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EnVision™ FLEX Mini Kit, High pH, (Dako Autostainer/Autostainer

1. FLEX Wash Buffer 20x 1 L concentr 20x Solution saline de tampon Tris contenant du Tween 20 pH 7 6 0 1 EnVision FLEX EnVision FLEX Hematoxylin 10 x 13 mL pr t l emploi Solution aqueuse d h matoxyline EnVision FLEX Rabbit LINKER 3x 13 mL pr t l emploi Solution tampon contenant une prot ine stabilisante et un agent antimicrobien Contient suffisamment de r actif pour 110 a 165 tests sur la base de 200 a 300 uL par test EnVision FLEX Mouse LINKER 3x 13 mL pr t l emploi Solution tampon contenant une prot ine stabilisante et un agent antimicrobien Contient suffisamment de r actif pour 130 a 200 tests sur la base de 200 a 300 uL par test 1 Pour utilisateurs professionnels 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 14 29 Les produits EnVision FLEX HRP EnVision FLEX Mouse LINKER et EnVision FLEX Rabbit LINKER contiennent des substances d origine animale et on ne peut exclure le fait que des quantit s infimes de substances humaines puissent tre pr sentes en raison des proc dures de fabrication Comme avec tout produit d origine biologique respecter les proc dures de manipulation appropri es Ne pas exposer les produits EnVision FLEX DAB Chromogen EnVision FLEX Substrate Buffer ou EnVision FLEX Substrate Working Solution a une lumi re intense pendant la proc dure 4 EnvVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x et
2. FLEX Target Retrieval Solution bei Raumtemperatur 20 1 Minuten abk hlen lassen Die EnVision FLEX Target Retrieval Solution ausgie en und die Schnitte mit verd nntem EnVision FLEX Wash Buffer 20x bei Raumtemperatur 1 5 Minuten sp len Das Gestell mit den gesp lten Schnitten in das Dako Autostainer Autostainer Plus Ger t einsetzen Sofort mit dem vorprogrammierten F rbedurchlauf beginnen HINWEIS Bei Verwendung von Coplin Schalen f r das HIER Verfahren k nnen die verd nnte Target Retrieval Solution und der verd nnte Wash Buffer nur ein Mal verwendet werden Einmalgebrauch 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 27 29 Einige Epitope vertragen das HIER Verfahren nicht und andere erfordern enzymatische Vorbehandlung Angaben bitte der Packungsbeilage des jeweiligen prim ren Antik rpers von Dako entnehmen Die Gewebeschnitte d rfen weder w hrend der Behandlung noch w hrend des anschlie enden immunhistochemischen F rbevorgangs austrocknen F r eine bessere Haftung der Gewebeschnitte an den Glas Objekttr gern werden FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen B Arbeitsablauf des F rbens Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies k nnen mit dem Dako EnVision FLEX Nachweissystem auf formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitten verwendet werden Die Packungsbeilage der konzentrierten prim ren Antik rper enth lt Angaben zur Verd nnung konzentrierter prim rer Antik rper von D
3. langeant vigoureusement 1 goutte de EnVision FLEX DAB Chromogen DM827 par 1 mL de EnVision FLEX Substrate Buffer DM823 Utiliser la solution EnVision FLEX Substrate Working Solution dans les 5 jours conserver dans l obscurit entre 2 et 8 C Pr l vement et pr paration des chantillons Les chantillons peuvent tre des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine Le temps de fixation d pend du fixateur et du type de l paisseur du tissu Par exemple les blocs de tissu d une paisseur de 3 a 4 mm doivent tre fix s au formol neutre tamponn pendant 18 a 24 heures L paisseur optimale des coupes incluses en paraffine est d environ 4 um Les chantillons doivent tre mont s sur des lames de microscope par ex les lames FLEX IHC Microscope Slides r f K8020 Les coupes doivent tre mont es sur les lames aussi plates que possible et avec le moins de plis possible Trop de plis aurait un impact sur les r sultats de la coloration REMARQUE les lames de microscope doivent poss der une largeur adapt e l appareil Dako Autostainer Autostainer Plus Veuillez vous reporter au manuel de l op rateur de chaque appareil Dako pour la d finition des lames de microscope utilisables Les coupes en paraffine doivent tre mont es depuis un bain pr chauff contenant de l eau distill e ou d ionis e Le bain marie ne doit contenir aucun additif tel que de la g latine de la poly L lysin
4. r f K8016 contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosives Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 9 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 10 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conservation Conserver les r actifs EnVision FLEX et EnVision FLEX entre 2 et 8 C Conserver l h matoxyline EnVision FLEX Hematoxylin r f K8018 temp rature ambiante Ne pas utiliser apr s la date de p remption imprim e sur les flacons Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur La solution de travail du substrat pr par e doit tre conserv e dans l obscurit entre 2 et 8 C et utilis e dans les 5 jours suivant sa pr paration En cas de coloration inattendue ne pouvant tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et de suspicion d un probl me avec le produit contacter le service technique de Dako Pr paration des r actifs A 1 EnVisi
5. 1 sur un appareil PT Link la solution de d masquage des cibles dilu e ainsi que le tampon de lavage dilu peuvent tre utilis s 3 fois sur une p riode de 5 jours condition d tre conserv s temp rature ambiante Proc dure HIER l aide du PT Link Apr s un d paraffinage et une r hydratation dans un bain de tampon eau les coupes de tissus doivent tre soumises un d masquage d pitope induit par la chaleur HIER 1 2 Pr parer une solution de travail en diluant la solution de d masquage des cibles EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x concentr e au 1 50 me dans de l eau distill e ou d ionis e Remplir les cuves du PT Link avec une quantit de solution de travail suffisante 1 5 litres pour recouvrir les coupes de tissus R gler le PT Link afin de pr chauffer la solution a 65 D paraffiner et r hydrater manuellement les coupes de tissus mont es sur des lames de verre Pour une meilleure adh rence du tissu sur la lame il est recommand d utiliser des lames pr trait es ou silanis es Immerger les coupes de tissus se trouvant temp rature ambiante dans la solution de d masquage des cibles EnVision FLEX Target Retrieval Solution solution de travail pr chauff e et incuber a 97 pendant 20 a 40 minutes L utilisateur doit d terminer le temps d incubation optimal Laisser les coupes refroidir dans le PT Link jusqu 65 Retirer chaque portoir lames de
6. 5 G Optionalr agents 25338223 2 a des ana dpt ante ee ale 6 ai Le E 6 SI stele EG ne et nn Ein ee Eege Sege 8 Beagent Preparation 2 e eaer a a a HR akap aiana ein 8 Specimen Collection and Preparaton ss 9 lee IC 9 A Pre treatment procedure geed ds 9 ASE AAA O 10 TE EE 11 Interpretation of Results nant en a alo Edge ee E 11 LIMHATIONS EE RSR ES TR Ad ta A ee 11 Explanation of symbOls Her eek Hin tie mere me ser Niels nn 29 FRAN AIS Utilisation e ET 12 R sum t explicar dada e an eg eee 12 le EE EE 13 A Mat riel TOU EE 13 B Mat riel requis Mais non fourni 13 RE En Bee EE 14 Ile Le 14 CONSERVATION eegend eege a 16 Pr paration des TEC a EE 16 Pr l vement et pr paration des chantillons oooooooocccnnnnnnnicocccccnoccnnnaanccnoncnnonnanrnc cnn na nannann noo 17 Procedure id A A A A PE AS 17 A Proc dure de pr traitement nn 17 B Proc dure de coloratiON civil ias 19 Gontr l qualit s se ra ENEE 20 Interpr tation des r sultats sis 20 tu 20 Explication des Symboles inian nd tl nr each uge 29 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 2 29 DEUTSCH VerwendUngSzweek yiscscccsigeete sok ari IHRE airis clans 20 Verwendungszweck en ein ea ote ae ee eae OM caine UN eaten da 20 Zusammenfassung und Erkl rung 21 A A lod padi ae ia ee 21 A Mitgelieferte Materialien sie 21 B Erforderliches aber nicht mitgeliefertes Material 22 Opt
7. EnVision FLEX Rabbit LINKER Code K8019 may be applied for an optional signal amplification of rabbit primary antibodies For signal amplification when using mouse primary antibodies EnVision FLEX Mouse LINKER Code K8022 or included in Code K8012 may be applied As a guideline EnVision FLEX Rabbit LINKER provides 2 3 fold signal amplification and EnVision FLEX Mouse LINKER provides 4 5 fold signal amplification Dako EnVision FLEX HRP detection reagent DM822 in the kit consists of a dextran backbone to which a large number of peroxidase HRP molecules and secondary antibody molecules have been coupled A unique chemistry is used for the coupling reaction which permits the binding of up to 100 HRP molecules and up to 20 antibody molecules per backbone The substrate system in the kit consists of two components EnVision FLEX DAB Chromogen DM827 a concentrated diaminobenzidine DAB solution and EnVision FLEX Substrate Buffer DM823 containing hydrogen peroxide Before use EnVision FLEX DAB Chromogen must be diluted in EnVision FLEX Substrate Buffer The substrate system produces a crisp brown end product at the site of the target antigen EnVision FLEX Hematoxylin Code K8018 is recommended for counterstaining The reagent provides a clear blue nuclear staining 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 4 29 The stained tissue sections may be mounted with either aqueous or organic solvent
8. Enlever les v tements contamin s Laver les v tements contamin s avant r utilisation En cas d irritation cutan e consulter un m decin EN CAS DE CONTACT AVEC LES YEUX Rincer avec pr caution l eau pendant plusieurs minutes Enlever les lentilles de contact si la victime en porte et si elles peuvent tre facilement enlev es Continuer rincer Si Pirritation oculaire persiste consulter un m decin Une fiche technique de s curit destin e aux utilisateurs professionnels est disponible sur demande pour le produit EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent EnVision FLEX DAB Chromogen contient 1 5 de t trahydrochlorure de 3 3 diaminobenzidine et est d sign comme Danger H350 H341 P201 128355 001 Peut provoquer le cancer Susceptible d induire des anomalies g n tiques Se procurer les instructions avant utilisation P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 15 29 P202 Ne pas manipuler avant d avoir lu et compris toutes les dispositions de s curit P280 Porter des gants de protection Porter un quipement de protection des yeux ou du visage Porter des v tements de protection P308 P313 EN CAS d exposition prouv e ou suspenct e consulter un m decin P405 Garder sous clef P501 Eliminer le contenu et le r cipient en conformit avec toutes r glementations locales r gionales nationales et internationales 8 Le r actif en option EnVision FLEX Antibody Diluent
9. des temps de lavage comparables 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 19 29 Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es a temp rature ambiante Pour plus de d tails se reporter au Manuel de l op rateur sp cifique a l appareil Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l appareil Dako Autostainer Autostainer Plus utilis contacter le service technique de Dako Les temps d incubation optimaux de l anticorps primaire et du produit EnVision FLEX HRP d pendent de l anticorps primaire utilis Veuillez vous reporter la notice de chaque anticorps primaire Dako L utilisateur doit v rifier le protocole appliqu Une fois la proc dure de coloration termin e les chantillons doivent tre mont s Il est recommand de r aliser une d shydratation un claircissement et un montage permanent quand les lames ont subi une proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 Pour les lames ayant subi une proc dure HIER elles peuvent tre mont es avec un milieu de montage aqueux ou permanent Pour un montage aqueux un milieu de montage de type Dako Glycergel Mounting Medium r f CO563 ou Faramount Aqueous Mounting Medium r f S3025 est recommand Contr le qualit Chaque cycle de coloration doit comprendre un chantillon de contr le positif connu pour v rifier la bonne performance de tous les r actifs appliqu s Si l chantillon de contr le positif ne pr sente pas de coloration posi
10. instruments when using the protocol recommended in this package insert Prior to staining formalin fixed paraffin embedded tissue sections should be subjected to deparaffinization and hydration followed by heat induced epitope retrieval HIER using the target retrieval method specified in the package insert for the primary antibody Please also see Procedure section for 3 in 1 specimen preparation Code K8024 includes EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 Alternatively EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8004 or EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code K8005 is recommended Some primary antibodies require enzymatic pre treatment of tissue for optimal staining instead of HIER Endogenous peroxidase should be blocked with EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent DM821 included in the kit Due to an effective washing procedure and the presence of stabilizing proteins in the Dako reagents extra blocking steps to reduce non specific background staining are unnecessary EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 included in the kit or available as optional reagent Code K8007 is recommended Primary antibodies are not provided with the kit We recommend the use of Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies or Dako concentrated Primary Antibodies EnVision FLEX Antibody Diluent Code K8006 is recommended for the dilution of Dako concentrated Primary Antibodies
11. ionis e jusqu au trait indiqu ligne de remplissage La solution dilu e non utilis e peut tre conserv e entre 2 et 8 pe ndant un mois Jeter la solution si elle semble trouble Quand on l utilise sur un appareil PT Link pour une proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 la solution dilu e peut tre r utilis e 3 fois sur une p riode de 5 jours si elle est conserv e a temp rature ambiante 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 16 29 A 3 EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 r f K8007 Diluer une quantit suffisante de EnVision FLEX Wash Buffer 20x au 1 20 amp me en utilisant de l eau distill e ou d ionis e pour la proc dure de coloration pr vue Diluer en ajoutant le tampon de lavage concentr a une quantit pr mesur e d eau distill e ou d ionis e afin de minimiser la formation de mousse M langer doucement jusqu ce que la solution dilu e apparaisse homog ne La solution dilu e non utilis e peut tre conserv e entre 2 et 8 pendant un mois Jeter la solution si elle sem ble trouble Quand on l utilise sur un appareil PT Link pour une proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 la solution dilu e peut tre r utilis e 3 fois sur une p riode de 5 jours si elle est conserv e a temp rature ambiante A 4 EnVision FLEX Substrate Working Solution La solution de travail du substrat EnVision FLEX Substrate Working Solution contenant de la DAB est pr par e en m
12. la cuve du PT Link et plonger imm diatement les lames dans un r cipient une cuve par ex PT Link Rinse Station r f PT109 contenant du tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu et temp rature ambiante Laisser les lames dans le tampon EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu et a temp rature ambiante pendant 1 5 minutes Placer les lames sur un appareil Dako Autostainer Autostainer Plus et proc der a la coloration Les coupes ne doivent pas s cher lors du traitement ni pendant la proc dure de coloration immunohistochimique 10 Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 18 29 REMARQUE lors d une utilisation pour une proc dure HIER sur un appareil PT Link la solution de d masquage des cibles dilu e ainsi que le tampon de lavage dilu peuvent tre utilis s 3 fois sur une p riode de 5 jours a condition d tre conserv s a temp rature ambiante Proc dure HIER utilisant des cuves de Coplin Apr s un d paraffinage et une r hydratation dans un bain de tampon eau les coupes de tissus doivent tre soumises a un d masquage d pitope induit par la chaleur HIER 1 Placer les cuves de coloration contenant le produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x dilu dans un bain marie 2 Porter le bain marie et les cuves remplies de produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution solution de travail 9
13. la proc dure de coloration immunohistochimique qui s ensuit Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides r f K8020 B Proc dure de coloration Les anticorps Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies peuvent tre utilis s avec le syst me de d tection Dako EnVision FLEX appliqu sur des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine Une directive de dilution pour les anticorps primaires concentr s Dako est fournie dans la notice de l anticorps primaire concentr Les anticorps primaires concentr s doivent tre dilu s dans le diluant EnVision FLEX Antibody Diluent DM830 r f K8006 Les tapes de coloration et les temps d incubation sont pr programm s dans le logiciel des appareils Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEX_ 200 volume d application de 200 uL ou FLEX_ 300 volume d application de 300 uL Pour les cycles de coloration utiliser les programmes automatis s suivants FLEX protocole FLEX FLEX_Mo protocole FLEX Mouse LINKER FLEX_Rb protocole FLEX Rabbit LINKER L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration comptant 10 lames ou moins de 10 lames Pour les cycles de coloration comptant 10 lames ou plus l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela garantit
14. procedure 10 After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium NOTE When used in PT Link for HIER procedure the diluted Target Retrieval Solution and diluted Wash Buffer can be used 3 times within a 5 day period if stored at room temperature HIER procedure using Coplin jars After deparaffinization and hydration to buffer water tissue sections should be subjected to heat induced epitope retrieval HIER 1 Place staining jars containing diluted EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x in water bath 2 Heat water bath and jars filled with EnVision FLEX Target Retrieval Solution working solution to 95 99 Cover jars with lids to stabilize the temperature and avoid evaporation 3 Immerse the room temperature sections in the preheated EnVision FLEX Target Retrieval Solution working solution in the staining jars 4 Bring temperature of the water bath and EnVision FLEX Target Retrieval Solution back to 95 99 Incubate for 20 1 minutes at 95 99 5 Remove the entire jar with slides from the water bath Allow slides to cool in the EnVision FLEX Target Retrieval Solution for 20 1 minutes at room temperature 6 Decant the EnVision FLEX Target Retrieval Solution and rinse sections with the diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x for 1 5 minutes 7 Place the rack with rinsed sections in a Dako Autostainer Autostainer Plus instrument Imm
15. von prim ren Kaninchen Antik rpern eingesetzt werden Bei der Verwendung von primaren Maus Antik rpern kann zur Verst rkung des Signals EnVision FLEX Mouse LINKER Code Nr K8022 oder in Code Nr K8012 enthalten eingesetzt werden Als Richtwert EnVision FLEX Rabbit LINKER liefert zwei bis dreifache Signalverst rkung EnVision FLEX Mouse LINKER vier bis f nffache Signalverstarkung Dako EnVision FLEX HRP Detection Reagent DM822 im Kit besteht aus einem Dextran Backbone an den zahlreiche Peroxidase HRP Molek le und Molek le sekundarer Antik rper gekoppelt sind Die Kopplungsreaktion besteht aus einer einzigartigen chemischen Reaktion die es erm glicht pro Backbone bis zu 100 HRP Molek le und bis zu 20 Antik rper Molek le zu binden Das Substratsystem im Kit besteht aus zwei Komponenten EnVision FLEX DAB Chromogen DM827 einer konzentrierten Diaminobenzidinl sung DAB L sung und dem wasserstoffperoxidhaltigen EnVision FLEX Substrate Buffer DM823 Vor der Anwendung muss EnVision FLEX DAB Chromogen mit EnVision FLEX Substrate Buffer verd nnt werden Das Substratsystem f hrt zu einem kontrastreichen braunen Endprodukt am Ort des Zielantigens Zur Gegenfarbung wird EnVision FLEX Hematoxylin Code Nr K8018 empfohlen Dieses Reagenz ruft eine deutliche Blaufarbung der Zellkerne hervor Fur die Fixierung der gefarbten Gewebeschnitte eignen sich sowohl Fixiermittel auf wassriger Basis al
16. 15 04 p 17 29 Remplir les cuves du PT Link avec une quantit de solution de travail suffisante 1 5 litres pour recouvrir les coupes de tissus R gler le PT Link afin de pr chauffer la solution a 65 Immerger les coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine mont es dans la solution de d masquage des cibles EnVision FLEX Target Retrieval Solution solution de travail pr chauff e contenue dans les cuves du PT Link et incuber 97 pendant 20 a 40 minutes L utilisateur doit d terminer le temps d incubation optimal Laisser les coupes refroidir dans le PT Link jusqu 65 Retirer chaque portoir lames Autostainer contenant les lames de la cuve du PT Link et plonger imm diatement les lames dans un r cipient une cuve par ex PT Link Rinse Station r f PT109 contenant du tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu et a temp rature ambiante Laisser les lames dans le tampon EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu et a temp rature ambiante pendant 1 5 minutes Placer les lames sur un appareil Dako Autostainer Autostainer Plus et proc der la coloration Les coupes ne doivent pas s cher lors du traitement ni pendant la proc dure de coloration immunohistochimique Apr s coloration il est recommand d effectuer une d shydratation un claircissement et un montage permanent REMARQUE lors d une utilisation pour une proc dure de pr paration des chantillons 3 en
17. 165 tests based on the use of 200 300 uL per test EnVision FLEX Mouse LINKER 3 x 13 mL ready to use Buffered solution containing stabilizing protein and an antimicrobial agent Contains reagent sufficient for 130 200 tests based on the use of 200 300 uL per test 1 For professional users 2 EnVisionTM FLEX HRP EnVision FLEX Mouse LINKER and EnVision FLEX Rabbit LINKER contain material of animal origin and it cannot be excluded that trace amounts of human material could be present due to manufacturing procedures As with any product derived from biological sources proper handling should be used 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 6 29 3 Do not expose EnVision FLEX DAB Chromogen EnVision FLEX Substrate Buffer or the EnVision FLEX Substrate Working Solution to strong light during the procedure 4 EnVision M FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x and EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x contain 5 lt 10 Nonoxinol and are labeled Warning H319 Causes serious eye irritation H411 Toxic to aquatic life with long lasting effects P280 Wear eye or face protection P273 Avoid release to the environment P264 Wash hands thoroughly after handling P305 P351 IF IN EYES Rinse cautiously with water for several minutes Remove P338 contact lenses if present and easy to do Continue rinsing P337 P313 If eye irritation persists Get medical attention P501 Dispose of con
18. 338 P337 P313 P501 Freisetzung in die Umwelt vermeiden Nach Gebrauch H nde gr ndlich waschen BEI KONTAKT MIT DEN AUGEN Einige Minuten lang behutsam mit Wasser aussp len Eventuell Vorhandene Kontaktlinsen nach M glichkeit entfernen Weiter aussp len Bei anhaltender Augenreizung rztliche Hilfe hinzuziehen Inhalt und Beh lter in bereinstimmung mit allen lokalen regionalen nationalen und internationalen Gesetzen entsorgen 5 EnVisionTM FLEX Wash Buffer 20x enth lt 10 30 2 Amino 2 hydroxymethyl propan 1 3 diolhydrochlorid und ist wie folgt genkennzeichnet Achtung H319 H315 P280 P264 P302 P352 P362 2 P363 P332 P313 P305 P351 P338 P337 P313 Verursacht schwere Augenreizung Verursacht Hautreizungen Schutzhandschuhe tragen Augenschutz oder Gesichtsschutz tragen Nach Gebrauch H nde gr ndlich waschen BEI BERUHRUNG MIT DER HAUT Mit reichlich Wasser und Seife waschen Kontaminierte Kleidung ausziehen Kontaminierte Kleidung vor erneutem Tragen waschen Bei Hautreizung arztliche Hilfe hinzuziehen BEI KONTAKT MIT DEN AUGEN Einige Minuten lang behutsam mit Wasser aussp len Eventuell Vorhandene Kontaktlinsen nach M glichkeit entfernen Weiter aussp len Bei anhaltender Augenreizung rztliche Hilfe hinzuziehen 6 F r EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent steht auf Anfrage f r professionelle Benutzer ein Sicherheitsdatenblatt zur Verf gung 7 EnvVision FL
19. 5 99 Couvrir les cuves pour stabiliser la temp rature et viter toute vaporation 3 Immerger les coupes se trouvant a temp rature ambiante dans la solution de d masquage des cibles EnVision FLEX Target Retrieval Solution solution de travail pr chauff e contenue dans les cuves de coloration 4 Porter de nouveau le bain marie et le produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution a 95 99 Incuber pendant 20 minutes 1 minute a 95 99 5 Retirer la cuve contenant les lames du bain marie Laisser les lames refroidir dans le produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution pendant 20 minutes 1 minute a temp rature ambiante 6 Vider le produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution et rincer les coupes l aide du produit EnVision FLEX Wash Buffer 20x dilu et temp rature ambiante pendant 1 5 minutes 7 Placer le portoir contenant les coupes rinc es dans un appareil Dako Autostainer Autostainer Plus Lancer imm diatement le cycle de coloration pr programm REMARQUE lors d une proc dure HIER avec des cuves de Coplin n utiliser la solution de d masquage des cibles dilu e ainsi que le tampon de lavage dilu qu une seule fois usage unique Certains pitopes ne tol rent pas la proc dure HIER et requi rent un pr traitement enzymatique Veuillez vous reporter a la notice de chaque anticorps primaire Dako Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni pendant
20. Dako Autostainer Autostainer Plus einsetzen und mit der F rbung fortfahren Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Fixiermittel fixieren HINWEIS Bei Verwendung im PT Link f r das HIER Verfahren k nnen die verd nnte Target Retrieval Solution und der verd nnte Wash Buffer 3 Mal innerhalb von 5 Tagen verwendet werden wenn sie bei Raumtemperatur gelagert werden HIER Arbeitsverfahren mit Coplin K vetten Nach der Entparaffinierung und Rehydrierung mit Puffer Wasser ist bei den meisten Gewebeschnitten eine hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER erforderlich 1 2 Die F rbeschalen mit verd nnter EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x in ein Wasserbad stellen Die Schalen mit der EnVision FLEX Target Retrieval Solution Arbeitsl sung im Wasserbad auf 95 99 erw rmen Zur Temperaturstabilisierung und zum Vermeiden von Verdunstung die Schalen mit Deckeln abdecken Die auf Raumtemperatur gebrachten Gewebeschnitte in die vorgew rmte EnVision FLEX Target Retrieval Solution Arbeitsl sung in den F rbeschalen eintauchen Die Temperatur von Wasserbad und EnVision FLEX Target Retrieval Solution wieder auf 95 99 bringen 20 1 Minuten bei 95 99 inku bieren Die Schale mit den Objekttr gern aus dem Wasserbad nehmen Die Objekttr ger in der EnVision
21. EX Mouse LINKER r f K8022 ou inclus dans la r f rence K8012 peut tre appliqu pour obtenir une amplification du signal lorsque des anticorps primaires de souris sont utilis s De mani re g n rale le produit EnVision FLEX Rabbit LINKER fournit une amplification du signal de 2 a 3 fois et le produit EnVision FLEX Mouse LINKER fournit une amplification du signal de 4 a 5 fois Le r actif de d tection Dako EnVision FLEX HRP DM822 du kit se compose d une chaine de dextrane sur laquelle un grand nombre de mol cules de peroxydase HRP et de mol cules d anticorps secondaire ont t coupl es Une seule r action chimique est utilis e pour la r action de couplage ce qui permet la liaison de 100 mol cules de HRP maximum et de 20 mol cules d anticorps maximum par chaine Le syst me du substrat contenu dans le kit est form de deux composants le produit EnVision FLEX DAB Chromogen DM827 une solution de diaminobenzidine DAB concentr e et le tampon EnVision FLEX Substrate Buffer DM823 contenant du peroxyde d hydrog ne Avant emploi le EnVision FLEX DAB Chromogen doit tre dilu dans le tampon substrat EnVision FLEX Substrate Buffer Le syst me du substrat forme un produit brun vif sur le site de l antig ne cible 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 12 29 L h matoxyline EnVision FLEX Hematoxylin r f K8018 est recommand e pour la contre coloration Le r actif p
22. EX DAB Chromogen enth lt 1 5 3 3 Diaminobenzidin Tetrahydrochlorid und ist wie folgt gekennzeichnet Gefahr H350 H341 P201 P202 P280 P308 P313 P405 P501 Kann Krebs erzeugen Kann vermutlich genetische Defekte verursachen Vor Gebrauch besondere Anweisungen einholen Vor Handhabung s mtliche Sicherheitsratschl ge lesen und verstehen Schutzhandschuhe tragen Augenschutz oder Gesichtsschutz tragen Schutzkleidung tragen S BEI Exposition oder falls betroffen Arztliche Hilfe anfordern Unter Verschluss aufbewahren Inhalt und Beh lter in bereinstimmung mit allen lokalen regionalen nationalen und internationalen Gesetzen entsorgen 8 Das optionale Reagenz EnVision FLEX Antibody Diluent Code Nr K8016 enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Ansammlungen von Natriumazid k nnen auch in Konzentrationen die nicht als gef hrlich klassifiziert sind mit Blei und Kupferabflussrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Azidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 9 Entsprechende Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 10 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 24 29 Lagerung EnVision FLEX und EnVision FLEX Reagenzien bei 2 8 lagern EnVision FLEX Hematoxylin Cod
23. EX Target Retrieval Solution High pH 50x 1 50 using distilled or deionised water for the staining procedure that is planned Unused diluted solution may be stored at 2 8 C for one month If Dako PT Link is used for pre treatment dilution can be performed by emptying the content of the Target Retrieval Solution 50x vial into the Dako PT Link tank and adding distilled or deionised water to the marked line Fill Line Discard solution if cloudy in appearance When used in PT Link for 3 in 1 specimen preparation procedure the diluted solution can be used 3 times within a 5 day period if stored at room temperature A 2 EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x DM829 Code K8005 Dilute a sufficient quantity of EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x 1 50 using distilled or deionised water for the staining procedure that is planned If Dako PT Link is used for pre treatment dilution can be performed by emptying the content of the Target Retrieval Solution 50x vial into the Dako PT Link tank and adding distilled or deionised water to the marked line Fill Line Unused diluted solution may be stored at 2 8 C for one month Discard solution if cloudy in appearance When used in PT Link for 3 in 1 specimen preparation procedure the diluted solution can be used 3 times within a 5 day period if stored at room temperature A 3 EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 Code K8007 Dilute a sufficient quantity of EnVi
24. EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x contiennent 5 a moins de 10 de nonoxinol et sont d sign comme Attention H319 H411 P280 P273 P264 P305 P351 P338 P337 P313 P501 Provoque une s v re irritation des yeux Toxique pour les organismes aquatiques entraine des effets n fastes a long terme Porter un quipement de protection des yeux ou du visage viter le rejet dans l environnement Se laver les mains soigneusement apr s manipulation EN CAS DE CONTACT AVEC LES YEUX Rincer avec pr caution l eau pendant plusieurs minutes Enlever les lentilles de contact si la victime en porte et si elles peuvent tre facilement enlev es Continuer rincer Si Pirritation oculaire persiste consulter un m decin Eliminer le contenu et le r cipient en conformit avec toutes r glementations locales r gionales nationales et internationales 5 EnVision FLEX Wash Buffer 20x contient 10 30 2 Amino 2 hydroxym thyl propane 1 3 diol chlorhydrate et est d sign comme Attention H319 H315 P280 P264 P302 P352 P362 2 P363 P332 P313 P305 P351 P338 P337 P313 Provoque une s v re irritation des yeux Provoque une irritation cutan e Porter des gants de protection Porter un quipement de protection des yeux ou du visage Se laver les mains soigneusement apr s manipulation EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU laver abondamment l eau et au savon
25. Link f r die 3 in1 Probenvorbereitung kann die verd nnte L sung 3mal innerhalb von 5 Tagen verwendet werden wenn sie bei Raumtemperatur gelagert wird AA EnVision FLEX Substrate Working Solution Die DAB haltige EnVision FLEX Substrate Working Solution wird durch gr ndliches Mischen von 1 Tropfen EnVision FLEX DAB Chromogen DM827 und 1 mL EnVision FLEX Substrate Buffer DM823 angesetzt Die EnVision FLEX Substrate Working Solution innerhalb von 5 Tagen verbrauchen bei 2 8 im Dunkeln aufbewahren Entnahme und Vorbereitung der Probe Als Proben kommen formalinfixierte paraffineingebettete Gewebeschnitte in Betracht Die Fixation h ngt von Art Dicke des Fixationsmittels und des Gewebes ab Zum Beispiel sollten Gewebebl cke mit einer Dicke von 3 4 mm in neutral gepuffertem Formalin 18 24 Stunden fixiert werden 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 25 29 Die optimale Dicke paraffineingebetteter Schnitte betragt etwa 4 um Die Proben sollten auf Objekttrager zum Beispiel FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 aufgebracht werden Die Schnitte so flach und faltenfrei wie m glich auf den Objekttr gern aufbringen Zu viele Falten wirken sich negativ auf die F rbungsergebnisse aus HINWEIS Die Gr e der Objekttr ger muss zum Dako Ger t passen Angaben zu geeigneten Mikroskop Objekttr gern bitte dem Bedienungshandbuch des jeweiligen Dako Ger ts entnehmen Paraffineingebettete Schnitte sollten aus
26. O CE EnVision FLEX Mini Kit High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8024 3rd edition 3 me dition 3 Ausgabe The kit contains reagents sufficient for 125 190 tests For Dako Autostainer Autostainer Plus Les r actifs contenus dans ce kit permettent d effectuer 125 a 190 tests Pour Dako Autostainer Autostainer Plus Die in diesem Kit enthaltenen Reagenzien sind ausreichend f r 125 190 Tests Fur Dako Autostainer Autostainer Plus Optional reagents R actifs en option Optionale Reagenzien Code K8004 K8005 K8006 K8007 K8018 K8019 K8022 Product name Nom du produit Produktname EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x EnVision FLEX Antibody Diluent EnVision FLEX Wash Buffer 20x EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus EnVision FLEX Rabbit LINKER Dako Autostainer Autostainer Plus EnVision FLEX Mouse LINKER Dako Autostainer Autostainer Plus Other options Autres options Andere Optionen K8020 128355 001 FLEX IHC Microscope Slides Tests 200 430 200 430 400 600 400 600 120 190 120 190 500 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 1 29 Contents Table des mati res Inhalt Page Page Seite ENGLISH utile ERR EE 4 summary and Rei ue EE 4 REAGENTS a2 A EE Te en 5 A Materials provided E 5 B Materials required but not provided
27. ako Die konzentrierten prim ren Antik rper sollten nur mit EnVision FLEX Antibody Diluent DM830 Code Nr K8006 verd nnt werden Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEX_200 200 uL Abgabevolumen oder FLEX_300 300 uL Abgabevolumen Auto Programme fiir Farbedurchlaufe FLEX FLEX Protokoll FLEX_Mo FLEX Mouse LINKER Protokoll FLEX_Rb FLEX Rabbit LINKER Protokoll Bei Farbedurchlaufen mit h chstens 10 Objekttragern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dies gewahrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Autostainer Plus Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Inkubationszeiten f r den prim ren Antik rper und EnVision FLEX HRP h ngen vom verwendeten prim ren Antik rper ab Angaben bitte der Packungsbeilage des jeweiligen prim ren Antik rpers von Dako entnehmen Die Verifizierung des verwendeten Protokolls obliegt dem Anwender Nach Abschluss des F rbeverfahrens m ssen
28. based mounting medium Reagents A Materials provided D M 82 1 EnVision FLEX PEROXIDASE BLOCKING REAGENT EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent 3 x 13 mL ready to use Phosphate buffer containing hydrogen peroxide 15 mmol L NaN and detergent Ge EnVision FLEX HRP 3 x 13 mL ready to use Dextran coupled with peroxidase molecules and goat secondary antibody molecules against rabbit and mouse immunoglobulins In buffered solution containing stabilizing protein and preservative DM827 EnVision FLEX DAB Chromogen 1x3mL 3 3 diaminobenzidine tetrahydrochloride in organic solvent The color of this reagent may vary from strong violet to colorless without having any influence on the performance of the kit DUREE EnVision FLEX Substrate Buffer 7X13 mL Buffered solution containing hydrogen peroxide and preservative DM828 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 3 x 30 mL 50x concentrated Tris EDTA buffer pH 9 DM831 EnVision FLEX 9X WASH BUFFER EnVision FLEX Wash Buffer 20x 2 x 1 L 20x concentrated Tris buffered saline solution containing Tween 20 pH 7 6 0 1 B Materials required but not provided Dako Autostainer Autostainer Plus instrument Dako PT Link Dako Proteinase K Ready to Use if necessary Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies or suitably diluted concentrated primary rabbit or mouse a
29. c dure optimale doit tre d termin e et v rifi e par l utilisateur moins qu elle soit sp cifi e dans la notice de l anticorps primaire sp cifique de Dako Des modifications apport es la proc dure peuvent avoir une influence sur le nombre de tests que le kit permet d effectuer DEUTSCH Verwendungszweck Zur In vitro Diagnostik Das Dako EnVision FLEX Nachweissystem ist f r immunhistochemische Verfahren mit Dako Autostainer Autostainer Plus Geraten bestimmt Das System weist primare Maus und Kaninchen Antik rper nach und stellt die Reaktion mittels EnVision FLEX DAB Chromogen dar Durch Verwendung von EnVision FLEX Rabbit LINKER Code Nr K8019 bzw EnVision FLEX Mouse LINKER Code Nr 8022 k nnen die Signale der prim ren Maus bzw Kaninchenantik rper verst rkt werden Die EnVision FLEX Reagenzien sind zur Verwendung auf formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitten vorgesehen 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 20 29 Zusammenfassung und Erkl rung Das Dako EnVision FLEX Nachweissystem wurde als flexibles System konzipiert das bei Verwendung des in dieser Packungsbeilage angegebenen Protokolls optimale Farbeergebnisse auf Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten liefert Vor der F rbung m ssen die formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte einer Entparaffinierung und Rehydrierung gefolgt von hitzeinduzierter Epitopdemaskierung HIER mit der in der Packung
30. derlich Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies oder entsprechend verd nnte konzentrierte prim re Kaninchen bzw Mausantik rper von Dako Dako FLEX Ready to Use Rabbit oder Mouse Universal Negative Control oder anderes geeignetes Negativkontrollreagenz f r den prim ren Antik rper Zubeh r f r Dako Ger te Objekttr ger z B FLEX IHC Microscope Slides Fur die Entparaffinierung bei paraffineingebetteten Gewebeschnitten gebrauchliche Laborreagenzien Fixiermittel wassrig oder auf Basis organischer L sungsmittel und Deckglaser C Optionale Reagenzien K8004 TARGET RETRIEVAL SOLUTION DM828 HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 3 x 30 mL 50fach konzentriert Tris EDTA Puffer pH 9 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 22 29 K8005 DM829 K8006 DM830 K8007 DM831 K8018 DM826 K8019 DM825 K8022 SM824 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION LOW pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x 3 x 30 mL 50fach konzentriert Q gt Di v lt oO TD I ep EnVision FLEX Antibody Diluent 120 mL gebrauchsfertig Tris Puffer pH 7 2 mit 15 mmol L NaN und Protein EnVision FLEX WASH BUFFER 20x EnVision FLEX Wash Buffer 20x 1 L 20fach konzentriert Tris gepufferte Kochsalzl sung mit Tween 20 pH 7 6 0 1 HEMATOXYLIN EnVision FLEX Hematoxylin 10 x 13 mL gebrauchsfertig W ssrige H matoxylinl
31. die Proben fixiert werden Es wird empfohlen eine Dehydrierung Reinigung und permanente Fixierung durchzuf hren wenn Objekttr ger mit der 3 in 1 Probenvorbereitung behandelt wurden Mit dem HIER Verfahren behandelte Objekttr ger k nnen mit einem w ssrigen oder permanenten Fixiermittel fixiert werden Zur Fixierung in w ssrigem Medium werden Fixiermittel wie Dako Glycergel Mounting Medium Code Nr C0563 oder Faramount Aqueous Mounting Medium Code Nr S3025 empfohlen Qualit tskontrolle Bei jedem F rbedurchlauf sollte eine als positiv bekannte Kontrollprobe mitgef hrt werden um die Leistung aller verwendeten Reagenzien zu best tigen Wenn das positive Kontrollgewebe keine F rbung aufweist muss die Markierung der Testproben f r ung ltig erkl rt werden Zum Ausschluss einer unspezifischen F rbung sollte ferner stets eine Negativkontrolle mitlaufen Ist die unspezifische F rbung nicht eindeutig von der spezifischen F rbung zu unterscheiden muss die Markierung der Testproben f r ung ltig erkl rt werden Auswertung der Ergebnisse Die Diaminobenzidin enthaltende Substrat Arbeitsl sung erzeugt am Ort des vom prim ren Antik rper erkannten Zielantigens ein braunes Endprodukt Die Braunf rbung muss am erwarteten Ort des Zielantigens auf der Positivkontrolle vorhanden sein 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 28 29 Eine unspezifische Farbung stellt sich als eher diffuse Braunf rbung der mit der Negativkontrolle b
32. e etc Les coupes doivent tre s ch es en les chauffant en g n ral une temp rature ne d passant pas 60 C pendant 60 minutes maximum Pour garantir une bonne adh rence des coupes aux lames il est important d goutter l eau se trouvant sous les coupes avant de passer la proc dure de s chage dans une tuve Proc dure Les appareils Dako Autostainer Autostainer Plus utilisent des techniques bas es sur diff rents principes afin d obtenir un r sultat de coloration optimal Avant d ex cuter des protocoles sur votre appareil Dako Autostainer Autostainer Plus veuillez lire attentivement le Manuel de l op rateur sp cifique l appareil Dako utilis Pour assurer un d masquage des pitopes reproductible il est recommand de toujours remplir compl tement le portoir lames Ceci assure un chauffage identique des coupes lors de chaque cycle A Proc dure de pr traitement Proc dure 3 en 1 recommand e pour la pr paration des chantillons l aide du PT Link Le d paraffinage la r hydratation et le d masquage d pitope induit par la chaleur HIER peuvent tre r alis s sur des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine en utilisant la proc dure 3en1 1 Pr parer une solution de travail en diluant la solution de d masquage des cibles EnVision FLEX Target Retrieval Solution concentr e au 1 50 me dans de l eau distill e ou d ionis e 128355 001 P04139EFG_01_K8024 20
33. e Fabricant 4 Stee pour lt n gt tests diagno sticin vitro A Hersteller F hhalt ausreichend In vitro Diagn ostikum fir lt n gt Tests GHS hazard pictogram Consult instructions con sult precautions section foruse Consulter les Batch code eech de TR instructions LOT Code du lot Maria Section dutlisation Charge nbe zeichnung Pr caution s d emploi GHS Gefahrensymbol siehe Abschnitt zu den Siche rhe itsh inw eise n The Dako EnVision Systems are covered by U S Patent 5 543 332 and European Patent 594 772 Les systemes Dako EnVision sont couverts par le brevet am ricain 5 543 332 et le brevet europ en 594 772 Die Dako EnVision Systeme sind durch folgende Patente geschitzt US Patent 5 543 332 und Europaisches Patent 594 772 Produced by Produit par Hersteller Dako North America Inc Produced for Produit pour Produziert f r Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Danemark Danemark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 29 29
34. e Nr K8018 im Dunkeln bei Raumtemperatur lagern Nach Ablauf des auf den Flaschchen aufgedruckten Verfallsdatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien anders als entsprechend den in der Packungsbeilage angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen die Bedingungen vom Anwender verifiziert werden Die fertige Substrat Arbeitsl sung im Dunkeln bei 2 8 C aufbewahren und innerhalb von 5 Tagen verbrauchen Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Produkt hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Reagenzvorbereitung A 1 EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 Code Nr K8004 Eine f r das geplante Farbeverfahren ausreichende Menge EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x mit destilliertem oder entionisiertem Wasser im Verh ltnis 1 50 verd nnen Unverbrauchte verd nnte L sung kann bei 2 8 einen Monat lang aufbewahrt werden Wenn Dako PT Link zur Vorbehandlung genutzt wird kann die Verd nnung durch berf hren des Inhalts des Flaschchens Target Retrieval Solution 50x in den Dako PT Link Tank und Hinzuf gen von destilliertem oder deionisiertem Wasser bis zur Markierung Fill Line erfolgen Getr bte L sung verwerfen Bei Verwendung im PT Link f r die 3 in1 Probenvorbereitung kann die verd nnte L sung 3mal innerhalb von 5 Tagen verwendet werden wenn sie bei Raumtemp
35. ediately begin the pre programmed staining run NOTE When used in Coplin jars HIER procedure the diluted Target Retrieval Solution and diluted Wash Buffer can be used only 1 time single use A few epitopes do not tolerate the HIER and some require enzymatic pre treatment Please refer to the package insert for the individual Dako primary antibody The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohisto chemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended B Staining procedure Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies can be used with Dako EnVision FLEX detection system applied on formalin fixed paraffin embedded tissue sections 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 10 29 A dilution guideline for Dako concentrated primary antibodies is provided in the package insert of the concentrated primary antibody The concentrated primary antibodies should be diluted in EnVision FLEX Antibody Diluent DM830 Code K8006 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEX_200 200 uL dispense volume or FLEX_300 300 uL dispense volume Autoprograms for staining runs FLEX FLEX protocol FLEX_Mo FLEX Mouse LINKER protocol FLEX_Rb FLEX Rabbit LINKER
36. ehandelten Objekttrager dar Zellkerne werden durch die Hamatoxylin Gegenfarbung blau gefarbt Einschrankungen 1 Nur f r die automatisierte Benutzung in Autostainer Ger ten Falls das Farben manuell durchgef hrt wird muss der optimale Arbeitsablauf vom Benutzer ermittelt und festgelegt werden solange dieser nicht in der Packungsbeilage f r den spezifischen Dako Primary Antibody beschrieben ist 2 Nur zur Benutzung mit formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitten Bei der Benutzung gefrorener Gewebeschnitte oder Zellabstriche muss der optimale Arbeitsablauf vom Benutzer ermittelt und festgelegt werden solange dieser nicht in der Packungsbeilage f r den spezifischen Dako Primary Antibody beschrieben ist Anderungen des Arbeitsablaufes k nnen Auswirkungen auf die Anzahl der im Kit mitgelieferten Tests haben Explanation of symbols Explication des symboles Erlauterung der Symbole Catalogue number R f rence du catalogue Bestellnummer In vitro diag nostic Temperature limitation Limites de temperature Zulassger Te mperatu rbe reich Contains sufficient GHS hazard pictogram consult precautions section Use by Pictogrammes de Utiliser avant danger SGH Verwe nd bar bis voirla section Pr cautions d emploi GHS Gefahrensymbol sie he Abschnitt zu den Sich erhe itshin wei sen Gebrauchsanweisung beachten medical device e oe op Manufacturer IVD Dispositif m dical de mee
37. einem vorgew rmten Wasserbad mit destilliertem oder entionisiertem Wasser heraus fixiert werden Dieses Wasserbad darf keine Zus tze enthalten wie z B Gelatine Poly L Lysin usw Die Schnitte werden bis zu 60 Minuten lang unter W rme getrocknet gew hnlich bei einer Temperatur von h chstens 60 Damit die Schnitte gut auf den Objekttr gern haften muss vor dem Trockenprozess im Ofen alles Wasser unter den Schnitten entfernt worden sein Verfahren Um optimale F rbungsergebnisse zu erzielen arbeiten Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit auf verschiedenen Prinzipien beruhenden Verfahren Bitte lesen Sie das Bedienerhandbuch des betreffenden Dako Ger ts vor der Durchf hrung von F rbungen mit Ihrem Autostainer Autostainer Plus Ger t gr ndlich durch Um f r eine reproduzierbare Epitopdemaskierung zu sorgen wird empfohlen den Objekttr gerhalter immer voll zu beladen Dadurch wird eine gleichm ige Erhitzung der Schnitte in jedem Durchlauf erreicht A Arbeitsablauf der Vorbehandlung Empfohlenes Verfahren zur 3 in 1 Probenvorbereitung mit PT Link Entparaffierung Rehydration und Hitze unduzierte Epitopdemaskierung HIER k nnen mit formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitten unter Ber cksichtigung des 3 in 1 Verfahrens durchgef hrt werden 1 Eine Arbeitsl sung durch Verd nnen der konzentrierten EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x mit destilliertem oder deionisiertem Wasser im Verh ltni
38. eratur gelagert wird A 2 EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x DM829 Code Nr K8005 Eine f r das geplante F rbeverfahren ausreichende Menge EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x mit destilliertem oder entionisiertem Wasser im Verh ltnis 1 50 verd nnen Wenn Dako PT Link zur Vorbehandlung genutzt wird kann die Verd nnung durch berf hren des Inhalts des Fl schchens Target Retrieval Solution 50x in den Dako PT Link Tank und Hinzuf gen von destilliertem oder deionisiertem Wasser bis zur Markierung Fill Line erfolgen Unverbrauchte verd nnte L sung kann bei 2 8 einen Monat lang aufbewahrt werden Getr bte L sung verwerfen Bei Verwendung im PT Link f r die 3 in1 Probenvorbereitung kann die verd nnte L sung 3mal innerhalb von 5 Tagen verwendet werden wenn sie bei Raumtemperatur gelagert wird A 3 EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 Code Nr K8007 Eine f r das geplante Farbeverfahren ausreichende Menge EnVision FLEX Wash Buffer 20x mit destilliertem oder deionisiertem Wasser im Verh ltnis 1 20 verd nnen Um ein Aufsch umen so weit wie m glich zu vermeiden f gen Sie konzentrierten Wash Buffer zu einer abgemessenen Menge destilliertem oder entionisiertem Wasser hinzu R hren Sie gleichm ig bis die verd nnte L sung homogen erscheint Unverbrauchte verd nnte L sung kann bei 2 8 einen Monat lang aufbewahrt werden Getr bte L sung verwerfen Bei Verwendung im PT
39. ion EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 Il est galement possible d utiliser les solutions EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x r f K8004 ou EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x r f K8005 Certains anticorps primaires n cessitent un pr traitement enzymatique du tissu pour une coloration optimale au lieu d une proc dure HIER La peroxydase endog ne doit tre bloqu e l aide du r actif EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent DM821 inclus dans le kit En raison d une proc dure de lavage efficace et de la pr sence de prot ines stabilisantes dans les r actifs Dako des tapes de blocage suppl mentaires ne sont pas n cessaires pour r duire la coloration de fond non sp cifique Il est recommand d utiliser le tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 inclus dans le kit ou disponible comme r actif en option r f K8007 Les anticorps primaires ne sont pas fournis dans le kit L utilisation des anticorps Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies ou des anticorps primaires concentr s Dako est recommand e Le diluant EnVision FLEX Antibody Diluent r f K8006 est recommand pour la dilution des anticorps primaires concentr s Dako Le produit EnVision FLEX Rabbit LINKER r f K8019 peut tre appliqu pour obtenir une amplification du signal des anticorps primaires de lapin en option Le produit EnVision FL
40. ionale Heagenzien 202 Nee ENEE SEENEN HEEN NENNEN NENNEN in ia 22 VorsichtsmaBnahmen iii 23 Re ln WEE 25 Reagenzvorbereitung sieste autre et adie te ee hd eege ee ee eat 25 Entnahme und Vorbereitung der Probe ss 25 O 26 A Arbeitsablauf der Vorbehandlung cccoccocococcccccconcnononcnnnononcnnononcnnnnonnnnnnnnnnnncnnnnnnnnncnncnninnns 26 B Arbeitsablauf des F rbens ss 28 EI elle 28 Auswertung der ErgebNiSSe iii eee A A teas De a tea ed at 28 Einschr nkungen EE 29 Erl uter ng der SyMmbole 20 2em2 4008er His 29 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 3 29 ENGLISH Intended Use For in vitro diagnostic use Dako EnVision FLEX detection system is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments The system detects primary mouse and rabbit antibodies and the reaction is visualized by EnVision FLEX DAB Chromogen If used with EnVision FLEX Rabbit LINKER Code K8019 or EnVision FLEX Mouse LINKER Code K8022 signal amplification of primary rabbit antibodies or primary mouse antibodies respectively can be achieved The EnVision FLEX reagents are intended for use on formalin fixed paraffin embedded tissue sections Summary and Explanation Dako EnVision FLEX detection system has been designed to be a flexible system and gives an optimal staining on Dako Autostainer Autostainer Plus
41. mperature 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 9 29 HIER procedure using PT Link After deparaffinization and hydration to buffer water tissue sections should be subjected to heat induced epitope retrieval HIER 1 Prepare a working solution by diluting the EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x concentrate 1 50 in distilled or deionized water 2 Fill PT Link tanks with sufficient quantity 1 5 L of working solution to cover the tissue sections 3 Set PT Link to pre heat the solution to 65 4 Manually deparaffinize and rehydrate tissue sections mounted on glass slides For better adhesion of tissue to slide use of coated or silanized slides is recommended 5 Immerse room temperature tissue sections into the pre heated EnVision FLEX Target Retrieval Solution working solution and incubate for 20 40 minutes at 97 The optimal incubation time should be determined by the user 6 Leave the sections to cool in PT Link to 65 7 Remove each slide rack from PT Link tank and immediately dip slides into a jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 with diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x 8 Leave slides in the diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x for 1 5 minutes 9 Place slides on a Dako Autostainer Autostainer Plus instrument and proceed with staining The sections should not dry out during the treatment or during the immunohistochemical staining
42. n 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 26 29 HIER Verfahren mit PT Link Nach der Entparaffinierung und Rehydrierung mit Puffer Wasser ist bei den meisten Gewebeschnitten eine hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER erforderlich 1 10 Eine Arbeitsl sung durch Verd nnen der konzentrierten EnVision FLEX Target Retrieval Solution 50x mit destilliertem oder deionisiertem Wasser im Verh ltnis 1 50 herstellen Tanks des PT Link mit einer ausreichenden Menge Arbeitsl sung 1 5 L f llen um die Gewebeschnitte zu bedecken PT Link auf Erwarmen der L sung auf 65 einste llen Gewebeschnitte auf Objekttragern manuell entparaffinieren und rehydrieren Zur besseren Haftung des Gewebes auf dem Objekttrager werden beschichtete oder silanisierte Objekttrager empfohlen Die auf Raumtemperatur gebrachten Gewebeschnitte in die vorgewarmte EnVision FLEX Target Retrieval Solution Arbeitsl sung geben und 20 40 Minuten bei 97 inkubieren Die optimale Inkubationszeit muss vom Anwender bestimmt werden Die Schnitte im PT Link auf 65 abk hlen lasse n Die Gestelle aus dem PT Link Tank nehmen und die Objekttr ger sofort in einen Beh lter Tank z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd nntem auf Raumtemperatur gebrachtem Dako Wash Buffer 20x tauchen Die Objekttr ger f r 1 5 Minuten im verd nnten und auf Raumtemperatur gebrachten EnVision FLEX Wash Buffer 20x belassen Objekttr ger in einen
43. nd wrinkle free as possible Too many wrinkles will have an impact on the staining results NOTE The microscope slides must have a width suitable for the Dako Autostainer Autostainer Plus instrument Please refer to the Operator s Manual for the individual Dako instrument for definition of usable microscope slides Paraffin sections should be mounted from a pre heated water bath containing distilled or deionized water The water bath should contain no additives such as gelatin poly L lysine etc Sections should be dried by heating generally at a temperature not above 60 C for up to 60 minutes To ensure proper adherence of sections to slides it is important to drain the water from beneath the sections prior to the oven drying process Procedure Dako Autostainer Autostainer Plus instruments use techniques based on different principles to obtain an optimal staining result Before running protocols on your Dako Autostainer Autostainer Plus instrument please read carefully the Operator s Manual for the dedicated Dako instrument In order to ascertain reproducible epitope retrieval it is recommended always to load the slide holder fully with slides This ensures an identical heating of sections in every run A Pre treatment procedure Recommended 3 in 1 specimen preparation procedure using PT Link Deparaffinization rehydration and heat induced epitope retrieval HIER can be performed on formalin fixed paraffin embedded tissue secti
44. ntibodies from Dako Dako FLEX Ready to Use Rabbit or Mouse Universal Negative Control or suitable negative control reagent for the primary antibody Dako instrumentation utensils Microscope slides e g FLEX IHC Microscope Slides 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 5 29 General laboratory reagents for deparaffinization of paraffin embedded tissue sections Mounting medium aqueous or organic solvent based and coverslips C Optional reagents K8004 DM828 K8005 DM829 K8006 DM830 K8007 DM831 K8018 DM826 K8019 DM825 K8022 SM824 Precautions EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 3 x 30 mL 50x concentrated Tris EDTA buffer pH 9 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION LOW pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x 3 x 30 mL 50x concentrated Citrate buffer pH 6 1 EnVision FLEX Antibody Diluent 120 mL ready to use Tris buffer pH 7 2 containing 15 mmol L NaN and protein wash surrer 20X EnVision FLEX Wash Buffer 20x 1 L 20x concentrated Tris buffered saline solution containing Tween 20 pH 7 6 0 1 HEMATOXYLIN EnVision FLEX Hematoxylin 10 x 13 mL ready to use Aqueous solution of hematoxylin EnVision FLEX Rabbit LINKER 3 x 13 mL ready to use Buffered solution containing stabilizing protein and an antimicrobial agent Contains reagent sufficient for 110
45. on FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 r f K8004 Diluer une quantit suffisante de EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x au 1 50 me en utilisant de l eau distill e ou d ionis e pour la proc dure de coloration pr vue La solution dilu e non utilis e peut tre conserv e entre 2 et 8 pendant un mois Si l appareil Dako PT Link est utilis pour effectuer un pr traitement la dilution peut tre r alis e en vidant le contenu du flacon de solution de d masquage des cibles 50x dans la cuve du Dako PT Link et en ajoutant de l eau distill e ou d ionis e jusqu au trait indiqu ligne de remplissage Jeter la solution si elle semble trouble Quand on l utilise sur un appareil PT Link pour une proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 la solution dilu e peut tre r utilis e 3 fois sur une p riode de 5 jours si elle est conserv e a temp rature ambiante A 2 EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x DM829 r f K8005 Diluer une quantit suffisante de EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x au 1 50 me en utilisant de l eau distill e ou d ionis e pour la proc dure de coloration pr vue Si l appareil Dako PT Link est utilis pour effectuer un pr traitement la dilution peut tre r alis e en vidant le contenu du flacon de solution de d masquage des cibles 50x dans la cuve du Dako PT Link et en ajoutant de l eau distill e ou d
46. on Tris contenant du Tween 20 pH 7 6 0 1 B Mat riel requis mais non fourni Appareil Dako Autostainer Autostainer Plus Dako PT Link Dako Proteinase K Ready to Use si n cessaire Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies ou anticorps primaires de lapin ou de souris concentr s dilu s de fa on appropri e obtenus aupr s de Dako 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 13 29 Dako FLEX Ready to Use Rabbit ou Mouse Universal Negative Control ou r actif de contr le n gatif appropri pour l anticorps primaire Ustensiles pour l appareillage Dako Lames de microscope par ex les lames FLEX IHC Microscope Slides R actifs g n raux de laboratoire pour le d paraffinage des coupes de tissus incluses en paraffine Milieu de montage aqueux ou organique a base de solvant et lamelles C R actifs en option K8004 DM828 K8005 DM829 K8006 DM830 K8007 DM831 K8018 DM826 K8019 DM825 K8022 SM824 Pr cautions EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 3 x 30 mL concentr 50x Tampon Tris EDTA pH 9 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION LOW pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x 3 x 30 mL concentr 50x Tampon citrate pH 6 1 EnVision FLEX Antibody Diluent 120 mL pr t a l emploi Tampon Tris pH 7 2 NaN 15 mmol L et une prot ine EnVision FLEX wasipurrer 20X EnVision
47. ons using the 3 in 1 procedure 1 Prepare a working solution by diluting the EnVision FLEX Target Retrieval Solution concentrate 1 50 in distilled or deionized water 2 Fill PT Link tanks with sufficient quantity 1 5 L of working solution to cover the tissue sections 3 Set PT Link to pre heat the solution to 65 4 Immerse the mounted formalin fixed paraffin embedded tissue sections into the pre heated EnVision FLEX Target Retrieval Solution working solution in PT Link tanks and incubate for 20 40 minutes at 97 The optimal incubation time sh ould be determined by the user 5 Leave the sections to cool in PT Link to 65 6 Remove each Autostainer slide rack with the slides from the PT Link tank and immediately dip slides into a jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 with diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x 7 Leave slides in the diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 20x for 1 5 minutes 8 Place slides on a Dako Autostainer Autostainer Plus instrument and proceed with staining The sections should not dry out during the treatment or during the immunohistochemical staining procedure 9 After staining it is recommended to perform dehydration clearing and permanent mounting NOTE When used in PT Link for 3 in 1 specimen preparation procedure the diluted Target Retrieval Solution and diluted Wash Buffer can be used 3 times within a 5 day period if stored at room te
48. ontainer in accordance with all local regional national and international regulations 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 7 29 8 Optional reagent EnVision FLEX Antibody Diluent Code K8016 contains sodium azide NaNs a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 9 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 10 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Storage Store EnVision FLEX and EnVision FLEX reagents at 2 8 C Store EnVision FLEX Hematoxylin Code K8018 at room temperature Do not use after expiration date stamped on the vials If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user The prepared Substrate Working Solution should be stored in the dark at 2 8 C and used within 5 days If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the product is suspected contact Dako Technical Services Reagent Preparation A 1 EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 Code K8004 Dilute a sufficient quantity of EnVision FL
49. protocol The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with 210 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to Operator s manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer Autostainer Plus instrument please contact Dako Technical Services Optimal incubation times of primary antibody and EnVision FLEX HRP are dependent on the applied primary antibody Please refer to the package insert for the individual Dako primary antibody The user must verify the applied protocol When the staining procedure is completed the specimens must be mounted It is recommended to perform dehydration clearing and permanent mounting when slides have been treated with the 3 in 1 specimen preparation procedure Slides treated with HIER procedure can be mounted using aqueous or permanent mounting medium For aqueous mounting mounting media such as Dako Glycergel Mounting Medium Code C0563 or Faramount Aqueous Mounting Medium Code S3025 is recommended Quality Control Each staining run should include a known positive control specimen to ascertain a proper performance of all the applied reagents If the positive control specimen fails to demonstrate positive staining labeling of test soecimens should be con
50. rovoque une coloration nucl aire bleu clair Les coupes de tissus color es peuvent tre mont es soit avec un milieu de montage aqueux soit avec un milieu de montage organique a base de solvant R actifs A Mat riel fourni DM821 EnVision FLEX PEROXIDASE BLOCKING REAGENT EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent 3 x 13 mL pr t l emploi Tampon phosphate contenant du peroxyde d hydrog ne NaN 15 mmol L et un d tergent SES EnVision FLEX HRP 3 x 13 mL pr t l emploi Dextrane coupl des mol cules de peroxydase et des mol cules d anticorps secondaires de ch vre dirig s contre les immunoglobulines de souris et de lapin Dans une solution tamponn e contenant une prot ine stabilisante et un agent conservateur DM827 EnVision FLEX DAB Chromogen 1x3mL T trahydrochlorure de 3 3 diaminobenzidine dans un solvant organique La couleur de ce r actif peut varier de violet fonc incolore sans que cela ait une quelconque influence sur la performance du kit DM823 EnVision FLEX Substrate Buffer 7X13 mL Solution tamponn e contenant du peroxyde d hydrog ne et un agent conservateur DM828 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 3 x 30 mL concentr 50x Tampon Tris EDTA pH 9 DM831 EnVision FLEX DO x WASH BUFFER EnVision FLEX Wash Buffer 20x 2 x 1 L concentr 20x Solution saline de tamp
51. s auch auf Basis organischer L sungsmittel Reagenzien A Mitgelieferte Materialien DM821 EnVision FLEX PEROXIDASE BLOCKING REAGENT EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent 3 x 13 mL gebrauchsfertig Wasserstoffperoxidhaltiger Phosphatpuffer 15 mmol L NaN und Detergenz 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 21 29 SS EnVision FLEX HRP 3 x 13 mL gebrauchsfertig Mit Peroxidasemolek len und sekund ren Ziegenantik rpermolek len gegen Kaninchen und Maus Immunglobuline gekoppeltes Dextran In gepufferter L sung mit Stabilisatorprotein und Konservierungsmittel DM827 EnVision FLEX DAB Chromogen 1x3mL 3 3 Diaminobenzidin Tetrahydrochlorid in organischem L sungsmittel Farbschwankungen bei diesem Reagenz kr ftig violett bis farblos haben keinerlei Einfluss auf die Leistung des Kits DM823 EnVision FLEX Substrate Buffer 7x13mL Gepufferte L sung mit Wasserstoffperoxid und Konservierungsmittel DM828 EnVision FLEX TARGET RETRIEVAL SOLUTION HIGH pH 50x EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x 3 x 30 mL 50fach konzentriert Tris EDTA Puffer pH 9 DM831 EnVision FLEX DO x WASH BUFFER EnVision FLEX Wash Buffer 20x 2 x 1 L 20fach konzentriert Tris gepufferte Kochsalzl sung mit Tween 20 pH 7 6 0 1 B Erforderliches aber nicht mitgeliefertes Material Dako Autostainer Autostainer Plus Ger t Dako PT Link Dako Proteinase K Ready to Use falls erfor
52. s 1 50 herstellen 2 Tanks des PT Link mit einer ausreichenden Menge Arbeitsl sung 1 5 L f llen um die Gewebeschnitte zu bedecken 3 PT Link auf Erw rmen der L sung auf 65 einste llen 4 Die formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte in die vorgewarmte EnVision FLEX Target Retrieval Solution Arbeitsl sung in den PT Link Tanks geben und 20 40 Minuten bei 97 inkubieren Die optimale Inkubationszeit muss vom Anwender bestimmt werden 5 Die Schnitte im PT Link auf 65 abk hlen lasse n 6 Die Autostainer Gestelle mit den Objekttragern aus dem PT Link Tank nehmen und die Objekttrager sofort in einen Behalter Tank z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd nntem auf Raumtemperatur gebrachtem EnVision FLEX Wash Buffer 20x tauchen 7 Die Objekttrager f r 1 5 Minuten im verd nnten und auf Raumtemperatur gebrachten EnVision FLEX Wash Buffer 20x belassen 8 Objekttr ger in einen Dako Autostainer Autostainer Plus einsetzen und mit der F rbung fortfahren Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des immunhistochemischen Farbeverfahrens nicht austrocknen 9 Nach der F rbung sollte eine Dehydrierung Sp lung und Permanentfixierung erfolgen HINWEIS Bei Verwendung im PT Link f r die 3 in 1 Probenvorbereitung k nnen die verd nnte Target Retrieval Solution und der verd nnte Wash Buffer 3 Mal innerhalb von 5 Tagen verwendet werden wenn sie bei Raumtemperatur gelagert werde
53. sbeilage des prim ren Antik rpers angegebenen Demaskierungsmethode unterzogen werden Bitte lesen Sie dazu auch 3 in 1 Probenvorbereitung im Abschnitt Verfahren Code Nr K8024 enthalt EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x DM828 Alternativ kann EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8004 oder EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code Nr K8005 eingesetzt werden Bei einigen primaren Antik rpern sind die Farbeergebnisse besser wenn anstelle des HIER Verfahrens eine Gewebevorbehandlung mit Enzymen vorgenommen wird Endogene Peroxidase sollte mit dem im Kit enthaltenen EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent DM821 blockiert werden Das wirkungsvolle Waschverfahren und die in den Dako Reagenzien vorhandenen Stabilisierungsproteine machen weitere Blockierungsschritte zur Verminderung einer unspezifischen Hintergrundf rbung berfl ssig Empfohlen wird der EnVision FLEX Wash Buffer 20x DM831 der im Kit enthalten oder auf Wunsch auch als optionales Reagenz einzeln Code Nr K8007 erh ltlich ist Prim re Antik rper geh ren nicht zum Lieferumfang Wir empfehlen Dako FLEX Ready to Use Primary Antibodies bzw Dako Concentrated Primary Antibodies Zur Verd nnung von Dako Concentrated Primary Antibodies wird EnVision FLEX Antibody Diluent Code Nr K8006 empfohlen EnVision FLEX Rabbit LINKER Code Nr K8019 kann wahlweise zur Verst rkung des Signals
54. sidered invalid A negative control reagent should be used with each specimen to identify any non specific staining If non specific staining cannot be clearly differentiated from the specific staining the labeling of the test specimen should be considered invalid Interpretation of Results The diaminobenzidine containing Substrate Working Solution gives a brown color at the site of the target antigen recognized by the primary antibody The brown color should be present on the positive control specimen at the expected localization of the target antigen If non specific staining is present this will be recognized as a rather diffuse brown staining on the slides treated with the negative control reagent Nuclei will be stained blue by the hematoxylin counterstain Limitations 1 For automated use on Dako Autostainer Instruments only When performing manual stainings the optimal procedure must be determined and verified by the user unless specified in the Package Insert for the specific Dako Primary Antibody 2 For use on formalin fixed paraffin embedded tissue sections only When using frozen sections or cell smears the optimal procedure must be determined and verified by the user unless specified in the Package Insert for the specific Dako Primary Antibody Changes in the procedure may have impact on the number of tests provided with the kit 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 11 29 FRANCAIS Utilisation pr vue Pour utilisa
55. sion FLEX Wash Buffer 20x 1 20 using distilled or deionised water for the staining procedure that is planned Dilute by adding the concentrated Wash Buffer to a pre measured quantity of distilled or deionised water to minimize foaming Stir gently until the diluted solution appears homogenous Unused diluted solution may be stored at 2 8 C for one month Discard solution if cloudy in appearance When used in PT Link for 3 in 1 specimen preparation procedure the diluted solution can be used 3 times within a 5 day period if stored at room temperature A 4 EnVision FLEX Substrate Working Solution The DAB containing EnVision FLEX Substrate Working Solution is prepared by mixing thoroughly 1 drop EnVision FLEX DAB Chromogen DM827 per 1 mL EnVision FLEX Substrate Buffer DM823 Use EnVision FLEX Substrate Working Solution within 5 days store in the dark at 2 8 C 128355 001 P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 8 29 Specimen Collection and Preparation The specimens may be formalin fixed paraffin embedded tissue sections Fixation time is dependent on fixative and tissue type thickness For example tissue blocks with a thickness of 3 4 mm should be fixed in neutral buffered formalin for 18 24 hours The optimal thickness of paraffin embedded sections is approximately 4 um The specimens should be mounted on microscope slides e g FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 The sections should be mounted on the slides as flat a
56. sung EnVision FLEX Rabbit LINKER 3x 13 mL gebrauchsfertig Gepufferte L sung mit Stabilisierungsprotein und antimikrobieller Substanz Ausreichend f r 110 165 Tests bei Verwendung von 200 300 uL pro Test EnVision FLEX Mouse LINKER 3x 13 mL gebrauchsfertig Gepufferte L sung mit Stabilisierungsprotein und antimikrobieller Substanz Ausreichend f r 130 200 Tests bei Verwendung von 200 300 uL pro Test Vorsichtsma nahmen 1 Zur Anwendung durch Fachpersonal 2 EnVisionTM FLEX HRP EnVision FLEX Mouse LINKER und EnVision FLEX Rabbit LINKER enthalten Material tierischen Ursprungs es kann nicht ausgeschlossen werden dass aufgrund der Herstellungsverfahren auch Spuren von Material menschlichen Ursprungs enthalten sind Wie alle Produkte biologischen Ursprungs muss auch dieses entsprechend gehandhabt werden 3 EnVision FLEX DAB Chromogen EnVision FLEX Substrate Buffer oder die EnVision FLEX Substrat Arbeitsl sung w hrend des Verfahrens keinem starken Lichteinfall aussetzen 4 EnVisionTM FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x und EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x enthalten 5 lt 10 Nonoxinol und sind wie folgt gekennzeichnet H319 H411 P280 128355 001 Achtung Verursacht schwere Augenreizung Giftig f r Wasserorganismen mit langfristiger Wirkung Augenschutz oder Gesichtsschutz tragen P04139EFG_01_K8024 2015 04 p 23 29 P273 P264 P305 P351 P
57. tents and container in accordance with all local regional national and international regulations 5 For EnVision FLEX Wash Buffer 20x contains 10 30 2 Amino 2 hydroxymethyl propane 1 3 diol hydrochloride and is labeled Warning H319 Causes serious eye irritation H315 Causes skin irritation P280 Wear protective gloves Wear eye or face protection P264 Wash hands thoroughly after handling P302 P352 IF ON SKIN Wash with plenty of soap and water Take off contaminated P362 2 P363 clothing Wash contaminated clothing before reuse P332 P313 If skin irritation occurs Get medical attention P305 P351 IF IN EYES Rinse cautiously with water for several minutes Remove P338 contact lenses if present and easy to do Continue rinsing P337 P313 If eye irritation persists Get medical attention 6 For EnVision FLEX Peroxidase Blocking Reagent a safety data sheet is available for professional users on request 7 EnvVision FLEX DAB Chromogen contains 1 5 3 3 diaminobenzidine tetrahydrochloride and is labeled Danger H350 May cause cancer H341 Suspected of causing genetic defects P201 Obtain special instructions before use P202 Do not handle until all safety precautions have been read and understood P280 Wear protective gloves Wear eye or face protection Wear protective clothing P308 P313 IF exposed or concerned Get medical attention P405 Store locked up P501 Dispose of contents and c
58. tion en diagnostic in vitro Le syst me de d tection Dako EnVision FLEX est destin a tre utilis en immunohistochimie avec les appareils Dako Autostainer Autostainer Plus Le systeme d tecte les anticorps primaires de souris et de lapin et la r action est visualis e l aide de EnVision FLEX DAB Chromogen Utilis avec le EnVision FLEX Rabbit LINKER r f K8019 ou le EnVision FLEX Mouse LINKER r f K8022 une amplification du signal des anticorps primaires de lapin ou de souris respectivement peut tre obtenue Les r actifs EnVision FLEX sont destin s a tre utilis s sur des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine R sum et explication Le syst me de d tection Dako EnVision FLEX a t con u comme un dispositif flexible et permet d obtenir une coloration optimale sur les appareils Dako Autostainer Autostainer Plus sous r serve de respecter le protocole recommand dans la pr sente notice Avant de proc der la coloration les coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine doivent tre soumises un d paraffinage et une r hydratation puis une proc dure de d masquage d pitope induit par la chaleur HIER l aide de la m thode de restauration des cibles indiqu e dans la notice de l anticorps primaire Pour la proc dure de pr paration des chantillons 3 en 1 consulter aussi la section Proc dure La r f rence K8024 inclut la solut
59. tive le marquage des chantillons a analyser doit tre consid r comme non valide Un r actif de contr le n gatif doit tre utilis avec chaque chantillon afin d identifier toute coloration non sp cifique Si une coloration non sp cifique ne peut pas tre clairement diff renci e de la coloration sp cifique le marquage de l chantillon analyser doit tre consid r comme non valide Interpr tation des r sultats La solution de travail du substrat contenant de la diaminobenzidine produit une coloration brune sur le site de l antig ne cible reconnu par l anticorps primaire La couleur brune doit tre pr sente sur l chantillon de contr le positif l o l antig ne cible est attendu Si une coloration non sp cifique est pr sente ceci sera identifi comme une coloration brune diffuse sur les lames trait es avec le r actif de contr le n gatif Les noyaux seront color s en bleu par le contre colorant h matoxyline Limites 1 Pour une utilisation automatis e sur les appareils Dako Autostainer uniquement Lors de la r alisation de colorations manuelles la proc dure optimale doit tre d termin e et v rifi e par l utilisateur moins qu elle soit sp cifi e dans la notice de l anticorps primaire sp cifique de Dako 2 R serv une utilisation sur des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine uniquement Lors de l utilisation de coupes congel es ou de frottis cellulaires la pro

EnVision™ FLEX Mini Kit, High pH, (Dako Autostainer/Autostainer

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