieux Tous les chantillons doivent donc tre manipul s et limin s comme des produits potentiellement infectieux Seul un personnel qualifi portant les quipements de protection personnels ad quats et form la manipulation d chantillons potentiellement infectieux est autoris utiliser ce coffret Insert Code VINO18 Version 21 September 2010 Page 5 of 9 Ce produit contient de l azide de sodium et ProClin 300 et doit tre manipul avec pr caution ne pas ing rer ou mettre en contact avec la peau ou les muqueuses sp cialement en cas de blessure En cas de contact rincer grande eau et consulter un m decin L azide de sodium peut r agir avec les tuyauteries en plomb ou en cuivre pour former des azides de m taux explosifs Il est n cessaire d ajouter de grands volumes d eau pour viter la formation d azides Ce r actif doit tre utilis par un personnel form Il est recommand de suivre scrupuleusement le protocole La validit des r sultats obtenus en utilisant des param tres autres q
23. a Cancer 61 2408 2415 3 Solling K Solling J Romer FK 1981 Free light chains of immunoglobulins in serum from patients with rheumatoid arthritis sarcoidosis chronic infections and pulmonary cancer Acta Med Scand 209 473 477 4 Drayson MT Tang LX Drew R Mead GP Carr Smith HD and Bradwell AR 2001 Serum free light chain measurements for identifying and monitoring patients with non secretory multiple myeloma Blood 97 2900 2902 5 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP Tang LX Showell PJ Drayson MT and Drew RJ 2001 Highly sensitive automated immunoassay for immunoglobulin free light chains in serum and urine Clin Chem 47 4 673 680 6 Tang LX Showell P Carr Smith HD Mead GP Drew R and Bradwell AR 2000 Evaluation of F ab based latex enhanced nephelometric reagents for free immunoglobulin light chains on the Behring Nephelometer Il Clin Chem 46 6 Suppl 2000 705 pA181 Te Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP Harvey TC and Drayson MT 2003 Serum test for assessment of patients with Bence Jones myeloma Lancet 361 489 491 8 Abraham RS Katzman JA Clark RJ Bradwell AR Kyle RA and Gertz MA 2003 Quantitative Analysis of Serum Free Light Chains A new marker for the diagnostic evaluation of primary systemic amyloidosis Am J Clin Pathol 119 2 274 278 9 Lachmann HJ Gallimore JR Gillmore JD Carr Smith HD Bradwell AR Pepys MB and Hawkins PN 2003 Outcome in systemic A
24. alen Proteine k nnen verschiedene Reagenzienchargen bei einigen Patientenproben m glicherweise mit den Epitopen einiger Freier Leichtketten unterschiedlich reagieren In diesen F llen k nnen die Messergebnisse variieren wenn die Probe mit verschiedenen Reagenzienchargen gemessen wird Falls bei der Verlaufskontrolle verschiedene Reagenzienchargen verwendet werden wird empfohlen wenn m glich die vorhergehende Probe zeitgleich mit der aktuellen Probe zu messen und die entsprechenden Messergebnisse miteinander zu vergleichen 11 2 Trouble shooting Problem M gliche Ursache n Empfohlene Ma nahmen Fehlermeldung Blank zu Sehr hohe Analyt Probe mit einer h heren hoch Wiederholungs konzentration Verd nnung erneut messen messung wird angezeigt Lip mische tr be oder Alternative Messmethode h molytische Probe verwenden Kontrollen au erhalb des Produkt verfallen Verfallsdatum berpr fen Vertrauensbereichs Anwenderfehler Messung mit korrekter Verd nnung wiederholen Probe zeigt unerwartet niedriges Ergebnis Antigen berschuss Test mit h herer Verd nnung wiederholen und berpr fen ob die beiden Ergebnisse bereinstimmen PAN ERWARTETE WERTE Die unten aufgef hrten Normalbereiche basieren auf der Untersuchung eines normalen Spenderkollektivs und dienen nur zur Orientierung Es wird dringend empfohlen wenn m glich lokale Normbereiche zu bestimmen 12
25. ase oi ee o Diluci n de 40uL de muestra 7 muestra 1 20 neta 760pL 4 91 98 90 Diluci n de 100pL de la muestra 1 200 diluci n 1 20 900pL 49 1 983 0 Dilucion de 100pL de la muestra 1 2000 diluci n 1 200 SOUL 49173830 Diluci n de 100pL de la muestra 1 20000 diluci n 1 2000 900pL 4910 98300 10 3 Exceso de ant geno El MININEPHPLUS monitoriza la reacci n cin tica inicial de cada muestra y compara los resultados con los l mites de reacci n establecidos mediante el an lisis de una extensa variedad de mielomas Las muestras en las que se detecta exceso se marcan mg L XS y se deben volver a medir con una diluci n de muestra superior ver la Secci n 11 1 3 10 4 Al estar diluidas no se garantiza la estabilidad de las muestras A una diluci n de 1 20 las muestras con estables durante 2 horas a 21 C Las muestras a las que se hayan efectuado diluciones superiores deben utilizarse inmediatamente despu s de la preparaci n 11 LIMITACIONES DEL METODO 11 1 Limitaciones espec ficas del ensayo 11 151 Los ensayos nefelom tricos no son adecuados para la determinaci n de muestras altamente lip micas o hemol ticas o muestras que contengan niveles altos de complejos inmunes circulantes CIC dado que estas muestras pueden producir una cantidad impredecible de luz dispersa no especificable Los resultados no previstos deber n verificarse con un m todo alternativo 11 1 2 No debe realizarse el diagn stico ni in
26. ay will begin After a 30 second blanking time the assay will take 150 seconds to complete The result will be displayed Results will be automatically printed if a printer is connected Insert Code VINO18 Version 21 September 2010 Page 1 of 9 8 3 22 If the analyser indicates the result is higher than the intended measuring range displayed as gt or mg L XS re assay the sample at a higher dilution of 1 200 900uL MININEPH Sample Diluent 100uL sample diluted 1 20 The sample dilution should be entered as 1 200 see section 10 2 8 3 23 On completion of the assay remove the cuvette and press enter to perform the next assay 8 3 24 When all assays for the chosen chemistry have been completed press escape esc and select the chemistry number for the next set of assays 8 3 25 Empty waste pot and discard the pipette tip from the hand held pipette 9 QUALITY CONTROL The controls provided should be included in all assay runs The acceptable lambda free concentration ranges are stated on the accompanying Quality Control certificate VINO18 QC Results obtained during the run should only be accepted if the control results obtained are within the ranges stated Should a control measurement be out of range when assayed with a stored curve the control values should be re measured If repeat results are still out of range the analyser should be checked before repeating the assay If problems persist refer to supplier 10 INTERPRETAT
27. be finden Sie in der Bedienungsanleitung 8 3 15 Probenverd nnung 1 20 Durch Dr cken der ENTER Taste akzeptieren Sie diese Verd nnung Wird eine andere Verd nnung gew nscht diese an dieser Stelle eingeben 8 3 16 K vette in Messkammer setzen Die K vette mit Magnet R hrst bchen und 100uL verd nnter Probe in die Messkammer setzen Die K vette vorsichtig herunter dr cken bis der Boden erreicht ist Das Ger t erkennt die K vette automatisch 8 3 17 Stabilisierung der Temperatur Im Ger t wird die Probe in der K vette aufgew rmt Die Wartezeit betr gt 90 Sekunden 8 3 18 Reagenz zugeben Die elektronische Pipette mit Freiem Lambda Reagenz f llen 8 3 19 Luftblase Mit der elektronischen Pipette eine Luftblase ziehen 8 3 20 Zusatzreagenz Die elektronische Pipette mit Zusatzreagenz f llen 8 3 21 Reagenz zugeben Pipettieren Sie alle Reagenzien in die K vette Die Reagenzzugabe wird erkannt der Testansatz automatisch gemischt und die Messung gestartet Nach einer Anlaufzeit von 30 Sekunden braucht der Test weitere 150 Sekunden bis er beendet ist Ist die Messung beendet erscheint das Ergebnis in der Anzeige und wird falls ein Drucker angeschlossen ist automatisch ausgedruckt 8 3 22 Liegt das Ergebnis oberhalb des Messbereichs angezeigt als gt oder mg L XS sollte die Probe mit der h heren 1 200 Verd nnung 900uL MININEPH Probendiluens 100uL Probe in der 1 20 Verd nnung erneut gemessen werden Bei der Abf
28. cules de taille convenable il y a augmentation du signal de la lumi re diffus e relative la r action antig ne anticorps 4 REACTIFS 4 1 R actif latex lambda libre humaine Anticorps mono sp cifique li des microparticules de polystyr ne Fourni sous forme lyophilise Le reconstituer avec 0 75mL d eau distill e et le mettre en agitation sur un agitateur automatique pendant 30 minutes avant utilisation Il contient les conservateurs suivants 0 099 d azide de sodium 0 05 de ProClin 0 1 d Acide E amino Caproique EACA et 0 01 de benzamidine 4 2 Carte magn tique lambda libre Elle contient les d tails de la courbe de calibration sp cifique de chaque lot de produits Cette carte est sp cifique d un lot de produits et doit tre utilis e uniquement avec ce lot 43 Tampon lambda libre Il doit tre utilise uniquement avec le r actif latex lambda la carte magn tique et les contr les du m me lot Il contient 0 099 d azide de sodium en tant que conservateur 44 Contr l s lambda libre humaine S rums m lang s contenant des cha nes l g res libres ChLL polyclonales lambda Fournis sous forme liquide stable Conservateurs 0 099 d azide de sodium 0 1 EACA et 0 01 benzamidine Les gammes de valeurs de concentrations acceptables pour les contr les lambda libre humaine sont inscrites sur le certificat de contr le qualit VINO18 QC joint au coffret ProClin est une marque d pos e de
29. de Immunkomplexe CIC s enhalten k nnen mit dieser Methode nicht bestimmt werden da sie eine nicht vorhersagbare unspezifische Lichtstreuung erzeugen k nnen Bei unerwarteten Ergebnissen sollten diese durch eine alternative Messmethose best tigt werden 11 1 2 Die Diagnose und die Einleitung einer Therapie d rfen nicht ausschlie lich auf der Bestimmung der Freien Leichtketten basieren Das klinische Bild und andere serologische Befunde m ssen ebenfalls ber cksichtigt werden 11 1 3 Antigen berschuss Eine geringe Anzahl an Patientenproben die hohe Konzentrationen an Freiem Kappa oder Freiem Lambda enthalten kann aufgrund von Antigen berschuss ein falsch niedriges Ergebnis der involvierten Leichtkette erzeugen Die Konzentration bei der eine Probe eine Antigen berschuss Reaktion in dem Freelite Test zeigen kann ist von der Aminos urenzusammensetzung der Leichtkette die von einem individuellen B Zell Klon produziert wird abh ngig In fast allen F llen wird die Konzentration der erh hten Freien Leichtkette immer noch oberhalb des angegebenen Normalbereichs liegen 3 30 19 40mg L f r Freies Kappa und 5 71 26 30mg L f r Freies Lambda und oder die andere Freie Leichtketten Konzentration wird unterhalb des angegebenen Bereichs liegen und oder das Verh ltnis Freies Kappa zu Freiem Lambda k A Ratio wird au erhalb des geltenden Normalbereichs 0 26 1 65 liegen Daher sollte jede Probe sowohl in der 1 20 Standardverd nnung als a
30. distintos para k y A lo que podr a ser una posible explicaci n para la relaci n k A de 0 625 en el suero comparada con la relaci n k ligada A ligada de 2 0 Una concentraci n elevada de las cadenas ligeras libres monoclonales en suero est asociada con la proliferaci n maligna de c lulas plasm ticas por ejemplo mieloma m ltiple AL amyloidosis y la deposici n de cadenas ligeras Con enfermedades autoinmunes como el SLE pueden aparecer unas concentraciones elevadas de cadenas ligeras libres policlonales en suero 3 Para la determinaci n de la concentraci n de un ant geno soluble mediante nefelometr a se a ade la muestra a una cubeta de reacci n que contiene una soluci n con el anticuerpo correspondiente Durante la reacci n antigeno anticuerpo un rayo de luz pasa a trav s de la cubeta y su difusi n aumenta mientras que se forman complejos inmunol gicos insolubles La difusi n de la luz se detecta midiendo la intensidad de la luz en un ngulo a parte de la luz incidente El anticuerpo en la cubeta est en exceso por tanto la cantidad del complejo inmunol gico formado es proporcional a la concentraci n del ant geno Las concentraciones se calculan autom ticamente en referencia a la curva de calibraci n almacenada en la tarjeta de calibraci n La sensibilidad de los tests nefelom tricos o turbidim tricos puede aumentar con el uso de part culas de latex Esto comporta la uni n del anticuerpo a una part cula de
31. duos y retire la punta de la pipeta manual 9 CONTROL DE CALIDAD Se deben incluir los controles suministrados en todos las series de ensayos Los rangos aceptables de concentraci n lambda libre est n indicados en el certificado de control de Calidad que acompa a al producto VINO18 QC Los resultados obtenidos en la serie solo pueden aceptarse si los resultados del control se encuentran dentro de los rangos indicados Si una medida de control queda fuera del rango cuando se ensaya con una curva de calibraci n guardada el control debe analizarse de nuevo Si los valores de control medidos vuelven a quedar fuera de rango se deben comprobar el instrumento antes de repetir en ensayo Si los problemas persisten contacte con su distribuidor 10 INTERPRETACI N DE LOS RESULTADOS 10 1 El instrumento calcula los resultados y los indica en mg L Si se ha conectado una impresora el resultado se imprime autom ticamente junto al c digo de identificaci n del paciente y la diluci n de muestra No son necesarios c lculos adicionales 10 2 Todas las muestras se deben analizar primero a la diluci n est ndard de 1 20 dando un rango de medici n aproximado de 4 91 98 3mg L Para las muestras que est n por encima del l mite superior de la curva en una diluci n del instrumento de 1 20 deber n ser realizadas las siguientes series de diluciones manuales para reducir al m nimo el uso de reactivos Diluci n total Muestra HL Bi
32. e 10 2 Tous les chantillons doivent tre mesur s en premier en utilisant la dilution chantillon standard 1 20 donnant une gamme approximative de 4 91 98 3 mg L Pour les chantillons dilu au 1 20 et mesur s sup rieurs la limite haute de la courbe nous sugg rons de faire les dilutions comme indiqu dans le tableau ci dessous afin de minimiser les volumes des r actifs utilis s Dilution totale A Diluant Gamme de mesure lambda chantillon Echantillon HL uL approximative mg L 1 20 ee 760pL 4 91 98 30 chantillon pur 1 200 ear oe Boone 49 1 983 0 100uL de la dilution 7 1 2000 1 200 900pL 491 9830 100uL de la dilution 1 20000 1 2000 900pL 4910 98300 10 3 Exces d antigene Le MININEPHPLUS suit la reaction cin tique de chaque chantillon et compare les r sultats avec les limites de la r action d termin e par le test d une collection importante d chantillons de my lome Les chantillons d tect s en exc s d antigene sont marqu s d une alerte mg L XS dans les r sultats et doivent tre remesur s a une dilution d chantillon sup rieure voir paragraphe 11 1 3 10 4 La stabilit des chantillons n est pas garantie lorsqu ils sont dilu s A la dilution 1 20 les chantillons sont stables 2 heures a 21 C A des dilutions sup rieures l chantillon devra tre imm diatement test s apr s avoir t pr par s 11 LIMITES 11 1 Limites relatives au test 1
33. e de cuantificaci n de este ensayo se define como el punto inferior de la curva de calibraci n ej 4 91mg L basado en una diluci n de muestra de 1 20 13 5 Estudio comparativo Se llev a cabo un estudio de correlaci n con 95 sueros normales procedentes de adultos y 30 sueros cl nicos procedentes de pacientes con mieloma m ltiple diagnosticado o sospechado y pacientes con lupus eritematoso sist mico usando los kits Freelite para MININEPHPLUS y Freelite para BNII Los resultados fueron los siguientes Suero normal y suero de casos cl nicos Rango mg L 7 90 8680 Regresi n Passing Bablok mg L 1 03x 1 36 Regresi n lineal R 0 9798 N 14 10 11 12 13 BIBLIOGRAF A Cole PW Durie BGM Salmon SE 1978 Immunoquantitation of free light chain immunoglobulins Application in multiple myeloma J Immunol Meth 19 341 349 Pescali E Pezozoli A 1988 The clinical spectrum of pure Bence Jones proteinuria Cancer 61 2408 2415 Solling K Solling J Romer FK 1981 Free light chains of immunoglobulins in serum from patients with rheumatoid arthritis sarcoidosis chronic infections and pulmonary cancer Acta Med Scand 209 473 477 Drayson MT Tang LX Drew R Mead GP Carr Smith HD and Bradwell AR 2001 Serum free light chain measurements for identifying and monitoring patients with non secretory multiple myeloma Blood 97 2900 2902 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP Ta
34. ecific test limitations 11 13 Nephelometric assays are not suitable for measurement of highly lipaemic or haemolysed samples or samples containing high levels of circulating immune complexes CIC due to the unpredictable degree of non specific scatter these sample types may generate Unexpected results should be confirmed using an alternative assay method 11 1 2 Diagnosis cannot be made and treatment must not be given on the basis of free light chain measurements alone Clinical history and other laboratory findings must be taken into account 11 1 3 Antigen excess A small proportion of patient samples containing high concentrations of free kappa or free lambda can give a falsely low result for the involved light chain due to antigen excess The amino acid composition of the light chain produced by an individual B cell clone will influence the level at which a sample may show antigen excess with the Freelite assay In almost every case the concentration of the involved light chain will still be above the quoted normal range 3 30 19 40mg L for free kappa and 5 71 26 30mg L for free lambda and or the opposite light chain concentration will be below the quoted range and or the free kappa free lambda ratio will be outside the quoted range 0 26 1 65 Samples should be tested at both 1 20 and 1 200 dilutions in order to detect antigen excess if any of the following conditions are met a sample shows either a free light chain concentration or a
35. einer Serumprobe best tigt Regressionsanalyse y 0 91x 1 07 mg L Pr 0 984 y gemessene Freie Lambda Konzentration x theoretische Konzentration 13 3 Interferierende Substanzen Durch Zugabe von 200mg L Bilirubin 1 95 5 0g L H moglobin 4 90 und und 15000 formazine turbidity units Chylus 7 41 zu einer Freien Lambda Kontrolle 57 1mg L wurde eine geringf gige Interferenz verursacht 13 4 Leerwert und Nachweisgrenze Die untere Nachweisgrenze diese Tests ist durch den niedrigsten Punkt der Kalibrationskurve definiert z B 4 91mg L in der 1 20 Standardverd nnung 13 5 Vergleichsstudien Es wurden mit 95 normalen und 30 klinschen Proben von Patienten mit bekannter Diagnose oder Verdacht auf Multiples Myelom und Systemischer Lupus erythematodes eine Vergleichsmessung mit Freelite auf dem MININEPHPLUS und Freelite auf dem BNII Folgende Ergebnisse wurden ermittelt Normale und klinische Seren Bereich mg L 7 90 8680 Passing Bablok Regression mg L 1 03x 1 36 Lineare Regression R 0 9798 Insert Code VINO18 Version 21 September 2010 Page 4 of 9 14 10 11 12 13 REFERENZEN Cole PW Durie BGM Salmon SE 1978 Immunoquantitation of free light chain immunoglobulins Application in multiple myeloma J Immunol Meth 19 341 349 Pescali E Pezozoli A 1988 The clinical spectrum of pure Bence Jones proteinuria Cancer 61 2408 2415 Solling K Solling J R
36. erent batch numbers of kits are NOT interchangeable If large numbers of tests are performed care should be taken to ensure that all the reagents are from the same kit lot 6 STORAGE AND STABILITY The unopened kits should be stored at 2 8 C and can be used until the expiry date given on the kit box label DO NOT FREEZE Once reconstituted the reagent is stable for 5 days when stored at 2 8 C It is recommended that reagent bottles are used consecutively The supplementary buffer should be allowed to equilibrate to room temperature prior to use Opened supplementary buffer and controls are stable for 1 month when stored at 2 8 C 7 SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION Use fresh or deep frozen serum samples Serum should be obtained by venepuncture allowed to clot and the serum separated as soon as possible to prevent haemolysis Samples may be stored at 2 8 C for up to 21 days but for prolonged storage they should be kept frozen at 20 C or below Repeated freeze thaw cycles should be avoided Microbially contaminated serum samples samples containing particulate matter and lipaemic or haemolysed serum samples should not be used Some types of sera are not suitable for MININEPHPLUS assays see section 11 1 1 8 METHODOLOGY Note To enable full interpretation of results free Kappa Lambda ratios should be determined samples must therefore be assayed using Binding Site s MININEPHPLUS Freelite Kappa Free Kit VK016 8 1 Materials pr
37. es 12 1 Gammes adultes s riques 282 s rums d adultes sains g s de 20 90 ans ont t test s en utilisant les tests Freelite Binding Site pour BN II Les r sultats obtenus sont dans le tableau ci dessous S rum Adultes normaux Conc moyenne Conc m diane Gamme 95 percentile Kappa Libre 8 36 mg L 7 30 mg L 3 30 19 40 mg L Lambda Libre 13 43 mg L 12 40 mg L 5 71 26 30 mg L Moyenne M diane Gamme totale Rapport Kappa Lambda 0 63 0 60 0 26 1 65 BN est une marque d pos e de Siemens Healthcare Diagnostics Inc IEA PERFORMANCES 13 1 Pr cision Lambda pr cision sommaire Conc Intra lots CV Inter jours CV Inter instruments CV mg L en n 20 en n 10 en n 5 S rum 1 80 54 5 1 6 7 6 1 S rum 2 29 42 3 9 3 8 5 1 Serum 3 7 62 3 2 7 4 6 5 Precision intra lots Le tableau ci dessous resume les valeurs de coefficient de variation CV obtenues lors des intra tests 20 fois le test de 3 concentrations d chantillon differentes Precision inter jours Les mesures on t r alis es sur 10 jours Le CV total pour les r sultats des tests des chantillons chaque concentration a t calcul Pr cision inter instruments Les tests ont t r alis s en duplicat pour trois concentrations differentes sur 5 instruments Le Cv des r sultats pour chaque concentration a t calcul 13 2 Lin ari
38. es libres lambda dans le s rum sur le MININEPHPLUS La mesure des taux de chaines l g res libres apporte une aide au diagnostic et au suivi des my lomes multiples des n oplasmes lymphocytaires des macroglobulin mies de Waldenstr m des amyloses AL des maladies de d p t des chaines l g res et des maladies des tissus connectifs comme le lupus ryth mateux diss min en corr lation avec d autres r sultats de laboratoire et clinique 2 PRESENTATION GENERALE Les mol cules d immunoglobulines sont constitu es de deux chaines lourdes identiques a 5 e y OU pt qui d finissent la classe de l immunoglobuline et de deux cha nes l g res identiques k ou A Chaque chaine l g re est attach e par des liaisons covalentes aux cha nes lourdes qui sont li es de facon covalente par la r gion charni re Chez les patients sains la majorit des chaines legeres dans le s rum sont li es aux cha nes lourdes Cependant les cha nes l g res libres ChLL sont trouv es de faibles taux dans le s rum des sujets normaux Ceci est d une surproduction et s cr tion des ChLL par des plasmocytes Bien que le poids mol culaire des deux cha nes l g res soit d environ 22 5kD la cha ne libre K KChLL existe de fa on pr dominante sous forme monom rique et la cha ne libre AChLL sous forme dim rique li e de fa on covalente avec un poids mol culaire d environ 45kD Ceci induit un taux de filtration glom rulaire diff re
39. free light chains following chemotherapy Brit J Haem 122 78 84 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP and Drayson MT 2002 Serum free ligh chain immunoassays and their clinical application Clinical and Applied Immunology Reviews 3 17 33 Katzmann JA Clark RJ Abraham RS Bryant S Lymp JF Bradwell AR and Kyle RA 2002 Serum reference intervals and diagnostic ranges for free kappa and free lambda immunoglobulin light chains relative sensitivity for detection of monoclonal light chains Clin Chem 48 1437 1444 Bradwell AR 2009 Serum Free Light Chain Analysis 5h Edition 221 228 Publ The Binding Site Ltd Birmingham UK Mead GP Carr Smith HD Drayson MT Morgan GJ Child JA and Bradwell AR 2004 Serum free light chains for monitoring multiple myeloma Brit J Heamatol 126 348 354 Coffret Lambda Libre Humaine Freelite pour utilisation sur MININEPHPLus Pour un usage en diagnostic in vitro Code produit VK018 Produit fabriqu par The Binding Site Group Ltd PO Box 11712 Birmingham B14 4ZB UK www bindingsite co uk Distribu en France par la soci t The Binding Site Group Ltd 14 rue des Glairaux BP226 38522 Saint Egr ve Cedex T l phone 04 38 02 19 19 Fax 04 38 02 19 20 e mail infoObindingsite fr MININEPHPLUs et Freelite sont des marques d pos es par The Binding Site Group Ltd Birmingham UK 1 Ce coffret permet de quantifier les chaines l g r
40. ght of both light chains is 22 5kD in serum x free light chain k FLC exists predominantly as a monomer and A free light chain A FLC as a covalently linked dimer with a molecular weight of 45kD This will lead to a differential glomerular filtration rate for k FLC and A FLC and may explain the observed ratio of k FLC to A FLC of 0 625 in serum compared to the ratio of bound k to A of 2 0 Elevated serum levels of monoclonal FLC are associated with malignant plasma cell proliferation eg multiple myeloma AL amyloidosis and light chain deposition disease Raised serum levels of polyclonal FLC may be associated with autoimmune diseases such as systemic lupus erythematosus 1 3 PRINCIPLE OF THE ASSAY Evaluating the concentration of a soluble antigen by nephelometry involves the addition of the test sample to a solution containing the appropriate antibody in a reaction vessel or cuvette A beam of light is passed through the cuvette and as the antigen antibody reaction proceeds the light passing through the cuvette is scattered increasingly as insoluble immune complexes are formed Light scatter is monitored by measuring the light intensity at an angle away from incident light The antibody in the cuvette is in excess so the amount of immune complex formed is proportional to the antigen concentration Concentrations are automatically calculated by reference to a calibration curve stored upon the calibration card The sensitivity of nephelometr
41. ic assays can be increased by the use of particle enhancement This entails linking the antibody to a suitably sized particle that increases the relative light scattering signal of the antigen antibody reaction 4 REAGENTS 4 1 Human lambda free reagent Consisting of monospecific antibody coated onto polystyrene microparticles Supplied in lyophilised form reconstitute with 0 75mL of distilled water and put on a roller mixer for 30 minutes before use It contains 0 099 sodium azide 0 05 ProClin 0 1 E amino n caproic acid EACA and 0 01 benzamidine as preservatives 4 2 Lambda free swipe card This is encoded with details of the reaction curve specific to the respective lot of reagent This card is reagent lot specific and must be used only with the reagent lot stated 4 3 Lambda free supplementary buffer For use with the identical lot of Lambda Free reagent swipe card and controls only The supplementary buffer contains 0 099 sodium azide as a preservative 4 4 Controls These consist of pooled human sera that contain polyclonal Lambda Free light chain They are supplied in stabilised liquid form that contain 0 099 sodium azide 0 1 EACA and 0 01 benzamidine as preservatives The acceptable ranges of Human Lambda Free concentrations are stated on the batch specific Quality Control certificate VINO18 QC accompanying the kit ProClin is a trademark of Rohm and Haas Corp Philadelphia PA EA CAUTION All don
42. iciarse un tratamiento bas ndose nicamente en la medida de las cadenas ligeras libres deben tenerse en cuenta tambi n la historia cl nica y resultados de otras pruebas de laboratorio 11 1 3 Exceso de ant geno Un exiguo n mero de muestras de pacientes que contienen concentraciones elevadas de cadenas libres Kappa o cadenas libres Lambda puede dar resultados falsos bajos para la cadena ligera en cuesti n debido al exceso de ant geno La composici n amino cida de las cadenas ligeras producidas durante una condici n patol gica de la c lula B influir el nivel en correspondencia del cual una muestra puede evidenciar con el ensayo Freelite un exceso de ant geno En casi todos los casos la concentraci n de la cadena ligera presente en cantidad elevada resultar arriba del rango de normalidad previsto 3 30 19 40mg L para kappa libre y 5 71 26 30mg L para lambda libre y o la concentraci n de la cadena ligera opuesta resultar debajo del rango de normalidad previsto y o la relaci n de las cadenas Kappa libre Lambda libre resultar fuera del rango previsto 0 26 1 65 Cualquier muestra deber ensayarse a las diluciones de 1 20 y 1 200 para detectar el exceso antig nico si se da cualquiera de las siguientes condiciones a Cualquier muestra que manifieste una concentraci n de cadenas ligeras libres o una relaci n Kappa libre Lambda libre fuera del rango previsto b cualquier muestra que provenga de un paciente que previamente ha
43. it Freelite Kappa Libre MININEPHPLUS de Binding Site VK016 8 1 Material suministrado 5 2 x 0 75mL Human Lambda Free Reagent Reactivo Lambda Libre Humana 8 1 2 1 x 3 5mL Lambda Free Supplementary Buffer Buffer Suplementario Lambda Libre 1 x0 5mL Human Lambda Free High Control Control Alto Lambda Libre Humana 1 x 0 5mL Human Lambda Free Control Control Lambda Libre Humana Tarjeta magn tica espec fica de lote con informaci n sobre la calibraci n Certificado de control de calidad Hoja de instrucciones go w w w o NOOR W 8 2 Materiales necesarios pero no suministrados 8 2 1 Analizador MININEPHPLUS AD500 C D E 8 2 2 Impresora MININEPHPLUS AP1310DPK1T63 Opcional 8 2 3 Conjunto de accesorios MININEPH Reagent ZK500 R 8 2 4 Buffer On Board MININEPHPLUS 1 SN107 8 2 5 Conjunto de pipetas con capacidad para dispensar 5 1000uL 8 2 6 Puntas de pipeta para uso con MININEPHPLUS consulte el manual del usuario de MININEPHPLUS 8 2 7 Materiales necesarios para la recolecci n y preparaci n de las muestras 8 2 8 Un mezclador de rodillo 8 2 9 Agua destilada 8 3 Procedimiento de ensayo 8 3 1 Resumen de vol menes de reactivo que se han de a adir a la cubeta Reactivo Volumen a adido Muestra diluci n 1 20 AO Buffer Suplementario Lambda Libre TO0uL Reactivo Lambda Libre Humana 40uL 8 3 2 Aseg rese de que hay suficiente Buffer On Board 1 para llevar a cabo las pruebas Consulte las ins
44. lerdings werden auch geringe Mengen an Freien Leichtketten FLC im Serum von Gesunden gefunden da die Plasmazellen sie im berschuss produzieren und sekretieren Das Molekulargewicht der Leichtketten k und A betr gt ca 22 5kD Im Serum kommt die Freie Kappa Leichtkette k FLC berwiegend als Monomer die Freie Lambda Leichtkette A FLC als kovalent gebundenes Dimer mit einem Molekulargewicht von ca 45kD vor Dies f hrt zu einer unterschiedlichen Filtrationsrate f r k FLC und A FLC was eine m gliche Erklarung des im Serum gefundenen k FLC A FLC Verh ltnis von 0 625 ist Das k A Verh ltnis der gebundenen Leichtketten ist dagegen 2 0 Erh hte Serumkonzentrationen an monoklonalen Freien Leichtketten sind mit der malignen Proliferation von Plasmazellen z B Multiples Myelom AL Amyloidose und der Ablagerung von Freien Leichtketten free light chain deposition disease assoziiert Erh hte Serumkonzentrationen an polyklonalen Freien Leichtketten k nnen bei Autoimmun erkrankungen wie SLE auftreten Zur Bestimmung eines l slichen Antigens mittels Nephelometrie wird die zu testende Probe in eine K vette die den entsprechenden Antik rper enth lt zugegeben Beim Fortschreiten der Antigen Antik rper Reaktion bei der unl sliche Immunkomplexe gebildet werden wird das in die K vette eingestrahlte Licht zunehmend gestreut Die Lichtstreuung wird ermittelt indem die Lichtintensit t in einem bestimmten Winkel zum einfallenden Lich
45. lobulin light chains relative sensitivity for detection of monoclonal light chains Clin Chem 48 1437 1444 Bradwell AR 2009 Serum Free Light Chain Analysis 5 Edition 221 228 Publ The Binding Site Ltd Birmingham UK Mead GP Carr Smith HD Drayson MT Morgan GJ Child JA and Bradwell AR 2004 Serum free light chains for monitoring multiple myeloma Brit J Heamatol 126 348 354 Insert Code VINO18 Version 21 September 2010 Page 9 of 9
46. lonales Freies Lambda und liegen als stabilisierte Fl ssigkeiten vor Enthaltene Konservierungsmittel 0 099 Natriumazid 0 1 EACA und 0 01 Benzamidin Der erlaubte Bereich f r die Freie Lambda Konzentration ist auf dem QC Zertifikat VINO18 QC angegeben das dem Kit beiliegt ProClin ist ein Warenzeichen von Rohm and Haas Corp Philadelphia PA 5 WARNUNGEN UND VORSICHTSMABNAHMEN Das Ausgangsmaterial zur Erstellung der Kalibratoren und Kontrollen stammt aus menschlichem Blut Jede Einzelspende wurde bez glich Antik rpern gegen Human Immunschw che Virus HIV 1 amp 2 Hepatitis C Virus und Hepatitis B Oberfl chenantigen HBsAG untersucht und als negativ befunden Die hierf r verwendeten Tests sind entweder von der FDA USA zugelassen oder f r den Gebrauch in der in vitro Diagnostik in der EU freigegeben Directive 98 79 EC Annex Il Es gibt aber zur Zeit keine absolut sicheren Testmethoden zum Auschluss von HIV Hepatitis C Virus Hepatitis B Virus und anderen Infektionstragern Deshalb sollten die Reagenzien als potentiell infekti s behandelt werden Umgangs und Entsorgungsmethoden sollten denen f r potentiell infekti sem Material entsprechen insbesondere dem standigen Tragen entspechender Schutzkleidung Der Test sollte nur von entsprechend geschultem Personal durchgef hrt werden Dieses Produkt enth lt Natriumazid und ProClin 300 und muss mit den entsprechenden VorsichtsmaBnahmen behandelt werden Verschlucke
47. mbda libre est en dehors des valeurs normales 0 26 1 65 Si une des conditions ci dessous est rencontr e un chantillon devra tre teste a la dilution initiale 1 20 et ala dilution 1 200 pour d tecter tout exc s d antigene a l chantillon a soit une concentration en CLL ou un rapport CLL kappa CLL lambda en dehors des gammes de mesures b l chantillon provient d un patient ayant d j pr sent un exc s d antigene ou c les r sultats de l chantillon ne sont pas en ad quation avec les autres r sultats cliniques 11 1 4 Les ChLL poss dent une combinaison unique d acides amin s Ainsi il est th oriquement possible que certaines prot ines monoclonales soient ind tectables par immunoessai provoquant des r sultats plus faibles que pr vus En pratique cela ne se produit que tr s rarement avec le test Freelite Les chantillons suspects doivent d abord tre test s pour l exc s d antigene voir paragraphe 11 1 3 ci dessus puis par d autres techniques d analyse immunofixation et lectrophor se des prot ines s riques 11 1 5 Dans les essais immunoenzymatiques la nature des prot ines monoclonales peut causer une r ponse non lin aire et potentiellement donner des r sultats contradictoires Ceci peut tre vit en diluant les chantillons comme suit 1 20 1 200 1 2000 1 20000 Ne pas omettre une de ces dilutions 11 1 6 La nature des prot ines monoclonales est tres variable c est pourquoi des lo
48. n sowie Kontakt mit Haut oder Schleimh uten vermeiden Nach Kontakt Hautstelle mit viel Wasser absp len und rztlichen Rat einholen Natriumazid kann mit Blei oder Kupferrohren explosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung mit ausreichender Menge Wasser nachsp len um Azidablagerungen zu vermeiden Dieser Test sollte nur f r den angegebenen Verwendungszeck von entsprechend geschultem Laborpersonal durchgef hrt werden Die Einhaltung der Arbeitsanleitung wird empfohlen Bei Verwendung von abge nderten Testparametern kann die Richtigkeit der Ergebnisse nicht garantiert werden Reagenzien unterschiedlicher Chargen d rfen NICHT untereinander gemischt oder gemeinsam verwendet werden Bei gro em Testdurchsatz muss darauf geachtet werden dass alle Reagenzien der gleichen Charge entstammen 6 LAGERUNG UND STABILIT T Der unge ffnete Kit ist bei 2 8 C bis zum auf der Packung angegebenen Verfallsdatum haltbar NICHT EINFRIEREN Nach Rekonstitution ist das Reagenz wenn es bei 2 8 C gelagert wird 5 Tage stabil Es wird empfohlen die Reagenzflaschen nacheinander zu verwenden Das Zusatzreagenz vor Gebrauch auf Raumtemperatur erw rmen lassen Nach dem ffnen sind Zusatzreagenz und Kontrollen bei Lagerung bei 2 8 C bis zu 1 Monat stabil 7 PROBENENTNAHME UND VORBEREITUNG Immer frisches oder tiefgefrorenes Serum verwenden Blutproben ber Venenpunktur sammeln und auf nat rliche Weise gerinnen lassen Serum so schnell wie m glich vom
49. ncet 361 489 491 8 Abraham RS Katzman JA Clark RJ Bradwell AR Kyle RA and Gertz MA 2003 Quantitative Analysis of Serum Free Light Chains A new marker for the diagnostic evaluation of primary systemic amyloidosis Am J Clin Pathol 119 2 274 278 9 Lachmann HJ Gallimore JR Gillmore JD Carr Smith HD Bradwell AR Pepys MB and Hawkins PN 2003 Outcome in systemic AL amyloidosis in relation to changes in concentration of circulating immunoglobulin free light chains following chemotherapy Brit J Haem 122 78 84 10 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP and Drayson MT 2002 Serum free light chain immunoassays and their clinical application Clinical and Applied Immunology Reviews 3 17 33 11 Katzmann JA Clark RJ Abraham RS Bryant S Lymp JF Bradwell AR and Kyle RA 2002 Serum reference intervals and diagnostic ranges for free kappa and free lambda immunoglobulin light chains relative sensitivity for detection of monoclonal light chains Clin Chem 48 1437 1444 a N 12 Bradwell AR 2009 Serum Free Light Chain Analysis 5 Edition 221 228 Publ The Binding Site Ltd Birmingham UK 13 Mead GP Carr Smith HD Drayson MT Morgan GJ Child JA and Bradwell AR 2004 Serum free light chains for monitoring multiple myeloma Brit J Heamatol 126 348 354 Insert Code VINO18 Version 21 September 2010 Page 2 of 9 Freelite Human Lambda Free Kit zur Verwendung auf dem MININEPHPLus
50. ng LX Showell PJ Drayson MT and Drew RJ 2001 Highly sensitive automated immunoassay for immunoglobulin free light chains in serum and urine Clin Chem 47 4 673 680 Tang LX Showell P Carr Smith HD Mead GP Drew R and Bradwell AR 2000 Evaluation of F ab based latex enhanced nephelometric reagents for free immunoglobulin light chains on the Behring Nephelometer II Clin Chem 46 6 Suppl 2000 705 pA181 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP Harvey TC and Drayson MT 2003 Serum test for assessment of patients with Bence Jones myeloma Lancet 361 489 491 Abraham RS Katzman JA Clark RJ Bradwell AR Kyle RA and Gertz MA 2003 Quantitative Analysis of Serum Free Light Chains A new marker for the diagnostic evaluation of primary systemic amyloidosis Am J Clin Pathol 119 2 274 278 Lachmann HJ Gallimore JR Gillmore JD Carr Smith HD Bradwell AR Pepys MB and Hawkins PN 2003 Outcome in systemic AL amyloidosis in relation to changes in concentration of circulating immunoglobulin free light chains following chemotherapy Brit J Haem 122 78 84 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP and Drayson MT 2002 Serum free light chain immunoassays and their clinical application Clinical and Applied Immunology Reviews 3 17 33 Katzmann JA Clark RJ Abraham RS Bryant S Lymp JF Bradwell AR and Kyle RA 2002 Serum reference intervals and diagnostic ranges for free kappa and free lambda immunog
51. ntiel pour KChLL et AChLL et peut expliquer le rapport s rique KChLL AChLL observ de 0 625 compar au taux de cha nes l g res li es k A de 2 0 Des taux s riques lev s de cha nes l g res libres monoclonales sont associ s une prolif ration maligne de plasmocytes ex my lomes multiples l amylose AL et la maladie de d p t des cha nes l g res Des taux s riques lev s de cha nes l g res libres polyclonales peuvent tre associ s des maladies auto immunes telles que le LED 9 3 PRINCIPE L valuation de la concentration d un antig ne soluble par n ph l m trie n cessite l ajout de l chantillon une solution d anticorps appropri dans une cuvette Un faisceau de lumi re traverse la cuvette et comme la r action antig ne anticorps se produit la diffusion de la lumi re augmente au cours de la formation des complexes immuns insolubles La lumi re diffus e est mesur e par de la diminution de l intensit lumineuse de la lumi re incidente L anticorps dans la cuvette est en exc s pour que la quantit de complexes immuns form s soit proportionnelle la concentration d antig ne Les concentrations sont calcul es automatiquement partir de courbe talon pr tabli enregistr e sur la carte de calibration La sensibilit des tests en n ph l m trie peut tre augment e par l utilisation de particules chimique li es l anticorps Lorsque l anticorps est accroch des parti
52. ntinuer l tape 8 3 10 Si le num ro de lot ne correspond pas a celui du r actif s lectionner N presser 2 et retourner a l tape 8 3 7 de fa on rentrer les donn es correctes 8 3 10 Amor age 1 0 2 N Amorcer l automate pour expulser les bulles d air contenues dans les tubulures allant du tampon charg embarqu a la pipette Ceci est fait en pressant la touche 1 lorsque demand e Le tampon exc dant sera rejet dans le flacon d chets Lorsque l amorgage est termin presser la touche 2 8 3 11 Block N Pipette N Attendre la chauffe complete de l appareil La temperature de chauffe correcte fait partie des informations contenues dans la carte magnetique 8 3 12 Pr parer les dilutions des contr les et des chantillons en utilisant le diluant pour MININEPH fourni dans le coffret accessoire r actif du MININEPH ZK500 R La dilution de l chantillon recommand e pour Lambda est 1 20 pour la pr parer pipeter 40uL d chantillon et ajouter 760uL de diluant 8 3 13 Pr parer une cuvette pour MININEPH pour chacun des chantillons a tester Placer un aimant dans chacune des cuvettes l aide d une pince Ensuite d poser tr s d licatement 40uL d chantillon dilu au fond de chaque cuvette 8 3 14 Identification patient Entrer un num ro d identification par ex 1 pour le premier chantillon tester et presser enter pour continuer se r f rer au manuel d utilisation pour le choix des codes d identification
53. objetivo la cuantificaci n en suero de las cadenas ligeras libres lambda en el MININEPHPLUS El an lisis de las distintas cantidades de cadenas ligeras libres es de gran ayuda en el diagn stico y monitorizaci n del mieloma m ltiple neoplasias linfoc ticas la macroglobulinemia de Waldenstr m amiloidosis primaria s ndrome de deposici n de cadenas ligeras y enfermedades del tejido conjuntivo como por ejemplo el lupus eritematoso sist mico junto con otras determinaciones cl nicas y de laboratorio 2 RESUMEN Y EXPLICACI N Las mol culas de inmunoglobulinas se componen de dos cadenas pesadas id nticas a 3 e y O u que definen el tipo de inmunoglobulina y dos cadenas ligeras id nticas k o A Cada cadena ligera est unida covalentemente a una cadena pesada y las dos cadenas pesadas est n entre si enlazadas covalentemente en la regi n bisagra En el suero de individuos sanos la mayor a de las cadenas ligeras se presentan ligadas a la cadena pesada Sin embargo tambi n se encuentran niveles bajos de cadenas ligeras en el suero de individuos sanos ya que las c lulas plasm ticas las producen y segregan en exceso El peso molecular de ambas cadenas ligeras es de aproximadamente 22 5kD En el suero se encuentra la cadena ligera libre Kappa K mayormente como mon mero la cadena ligera libre Lambda A como d mero covalentemente ligado con un peso molecular de aproximadamente 45kD Esto conlleva a ndices de filtraci n glomerular
54. omer FK 1981 Free light chains of immunoglobulins in serum from patients with rheumatoid arthritis sarcoidosis chronic infections and pulmonary cancer Acta Med Scand 209 473 477 Drayson MT Tang LX Drew R Mead GP Carr Smith HD and Bradwell AR 2001 Serum free light chain measurements for identifying and monitoring patients with non secretory multiple myeloma Blood 97 2900 2902 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP Tang LX Showell PJ Drayson MT and Drew RJ 2001 Highly sensitive automated immunoassay for immunoglobulin free light chains in serum and urine Clin Chem 47 4 673 680 Tang LX Showell P Carr Smith HD Mead GP Drew R and Bradwell AR 2000 Evaluation of F ab based latex enhanced nephelometric reagents for free immunoglobulin light chains on the Behring Nephelometer Il Clin Chem 46 6 Suppl 2000 705 pA181 Bradwell AR Carr Smith HD Mead GP Harvey TC and Drayson MT 2003 Serum test for assessment of patients with Bence Jones myeloma Lancet 361 489 491 Abraham RS Katzman JA Clark RJ Bradwell AR Kyle RA and Gertz MA 2003 Quantitative Analysis of Serum Free Light Chains A new marker for the diagnostic evaluation of primary systemic amyloidosis Am J Clin Pathol 119 2 274 278 Lachmann HJ Gallimore JR Gillmore JD Carr Smith HD Bradwell AR Pepys MB and Hawkins PN 2003 Outcome in systemic AL amyloidosis in relation to changes in concentration of circulating immunoglobulin
55. ors of human serum supplied in this kit have been serum tested and found negative for hepatitis B surface antigen HBsAg and antibodies to human immunodeficiency virus HIV1 and HIV2 and hepatitis C virus The assays used were either approved by the FDA USA or cleared for in vitro diagnostic use in the EU Directive 98 79 EC Annex Il however these tests cannot guarantee the absence of infective agents Proper handling and disposal methods should be established as for all potentially infective material including but not limited to users wearing suitable gloves protective equipment and clothing at all times Only personnel fully trained in such methods should be permitted to perform the procedures This product contains sodium azide and ProClin 300 and must be handled with caution Do not ingest or allow contact with the skin particularly broken skin or open wounds or mucous membranes lf contact does occur wash with a large volume of water and seek medical advice Explosive metal azides may be formed on prolonged contact of sodium azide with lead and copper plumbing on disposal of reagent flush with a large volume of water to prevent azide build up This product should only be used by suitably trained personnel for the purposes stated in the Intended Use Strict adherence to these instructions is essential at all times Results are likely to be invalid if parameters other than those stated in these instructions are used Reagents from diff
56. os de diferentes lotes NO son intercambiables En caso de realizar un n mero elevado de tests averig e que todos los reactivos sean del mismo lote 6 ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD El kit sin abrir debe conservarse a 2 8 C y puede utilizarse hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta NO CONGELAR Una vez reconstituido el reactivo es estable durante 5 d as si se conserva a 2 8 C Antes de usar se debe dejar equilibrar el buffer suplementario a temperatura ambiente Se recomienda el uso consecutivo de los viales de reactivo Una vez abiertos el buffer suplementario y los controles son estables durante 1 mes si se conservan a 2 8 7 OBTENCI N Y PREPARACI N DE LAS MUESTRAS Utilizar muestras de suero frescas o congeladas Las muestras de sangre se han de obtener por punci n en vena dejar que coagule de modo natural y separar el suero lo antes posible para prevenir la hem lisis El suero se conserva a 2 8 C hasta 21 d as o se congela a 20 C para periodos m s largos Se deben evitar ciclos de congelaci n y descongelaci n repetidos No deben utilizarse muestras hemolizadas lip micas con contaminaci n microbiana o muestras que contengan part culas Algunos tipos de suero no son adecuados para los ensayos MININEPHPLUS ver secci n 11 1 1 8 METODOLOG A Nota para una interpretaci n completa de los resultados se deben determinar los ratios kappa lambda libre por lo que las muestras han de ensayarse tambi n con el k
57. ovided 2x0 75mL Human Lambda Free Reagent 1 x 3 5mL Lambda Free Supplementary Buffer 1 x 0 5mL Human Lambda Free High Control 1 x 0 5mL Human Lambda Free Control Magnetic swipe card containing lot specific calibration information Quality Control Certificate Instruction leaflet go GD G9 go Go le ek ei lr lr ay ah Loup 8 2 Materials required but not provided 8 2 1 MININEPHPLUS analyser AD500 C D E 8 2 2 MININEPHPLUS printer AP1310DPK1T63 Optional 8 2 3 MININEPH Reagent Accessory Pack ZK500 R 8 2 4 MININEPHPLUS On Board Buffer 1 SN107 8 2 5 A range of pipettes capable of dispensing 5 1000pL 8 2 6 Pipette tips for use with the MININEPHPLUS refer to MININEPHPLUS User Guide 8 2 7 Equipment for the collection and preparation of test samples 8 2 8 A roller mixer 8 2 9 Distilled water 8 3 Test procedure 8 3 1 Summary of reagent volumes added to the cuvette Reagent Volume added Sample 1 20 dilution un Lambda Free Supplementary Buffer TOUL Human Lambda Free Reagent 40uL 8 3 2 Ensure there is sufficient On Board Buffer 1 to perform the tests Refer to the MININEPHPLUS User Guide for instructions on replenishing the buffer 8 3 3 Check that the waste pot is under the hand held pipette stand at the back of the MININEPHPLUS and is empty 8 3 4 Attach a pipette tip to the hand held pipette and place back into the pipette holder 8 3 5 Switch the analyser on 8 3 6 Enter chemistry numbe
58. r Enter the chemistry number LAM 18 and press enter 8 3 7 Swipe chemistry card This message will only be displayed if this chemistry has never been used before or you wish to change reagent lot number Pass the swipe card through the swipe card reader moving in a left to right direction across the front of the analyser The magnetic stripe should be facing upwards 8 3 8 Check reagent lot number Press enter 8 3 9 LAM lot xxxx OK 1 Y 2 N Compare the details displayed with those on the reagent label and swipe card If the lot number displayed is identical to the four digits of the lot number printed on the reagent vial and swipe card select Y press 1 and continue to step 8 3 10 If the lot number is different from those displayed select N press 2 and return to step 8 3 7 to allow the details of the correct lot to be entered 8 3 10 Prime 1 Y 2 N Prime the analyser to expel air bubbles in the plastic tube leading from the On board buffer bottle to the hand held pipette This is done by pressing button 1 when prompted Excess On board buffer will be expelled into the waste pot When priming has finished press 2 8 3 11 Block N Pipette N Allow analyser to warm to operating temperature The correct operating temperature is coded in the calibration card 8 3 12 Prepare dilutions of controls and samples using the MININEPH Sample Diluent supplied in the MININEPH Reagent Accessory Pack ZK500 R The recommended sample dilution for Lambda i
59. r automatique 8 2 9 Eau distill e 8 3 Proc dure de test 8 3 1 R capitulatif des volumes de r actifs ajout s dans la cuvette R actif Volume ajout Echantillon dilu au 1 20 40uL Tampon Lambda Libre 100pL R actif Latex Lambda Libre Humaine 40pL 8 3 2 S assurer qu il y a suffisamment de tampon charg a bord de l automate On Board Buffer 1 SN107 pour la r alisation des tests Se r f rer au manuel d utilisation du MININEPHPLUS pour rajouter du tampon 8 3 3 V rifier que le r cipient a d chets est dispos a l arri re du MININEPHPLUS sous la pipette et qu il est vide 8 3 4 Mettre un c ne a la pipette et reposer la pipette sur son support 8 3 5 Mettre l automate sous tension 8 3 6 Entrer num ro param tre S lectionner le num ro 18 LAM 18 puis valider sur la touche enter 8 3 7 Introduire la carte Ce message n apparait que lors de la premiere utilisation du canal ou si vous souhaitez changer de numero de lot Glisser la carte dans le lecteur de gauche droit avec la bande magn tique vers le haut Faire un mouvement horizontal 8 3 8 Verifier numero de lot reactif Valider en appuyant sur enter 8 3 9 LAM Lot xxxx OK 1 O Oui 2 N Non V rifier que les informations affich es correspondent bien celles disponibles sur l tiquette du r actif et passer la carte Si le num ro de lot affich correspond a celui du r actif et de la carte magn tique s lectionner Y presser 1 et co
60. rage der Probenverd nnung 1 200 in das Ger t eingeben siehe Abschnitt 10 2 8 3 23 Ist die Messung beendet die K vette entnehmen und die ENTER Taste dr cken damit die n chste Messung durchgef hrt werden kann 8 3 24 Sind alle Tests des angew hlten Parameters gemessen worden die ESC Taste dr cken und den n chsten Parameter anw hlen 8 3 25 Den Abfallbeh lter leeren und die Pipettenspitze von der Pipette entfernen 9 QUALITATSKONTROLLE Es wird empfohlen dass bei jedem Testansatz die mitgelieferten Kontrollen mitgef hrt werden Die zul ssigen Freie Lambda Konzentrationbereiche sind auf dem beiliegenden QC Zertifikat VINO16 QC angegeben Ergebnisse sollten nur akzeptiert werden wenn die Kontrollen innerhalb die angegebenen Konzentrationbereichen fallen Liegt eine Kontrolle au erhalb des Vertrauensberich und wurde eine gespeicherte Kalibrationskurve verwendet so wir empfohlen diese erneut zu messen Liegen die Kontrollen wiederholt au erhalb des Vertrauensbereich sollte das Ger t berpr ft werden L sst sich das Problem nicht l sen wenden Sie sich bitte an Ihre Lieferfirma 10 INTERPRETATION OF RESULTS 10 1 Die Ergebnisse werden direkt im Ger t berechnet und in mg L angegeben Ist ein Drucker angeschlossen wird das Ergebnis zusammen mit der Probenidentifikation und verd nnung automatisch ausgedruckt Weitere Berechnungen sind nicht notwendig 10 2 Alle Proben m ssen zuerst in der Standardverd nnung von
61. s 1 20 to prepare this dilution pipette 40uL of sample into a sample dilution tube and add 760pL of sample diluent 8 3 13 Prepare one MININEPH cuvette for each sample to be assayed Using the forceps provided with the MININEPHPLUS place a stirring bar in each cuvette and then using a pipette add 40pL of diluted sample carefully to the bottom of each cuvette 8 3 14 Enter sample ID Enter an identity code e g 1 for the first sample to be assayed then press enter to continue refer to User Guide for choice of identity codes 8 3 15 Sample dilution 1 20 Accept the recommended dilution by pressing enter or type in a new dilution factor if an alternative dilution is to be used 8 3 16 Place cuvette in chamber Place a cuvette containing a stirring bar and 40pL of diluted sample in the cuvette chamber Press the cuvette down gently until it reaches the bottom of the chamber The cuvette will be detected automatically 8 3 17 Temperature Stabilising There is a waiting period of 90 seconds whilst the sample in the cuvette is warmed inside the analyser 8 3 18 Add reagent Using the MININEPHPLUS hand held pipette aspirate the Human Lambda Free Reagent 8 3 19 Air Gap Using the MININEPHPLUS hand held pipette aspirate an air gap 8 3 20 Supplementary Using the MININEPHPLUS hand held pipette aspirate the Lambda Free Supplementary Buffer 8 3 21 Add Reagent Dispense the aspirated reagents into the cuvette The stirring bar will rotate and the ass
62. t La lin arit de ce test a t confirm e en utilisant des dilutions en s rie d un s rum polyclonal L quation de r gression obtenue est y 0 91x 1 07 mg L P 0 984 y concentration mesur e de lambda libre x concentration th orique 13 3 Interf rences Des interf rences minimes ont t trouv es avec la bilirubine 200mg L 1 95 h moglobine 5 0g L 4 90 et le chyle a 15000 unit s de turbidit de formazine 7 41 en utilisant un s rum de contr le lambda libre a 57 1mg L 13 4 Limite de D tection et Limite du Blanc La limite de quantification et de d tection de ce test est d finie an tant que point le plus bas de a courbe de calibration c est a dire 4 91 mg L pour une dilution d chantillon a 1 20 13 5 Comparaison 90 s rums adultes normaux et 30 s rums adultes pathologiques connus ou suspect s atteints de my lome ou de lupus ryth mateux syst mique ont t test s avec les coffrets Freelite sur le MININEPHPLUS et le BNII Les r sultats obtenus sont les suivants S rums normaux et s rums cliniques Gamme mg L 7 90 8680 R gression de Passing Bablok mg L 1 03x 1 36 Regression lin aire R 0 9798 14 1 Cole PW Durie BGM Salmon SE 1978 Immunoquantitation of free light chain immunoglobulins Application in multiple myeloma J Immunol Meth 19 341 349 2 Pescali E Pezozoli A 1988 The clinical spectrum of pure Bence Jones proteinuri
63. tion s Error message Blank too Very high analyte high reassay displayed concentration Reassay sample at a higher dilution Lipaemic turbid or haemolysed samples Try alternative assay method Controls out of range Product deterioration Check expiry date Operator error Repeat assay with the correct sample dilution Test sample giving unexpectedly low result Antigen excess if the two results agree Repeat assay at higher dilution Check 12 EXPECTED RESULTS The ranges provided below have been obtained from a limited number of samples and are intended for guidance purposes only Wherever possible it is strongly recommended that local ranges are generated 12 1 Adult serum ranges 282 normal subjects aged rom 20 to 90 years were assayed using the Binding Site Freelite assays for the BN II 1 The results are shown in the table below Normal adult serum Mean conc Median conc 95 Percentile range Free kappa 8 36 mg L 7 30 mg L 3 30 19 40 mg L Free lambda 13 43 mg L 12 40 mg L 5 71 26 30 mg L Mean Median Total range Kappa Lambda ratio 0 63 0 60 0 26 1 65 BN is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics Inc 13 PERFORMANCE CHARACTERISTICS 13 1 Precision Lambda precision summary Conc Intra batch CV Day to day Inter instrument mg L n 20 CV n 10 CV n 5 Serum 1 80 54 5 1 6 7
64. trucciones para reponer el buffer en el manual del usuario MININEPHPLus 8 3 3 Compruebe que el cubo de residuos esta situado bajo el soporte para pipetas manuales en la parte posterior del MININEPHPLUS y que esta vacio 8 3 4 Ponga una punta a la pipeta manual y vu lvala a poner en el soporte para pipetas 8 3 5 Encienda el analizador 8 3 6 Entre n mero de t cnica Introduzca el numero de par metro LAM 18 y pulse enter 8 3 7 Pase la tarjeta espec fica Este mensaje s lo aparecer si el par metro en cuesti n no se ha utilizado antes o si desea cambiar el n mero de lote del reactivo Pase la tarjeta magn tica por el lector en l nea recta de izquierda a derecha a lo largo de la parte delantera del analizador con la banda magn tica hacia arriba 8 3 8 Compruebe n mero de lote Pulse enter 8 3 9 Lote LAM xxxx OK 1 S 2 N Compare los detalles mostrados en pantalla con los de la etiqueta y banda magn tica Si el n mero de lote en pantalla coincide con los del vial y banda magn tica seleccione S pulse 1 y contin e con el paso 8 3 10 Si el n mero de lote del vial es distinto al mostrado en pantalla seleccione N pulse 2 y vuelva al paso 8 3 7 para permitir la entrada de los datos correctos del lote 8 3 10 Cebar 1 S 2 N Cargue el analizador para expulsar las burbujas de aire del tubo de pl stico que va del vial de buffer On board a la pipeta manual Esto se hace pulsando el bot n 1 cuando se indique Se expulsar
65. ts de r actifs diff rents peuvent r agir differemment aux pitopes pr sents dans certains s rums Dans ces cas les r sultats d un s rum peuvent varier s ils ont t obtenus sur des lots diff rents En suivi de patients les r sultats doivent tre interpr t s avec pr caution si les lots sont diff rents Nous recommandons dans la mesure du possible d utiliser un m me lot lorsque plusieurs chantillons doivent tre compar s Insert Code VINO18 Version 21 September 2010 Page 6 of 9 11 2 Causes d erreur Probleme Cause s possible s Actions sugg r e Message d erreur Blanc Concentration tr s lev e Retester l echantillon une trop haut retester de l chantillon dilution sup rieure affich Echantillon lipidiques Trouver une autre technique de troubles ou h molys s test Contr les en dehors des D t rioration des produits V rifier la date d expiration gammes accept es Erreur op rateur R p ter le test en utilisant la dilution de l chantillon appropri e Le tes d un chantillon Exces d antigene R p ter le test a une dilution donne un faible r sultat sup rieure V rifier la inattendu concordance des r sultats 12 VALEURS ATTENDUES Les gammes de valeurs indiqu es ci dessous ont t obtenues partir d un nombre limit d chantillons et sont donn es titre indicatif Il est fortement recommand d tablir ses propres norm
66. tstrahl gemessen wird Da der Antik rper im berschuss vorliegt ist die Immunkomplexbildung proportional zur Antigen konzentration Die Antigenkonzentration wird automatisch anhand einer Kalibrationskurve die auf der Magnetkarte gespeichert ist berechnet Die Empfindlichkeit von nephelometrischen Tests kann durch eine Partikelverst rkung erh ht werden Dazu wird der Antik rper an einen Partikel geeigneter Gr Be gekoppelt dadurch wird das relative Streulichtsignal w hrend der Antigen Antik rper Reaktion verst rkt 4 1 Human Lambda Free Reagenz Besteht aus monospezifischen Schaf Antik rpern die an Polystyren Latexpartikel gekoppelt wurden Das Reagenz wird in lyophilisierter Form geliefert Rekonstitution erfolgt mit 0 75mL destillierten Wasser und wird vor Gebrauch f r 30 Minuten in rotierenden Bewegungen gemischt Enthaltene Konservierungsmittel 0 05 ProClin 0 1 E aminocaprons ure EACA und 0 01 Benzamidin 4 2 Lambda Free Magnetkarte Auf der Magnetkarte ist die chargenspezifische Kalibrationskurve gespeichert Diese Karte darf nur mit Reagenz der entsprechenden Charge verwendet werden 4 3 Lambda Free Zusatzreagenz Nur im Gebrauch mit der identischen Chargennummer von Freiem Lambda Reagenz Magnetkarte und Kontrollen verwenden Enthaltene Konservierungsmittel 0 099 Natriumazid 4 4 Human Lambda Free Kontrollen Low Level und High Level Sie werden aus normalem Humanserum hergestellt und enthalten polyk
67. uch in der 1 200 Verd nnung erneut getestet werden um einen Antigen berschuss zu erfassen wenn eine der folgenden Bedingungen zutrifft a Die Probe weist eine Konzentration an Freien Leichtketten oder eine K A Ratio auf die au erhalb der angegebenen Normalbereiche liegt b Die Probe stammt von einem Patienten bei dem bereits fr her ein Antigen berschuss gefunden wurde oder c Die Probenergebnisse stimmen nicht mit dem klinischen Bild oder anderen Laborbefunden berein 11 1 4 Jede monoklonale Freie Leichtkette enth lt einzigartige Aminos uresequenzen Daher ist es m glich dass bestimmte monoklonale Freie Leichtketten durch den Immunoassay nicht erfasst werden was sich in niedrigeren Messwerten als erwartet u ert In der Praxis findet man dieses Ph nomen bei Verwendung der Freelite Kits extrem selten Fragliche Proben sollten zun chst auf Vorliegen eines Antigen berschusses siehe Abschnitt 11 1 3 berpr ft und mit anderen Labormethoden wie z B Immunfixation oder Serumeiwei elektrophorese untersucht werden 11 1 5 Der Charakter monoklonaler Proteine kann in Immunoassays zu einem nicht linearen Verhalten f hren was m glicherweise in widerspr chlichen Ergebnissen resultiert Dies kann verhindert werden indem die Proben immer in der Reihenfolge 1 20 1 200 1 2000 1 20000 verd nnt werden Es sollte vermieden werden eine Verd nnung auszulassen 11 1 6 Aufgrund der hohen Variabilit t der monoklon
68. ue ceux indiqu s ne peut tre garantie Les r actifs des coffrets ayant des num ros de lots differents NE SONT PAS interchangeables Si de grandes s ries de tests doivent tre r alis es v rifier que tous les r actifs aient le m me num ro de lot La substitution de certains r actifs peut induire des r sultats incorrects 6 STOCKAGE ET STABILITE Le coffret non ouvert doit tre stock 2 8 C et ce jusqu la date de p remption figurant sur son tiquette NE PAS CONGELER Une fois reconstitu le r actif latex lambda libre humain est stable 5 jours s il est conserv 2 8 C Il est recommand d utiliser les flacons de r actif l un apr s l autre Le tampon doit tre laiss temp rature ambiante avant utilisation Une fois ouverts le tampon et les contr les sont stables 1 mois s ils sont conserv s 2 8 C 7 PRELEVEMENT ET PREPARATION DE L ECHANTILLON Utiliser du s rum frais ou congel Les s rums doivent tre pr lev s par ponction veineuse en laissant le caillot se former puis en s parant le s rum d s que possible afin d viter l hemolyse Les chantillons peuvent tre conserv s 2 8 C jusqu 21 jours avant les tests ou congel s a 20 C Pour une conservation prolong e ils doivent tre gardes a 20 C ou a une temp rature inf rieure Les cong lations d cong lations successives doivent tre vit es Les chantillons de s rums contamin s par des bact ries ou contenant des
69. uministrados en el kit han sido sometidos a tests de screening para donantes resultando negativos a la presencia del antigeno de superficie de la hepatitis B HBsAg y a la presencia de anticuerpos frente a los virus HIV1 HIV2 y HCV Las t cnicas usadas est n aprobadas por la FDA USA o aprobadas para el diagn stico in vitro en la UE Directiva 98 79 EC Anexo Il sin embargo dichos ensayos no garantizan la ausencia de agentes infecciosos Deben establecerse m todos de manipulaci n y eliminaci n adecuados para todos los materiales potencialmente infecciosos Use guantes y vestuario protector adecuado en todo momento al manipular este producto Los procedimientos deben ser accesibles s lo a personal experto y autorizado Insert Code VINO18 Version 21 September 2010 Page 7 of 9 Este producto contiene azida s dica y ProClin 300 y debe ser manipulados con precauci n No trague ni permita el contacto con la piel o las mucosas especialmente si hay heridas En caso de contacto lave con abundante agua y consulte a un m dico Con el plomo y el cobre pueden formarse azidas met licas explosivas Cuando se elimine el reactivo lave con mucha agua los recipientes para evitar la acumulaci n de azida El presente producto debe ser utilizado por personal especializado Se recomienda observar estrictamente el procedimiento indicado No se garantizan resultados v lidos obtenidos utilizando par metros diferentes que los indicados Los reactiv
70. ya manifestado exceso antig nico o c un resultado que no concuerde con los otros datos cl nicos o de laboratorio Insert Code VINO18 Version 21 September 2010 Page 8 of 9 11 1 4 Cada CLL contiene combinaciones nicas de amino cidos Por lo tanto es posible que algunas prote nas monoclonales sean indetectables por inmunoensayo teniendo como consecuencia mediciones inferiores a las esperadas En la pr ctica esto ocurre en raras ocasiones con el an lisis Freelite Primero se debe analizar si las muestras sospechosas contienen exceso antig nico ver secci n anterior 11 1 3 y posteriormente someterlas a an lisis adicionales inmunofijaci n y electroforesis de prote nas s ricas La naturaleza de las prote nas monoclonales puede ocasionar una respuesta no lineal en inmunoensayos pudiendo llevar a resultados inconsistentes esto se puede prevenir diluyendo siempre las muestras en la secuencia 1 20 1 200 1 2000 1 20000 Se debe evitar la omisi n de alg n paso de diluci n Debido a la naturaleza altamente variable de las prote nas monoclonales los reactivos de diferentes lotes podr an reaccionar de distintas formas a los ep topos en algunas muestras En estos casos los resultados podr an variar al usar multiples lotes Se debe extremar la precauci n al monitorizar pacientes con reactivos de lotes distintos Se recomienda siempre que sea posible que se analicen las muestras actuales y antiguas con los lotes nuevos y que

Change to insert re sensitivity added EFG (Sect 1)

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