TG Color GPO
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1. colorean el Reactivo aumentando los Blancos Las contaminaciones con glicerol producen resultados falsa mente aumentados PERFORMANCE a Reproducibilidad procesando simult neamente replica dos de las mismas muestras en 10 d as diferentes se obtu vieron los siguientes datos Nivel D S C V 1 14 g l 0 021 g l 1 82 7 41 g l 0 074 g l 2 11 b Recuperaci n agregando cantidades conocidas de trio le na a distintos sueros se obtuvo una recuperaci n entre 99 2 y 100 7 para todo el rango de linealidad del m todo c Linealidad la reacci n es lineal hasta 10 g l de triglic ri dos Para valores superiores repetir la determinaci n con muestra diluida 1 2 con soluci n fisiol gica Multiplicar el re sultado obtenido por la diluci n efectuada d L mite de detecci n depende del fot metro empleado En espectrofot metros el cambio m nimo de concentraci n detectable en las condiciones de reacci n descriptas para una variaci n de absorbancia de 0 001 D O ser aproxima damente de 0 008 g l PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS Para las instrucciones de programaci n debe consultarse el Manual del Usuario del Analizador en uso Para la calibraci n debe emplearse Calibrador A plus de Wiener lab de acuerdo a los requerimientos del analizador PRESENTACION 5x 20 ml C d 1780107 10 x 20 ml C d 1780101 4 x 50 ml C d 1780105 BIBLIOGRAFIA Fossati P Clin Chem 28 10 2077 1982. de Trabajo 1ml 1ml 1ml Mezclar incubar 5 minutos a 37 C o 20 minutos a tempe ratura ambiente 18 25 C Enfriar y leer en espectrofot metro a 505 nm o en fotocolor metro con filtro verde 490 530 nm llevando el aparato a cero con agua destilada ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL El color de reacci n final es estable 60 minutos por lo que la absorbancia debe ser le da dentro de este lapso CALCULO DE LOS RESULTADOS Corregir las lecturas con el Blanco de reactivos y usar las lecturas corregidas para los c lculos 2 g l S TG g l D x factor factor CONVERSION DE UNIDADES Triglic ridos g l 0 01 x Triglic ridos mg dl Triglic ridos mg dl x 0 0113 Triglic ridos mmol l METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad Stan datrol S E 2 niveles con concentraciones conocidas de tri glic ridos con cada determinaci n VALORES DE REFERENCIA El panel de expertos del National Cholesterol Education Program NCEP provee los siguientes valores de Triglic ridos Deseable lt 1 50 g l Moderadamente elevado a elevado 1 50 1 99 g l Elevado 2 00 4 99 g l Muy elevado gt 5 00 g l No obstante se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios intervalos o valores de referencia LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA Los reductores disminuyen la respuesta de color mientras que los oxidantes
3. 2 McGowan M W et al Clin Chem 29 3 538 1983 Tietz N W Fundamentals of Clin Chem W B Saunders Co Philadelphia Pa 1970 p g 329 Expert Panel of National Cholesterol Education Program JAMA 285 19 2486 2001 Young D S Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests AACC Press 4 ed 2001 870920022 00 p 2 9 S mbolos Los siguientes s mbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagn stico de Wiener lab Este producto cumple con los requerimientos pre vistos por la Directiva Europea 98 79 CE de pro ductos sanitarios para el diagn stico in vitro Representante autorizado en la Comunidad Eu ropea Uso diagn stico in vitro Contenido suficiente para lt n gt ensayos Fecha de caducidad L mite de temperatura conservar a No congelar Riesgo biol gico LOU TIxX lt vuO Volumen despu s de la reconstituci n O O 5 Contenido N mero de lote Q Elaborado por Nocivo Corrosivo Ca stico i x z Xi x lt Irritante L Consultar instrucciones de uso Calibrador Control Control Negativo b Control Positivo N mero de cat logo M Wiener Laboratorios S A 1 C Riobamba 2944 2000 Rosario Argentina nito Yaww doi ab com ar O Wi ir T c Viviana E C tola b pir Tao N iener lab Producto Autorizado A N M A T Cert N 2085 97 2000 Rosario Argentina 870920022 00 p 3 9 UR120607
4. C TG Color GPO PAP AA M todo enzim tico para la determinaci n de triglic ri dos en suero o plasma SIGNIFICACION CLINICA Los triglic ridos son l pidos absorbidos en la dieta y tambi n producidos en forma end gena a partir de los carbohidratos Su medici n es importante en el diagn stico y manejo de las hiperlipidemias Estas enfermedades pueden tener origen ge n tico o ser secundarias a otras tales como nefrosis dia betes mellitus y disfunciones end crinas El aumento de tri glic ridos se ha identificado como un factor de riesgo en en fermedades ateroscler ticas FUNDAMENTOS DEL METODO El esquema de reacci n es el siguiente lipoprotein lipasa triglic ridos gt glicerol cidos grasos glicerol kinasa glicerol ATP gt glicerol 1 P ADP glicerol 1 fosfato O gt H O dihidroxiacetonafosfato POD 2 H O 4 AF clorofenol gt quinonimina roja REACTIVOS PROVISTOS A Reactivo A viales conteniendo lipoprotein lipasa glicerol kinasa GK glicerol fosfato oxidasa GPO peroxidasa POD adenosina trifosfato ATP y 4 aminofenazona 4 AF B Reactivo B soluci n de buffer Good conteniendo clorofenol pH 7 5 S Standard soluci n de glicerol 2 26 mmol l equivale a 2 g l de triole na Concentraciones finales E e ae 50 mmol l pH 7 5 Cloro fenol E Sesan e ea R EAEG 2 mmol l lipoproteinilipas d sanitasi arnas gt 800 U I A E gt 500 U I GPO gt 1500
5. Recolecci n previo ayuno de 12 a 14 horas obtener sue ro o plasma Separar de los gl bulos rojos dentro de las 2 horas de extracci n b Aditivos en caso de emplear plasma se recomienda el uso de Anticoagulante W o heparina para su obtenci n c Sustancias interferentes conocidas los sueros con he m lisis intensa o marcadamente ict ricos producen resulta dos err neos por lo que no deben ser usados Referirse a la bibliograf a de Young para los efectos de las drogas en el presente m todo d Estabilidad e instrucciones de almacenamiento los triglic ridos en suero son estables 3 d as en refrigerador 2 10 C No congelar MATERIAL REQUERIDO no provisto Espectrofot metro o fotocolor metro Micropipetas y pipetas para medir los vol menes indicados Tubos o cubetas espectrofotom tricas Ba o de agua a 37 C Reloj o timer 870920022 00 p 1 9 CONDICIONES DE REACCION Longitud de onda 505 nm en espectrofot metro o 490 530 nm en fotocolor metro con filtro verde Temperatura de reacci n 37 C Tiempo de reacci n 5 minutos Volumen de muestra 10 ul Volumen de reactivo 1 ml Volumen final de reacci n 1 01 ml PROCEDIMIENTO Homogeneizar la muestra antes de usar especialmente frente a sueros lechosos En tres tubos o cubetas espectrofotom tricas marcadas B Blanco S Standard y D Desconocido colocar B S D Muestra Standard 10ul Reactivo
6. U I POD 2 900 U I ATP 2 mmol l A 0 4 mmol l REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab cuando se emplea la t c nica autom tica INSTRUCCIONES PARA SU USO Standard listo para usar Reactivo de Trabajo 5 10 x 20 ml agregar 20 ml de Reactivo B a un vial de Reactivo A Mezclar hasta disoluci n completa Homogeneizar y fechar 4 x 50 ml reconstituir el contenido de un vial de Reactivo A con una porci n de Reactivo B y luego transferir al frasco de Reactivo B enjuagando varias veces Homogeneizar y fechar PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagn stico in vitro Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de an lisis cl nicos Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos son estables en refrigerador 2 10 C hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja No mante ner atemperaturas elevadas durante lapsos prolongados Reactivo de Trabajo es estable 30 d as en refrigerador 2 10 C INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS El Reactivo de Trabajo puede presentar una coloraci n rosa da que no afecta su funcionamiento Lecturas del Blanco superiores a 0 160 D O o lecturas del Standard anormalmente bajas son indicios de deterioro del Reactivo En tal caso desechar MUESTRA Suero o plasma a
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