ce-ivd spec template
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1. CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD4 Clone 4B12 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code 15649 ENGLISH Intended use For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD4 Clone 4B12 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody labels thymocytes and T helper cells 1 and the antibody is useful for the identification of anaplastic large cell lymphomas 2 Antibodies to CD4 may also be useful for the identification of mycosis fungoides and unspecified peripheral T cell lymphoma 3 5 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Summary CD4 is a 55 kDa glycoprotein with five immunoglobulin like external domains a transmembrane domain and a highly conserved intracellular and explanation domain CD4 acts as a co receptor in MHC class Il restricted antigen induced T cell activation and may increase cell adhesion 1 The CD4 molecule also serves as a receptor for the human immunodeficiency virus on T cells and monocytes macrophages 4 CD4 is expressed during T cell development but is absent in immature thymocytes 3 It is expressed in T helper cells about 80 90 of mature thymoc2. Langerhans schen Zellen und anderen dendritischen Zellen exprimiert jedoch nicht auf B Zellen 1 CD4 spielt eine wichtige Rolle bei der Immunph notypisierung von reaktiven Lymphozyten und Iymphoproliferativen St rungen Die Mehrzahl der peripheren T Zell Lymphome leiten sich von der Helfer T Zell Untergruppe ab sodass die meisten aber nicht alle postthymischen T Zell Neoplasmen CD4 positiv sind 1 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klone 4B12 Isotyp IgG1 Kappa Rekombinantes Protein der externen Dom ne des CD4 Molek ls entsprechend 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitu
3. T Helfer Zellen eine m ige bis starke F rbereaktion In der Leber zeigen die Kupffer schen und Endothel Zellen der Sinusoide eine schwache bis m ige F rbungsreaktion Pathologisches Gewebe Der Antik rper markierte 1 von 1 Fall von Mucosis fungoides und 2 von 2 F llen von peripheren T Zell Lymphomen In einer Studie mit 75 Kindern markierte der Antik rper 22 von 51 der anaplastischen Gro zell Lymphome 2 References R f rences Literatur 1 Leong AS Y Cooper K and Leong FJW K CD4 Manual of diagnostic antibodies for immunohistology London Greenwich Medical Media 2003 p 65 66 DE Ps gt D Amore SEG Menin A Bonoldi E Bevilacqua P et al Anaplastic large cell lymphomas A study of 75 pediatric patients Pediatr Dev Pathol 2007 10 181 91 Dabbs DJ Ed Diagnostic Immunohistochemistry 2nd edition Elsevier Inc 2006 p 141 50 Williamson SLH Steward M Milton I Parr A et al New monoclonal antibodies to the cell antigens CD4 and CD8 Am J Pathol 1998 152 1421 26 Zettl A R diger T Konrad M A Chott A et al Genomic profiling of peripheral T cell lymphoma unspecified and anaplastic large T cell lymphoma delineates novel recurrent chromosomal alterations Am J Pathol 2004 164 1837 48 Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole 117584 002 Catalogue number R f rence catalogue Bestellnummer In vitro diagnostic medical device Dispositif m dical de diagnostic in vitr
4. to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Storage Store at 2 8 C Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support Specimen preparation The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of including materials approximately 4 um required but not supplied Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 K8014 Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link Code PT1
5. 00 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 K8014 The following parameters should be used for PT Link Pre heat temperature 65 C epitope retrieval temperature and time 97 C for 20 1 minutes cool down to 65 C Remove Autostainer slide rack with slides from the PT Link tank and immediately dip slides into a jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 containing diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 Leave slides in Wash Buffer for 1 5 minutes Paraffin embedded sections As alternative specimen preparation both deparaffinization and epitope retrieval can be performed in the PT Link using a modified procedure See the PT Link User Guide for instructions After the staining procedure has been completed the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of Dako Silanized Slides Code S3003 is recommended Staining procedure The recommended visualization system is EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8012 inclu
6. Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration 117584 002 for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include tonsil and liver and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code 1S750 Cells labeled by the antibody display membrane staining Normal tissues In tonsil the crowded and isolated T helper cells show a moderate to strong staining reaction In liver the Kupffer and endothelial cells of the sinusoids show a weak to moderate staining reaction Abnormal tissues The antibody labeled 1 1 mucosis fungoides and 2 2 peripheral T cell lymphomas In a study of 75 pediatric patients the antibody labeled 22 51 anaplastic large cell ly
7. D4 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur II ny a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance te
8. chnique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 pm Le pr traitement avec un demasquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8012 K8014 Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes de tissus d paraffin s fix s au formol et inclus en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de details se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Suivre la proc dure de pre traitement indiqu e dans la notice pour la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Ref K8012 K8014 Les param tres suivants doivent tre utilis s pour le PT Link temperature de pr chauffage 65 C temp rature et dur e de restauration de l Epitope 97 C pendant 20 1 minutes refroidissement 65 C Retirer le portoir lames et les lames Autostainer de la cuve du PT Link et plonger imm diatement les lames dans un r cipient une cuve p ex PT Link Rinse Station ref PT109 contenant du EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8012 dilu temp rature ambiant
9. ding materials The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the required but not supplied following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram CD4 without counterstaining or CD4H with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted 117584 002 IS649 EFG SSM 15 04 08 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Staining interpretation Performance characteristics FRAN AIS Utilisation pr vue R sum et explication R actifs fournis Immunog ne Pr cautions
10. e Laisser les lames dans le Wash Buffer pendant 1 5 minutes Coupes incluses en paraffine comme pr paration alternative des chantillons le deparaffinage et la restauration de l Epitope peuvent tre r alis s dans le PT Link l aide d une proc dure modifi e Se r f rer aux instructions du Guide d utilisation du PT Link Une fois que la proc dure de coloration est termin e les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames Dako Silanized Slides R f S3003 Le syst me de visualisation recommand est le EnVision FLEX Mouse High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8012 IS649 EFG SSM 15 04 08 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 y compris le mat riel requis mais non fourni Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance DEUTSCH Verwendungszweck Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Vorsichtsma nahmen Lagerung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 117584 002 Les tapes de coloration et les
11. ehe PT Link Benutzerhandbuch Nach Abschluss des F rbeverfahrens m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und unter Verwendung eines permanenten Fixiermittels auf die Objekttr ger aufgebracht werden Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern werden Dako Silanized Slides Code Nr S3003 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Autostainer Link Software vorprogrammiert Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram CD4 ohne Gegenf rbung oder CD4H mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendet
12. en Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Mandel und Lebergewebe enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Mit diesem Antik rper markierte Zellen weisen eine Membranf rbung auf Gesundes Gewebe In Mandelgewebe zeigen die eng angeordneten und isolierten
13. mphomas 2 Pour utilisation lors d un diagnostic in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD4 clone 4B12 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin a une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps marque les thymocytes et les cellules CD4 1 et permet l identification des Iymphomes anaplasiques grandes cellules 2 Les anticorps du CD4 peuvent galement aider l identification du mycosis fongoide et du lymphome lymphocytes T p riph riques non sp cifiques 3 5 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi Le CD4 est une glycoprot ine de 55 kDa avec cinq domaines externes de type immunoglobuline un domaine transmembranaire et un domaine intracellulaire hautement conserv Le CD4 agit comme cor cepteur dans l activation des lymphocytes T induite par l antig ne limit par le MHC de classe Il et peut augmenter l adh sion cellulaire 1 La mol cule CD4 sert aussi de r cepteur pour le virus de limmunod ficience humaine sur les lymphocytes T et les monocytes macrophages 4 Le CD4 s exprime durant tout le d veloppement des lymphocytes T mais est absent chez les thymocytes immatures 3 Il est exprim da
14. n CD4 Klon 4B12 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper markiert Thymozyten und T Helferzellen 1 und dient zur Erkennung anaplastischer Gro zell Lymphome 2 Antik rper gegen CD4 k nnen auch zur Identifizierung von Mycosis fungoides und unspezifischen peripheren T Zell Lymphomen 3 5 dienen Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit geeigneten Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer diagnostischer Tests des Patienten vorgenommen werden CD4 ist ein Glykoprotein von 55 kDa mit f nf immunglobulin hnlichen externen Dom nen einer transmembranen Dom ne und einer hochkonservierten intrazellul ren Dom ne CD4 wirkt als Co Rezeptor bei der MHC Klasse Il beschr nkten antigeninduzierten T Zell Aktivierung und kann Zelladh sion verst rken 1 Das CD4 Molek l dient auch als Rezeptor f r HIV auf T Zellen und Monozyten Makrophagen 4 CD4 wird w hrend der T Zell Entwicklung exprimiert fehlt aber in unreifen Thymozyten 3 Es wird in T Helfer Zellen exprimiert in etwa 80 90 der reifen Thymozyten und 55 65 der reifen peripheren T Zellen Es kommt auch auf einer Untergruppe von Suppressor oder zytotoxischen T Zellen vor CD4 wird auch auf Monozyten Makrophagen
15. ngen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 C aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Es ist eine Vorbehandlung mit hitzeinduzierter Epitopdemaskierung HIER Verfahren erforderlich Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 K8014 erzielt werden Entparaffinierte Schnitte Die V
16. ns les cellules CD4 dans environ 80 90 des thymocytes matures et 55 a 65 des lymphocytes p riph riques T matures Il est galement pr sent dans un sous ensemble de lymphocytes T suppresseurs ou cytotoxiques Le CD4 s exprime galement sur les monocytes macrophages les cellules de Langerhans et autres cellules dendritiques mais il ne s exprime pas sur les lymphocytes B 1 Le CD4 joue un r le important dans l immunoph notypage de lymphocytes r actifs et les troubles Iymphoproliferatifs La majorit des lymphomes lymphocytes T p riph riques d rivent du sous ensemble de cellules CD4 et donc la plupart mais pas tous des n oplasmes lymphocytes T post thymiques sont positifs au CD4 1 Se r f rer aux nstructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le de qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone 4B12 Isotype IgG1 kappa Prot ine de fusion recombinante correspondant au domaine externe de la mol cule C
17. o In vitro Diagnostikum Consult instructions for use Voir les instructions d utilisation Gebrauchsanweisung beachten Temperature limitation Use by Limites de temp rature Utiliser avant Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis Manufacturer Fabricant Contains sufficient for lt n gt tests Contenu suffisant pour lt n gt tests Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Batch code Num ro de lot Chargenbezeichnung IS649 EFG SSM 15 04 08 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
18. orbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte sollte mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 erfolgen Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch IS649 EFG SSM 15 04 08 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der F rbung Leistungsmerkmale Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 K8014 durchf hren F r PT Link sollten die folgenden Parameter verwendet werden Vorw rmtemperatur 65 C Temperatur und Zeit f r Epitopdemaskierung 97 C in 20 1 Minuten auf 65 C abk hlen Das Autostainer Objekttr gergestell mitsamt Objekttr gern aus dem PT Link Beh lter herausnehmen und Objekttr ger sofort in einen Beh lter z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd nntem auf Zimmertemperatur gebrachtem EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8012 eintauchen Die Objekttr ger f r 1 5 Minuten im Wash Buffer belassen Paraffineingebettete Schnitte Zur Probenpr paration kann f r Entparaffinierung und Epitopdemaskierung im PT Link auch ein modifiziertes Verfahren verwendet werden Weitere Informationen hierzu si
19. ration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide de EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre le foie et l amygdale et les cellules structures doivent pr senter les sch mas de r action d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le r actif de contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration membranaire Tissus sains dans l amygdale les cellules CD4 isol es et en amas pr sentent une coloration mod r e forte Dans le foie les cellules de Kupffer et les cellules endoth liales sinusoidales pr sentent une coloration faible mod r e Tissus tumoraux l anticorps a marqu 1 cas sur 1 de mycosis fongoide et 2 cas sur 2 de lymphomes lymphocytes T p riph riques Dans une tude portant sur 75 patients p diatriques l anticorps a marqu 22 cas sur 51 de Iymphomes anaplasiques grandes cellules 2 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Huma
20. temps d incubation sont preprogrammes dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume d application de 200 uL ou FLEXRTU3 volume d application de 300 uL Programme automatique CD4 sans contre coloration ou CDAH avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application specialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la reprogrammation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de colo
21. ytes and 55 65 of mature peripheral T cells It is also present on a subset of suppressor or cytotoxic T cells CD4 is also expressed on monocytes macrophages Langerhans cells and other dendritic cells but it is not expressed on B cells 1 CD4 plays an important role in immunophenotyping of reactive lymphocytes and Iymphoproliferative disorders The majority of peripheral T cell lymphomas are derived from the helper T cell subset so most but not all post thymic T cell neoplasms are CD4 positive 1 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Reagent provided Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone 4B12 Isotype IgG1 kappa Immunogen Recombinant protein corresponding to the external domain of the CD4 molecule Precautions 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water
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