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ChemStation Agilent - Agilent Technologies

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1. e Remove Manual Events from Method efface les v nements manuels de la m t hode Comprendre votre ChemStation Agilent 119 4 int gration Int gration manuelle 120 Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent e 5 e Quantification D finition 122 Calculs de la quantification 123 Facteurs de correction 124 Facteur de r ponse absolu 124 Multiplicateur 124 Facteur de dilution 124 Quantit d chantillon 125 Proc dures de calcul non talonn 126 surface et hauteur 126 Proc dures de calcul talonn es 127 Calcul d talonnage externe 128 Calcul du pourcentage normalis 131 Calcul ISTD 132 Analyse 1 talonnage 133 Analyse 2 Echantillon inconnu 134 Calcul ISTD des pics talonn s 134 Calcul d talonnage interne de pics non talonn s 135 Ce chapitre d crit la proc dure de quantification de la ChemStation Il d taille les calculs de surface et de hauteur le calcul d talonnage externe ESTD d talonnage interne ISTD de pourcentage normalis et la quantifica tion des pics non identifi s che Agilent Technologies 121 5 Quantification D finition 122 Une fois que les pics ont t int gr s et identifi s l tape suivante de l analyse est la quantification La quantification utilise l aire ou la hauteur de pic pour d terminer la concentration d un compos dans un chantillon L analyse quantitative comporte de nombr
2. selon l une des m thodes ASTM d crites pr c demment Le calcul prend en compte au moins sept points de donn es par cycle Dans la d termination automatis e du bruit les cycles se chevauchent de 10 Calcul du rapport signal bruit Dans le cadre de la d finition du rapport signal bruit la ChemStation utilise le principe de l cart type sd x 6 de la r gression lin aire de la d rive pour calculer le bruit La plage la plus proche du pic est s lectionn e partir des plages sp cifi es dans les param tres d aptitude syst me Le rapport signal bruit est calcul selon cette formule Si Height of the peak Signal to Noise Noise of closest range Le rapport signal bruit est calcul pour chaque pic du signal Si la ChemSta tion ne parvient pas trouver la valeur d un bruit le rapport signal bruit cor respondant est repr sent par un tiret D rive et d viation La d rive correspond la valeur de la pente de r gression lin aire figure Bruit calcul comme l cart type x 6 la d viation se d finit comme le bruit pic pic des valeurs moyennes dans les cycles de bruit ASTM voir D finition du bruit l aide de la m thode ASTM Comprendre votre ChemStation Agilent 257 11 Evaluation de l aptitude du syst me Calcul de la sym trie des pics La ChemStation ne d finit pas le rapport d asym trie d un pic que l on obtient en g n ral en comparant les demi largeurs de pic
3. 1 1 i l 3 N d 3 m x X 1 1 a i l i 4 N d 4 m F i 1 3 1 i i l o Ai d to N i l 262 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 N X 4 E N Y Y i 1 4 i l Moments statistiques obliquit et exc s Le calcul des moments statistiques est une solution de remplacement pour d crire les formes de pic asym triques Il existe un nombre infini de moments de pic mais seuls les cinq premiers sont utilis s dans le cadre des calculs de pics chromatographiques Ils portent les noms suivants Moment 0 Moment 1 Moment 4 Le moment 0 repr sente l aire du pic Le moment 1 est le temps de r tention moyen ou le temps de r tention mesur au niveau du centre de gravit du pic Il diff re du temps de r tention chroma tographique mesur au niveau maximal du pic sauf si le pic est sym trique Le moment 2 est la variance de pic soit une mesure de la dispersion lat rale Il s agit de la somme de la variance g n r e par diff rents l ments du syst me d instrument Le moment 3 d crit la sym trie verticale ou obliquit Il s agit de la mesure de l cart de la forme de pic par rapport au mod le gaussien L obliquit d finie dans le rapport Performances tendu constitue sa forme adimensionnelle Un pic sym trique pr sente une valeur d obliquit gale z ro Les pics de tra n e pr sentent une obliquit positive et leur
4. 10 de la hauteur de pic ou 5 selon les recommandations de la FDA L int grateur calcule la sym trie des pics comme un pseudo moment l aide des quations de moment suivantes m I Pa 2 EEE N hj a V7 m Ma 0 5H 1 5H dy m duilh t 4 4153 1 5H r m m Peak symmetry m my Si aucun point d inflexion n est d tect ou si un seul point d inflexion est observ la sym trie des pics se calcule comme suit aj a Peak symmetry az ay 258 Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 gt alcul de la sym trie des pics fin de pic gt Temps d but de pic Ligne de base Figure 45 Calcul du facteur de sym trie de pic o aj surface de la section ti temps de la section H hauteur du point d inflexion avant H hauteur du point d inflexion arri re H hauteur au sommet 259 11 Evaluation de l aptitude du syst me Calculs et formules d aptitude syst me La ChemStation utilise les formules suivantes pour g n rer les r sultats des diff rents tests d aptitude syst me Les r sultats sont ensuite int gr s dans un rapport qui adopte les styles Performance Performances Performance Noise Performances Bruit et Performance Extended Performances Etendu Si une norme ASTM ou USP est sp cifi e pour une d
5. 5161000014 0 s161000015 0 5110000160 E s161000017 0 E siG1000018 D 51G1000013 D Conteneur de donn es de s quence CI TEST M Fichier de lot a DEWIBATIHE uuum mMM E DEMOBATCH LOG Journal de s quence a DEMOBATCH S mms F METHODS REG Mod le de s quence Figure 40 Structure d un fichier de donn es de s quence Comprendre votre ChemStation Agilent 189 Automatisation Attribution d un nom des fichiers de donn es dans une s quence 190 Il existe plusieurs m thodes pour attribuer un nom aux fichiers de donn es d une s quence e automatique e manuelle ou e l aide d un pr fixe compteur Attribution automatique d un nom un fichier de donn es lors d une s quence Flacons d chantillon Par exemple 017 0103 D o e Les trois premiers chiffres repr sentent le num ro du flacon 017 e Le quatri me chiffre en chromatographie liquide et en lectrophor se capil laire est un tiret de s paration En chromatographie gazeuse CPG il s agit du caract re F qui d signe l avant ou du caract re B qui d signe l arri re e Les cinqui me et sixi me chiffres constituent la ligne de s quence d finiss ant la m thode utilis e par exemple 01 pour la premi re ligne de s q uence e Les septi me et huiti me chiffres repr sentent le num ro d injection de ce flacon par la m thode par exemple 03 pour la troisi me injection Analyses d
6. M thodes R capitulatif de l ex cution d une methode 62 Le fonctionnement d une m thode est d compos sur la liste ci dessous cas o tous les l ments de la liste de v rification de l ex cution sont s lectionn s 1 Commande ou macro de pr analyse Effectue une t che avant le d but de l analyse Acquisition de donn es Lance le programme d injection Injecte l chantillon Acquiert des donn es brutes Stocke les donn es Enregistrement d une copie de la m thode avec les donn es RUN M action facultative de la liste de v rification de l ex cution Enregistrement d une copie de la m thode avec les donn es ACQ M ChemStation par d faut Analyse de donn es traitement des donn es Charge le fichier de donn es Int gre le fichier de donn es Identifie et quantifie les pics Effectue une recherche dans la biblioth que spectrale le cas ch ant V rifie la puret des pics le cas ch ant Imprime le rapport Analyse de donn es personnalis e Ex cute vos macros Enregistrement des donn es de BPL Enregistre le fichier de registre binaire GLPSave Resg Commande ou macro de post analyse Effectue une t che une fois l analyse termin e g n ration d un rapport per sonnalis par exemple Enregistrement d une copie de la m thode avec les donn es DA M ChemStation par d faut Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 3 Acquis
7. galem ent enregistr es si l instrument analytique configur prend en charge cette fonctionnalit Ces donn es peuvent par la suite tre pr sent es sous forme graphique avec le chromatogramme lectrophor gramme de mani re pr s enter les conditions de fonctionnement r elles de l instrument au cours d une analys donn e Elles peuvent galement tre int gr es au rapport Les m thodes enregistr es dans le fichier de donn es refl tent la m thode r elle au moment de l analyse et permettent de proc der ult rieurement la reconstruction totale des donn es faisant l objet d un rapport La m thode est enregistr e apr s toutes les tapes analytiques Tous les rapports sont horodat s et leurs pages sont num rot es pagination de type page x sur y l utilisateur peut s lectionner le niveau de d tail de cha que rapport de rapports r sum s simples des rapports d taillant l ensemble du du syst me voir la section relative aux rapports ci dessus Les fichiers de registre BPL sp cifi s dans le cadre de la configuration des m thodes consignent toutes les donn es brutes comprenant les informations d chantillon la m thode d analyse des donn es les signaux chromatographi ques lectrophor tiques les conditions op ratoires de l instrument les r sult ats d int gration et de quantification les r sultats finaux et le journal d ex cution dans un seul fichier binaire prot g par somme de contr le
8. tendus Extended Statistics Statistiques tendues Comprendre votre ChemStation Agilent F Full Complet GLP GPL Header En t te height reject hauteur de rejet Height reject Hauteur de rejet Height hauteur ndividual Method from Data File DA M M thode individuelle partir du fichier de donn es Da M nitial peak width Largeur de pic initiale ntegration Int gration ntegration Events Table Table des v nements d int gration STD ISTD ISTD tems and Limits for Extended Statistics Options et limites des statistiques tendues 285 Glossaire d IU L Library Search Recherche en biblioth que load DA method from data file Charger la m thode DA M partir du fichier de donn es Load DA method from data file Charger la m thode d analyse de don n es partir du fichier de donn es Logbook Journal M anual Events v nements manuels Manual Integration int gration manuelle Method and Run Control Contr le de m thode et d analyse Methods M thodes Navigation Table Table de navigation Negative Peaks Pics n gatifs Noise Bruit None Aucun Norm Norm norm 0 One Page Header En t te sur une page 286 P page x of y page x sur y Partial Sequence S quence partielle parts of method to run Partie de la m thode analyser Path Chemin Paths Chemins peak width largeur de pic Performance performances Performance and Noise pe
9. teur Pour les configurations GC le calcul de largeur de pic par d faut utilise le rap port aire hauteur Ce calcul ne surestime pas la largeur lorsque des pics sont fusionn s au dessus du point de mi hauteur Dans certains types d analyse par exemple les analyses GC isothermes et LC isocratiques les pics peuvent s largir de mani re significative au cours de l analyse Pour compenser cela l int grateur met jour automatiquement la largeur du pic au fur et mesure que les pics s largissent en cours d analyse Ceci est effectu automatiquement sauf si la mise jour a t d sactiv e ou la largeur de pic a t d finie une valeur sp cifique par un v nement program m La mise jour de largeur de pic est pond r e de la fa on suivante 0 75 x largeur de pic existante 0 25 x largeur du pic actuel Si un v nement d int gration programm d sactive ou d finit la largeur du pic une valeur particuli re l ajustement automatique de largeur de pic est d sactiv Comprendre votre ChemStation Agilent 87 4 int gration Groupage Le groupage est le moyen utilis par l int grateur pour maintenir les pics largis dans la plage efficace des filtres de reconnaissance de pic et conserver une bonne s lectivit L int grateur ne peut continuer augmenter ind finiment la largeur de pic Finalement les pics peuvent tre tellement largis que les filtres de reconnais sance de pic ne pourra
10. Ce format binaire non modifiable garantit l originalit des r sultats Le fichier comporte un sch ma de r vision qui indique si les donn es ont t retrait es Vous pouvez d finir les types d chantillons talons dans la table de s quence et les utiliser pour contr ler automatiquement les performances de l instru ment partir des r sultats des chantillons de contr le qualit lorsque l ins trument fonctionne sans surveillance Les r sultats hors de la plage acceptable d finie par l utilisateur provoquent l arr t du fonctionnement automatique de l instrument Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Commande des instruments Vous pouvez enrichir la capacit de commande des instruments de la ChemsS tation en acqu rant d autres modules permettant les configurations plu sieurs instruments et techniques mixtes Pour plus d informations reportez vous aux manuels fournis avec les autres modules ChemStation Fonctionnement en r seau ChemStation est test et compatible avec les logiciels Agilent LanManager Microsoft Windows XP Professionnel et Microsoft Windows Vista Profession nel conformes la sp cification IEEE 802 3 CSMA CD Il doit tre compatible avec tout logiciel de gestion de r seau conforme aux normes de programma tion de Microsoft Windows Gr ce ces produits la ChemStation peut partager non seulement des p rip h riques physiques traceurs im
11. L aire sous le segment de droite est soustraite du sous pic et ajout e au pic principal voir Figure 18 page 101 14 296 14 357 14 144 Figure 18 Approximation lin aire Comprendre votre ChemStation Agilent 101 4 102 Int gration Approximations standard Le calcul appropri est choisi en fonction de l application par d faut la m t hode choisie est une combinaison de calculs exponentiels et lin aires permet tant d obtenir le meilleur ajustement Le passage du calcul exponentiel au calcul lin aire est effectu de mani re liminer des discontinuit s importantes de hauteur ou d aire e Lorsque le signal est nettement au dessus de la ligne de base le calcul d ajustement de tra ne est exponentiel e Si le signal se situe dans l enveloppe de la ligne de base le calcul d ajuste ment de tra ne est une ligne droite Les calculs combin s sont indiqu s en tant qu int gration exponentielle ou tangentielle Crit res d approximation Deux crit res d terminent l utilisation d une droite d approximation pour cal culer la surface d un sous pic lu sur la tra ne d un pic principal e rapport hauteur tra ne d approximation e rapport hauteur vall e Ces crit res ne sont pas utilis s si un v nement programm est actif pour une exponentielle ou si le pic principal est lui m me un sous pic Le code de s p aration entre le pic principal et le sous pic doit tre du type Va
12. d tails 47 num rique 64 sommet de pic 92 sommet 77 suivi de ligne de base 97 98 T table d talonnage d finition 153 table de lots configuration 226 g n ration de rapport 230 type d chantillon supprim 226 temps de d but 77 temps de fin 77 temps de r tention absolu 142 traitement des donn es 47 U USP facteur de tra ne 265 V volume mort 261 Comprendre votre ChemStation Agilent Index Comprendre votre ChemStation Agilent 291 www agilent com Contenu de ce manuel Ce manuel d crit les diff rents concepts de la ChemStation Agilent Il a pour objectif de vous aider mieux comprendre le fonctionnement du syst me Pour plus d informations sur l utilisation de la ChemStation reportez vous au syst me d aide et au didacticiel en ligne Agilent Technologies 2004 2005 2009 Printed in Germany 07 09 G2070 93126 a Agilent Technologies
13. dans l chantillon et le m lange talon l utilisateur n a pas besoin de conna tre ni de contr ler le volume de l chantillon inject Cela corrige galement toute variation des performances de l instrument entre les analyses 236 Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports ChemStation 10 Valeurs de champ personnalis de g n ration de rapport Les valeurs des champs personnalis s associ s un chantillon particulier en fonction de sa m thode d acquisition peuvent tre ajout es au rapport Les champs personnalis s d chantillon sont list s la fin de l en t te de rapport qui contient les informations g n rales d chantillon Les champs personnali s s de compos apparaissent la fin du rapport Comprendre votre ChemStation Agilent 237 10 Utilisation des rapports ChemStation Styles de rapports 238 Les styles de rapports suivants sont disponibles Pour ajouter un signal l un des styles de rapports vous devez cocher la case correspondante dans la bo te de dialogue Sp cifier le rapport None aucun texte ne sera inclus dans le rapport Le chromatogramme n est inclus dans le rapport que si l option Ajouter une sortie de chromato gramme est s lectionn e Short inclut les r sultats quantitatifs textuels de toutes les acquisitions int gr es d finies dans la bo te de dialogue D tails des acquisitions CPL uniquement ou Acquisition CPG uniquement La largeur de p
14. et exc s 263 Largeur de pic vraie Wx min 264 Facteur de capacit USP rapport de capacit ASTM k 264 Facteur de tra ne USP USP t 265 Nombre de plateaux th oriques par colonne USP ASTM n 265 Nombre de plateaux th oriques par m tre N 1 m 266 R tention relative USP ASTM s lectivit alpha 267 R solution USP ASTM R 267 D finitions de la reproductibilit 269 Moyenne d chantillon M 269 cart type d chantillon S 269 cart type relatif ETR USP 270 cart type de la moyenne SM 270 Intervalle de confiance IC 271 Analyse de r gression 272 Es Agilent Technologies 249 11 250 Evaluation de l aptitude du syst me Coefficient de r gression 272 Ecart type S 273 Acc s au nombre en double pr cision stock en interne 274 Ce chapitre d crit les fonctions de la ChemStation permettant d valuer les per formances de l instrument d analyse avant son utilisation pour les analyses d chantillons et de la m thode d analyse avant son fonctionnement dans des conditions standard Il d crit galement la v rification des performances d ana lyse avant et pendant les analyses de routine L valuation des performances de l instrument analytique avant utilisation dans le cadre de l analyse d chantillon ainsi que l valuation des performan ces de la m thode analytique avant qu elle ne soit exploit e de mani re routi ni re font partie des bonnes pratiques analytiques adopter La v rificatio
15. et un fichier GIF Graphics Interchange Format pour chacune des pages du rapport ex pagel gif Pour afficher le rapport html ouvrez le fichier d index dans votre navigateur Comprendre votre ChemStation Agilent 247 10 Utilisation des rapports ChemStation 248 L option Report to printer permet d envoyer le rapport l imprimante syst me L impression des rapports propres chaque analyse entra ne galement l impression des rapports d chantillon apr s chaque analyse Ces rapports sont imprim s en plus de ceux sp cifi s pour le rapport r capitulatif de s q uence g n r s au terme de la s quence compl te Vous pouvez indiquer une nouvelle destination pour ces rapports dans la bo te de dialogue Sequence Out put ou utiliser la destination sp cifi e dans chaque m thode Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 11 Evaluation de l aptitude du syst me D finition du bruit 253 Calcul du bruit selon le principe 6 x cart type 253 Calcul du bruit l aide de la formule cr te cr te 254 Calcul du bruit par la m thode ASTM 255 Calcul du rapport signal bruit 257 D rive et d viation 257 Calcul de la sym trie des pics 258 Calculs et formules d aptitude syst me 260 D finitions g n rales 261 Volume mort 261 Temps de r tention de compos non retenu t m min 261 D finition des tests de performances 262 Moments statistiques 262 Moments statistiques obliquit
16. finition donn e celle ci doit se conformer la r f rence correspondante Toutefois les symboles utili s s ici ne sont peut tre pas identiques ceux adopt s dans la r f rence Les deux r f rences utilis es dans ce contexte sont e ASTM Section E 682 93 Annual Book of ASTM Standards Vol 14 01 USP The United States Pharmacopeia la pharmacop e am ricaine XX Revision pp 943 946 260 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 D finitions g n rales Volume mort V dal f 4 o d diam tre de colonne cm n constante rapport circonf rence diam tre d un cercle 1 longueur de colonne cm f fraction du volume de colonne qui n est pas prise en compte lors de la phase stationnaire mais disponible pour la phase mobile Valeur par d faut de f 0 68 pour Hypersil Temps de r tention de compos non retenu t m min Egalement appel temps mort ou temps de volume mort T VIF 7 o F d bit de CPL ml min Comprendre votre ChemStation Agilent 261 11 Evaluation de l aptitude du syst me D finition des tests de performances Moments statistiques MO d M1 t d 3 Nombre de sections d aire Valeur de la section d aire index e par i Intervalle entre les sections d aire adjacentes Temps de la premi re section d aire Somme de l index de d part 1 l index final N observations discr tes N d 2 ri u2 gt
17. m le d but de cet paulement est d fini au point cible partir du point de d part sur la courbe Le temps de r tention migration est d termin partir du point de courbure n gative maximale de l paulement Avec un v nement d int gration program m l int grateur peut galement calculer les aires d paulement comme des pics normaux avec des lignes verticales aux points d inflexion du pic d paul ement L aire de l paulement est soustraite du pic principal Comprendre votre ChemStation Agilent 93 4 int gration Identification d un pic Les paulements du pic peuvent tre trait s comme des pics normaux l aide d un v nement programm de l int grateur 94 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Attribution de la ligne de base Une fois qu un groupe de pics est termin et que la ligne de base est d tect e l int grateur demande l algorithme d attribution d attribuer la ligne de base par une technique d essais et d erreurs Il utilise des corrections d aire trap z o dale et de hauteur proportionnelle afin de normaliser et maintenir la ligne de base la plus basse possible Les entr es dans l algorithme d attribution de la ligne de base comprennent galement des param tres des fichiers de m thod es et de donn es identifiant le d tecteur et l application utilis s par l int grat eur pour optimiser ses calculs Construction de la ligne de base par d faut Dans les cas l
18. mentaire de contr le d instruments et d acquisition de don n es CPL r f rence produit G2171BA module suppl mentaire de contr le d instruments et d acquisition de don n es EC r f rence produit G2172BA module compl mentaire de contr le d instruments d acquisition et d val uation de donn es CPL MSD r f rence produit G2712BA module suppl mentaire d acquisition de donn es analogiques r f rence produit G2073BA module d extension MSD permettant la mise niveau du syst me CPL vers la version LC7MSD r f rence produit G2712BA Modules compl mentaires pour l valuation des donn es Vous pouvez enrichir les capacit s de traitement des donn es des ChemSta tions gr ce aux modules compl mentaires de traitement de donn es con us pour des applications sp cialis es e module d valuation spectrale de d tecteur barrette de diodes DAD r f rence produit G2180BA Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 e module compl mentaire de base de donn es de r sultats et d organisation d chantillons ChemStore r f rence produit G2181BA e module d valuation des donn es de biologie analytique et de d convolution CPL MSD r f rence produit G2720BA pour utilisation exclusive avec le module CPL MSD ChemStation e option ChemStation OpenLAB r f rence produit G2189BA permettant l interfa age entre la ChemStation et le Gestionnaire des
19. nage 1 1 M thode 1 talonnage 1 Moyenne Aucune 2 A mise jour 2 2 M thode 1 talonnage 2 Moyenne Aucune 2 A mise jour Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Tableau 17 Table de s quence des m thodes A et B Ligne Flacon Nomde Injection Type d Niveau Mise Mise Inter m thode flacon chantillon d talon jour FR jourTR valle nage 3 10 M thode 1 A 4 11 M thode 1 A 5 12 M thode 1 A 6 13 M thode 1 A 7 14 M thode 1 A 8 3 M thode 1 talonnage 1 Moyenne Aucune 3 B mise jour 9 5 M thode 2 talonnage 2 Moyenne Aucune 3 B mise jour 10 20 M thode 1 B 11 21 M thode 1 B 12 22 M thode 1 B 13 23 M thode 1 B 14 24 M thode 1 B Comprendre votre ChemStation Agilent 203 8 Automatisation Ordre d analyse de la m thode A Cette section d crit l ordre d analyse de la m thode A premi re partie de la s quence deux m thodes Tableau 18 Ordre d analyse de la m thode A N Method Flacon Op ration d injection M thode 1 M thode A 1 Niveau d talonnage 1 et rapport 2 M thode A 2 Niveau d talonnage 2 et rapport 3 M thode A 10 Analyse d chantillon et rapport 4 M thode A 11 Analyse d chantillon et rapport 5 M thode A 1 Niveau d talonnage 1 et rapport 6 M thode A 2 Niveau d talonnage 2 et rapport 7 M thode A 12 Analyse d chantillon et rapport 8 M thode A 13 Analyse d chantillon et rapport 9 M thode A 1 Niveau d talonnage 1 et r
20. ration de 1 x2 normalis par rapport la plus faible quantit de sorte que le facteur de pond ration le plus lev soit 1 La normalisation est effectu e en multipliant la pond ration par la plus faible quantit Par exemple la pond ration d un point d talonnage avec la quantit x est 1 x2 x a o a d signe la plus faible quantit du compos talon pr par e dans les talons Comprendre votre ChemStation Agilent talonnage 7 Pond ration Description Quadratique Un point d talonnage de r ponse y poss de un facteur de pond ration r ponse de 1 y2 normalis par rapport la plus faible r ponse de telle sorte que le facteur de pond ration le plus lev soit 1 La normalisation est effectu e en multipliant la pond ration par la plus faible r ponse Par exemple la pond ration d un point d talonnage de quantit y est 1 y x b o b d signe la r ponse correspondant la plus faible quantit de compos talon pr par e dans les talons Nombre Un point d talonnage est pond r en fonction de son nombre de d talonnages r talonnages Aucune normalisation n est effectu e Des pond rations de points d talonnage quadratique peuvent par exemple tre utilis es pour ajuster la dispersion des points d talonnage Les points d talonnage les plus proches de l origine qui sont g n ralement mesur s avec une plus grande pr cision sont ainsi assur s d obtenir une pond rat
21. s correspondants servent calculer de nouveaux facteurs de r ponse pour les autres pics Vous identifiez l talon interne utiliser pour le calcul de la valeur delta pour chaque pic dans la table d talonnage 198 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Types de s quence Les types de s quence sont les suivants e s quences d talonnage explicite e s quences d talonnage explicite un niveau e s quences d talonnage cyclique plusieurs niveaux e _ talonnages explicites et cycliques utilis s simultan ment dans une s q uence et e s quences d talonnage cyclique avec talonnages encadrants Comprendre votre ChemStation Agilent 199 8 Automatisation S quences d talonnage explicite Ce type de s quence effectue le r talonnage aux intervalles sp cifi s par vos soins dans la table de s quence Pour les s quences d talonnage explicite les talons sont entr s dans la s q uence sans qu aucune entr e d intervalle ne soit fournie dans la table de s q uence Le r talonnage a lieu une fois pour chaque entr e d talon de la table de s quence 200 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 S quences d talonnage cyclique un niveau Ce type de s quence utilise le m me flacon l talon intervalles r guliers dans la s quence L entr e d intervalle de la table de s quence d termine le mode d ex cution du r talonnage Par exemple l
22. s en raison de leur hauteur r duite Optimisation de l int gration Il est souvent utile de modifier les valeurs de sensibilit de pente largeur de pic hauteur de rejet et aire de rejet pour personnaliser l int gration Figure 27 page 113 illustre comment ces param tres affectent l int gration de cinq pics dans un signal se Hauteur de rejet Ligne de base Largeur de pic Figure 27 Utilisation d v nements initiaux Un pic n est int gr que si les quatre crit res sur les param tres d int gration sont satisfaits En utilisant la largeur de pic pour le pic 3 l aire de rejet et la sensibilit de pente pr sent s sur Figure 27 page 113 seuls les pics 1 3 5 et 7 sont int gr s Pic1 est int gr parce que les quatre v nements d int gration sont conformes Pic2 est rejet parce que l aire est inf rieure la valeur de rejet d aire d finie Comprendre votre ChemStation Agilent 113 4 114 Int gration Pic 3 Pic 4 Pic 5 Pic 6 Pic 7 est int gr parce que les quatre v nements d int gration sont conformes n est pas int gr parce que la hauteur du pic est inf rieure la hauteur de rejet est rejet parce que l aire est inf rieure la valeur de rejet d aire d finie n est pas int gr le filtrage et le groupage rendent ce pic invisible est int gr Tableau 12 Valeurs de rejet de hauteur et d aire Param tre d int gration Pic 1 Pic 2 Pic
23. 3 Pic 4 Pic 5 Pic 7 Hauteur de rejet Au dessu Au dessu Au dessu Au desso Au dessu Au dessu s s s us s s Aire de rejet Au dessu Au desso Au dessu Au desso Au desso Au dessu s us s us us s Pic int gr Oui Non Oui Non Non Oui Ev nements programm s Vous pouvez utiliser des v nements programm s pour personnaliser la construction de la ligne de base du signal lorsque la construction par d faut ne convient pas Ces v nements peuvent tre utiles pour l addition des surfaces de pics et pour corriger des aberrations de la ligne de base court et long terme Pour plus d informations sur les v nements d int gration voir Ev nements initiaux page 111 Int gration automatique La fonction Autointegrate est un point de d part pour la d finition d v neme nts initiaux Elle est particuli rement utile lors de la mise en oeuvre d une m thode nouvelle Il est possible de commencer avec une table d v nements d int gration par d faut ne contenant aucun v nement programm puis d optimiser les param tres propos s par la fonction d int gration automatique pour utilisation g n rale Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Principes de fonctionnement La fonction Autointegrate lit les donn es du chromatogramme et calcule les valeurs optimales des param tres d int gration initiaux pour chaque signal du chromatogramme L algorithme examine 1 au d but et la fin du chromatogramme
24. ChemStation Agilent talonnage 7 R talonnage partiel Cette fonction assure uniquement le r talonnage des pics identifi s Les pics manquants n entra nent pas l abandon du r talonnage mais ils font l objet d une annotation dans le rapport R talonnage de tous les temps de r tention migration Cette fonction permet le r talonnage du temps de r tention migration de tous les pics identifi s et non identifi s Cette op ration est effectu e sur la base des temps de r tention migration des pics identifi s Les facteurs de r p onse des pics non identifi s ne sont pas actualis s Comprendre votre ChemStation Agilent 169 7 talonnage R talonnage 170 Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 8 Automatisation Qu est ce que l automatisation 173 D finition d une s quence et d un mod le de s quence 174 Bo te de dialogue Preferences Pr f rences Onglet Sequence S quence 175 Param tres de s quence 177 Table de s quence 179 Cr ation de s quences s quences et mod les de s quence 180 Utilisation de l diteur de table de s quence 180 Utilisation du bouton Insert Vial Range Ins rer une plage de flacons 180 Utilisation du bouton Append Line Ajouter une ligne 181 Utilisation du bouton Custom Fields Champs personnalis s 181 Utilisation de s quences s quences et mod les de s quence 182 chantillons prioritaires 182 S quen age ave
25. ChemStation Agilent CHEM32 Figure 1 38 REPSTYLE CORE LC GC CE MS IOT DRIVERS speclibs Structure des r pertoires ChemStation PICTURES Language helpenu 1024 800 ToolbarSupportFiles Language 800 ToolbarSupportFiles GCI Rapid TEMP DATA METHODS SEQUENCE VERIFY DEMO DEMO Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Tableau 3 Sous r pertoires ChemStation R pertoire Contents Chem32 Ce r pertoire contient les programmes utilis s pour configurer et d marrer le logiciel ChemStation II doit faire partie de la variable PATH Ce r pertoire est ajout automatiquement par le programme d installation sauf si vous en sp cifiez un autre REPSTYLE Utilis pour les mod les de rapport d finis l aide de l diteur de mod le de rapport CORE Utilis pour les composants centraux du logiciel partag s par toutes les configurations d instrument chromatographique lectrophor tique C est le r pertoire de travail de ChemStation PICTURES Contient des graphiques requis par le logiciel ChemStation Language Utilis pour le code de langue nationale de cette partie du logiciel 1024 800 fichiers ToolbarSupport helpenu BACKUP DRIVERS 1 DATA Contient les fichiers d initialisation pour l interface utilisateur graphique Ne pas modifier Utilis pour la version anglaise tats Unis des fichiers d aide pour la partie appropr
26. Il est possible de d finir manuellement un nom de fichier de donn es pouvant comporter jusqu 40 caract res extension com prise Chaque fichier pr sent dans le r pertoire respecte une convention de noms Des r pertoires de donn es additionnels peuvent tre ajout s l aide des param tres de Pr f rences Tableau 7 Fichiers de donn es Nom Description CH UV REPORT TXT REPORT PDF SAMPLE MAC SAMPLE MAC BAC RUN LOG LCDIAG REG ACQRES REG Fichiers de donn es d acquisition chromatographique lectrophor tique Le nom du fichier comporte le type de module ou de d tecteur le num ro du module et l identification du signal ou du canal Par exemple pour ADC1A CH ADC correspond au type de module 1 au num ro du module et A est l identificateur du signal CH d signe l extension chromatographique Fichiers de donn es spectrales UV Le nom du fichier se compose du type de d tecteur et du num ro de l appareil uniquement pour les d tecteurs barrette de diodes et fluorescence Fichiers de donn es de rapport pour les fichiers de donn es de signaux quivalents Macro d informations d chantillon Sauvegarde de la macro d informations d chantillon originale Ce fichier est cr lorsque les param tres d chantillon originaux tels que des multiplicateurs sont mis jour lors du retraitement Entr es du journal g n r es au cours d une analyse Le journal conser
27. Param tres d talonnage pour des analyses simples Si la quantit d chant illon est gale z ro l talonnage externe est calcul 130 Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Calcul du pourcentage normalis Dans la m thode de normalisation les facteurs de r ponse sont appliqu s aux surfaces ou hauteurs des pics de mani re compenser les diff rences de sensibilit du d tecteur pour les diff rents composants de l chantillon Le calcul du rapport Norm est identique au rapport ESTD la diff rence pr s que le calcul des quantit s relatives de compos comprend une tape sup pl mentaire pour calculer des quantit s relatives et non absolues Le rapport Norm pr sente les m mes inconv nients que les rapports aire et hauteur Toute modification affectant la surface de pic totale a une inci dence sur le calcul de la concentration de chaque pic Le rapport de normali sation ne doit donc tre utilis que si tous les l ments recherch s sont lu s et int gr s L exclusion de pics s lectionn s d un rapport de normalisation modifie les r sultats finaux pour l chantillon L quation utilis e pour le calcul du pourcentage normalis d un composant x est la suivante Response RF 100 W D Norm of x 2 Response RF o Response repr sente l aire ou la hauteur du pic x RF repr sente le facteur de r ponse Response RF repr sente le
28. RPTHEAD TXT situ dans le r pertoire des m thodes Vous pouvez modi fier l en t te l aide d un diteur de texte si vous souhaitez ajouter un texte sp cifique pour la m thode Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports ChemStation 10 e Full inclut l en t te les informations sur l chantillon les conditions de l instrument le journal les acquisitions et les r sultats quantitatifs L en t te est stock dans un fichier RPTHEAD TXT situ dans le r pertoire des m thodes Vous pouvez modifier l en t te l aide d un diteur de texte si vous souhaitez ajouter un texte sp cifique pour la m thode e Performance g n re un rapport en fonction des limites sp cifi es dans la bo te de dialogue Modifier les limites de performances du menu Conformit du syst me Pour les m thodes non talonn es les param tres du rapport incluent le num ro du pic le temps de r tention migration laire et la hauteur du pic la description de l acquisition la largeur vraie du pic mi hauteur voir galement Largeur de pic vraie Wx min page 264 la sym trie k l efficacit plateaux et la r solution pour chaque pic Pour les m thodes talonn es les param tres du rapport incluent le num ro du pic le temps de r tention migration le nom du compos la quantit la description de l acquisition la largeur vraie du pic mi hau teur la sym trie k l efficaci
29. Sample Analysis no report PPPppp D D VX Report Report Report Report Report Report Report Sample Sample Dopo gt gt gt D 0 Report Report R Report A Report R Report A Report for for for for for for for Sample Sample Sample Calibration Calibration Calibration Calibration Calibration Analysis no report Calibration Analysis no report Calibration Analysis no report Calibration Analysis no report Print Calibration Table Run No 5 Run No 6 Run No 7 Run No 8 Run No 9 Run No 10 Run No 11 Analysis no report Analysis no report for Calibration Analysis no report Calibration Analysis no report Calibration Analysis no report Calibration Analysis no report Print Calibration Table Sample Run No 12 Sample Run No 13 Calibration Calibration Calibration Calibration Run No 14 Run No 15 Run No 16 Run No 17 Comprendre votre ChemStation Agilent Where A average R replace 211 Automatisation S quences de r talonnage cyclique utilisant plusieurs flacons qui contiennent la m me dilution d talon 212 S quence de r talonnage cyclique utilisant des flacons d talonnage la ronde Lorsque vous analysez une s quence volumineuse ex cutant des r talonnage s cycliques r talonnage automatique effectu apr s un certain nombre d injections d chantillon le volume du flacon d quilibrage risque de se vider durant la s quence La table de s
30. Sample12 Echantillon12 Vial 1 Calla Flacon 1 Etala Comprendre votre ChemStation Agilent 213 214 Automatisation e Vial 5 Cal2a Flacon 5 Eta2a e 6 injections partir du flacon 13 Sample13 Echantillon13 e Vial 2 Callb Flacon 2 Etalb e Vial 6 Cal2b Flacon 6 Eta2b e etc R talonnages cycliques avec utilisation d un flacon diff rent pour chaque talonnage Pour garantir l injection unique de chaque flacon d chantillon la s quence doit d finir un nombre suffisant de flacons d chantillon diff rents afin que l ordre la ronde d crit dans l exemple pr c dent ne soit pas appliqu Par exemple si la s quence traite 80 flacons d chantillon avec des r talonna ges requis tous les 10 chantillons la table de s quence doit contenir 80 10 1 9 lignes d talonnage pour chaque niveau Comme dans l exemple pr c dent les lignes d talonnage doivent tre des lignes de s quence adjacentes faisant r f rence des positions de flacon adja centes S quence encadrante utilisant des flacons diff rents pour les encadrements ouvrant et fermant La m me fonction est disponible pour les s quences encadrantes En d finiss ant la plage appropri e de flacons d talonnage vous pouvez d finir une s q uence encadrante afin que des flacons d talonnage diff rents puissent servir aux encadrements ouvrant et fermant L encore les lignes d talonnage de la s quence doiv
31. Une m thode d talonnage par r gression lin aire ne convient pas pour ces types d analyse et un calcul d talonnage plusieurs niveaux doit alors tre envisag Comprendre votre ChemStation Agilent talonnage 7 Traitement de l origine Vous pouvez traiter l origine de quatre fa ons diff rentes lors du trac de la courbe de r ponse e ignorer l origine e int grer l origine e forcer l origine ou e relier l origine Pour forcer l int gration de l origine dans la courbe d talonnage les points d talonnage sont mis en correspondance par rapport l origine depuis le premier quadrant dans le troisi me quadrant L utilisation de tous les points pour le calcul de r gression assure que la courbe d talonnage passe par l ori gine Ceci est galement d crit dans Figure 37 page 161 R ponse 1000 Courbe d talonnage r 500 100 ra f A L L J Y i 5 10 Quantit ng l Figure 37 Forcer l int gration de l origine Pour plus d informations sur l ajustement de la courbe d talonnage et le trai tement de l origine voir l aide en ligne Comprendre votre ChemStation Agilent 161 7 162 talonnage Pond ration des points d talonnage Lorsque vous d finissez la courbe d talonnage par d faut il est possible de sp cifier la pond ration ou importance relative des diff rents points d tal onnage utilis s pour g n rer la courbe Les options de pond ration suivantes
32. a correspon dance le pic de l chantillon est suppos repr senter le m me compos que celui qui figure dans la table d talonnage Voir Identification des pics page 137 Au cours d une analyse ou pendant la g n ration d un rapport les quantit s entr es pour chaque pic sont utilis es pour calculer les quantit s destin es au calcul s lectionn pour ce rapport Le type et la quantit d infor mations requises pour la cr ation d une table d talonnage varient en fonction du type de proc dure de calcul souhait Les informations suivantes sont n cessaires pour cr er une table d talonnage e le temps de r tention migration de chaque pic de composant d un m lange talon e la quantit de chaque composant utilis e dans l laboration du m lange talon exprim e en unit s homog nes Comprendre votre ChemStation Agilent 153 7 talonnage Courbe d talonnage 154 Une courbe d talonnage est la repr sentation graphique des donn es de quan tit et de r ponse pour un compos obtenues partir d un ou plusieurs chantillons talons G n ralement une aliquote de l talon est inject e un signal est obtenu et la r ponse est d termin e en calculant l aire ou la hauteur du pic comme d crit sur Figure 32 page 154 R ponse R ponse 1000 5 10 10 Temps min Quantit ng ul Figure 32 Signal de l talon 10 ng ul et courbe d talonnage Un coefficien
33. bo te de dialogue utilis e pour s lectionner le registre GLPsave consulter vous pouvez s lectionner les options de r vision suivantes e charger la m thode d origine e charger les signaux d origine e charger les donn es de performance d instrument e imprimer la m thode d origine e imprimer les r sultats d int gration d origine e imprimer les r sultats de quantification d origine e g n rer un rapport initial partir des signaux et de la m thode d origine Vous pouvez utiliser la fonctionnalit de r vision des BPL pour prouver que les donn es chromatographiques sont les donn es d origine pour d montrer la qualit de l analyse partir des donn es de performance de l instrument et pour attester de l authenticit de l interpr tation des donn es Comprendre votre ChemStation Agilent V rification du syst me 12 Par exemple vous pouvez e recharger et r imprimer l analyse des donn es utilis e dans la m thode au moment de l analyse d chantillon afin de prouver que l valuation des don n es pr sent es dans les r sultats de l analyse n a pas t modifi e e passer en revue sans les recalculer les r sultats d int gration et de quanti fication afin d attester de l authenticit du rapport Comprendre votre ChemStation Agilent 283 12 V rification du syst me Fonction de test DAD Les tests de d tecteur peuvent s inscrire dans le cadre de la validation de sys t me de routin
34. cart type de la r gression lin aire de tous les points de donn es dans l intervalle de temps Calcul du bruit l aide de la formule cr te cr te bruit pic max et A A 8e moins min e ic EL ni CEE Er ar as 5e temps Figure 43 Bruit calcul par la distance entre la cr te maximale et la cr te minimale Pour calculer la d rive il convient d abord de d terminer la r gression lin aire partir de tous les points de donn es dans la plage de temps voir la section Analyse de r gression page 272 La droite de r gression lin aire est sous traite de tous les points de donn es de l intervalle de temps afin d obtenir un signal corrig en fonction de la d rive Le bruit cr te cr te est ensuite calcul gr ce cette formule N I max I min o N est le bruit cr te cr te Imax est le pic d intensit maximale et Imin est le pic d intensit minimale dans l intervalle de temps Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 Calcul du bruit par la m thode ASTM D dJ bruit pic max moins min M e d viation temps Figure 44 D finition du bruit l aide de la m thode ASTM La m thode de calcul du bruit ASTM ASTM E 685 93 repose sur la pratique standard de test de d tecteurs photom triques longueur d onde variable uti lis s en chromatographie liquide conform ment aux directives de l American Society for
35. choix Rapport de tableaux Le rapport de tableaux suit un r sultat unique de plusieurs analyses pour un compos talonn pr cis La fonction Control Chart est install e une fois la ChemStation op rationnelle Les m thodes utilisant cette fonction transmet tent le r sultat suivi une feuille de calcul Microsoft Excel apr s chaque ana lyse Le tableur Excel est ensuite utilis pour imprimer le rapport 234 Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports ChemStation 10 Resultats quantitatifs Le type de rapport est identifi par le nom de la m thode de calcul utilis e pour le pr parer par exemple un rapport ISTD Chaque type est d crit bri v ement ci dessous Les calculs effectu s pour chaque rapport sont fournis dans R sultats quantitatifs page 235 Area fournit le rapport le plus concis et ne requiert aucune donn e d talonn age car la diff rence de r ponse de d tecteur des compos s d chantillon n est pas corrig e Le rapport Area aire s av re particuli rement utile pour d velopper une table d talonnage afin de l utiliser avec les autres options de rapport Ce rapport convient aux analyses dans lesquelles la diff rence de r p onse de d tecteur des compos s n est pas significative Height fournit un rapport semblable au rapport Area aire la diff r ence pr s que c est la hauteur et non l aire du pic qui sert aux calculs Norm fournit un rapport dans le
36. d un d tecteur barrette de diodes et d valuation des donn es de spectrom trie de masse ainsi que les fonctionnalit s de base d valuation des donn es de la ChemStation Comprendre votre ChemStation Agilent 13 1 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Mat riel requis pour ChemStation Pour plus d informations sur le mat riel requis pour ChemStation repor tez vous au manuel Installation de votre ChemStation 14 Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 propos du logiciel ChemStation Syst me d exploitation Le logiciel ChemStation requiert le syst me d exploitation Microsoft Windows XP Professionnel SP3 ou Windows Vista Professionnel SP1 La fonction tableur du logiciel ChemStation requiert MicroSoft Excel M thodes et s quences La m thode d analyse d crit de mani re d taill e la proc dure d une s parat ion sp cifique Elle comporte tous les param tres associ s aux activit s de contr le d instrument d acquisition et d valuation des donn es notamment l int gration la quantification et la g n ration de rapports Le syst me peut tre programm pour l acquisition de donn es d une s rie d chantillons avec diff rentes m thodes Le fichier de commande pour ce type d op ration est appel s quence Une s quence comprend les informations de chaque chantillon les r f rences aux m thodes appropri es et les sp cifications de de r
37. d analyse dans un registre dans le cadre des BPL Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Etat des m thodes Une m thode se pr sente sous l un des deux tats suivants m thode stock e ou m thode charg e active M thodes enregistr es Ces m thodes sont enregistr es sur le disque de l ordinateur Les m thodes enregistr es portent un nom de 40 caract res alphanum riques au maximum suivi par l extension M Elles peuvent tre enregistr es dans trois emplacements e La m thode de r f rence est enregistr e dans un sous r pertoire de m t hodes dans un n ud Methods de l Explorateur ChemStation et n est pas directement associ e un conteneur de donn es e Lorsqu une s quence est ex cut e l aide de l option Unique Folder Creation ON voir Bo te de dialogue Preferences Pr f rences Onglet Sequence S quence page 175 des copies de toutes les m thodes de r f rence uti lis es dans la s quence sont stock es dans le conteneur de donn es de s q uence avec les fichiers de donn es correspondants Ces m thodes sont directement associ es la s quence et sont galement utilis es lors du retraitement de la s quence Les modifications apport es ces m thodes ne sont pas r percut es dans les m thodes de r f rence Ces modifications sont r percut es dans la m thode Conteneur de s quences ainsi que dans chaque m thode d analyse de donn es DA M lors d
38. de donn es Comprendre votre ChemStation Agilent 35 1 36 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent La rubrique proc durale de l aide en ligne comprend galement des listes de v rification pour les t ches chromatographiques courantes et propres une technique les plus complexes de mani re aider les utilisateurs moins r gul iers v rifier qu ils configurent correctement le syst me Ces listes de v rific ation sont directement reli es des informations d taill es de l aide en ligne Principe de fonctionnement Le manuel Comprendre votre ChemStation documente le principe de fonc tionnement du logiciel ainsi que les algorithmes utilis s lors des manipula tions de donn es Personnalisation Les utilisateurs chevronn s qui souhaitent personnaliser le fonctionnement de la ChemStation ou y ajouter d autres fonctions peuvent crire des macros cet effet Le manuel de r f rence de base intitul Guide de macroprogrammation que vous trouverez dans l aide en ligne donne de nombreux exemples fonction nels ainsi qu une description compl te des structures et types de donn es internes Le fichier d aide relatif aux commandes accessible directement partir du menu Help Aide ou de la bo te de dialogue Show Command Afficher la com mande de la ChemStation constitue pour le programmeur l ouvrage de r f rence des fonctions Il d crit la syntaxe et les param tres et fournit des exemples de macr
39. de donn es Int gration L algorithme d int gration ChemStation est la deuxi me version d une nou velle g n ration qui vise plus de robustesse de fiabilit et de simplicit d uti lisation Analyse de donn es Quantification Le mode d talonnage de la vue d analyse des donn es permet l affichage simultan des l ments suivants signaux en cours d talonnage avec fen tre des temps de r tention migra tion du compos en cours table d talonnage dont l affichage peut tre configur partir d une s lect ion compl te de param tres d talonnage et courbe du compos en cours d talonnage Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Toutes les fen tres du mode d talonnage sont li es de sorte que toute modifi cation apport e l une d elles s applique automatiquement aux autres Ce mode permet de modifier et de s lectionner les donn es d talonnage sur le graphique La quantification repose sur diff rents calculs normalis talon externe d talon externe talon interne et d talon interne visant l aire ou la hau teur du pic Les talonnages peuvent tre multiniveaux et inclure plusieurs d finitions d talon interne L historique des talonnages est enregistr auto matiquement et peut servir pond rer les calculs de r talonnage Pour plus d informations sur l talonnage et la quantification reportez vous la sect
40. de g n rer plusieurs signaux la d tection multisi gnal est g n ralement utilis e en chromatographie liquide avec des d tecteurs longueurs d onde multiples ou barrette de diodes Ces d tecteurs sont nor malement r gl s de sorte que la longueur d onde la plus proche de la valeur d absorbance aire la plus lev e soit utilis e pour d finir le pic principal de la table d talonnage Sur Figure 31 page 146 il s agit de Lambda Les deux autres longueurs d onde de d tection peuvent tre utilis es en tant que qualificateurs de pic Sur cette figure il s agit de Lambdas et de Lambdas Longueur d onde du pic principal R ponse Longueur d onde du R pic qualificateur R2 Ra g 3 Longueur d onde Figure 31 Qualificateurs de pic Les pics d un compos ont un rapport de r ponse constant diff rentes lon gueurs d onde La r ponse de pic qualificateur repr sente un certain pourcentage de la r p onse du pic principal Les limites qui d terminent la plage acceptable de la r ponse attendue sont d finies dans la table d talonnage lorsque l option Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 Identification Details D tails d identification est s lectionn e Si le rapport entre le qualificateur de pic principal Lambda et le qualificateur de pic par exemple Lambdas est dans les limites tol r es l identit du compos peut tre confirm e Corr lation de signa
41. de la mani re suivante 0 75 x largeur de pic existante 0 25 x largeur du pic actuel Si un v nement d int gration programm d sactive ou d finit la largeur du pic une valeur particuli re l ajustement automatique de largeur de pic est d sactiv Hauteur de rejet et largeur de pic La peak width et la height reject jouent tous deux un r le important dans le pro cessus d int gration La modification de leurs valeurs peut conduire des r s ultats diff rents e Augmentez la hauteur de rejet et la largeur de pic lorsque des composants relativement dominants doivent tre d tect s et quantifi s dans un environ nement fortement bruit Une largeur de pic plus lev e am liore le filtrage du bruit et une hauteur de rejet plus lev e permet d ignorer le bruit al at oire Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 e Diminuez la hauteur de rejet et la largeur de pic pour d tecter et quantifier des composants traces dont les hauteurs sont proches de celles du bruit lui m me En diminuant la largeur de pic vous diminuez le filtrage des signaux tandis qu en diminuant la hauteur de rejet vous assurez que les petits pics ne seront pas rejet s en raison de leur hauteur insuffisante e Si une analyse contient des pics de diff rentes largeurs d finissez la lar geur de pic en fonction des pics les plus troits et diminuez la hauteur de rejet afin d viter que les pics les plus larges soient ignor
42. de param tres chromatographi ques lectrophor tiques et de param tres de performances syst me comme d crit dans la section relative la quantification des r sultats Les r sultats hors de ces plages permettent de contr ler l ex cution des s q uences automatis es comme d crit dans la section relative l automatisa tion Ils sont identifi s dans le rapport d analyse correspondant Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 e Les rapports de performances ou de conformit du syst me voir la section relative la g n ration de rapports ci dessus pr sentent une analyse d t aill e de la qualit de s paration ChemStation peut tre configur de mani re limiter l acc s selon deux niveaux d acc s utilisateur niveau op rateur et gestionnaire Le niveau ges tionnaire qui peut tre prot g par mot de passe permet d acc der toutes les fonctionnalit s de la ChemStation Le niveau op rateur permet unique ment d acc der aux principales fonctionnalit s et d ex cuter les m thodes d analyse d finies Ce niveau qui est destin un usage en laboratoire stan dard emp che en particulier les utilisateurs de modifier et de cr er des m t hodes Robustesse des m thodes Les rapports r capitulatifs de s quence voir Rapport r capitulatif de s quence page 244 permettent de tester la robustesse des m thodes Les rapports d taill s pour des crit
43. de r tention migration du pic d chantillon est compar au temps de r tention migration attendu sp cifi pour chaque composant de la table d talonnage Temps de r tention migration corrig Les temps de r tention migration attendus des pics de composant sont corri g s partir des temps de r tention migration r els d un ou plusieurs pics de r f rence et la correspondance est faite avec ces temps de r tention migration corrig s relatifs Le ou les pics de r f rence doivent tre sp cifi s dans la table d talonnage Qualificateurs de pics Outre l identification des pics par le temps de r tention migration vous pou vez utiliser des qualificateurs de pics pour obtenir un r sultat plus pr cis Si plusieurs pics surviennent dans une fen tre de temps de r tention migration les qualificateurs devront tre utilis s pour identifier le composant corrig 140 Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 Limites de quantit Les limites de quantit d finies dans la bo te de dialogue Compound Details Caract ristiques de compos permettent de qualifier l identification des pics Si la quantit du compos identifi s inscrit dans les limites d finies l identifi cation des pics est mentionn e dans le rapport Comprendre votre ChemStation Agilent 141 Identification des pics Temps de r tention migration absolu 142 La fen tre de temps de r tention migration est utilis e
44. des calculs externes manuels sont requis au titre de la validation il est recommand d utiliser tous les chiffres exploit s dans le cadre des calculs en interne Le fait d utiliser des donn es arrondies et ou affich es dans le cadre des calculs en externe peut fournir des r sultats diff rents de ceux g n r s par la ChemStation en raison des erreurs d arrondi Le paragraphe suivant d crit la mani re d acc der aux chiffres stock s en interne qui composent les nombres g n ralement requis dans les calculs manuels Dans tous les cas un fichier de donn es doit tre charg et faire l objet d un rapport ad quat avant toute ex cution d une commande Toutes les commandes sont saisies au niveau de la ligne de commande de la ChemSta tion que vous pouvez activer via le menu Affichage Affichez les informations contenues dans le fichier C CHEM32 TEMP TXT en utilisant NOTEPAD ou un diteur de texte adapt Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 Donn es brutes de pic Temps de r tention Aire Hauteur Largeur int grateur Sym trie Heure de d but du pic Heure de fin du pic Utilisez l entr e de ligne de commande suivante DUMPTABLE CHROMREG INTRESULTS C CHEM32 1 TEMP INTRES TXT Donn es de pic trait es Temps de r tention mesur Temps de r tention attendu Aire Hauteur Largeur int grateur Sym trie Hauteur mi hauteur m
45. donn es de BPL en cochant la case correspondante sur la liste de v rification de l ex cution Vous pouvez consulter les donn es de BPL partir du menu Data Analysis Analyse de donn es du logiciel ChemsS tation mais vous ne pouvez pas les modifier Commande ou macro de post analyse liste de v rification de l ex cution Si vous avez d fini une commande ou une macro de post analyse elle est ex c ut e apr s l valuation des donn es copie de donn es sur un disque pour les sauvegarder par exemple Enregistrement d une copie de la m thode avec les donn es liste de v rification de l ex cution Cet enregistrement s effectue une fois l acquisition des donn es termin e et uniquement si la case Data Acquisition Acquisition de donn es est coch e sur la liste de v rification de l ex cution La m thode active est alors copi e dans le r pertoire de donn es appel RUN M Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Enregistrement d une copie de la m thode DA M avec les donn es param tre par d faut de la ChemStation En fonction des l ments marqu s dans la Run Time Checklist une copie de la m thode active en cours d ex cution est enregistr e sous le nom DA M avec le fichier de donn es Cette action se produit apr s l ex cution du dernier l ment marqu dans la Standard Data Analysis soit en g n ral apr s l Run Time Checklist Comprendre votre ChemStation Agilent 61 2
46. e LPTIx x repr sentant un chiffre compris entre 1 et 9 Evitez aussi d utiliser ces noms suivis d une extension par exemple Nul txt Des syst mes d exploitation en anglais japonais et chinois ont t utilis s pour tester les conventions de noms Agilent ne peut fournir aucune garantie quant la prise en charge de syst mes d exploitation dans d autres langues que l anglais et de leurs caract res sp ciaux Longueur maximale des noms de fichiers et de sous r pertoires ChemStation Les sp cifications de noms de fichiers et de sous r pertoires utilis es dans Agilent ChemStation sont Tableau 2 Longueur maximale des noms de fichiers et de sous r pertoires ChemStation Fichier sous r pertoire chemin Longueur Ajout Exemple de saisie automatiqu maximale e Nom de fichier de donn es 38 D Demodad d Nom de fichier avec pr fixe compteur 15 D longname000001 d Comprendre votre ChemStation Agilent 17 1 18 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Tableau 2 Longueur maximale des noms de fichiers et de sous r pertoires ChemStation Fichier sous r pertoire chemin M thode S quence Hypers quence Biblioth ques Mod les de rapports personnalis s Sous r pertoire de fichiers de donn es Sous r pertoire de s quence de donn es Nom du conteneur de donn es de s quence Chemin de donn es Chemin de m thode Chemin de s quence Chemin d hypers quence Chemin de biblioth que Che
47. e avec le fichier de donn es avant de charger les donn es de s quence Comme chaque ligne de la table de naviga tion est appel e lors de la r vision des donn es la m thode DA M associ e au fichier de donn es s lectionn est charg e et utilis e pour v rifier et g n rer le rapport Le nom de la m thode est visible dans la barre d tat Le syst me ajoute DA M entre parenth ses DA M pour signaler que la m t hode charg e correspond au fichier de donn es 2 R viser vos donn es l aide de la m thode de s quence Utilisez l option Sequence Method dans Preferences Signal Review Options pour que le sys t me charge la m thode de s quence correspondant la ligne active de la table de navigation Cette m thode charg e chaque chargement d un fichier de donn es permet d effectuer des r visions et de g n rer des rap ports Le nom de la m thode est visible dans la barre d tat Le syst me ajoute sequence entre parenth ses s quence pour signaler que la m thode charg e repr sente la m thode de s quence correspondant la ligne active de la table de navigation 3 R viser vos donn es l aide d une autre m thode Si vous souhaitez utili ser une autre m thode que la m thode d analyse de donn es DA M stock e avec le fichier de donn es pour r viser des donn es vous devez s lectionn er l option current method dans Preferences Signal Review Option Dans ce cas l
48. ensuite examin e pour optimiser les valeurs pr c dentes de hauteur de rejet et de sensibilit de pente L aire de rejet est d finie 90 de l aire minimale du pic le plus sym trique d tect pendant l essai d int gration Le chromatogramme est nouveau int gr avec ces valeurs finales des para m tres d int gration et les r sultats de l int gration sont enregistr s Param tres d int gration automatique Les param tres ci dessous sont d finis par la fonction d int gration automatique e Sensibilit de pente initiale e Hauteur initiale e Largeur de pic initiale e Aire de rejet initiale Comprendre votre ChemStation Agilent 115 4 Int gration Int gration manuelle Int gration manuelle Trac de ligne de base Pics n gatifs Approximation tangentielle Pic d doubl Supprimer le s 116 pic s Ce type d int gration permet d int grer des pics ou groupes de pics s lectionn s Hormis pour la valeur initiale de rejet de surface les v nements d int g ration du logiciel sont ignor s dans la plage indiqu e d int gration manuelle Si un ou plusieurs des pics r sultant de l int gration manuelle se trouvent sous le seuil de rejet de surface ceux ci sont ignor s Les v nements d int g ration manuelle utilisent des valeurs de temps absolues Ils ne sont pas ajust s pour tenir compte de la d rive du signal L Manual Integration permet de d finir les points de d
49. est la proc dure de quantification de base dans laquelle l chantillon talon et l chantillon inconnu sont analy s s dans les m mes conditions Les r sultats de l chantillon inconnu sont alors compar s ceux de l talon pour calculer les quantit s dans l chantillon inconnu Contrairement la proc dure d talonnage interne la proc dure d talonnage externe utilise des facteurs de r ponse absolus Les facteurs de r ponse sont obtenus partir d un talonnage puis enregistr s Dans les analyses d chant illons suivantes le calcul quantitatif applique ces facteurs de r ponse aux quantit s d chantillons mesur es Il est important que pour ce type de calcul le volume d injection d chantillon soit reproductible d une analyse l autre car il n y a pas d talon dans l chantillon pour corriger les variations du volume inject ou de pr paration d chantillon Lors de la g n ration d un rapport d talonnage externe le calcul de la quanti t d un compos sp cifique dans un chantillon inconnu est effectu en deux tapes 1 Une quation de la courbe passant par les points d talonnage de ce compo s est calcul e l aide du type de r gression d fini dans la bo te de dialogue Calibration Settings Param tres d talonnage ou Calibration Curve Courbe d talonnage 2 La quantit du compos dans l chantillon inconnu est calcul e l aide de l quation d crite ci apr s Cette q
50. est s lectionn e Utilisez l option With Calibrated Peaks Pics talonn s pour rapporter les pics non talonn s et les pics talonn s e Utilisez l option Do Not Report Ne pas rapporter pour supprimer le rap port des pics non talonn s Comprendre votre ChemStation Agilent 241 10 Utilisation des rapports ChemStation Destination du rapport 242 Voici les destinations possibles des rapports e Ecran Le rapport texte et graphiques inclus s affiche l cran dans la fen tre de pr sentation du rapport partir de laquelle vous pouvez l imprimer Imprimante Le rapport texte et graphiques inclus est imprim sur l imprimante s lect ionn e e Fichier Le rapport est enregistr dans un fichier Si les donn es sont enregistr es dans un fichier il est possible de les retraiter l aide d un autre pro gramme comme Microsoft Windows EXCEL Formats des fichiers de rapport TXT EMF DIF Il existe quatre formats d enregistrement de rapports Chaque format a une extension sp cifique Il est possible de s lectionner plusieurs formats pour un m me rapport Le texte du rapport est imprim en tant que fichier texte UNICODE Chaque graphique du rapport courbe talonnage ou signal est enregistr dans un m tafichier Microsoft Windows WMF Un m me rapport peut parfai tement inclure plusieurs fichiers WMF Le format de fichier g n r est conforme au format de m tafichier standa
51. et apprentissage du logiciel ChemStation e Utilisation du logiciel ChemStation e Principe de fonctionnement du logiciel ChemStation e Personnalisation de la ChemStation Installation et apprentissage Chaque logiciel ChemStation est livr avec un manuel d installation qui d t aille la configuration mat rielle et logicielle requise l installation de l interface de l instrument l installation du logiciel et la validation de l installation Cha que manuel se rapporte pr cis ment la configuration acquise et peut com porter des conseils sur le d pannage les registres syst me et la maintenance du syst me Utilisation du logiciel Deux autres cat gories d informations en ligne ont t con ues pour les utilisa teurs r guliers Le logiciel ChemStation comporte une aide en ligne contextuelle et index e compl te de type Windows Ce syst me donne des explications d taill es sur chaque cran et indique la signification des param tres qui y figurent Ces explications d taill es sont si n cessaire compl t es par des graphiques Vous pouvez les copier dans le presse papiers de Windows pour les incorporer dans votre documentation personnelle ou les imprimer Gr ce un didacticiel int gr l aide en ligne vous pouvez apprendre utili ser le logiciel tout en travaillant avec vos propres m thodes et donn es Ce didacticiel propose une pr sentation g n rale des premi res tapes d acquisi tion et d analyse
52. et la fin du sous pic la hauteur du d but du sous pic est corrig e par la pente du pic principal La courbe passe sous chaque sous pic qui suit le pic principal l aire sous la courbe d approximation est soustraite des sous pics et ajout e au pic principal voir Figure 17 page 101 14 296 14 357 14 144 Figure 16 Approximation exponentielle Nouveau mode d ajustement de courbe exponentiel Ce mod le tangentiel trace une courbe en utilisant une quation exponentielle pour obenir une approximation du front ou de la tra n e du pic principal La courbe passe sous un ou plusieurs pics qui suivent le pic principal sous pics L aire sous la courbe tangentielle est soustraite des sous pics et ajout e au pic principal Plus d un sous pic peut tre cr t en utilisant le m me mod le Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 exponentiel tous les pics apr s le premier sous pic sont s par s par des lignes verticales partir de la fin du premier sous pic et sont abaiss s uni quement la tangente voir Figure 17 page 101 Pic principal i 14 296 14 357 Sous pics Projections Courbe d approximation exponentielle Ligne de base du pic principal Figure 17 Nouveau mode d approximation exponentielle Approximation lin aire Ce mod le d approximation trace un segment de droite du d but la fin d un sous pic La hauteur du d but du sous pic est corrig e par la pente du pic principal
53. la vall e la ligne de base la fin du deuxi me pic comparer la Figure 13 page 98 la Figure 14 page 99 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Figure 14 Rapport pic vall e Le rapport pic vall e se calcule l aide des quations suivantes H1 2 H2 Rapport pic vall e H2 Hv et H1 lt H2 Rapport pic vall e H1 Hv La Figure 15 page 99 illustre l incidence de la valeur du rapport pic vall e d finie par l utilisateur sur les lignes de base 18 529 18 529 19 060 19 060 Rapport pic vall e Rapport pic vall e inf rieur sup rieur valeur sp cifi e par l utilisateur valeur sp cifi e par l utilisateur Figure 15 Effet du rapport pic vall e sur les lignes de base Comprendre votre ChemStation Agilent 99 4 100 Int gration Int gration tangentielle L int gration tangentielle est une forme de ligne de base construite pour les pics d tect s sur le front ou la tra ne d un autre pic Si l int gration tangen tielle est activ e quatre mod les permettent de calculer les aires des pics correspondants e ajustement de courbe exponentielle e nouvelle approximation exponentielle e approximation lin aire e combinaison de calculs de r gression exponentiel et lin aire approxima tions standard Ajustement de courbe exponentiel Ce mod le d int gration tangentielle trace une courbe l aide d une quation exponentielle passant par le d but
54. lampe ou la barrette de diodes n est pas concern e par ce test Pour les v rifier utilisez la fonction de test DAD Fonction de test DAD page 284 Int gration des pics Le fichier de donn es est int gr de nouveau conform ment la m thode d origine Les r sultats sont compar s aux r sultats d int gration d origine stock s dans le registre de v rification Le test choue si des diff rences sont d tect es Comprendre votre ChemStation Agilent 279 12 V rification du syst me Quantification de compos s Les compos s indiqu s dans le fichier de donn es sont de nouveau quantifi s Les r sultats sont compar s aux r sultats de quantification d origine stock s dans le registre de v rification Le test choue si des diff rences sont d tect es Impression de rapports Le rapport d origine est de nouveau imprim La page suivante pr sente un exemple de test de v rification r ussi 280 Comprendre votre ChemStation Agilent V rification du syst me 12 Vues Verification V rification et Diagnosis Diagnostic Tested Configuration Component Revision ChemStation for LC 3D ChemStation B 01 01 Microsoft Windows Microsoft Windows XP Processor Processor Architecture Intel CoProcessor yes ChemStation Verification Test Details Test Name C CHEM32 1 VERIFY DEFAULT VAL Data File C CHEM32 1 VERIFY DEFAULT VAL VERIFY D Method C CHEM32 1 VERIFY DEFAULT VAL VERIFY M Original Datafile
55. le traitement de ces donn es Aucune copie de la m thode n est enregistr e avec la s quence ou avec le fichier de donn es Ainsi si la m thode est modi fi e ou si une nouvelle m thode est cr e avec ce nom la s quence ne peut pas tre exactement reproduite Les fichiers contenant les donn es de s quence sont stock s conform ment aux param tres sp cifi s dans la partie Data File Fichier de donn es de la bo te de dialogue Sequence Parameters Param tres de s quence Dans ce mode la fonction d attribution d un nom aux s quences disponible dans l onglet Sequence S quence de la bo te de dialogue Prefe rences Pr f rences est d sactiv e Ce mode de stockage tant identique celui du logiciel ChemStation version B 02 01 ou ant rieure il ne b n ficie pas des nouvelles fonctionnalit s de r vision retraitement des donn es dans la vue Data Analysis Analyse de donn es de ChemStation Les donn es de s quence acquises avec l option Unique folder Creation OFF doivent tre retrait es l aide de l option correspondante de la vue Method and Run Control Contr le de m thode et d analyse Les outils compl mentaires ChemStation OpenLAB 2189BA et ChemStore G2181BA requi rent le mode de pr f rence Unique Folder Creation ON D s que la solution compl mentaire est install e sur le logiciel ChemStation l option Unique Folder Creation OFF est d sactiv e Comprendre votre ChemStation Agilent Aut
56. me Ce chapitre d crit la fonction de v rification et les fonctionnalit s GLP de la ChemStation Comprendre votre ChemStation Agilent Sommaire Sommaire 1 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 9 Description g n rale 11 Mat riel requis pour ChemStation 14 propos du logiciel ChemStation 15 Commande des instruments 33 Documentation 35 Structure de r pertoires ChemStation 37 Panneau de navigation 41 2 M thodes 43 Qu est ce qu une m thode 45 Parties d une m thode 46 Etat des m thodes 49 Cr ation de m thodes 52 Modification des m thodes 53 Structure de r pertoire de m thodes 55 Pendant l ex cution d une m thode 56 R capitulatif de l ex cution d une m thode 62 3 Acquisition de donn es 63 Qu est ce que l acquisition de donn es 64 Fichiers de donn es 65 Moniteurs en temps r el 67 Journal 68 Informations sur l tat 69 4 Int gration 71 Qu est ce que l int gration 73 Description 74 Les algorithmes d int gration de la ChemStation 75 Description g n rale 77 Terminologie 82 Comprendre votre ChemStation Agilent Sommaire Principe de fonctionnement 84 Identification d un pic 85 Attribution de la ligne de base 95 Mesure d aire de pic 108 v nements d int gration 111 Int gration manuelle 116 Quantification 121 D finition 122 Calculs de la quantification 123 Facteurs de correction 124 Proc dures de calcul non talonn 126 Proc dures de calcul talonn es
57. moment 1 est sup rieur au temps de r tention Les pics de front diffus pr sentent une obliquit n gative et leur moment 1 est inf rieur au temps de r tention Comprendre votre ChemStation Agilent 263 11 264 Evaluation de l aptitude du syst me Le moment 4 galement appel exc s mesure la compression ou l tirement du pic le long d un axe vertical par rapport un mod le gaussien dont le moment 4 est gal z ro Il est possible de le visualiser en d pla ant ou en s parant les c t s du pic gaussien tout en maintenant une aire constante Si le pic appara t comprim ou cras son exc s est n gatif Dans le cas contraire son exc s est positif En outre l exc s est d fini dans le rapport Performances tendu sous sa forme adimensionnelle Largeur de pic vraie W min W width of peak at height x of total height Wg largeur de base 4 x cart type obtenue en croisant les tangentielles aux points d inflexion avec la ligne de base largeur de pic tangentielle W44 largeur 4 4 de la hauteur largeur 5 x cart type W50 largeur 5 de hauteur largeur de pic de tra n e utilis e pour calculer le facteur de tra ne USP Woo largeur 50 de hauteur largeur de pic r elle mi hauteur ou 2 35 x cart type Facteur de capacit USP rapport de capacit ASTM k k T T1 To o TR temps de r tention du pic min T temps de volume mort min C
58. nes informations relatives l chantillon comme par exemple le nom de l chantillon le nom du fichier de donn es la m thode et le num ro de flacon Le style Compound Summary pr sente sous forme de tableau les analyses d chantillon et les r sultats de quantification de base pour chaque compos talonn ou pour chaque pic en fonction du type de rapport sp cifi dans la m thode Sortie de s quence La bo te de dialogue Sequence Output permet de d finir la sortie d impression du rapport r capitulatif de s quence Si vous choisissez Report to file et que vous indiquez un nom de fichier le rap port sera enregistr dans le fichier sp cifi Par d faut les donn es sont enre gistr es dans le fichier GLPrprt txt Sur les syst mes CPG quip s d un dispositif injection double les donn es sont enregistr es dans les fichiers GLPrptFtxt et GLPrptB txt pour l injecteur avant et l injecteur arri re respec tivement L option Report to PDF permet d enregistrer le rapport dans un document PDF Le rapport est enregistr dans le dossier de s quence sous le nom CLPr prt PDF L option Report to HTM permet d imprimer le rapport au format HTML Le rap port sera alors enregistr dans le r pertoire HTM du r pertoire de donn es sp cifi au niveau des Sequence Parameters Le rapport HTM se compose d un fichier d index index htm et d au moins deux autres fichiers un fichier de contenu contents htm
59. pente et de la courbure dans un ensemble de points de donn es contigus Ces filtres utilisent la d riv e premi re pour mesurer la pente et la d riv e seconde pour mesurer la courbure des points de donn es analys s par l int grateur Les filtres de reconnaissance sont Pente courbure de deux trois points de donn es contigus Pente de quatre points de donn es contigus et courbure de trois points de don n es non contigus Pente de huit points de donn es contigus et courbure de trois points de don n es non contigus Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Le filtre r el utilis est d termin par le param tre de largeur de pic Par exemple au d but d une analyse le filtre 1 peut tre utilis Si la largeur de pic augmente au cours de l analyse le filtre passe d abord au filtre 2 puis au filtre 3 Pour que les filtres de reconnaissance soient performants vous devez attribuer la largeur de pic une valeur proche de la largeur effective des pics de chromatographe lectroph rogramme Au cours de l analyse l int grateur met jour la largeur de pic pour optimiser l int gration si n cessaire L int grateur calcule la largeur de pic mise jour de diff rentes fa ons sui vant la configuration d instrument Pour les configurations LC CE le calcul de largeur de pic par d faut utilise un calcul composite 0 3 x Point d infelexion droit Point d inflexion gauche 0 7 x Aire Hau
60. pour d t erminer le bruit et la pente de cette partie Le bruit est calcul comme tant 3 fois l cart type de la r gression lin aire divis par la racine carr du nombre en pourcentage de points utilis s dans la r gression Ces valeurs sont utilis es pour d finir des valeurs appropri es de hauteur de rejet et de sensibilit de pente pour l int gration L algorithme attribue ensuite une valeur temporaire la largeur de pic en fonction de la dur e du chromatogramme le plus souvent 0 5 en LC et 0 3 0 2 en GC La valeur initiale d aire de rejet est d finie z ro et un essai d int gration est effectu e L essai est r p t plusieurs fois si n cessaire en modifiant les param tres chaque fois jusqu ce qu au moins 5 pics soient d tect s ou qu une int gration soit effectu e avec une hauteur de rejet initiale de 0 L essai d int gration se termine si les conditions ci dessous ne sont pas atteintes apr s 10 essais Les r sultats de l int gration sont examin s et la largeur de pic ajust e en fonc tion des largeurs des pics d tect s ce qui oriente le calcul vers les pics ini tiaux La sym trie des pics d tect s est utilis e pour n inclure que les pics dont la sym trie est comprise entre 0 8 et 1 3 pour le calcul de largeur de pic S il n est pas possible de d tecter suffisamment de pics sym triques cette limite est tendue minSymmetry 1 5 et maxSymmetry 1 5 La ligne de base entre les pics est
61. pour le pr f ixe compteur Le nom de fichier de donn es d fini par le pr fixe compteur peut avoir jusqu quinze caract res plus l extension d soit dix sept caract r es au total Les r gles ci dessous s appliquent au champ pr fixe compteur e le compteur lui m me peut avoir au maximum 6 caract res e si un pr fixe fournit moins de neuf caract res pour le pr fixe le compteur est tendu automatiquement 6 chiffres e le nom donn dans le compteur est le num ro de d part de l incr mentation Comprendre votre ChemStation Agilent 191 8 Automatisation Tableau 15 Prefix Pr fixe Compteur r sultats dans le nom de fichier long 000001 long000001 longname 000001 longname000001 testwithalongna 1 testwithalongna1 192 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Fonctionnement post s quence Vous pouvez indiquer ce qui doit se passer au terme d une s quence d ex cut ion normale ou si ChemStation d tecte une erreur durant la s quence En chromatographie en phase liquide CPL vous cochez pour cela la case post sequence Cmd Macro Cmd macro post s quence des param tres de s quence o vous avez le choix entre e Mettre le syst me en tat STANDBY auquel cas la pompe est arr t e et la lampe teinte e Mettre le syst me en tat LAMPOFF avec toutes les lampes inactives off CPL et EC seulement e Mettre le syst me en tat PUMPOFF avec toutes les pompes inactives off
62. quence Il pr sente galement les principes de r vision par lot de configuration par lot les fonctions de r vision et la g n rati on de rapports che Agilent Technologies 217 9 R vision retraitement des donn es et r vision par lot Table de navigation de la vue Data Analysis Analyse de donn es 218 La vue Data Analysis Analyse de donn es inclut une table de navigation con ue pour faciliter les d placements parmi les fichiers de donn es Cette table affiche les analyses contenues dans le sous r pertoire de donn es ou de donn es de s quence s lectionn Utilisez la pour charger les diff rentes ana lyses ou pour faire d filer automatiquement les acquisitions charg es Pour plus de d tails consultez le manuel Getting Started With New ChemStation Workflow Mise en route du nouveau processus ChemStation Configuration de la table de navigation La table de navigation affiche les informations relatives aux fichiers de don n es en fonction des ensembles de donn es disponibles La table de naviga tion est en lecture seule et ne peut pas tre modifi e Tableau 25 Colonnes de la table de navigation Colonnes des analyses simples Colonnes des analyses de s quence Overlay Date Time Date heure Operator Op rateur Vial Flacon Data File Fichier de donn es Sample Name Nom d chantillon Method Name Nom de m thode Manual Events v nements manuels Sample Info Infor
63. quence ChemStation permet d utiliser une s rie de flacons contenant la m me dilution d talon utiliser en mode la ronde Gr ce cette fonction des s quences volumineuses peuvent tre d finies avec des r talonnages automatiques intervalles fixes et plusieurs flacons d tal onnage pour chaque niveau En outre chaque flacon d talonnage est consom m de la m me mani re En d finissant un nombre appropri de flacons d talonnage il est m me pos sible de garantir l utilisation unique de chaque flacon d talonnage C est l une condition primordiale si un flacon d talonnage r cent est requis pour chaque r talonnage par exemple parce que l analyte s vapore une fois le sep tum perfor ou qu il commence se d grader apr s avoir t en contact avec l aiguille m tallique La section suivante explique comment la table de s q uence ChemStation doit tre configur e pour remplir ces conditions D terminez le nombre total de flacons d talonnage pour chaque niveau par tir de l estimation de l utilisation des talons tout au long de la s quence D finissez une autre ligne de r talonnage cyclique pour chaque flacon d tal onnage Les lignes d finies pour le m me niveau d talonnage doivent se trou ver sur des lignes de s quence adjacentes Les positions de flacon d finies doivent galement tre adjacentes Choisissez le m me intervalle de r talo nnage pour toutes les ligne
64. s court terme lorsque la plage de temps s lectionn e est comprise entre 1 et 10 minutes La plage de temps de chaque cycle dt est de 0 1 minute ce qui correspond dix cycles au moins dans la plage de temps s lectionn e D termination du nombre de cycles n tot n t o t est le temps de cycle et tiot la dur e totale pendant laquelle le bruit est cal cul Calcul du bruit cr te cr te dans chaque cycle Pour calculer la d rive il convient d abord de d terminer la r gression lin aire partir de tous les points de donn es dans la plage de temps voir la section Analyse de r gression page 272 La droite de r gression lin aire est sous traite de tous les points de donn es de l intervalle de temps afin d obtenir un signal corrig en fonction de la d rive Le bruit cr te cr te est ensuite calcul gr ce cette formule o N est le bruit cr te cr te Imax le pic d intensit maximale et Lmin le pic d intensit minimale dans la plage de temps Calcul du bruit ASTM n EN i l n N4sTM o Nasty est le bruit calcul selon la m thode ASTM La d termination ASTM du bruit n est pas effectu e si la plage de temps s lect ionn e est inf rieure une minute En fonction de la plage si la plage de temps s lectionn e est sup rieure ou gale une minute le bruit est d fini Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11
65. sactiv la table d talonnage de la m thode ma tresse est mise jour pendant le r talonnage Comprendre votre ChemStation Agilent 195 Automatisation Sp cification de r talonnages 196 Les param tres de r talonnage de la s quence sont saisis directement dans la table de s quence Ces param tres d finissent le mode de r talonnage de la m thode durant une s quence Param tres de r talonnage de la table de s quence Le facteur de r ponse et les temps de r tention migration peuvent tre mis jour de plusieurs mani res Le niveau d talonnage la mise jour du facteur de r ponse et la mise jour des temps de r tention migration sont des ins tructions utilis es dans l analyse de donn es lors du r talonnage de la table d talonnage Lorsque l talonnage est sp cifi dans la colonne SampleType Type d chant illon de la table d chantillons les colonnes suivantes sont actives et modifiables e Cal Level Niveau d talonnage Update RT Mettre jour le temps de r tention Update RF Mettre jour le facteur de r ponse e Interval Intervalle Les valeurs que vous pouvez saisir dans chacune de ces colonnes sont r pert ori es dans le tableau suivant Tableau 16 Param tres de r talonnage de la table de s quence CAL Level Niveau Update RT Mettre Update RF Mettre Interval Intervalle d talonnage jour le temps de jour le facteur de r tention r
66. t d finie par l utilisateur qui s ex cute la fin de la s quence la suite d une erreur ou une fois toutes les analyses termin es La table de s quence ou liste d analyses effectuer est cr e dans une inter face utilisateur comparable celle d un tableur permettant de sp cifier le num ro des flacons le nom des chantillons les m thodes d analyse les para m tres de quantification des chantillons notamment la quantit d chant illon un facteur de multiplication et de dilution une sp cification d talonnage les param tres d change de donn es LIMSID et le nombre de r p titions des injections Selon les instruments et modules configur s d autres champs peuvent tre accessibles Par exemple si un syst me CPL Agilent 1100 1200 comporte un collecteur de fractions la colonne Fract Start D but de fraction appara t dans la table de s quence La pr sentation de la table de s quence est modifiable par l utilisateur Vous pouvez passer d une Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 cellule une autre dans la table et copier couper ou coller des cellules des lignes enti res ou une s rie de lignes de mani re cr er des s quences effica cement et rapidement Dans la table de s quence les chantillons sont identifi s comme chantillons inconnus chantillons d talonnage et chantillons de contr le Le type d chantillon d termine le traite
67. talonnage 162 quadratique 162 uniforme 162 pr cision format de nombre 274 Pr f rences 37 pr sentation du logiciel configuration du syst me 15 m thodes et s quences 15 syst me d exploitation 15 Q qualificateurs 146 quantification d finition 122 talonnage externe 128 rapport de capacit 264 rapport de conformit du syst me rapport de performances 24 rapport de lot formats de sortie 230 rapport pic vall e 98 rapport r capitulatif de s quence caract ristiques de la sortie 247 configuration 245 en t te 245 journal 245 290 m thodes 245 page r capitulative 247 rapports d analyse 245 statistiques 246 table d chantillons 245 table de s quence 245 rapport formats de fichier 242 non talonn 233 personnalis 26 r capitulatif de s quence 26 rapports de conformit du syst me 24 performances tendues 25 style performances et bruit 25 rapports de tableaux 27 rapports conformit du syst me 24 rapport style 238 tableau 27 reconnaissance de pic filtre 86 r talonnage d finition 168 justification 168 r pertoire m thode 55 structure 37 r ponse de d tecteur 157 r ponse d tecteur 157 rapport 146 r sidu carttype 155 relatif 155 r solution 267 r tention relative 267 S sensibilit de pente 111 s quence cr ation 182 enregistrement 182 talonnage cyclique 202 modifier 182 signal analogique 64 signal num rique 64 signal analogique 64
68. tre utilis en cas de doute sur la lin ar it de la r ponse d un composant ou pour confirmer la lin arit de la plage d talonnage Chaque niveau d talonnage correspond un chantillon talon ayant une concentration donn e de composants Les chantillons talons doi vent tre pr par s de sorte que la concentration de chaque composant varie Comprendre votre ChemStation Agilent talonnage 7 dans la plage de concentrations attendue dans les chantillons inconnus Il est ainsi possible de pr voir la variation de la r ponse du d tecteur en fonction de la concentration et calculer les facteurs de r ponse en cons quence La courbe d talonnage multiniveau repr sent e comporte trois niveaux et illustre un ajustement lin aire passant par l origine La m thode d ajustement lin aire passant par l origine s apparente la m thode d talonnage simple Il est suppos que la r ponse du d tecteur en fonction de la concentration est lin aire La diff rence entre ces deux types d talonnage est la suivante dans le cadre d un ajustement lin aire la pente de la r ponse du d tecteur peut tre d termin e par un ajustement passant par plusieurs points un pour chaque niveau R ponse Courbe d talonnage 1000 500 100 1 5 10 Concentration ng pl Figure 36 Courbe d talonnage multiniveau avec trois niveaux La table d talonnage correspondante qui pr sente sous forme de tableau les informat
69. un but particulier En aucun cas Agilent ne peut tre tenu responsable des ventuelles erreurs contenues dans ce document ni des dommages directs ou indirects pouvant d couler des informations contenues dans ce document de la fourniture de l usage ou de la qualit de ce document Si Agilent et l utilisa teur ont souscrit un contrat crit dis tinct dont les conditions de garantie relatives au produit couvert par ce document entrent en conflit avec les pr sentes conditions les conditions de garantie du contrat distinct se sub stituent aux conditions stipul es dans le pr sent document Licences technologiques Le mat riel et le logiciel d crits dans ce document sont prot g s par un accord de licence et leur utilisation ou reproduction sont soumises aux termes et conditions de ladite licence Mentions de s curit ATTENTION Une mention ATTENTION signale un danger Si la proc dure le pro c d ou les consignes ne sont pas ex cut s correctement le produit risque d tre endommag ou les donn es d tre perdues En pr sence d une mention ATTENTION vous devez conti nuer votre op ration uniquement si vous avez totalement assimil et respect les conditions men tionn es AVERTISSEMENT Une mention AVERTISSEMENT signale un danger Si la proc d ure le proc d ou les consignes ne sont pas ex cut s correcte ment les personnes risquent de s exposer des l sions graves En pr sence d u
70. une analyse donn e La fonction de v rification de la ChemStation vous permet de v rifier le fonc tionnement correct du logiciel ChemStation Pour ce faire vous pouvez retrai ter les fichiers de donn es selon des m thodes sp cifiques avant de comparer les r sultats avec une norme pr d finie La fonction de v rification rev t un int r t tout particulier lorsqu il s agit de faire la preuve de l int grit des r s ultats d int gration et de quantification Le test de v rification standard est votre disposition mais vous tes libre de cr er vos propres tests partir de vos m thodes et fichiers de donn es afin de v rifier les combinaisons logicielles algorithmiques utilis es par vos m thodes d analyse Le test de v rification est un fichier prot g Il est donc impossible de le modifier ou de le supprimer La zone Verification V rification de la vue Data Analysis Analyse de don n es permet de s lectionner les options suivantes e Lancer un test de v rification dans la base de donn es e D finir un nouveau test de v rification et l ajouter la base de donn es e Supprimer un test de v rification de la base de donn es Comprendre votre ChemStation Agilent V rification du syst me 12 La section proc durale du syst me d aide en ligne d crit la proc dure suivre pour r aliser ces t ches Dans le cadre d un test de v rification de la ChemSta tion vous pouvez ex cuter le test dans son
71. valu s dans le rapport r capitulatif de s quence Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 Les essais sont document s dans un format qui est g n ralement accept par les autorit s r glementaires et par les v rificateurs ind pendants Ces statisti ques portent sur les donn es suivantes e temps de r tention migration de pic e aire de pic e quantit e hauteur de pic e largeur de pic mi hauteur e sym trie de pic e tra n e de pic e facteur de capacit k e nombre de plateaux e r solution entre pics e s lectivit par rapport au pic pr c dent e asym trie et exc s La valeur moyenne l cart type l cart type relatif et l intervalle de confiance sont des valeurs calcul es Vous pouvez d finir des limites d cart type d cart type relatif ou d intervalle de confiance pour chacun de ces param tres Si les valeurs sont sup rieures aux limites que vous avez d finies le rapport est alors marqu afin d attirer votre attention La qualit des donn es analytiques peut tre prouv e en conservant des enre gistrements des conditions r elles au moment des mesures Le fichier journal de ChemStation enregistre les conditions avant et apr s toute analyse Ces informations sont stock es avec les donn es et pr sent es dans un rapport avec les donn es d chantillon Les courbes de performance de l instrument sont enregistr es pendant tout
72. 127 Calcul d talonnage externe 128 Calcul du pourcentage normalis 131 CalculISTD 132 Identification des pics 137 En quoi consiste l identification des pics 138 R gles de correspondance des pics 139 Types d identification des pics 140 Temps de r tention migration absolu 142 Temps de r tention migration corrig s 144 Qualificateurs de pic 146 La proc dure d identification 149 talonnage 151 Terminologie 152 Table d talonnage 153 Courbe d talonnage 154 chantillons inconnus 156 Types d talonnage 157 talonnage group 164 Sommation des pics 165 R talonnage 166 Comprendre votre ChemStation Agilent Sommaire 8 Automatisation 171 Qu est ce que l automatisation 173 D finition d une s quence et d un mod le de s quence 174 Bo te de dialogue Preferences Pr f rences Onglet Sequence S quence 175 Param tres de s quence 177 Table de s quence 179 Cr ation de s quences s quences et mod les de s quence 180 Utilisation de s quences s quences et mod les de s quence 182 Fichier journal de s quence 186 Proc dure d analyse de s quence 187 Structure d un fichier de donn es de s quence Mode Cr ation de dossiers uni ques activ 189 Attribution d un nom des fichiers de donn es dans une s quence 190 Fonctionnement post s quence 193 R talonnage automatique 195 Sp cification de r talonnages 196 Types de s quence 199 S quences d talonnage explicite 200 S
73. Automatisation 8 Structure d un fichier de donn es de s quence Mode Cr ation de dossiers uniques activ Structure d un fichier de donn es de s quence Mode Cr ation de dossiers uniques activ Dans la ChemStation version B 02 01 ou sup rieure le lien entre les donn es brutes et la m thode a t renforc comme l illustre la figure Structure d un fichier de donn es de s quence en mode Cr ation de dossiers uniques activ EX D ATREE NDATANTEST1 DEMOBAT CH 12 01 2006 13 05 01 Ele Edit View Favorites Tools Help lt H Back td Search Folders 4 GE X 2 FE Address f E D TREE1 DATA TEST1 DEMOBATCH 12 01 2006 13 05 01 Folders z M thodes E 6 0 TREE a 2005011201 M q i 6 2 DATA EI DEMOBATCH M amp 3 DEMO Ca s161000001 D O TEST SEQ 1 C 5161000002 D 8 02 TESTI S1G1000003 D FSC EEe 2561000000 2006011201 M S1G1000005 D S1G1000008 D S1G1000007 D s1G1000008 0 DEMOBATCH M g 161000001 0 C 5610000020 C3 ACQM 0 DAM C2 SIG1000003 D S SIG1000004 D s1G1000005 0 SIG1000006 D 1 SIG1000007 D 5161000008 0 amp C2 161000003 D 8 2 S1G1000010 D C2 51G1000011 0 S s1G1000012 0 H O 1G1000013 0 0 s1G1000014 0 C S161000015 0 5161000016 0 W S1G1000017 0 C2 5161000080 8 2 5110000190 C S1G1000020 0 i TEST M M thode d acquisition siG1000011 0 M thode d analyse des donn es C 5161000020 C2 5161000030
74. CPL et EC seulement ou e Utiliser une macro SHUTDOWN par d faut ou modifier SHUTDOWN MAC pour d terminer une op ration sp cifique Par exemple vous pouvez arr ter le syst me au terme de la s quence La macro d arr t peut galement servir param trer le d bit sur z ro ou le r duire l g rement Dans les param tres de s quence vous pouvez indiquer la macro personnali s e ex cuter en incluant son nom dans le champ Post Sequence Cmd Macro Cmd macro post s quence puis en cochant la case Not Ready Timeout Temporisation non pr t CPL et EC seulement La valeur Not Ready Timeout Temporisation non pr t des param tres de s q uence repr sente le temps d attente n cessaire du syst me avant que l instru ment soit pr t Une fois ce laps de temps coul le syst me s arr te Comprendre votre ChemStation Agilent 193 8 Automatisation Wait Time Temps d attente CPL et EC seulement Les param tres de s quence vous permettent d indiquer un temps d attente qui est ex cut une fois la m thode charg e et avant l injection l aide de cette m thode Cela permet de r quilibrer les colonnes les capillaires lorsque de nouvelles conditions d analyse sont utilis es 194 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 R talonnage automatique En g n ral l talonnage s effectue apr s toute modification des conditions de fonctionnement par exemple changement de colonne ou de ca
75. ChemStation Agilent 2 amp D e 8 e e 00 ee Te PINCE 1 Pai t oe e a e 0201 oTecheng _ 2 500003 Dh LT e Comprendre votre ChemStation gy Agilent Technologies Avertissements Agilent Technologies Inc 2004 2005 2009 Conform ment aux lois nationales et inter nationales relatives la propri t intellectu elle toute reproduction totale ou partielle de ce manuel sous quelque forme que ce soit par quelque moyen que ce soit voie lectronique ou traduction est interdite sans le consentement crit pr alable de la soci t Agilent Technologies Inc R f rence du manuel 62070 93126 Edition 07 09 Imprim en Allemagne Agilent Technologies Hewlett Packard Strasse 8 76337 Waldbronn R vision du logiciel Ce guide correspond aux r visions B 04 xx du logiciel Agilent ChemStation o xx d s igne des num ros de r visions mineures du logiciel sans influence sur l exactitude tech nique de ce guide Garantie Les informations contenues dans ce document sont fournies en l tat et pourront faire l objet de modifica tions sans pr avis dans les ditions ult rieures Dans les limites de la l g islation en vigueur Agilent exclut en outre toute garantie expresse ou implicite quant ce manuel et aux informations contenues dans ce dernier notamment mais sans s y restreindre toute garantie march ande et aptitude
76. E ET o Figure 38 Bo te de dialogue Partial Sequence S quence partielle S quence partielle en mode de pr f rence Mode Cr ation de dossiers uniques activ Les donn es de s quence sont enregistr es dans un conteneur de donn es de s quence portant un nom de conteneur de s quence d fini Si vous ex cutez une s quence partielle le syst me cr e un nouveau conteneur de donn es de s quence en utilisant les param tres Preference chaque fois qu une partie de Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 cette s quence est ex cut e Il est donc possible de cr er par exemple trois conteneurs de donn es pour la m me s quence en ex cutant trois fois une s quence partielle bas e sur cette s quence S quence partielle en mode de pr f rence Mode Cr ation de dossiers uniques d sactiv Les fichiers contenant les donn es de s quences sont stock s conform ment aux param tres sp cifi s dans la section Data File de la bo te de dialogue Sequence Parameters M me si la s quence est ex cut e partiellement tous les fichiers de donn es sont stock s dans le m me sous r pertoire Comprendre votre ChemStation Agilent 185 8 Automatisation Fichier journal de s quence Un fichier journal indiquant tous les v nements qui se sont produits lors de la s quence est g n r Il est utile pour identifier notamment le moment o des erreurs surviennent si la s quence est a
77. La ChemStation comporte une vue Conception de rapport personnalis desti n e aux utilisateurs qui souhaitent d finir le contenu exact de leurs rapports L utilisateur configure graphiquement un mod le de rapport pouvant compor ter des informations g n rales sur les chantillons ainsi que des informations relatives aux signaux l int gration et aux r sultats quantitatifs des analyses Il est possible de d finir chaque l ment par exemple du texte des tableaux et des graphiques de les organiser en sections informatives et d ajuster graphi quement leur position relative leur taille et leur orientation Les diff rentes sections peuvent galement tre ajout es supprim es r organis es et imbri qu es Il est galement possible de configurer les en t tes et pieds de page qui appa ra tront sur chaque page l horodatage du rapport et la num rotation des pages au format page x of y Les informations du rapport peuvent comprendre n importe quel param tre ChemStation ou d fini par l utilisateur Une fois le rapport format il peut tre associ une m thode particuli re pour devenir le format de rapport par d faut pour ce type d analyse Les rapports personnalis s peuvent tre affich s l cran imprim s ou enre gistr s dans un fichier Les rapports affich s l cran contiennent des graphi ques Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Pour plus
78. Le pic n tait pas attribu D autres indicateurs peuvent tre ajout s en ordre de priorit Caract re 3 Pic d form Int gration abandonn e D tection de limite inf rieure de plage D tection de limite sup rieure de plage Caract re 4 Le quatri me caract re d crit le type du pic Le pic est un pic de solvant Le pic est n gatif Le pic est une sommation d aires Pic calcul par int gration tangentielle approximation standard Pic calcul par int gration tangentielle approximation exponentielle ancien mode Pic calcul par int gration tangentielle approximation exponentielle nouveau mode Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 m Pic d fini par une ligne de base manuelle n Pic n gatif d fini par une ligne de base manuelle t Pic int gration tangentielle d fini par une ligne de base manuelle R Le pic est un pic de solvant recalcul f Pic d fini par une tangente d paulement de front Pic d fini par une tangente d paulement de tra ne Pic d fini par une projection verticale d paulement de front Pic d fini par une projection verticale d paulement de tra ne c On S Pic non attribu Comprendre votre ChemStation Agilent 107 4 Int gration Mesure d aire de pic 108 La derni re tape de l int gration de pic consiste d terminer son aire finale Les aires de pic sont calcul es partir du contenu du fichier de points cardi
79. TD contient plusieurs pics le plus grand pic est retenu Comprendre votre ChemStation Agilent 149 6 Identification des pics Recherche des pics talonn s restants La troisi me passe vise identifier tous les pics restants r pertori s dans la table d talonnage Les pics autres que ceux de r f rence dans la table d tal onnage sont compar s aux pics d analyse restants l aide de la fen tre du temps de r tention RT chaque pic talonn correspond un temps de r tention migration propre dans la table d talonnage Il est ajust l analyse en cours sur la base de l identification pr alable des pics de r f rence La fen tre de temps de r tent ion migration du pic talonn est ajust e d apr s le temps de r tention migra tion corrig du pic talonn Si plusieurs pics sont trouv s dans la m me fen tre le pic avec un temps de r tention migration le plus proche du temps de r tention migration pr vu et qui r pond aussi aux sp cifications de qualificateur facultatives est choisi Classification des pics non identifi s S il reste des pics non identifi s ils sont r pertori s dans la cat gorie des pics inconnus La ChemStation essaie de regrouper les pics inconnus appartenant au m me compos Si un pic a t d tect dans plusieurs signaux les pics avec le m me temps de r tention migration dans chaque signal sont group s en un seul compos Les pics inconnus sont int gr s dans les r
80. TR du pic b TR en min M thode tangentielle USP ASTM 2 Tr b T R a W R B b H B a M thode 5 x cart type 2 5 Tr b P Tria W R 44b t Waa a M thode mi largeur R solution adopt e dans le rapport de performances R 2 DUko Tra j W 50 b 50 a M thode statistique a M1 W sia M1 W R ta S b Comprendre votre ChemStation Agilent 267 11 Evaluation de l aptitude du syst me Ml temps de r tention moyen pour le pic x 1er moment statistique min WB x largeur de base du pic x min Wa 4x largeur 4 4 de la hauteur du pic x min Wioc largeur 50 de la hauteur du pic x min Ws x largeur d riv e des moments statistiques M2 pour pic x min voir aussi Moments statistiques page 262 268 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 D finitions de la reproductibilit Dans le cadre de la r vision statistique des donn es analytiques en mati re de reproductibilit la s quence s apparente un petit chantillon al atoire pr l ev dans un nombre infini de r sultats exp rimentaux Le traitement d un ensemble complet de r sultats requiert une quantit de mat riel d chantillon illimit e ainsi que du temps Les donn es strictement statistiques ne s appli quent qu un jeu ou une population de donn es complet et autonome D s lors un tel traitement doit repo
81. Testing and Materials ASTM En fonction de la taille de l inter valle de temps on distingue trois types de bruit La d termination du bruit repose sur la mesure cr te cr te dans des plages de temps d finies Dur e de cycle t Bruit long terme amplitude maximale de toutes les variations al atoires de signal du d tecteur aux fr quences comprises entre 6 et 60 cycles par heure Le bruit est d fini comme tant long terme lorsque la plage de temps s lect ionn e d passe une heure La plage de temps de chaque cycle dt est de 10 minutes ce qui correspond six cycles au moins dans la plage de temps s l ectionn e Bruit court terme amplitude maximale de toutes les variations al atoires de signal du d tecteur d une fr quence sup rieure un cycle par minute Le bruit est d fini comme tant court terme lorsque la plage de temps s lect ionn e est comprise entre 10 et 60 minutes La plage de temps de chaque cycle dt est d une minute ce qui correspond dix cycles au moins dans la plage de temps s lectionn e Bruit tr s court terme ne fait pas partie de la norme ASTM E 685 93 cette notion est introduite afin de d crire l amplitude maximale de toutes les variations al atoires de signal du d tecteur d une fr quence sup rieure un cycle par 0 1 minute Comprendre votre ChemStation Agilent 255 11 256 Evaluation de l aptitude du syst me Le bruit est d fini comme tant tr
82. VERIFY D Original Acquisition Method VERIFY M Original Operator Hewlett Packard Original Injection Date 4 16 93 11 56 07 AM Original Sample Name Isocratic Std Signals Tested Signal 1 DAD1 A Sig 254 4 Ref 450 80 of VERIFY D ChemStation Verification Test Results Test Module Selected For Test Test Result Digital electronics test No N A Integration test yes Pass Quantification test yes Pass Print Analytical Report No N A ChemStation Verification Test Overall Results Pass Comprendre votre ChemStation Agilent 281 12 V rification du syst me Registre GLPsave 282 Le registre GLPsave est enregistr au terme de chaque analyse lorsque cette option est s lectionn e sur la liste de v rification de l ex cution Il contient les informations suivantes e les signaux e le journal e la table des r sultats d int gration e la table des r sultats de quantification e les donn es de performance de l instrument e la m thode d analyse des donn es Ce registre est prot g dans son int gralit et g n r lors de l analyse Vous pouvez le r cup rer tout moment pour servir de preuve quant aux m thodes analytiques utilis es L option de registre GLPsave de la vue Data Analysis Analyse de donn es vous permet de consulter tout moment le fichier de registre GLPsave Ce fichier est prot g par un total de contr le et il est crypt en code binaire afin d emp cher toute modification Dans la
83. a valeur d intervalle 2 effectue le r talonnage tous les deux flacons d chantillon de la s quence Comprendre votre ChemStation Agilent 201 Automatisation S quences d talonnage cyclique plusieurs niveaux 202 Ce type de s quence utilise diff rents talons pour r talonner une m thode talonn e plusieurs niveaux L exemple suivant d crit une s quence deux m thodes A et B destin e analyser deux groupes d chantillons A et B sont des m thodes d talonnage plusieurs niveaux qui se r talonnent automatiquement intervalles d finis Pour chaque m thode la table de s quence inclut trois entr es e Deux niveaux d talonnage Lignes de s quence 1 et 2 dans la m thode A Lignes de s quence 8 et 9 dans la m thode B e Cinq entr es pour les chantillons Ligne de s quence 3 7 dans la m thode A Ligne de s quence 10 14 dans la m thode B Les talonnages sont sp cifi s intervalles r guliers par l entr e d intervalle de r talonnage dans la table de r talonnage de s quence e La m thode A se r talonne tous les deux chantillons e La m thode B se r talonne tous les trois chantillons La table de s quence ci dessous a t abr g e pour simplifier l exemple Tableau 17 Table de s quence des m thodes A et B Ligne Flacon Nom de Injection Type d Niveau Mise Mise Inter m thode flacon chantillon d talon jour FR jour TR valle
84. activer le diagramme Il s agit d une repr sentation graphique de votre syst me ChemStation Chaque composant est repr sent par une ic ne L tat actif est illustr selon le codage couleur d crit ci apr s Tableau 8 Codage couleur du diagramme du syst me Couleur Status gris inactif ou teint jaune non pr t vert pr t bleu ex cution rouge erreur Il est galement possible d afficher des listes des param tres en cours Outre une pr sentation de l tat g n ral ce diagramme offre un acc s rapide aux bo tes de dialogue permettant de configurer les param tres de chaque compo sant du syst me Pour plus d informations sur le diagramme du syst me reportez vous la sec tion de l aide en ligne consacr e aux instruments Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 4 Int gration Qu est ce que l int gration 73 Description 74 Les algorithmes d int gration de la ChemStation 75 Possibilit s d int gration 75 Description g n rale 77 D finition de la ligne de base initiale 78 Suivi de la ligne de base 78 Attribution de la ligne de base 79 Identification des points cardinaux d un pic 80 Terminologie 82 Points cardinaux 82 Pic de solvant 82 paulements avant arri re 83 Pente 83 Principe de fonctionnement 84 Identification d un pic 85 Largeur de pic 85 Filtres de reconnaissance de pic 86 Groupage 88 Algorithme de reconnaissance de pic 89 Calculs non gaus
85. age s av re n cessaire pour garantir l exactitude de l analyse Consid rons par exemple que vous avez cr une table d talonnage pour le compos caf ine et que vous l utilisez chaque quantification d chantillons contenant de la caf ine un moment donn vous devrez remplacer la colonne le capillaire M me si la colonne le capillaire est remplac par exactement un autre du m me type il ne se com portera pas exactement comme le pr c dent lorsque vous avez cr la table d talonnage pour la caf ine Par cons quent pour pr server la coh rence vous devez r talonner les points dans la table d talonnage avant d utiliser la nouvelle colonne le nouveau capillaire pour analyser des chantillons conte nant des quantit s inconnues de caf ine Vous proc dez ainsi la quantifica tion d chantillons analys s dans des conditions syst me identiques R talonnage manuel Vous pouvez saisir manuellement des informations sur l talonnage des pics et normaliser la table d talonnage en s lectionnant le bouton d option Manual Setup Configuration manuelle dans la bo te de dialogue New Calibration Comprendre votre ChemStation Agilent talonnage 7 Table Nouvelle table d talonnage Pour cr er une m thode d talonnage il convient g n ralement d analyser un m lange talon de cr er une table d tal onnage et de saisir la quantit de tous les pics talonn s pour obtenir les fac teurs de r pons
86. aire du premier pic jusqu au point de vall e 2 au point de vall e la sommation d aire pour le premier pic se termine et la sommation pour le second pic commence 3 lorsque l int grateur localise la fin du second pic la sommation d aire s arr te Ce processus peut tre consid r comme une s paration des pics fusionn s en tra ant une ligne perpendiculaire partant du point de vall e entre les deux pics 92 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 paulements Les paulements sont des pics non r solus sur le front ou la tra ne d un pic de plus grande taille Il n y a pas de vraie vall e c est dire une pente n gative suivie par une pente positive Un pic peut avoir un nombre quelconque d paulements avant et ou arri re 15 550 o Figure 10 paulements de pic Les paulements sont d tect s partir de la courbure du pic mesur e par la d riv e seconde Quand la courbure passe par z ro l int grateur identifie un point d inflexion tels que les points a et b sur Figure 10 page 93 e Un paulement avant potentiel est signal si un second point d inflexion est d tect avant le sommet du pic Si un paulement est confirm le d but de l paulement est d fini au point de courbure positive maximale avant le point d inflexion e La d tection d un second point d inflexion avant la fin du pic ou la vall e indique la possibilit d un paulement arri re Si un paulement est confir
87. al ou horizontal des signaux pour une meilleure comparaison visuelle e projection en miroir ou inversion du signal pour une meilleure comparaison visuelle e fonctions graphiques de d filement et de zoom Comprendre votre ChemStation Agilent 21 1 22 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent r glage des attributs d affichage y compris la s lection de graduations de lignes de base d axes de temps de r tention migration et de noms de com pos s l utilisateur peut aussi s lectionner la police des tiquettes de com pos s et de TR r gler la taille et l orientation de l affichage choisir un affichage en mode s par ou superpos et s lectionner des chelles l affichage du chromatogramme de l lectroph rogramme peut inclure des superpositions graphiques des param tres de l instrument en fonction des capacit s de l instrument configur l utilisateur peut ajouter de fa on interactive des annotations personnali s es mais aussi s lectionner la police la taille l orientation et la couleur du texte une fois d finies les annotations peuvent tre graphiquement d p lac es modifi es ou supprim es copie de l cran dans le Presse papiers Windows aux formats bitmap et m t afichier une fonction mode de saisie sert afficher les valeurs des points de don n es dans les unit s des d tecteurs et exportation des points num ris s de temps d intensit vers le Presse papiers Windows Analyse
88. alage de la ligne de base du pic principal 13 934 14 296 14 357 Figure 20 Valeurs utilis es pour calculer une approximation exponentielle Comprendre votre ChemStation Agilent 103 4 int gration courbe de sous pic corrig e 104 Le mod le exponentiel est ajust sur la partie de la tra ne du pic principal situ e imm diatement avant le premier sous pic La Figure 21 page 104 illus tre la courbe corrig e d un sous pic apr s approximation tangentielle Figure 21 Sous pic corrig de la tra ne Approximation de front de pic Comme pour les sous pics sur la tra ne d un pic principal une int gration sp ciale est n cessaire pour certains pics situ s sur le front ou pente mon tante d un pic voir Figure 22 page 104 Figure 22 Approximation de front de pic L approximation de front de pic est trait e de la m me fa on que l approxima tion de tra ne en utilisant les m mes mod les d approximation Les crit res d approximation sont e rapport hauteur front d approximation Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 e rapport hauteur vall e Le rapport hauteur vall e a la m me valeur pour l approximation de front de pic que pour l approximation de tra ne voir Rapport hauteur vall e Le rapport hauteur front est calcul comme le rapport hauteur tra ne voir Rapport hauteur tra ne mais peut avoir une valeur diff rente Pics non attribu s P
89. ans ces r pertoires ont une extension S La fonction Preferences Pr f rences permet d ajouter des chemins de s quence suppl mentaires voir Bo te de dialogue Preferences Pr f rences Onglet Sequence S quence page 175 et Param tres de s quence page 177 Contient les fichiers de donn es les m thodes et les r sultats de traitement de donn es stock s dans des fichiers de registre REG Ces fichiers ex cutent la proc dure de v rification ChemStation d crite dans l aide en ligne Un jeu de fichiers de donn es de m thode et de registre est utilis pour chaque test de v rification Le sous r pertoire TEMP comprend les fichiers de travail temporaire et les fichiers journal Par exemple pour Instrument 1 le journal en ligne est appel INSTR1 LOG et le journal hors ligne est appel INSTR1 2 L0G Code sp cifique des pilotes des instruments tel que des fichiers INI Contient les fichiers n cessaires pour la g n ration de rapport IQT Contient les biblioth ques spectrales 40 Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Panneau de navigation Un panneau de navigation qui se trouve gauche de toutes les vues ChemSta tion permet d acc l rer l acc s de nombreux l ments ChemStation et de passer rapidement d une vue une autre Ce panneau contient l explorateur ChemStation sous forme d arborescence et une zone de boutons configura
90. apport 10 M thode A 2 Niveau d talonnage 2 et rapport 11 M thode A 14 Analyse d chantillon et rapport Ordre d analyse de la m thode B Cette section d crit l ordre d analyse de la m thode B deuxi me partie de la s quence deux m thodes La m thode B pr sente les diff rences suivantes par rapport la m thode A e Ilya deux injections par flacon pour le niveau d talonnage 2 L entr e d intervalle est param tr e sur 3 204 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Tableau 19 Ordre d analyse de la m thode B N Method Flacon Op ration d injection M thode 12 M thode B 3 Niveau d talonnage 1 et rapport 13 M thode B 5 Niveau d talonnage 2 et rapport 14 M thode B 5 Niveau d talonnage 2 et rapport 15 M thode B 20 Analyse d chantillon et rapport 16 M thode B 21 Analyse d chantillon et rapport 17 M thode B 22 Analyse d chantillon et rapport 18 M thode B 3 Niveau d talonnage 1 et rapport 19 M thode B 5 Niveau d talonnage 2 et rapport 20 M thode B 5 Niveau d talonnage 2 et rapport 21 M thode B 23 Analyse d chantillon et rapport 22 M thode B 24 Analyse d chantillon et rapport Notez que les r sultats r pertori s dans le Tableau 18 page 204 et le Tableau 19 page 205 s obtiennent au moyen d une s quence partielle de fa on avoir un aper u de l ordre d analyse une fois la table de s quence configur e Comprendre votre ChemStation Agilent 205 8 A
91. apports si l option correspondante a t s lectionn e dans la bo te de dialogue Calibration Settings Param tres d talonnage 150 Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent y Etalonnage Terminologie 152 Table d talonnage 153 Courbe d talonnage 154 chantillons inconnus 156 Types d talonnage 157 talonnage simple 157 talonnage multiniveau 158 Plages d talonnage 160 Ajustement de la courbe d talonnage 160 Traitement de l origine 161 talonnage group 164 Sommation des pics 165 R talonnage 166 Qu est ce que le r talonnage 166 Pourquoi r talonner 166 R talonnage manuel 166 R talonnage avec sommation des pics 167 Options de r talonnage 167 Modes de r talonnage 168 R talonnage des pics non identifi s 168 Ce chapitre d crit les fonctionnalit s d talonnage dans la ChemStation che Agilent Technologies 151 7 talonnage Terminologie talonnage Compos Niveau d talonn age Point d talonn age Echantillon talon 152 L talonnage est le processus consistant d terminer les facteurs de r ponse utilis s pour calculer les concentrations absolues de compos en injectant des chantillons talons pr par s sp cialement cet effet La table d talonnage est galement utilis e pour l identification Voir Identification des pics page 137 Un compos chimique peut comporter plusieurs pics dans u
92. arge l valuation spectrale Il affiche l absorbance comme une fonction de la longueur d onde Vous pouvez r gler la fois la plage de longueurs d onde et l chelle d absorbance l cran Comprendre votre ChemStation Agilent 67 3 Acquisition de donn es Journal 68 Le journal affiche les messages g n r s par le syst me d analyse Il s agit des messages d erreur des messages syst me ou des messages d v nement prove nant d un module Le journal enregistre ces v nements qu ils soient affich s ou pas Pour plus d informations sur un v nement du journal double cliquez sur la ligne correspondante pour afficher un texte d aide descriptif Comprendre votre ChemStation Agilent Acquisition de donn es 3 Informations sur l tat Etat de la ChemStation La fen tre d tat de la ChemStation affiche un r capitulatif de l tat du logiciel ChemStation Lorsqu une analyse individuelle est en cours e la premi re ligne de la fen tre d tat de la ChemStation affiche l volution de l analyse en cours e la deuxi me ligne de la fen tre d tat affiche l tat de la m thode en cours et e le nom du fichier de donn es brutes appara t sur la troisi me ligne avec le temps d analyse r el exprim en minutes pour un instrument CPG les fichiers correspondant aux injecteurs avant et arri re apparaissent galem ent Les fen tres d tat d instrument fournissent des informations sur l tat des d tecteu
93. aux et sont enregistr s Chaque point cardinal est caract ris par une coor donn e horizontale de temps coul une coordonn e verticale de hauteur partir de la ligne de base et d autres param tres par exemple le type de pic les codes de s paration les valeurs de d but et de fin de pic potentiels ainsi que les hauteurs aires et pentes correspondantes utilis s par l int grateur pour calculer les aires des pics Pic de solvant Le pic de solvant est g n ralement tr s grand mais ne joue aucun r le sur le plan analytique et n est pas int gr habituellement Cependant lorsque de petits pics int ressants analytiquement parlant sont lu s tout pr s du pic de 82 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 solvant par exemple pendant la tra n e du pic de solvant des conditions d int gration particuli re peuvent tre d finies pour calculer une aire qui tient compte de la tra n e du pic de solvant paulements avant arri re Les paulements apparaissent quand deux pics sont si proches qu il n existe plus de vall e entre eux ils ne sont donc pas r solus Les paulements peuvent appara tre sur le front montant avant du pic ou sur le front descendant tra ne du pic Lors de la d tection d paulement il est possible de les int g rer par int gration tangentielle ou projection sur la ligne de base Pente La pente d un pic refl te le changement de la concentration du compos en
94. bles Il comporte galement une fonction de masquage automatique qui permet d optimiser l espace de travail du logiciel ChemStation et propose des fonc tions standard redimensionnement et r organisation de la zone de boutons de navigation par exemple Boutons de navigation Les boutons de navigation vous permettent de passer d une vue du logiciel ChemStation une autre Pour ce faire il vous suffit de cliquer sur le bouton de navigation concern Vous pouvez r duire agrandir et r organiser la sec tion Navigation Button Bouton de navigation Explorateur ChemStation Le contenu du panneau de navigation d pend de la vue Pour les vues Method and Run Control Contr le de m thode et d analyse Data Analysis Analyse de donn es et Report Layout Mise en page de rapport l explorateur ChemsS tation vous permet d acc der aux diff rents l ments de la ChemStation Pour les donn es les m thodes et les s quences ces l ments reposent par d faut sur les param tres de l diteur de configuration Vous pouvez tendre la repr sentation de ces l ments et sp cifier de nouveaux n uds pour les m t hodes les s quences et les donn es l aide de l option Preferences Pr f re nces du menu View Affichage Comprendre votre ChemStation Agilent 41 1 42 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Tableau 4 Options du panneau de navigation Boutons de navigation Options de l explorateur ChemStation M
95. bouton droit sur la ligne de la m thode concern e La fonction Update Master Method Update Sequence Method permet de copier les param tres d analyse des donn es de la m thode choisie vers la m thode de r f rence s quence correspondante Cette mise jour automati que est r percut e dans l historique de la m thode cible Tableau 5 Disponibilit de la fonctionnalit Update Method dans la table de navigation M thode charg e Option de mise jour disponible M thode individuelle d analyse de donn es Update Master Method PAM Update Sequence Method M thode de s quence Update Master Method M thode de r f rence M thode active Lorsqu une m thode stock e sur le disque est rappel e elle devient la m t hode active Une m thode active est toujours charg e en m moire Lorsque vous lancez le logiciel ChemStation pour la premi re fois la m thode par d f aut fournie par Agilent Technologies est toujours charg e dans le cadre du processus de d marrage Par exemple il peut s agir de l une des deux m thod es suivantes e DEF_LC M pour un instrument de CPL e DEF _GC M pour un instrument de CPG e DEF _CE M pour un instrument d EC Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Une copie de la m thode par d faut est plac e dans la m moire et devient la m thode active A ce stade vous pouvez charger une autre m thode qui deviendra alors la nouvelle m thode active Comprendre votr
96. but et de fin du pic puis d inclure les surfaces recalcul es dans les modules de quantification et de g n ration de rapports Les pics int gr s manuellement sont signal s dans les rapports par le code de s paration de pics M L Manual Integration offre les fonctions suivantes Draw Baseline sp cifie quel moment les lignes de base doivent tre trac es pour un pic ou un ensemble de pics Il est galement possible de sp cifier si les pics dans la plage donn e doivent tre s par s automatiquement tous les points de vall e Negative Peaks sp cifie si toutes les surfaces au dessous de la ligne de base doi vent tre trait es comme des pics n gatifs Il est galement possible de sp cif ier si les pics dans la plage donn e doivent tre s par s automatiquement tous les points de vall e Tangent Skim calcule les surfaces de pics soustraites d un pic principal par approximation tangentielle La surface du pic soumis l approximation tan gentielle est soustraite de la surface du pic principal Split Peak sp cifie un point o un pic doit tre divis par une ligne verticale Delete Peak s supprime un ou plusieurs pics des r sultats d int gration Codes de s paration de pic pour les pics int gr s manuellement Les pics int gr s manuellement sont signal s dans les rapports d int gration par le code de pic MM Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 S il existe un pic avant l
97. c des chantillons de contr le 182 Arr t d une s quence 183 Abandon d une s quence 183 Interruption d une s quence 183 Ex cution d une s quence partielle 183 Fichier journal de s quence 186 Proc dure d analyse de s quence 187 Structure d un fichier de donn es de s quence Mode Cr ation de dos siers uniques activ 189 Attribution d un nom des fichiers de donn es dans une s quence 190 Attribution automatique d un nom un fichier de donn es lors d une s quence 190 Saisie manuelle des noms de fichier de donn es 191 gig Agilent Technologies 171 172 Automatisation Fonctionnement post s quence 193 Not Ready Timeout Temporisation non pr t CPL et EC seulement 193 Wait Time Temps d attente CPL et EC seulement 194 R talonnage automatique 195 Sp cification de r talonnages 196 Param tres de r talonnage de la table de s quence 196 Types de s quence 199 S quences d talonnage explicite 200 S quences d talonnage cyclique un niveau 201 S quences d talonnage cyclique plusieurs niveaux 202 Ordre d analyse de la m thode A 204 Ordre d analyse de la m thode B 204 Utilisation simultan e d talonnages explicites et cycliques 206 Exemple 206 Ordre d analyse de SimpReg 207 S quences d talonnage cyclique avec encadrement 208 Exemple 208 Fonctionnement d une s quence encadrante 209 Exemple 210 S quences de r talonnage cyclique utilisant plusieurs flacons qui contiennen
98. ce Method Mettre jour la m thode de s quence Comprendre votre ChemStation Agilent Use Sequence Table information Utiliser la table de s quence Use Sequence Table Information Utiliser les informations sur la table de s quence V Valley Vall e Valley Height Ratio Rapport hauteur vall e View Vue 287 Index Index hauteur calcul 126 normalis calcul 131 surface calcul 126 A absolu temps de r tention 142 acquisition de donn es d finition 64 aire de pic 108 aire de rejet 111 ajustement courbe 161 analyse de donn es rapports sp cifiques 24 analyse exactitude 168 approximation de front de pic 104 aptitude du syst me statistiques incluses 250 aptitude du syst m limites 251 attribution de la ligne de base 79 95 automatisation 171 bonnes pratiques de laboratoire 30 288 C calcul du pourcentage 126 calcul normalis 131 talonnage externe 128 sym trie de pic 258 ChemStation description g n rale 11 personnalisation 28 commande de l instrument r seau 33 Compos 152 configuration 15 construction de ligne de base 95 courbe d talonnage ajustement 161 161 d finition 154 description 154 multiniveau 158 pond ration des points d talonnage 162 simple 157 z ro origine forc 161 courbe ajustement 161 talonnage 154 crit res d approximation 102 D DAM 61 d but du pic 90 d riv e 86 d tection d paulement 111 d terminat
99. chimique de l ISTD et celui de l inconnu sont similaires Si vous utilisez la proc dure ISTD pour des talonnages avec une caract ristiq ue non lin aire veillez ce que les ventuelles erreurs issues du principe de calcul n entra nent pas d erreur syst matique Dans les talonnages multini veaux la quantit du compos ISTD doit tre constante c est dire identique pour chaque niveau si la courbe d talonnage du compos n est pas lin aire Dans l analyse de l talon interne la quantit du composant tudi est li e la quantit de l talon interne par le rapport des r ponses des deux pics Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Lors d un talonnage ISTD deux analyses le calcul du rapport de quantit corrig d un compos donn dans un chantillon inconnu se d roule comme suit Analyse 1 talonnage 1 Les points d talonnage sont calcul s partir d un rapport de quantit et d un rapport de r ponse pour chaque niveau d un pic particulier dans la table d talonnage Le rapport de quantit est la quantit du compos divis e par la quantit de l talon interne ce niveau Le rapport de r ponse est l aire du compos divis e par l aire ou la hauteur de l talon interne ce niveau 2 Une quation de la courbe passant par les points d talonnage est calcul e l aide du type de r gression d fini dans la bo te de dialogue Calibration Set tings Param
100. ciels Acquisition de donn es liste de v rification de l ex cution e Tous les param tres sont configur s conform ment aux conditions initiales sp cifi es dans la m thode active e Si vous l avez d sign le programme d injection est ex cut et une injection est effectu e partir du flacon d fini Comprendre votre ChemStation Agilent 57 2 58 M thodes L affichage du moniteur montre la progression de l analyse y compris les informations relatives la chromatographie l lectrophor se et les don n es spectrales ventuelles Les donn es sont acquises et stock es dans un fichier de donn es Une fois les donn es acquises une copie de la m thode en cours d ex cution est stock e sous forme de m thode ACQ M pour le fichier de donn es par d faut Analyse de donn es liste de v rification de l ex cution Une fois le temps de fin atteint l analyse s arr te et toutes les donn es brutes sont stock es sur le disque dur de l ordinateur Le module d analyse de don n es du logiciel d marre lorsque toutes les donn es brutes sont stock es Int gration Les objets chromatogrammes lectrophor grammes acquis sont int gr s conform ment aux param tres de la bo te de dialogue Integration Events Ev nements d int gration Pour chaque pic le d but le sommet le temps de r tention de migration et la fin sont d termin s Des lignes de base sont d finies pour chaque pic afin de d
101. composant x Relative And of Absolute Amt of x 100 Sample Amount 134 Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Calcul d talonnage interne de pics non talonn s Il existe deux m thodes pour d finir le facteur de r ponse servant calculer la quantit pour les pics non identifi s 1 Utiliser le facteur de r ponse fixe d fini dans la zone With Rsp Factor Avec facteur de r ponse de la bo te de dialogue Calibration Settings Param tres d talonnage Pour corriger le facteur de r ponse fixe vous pouvez d finir une correction d talonnage interne ISTD Actual Amount of x RF Response Ratio Actual Amount of ISTD M D Response Response Ratio Response stp RF repr sente le facteur de r ponse d fini dans la bo te de dialogue Calibration Settings Ces formules d montrent que les variations de la r ponse ISTD permettent de corriger la quantification du composant inconnu 2 Utiliser un pic talonn Cette proc dure permet d utiliser le m me facteur de r ponse pour la quantification de tous les pics Le facteur de r ponse du compos s lectionn comme celui des pics non talonn s sont corrig s lors de chaque r talonnage Si le facteur de r ponse du pic talonn volue celui des pics non identifi s varie proportionnellement Si une table d tal onnage est d j d finie il est possible de s lectionner un compos dans la zone de
102. contenus d entre prise Agilent ECM Il est possible de configurer jusqu quatre instruments de chromatographie sur chaque ChemStation Si des instruments quip s de d tecteurs spectrosco piques d tecteurs barrette de diodes pour chromatographie en phase liquide ou lectrophor se capillaire sont configur s le nombre de d tecteurs barrette de diodes pris en charge sur une ChemStation est limit deux et le nombre d instruments pris en charge est limit trois Lorsque vous utilisez la ChemStation pour CPL SM afin de contr ler le module CPL SM Agilent s rie 1100 1200 ventuellement avec un module CPL Agilent s rie 1100 1200 ou CPL Agilent 1090 s rie II le PC ne prend en charge aucun autre instrument Produits destin s uniquement l valuation des donn es Il existe galement deux produits utilis s exclusivement pour l valuation des donn es et qui ne peuvent pas tre configur s avec un instrument analytique Ces produits sont destin s l valuation des donn es dans un environnement bureautique e ChemStation pour l valuation des donn es CPL 3D r f rence G2190BA qui offre les fonctionnalit s d valuation des donn es des ChemStations CPG CPL et EC permet l valuation des donn es spectrales d un d tecteur barrette de diodes e ChemStation pour l valuation des donn es CPL MSD r f rence G2730BA qui comprend les fonctionnalit s d valuation des donn es spectrales
103. cquises e la vue Report Layout Mise en page de rapport pour la conception de rap ports sp cifiques D autres vues sont disponibles si des modules d valuation de donn es en option ont t install s ou pour certaines configurations d instrument prenant en charge des proc dures de v rification et de diagnostic La vue ChemStation Companion permet aux op rateurs d analyser des chantillons partir d un tableau pr configur convivial Le volet Navigation contient le bouton Navigation qui permet de basculer rapi dement entre les vues ChemStation et l Explorateur Chemstation base d arborescence Le contenu de l explorateur ChemStation d pend de la vue affich e et permet d acc der aux diff rentes entit s ChemStation Chaque vue est constitu e d un ensemble d l ments standard d interface utili sateur tels que des menus et des barres d outils La barre d outils standard permet d acc der rapidement aux informations communes de sp cification du syst me telles que les m thodes et les s quences La vue Method and Run Control Contr le de m thode et d analyse comporte une barre d tat sys t me une zone d informations d chantillon qui peut tre configur e pour des analyses individuelles ou automatis es et un diagramme de l interface d ins trument pour les configurations GC CE et LC Le diagramme d interface d ins trument comprend des zones dynamiques permettant d acc der rapidement aux param tres des instr
104. d informations sur la mise en page des rapports consultez l aide en ligne Rapports de tableaux Le logiciel ChemStation comporte une fonction de Control Chart Lorsque cette fonctionnalit est install e et s lectionn e l utilisateur peut suivre automati quement un param tre particulier d un compos chaque fois qu une m thode est ex cut e Ces param tres comprennent la quantit le facteur de r ponse le temps de r tention migration et la surface Pour plus d informations sur les rapports personnalis s et les rapports de tableaux consultez l aide en ligne Utilitaires et compatibilit G n ralit s Le logiciel ChemStation permet d importer et d exporter des fichiers de don n es au format de chromatographie ANDI ANalytical Data Interchange publi par l ATA Analytical Instrument Association version 1 0 copyright 1992 L importation de donn es est prise en charge au niveau de conformit 1 informations d chantillon et donn es de signaux et l exporta tion de donn es au niveau de conformit 2 informations d chantillon don n es de signaux et r sultats d int gration Le logiciel ChemStation comporte des commandes et des fonctions prenant en charge la norme DDE change dynamique de donn es de la plate forme Microsoft Windows la fois en tant que client DDE et en tant que serveur DDE Cet ensemble de commandes permet d tablir et d interrompre des connexions de transf rer des informa
105. dans le processus d identification des pics Cette fen tre est centr e sur le temps de r tent ion migration pour un pic pr vu Tout pic d chantillon qui se situe dans cette fen tre est susceptible d tre exploit dans le cadre de l identification des com posants La Figure 30 page 142 pr sente une fen tre de temps de r tention migration pour le pic 2 situ e entre 1 809 et 2 631 minutes alors que le temps de r tent ion migration pr vu est de 2 22 minutes Il existe deux possibilit s pour le pic 2 l une 1 85 minute et l autre 2 33 minutes Si le pic attendu n est pas un pic de r f rence le pic le plus proche du temps de r tention migration attendu de 2 22 minutes est s lectionn Si le pic attendu correspond une r f rence ou un talon interne le plus grand pic de la fen tre est s lectionn Dans les deux cas la ChemStation s lectionne le pic 2 33 minutes Si les deux pics taient de taille identique le pic le plus proche du centre de la fen t re serait s lectionn Pic 1 Pic 2 Pic 3 Pic 4 0 1 2 3 4 5 6 lt 1 809 2 631 Fen tre du pic 2 Figure 30 Fen tres de temps de r tention migration La localisation des pics est effectu e l aide de trois types de fen tres e les fen tres de pic de r f rence qui concernent uniquement les pics de r f rence Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 e les fen tres de pics non r f rence qui s appliqu
106. dante et la tra ne Si n cessaire l int grateur met jour la largeur de pic en cours d analyse pour optimiser l int gration Il est possible de sp cifier la largeur de pic en unit s de temps qui correspond la largeur mi hauteur du premier pic attendu en excluant le pic de solvant La Slope sensitivity est le r glage de sensibilit de d tection de pic Il est modi fiable sur une chelle lin aire La Height reject d termine le rejet de pic en fonction de leur hauteur finale Les pics de hauteur inf rieure la hauteur minimale sont ignor s L Area reject d finit le rejet des pics en fonction de leur aire finale Tous les pics dont les aires sont inf rieures l aire minimale sont ignor s Lorsque la shoulder detection est activ e l int grateur d tecte les paulements en utilisant la courbure du pic indiqu e par la d riv e seconde Si la courbure atteint z ro l int grateur identifie ce point d inflexion comme tant un paul ement possible Si l int grateur identifie un autre point d inflexion avant le sommet du pic un paulement a t d tect Largeur de pic Le param tre de largeur de pic contr le la s lectivit de l int grateur pour dis tinguer les pics du bruit de la ligne de base Pour obtenir de bonnes perfor mances la largeur de pic doit tre proche de la largeur mi hauteur des pics chromatographiques lectroph tiques r els Si n cessaire l int grateur met jour la larg
107. de pic d tect e et compteur de pente montante sup rieur ou gal 2 ou e Compteur de pente descendante gal z ro ou cart type de pente descendante sup rieur l cart type de fin de pic ou e R initialisation imm diate de la ligne de base ou e R initialisation de la ligne de base la vall e suivante Compteur de pente montante sup rieur ou gal 2 Compteur de pente montante inf rieur ou gal 1 D but de pic Dans Tableau 10 page 91 la largeur de pic attendue d termine quelles valeurs de pente et de courbure de filtre sont compar es la sensibilit de pente Par exemple lorsque la largeur de pic attendue est faible les valeurs du filtre 1 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 sont ajout es l accumulateur de pente montante Si la largeur de pic atten due augmente les valeurs du filtre 2 et finalement celles du filtre 3 sont utili s es Lorsque la valeur de l accumulateur de pente montante est 215 l algorithme reconna t un d but de pic potentiel Tableau 10 Valeurs incr mentales de l accumulateur de pente montante Sorties des filtres de d riv e 1 3 en fonction du seuil Filtre 1 Filtre 2 Filtre 3 de sensibilit de pente Pente gt Seuil 8 5 3 Courbure gt Seuil 0 2 1 Pente lt Seuil 8 5 3 Pente gt Seuil 4 2 1 Courbure lt Seuil 0 2 1 Fin du pic Dans Tableau 11 page 91 la largeur de pic attendue d termine qu
108. de r tention migration r el du pic de r f rence 144 Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 Pics de r f rence multiples La correction des temps de r tention migration avec un pic de r f rence sim ple est bas e sur le postulat que l cart du temps de r tention migration r el par rapport aux temps de r tention migration pr vus change de mani re uni forme et lin aire pendant le d roulement de l analyse Or pendant une longue analyse il est fr quent que les temps de r tention migration changent de mani re non uniforme Dans ces conditions l utilisation de plusieurs pics de r f rence r partis tout au long de l analyse offre de meilleurs r sultats Le signal est alors divis en plusieurs zones La variation de l cart entre les temps de r tention migration est suppos e lin aire l int rieur de chaque zone mais la valeur de cette variation est d termin e s par ment pour cha cune d elle L algorithme de correction du temps peut chouer si les temps de r tention de plusieurs pics de r f rence sont trop proches les uns des autres et s ils ne sont pas r partis sur toute la dur e de l analyse Comprendre votre ChemStation Agilent 145 Identification des pics Qualificateurs de pic 146 Un composant peut tre d tect l aide de plusieurs signaux Si elle s applique toutes les formes de chromatographie qui utilisent plusieurs d tecteurs ou des d tecteurs permettant
109. dessous permettent la ChemStation de cr er et traiter des noms valides de fichiers et de r pertoires Les caract res suivants ne sont pas autoris s dans les noms de fichiers ou de r pertoires lt gt amp espaces etc Les noms de fichiers ou de r pertoires comportant l un de ces caract res peu vent poser probl me au moment du chargement des fichiers dans la ChemSta tion Par ailleurs si le dossier d installation contient ces caract res la copie de retraitement n est pas lanc e Si le caract re est utilis dans le dossier d installation certains raccourcis ChemStation Agilent ne fonctionneront pas correctement Autres r gles appliqu es Tableau 1 Caract res restreints Param tre ChemStation Character Noms de fichiers de m thode les caract res et point d cimal ne sont pas autoris s Comprendre votre ChemStation Agilent Tableau 1 Caract res restreints Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Param tre ChemStation Character Noms de fichiers de donn es pr fixe compteur Sous r pertoires de donn es et sous r pertoires de s quences les espaces ne sont pas autoris s point d cimal et les espaces ne sont pas autoris s Les noms de p riph riques suivants sont r serv s et ne peuvent pas tre utili s s comme noms de fichiers e CON PRN AUX NUL e COMX x repr sentant un chiffre compris entre 1 et 9
110. diquer si le retraitement s effectue sur la base des donn es de quantification de l chantillon d origine ou sur la base des nouvelles donn es saisies dans la table de s quence de l chantillon Vous pouvez interrompre momentan ment des s quences pour que des chantillons prioritaires d injection simple puissent tre analys s par une autre m thode vous pouvez ensuite relancer les s quences sans perturber l automatisation Vous pouvez ajouter des chantillons la table de s quence pendant l ex cution de la s quence Vous pouvez imprimer la table de s quence et la table de s quence partielle Pour plus d information sur les s quences reportez vous la section Automatisation page 171 et au syst me d aide en ligne Comprendre votre ChemStation Agilent 29 1 30 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Bonnes pratiques de laboratoire BPL ChemStation a t d velopp conform ment aux normes de conception et de d veloppement internationales et comporte un ensemble de fonctionnalis s sp cifiques pour aider les utilisateurs travaillant dans un environnement r g lement Ces fonctions concernent la sp cification compl te des m thodes et la v rification de leur conformit l utilisation pr vue le contr le du fonction nement du syst me et la tra abilit l originalit et la qualit des donn es Processus de d veloppement Le certificat de validation fourni avec chaque progiciel doc
111. e Cette proc dure s av re toutefois inefficace dans le cas de certaines applications notamment dans l industrie p trochimique o les m mes compos s sont analys s depuis des ann es et o les facteurs de r p onse des diff rents compos s et d tecteurs sont connus depuis longtemps Pour cr er manuellement la table d talonnage saisissez les pics et leurs fac teurs de r ponse dans la table d talonnage r talonnez la m thode l aide d un talon qui contient au moins un pic de r f rence et mettez jour le delta R talonnage avec sommation des pics Lorsque vous effectuez un r talonnage les intervalles de temps de r tent ion migration qui figurent dans la table de sommation des pics de la m thode sont actualis s pr alablement au r talonnage effectif Le r talonnage des sommations des pics est effectu sur ce mod le de telle sorte que le delta soit int gr aux calculs des temps Options de r talonnage Vous pouvez actualiser les r ponses qui figurent dans la table d talonnage avec les nouvelles donn es d talonnage de plusieurs fa ons Moyenne La formule suivante permet de calculer la moyenne de toutes les analyses d talonnage n Response MeasResponse Response n l Comprendre votre ChemStation Agilent 167 7 168 talonnage Moyenne flottante La moyenne pond r e de toutes les analyses d talonnage est calcul e L actua lisation de la pond ration es
112. e am lior es l aide des fonctions suivantes e Somme des aires des pics qui rentrent dans la plage d finie par l utilisateur e Somme des aires d une plage de pics et calculs l aide d un seul multiplica teur e Somme des aires de tous les pics portant le m me nom La table de sommation des pics s apparente la table d talonnage standard avec n anmoins quelques diff rences Tout comme la table d talonnage elle est associ e la m thode active Vous devez cr er la table d talonnage d une analyse avant de cr er la table de sommation des pics Comprendre votre ChemStation Agilent 165 7 talonnage R talonnage 166 Qu est ce que le r talonnage Le processus de r talonnage consiste actualiser un niveau sur une courbe d talonnage Lorsque vous proc dez un r talonnage vous analysez un autre chantillon qui contient les m mes compos s talon que l original mais surtout la m me quantit de ces compos s Lorsque vous analysez l chantillon d talonnage vous obtenez des facteurs de r ponse et des temps de r tent ion migration mis jour Vous pouvez galement choisir de faire la moyenne des facteurs de r ponse de plusieurs analyses d talonnage de mani re pon d rer les facteurs de r ponse parts gales Pourquoi r talonner La plupart des talonnages ont une dur e de vie limit e en raison des varia tions de m thode chromatographique Le r talonn
113. e la fin de la ligne de base est calcul e partir du dernier point de ligne de base valable jusqu la d rive connue de la ligne de base Si un pic se termine sur une vall e apparente mais que le pic suivant se trouve en dessous de la valeur de rejet d aire d finie la ligne de base est projet e partir du d but du pic jusqu au vrai point de ligne de base suivant Si un pic d bute de mani re similaire la m me r gle s applique 96 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 P n tration de la ligne de base Une p n tration est d finie par une diminution du signal au dessous de la ligne de base construite point a sur Figure 12 page 97 En cas de p n tration de la ligne de base cette partie de la ligne de base est g n ralement recons truite comme d crit par les points b sur Figure 12 page 97 Figure 12 P n tration de la ligne de base Les options suivantes de surveillance permettent de supprimer toutes les p n trations de la ligne de base Suivi de ligne de base conventionnel sans p n tration Lorsque cette option est s lectionn e une recherche de p n tration de la ligne de base est effectu e sur chaque groupe de pics Si des p n trations sont d t ect es les points de d but et ou de fin du pic sont d cal s jusqu ce que tou tes les p n trations soient limin es comparer les lignes de base sur Figure 12 page 97 et Figure 13 page 98 Comprendre votre ChemStatio
114. e la plage de flacons et le nombre d injections par flacon et si vous les sp cifiez la quantit de l chantillon la quantit ISTD le multiplicateur et la dilution Le syst me entre ensuite ces informations pour chaque flacon de la plage dans la table de s quence Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Utilisation du bouton Append Line Ajouter une ligne Pour ajouter une nouvelle ligne vide la fin de la table de s quence cliquez sur le bouton Append Line Ajouter une ligne Utilisation du bouton Custom Fields Champs personnalis s Si des champs personnalit s ont t d finis dans la les m thode s utilis e s dans la table de s quence le bouton Custom Fields permet de modifier les valeurs des champs personnalis s pour chaque chantillon champs personna lis s d chantillon ou pour chaque compos dans la m thode d un chantillon champs personnalis s de compos Comprendre votre ChemStation Agilent 181 8 Automatisation Utilisation de s quences s quences et mod les de s quence Le menu Sequence S quence permet de cr er et d acc der des s quences et mod les de s quence Vous pouvez cr er et enregistrer des s quences de la m me fa on que les m thodes Lorsque vous enregistrez une s quence un fichier S est cr Pour modifier ou r utiliser la s quence celle ci est accessi ble par exemple l aide de l option Load Sequence Charger la s quence du menu Se
115. e ChemStation Agilent 51 2 M thodes Cr ation de m thodes 52 La cr ation d une m thode passe syst matiquement par la modification de la m thode active et par l enregistrement des modifications sous un nouveau nom de m thode Attention Lorsque vous modifiez la m thode active la ver sion qui figure sur le disque demeure inchang e tant que vous n avez pas enre gistr vos modifications Vous pouvez cr er une m thode de plusieurs mani res soit pour proc der une analyse partielle soit pour proc der une analyse compl te Par exemple vous pouvez cr er une m thode pour n effectuer que l acquisition de donn es Lorsque vous tes pr t analyser les donn es et g n rer un rapport de recherche dans la biblioth que vous pouvez modifier la m thode pour effec tuer ces t ches de traitement de donn es Lorsque vous chargez une m thode pour analyser un chantillon optez toujours pour une m thode ma tresse issue d un n ud de m thode dans l explorateur de la ChemStation Evitez d utiliser des m thodes de s quence partir d un conteneur de donn es de s quence ou des m thodes individuelles associ es des fichiers de donn es ACO M ou DAM Ne supprimez pas la m thode par d faut DEF LC M DEF CE M ou DEF GC M Ces fichiers de m thode servent de mod le pour cr er des m thodes Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Modification des methodes Vous pouvez modifier une
116. e blanc Par exemple NV 0499 D o Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 e NV no vial d signe l absence de flacon e est un tiret de s paration e 0499 est la 99 analyse de blanc de la ligne de s quence 4 Saisie manuelle des noms de fichier de donn es L une des colonnes de la table de s quence s intitule Datafile Fichier de don n es Si elle ne comporte aucune entr e le syst me d attribution automati que ou pr fixe compteur de noms de fichier de donn es sp cifi permet de cr er le nom du fichier de donn es Si du texte est saisi dans la colonne Data file Fichier de donn es ChemStation l utilise comme nom de fichier de don n es pour l analyse Si plusieurs injections par flacon sont sp cifi es sur une ligne dont le nom de fichier de donn es a t saisi manuellement ChemStation remplace automati quement les caract res la fin du nom entr par l utilisateur par le num ro d injection Cela emp che la r utilisation du m me nom de fichier de donn es pour diff rentes injections Utilisation d un pr fixe compteur pour nommer des fichiers de donn es Si vous utilisez le pr fixe compteur pour nommer des fichiers de donn es ChemStation cr e un nom pour chaque analyse Dans le cas d un instrument prenant en charge l analyse signal double comme le CPG ChemStation cr e un nom pour chaque signal La configuration de s quence autorise les noms de fichiers longs
117. e d un instrument analytique dans un laboratoire r glement Le test DAD v rifie les performances du d tecteur barrette de diodes Ce test disponible dans le menu Instrument uniquement pour les unit s CPL 3D et EC v rifie l talonnage de longueur d onde et d intensit de l instrument Lorsque vous cliquez sur Save Enregistrer les r sultats du test sont automa tiquement enregistr s dans la base de donn es DADTest et un fichier de registre appel DADTest Reg est stock dans le r pertoire d instrument par d faut Fonction Examen du test DAD Afficher les spec tres d holmium Afficher les spec tres d intensit Enregistrer en tant que nouvelle base de donn es Afficher les spec tres s lectionn s Afficher le gra phique d intensi t 284 L option Review DAD Test dans le menu View de l analyse des donn es vous per met de consulter tout moment le fichier DADTest Reg Ce fichier est prot g par une somme de contr le et est crypt en code binaire afin d emp cher toute modification Vous pouvez examiner les parties suivantes du test DAD Trace tous les spectres d holmium r pertori s dans la table d examen du test DAD Le spectre actif est d sign par une balise Trace tous les spectres d intensit r pertori s dans la table d examen du test DAD Le spectre actif est d sign par une balise Si vous changez la lampe du d tecteur barrette de diodes DAD vous pouvez r initia
118. e l analyse sous forme de signaux Elles sont ensuite stock es dans le fichier de donn es Si l instrument le permet ces enregistrements superpos s sur le chromatogramme peuvent tre rappel s la demande par exemple lors d un audit La d rive et le bruit de la ligne de base peuvent tre mesur s automatique ment Un niveau de d tection minimum peut tre calcul partir des donn es de la hauteur de pic pour chaque compos talonn dans la m thode Comprendre votre ChemStation Agilent 251 11 Evaluation de l aptitude du syst me Enfin vous pouvez ajouter la configuration de l instrument le num ro de s rie des instruments l identification de colonne capillaire et vos commentaires dans chaque rapport imprim Les r sultats des performances tendues sont calcul s uniquement pour les compos s talonn s dans la m thode afin d assurer la caract risation par le temps de r tention migration et les noms de compos Un rapport type de test des performances du syst me comprend les r sultats suivants e informations relatives l instrument e d tails sur la colonne le capillaire e m thode analytique e informations sur l chantillon e informations sur l acquisition e description du signal et d termination du bruit de la ligne de base et e signal tiquet avec des temps de r tention migration ou des noms de com pos En outre les informations suivantes sont g n r es pour chaque comp
119. e la moyenne des param tres d talonnage L entr e d intervalle sp cifie que le r talonnage est effectu tous les trois chantillons e La seconde entr e remplace tous les param tres de r talonnage En d autres termes un r talonnage complet est effectu Elle n inclut aucun intervalle de r talonnage Table de s quence La table de s quence comprend sept lignes La premi re ligne sp cifie l chantillon de r talonnage cyclique La deuxi me ligne indique le r talo nnage explicite effectu une seule fois en d but de s quence Les lignes 3 7 indiquent les chantillons analyser L ordre des entr es dans la table de s quence est tr s important Toutes les entr es des flacons de r talonnage cyclique indiquant un talonnage cyclique doivent appara tre avant les entr es d chantillon ou les entr es de r talo nnage explicite de la m thode Ordre d analyse de SimpReg Cette section d crit l ordre d analyse de la m thode SimpReg Tableau 21 Ordre d analyse de SimpReg Ligne de N M thode Flacon Op ration s quence d injection 2 1 SimpReg 1 talonnage simple 1 2 SimpReg 1 talonnage r gulier 3 3 SimpReg 2 Analyse d chantillon 3 4 SimpReg 3 Analyse d chantillon 4 5 SimpReg 4 Analyse d chantillon 5 6 SimpReg 1 talonnage r gulier 6 7 SimpReg 5 Analyse d chantillon 7 8 SimpReg 6 Analyse d chantillon Comprendre votre ChemStation Agilent 207 8 Automa
120. e pic int gr manuellement et que la fin de ce pic est modifi e par l int gration manuelle elle re oit le code F forc Un pic de solvant affect par une int gration manuelle par exemple une approximation tangentielle est signal par R solvant recalcul Enregistrement des v nements d int gration manuelle Les v nements d int gration manuelle par exemple une ligne de base dessi n e manuellement sont encore plus sp cifiques d un fichier de donn es que les v nements d int gration programm s Dans le cas de chromatogrammes complexes il est particuli rement souhaitable de pouvoir utiliser ces v ne ments pour le retraitement Par cons quent partir de la version B 04 01 de la ChemStation les v nements d int gration manuelle peuvent tre enregis tr s directement dans le fichier de donn es plut t que dans la m thode Chaque fois que le fichier de donn es est examin ou retrait les v nements manuels dans le fichier de donn es sont automatiquement appliqu s Une ana lyse contenant des v nements d int gration manuelle est marqu e dans la Navigation Table dans la colonne correspondante Outre les outils utilis s pour dessiner une ligne de base et effacer un pic manuellement trois outils suppl mentaires sont disponibles dans l interface utilisateur afin de e sauvegarder les v nements manuels des chromatogrammes actuellement affich s dans le fichier de donn es e efface
121. e propos Bien que le temps de r tention d un compos donn puisse parfois s carter l g rement de la valeur moyenne calcul e au cours d une s quence les don n es manant d une autre s quence pr sentent des carts bien plus notables notamment en raison des modifications de la temp rature ambiante ou de la d gradation du mat riel de la colonne au cours du temps Pour d terminer cet cart l cart type de la moyenne d chantillon Sy est calcul selon la formule ci dessus 270 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 Intervalle de confiance IC L intervalle de confiance donne des informations propos du niveau de perti nence de l estimation d une valeur moyenne lorsqu elle est appliqu e l ensemble de la population et non plus un chantillon uniquement L intervalle de confiance 100 x 1 a de la moyenne g n rale est donn par la formule CT l 2 N 1 Sy lia 2 N 1 est le point de pourcentage de la table de distribution t une probabilit de risque de a Pour les statistiques d velopp es dans le cadre du rapport r capitulatif de s quence il convient d utiliser un intervalle de confiance de 95 a 0 05 La distribution t ou distribution de Student doit tre adopt e pour les petits volumes d chantillon Pour les volumes d chantillon importants les r sultats de la distribution t ou de la distribution norma
122. e rapport peut contenir des renseignements sur les pics d tect s lors de l analyse et les trac s des acquisitions 232 Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports ChemStation 10 dition des r sultats Deux types de rapport sont disponibles e un rapport non talonn qui ne corrige pas la r ponse de d tecteur et e un rapport talonn dont la diff rence de r ponse de d tecteur plusieurs compos s de l chantillon est corrig e Rapports non talonn s Les rapports non talonn s incluent les rapports Area et Height Ces rap ports sont principalement utilis s dans le cadre de la pr paration des rap ports talonn s Ils peuvent faire office de rapports finaux si les quantit s n cessaires pour g n rer une r ponse d aire ou de hauteur d unit pour les compos s consid r s sont similaires Rapports talonn s Les rapports talonn s corrigent la diff rence de r ponse de d tecteur aux compos s rapport s Un ou plusieurs talons contenant des quantit s connues de compos s rapport s doivent tre analys s dans les m mes conditions que l chantillon inconnu Les donn es d int gration provenant de ces talons per mettent de pr parer une table d talonnage Il s agit d une liste des temps de r tention migration des quantit s et des r ponses utilis e dans la g n ration du rapport Les rapports talonn s reposent sur deux proc dures d talonn age appel es
123. e reprise Abandon d une s quence La fonction Abort Abandonner met imm diatement fin une s quence active Interruption d une s quence Lors de l interruption d une s quence vous ne pouvez modifier ni le nom du fichier de la table de s quence ni celui du fichier de donn es Dans la table de s quence vous pouvez uniquement modifier les lignes de s quence qui n ont pas encore t ex cut es ou le num ro de flacon figurant sur la ligne de s q uence en cours Vous pouvez ajouter supprimer ou modifier des lignes de s q uence des analyses ult rieures Par exemple il peut s av rer n cessaire de modifier une s quence active pour y ajouter un nouveau lot d chantillons Vous modifiez donc la s quence afin que ces flacons constituent l chantillon suivant que ChemStation traitera apr s les chantillons sur la ligne de s quence en cours d analyse Ex cution d une s quence partielle Vous pouvez ex cuter partiellement une table de s quence d j configur e en s lectionnant Partial Sequence dans le menu Sequence Le syst me affiche la bo te de dialogue Partial Sequence dans laquelle figure une table vous permet tant de s lectionner les chantillons analyser Une analyse simple est pr sent e sur chaque ligne de la bo te de dialogue Partial Sequence Le flacon la m thode le fichier de donn es ainsi que le nom de l chantillon sont sp cifi s pour chaque analyse En outre les informations Com
124. e syst me utilise la m thode charg e pour r viser les donn es et g n rer le rapport Le nom de la m thode appara t dans la barre d tat Pour les syst mes CPL EC CPL SM et EC SM l option Individual Method from Data File DA M est s lectionn e par d faut Pour les syst mes CPG l option Current Method est s lectionn e par d faut Comprendre votre ChemStation Agilent 221 9 222 R vision retraitement des donn es et r vision par lot Retraitement d une s quence l aide de la table de navigation Les donn es de s quence acquises l aide de la ChemStation version B 01 03 ou une version ant rieure doivent tre retrait es via l option reprocess de la vue Method and Run Control Cette r gle s applique galement aux donn es acquises dans la version B 03 01 avec le mode Cr ation de dossiers uniques d sactiv Les donn es de s quence acquises avec la version B 02 01 ou une version ult rieure du logiciel ChemStation doivent tre retrait es l aide des outils de retraitement figurant dans la table de navigation Data Analysis Pour retraiter les donn es de s quence via la table de navigation de la vue Data Analysis tous les fichiers n cessaires doivent tre pr sents dans le conteneur de donn es de s quence e les fichiers de donn es de s quence d e tous les fichiers de m thodes m utilis s durant la s quence e une copie du mod le de s quence d origine s e le fichie
125. elles valeurs de pente et de courbure de filtre sont compar es la sensibilit de pente Par exemple si la largeur de pic attendue est faible les valeurs du filtre 1 sont ajout es l accumulateur de pente descendante Si la largeur de pic attendue augmente les valeurs du filtre 2 et finalement celles du filtre 3 sont utilis es Lorsque la valeur de l accumulateur de pente descendante est 215 l algo rithme d tecte une fin de pic potentielle Tableau 11 Valeurs incr mentales pour l accumulateur de pente descendante Sorties des filtres de d riv e 1 3 en fonction du seuil Filtre 1 Filtre 2 Filtre 3 de sensibilit de pente Pente gt Seuil 8 5 3 Courbure gt Seuil 0 2 1 Pente lt Seuil 11 7 4 Pente gt Seuil 28 18 11 Courbure lt Seuil 0 2 1 Comprendre votre ChemStation Agilent 91 4 Int gration Identification d un pic Algorithme de sommet de pic Le sommet de pic est d tect comme tant le point le plus haut du chromato gramme par construction d un ajustement parabolique passant par les points de donn es les plus hauts Calculs non gaussiens Pics fusionn s La fusion de pics se produit en cas de d but d un nouveau pic avant que la fin du pic soit d tect e La figure illustre comment l int grateur g re les pics fusionn s Point de vall e Figure 9 Pics fusionn s L int grateur g re les pics fusionn s de la fa on suivante 1 il cumule l
126. en rempla ant les facteurs de r ponse exis tants par de nouveaux facteurs de r ponse et en calculant la moyenne des analyses d talonnage suivantes dans une nouvelle table d talonnage e Les fichiers de donn es des flacons d chantillon sont valu s et des rap ports g n r s e La s quence revient l tape 2 si d autres flacons d chantillon doivent tre analys s Comprendre votre ChemStation Agilent 209 210 Automatisation Exemple Cette section d crit un exemple d encadrement de s quence incluant une m t hode Brack M Il s agit d une m thode d talon interne deux niveaux qui a recours l talonnage cyclique Table de s quence La table de s quence de Brack M page suivante est abr g e pour simplifier l exemple Elle comprend sept lignes Les deux premi res lignes d finissent les conditions de r talonnage pour chaque niveau Les autres lignes d signent les chantillons analyser Plus particuli rement la table de s quence de la m thode Brack M contient les entr es suivantes e Une entr e Bracket Encadrement dans la colonne Update Response Fac tor Mettre jour le facteur de r ponse qui sp cifie l encadrement d chantillons avec des talons e Une entr e Replace Remplacer dans la colonne Update Retention Migra tion Times Mettre jour les temps de r tention migration qui sp cifie le remplacement des temps de r tention migration e La valeur 3 dans la c
127. en vous permettant de programmer de nouveaux v nements d int gration des temps appropri s dans le chromatogramme Pour plus d informations voir la section Ev nements initiaux page 111 Comprendre votre ChemStation Agilent 77 4 78 D finition de la ligne de base initiale tant donn que les conditions de ligne de base d pendent de l application et du mat riel utilis pour le d tecteur l int grateur utilise des param tres de la m thode et du fichier de donn es pour optimiser la ligne de base Avant de pouvoir int grer des pics l int grateur doit d finir un point de ligne de base Au d but de l analyse l int grateur d finit un niveau de ligne de base initiale en prenant le premier point de donn es comme ligne de base provi soire Il essaie ensuite de red finir ce point de ligne de base initiale en se basant sur la moyenne du signal d entr e S il n obtient pas un point de ligne de base initiale red fini il conserve le premier point de donn es en tant que point de ligne de base initiale potentiel Suivi de la ligne de base L int grateur chantillonne les donn es num riques une fr quence d term in e par la largeur de pic initiale ou par la largeur de pic calcul e au fur et mesure de l analyse Il consid re chaque point de donn es comme un point de ligne de base potentiel L int grateur d termine une enveloppe de ligne de base partir de sa pente Dans l algorithme de sui
128. ent tous les autres pics talonn s et e les valeurs de fen tre sp cifiques pour les composants individuels qui sont d finies dans la bo te de dialogue Compound Details Les valeurs par d faut de ces fen tres sont saisies dans la bo te de dialogue Calibration Settings Param tres d talonnage La largeur de chaque c t du temps de r tention migration qui d finit la fen tre d identification de pic est la somme des fen tres absolue et en pourcentage Une fen tre de 5 signifie que le pic doit avoir un temps de r tention migra tion de 2 5 par rapport au temps de r tention migration talonn pour ce pic Par exemple un pic avec un temps de r tention migration de 2 00 lors de d talonnage doit appara tre entre 1 95 et 2 05 minutes dans les analyses suivantes Par exemple une fen tre absolue de 0 20 minute et une fen tre relative de 10 donnent une fen tre de temps de r tention migration situ e entre 1 80 et 2 20 minutes 1 80 min 2 00 min 0 10 min 0 20 min 2 0 10 min 10 de 2 00 min 2 20 min 200 min 0 10 min 0 20 min 2 0 10 min 10 de 2 00 min Comprendre votre ChemStation Agilent 143 6 Identification des pics Temps de r tention migration corrig s Etablir la correspondance entre des pics par les temps de r tention migration absolus est peut tre simple mais pas toujours fiable En effet les temps de r tention migration individuels peuvent varier l g rement en ra
129. ent tre adjacentes tout comme les positions des flacons d tal onnage L utilisation ventuelle des flacons d talonnage encadrants la ronde ou pour une seule injection d pend simplement du nombre total de flacons d tal onnage de chaque niveau et du nombre de r talonnages que requiert la s q uence Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 L exemple suivant d finit 3 injections d chantillon encadr es par des talonn ages Les encadrements ouvrant et fermant utilisent des flacons d talonnage diff rents Des r talonnages sont requis apr s chaque injection d chantillon L intervalle de r talonnage doit donc tre de 1 Le nombre de lignes d tal onnage par niveau est gal au nombre d chantillons plus un Tableau 24Flacons diff rents utilis s pour les encadrements ouvrant et fermant Num ro Nom de flacon d chantillon Sample Type Nom de m thode Nombre Niv Upd RT Upd RF Interval Type d injections eau Mettre Mettre Intervalle d chantillon jour le jour le temps de facteurde r tention r ponse 1 Etala 2 Eta1b 3 Etalc 4 Etald 10 Echantillon10 11 Echantillon11 12 Echantillon12 Etalonnage M thode A 1 1 Encadr Encadr 1 Etalonnage M thode A 1 1 Encadr Encadr 1 Etalonnage M thode A 1 1 Encadr Encadr 1 Etalonnage M thode A 1 1 Encadr Encadr 1 Echantillon M thode A 1 Echantillon M thode A 1 Echantillon M thode A 1 L ordre d ex cutio
130. entre les points de donn es le nombre de points de donn es les moments statistiques les plateaux les plateaux par m tre la s lectivit et la r solution de chaque pic sont imprim s La largeur Comprendre votre ChemStation Agilent 239 10 Utilisation des rapports ChemStation de pic les plateaux les plateaux par m tre la s lectivit et la r solution sont calcul s l aide des m thodes vraies mi hauteur de tangente de tra n e et 5 x cart type pour plus d informations voir D finition des tests de performances page 262 L en t te du rapport reprend toutes les informations pertinentes pour la m thode notamment l instrument la colonne le capillaire l chantillon et les param tres d acquisition ainsi qu un trac du signal Pour une liste compl te des algorithmes des param tres de performances de pic voir D finition des tests de performances page 262 Les styles de rapport spectral Short Spectrum Detail Spectrum Performance Library Search sont d crits dans le manuel Comprendre votre module spectral Ajout d un rapport personnalis aux styles de rapport Vous pouvez ajouter la liste des styles de rapport disponibles un mod le de rapport personnalis cr dans la vue Report Layout Mise en page de rap port de ChemStation Tous les rapports l exception des rapports de performances r pertorient les largeurs de pic calcul es l aide d une formule plus co
131. enu sup rieur Outils de retraitement des s quences La barre d outils de retraitement des s quences n est disponible que lorsqu une s quence acquise l aide de la ChemStation version B 02 01 ou sup rieure est charg e avec le Unique Folder Creation Il est possible de lancer d arr ter ou d interrompre le retraitement de la s quence En outre la barre d outils permet d acc der aux bo tes de dialogue suivantes pour modifier les param tres de retraitement des s quences et d impression e Sequence Table copie du mod le s d origine situ e dans le conteneur de donn es de s quence e Bo te de dialogue Sequence Parameters e Bo te de dialogue Sequence Output e Bo te de dialogue Sequence Summary Parameters Bo te de dialogue Extended Statistic Parameters Save Current Sequence e Print Current Sequence 220 Comprendre votre ChemStation Agilent R vision retraitement des donn es et r vision par lot 9 R vision des donn es l aide de la table de navigation Selon le flot de traitement requis vous pouvez v rifier vos donn es selon l une des m thodes suivantes 1 R viser vos donn es de s quence l aide de la m thode utilis e pour cha que fichier de donn es donn es de s quence B 02 01 ou version sup rieure Utilisez l option Individual Method from Data File DA M dans Preferences Signal Review Options afin que le syst me charge la m thode d analyse de donn es DA M stock
132. es de lin arit du d tecteur Aucun facteur de r ponse n est utilis Si tous les composants r pondent de mani re gale dans le d tecteur et sont lu s le calcul du pourcentage d aire aire offre une approximation acceptable des quantit s relatives des composants Le pourcentage d aire aire est fr quemment utilis pour des r sultats qua litatifs et pour produire des informations permettant de cr er la table d tal onnage requise pour d autres proc dures d talonnage La proc dure de calcul du pourcentage de hauteur hauteur indique la hau teur de chaque pic dans l analyse sous forme de pourcentage de la hauteur totale de tous les pics de l analyse Le multiplicateur et le facteur de dilution extraits des Calibration Settings dans la boite de dialogue Sample Information ou Sequence Table ne sont pas utilis s dans le calcul des aire ou hauteur 126 Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Proc dures de calcul talonn es Les proc dures de calcul d talon externe ESTD de normalisation et d talon interne ISTD requi rent des facteurs de r ponse et utilisent pour cela une table d talonnage La table d talonnage propose la conversion des r ponses dans les unit s choisies en fonction de la proc dure s lectionn e Comprendre votre ChemStation Agilent 127 5 Quantification Calcul d talonnage externe 128 La proc dure d talonnage externe ESTD
133. es historiques est accessible via l option de menu Batch History Histori que de lot uniquement 230 Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 10 Utilisation des rapports ChemStation Qu est ce qu un rapport 232 dition des r sultats 233 Rapports non talonn s 233 Rapports talonn s 233 Rapport d talon externe 233 Rapport d talon interne 234 Rapport de tableaux 234 R sultats quantitatifs 235 Valeurs de champ personnalis de g n ration de rapport 237 Styles de rapports 238 Ajout d un rapport personnalis aux styles de rapport 240 Autres param tres de style de rapport 241 Table de sommation des pics 241 Mise en page de rapport pour pics non talonn s 241 Destination du rapport 242 Formats des fichiers de rapport 242 Rapport r capitulatif de s quence 244 Description g n rale 244 Configuration d un rapport r capitulatif de s quence 244 Ce chapitre d crit la notion de rapport Il contient des informations concernant les rapports de r sultats les r sultats quantitatifs les styles et la destination des rapports et les rapports r capitulatifs de s quence che Agilent Technologies 231 10 Utilisation des rapports ChemStation Qu est ce qu un rapport Un rapport se compose d informations quantitatives et qualitatives de l chantillon que vous analysez Il peut tre imprim sur papier affich l cran ou disponible sous forme de fichier lectronique L
134. es plus simples l int grateur construit la ligne de base comme une suite de segments de droite entre e le d but de la ligne de base e les graduations e la fin du pic Graduations Figure 11 Construction de la ligne de base par d faut Ligne de base Comprendre votre ChemStation Agilent 95 4 int gration Le d but de la ligne de base Si aucune ligne de base n est d tect e au d but de l analyse le d but de la ligne de base est d fini d une des mani res suivantes e du d but de l analyse au premier point de ligne de base si le point de d but de l analyse est plus bas que le premier point de la ligne de base e du d but de l analyse au premier point de vall e si le point de d but de l analyse est plus bas que la premi re vall e e du d but de l analyse au premier point de vall e si la premi re vall e p n tre une ligne imaginaire trac e du d but de l analyse la premi re ligne de base e du d but de l analyse une ligne de base horizontale prolong e depuis le premier point de la ligne de base Graduations Les graduations identifient le d but et la fin d un pic Leurs positions sont d t ermin es par les temps de d but du pic et de fin du pic enregistr s dans la table des pics La fin de la ligne de base Le dernier point valid de la ligne de base sert d signer la fin de la ligne de base Quand l analyse ne se termine pas sur la ligne de bas
135. est en cours la fonction d analyse des donn es est inaccessible depuis la session en ligne d un instrument Les donn es doivent donc tre r vis es dans la copie hors ligne Les utilisateurs qui souhaitent d marrer le traitement des donn es avant la fin de l analyse doivent utiliser la fonction de capture d cran La capture imm d iatement disponible pour r vision doit s effectuer dans la copie hors ligne des sessions de l instrument La pr sentation des fen tres affichant les informations d tat ou les signaux y compris le sch ma de l interface d un instrument est enregistr e automatique ment Pour plus d informations sur l acquisition de donn es reportez vous la sec tion Acquisition de donn es page 63 et l aide en ligne Analyse de donn es Affichage La vue Data Analysis Analyse de donn es ajoute la barre d outils standard des fonctions d analyse des donn es regroup es par t ches notamment des bo tes outils pour l int gration l talonnage la cr ation de rapports les annotations et la comparaison de signaux Voici les principales op rations gra phiques possibles e s lection de l affichage un ou plusieurs signaux lors du chargement du chromatogramme de l lectroph rogramme e superpositions du chromatogramme de l lectroph rogramme partir de diff rents chantillons e soustraction de deux chromatogrammes lectroph rogrammes e alignement graphique vertic
136. ethod and Run Control Contr le de Mod les de s quence m thodes ma tresses m thode et d analyse Data Analysis Analyse de donn es Donn es m thodes ma tresses Report Layout Mise en page de rapport M thodes ma tresses Verification LC and LC MS Raccourcis propres la vue de v rification V rification CPL et CPL SM Diagnosis LC and LC MS Diagnostic Raccourcis propres la vue de diagnostic CPL et CPL SM Tune LC MS R glage CPL SM Raccourcis propres la vue de r glage Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 2 M thodes Qu est ce qu une m thode 45 Parties d une m thode 46 Informations sur les m thodes 46 Pilotage de l instrument 46 Traitement des donn es 47 Liste de v rification de l ex cution 48 Etat des m thodes 49 M thodes enregistr es 49 M thode active 50 Cr ation de m thodes 52 Modification des m thodes 53 El ments modifiables d une m thode 53 Structure de r pertoire de m thodes 55 Pendant l ex cution d une m thode 56 Ex cution de m thode 56 Commande ou macro de pr analysel liste de v rification de l ex cution 57 Acquisition de donn esf liste de v rification de l ex cution 57 Analyse de donn eslliste de v rification de l ex cution 58 Analyse de donn es personnalis e liste de v rification de l ex cution 59 Enregistrement des donn es de BPL liste de v rification de l ex cution 59 Commande ou macr
137. eur de pic en cours d analyse pour optimiser l int gration Comprendre votre ChemStation Agilent 111 4 112 Int gration Choix de la largeur de pic La valeur s lectionn e doit assurer un filtrage tout juste suffisant pour viter que le bruit soit interpr t comme des pics sans d former les informations du signal e Pour choisir une largeur de pic initiale appropri e pour un pic recherch particulier utilisez la largeur dur e du pic en tant que base de r f rence e Pour choisir une largeur de pic initiale appropri e lorsque plusieurs pics sont analys s la largeur de pic initiale doit tre d finie une valeur gale ou inf rieure la largeur du pic le plus troit pour obtenir une s lectivit de pic optimale Si la largeur de pic initiale s lectionn e est trop faible le bruit risque d tre interpr t comme des pics Si des pics larges et troits sont pr sents il est possible d utiliser des v nements programm s pour ajuster la largeur de pic pour certains pics Dans certains cas les pics peuvent s largir de fa on impor tante en cours d analyse par exemple pour des analyses GC isothermes ou LC isocratiques Pour compenser ce ph nom ne l int grateur met jour automa tiquement la largeur de pic au fur et mesure que les pics s largissent en cours d analyse sauf si celle ci est d sactiv e ou d finie avec un v nement programm La mise jour de largeur de pic est pond r e
138. euses tapes bri vement r sum es ci apr s Conna tre le compos analys tablir une m thode pour analyser les chantillons contenant ce compos Analyser un ou plusieurs chantillons contenant une ou plusieurs concen trations connues du compos pour d terminer la r ponse correspondant chaque concentration Il est galement possible d analyser un certain nombre de ces chantillons avec diff rentes concentrations des compos s en question si la r ponse de votre d tecteur est non lin aire Ce processus est appel talonnage multi niveau Analyser l chantillon contenant une concentration inconnue du compos pour d terminer la r ponse correspondant cette concentration D terminer la concentration du compos recherch par comparaison de sa r ponse celle de la concentration connue Pour obtenir une comparaison valide de la r ponse de l chantillon inconnu celle de l chantillon connu les donn es doivent tre obtenues et trait es dans des conditions identiques Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Calculs de la quantification ChemStation met votre disposition les proc dures de calcul suivantes pour d terminer la concentration de chaque composant pr sent dans un m lange e Pourcentage e Normalisation e Etalon externe ESTD e ESTD e Etalon interne ISTD e ISTD Les calculs utilis s pour d terminer la concentration d un compos dans un chan
139. fonction du temps elle sert d terminer le point de d part du pic son som met et sa fin Comprendre votre ChemStation Agilent 83 4 Int gration Principe de fonctionnement Principe de fonctionnement D finition de la ligne de base initiale Suivi et red finition de la ligne de base D but de groupe de pics Identification des coordonn es des pics D tection de la ligne de base Fin du groupe de pics Construction de pic D tection estimateurs xd5 Enregistrement des Calcul des statistiques pics dans la table de pics de pic Figure 6 Diagramme de fonctionnement de l int grateur Ev nements programm s 84 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Identification d un pic L int grateur utilise diff rents outils pour reconna tre et caract riser un pic la largeur du pic les filtres de reconnaissance du pic le regroupement de tranches d int gration bunching l alsorithme de reconnaissance du pic l alsorithme de sommet du pic et des calculs non gaussiens par exemple de tra n e fusion de pics Largeur de pic Pendant l int gration la largeur du pic est calcul e partir de l aire et de la hauteur du pic Largeur Aire Hauteur ou bien si les points d inflexion sont disponibles partir de la largeur entre les points d inflexion T tl t2 t3 Figure 7 Calcul de largeur de pic Comprendre votre ChemStation Agile
140. hantillons talons et les chantillons t moins peu vent tre affich s dans la table ou masqu s Chaque analyse s lectionn e occupe une ligne de la table de lots Vous pouvez exclure une analyse de la table de lots par exemple de l talonnage en s lect ionnant le type d chantillon Removed Supprim 226 Comprendre votre ChemStation Agilent R vision retraitement des donn es et r vision par lot 9 Table de compos s Les r sultats des compos s apparaissent dans une table de compos s que l uti lisateur peut configurer mais le contenu de cette table d pend du type d chantillon de la table de lots e La liste des compos s inclut tous les compos s trouv s dans la m thode qui a t charg e pour la r vision par lot e Si la table de lots n affiche que des talons les chantillons et les chant illons de contr le sont masqu s la table de compos s comporte d autres colonnes d informations d talonnage quantit attendue erreur relative et erreur absolue e Si la table de lots n affiche que des analyses de contr le les chantillons et les talons sont masqu s la table de compos s comporte d autres colonnes pour toutes les limites de contr le d finies Pour les colonnes contenant des informations de compos vous pouvez inclure le nom du compos dans le titre de la table en ajoutant s la sp cific ation de colonne Rapport de lot Le rapport de lot inclut deux tables g n raleme
141. i e du logiciel Utilis pour les copies de sauvegarde d anciens fichiers lors de l installation Contient les pilotes des instruments Utilis pour l instrument configur 1 4 Ce sous r pertoire comprend cinq sous r pertoires additionnels DATA METHODS SEQUENCE VERIFY et TEMP Contient les r pertoires de r sultats par d faut de vos analyses Il est galement possible d ajouter des sous r pertoires suppl mentaires l aode de la bo te de dialogie Sample Information ou Sequence Parameters Les r pertoires de r sultats sont identifi s par un nom avec une extension D La structure des fichiers de donn es est d crite de mani re plus d taill e dans la section Acquisition de donn es page 63 La fonction Preferences Pr f rences permet d ajouter des chemins de donn es suppl mentaires Comprendre votre ChemStation Agilent 39 1 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Tableau 3 Sous r pertoires ChemStation R pertoire Contents METHODS SEQUENCE VERIFY TEMP LC GC CE MS IQT speclibs Comprend les r pertoires de m thode ma tresse par d faut qui ont une extension M Pour plus de d tails sur le contenu voir Structure de r pertoire de m thodes page 55 La fonction Preferences Pr f rences permet d ajouter des chemins de m thode suppl mentaires Contient le r pertoire par d faut pour les mod les de s quence Les mod les de s quence d
142. i largeur Performances et performances tend ues Facteur de tra ne Performances et performances tendues S lectivit Performances et performances tendues K Performances tendues Largeur de pic tangentielle Performances tendues Obliquit Performances tendues Plateaux th oriques Mi largeur Performances et performances tendues Plateaux th oriques Int gration tangentielle Performances tendues Plateaux th oriques 5 Sigma Performances tendues Plateaux th oriques Statistiques Performances tendues R solution Mi largeur Performances et performances tendues Comprendre votre ChemStation Agilent 275 11 276 Evaluation de l aptitude du syst me e R solution Int gration tangentielle Performances tendues e R solution 5 Sigma Performances tendues e R solution Statistiques Performances tendues Utilisez l entr e de ligne de commande suivante DUMPTABLE CHROMRES PEAK C CHEM32 1 TEMP PEAK TXT Informations trait es relatives au compos e Quantit calcul e Utilisez l entr e de ligne de commande suivante DUMPTABLE CHROMRES COMPOUND C CHEM32 1 TEMP COM POUND TXT Informations relatives la table d talonnage e Nombre de niveaux e Quantit e Aire e Hauteur Utilisez l entr e de ligne de commande suivante DUMPTABLE DAMETHOD CALPOINT C CHEM32 1 TEMP CALIB TXT Informations sur la r gression li
143. ic dans le rapport abr g est calcul e l aide de la formule la plus complexe utilis e par l int grateur LP 0 3 point d inflexion droit point d inflexion gauche 0 7 aire hauteur Detail inclut l en t te les r sultats quantitatifs et les courbes d talonnage L en t te est stock dans un fichier RPTHEAD TXT situ dans le r pertoire des m thodes Vous pouvez modifier l en t te l aide d un diteur de texte si vous souhaitez ajouter un texte sp cifique pour la m thode Header Short inclut l en t te du fichier et les r sultats quantitatifs L en t te est stock dans un fichier RPTHEAD TXT situ dans le r pertoire des m thodes Vous pouvez modifier l en t te l aide d un diteur de texte si vous souhaitez ajouter un texte sp cifique pour la m thode GLP Short inclut l en t te les informations sur l chantillon les condi tions de l instrument le journal l acquisition et les r sultats quantitatifs L en t te est stock dans un fichier RPTHEAD TXT situ dans le r pertoire des m thodes Vous pouvez modifier l en t te l aide d un diteur de texte si vous souhaitez ajouter un texte sp cifique pour la m thode GLP Detail inclut l en t te les informations sur l chantillon les condi tions de l instrument le journal l acquisition les r sultats quantitatifs et les courbes d talonnage L en t te est stock dans un fichier
144. iciel r alise trois passes au niveau des donn es d int gration Recherche des pics de r f rence La premi re passe vise identifier les pics de r f rence Le logiciel examine les temps de r tention migration des pics provenant d une analyse pour trou ver des correspondances dans les fen tres de r tention migration des pics de r f rence dans la table d talonnage Un pic de l analyse est identifi comme pic de r f rence dans la table d talonnage si son temps de r tention migra tion se situe dans la fen tre construite pour le pic de la table d talonnage Si une fen tre contient plusieurs pics le pic avec l aire la plus grande ou la hauteur la plus lev e suivie par une correspondance positive du qualifica teur de signal si cette option est d finie est alors d sign comme pic de r f rence Une fois chaque pic de r f rence trouv la diff rence entre son temps de r t ention migration et celle qui figure dans la table d talonnage est utilis e pour ajuster les temps de r tention migration pr vus de tous les autres pics dans la table d talonnage Recherche des pics ISTD La seconde passe vise identifier les pics d talon interne d finis S ils n ont pas d j t identifi s en tant que ISTD ils peuvent l tre en tant que pics de r f rence Les pics ISTD sont identifi s par les fen tres de temps de r tent ion migration des pics et par les qualificateurs de pics Si la fen tre IS
145. ie e pour les pics de solvant S l aire est au dessus du prolongement horizontal du dernier point de ligne de base d tect et sous la ligne de base red finie attribu e aux pics tangentiels T Un pic de solvant peut s l ver trop lente ment pour tre d tect ou un groupe de pics plus loin dans l analyse peut sembler devoir tre trait comme un pic de solvant avec un ensemble de pics d pendants Il s agit g n ralement d un groupe de pics mal r solus dont le premier est beaucoup plus grand que les autres Le simple traitement par projection verticale amplifierait ces derniers pics parce qu ils se trouvent en r alit sur la tra ne du premier En for ant la reconnaissance du premier pic en tant que solvant le reste du groupe est limin de la tra ne e les pics n gatifs au dessous de la ligne de base ont une aire positive comme d crit sur Figure 26 page 110 Comprendre votre ChemStation Agilent 109 4 int gration Aire de la zone totale Aire sous la ligne de base Aire corrig e de la li Figure 26 Mesure d aire pour des pics n gatifs Unit s et facteurs de conversion Les donn es apparaissent sous la forme d un ensemble de points de donn es qui peuvent tre des donn es chantillonn es ou int gr es Dans le cas des donn es int gr es chaque point de donn es correspond une surface expri m e sous la forme Hauteur x Temps Pour les donn es chantillonn es cha que po
146. ient plus les d tecter Pour surmonter cette limitation l int grateur regroupe les points de donn es ce qui revient r tr cir le pic en conservant la m me aire Les donn es sont group es par deux la puissance de groupage c est dire que non group s 1x group s une fois 2x group s deux fois 4x etc Le groupage est bas sur la fr quence des donn es et la largeur de pic L int g rateur utilise ces param tres pour d finir le facteur de groupage afin d obtenir le nombre appropri de points de donn es Tableau 9 page 88 Le groupage est effectu par puissance de deux en fonction de la largeur de pic attendue ou observ e L algorithme de groupage est r sum dans Tableau 9 page 88 Tableau 9 Crit res de groupage Largeur de pic attendue Filtre s utilis s Groupage effectu 0 10 points de donn es Premier Aucun 8 16 points de donn es Deuxi me Aucun 12 24 points de donn es Troisi me Aucun 16 32 points de donn es Deuxi me Une fois 24 48 points de donn es Troisi me Une fois 32 96 points de donn es Troisi me deuxi me Deux fois 64 192 points de donn es Troisi me deuxi me Trois fois 88 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Algorithme de reconnaissance de pic L int grateur identifie le d but du pic avec un point de ligne de base d termin par l algorithme de reconnaissance de pic L algorithme de reconnaissance de pic compare da
147. iers de donn es talonn es e R talonnage de la table d talonnage e R vision des tables de compos s des m thodes talonn es e Cr ation de rapports de lot sp cifiques Analyse de donn es Rapports standard Dans la fen tre contenant les caract ristiques des rapports vous pouvez s l ectionner un ensemble standard de styles de rapports personnalisables pour les chantillons Chaque type de rapport standard comprend des groupes d informations standard et facultatives Pour plus d informations sur les styles de rapports disponibles reportez vous la section Utilisation des rapports ChemStation page 231 Analyse de donn es Rapports sp cifiques La ChemStation comporte galement des fonctionnalit s avanc es de g n rati on de rapports pour les applications n cessitant des rapports plus sp cifiq ues statistiques sur la qualit de s paration analyse de tendances entre les chantillons mises en page personnalis es etc Rapports de conformit du syst me Les rapports de conformit du syst me permettent de pr senter les param t res de performances du syst me pour chaque analyse Il existe trois variantes ou styles pour ces rapports Le rapport de Performance standard assure l impression des param tres de m thodes non talonn es notamment e temps de r tention migration e facteur de capacit k e aire de pic Comprendre votre ChemStation Agilent Fonction
148. ignal Dans ce cas les fichiers sont nomm s Report0O1 CSV puis RapportNN CSV NN correspondant au num ro du signal XLS Le rapport est export dans une feuille de calcul Microsoft Excel au format XLS Les donn es n cessitent g n ralement un traitement suppl mentaire PDF Le rapport est enregistr dans un fichier pdf Lors de l installation la ChemS tation installe une imprimante PDF appel e PDF XChange 4 0 Au red marr age de l ordinateur cette imprimante dispara t du menu D marrer Param tres Imprimantes et t l copieurs Lors du d marrage de la ChemStation une autre imprimante temporaire appel e ChemStation PDF est cr e partir de l imprimante PDF XChange Tant qu une session de la ChemStation est en cours l imprimante ChemStation PDF appara t dans le menu D marrer Param tres Imprimantes et t l copieurs L option Unique pdf file name permet d enregistrer les rapports pdf ind pendamment des rapports sous le nom lt nom_conteneur_s quence gt lt nom_fichier_donn es gt pdf Comprendre votre ChemStation Agilent 243 10 Utilisation des rapports ChemStation Rapport r capitulatif de s quence Description g n rale La ChemStation peut imprimer toute une s rie de rapports standard pour les analyses d chantillon individuelles Le rapport r capitulatif de s quence est un autre moyen de g n rer un rapport Il permet de calculer et d inclure dans un rapport les param tres de diff re
149. inie par le seuil de sensibilit de pente de l int grateur Si cette condition persiste l int grat eur reconna t le front montant d un pic le pic est alors trait D but 1 Pente et courbure dans la limite suivre la ligne de base 2 Pente et courbure au dessus de la limite possibilit d un pic 3 La pente reste au dessus de la limite pic reconnu point cardinal d fini 4 La courbure devient n gative point d inflexion avant Sommet 1 La pente passe par z ro et devient n gative sommet du pic point cardinal d fini Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 2 La courbure devient positive point d inflexion arri re Fin 1 Pente et courbure dans la limite la fin du pic est proche 2 La pente et la courbure restent dans la limite fin du pic point cardinal d f ini 3 L int grateur revient en mode suivi de la ligne de base Comprendre votre ChemStation Agilent 81 4 int gration Terminologie Points cardinaux sommet de pic point d inflexion point d inflexion point de ligne de base point de ligne de base coordonn e horizontale l du temps coul coordonn e verticale de hauteur Figure 5 Points cardinaux Les points cardinaux sont les points s lectionn s par l int grateur pour d finir et quantifier un pic Les points de ligne de base les points de vall e le sommet du pic et les points d inflexion sont d sign s comme tant des points cardi n
150. int gralit ou s lectionner certai nes op rations uniquement Les r sultats du test de v rification sont enregistr s au format binaire dans le sous r pertoire par d faut c CHEM32 1 Verify avec la m thode et les fichiers de donn es Le sous r pertoire Verify se trouve au m me niveau que les sous r pertoires de la s quence des m thodes et des donn es Vous pouvez envoyer les r sultats une imprimante ou un fichier Les r sultats du test qui incluent les r sultats de plusieurs tests de v rification combin s sont clas s s en fonction de leur r ussite ou de leur chec Les composants de test de v rification suivants sont disponibles Electronique num rique d tecteur barrette de diodes Agilent s rie 1100 1200 seulement Un chromatogramme de test est stock dans le d tecteur barrette de diodes Ce chromatogramme est envoy la ChemStation une fois que les tapes de traitement pr alable relatives aux donn es brutes provenant des photodiodes lui ont t appliqu es Les donn es r sultantes sont ensuite compar es aux r sultats d origine stock s dans la ChemStation pour ce chromatogramme de test Le test choue si des diff rences sont d tect es Ce test permet de garan tir que les composants lectroniques du d tecteur barrette de diodes qui assurent le pr traitement des donn es fonctionnent toujours parfaitement Etant donn qu un chromatogramme de test enregistr est utilis la
151. int de donn es correspond une hauteur Par cons quent pour les donn es int gr es la hauteur est une entit calcul e obtenue par division de la surface par le temps coul depuis le point de don n es pr c dent Pour les donn es chantillonn es laire s obtient par multipli cation des donn es par le temps coul depuis le point de donn es pr c dent Le calcul d int gration utilise les deux types d entit s Les unit s utilis es par l int grateur sont coups x millisecondes pour la surface et coups pour la hau teur Ceci permet d assurer une base commune pour les troncatures d entiers ventuellement n cessaires Les mesures de temps de surface et de hauteur sont pr sent es en unit s physiques r elles quelles que soient leurs m thodes de mesure de calcul et d enregistrement dans le logiciel 110 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 v nements d int gration L int grateur propose un certain nombre d v nements initiaux et program m s De nombreux v nements sont des paires actif inactif ou d but fin Ev nements initiaux Largeur de pic initiale Sensibilit de pente Hauteur de rejet Aire de rejet D tection d paulement La Initial peak width d finit la largeur de pic interne de l int grateur au d but de l analyse La valeur de largeur de pic initiale est utilis e pour mettre l chelle le compteur qui d tecte la pente montante la pente descen
152. ion Etalonnage page 151 Analyse de donn es R vision retraitement et r vision par lot Les deux bo tes outils suppl mentaires suivantes sont disponibles dans la vue Data Analysis Analyse de donn es e Table de navigation e R vision par lot La table de navigation permet de r aliser d importantes op rations graphiques e Fonctionnalit s standard de configuration de la table tri options de glis ser d poser s lection de colonne regroupement d l ments etc permet tant de d finir sa propre configuration de table de navigation e Fonctions accessibles via le bouton droit de la souris chargement ou super position d un signal exportation de donn es impression de rapports e R vision des d tails du signal en d veloppant une ligne dans la table de navigation e R vision des signaux et cr ation de rapports ChemStation partir des m t hodes charg es ou de la m thode individuelle du fichier de donn es DA M par exemple pour r viser les v nements d int gration manuelle e Retraitement des donn es de s quence donn es de s quence acquises depuis le syst me ChemStation R v B 02 01 ou ult rieure Comprendre votre ChemStation Agilent 23 1 24 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Les principales op rations graphiques suivantes sont disponibles dans le cadre de la r vision par lot e D finition de la r vision et du retraitement automatiques ou manuels des fich
153. ion les param tres de quantification les param tres d talonnage les param tres de configuration de champ personnalis et les param tres de g n ration de rapports Run Time Checklist Liste de contr le d analyse comprend les parties de la m thode ex cuter Notez que les m thodes peuvent tre enregistr es trois emplacements diff rents dans ChemStation V rifiez que vous modifiez la m thode appropri e Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Structure de r pertoire de m thodes Une m thode comporte un groupe de fichiers stock s dans le r pertoire cor respondant Le sous r pertoire de m thode comporte tous les sous r pertoires de m thod es ayant l extension M Il est possible d ajouter des sous r pertoires de m t hodes additionnels l aide des param tres de pr f rence Les fichiers de m thodes portant l extension MTH contiennent un ensemble de param tres et sont au format UNICODE Le fichier INFO MTH contient les param tres de commande de la m thode Les fichiers de m thode contenant les param tres relatifs aux instruments portent le nom du module analytique associ Par exemple Tableau 6 Exemples de fichiers de m thodes HPCE1 MTH Contient la m thode d acquisition pour l lectrophor se capillaire ADC1 MTH Contient la m thode d acquisition pour le syst me Agilent 35900 Si deux instruments identiques sont configur s les fichiers de m thode
154. ion du bruit ASTM 255 d termination du bruit 255 distributiont 271 E cart type de la moyenne 270 chantillon 269 relatif 270 chantillon inconnu 156 chantillon talon 152 inconnu 156 E encadrement talonnage cyclique 208 enregistrement avec les donn es copie de la m thode 61 E paulement 93 talonnage cyclique encadrement 208 o talonnage externe calcul 128 proc dure 128 onnage multiniveau 158 er talonnage compos 152 courbe 154 cyclique plusieurs niveaux 202 chantillon 152 externe 128 multiniveau 158 Comprendre votre ChemStation Agilent Index niveau 152 param tres 135 point 152 v nements d int gration 111 v nements d int gration 77 v nements programm s 114 E exactitude analyse 168 F facteur de capacit 264 facteur de dilution 129 facteur de tra ne 265 fen tre de r f rence 143 fen tre temporelle r tention migration 142 fen tres de temps de r tention 143 fichier de m thode param tres des instruments 55 fichier m thodes 55 filtre reconnaissance de pic 86 fin du pic 91 formats de fichier rapport de lots 230 rapport de r sultats 242 formules de conformit du syst me cart type 269 ETR 270 facteur de capacit 264 facteur de tra ne USP 265 largeur de pic 264 moyenne 269 nombre de plateaux 265 r solution 267 r tention relative 267 volume mort 261 formules d finition des tests de performance
155. ion plus lev e que les points d talonnage qui sont plus loign s de l origine et peuvent tre dispers s La d cision concernant le type de pond ration des points d talonnage doit tre bas e sur les sp cifications de votre m thode Comprendre votre ChemStation Agilent 163 7 talonnage talonnage group 164 L talonnage group est applicable aux compos s lorsque les concentrations individuelles ne sont pas connues alors que la somme des concentrations d un groupe de compos s est connue C est par exemple le cas des isom res Les groupes de compos s entiers sont talonn s Les formules utilis es sont les suivantes talonnage Conc ip RP4 Response RFp i Response p ou ConcAB d signe la concentration du groupe de compos s comportant le compos A et le compos B Response d signe l aire ou la hauteur du compos A RF d signe le facteur de r ponse Pour les compos s qui appartiennent un groupe de compos s nous partons du principe que les facteurs de r ponse sont gaux RF4 RFg La concentration d un compos faisant partie d un groupe se calcule par cons quent de la fa on suivante Conc p Resp Conc 4B 74 i Resp Resppg Comprendre votre ChemStation Agilent talonnage 7 Sommation des pics La table de sommation des pics est propos e pour certaines applications de l industrie p trochimique et de l industrie pharmaceutique qui peuvent tr
156. ions utilis es pour g n rer cette courbe est semblable celle pr sent e dans Tableau 14 page 159 Tableau 14 Table d talonnage Niveau Quantit ng yl R ponse calcul de l aire 1 1 100 2 5 500 3 10 1000 Comprendre votre ChemStation Agilent 159 7 160 Dans cet exemple les chantillons talons utilis s pour g n rer les trois niveaux sont num rot s 1 2 et 3 Plages d talonnage Chaque talonnage plusieurs niveaux est valable dans la plage de concentra tions utilis e dans les chantillons d talonnage L extrapolation d une courbe d talonnage notamment en cas de non lin arit est dans le meilleur des cas une approximation Vous pouvez d finir la plage d talonnage valable pour chaque compos dans la bo te de dialogue Compound Details D tails sur les compos s Pour chaque compos vous pouvez indiquer une limite inf rieure ou sup rieure Tout d passement de ces limites fait l objet d une annotation dans le rapport Ajustement de la courbe d talonnage Dans le cadre d un talonnage plusieurs niveaux vous pouvez calculer l ajus tement de la courbe selon diff rentes m thodes e Segment de droite lin aire e Lin aire e Logarithmique e Puissance e Exposant e Quadratique e Cubique e Moyenne r ponse quantit Ajustement non lin aire Dans certains cas la r ponse du d tecteur aux variations de concentration d un chantillon n est pas lin aire
157. ision retraitement des donn es et r vision par lot 9 Si vous devez modifier certains param tres de m thode par exemple sp cif ier une impression vers un fichier xls vous devez modifier et enregistrer les m thodes du conteneur de s quence Ces modifications g n rales sont ensuite appliqu es tous les fichiers de donn es pendant le retraitement Si vous souhaitez utiliser la m thode du conteneur de s quence mise jour pour les acquisitions de donn es ult rieures vous devez la copier depuis le conteneur de donn es de s quence vers l un des chemins de m thode d finis La m thode nouvelle mise jour est alors disponible en tant que m thode de r f rence dans la vue des m thodes de l Explorateur ChemStation Comprendre votre ChemStation Agilent 223 9 R vision retraitement des donn es et r vision par lot D finition de la r vision par lot 224 La r vision par lot est une fonction d analyse de donn es permettant l ana lyste de faire un premier passage sur les r sultats d une s quence ou d une s lection d analyses en les v rifiant rapidement et facilement Il gagne ainsi du temps notamment lorsqu il retraite de grandes quantit s d chantillons Lorsqu une s quence est analys e un fichier de commande b est automati quement g n r et plac dans le r pertoire de donn es avec les fichiers de donn es Ce fichier de commande contient des pointeurs vers les fichiers de donn e
158. ison d un petit changement de conditions ou de technique De ce fait certains pics peuvent sortir des fen tres de correspondance et ne seront donc pas identifi s Pour prendre en compte les in vitables fluctuations intervenant dans les temps de r tention migration absolus l une des techniques consiste expri mer les temps de r tention migration des composants par rapport un ou plu sieurs pics de r f rence Chaque pic de r f rence est identifi dans la table d talonnage sous la forme d une entr e dans la colonne de r f rence La technique de correspondance relative utilise le ou les pics de r f rence pour modifier l emplacement des fen tres de correspondance afin de compenser les glissements dans les temps de r tention migration des pics d chantillon Si aucun pic de r f rence n est d fini dans la m thode ou si la ChemStation ne peut identifier au moins un pic de r f rence pendant l analyse le logiciel uti lise les temps de r tention migration absolus pour l identification Pics de r f rence simples Une fen tre de temps de r tention migration pour le pic de r f rence est cr e aux alentours de son temps de r tention migration Le plus grand pic situ dans cette fen tre est consid r comme le pic de r f rence Les temps de r t ention migration attendus pour tous les autres pics de la table d talonnage sont corrig s en fonction du rapport du temps de r tention migration attendu au temps
159. ition de donn es Qu est ce que l acquisition de donn es 64 Fichiers de donn es 65 Moniteurs en temps r el 67 Moniteur de signaux en temps r el 67 Moniteur de spectres en temps r el 67 Journal 68 Informations sur l tat 69 Etat de la ChemStation 69 Barre d tat 69 Diagramme du syst me 70 Ce chapitre d crit entre autres l acquisition de donn es les fichiers de donn es et le journal ie Agilent Technologies 63 3 Acquisition de donn es Qu est ce que l acquisition de donn es 64 Au cours d une acquisition de donn es tous les signaux analogiques acquis par l instrument d analyse sont convertis en signaux num riques dans le d t ecteur Le signal num rique est ensuite transmis lectroniquement au logiciel ChemStation et est stock dans le fichier de donn es de signaux Les fichiers de donn es disponibles d sont affich s dans l Explorateur ChemStation Afin de faciliter la navigation il est possible d ajouter des empla cements de fichier de donn es suppl mentaires dans l arborescence de s lect ion de l Explorateur ChemStation l aide de l onglet Paths Chemins de la bo te de dialogue Preferences Pr f rences Comprendre votre ChemStation Agilent Fichiers de donn es Acquisition de donn es 3 Un fichier de donn es est constitu d un groupe de fichiers stock s par d faut dans un sous r pertoire du r pertoire DATA avec un nom de fichier de don n es et une extension D
160. ity V rifier la puret lorsque vous d signez une biblioth que pour la recherche automatique ou lorsque vous s l ectionnez un style de rapport appropri Pour plus d informations repor tez vous Comprendre votre module spectral Impression d un rapport Un rapport indiquant le nom et la quantit des composants d tect s au cours de l analyse est g n r Analyse de donn es personnalis e liste de v rification de l ex cution Vous permet d ex cuter vos propres macros personnalis es pour valuer les donn es d analyse Enregistrement des donn es de BPL liste de v rification de l ex cution Enregistre le registre binaire GLPSave Reg avec la m thode d analyse de don n es dans le sous r pertoire de fichier de donn es par d faut Cette fonction permet de garantir l origine des donn es et la qualit de chacune des analyses Comprendre votre ChemStation Agilent 59 2 60 M thodes Le fichier binaire GLPSave Reg est un fichier de registre non modifiable et prot g qui comporte les informations suivantes e les principaux points de consigne des instruments qui peuvent tre consul t s sous une forme graphique e les acquisitions de chromatographie ou d lectrophor se e les r sultats d int gration e les r sultats de quantification e la m thode d analyse de donn es e le journal Ces donn es ne sont enregistr es que si vous avez activ la fonction Save GLP Data Enregistrer les
161. l La corr lation de signal signifie que deux pics mesur s dans des signaux de d tecteur diff rents dans une m me fen tre temporelle sont attribu s au m me compos La fen tre de corr lation de signal peut tre contr l e l aide du param tre SignalCorrWin dans la table QuantParm du registre _DaMethod La fonctionnalit de corr lation de signal est d sactiv e lorsque la fen tre de cor r lation de signal est d finie sur 0 0 minute pour plus d informations consul tez le Guide de programmation de macro Dans ce cas les pics lu s au m me temps de r tention migration dans des signaux de d tecteur diff rents sont trait s comme des compos s diff rents La fen tre de corr lation de signal par d faut est de 0 03 minute pour les don n es CPL EC EC SM et CPL SM et de 0 0 minute pour les donn es CPG V rification de qualificateur Si la corr lation de signal est d sactiv e la v rification de qualificateur est activ e par d faut pour tous les types de fichier de donn es Cette fonctionna lit peut etre d sactiv e en d finissant la balise UseQualifiers de la table Quantification Parameters de la m thode pour plus d informations consultez le guide de macroprogrammation de macro La v rification du qualificateur est galement d sactiv e lorsque la corr lation de signal est d sactiv e Calcul de rapport de qualificateur Lorsque la v rification des qualificateurs est d sactiv e pour un c
162. lateaux th oriques Lors d une telle op ration le format de nombre utilis par la ChemStation doit tre respect Pour tous les nombres stock s en interne au sein de la ChemStation on utilise comme type de donn es du langage C le type DOUBLE Cela signifie que 14 chiffres significatifs sont enregistr s pour chaque nombre La mise en uv re de ce type de donn es est conforme la mani re dont Microsoft impl mente la norme IEEE relative aux types de donn es du langage C ainsi qu aux r g les connexes en mati re d arrondis pour plus d informations reportez vous aux documents Microsoft Q42980 Q145889 et Q125056 En raison du nombre illimit de param tres susceptibles d tre utilis s pour le calcul de la table d d talonnage il est impossible de d terminer l erreur exacte ventuellement introduite par la propagation et l accumulation des erreurs d arrondi Toutefois des tests pouss s l aide de diff rentes constructions de courbes d talonnage ont d montr que l exactitude tait garantie jusqu 10 chiffres Alors que la reproductibilit de laire de la hauteur et du temps de r tention d une analyse chromatographique pr sentait en g n ral 3 chiffres significatifs l application de 10 chiffres significatifs dans le cadre des calculs appara t tout fait suffisante Par cons quent la table d talonnage et les autres tables pr sentent 10 chiffres significatifs au maximum Si
163. le gaussienne ne pr sentent plus aucune diff rence Par cons quent pour 30 chantillons ou plus vous pouvez opter pour la distribution normale il est particuli rement difficile de calculer la distribution t lorsque le nombre d chantillons est lev la distribution normale donne donc la meilleure approximation Intervalle de confiance 95 pour 6 chantillons 1 a 0 95 N 6 La valeur correcte de t doit tre d riv e de la table de distribution t pour 5 N 1 degr s de libert et pour la valeur amp 2 soit 0 025 On obtient alors la for mule de calcul suivante pour l IC Comprendre votre ChemStation Agilent 271 11 Evaluation de l aptitude du syst me Analyse de r gression supposons que Fonction lin aire Y x a bX Coefficients Pi Sr Sa a i 1 i l i l N l b N XY y Ti 1 i l 2 Coefficient de r gression N N N N EXI EX ET t i l i l o 272 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 D finitions de la reproductibilit Ecart type S N S Y a bX i l Comprendre votre ChemStation Agilent 273 11 Evaluation de l aptitude du syst me Acc s au nombre en double pr cision stock en interne 274 des fins de validation il est parfois n cessaire de recalculer manuellement les r sultats de la ChemStation notamment les courbes d talonnage les coef ficients de corr lation et les p
164. les propos s Chaque mod le sp cifie le contenu et la mise en page d une section pr cise de l ensemble du rapport r capitulatif de s quence Choisissez l un des styles de rapports r capitulatifs de s quences suivants One Page Header Le mod le GLP imprime GLP en majuscules sur la page de titre du rapport qui suit Il inclut galement la date et une zone r serv e la signature Configuration S lectionnez l option Configuration pour inclure dans votre rapport la configu ration de l instrument ainsi que les caract ristiques techniques de la colonne d analyse du capillaire Sequence Table S lectionnez l option Sequence Table pour inclure dans le rapport la liste des chantillons des param tres de quantification des chantillons et des noms de m thodes Cette liste affiche les analyses que le syst me est cens effectuer Logbook S lectionnez l option Logbook pour inclure dans le rapport la liste des analyses effectu es par le syst me y compris les conditions des instruments ainsi que tout v nement inhabituel susceptible d tre survenu au cours de l analyse des chantillons Methods S lectionnez l option Methods pour inclure la liste des m thodes d analyse uti lis es dans le cadre d une s rie d analyses automatis es Analysis Reports S lectionnez l option Analysis Reports pour g n rer des rapports analyse indi viduels suivant le style de rapport d fini pour la
165. liser le DADtest en supprimant les r sultats de test non souhait s de la table puis en utilisant la fonction Save as New Database Affiche uniquement les spectres s lectionn s dans la table Vous pouvez tracer un graphique d intensit afin d obtenir une indication de la dur e de vie de la lampe du d tecteur barrette de diodes Ce graphique trace l intensit maximale de la lampe en fonction du temps Comprendre votre ChemStation Agilent Glossaire d IU Glossaire d IU A access level Niveau d acc s Analysis Reports Rapports d analyse Apply Manual Events from Method Appliquer les v nements manuels de la m thode Area reject Aire de rejet Area aire Autointegrate Int gration automatique Batch Lot C Calibration Settings Param tres d talonnage Character Caract re Compound Details Caract ristiques de compos Compound Summary R capitulatif de compos Contents Contenu Control Chart tableur current method M thode active Current Method M thode active D Data Analysis Analyse des donn es Data Analysis Navigation table Table de navigation dans l analyse de donn es Data File Fichier de donn es Delete Peak s Supprimer le s pic s Detail D tail Draw Baseline Trac de ligne de base E ESTD ESTD ESTD Extended tendu Extended Performance performances tendues Extended Statistic Statistiques tendues Extended Statistic Parameters Param tres statistiques
166. liste d roulante Using Compound Utiliser le compos de la bo te de dialogue Calibration Settings Param tres d talonnage Les quations permettant de calculer la quantit r elle d un pic non talonn x sont indiqu es ci dessus Comprendre votre ChemStation Agilent 135 5 Quantification Calcul ISTD 136 Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 6 Identification des pics En quoi consiste l identification des pics 138 R gles de correspondance des pics 139 Types d identification des pics 140 Temps de r tention migration absolu 140 Temps de r tention migration corrig 140 Qualificateurs de pics 140 Limites de quantit 141 Temps de r tention migration absolu 142 Temps de r tention migration corrig s 144 Pics de r f rence simples 144 Pics de r f rence multiples 145 Qualificateurs de pic 146 Corr lation de signal 147 V rification de qualificateur 147 Calcul de rapport de qualificateur 147 La proc dure d identification 149 Recherche des pics de r f rence 149 Recherche des pics ISTD 149 Recherche des pics talonn s restants 150 Classification des pics non identifi s 150 Ce chapitre d crit les principes de l identification des pics che Agilent Technologies 137 6 Identification des pics En quoi consiste l identification des pics L identification des pics consiste identifier les composants d un chantillon inconnu en se basant sur leurs caract ri
167. lley Le Tail Skim Height Ratio est le rapport de la hauteur corrig e de la ligne de base du pic parent Hp sur la Figure 19 page 102 sur la hauteur corrig e par la ligne de base du sous pic Hc Ce rapport doit tre sup rieur la valeur indi qu e pour que le sous pic soit cr t Hp Hv Hc Figure 19 Crit res d cr tage Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Il est possible de d sactiver l approximation exponentielle pour la totalit de l analyse en d finissant la valeur du rapport hauteur tra ne d approximation sur une valeur lev e ou z ro Le Valley Height Ratio est le rapport de la hauteur du sous pic au dessus de la ligne de base Hc sur la Figure 19 page 102 la hauteur de la vall e au dessus de la ligne de base Hv sur la m me figure Ce rapport doit tre inf rieur la valeur sp cifi e pour que le sous pic soit cr t Calcul d ajustement de la courbe exponentielle pour l cr tage L quation suivante permet de calculer une approximation exponentielle voir Figure 22 page 104 Hb Ho xexp Bx Tr To AxTr C o Hb hauteur de l approximation exponentielle au temps Tr Ho hauteur au dessus de la ligne de base du d but de l approximation exponentielle B facteur de d croissance de la fonction exponentielle To temps correspondant au d but de l approximation exponentielle pente de la ligne de base du pic principal C d c
168. m thode Comprendre votre ChemStation Agilent 245 10 Utilisation des rapports ChemStation 246 Vous pouvez imprimer un rapport individuel apr s chaque analyse en fonc tion du style de rapport sp cifi pour la m thode concern e en plus des sec tions de rapport d finies dans le Sequence Summary Reporting Reportez vous la section Sortie de s quence ci apr s SUILabel Type Application gt Statistics for Calibrated and Sample Runs S lectionnez l option Statistiques pour les analyses d chantillon pour obtenir une analyse statistique des tendances portant sur les chantillons d talonn age Si vous s lectionnez l option Statistics vous obtenez une analyse statisti que des tendances portant sur les chantillons inconnus Ces deux options proposent deux styles de mod le statistiques standard et statistiques tend ues L option Extended Statistics permet d imprimer la tendance statistique des analyses sous forme graphique tandis que l option Standard Statistics pr sente les r sultats sous forme de texte seul Les s lections effectu es dans la bo te de dialogue Items and Limits for Extended Statistics sont utilis es uniquement lors que vous choisissez l option ou les options Extended Statistic dans la bo te de dialogue Sequence Summary Parameters Si vous s lectionnez les options Standard Statistic dans la bo te de dialogue Sequence Summary Parameters les statistiques incluses dans le rapport por
169. m thode les parties de la m thode sp cifi es dans la bo te de dialogue Run Time Checklist Liste de contr le d analyse sont ex cut es Ex cution de m thode Le sch ma ci dessous repr sente l tat du logiciel ChemStation lors de l ex c ution d une m thode tous les l ments de la liste de contr le d analyse tant s lectionn s Notez que dans le cas du mode Unique Folder Creation OFF Mode Cr ation de dossiers uniques d sactiv aucun fichier ACQ M ou DA M n est g n r Pour plus de d tails voir Bo te de dialogue Preferences Pr f rences Onglet Sequence S quence page 175 56 Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Enregistrement de RUN M facultatif Enregistrement de ACQ M par UE ramen deDAM tat du logiciel ChemStation Injection par d faut Y Macro post analyse Evaluation des donn es Injection et analyse Niveaux d tat Donn es brutes fichier ferm Macro pr analyse Pr analyse Lancement de la m thode d analyse via le menu ChemStation Temps Figure 3 Ex cution de m thode Commande ou macro de pr analyse liste de v rification de l ex cution Lorsque vous sp cifiez une commande ou une macro de pr analyse celle ci est ex cut e avant le d but de l analyse En r gle g n rale cet l ment est uti lis dans le cadre de la personnalisation du syst me en association avec d autres progi
170. m thode existante l aide de l option Modifier l int gralit de la m thode dans le menu M thode Le processus est guid par des bo tes de dialogue et la m thode peut finalement tre enregistr e Ce pro cessus est d crit ci dessous M thode sur disque Y Chargement de la m thode M thode charg e en m moire devient la m thode active S lection de l option Modifier int gralement la m thode du menu M thode Modification de la m thode Enregistrement de la m thode sous Enregistrement sous un nouveau Baregistrement sous le m me nom Cr ation d une nouvelle m thode Remplacement de la m thode actuelle sur le disque Figure 2 Modification des m thodes El ments modifiables d une m thode Chaque m thode comporte quatre composants qui peuvent tre modifi s s p ar ment Certains des paragraphes ci dessous font r f rence des bo tes de dialogue sp cifiques tandis que d autres sont des descriptions g n rales Comprendre votre ChemStation Agilent 53 2 54 M thodes Method Information Informations sur la m thode comporte un texte de description de la m thode Instrument Control Commande des instruments d pend de la configura tion et peut comporter par exemple les param tres de four les param tres d injecteur et les param tres de d tecteur Data Analysis Analyse de donn es comporte les d tails de signal les param tres d int grat
171. mations sur l chantillon Quantit d chantillon Overlay Superposition Ligne Inj Injection Vial Flacon Sample Name Nom d chantillon Method Name Nom de m thode Sample Type Type d chantillon Manual Events v nements manuels Cal Level Niveau d talonnage Sample Info Informations sur l chantillon Comprendre votre ChemStation Agilent R vision retraitement des donn es et r vision par lot 9 Tableau 25 Colonnes de la table de navigation Colonnes des analyses simples Colonnes des analyses de s quence ISTD Amount Quantit ISTD Sample Amount Quantit d chantillon Multiplier Multiplicateur ISTD Amount Quantit ISTD Dilution Dilution Multiplier Multiplicateur Dilution Dilution Data File Fichier de donn es La table de navigation comporte des fonctions de configuration de table stan dard telles que le tri et le glisser d placer pour d placer des colonnes Il est galement possible de s lectionner les colonnes qui apparaissent dans la table de navigation En outre vous pouvez regrouper les donn es en fonction d une colonne par exemple il est possible de regrouper les fichiers charg s sur la base de la colonne operator op rateur pour afficher les analyses simples effectu es par un op rateur pr cis Plusieurs fonctions de la table de navigation sont accessibles via le bouton droit de la souris chargement ou superposition d un signal exportati
172. ment sp cifique de l chantillon au niveau de l valuation des donn es e Les chantillons inconnus sont valu s et font l objet d un rapport confor m ment la m thode sp cifi e e Les chantillons d talonnage permettent de r talonner le composant de quantification de la m thode comme indiqu ci apr s e Les chantillons de contr le sont valu s par rapport aux limites de chacun des composants d finis dans la m thode Si les r sultats obtenus d passent la plage de param tres sp cifi e l analyse de la s quence est interrompue Les chantillons d talonnage peuvent tre simples cycliques ou encadrants Les r talonnages simples indiquent qu un r talonnage se produit chaque d finition d un chantillon d talonnage dans la s quence Les r talonnages cycliques se produisent des intervalles d finis lors de l analyse d une s rie d chantillons inconnus Lors de l encadrement d une s rie d chantillons inconnus deux jeux d talonnage sont analys s Les rapports quantitatifs des chantillons inconnus sont ensuite calcul s l aide de la table d talonnage chelonn e entre les deux jeux d talonnage La fonctionnalit de s quence partielle vous permet non seulement de visuali ser l ordre d analyse de la s quence mais aussi de s lectionner des entr es d chantillons r analyser ou r valuer Dans le cadre de la r valuation de donn es d j acquises vous pouvez in
173. ments manuels actuelle ment sauvegard s dans la m thode au fichier de donn es actuellement charg e Remove Manual Events from Method efface les v nements manuels de la m t hode Afin de convertir les v nements manuels enregistr s dans une m thode pour les stocker dans le fichier de donn es il convient d appliquer les v nements de la m thode et d enregistrer les r sultats dans le fichier de donn es Si vous le souhaitez vous pouvez liminer les v nements de la m thode Si la case Manual Events de la Integration Events Table d une m thode est coch e les v nements manuels de la m thode sont toujours appliqu s lors du charge ment d un fichier de donn es utilisant cette m thode Si le fichier de donn es contient des v nements manuels suppl mentaires ils sont appliqu s apr s les v nements de la m thode Quand la case Manual Events est coch e l utilisa teur n est jamais invit sauvegarder les v nements dans le fichier de don n es Afin de convertir les v nements manuels enregistr s dans une m thode pour les stocker dans le fichier de donn es il convient d appliquer les v nements de la m thode et d enregistrer les r sultats dans le fichier de donn es Vous pouvez liminer imm diatement les v nements de la m thode Si la case Manual Events de la Integration Events Table d une m thode est coch e les v nements manuels de la m thode sont toujours appli
174. min de mod le de rapport personnalis Longueur Ajout de saisie automatiqu maximale e 40 M S HYP UVL FRP 40 40 40 100 100 Exemple def_Ic m def_Ic s def_Ic hyp demodad uvl areapct frp d mo dans les informations d chantillons d mo dans les param tres de s quence test_date_heure cr ation l aide des pr f rences de s quence c chem32 1 data c chem32 1 methods c chem32 1 sequence c chem32 1 hyper c chem32 speclib c chem32 repstyle Tous les journaux ChemStation affichent les messages syst me sous leur forme d velopp e et les cha nes d informations sont imprim es sur plusieurs lignes Certains rapports par exemple les rapports de s quences peuvent tronquer les noms de fichiers de mani re faire tenir toutes les informations n cessaires sur le mod le de rapport Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Interface utilisateur du logiciel L interface utilisateur du logiciel ChemStation est compos e de vues qui regroupent des fonctionnalit s selon les t ches d analyse classiques Les trois vues standard suivantes sont incluses dans toutes les configurations du logiciel e la vue Method and Run Control Contr le de m thode et d analyse pour le contr le et l acquisition des donn es provenant de l instrument e la vue Data Analysis Analyse de donn es pour la r vision et la r valuati on des donn es a
175. mpenser sa d rive jusqu la d tection d un front montant de pic Attribution de la ligne de base L int grateur d finit la ligne de base du chromatographe de l lectroph rogr amme en cours d analyse une fr quence d finie par la valeur de largeur de pic Une fois que l int grateur a chantillonn un certain nombre de points de donn es il red finit la ligne de base du point de ligne de base initial au point de ligne de base actuel L int grateur reprend le suivi de la ligne de base sur les points de donn es suivants et red finit nouveau la ligne de base Ce pro cessus continue jusqu ce que l int grateur identifie le d but d un pic Point de donn es tem s de d but point actuel PNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNT Largeur de pic attendue E m a a a 2T e 27 e H 2T a 2 et red finition de la ligne de base Figure 4 Ligne de base Au d but de l analyse ce r glage de ligne de base est utilis en tant que ligne de base initiale Si la valeur n est pas d finie le premier point de donn es est utilis Ce point de donn es est ensuite red fini p riodiquement selon la for mule suivante Comprendre votre ChemStation Agilent 19 4 80 Int gration Les aires sont somm es sur un temps T largeur de pic pr vue Ce temps ne peut jamais tre plus court qu un point de donn es La proc dure se poursuit tant que la condition sur la ligne de base existe La pente et la courbure
176. mplexe utilis e par l int grateur pour plus d informations sur les calculs de largeur de pic reportez vous Largeur de pic page 85 240 Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports ChemStation 10 Autres param tres de style de rapport Table de sommation des pics La table de sommation des pics est propos e pour certaines applications de l industrie p trochimique et de l industrie pharmaceutique qui peuvent tre am lior es l aide des fonctions suivantes e Somme des aires des pics qui rentrent dans la plage d finie par l utilisateur e Somme des aires d une plage de pics et calculs l aide d un seul multiplica teur e Somme des aires de tous les pics portant le m me nom Lorsque le rapport est g n r ChemStation utilise la table de sommation des pics pour cr er un rapport de sommation des pics imprim une fois les calculs de rapport standard effectu s l exception de Norm norm qui est rem plac par le rapport de sommation des pics Mise en page de rapport pour pics non talonn s Pour modifier la mise en page de rapport pour pics non talonn s choisissez l une des options suivantes dans la bo te de dialogue Specify Report Sp cifier le rapport e Utilisez l option Separately S par ment pour rapporter les pics non tal onn s dans une table distincte si le tri par temps de r tention migration est s lectionn ou dans des tables distinctes si le tri par signal
177. n chantillon inconnu il est n cessaire de e g n rer une courbe d talonnage du compos e injecter une aliquote de l chantillon inconnu et lancer l analyse dans des conditions exactement identiques l chantillon talon e d terminer la r ponse partir du signal c est dire l aire ou la hauteur du pic par rapport la quantit inconnue du compos et e utiliser la courbe d talonnage pour calculer la quantit du compos dans l chantillon inconnu Par exemple si l aire de pic d un chantillon inconnu est gale 500 il est pos sible de d terminer que la quantit du compos correspondant dans l chant illon inconnu est de 5 ng ul en utilisant la courbe d talonnage de la Figure 33 page 156 R ponse R ponse 1000 Aire 500 s R ponse de Quantit de inconnu f inconnu f 500 i ng pl f JA 10 5 10 Temps min Quantit ng pl Figure 33 Signal d un chantillon inconnu et courbe d talonnage 156 Comprendre votre ChemStation Agilent talonnage 7 Types d talonnage Le logiciel ChemStation propose deux types d talonnage l talonnage un seul niveau et l talonnage plusieurs niveaux talonnage simple La courbe d talonnage pr sent e dans Figure 34 page 157 comporte un seul point c est dire un niveau Avec une courbe d talonnage simple la r ponse du d tecteur est cens e tre lin aire sur la plage de mesure des concentrations
178. n talonnage mul tisignal en g n ral un par signal Dans un talonnage monosignal un compos fait r f rence un seul pic Un niveau d talonnage comprend les points d talonnage pour une concentra tion donn e d un talon Dans un talonnage multisignal les points d talonn age peuvent tre distribu s sur plusieurs signaux Un point d talonnage d signe le rapport quantit r ponse d un pic sur la courbe d talonnage Un chantillon talon galement appel talon est un chantillon contenant une quantit connue du compos quantifier Dans le logiciel l chantillon talon d signe une injection depuis le flacon d chantillon talon Des talons sont disponibles aupr s de fournisseurs de substances chimiques ou ils peuvent tre pr par s en utilisant une quantit mesur e exactement du compos pur La quantit du compos dans l chantillon d talonnage est g n ralement exprim e sous forme de concentration g n ralement en ng ul Comprendre votre ChemStation Agilent talonnage 7 Table d talonnage La table d talonnage sp cifie les conversions des aires ou hauteurs de pics en unit s de votre choix suivant la proc dure de calcul s lectionn e La table d talonnage contient une liste des temps de r tention migration provenant d une analyse d talonnage Ces temps de r tention migration sont compar s ceux des pics produits par l analyse d un chantillon S il y
179. n aire e Intersection Y ParmCourbel e Pente ParmCourbe2 e Coefficient de corr lation Utilisez l entr e de ligne de commande suivante DUMPTABLE DAMETHOD PEAK C CHEM32 1 TEMP REGRESS TXT Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 12 V rification du syst me Vues Verification V rification et Diagnosis Diagnostic 278 V rification du syst me 278 Registre GLPsave 282 Fonction de test DAD 284 Fonction Examen du test DAD 284 Ce chapitre d crit la fonction de v rification et les fonctionnalit s GLP de la ChemStation ie Agilent Technologies 277 12 V rification du syst me Vues Verification V rification et Diagnosis Diagnostic 278 Si l instrument configur prend en charge par exemple les modules Agilent s rie 1100 1200 pour CPL la ChemStation propose deux vues suppl mentair es afin de r aliser des op rations de v rification et de diagnostic des instru ments Pour plus d informations reportez vous l aide en ligne V rification du syst me La v rification du syst me est essentielle dans le cadre de l utilisation de rou tine d un instrument d analyse au sein d un laboratoire r glement Les fonc tionnalit s de v rification des BPL de la ChemStation sont con ues pour vous aider d montrer que le logiciel ou un composant particulier du logiciel fonctionne correctement ou du moins qu il fonctionnait correctement au moment d
180. n des performances du syst me d analyse avant pendant et apr s les analyses de routine est une d marche pertinente Le logiciel ChemStation comporte des fonctionnalit s permettant de r aliser automatiquement ces trois types de test Un test d instrument peut porter sur la sensibilit du d tecteur sur la pr cision des temps de r tention migration de pic et sur la pr cision des aires de pic Un test de m thode peut v rifier la pr cision des quantit s et des temps de r tention migration la s lectivit et la robustesse de la m thode en terme de variance quotidienne Un test du syst me peut porter sur la pr cision des quantit s la r solution entre deux pics sp cifiques et la tra n e de pic Il est recommand aux laboratoires qui doivent se conformer aux r glementat ions suivantes e Bonnes pratiques de laboratoire BPL e Bonnes pratiques de fabrication BPF et bonnes pratiques de fabrication appliqu es aux Etats Unis Current Good Manufacturing Practice regula tions cGMP et e Bonnes pratiques d automatisation de laboratoire GALP d effectuer ces tests et de documenter les r sultats de mani re d taill e Les laboratoires participant un syst me de contr le de la qualit par exemple dans le cadre de la norme ISO9000 doivent apporter la preuve des bonnes performances de leurs instruments ChemStation rassemble des r sultats g n r s par diff rentes analyses qui sont ensuite statistiquement
181. n Agilent 97 4 98 Int gration Suivi de ligne de base standard Suivi de ligne de base sans p n tration Figure 13 Suivi standard de ligne de base et suivi de ligne de base sans p n tration Le suivi de ligne de base sans p n tration n est pas disponible pour les pics de solvant avec leurs pics d pendants et paulements Suivi de ligne de base avanc Dans le mode de suivi de ligne de base avanc l int grateur tente d optimiser les positions de d but et de fin de pic il red finit la ligne de base pour un groupe de pics et supprime les p n trations de ligne de base voir Figure 12 page 97 Dans d enombreux cas le mode de suivi de ligne de base avanc conduit une ligne de base plus stable qui est moins d pendante de la sensi bilit de pente Rapport pic vall e Ce param tre personnalis est utilis dans le mode de suivi de ligne de base avanc Il permet de d cider si deux pics qui ne pr sentent pas de s paration de ligne de base sont s par s par une ligne verticale ou un point de vall e L int grateur calcule le rapport entre la hauteur corrig e par la ligne de base du pic le plus petit et la hauteur corrig e par la ligne de base de la vall e Si le rapport pic vall e est inf rieur la valeur sp cifi e par l utilisateur une ligne verticale est utilis e sinon une ligne de base est trac e partir de la ligne de base au d but du premier pic jusqu la vall e puis de
182. n de la s quence est le suivant Flacon 1 Etala encadrement ouvrant 1 Flacon 10 Echantillon10 Flacon 2 Etalb encadrement fermant 1 et encadrement ouvrant 2 Flacon 11 Echantillon11 Flacon 3 Etalc encadrement fermant 2 et encadrement ouvrant 3 Flacon 12 Echantillon12 Flacon 4 Etald encadrement fermant 3 Comprendre votre ChemStation Agilent 215 8 Automatisation S quences de r talonnage cyclique utilisant plusieurs flacons qui contiennent la m me dilution d talon 216 Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 9 R vision retraitement des donn es et r vision par lot Table de navigation de la vue Data Analysis Analyse de donn es 218 Configuration de la table de navigation 218 Barre d outils de la table de navigation 220 R vision des donn es l aide de la table de navigation 221 Retraitement d une s quence l aide de la table de navigation 222 D finition de la r vision par lot 224 Activation de la fonctionnalit de r vision par lot avec l option d int grat ion ChemStation OpenLAB 225 Configuration de lot 226 Table de lots 226 Table de compos s 227 Rapport de lot 227 Interface utilisateur 227 Fonctions de r vision 229 talonnage dans le cadre de la r vision par lot 229 G n ration de rapports parlot 230 Historique de lot 230 Ce chapitre d crit les possibilit s de r vision des donn es et les proc dures de retraitement de donn es de s
183. n du syst me 277 Vues Verification V rification et Diagnosis Diagnostic 278 Registre GLPsave 282 Fonction de test DAD 284 8 Comprendre votre ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 1 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Description g n rale 11 Modules d instruments suppl mentaires 12 Modules compl mentaires pour l valuation des donn es 12 Produits destin s uniquement l valuation des donn es 13 Mat riel requis pour ChemStation 14 propos du logiciel ChemStation 15 Syst me d exploitation 15 M thodes et s quences 15 Configuration du syst me 15 Mod le de donn es 16 Conventions de noms de fichiers 16 Interface utilisateur du logiciel 19 Acquisition de donn es 20 Analyse de donn es Affichage 21 Analyse de donn es Int gration 22 Analyse de donn es Quantification 22 Analyse de donn es R vision retraitement et r vision par lot 23 Analyse de donn es Rapports standard 24 Analyse de donn es Rapports sp cifiques 24 Utilitaires et compatibilit 27 Personnalisation 28 Automatisation 28 Bonnes pratiques de laboratoire BPL 30 Commande des instruments 33 Fonctionnement en r seau 33 Documentation 35 he Agilent Technologies 1 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Structure de r pertoires ChemStation 37 Panneau de navigation 41 Boutons de navigation 41 Explorateur ChemStation 41 Ce chapitre r capitule les principaux composants et fo
184. nalit s de la ChemStation Agilent 1 e hauteur de pic e sym trie e largeur r elle du pic mi hauteur e efficacit en nombre de plateaux e r solution e s lectivit Pour les m thodes talonn es le nom et la quantit du compos remplacent les colonnes d aire et de hauteur de pic et de s lectivit L en t te du rapport comprend l en t te et le pied de page standard un bloc d informations propos de l chantillon les param tres de la colonne d ana lyse et ventuellement un trac du chromatogramme lectrophor gramme Le style Performance and Noise ajoute aux donn es du rapport de Performance une valuation du bruit du signal dans sept plages d valuation maximum d finies par l utilisateur Les param tres de bruit sont pr sent s sous forme de rapports signal bruit pour chaque pic ou compos talonn et d un tableau de bruit pour chaque signal Chaque tableau de bruit comporte le bruit calcul par les m thodes 6 x cart type pic pic et ASTM ainsi que la d viation et la d rive Le style Extended Performance ajoute des trac s de chaque pics individuels indi quant les temps de d but et de fin de pic la largeur mi hauteur ainsi que la ligne de base Ce style comporte les param tres suivants qui s ajoutent ceux d finis dans les rapports de performances standard e aire hauteur et quantit e asym trie exc s e facteur de tra ne USP e intervalle de
185. nalys e sans surveillance ou pen dant la nuit Le nom du fichier journal porte toujours l extension log Le fichier journal est stock dans le r pertoire o sont stock es les donn es de la s quence 186 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Proc dure d analyse de s quence Lancement d une s quence en mode Unique Folder Creation ON Mode Cr ation de dossiers uniques activ Le syst me cr e un conteneur des donn es de s quence partir de la d finit ion de chemin d finie dans les param tres et les pr f rences de la s quence Toutes les m thodes d finies dans la table de s quence appartenant cette s quence sp cifique sont copi es dans le conteneur Le syst me continue d uti liser ces fichiers au cours de l acquisition Au d but de la s quence la m thode de la ligne de s quence correspondante est charg e dans ChemStation partir du conteneur Lancement d une s quence en mode Unique Folder Creation OFF Mode Cr ation de dossiers uniques d sactiv Au d but d une s quence le syst me charge le fichier s de cette s quence puis en fonction de l entr e dans la table de s quence charge la m thode cor respondante dans ChemStation Contrairement au mode de stockage Unique Folder Creation ON aucun conteneur des donn es de s quence n est cr Les s quences et m thodes restent dans leur r pertoire ma tre Autres op rations effectu es lors de l ex cution d une s que
186. naux Les points cardinaux sont les points s lectionn s par l int grateur pour d finir et quantifier un pic voir Identification des points cardinaux d un pic page 80 Ce sont les points de ligne de base les points de vall e le som met du pic les points mi hauteur du pic Les points cardinaux ont une coor donn e horizontale de temps coul une coordonn e verticale de hauteur partir de la ligne de base l aire et d autres param tres que l int grateur utilise pour calculer les aires de pic BB Figure 24 Mesure d aire pour des pics de ligne de base ligne de base Dans le cas d un pic simple isol l aire de pic est d termin e par l aire cumul e au dessus de la ligne de base entre le d but et la fin du pic identifi e par des graduations D termination de l aire L aire que l int grateur calcule pendant l int gration est d termin e de la mani re suivante e pour des pics de ligne de base ligne de base BB l aire est au dessus de la ligne de base entre les graduations comme sur la Figure 24 page 108 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 e pour les pics de vall e vall e VV l aire au dessus de la ligne de base est segment e au niveau des graduations selon des lignes verticales comme sur la Figure 25 page 109 VV Figure 25 Mesure d aire pour des pics de vall e vall e e pour les pics tangentiels T l aire est au dessus de la ligne de base red fin
187. nce Les tapes suivantes sont r p t es pour chaque ligne de s quence ex cut e e S il est quip d un injecteur automatique le logiciel ChemStation rep re d abord l chantillon sur cet instrument l aide du num ro saisi dans la colonne Vial Flacon e L instrument est charg avec les param tres de m thode e La macro de pr analyse est ex cut e e L chantillon est ensuite inject dans l instrument manuellement ou auto matiquement Comprendre votre ChemStation Agilent 187 8 Automatisation e L valuation des donn es de m thode est effectu e C est dire l int grat ion la quantification et la g n ration de rapport ainsi que toute macro ventuelle sp cifi e par l utilisateur Si le mode Unique Folder Creation ON Mode Cr ation de dossiers uniques activ est utilis le syst me stocke deux m thodes suppl mentaires ACQ M et DA M lors de l analyse e La macro post analyse est ex cut e e Pendant tout le processus ChemStation suit la progression de la s quence en temps r el et g n re un fichier journal de s quence Etat du logiciel ChemStation Macro post analyse Injection Evaluation de donn es Analyse de l instrument et de l injection U Nivea Macro pr analyse f d tat Chargement de la m thod Fichier de donn es brutes Lancement de la s qlience ferm gt Figure 39 tat de la s quence 188 Comprendre votre ChemStation Agilent
188. nctionnalit s de la ChemStation Agilent 10 Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Description g n rale Les ChemStations pour CPG CPL CPL MSD EC EC MSD et A N sont des modules de contr le d instruments d acquisition et d valuation des donn es pour les instruments suivants e Chromatographes en phase gazeuse Agilent 7890A e Chromatographes en phase gazeuse Agilent 6890N 6890Plus et 6890A e Chromatographes en phase gazeuse Agilent 6850 e Chromatographe en phase gazeuse s rie 5890 IT e Modules et syst mes Agilent s rie 1100 1200 pour CPL e CPL MSD Agilent s rie 1100 Single Quad CPL MSD Agilent s rie 6100 e Syst me d lectrophor se capillaire EC Agilent 1600 e Syst me d lectrophor se capillaire EC Agilent 7100 e Syst me EC SM Agilent e Interface analogique num rique bivoie Agilent 35900E Ce logiciel est con u pour tre install sur un PC compatible IBM fonctionnant sous Microsoft Windows XP Professionnel Il se pr sente sous la forme d une ChemStation de base mono instrument qui se d cline en cinq versions Toutes les versions incluent les fonctionnalit s de contr le d instruments d acquisition et d analyse des donn es int gration quantification et cr ation de rapports d automatisation et de personnalisa tion pour un instrument d analyse d termin Un instrument se d finit comme un outil fonctionnant sur une base de temps uni
189. ne mention AVERTISSEMENT vous devez continuer votre op ration uniquement si vous avez totale ment assimil et respect les conditions mentionn es Utilisation des fins de recherche uniquement Comprendre votre ChemStation Agilent Dans ce guide Dans ce guide Ce guide d crit les diff rents concepts de la ChemStation Agilent Il a pour objectif de vous aider mieux comprendre le fonctionnement du syst me Pour plus d informations sur l utilisation de la ChemStation reportez vous au syst me d aide et au didacticiel en ligne 1 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Ce chapitre r capitule les principaux composants et fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 2 M thodes Ce chapitre d crit les m thodes et leur utilisation 3 Acquisition de donn es Ce chapitre d crit entre autres l acquisition de donn es les fichiers de don n es et le journal 4 Int gration Ce chapitre d crit les principes de l int gration des algorithmes d int gration de la ChemStation Il d crit l algorithme d int gration l int gration et l int g ration manuelle 5 Quantification Ce chapitre d crit la proc dure de quantification de la ChemStation Il d taille les calculs de surface et de hauteur le calcul d talonnage externe ESTD d talonnage interne ISTD de pourcentage normalis et la quantifi cation des pics non identifi s 6 Identification des pics Ce chapitre d c
190. ns suivants la moyenne des valeurs de temps de r ponse et de r tention est calcul e Comprendre votre ChemStation Agilent 229 9 R vision retraitement des donn es et r vision par lot G n ration de rapports par lot La Table de lots page 226 que l utilisateur peut configurer peut tre impri m e directement affich e l cran ou imprim e dans un fichier avec un pr f ixe sp cifi par l utilisateur dans l un des formats suivants e Fichier texte UNICODE TXT e Data Interchange Format DIF e Valeurs s par es par une virgule CSV e Microsoft Excel XLS Les options de cr ation de rapports permettent galement de trier les chant illons par index d analyse type d chantillon ou m thode quelle que soit la m thode de tri de la table de lots Les priorit s de tri sont celles d crites pour la Table de lots page 226 Historique de lot La r vision par lot met jour un journal de toutes les op rations li es au lot en cours Toute op ration modifiant le lot par exemple modifier le chromato gramme affich ou le type d chantillon charger et enregistrer le lot ajoute une ligne l historique du lot Cette ligne inclut la date et l heure le nom de l op rateur en cours ainsi que la description de l v nement En outre vous pouvez ajouter vos propres commentaires l historique du lot Les entr es existantes de l historique du lot ne peuvent pas tre modifi es La liste d
191. ns un premier temps les sorties des filtres de reconnais sance de pic la valeur de sensibilit de pente initiale pour augmenter ou diminuer l accumulateur de pente montante L int grateur identifie le point auquel la valeur de l accumulateur de pente montante est 215 fois le point qui indique qu un pic a commenc L algorithme de reconnaissance de pic est repr sent dans la Figure 8 page 89 D marrage Figure 8 Reconnaissance de pic Comprendre votre ChemStation Agilent 89 4 90 Int gration tl t2 t3 t4 t5 t6 t7 t8 t9 t10 t11 Les crit res sont les suivants Compteur de pente montante sup rieur ou gal 1 Compteur de pente montante gal z ro Compteur de pente montante sup rieur ou gal 2 e Sommet de pic d tect et largeur de pic mi hauteur d tect e ou e Sommet de pic d tect et compteur de pente descendante sup rieur ou gal 2 e Abandon de pic ou e R initialisation imm diate de la ligne de base e Vall e de pic d tect e et compteur de pente montante sup rieur ou gal 2 ou cart type de pente descendante sup rieur deux fois l cart type de fin de pic ou e R initialisation imm diate de la ligne de base ou e R initialisation de la ligne de base la vall e suivante et vall e de pic d t ect e Le crit re de pente descendante n est plus satisfait Le crit re de pente descendante est nouveau satisfait e Vall e
192. nt 85 4 86 Int gration Sur la figure Calcul des largeurs de pics l aire totale A est la somme des aires al a2 a3 et a4 Fs est la pente frontale au point d inflexion Rs est la pente de tra ne au point d inflexion Si l un ou l autre point d inflexion est introuvable la largeur de pic est d finie par Largeur Aire ajust e Hauteur ajust e Le param tre de largeur de pic contr le la capacit de l int grateur distin guer les pics du bruit de la ligne de base Pour obtenir de bonnes performan ces la largeur du pic d finie doit tre proche de la largeur des pics chromatographiques lectrophor tiques r els La largeur du pic peut tre modifi e de trois fa ons e avant l analyse vous pouvez sp cifier la largeur initiale du pic e pendant l analyse l int grateur met automatiquement jour la largeur du pic de mani re maintenir une bonne correspondance avec les filtres de reconnaissance de pic e au cours de l analyse il est possible de red finir ou de modifier la largeur de pic par un v nement programm dans le temps Pour consulter les d finitions de largeur de pic utilis es par les calculs de conformit du syst me voir la section Largeur de pic page 85 Filtres de reconnaissance de pic Filtre 1 Filtre 2 Filtre 3 L int grateur comporte trois filtres de reconnaissance de pic qu il utilise pour reconna tre les pics en d tectant des variations de la
193. nt semblables aux tables de lots et de compos s que l utilisateur peut configurer Pour les colonnes contenant des informations de compos vous pouvez inclure le nom du compos dans le titre de la table en ajoutant s la sp cific ation de colonne Les en t tes multilignes sont autoris s Vous ajoutez le carac t re l endroit o vous souhaitez ins rer un saut de ligne Interface utilisateur La r vision par lot offre deux interfaces utilisateur e l interface standard qui inclut une barre de boutons proposant la plupart des options du menu Batch Lot la table de lots et la table de compos s Comprendre votre ChemStation Agilent 227 9 R vision retraitement des donn es et r vision par lot e une interface minimale qui inclut une barre de boutons semblable l inter face standard mais o les tables de lots et de compos s sont remplac es par une bo te combin e contenant uniquement les informations sp cifi es pour la table de lots La barre de boutons de l interface minimale ne comporte aucun bouton li la table de lots ou la table de compos s 228 Comprendre votre ChemStation Agilent R vision retraitement des donn es et r vision par lot 9 Fonctions de r vision Il existe deux modes d affichage des fichiers de donn es e manuellement en s lectionnant l analyse afficher dans la table e automatiquement avec un intervalle pr d fini entre chaque fichier de don n es Lo
194. ntes analyses Il s av re particuli rement utile par exemple pour tester la stabilit d un instrument ou la fiabilit d une nouvelle m thode Un rapport r capitulatif de s quence peut inclure les l ments suivants une page de titre la configuration de l instrument y compris ses num ros de version et les d tails de la colonne d analyse du capillaire utilis s les listes de la table de s quence d crivant la s quence automatis e des analyses qui doit tre r alis e les descriptions du journal expliquant les op rations effectu es par la s q uence et d taillant les v nements inattendus relev s au cours de cette s q uence les listes de m thodes des rapports individuels pour chaque chantillon des statistiques sur les analyses sur la base des crit res s lectionn s sachant que les statistiques sont calcul es pour les compos s talonn s uniquement et une table des mati res incluant les num ros de page afin d acc der facile ment aux diff rentes sections du rapport Configuration d un rapport r capitulatif de s quence Lors de la configuration d un rapport r capitulatif de s quence vous pouvez s lectionner n importe quelle combinaison des neuf cat gories d crites ci apr s en cochant les cases d option correspondantes et le cas ch ant en 244 Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports ChemStation 10 choisissant un style de rapport parmi les mod
195. o de post analyse liste de v rification de l ex cution 60 Enregistrement d une copie de la m thode avec les donn es liste de v rification de l ex cution 60 he Agilent Technologies 43 2 44 M thodes Enregistrement d une copie de la m thode DA M avec les donn es param tre par d faut de la ChemStation 61 R capitulatif de l ex cution d une m thode 62 Ce chapitre d crit les m thodes et leur utilisation Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Qu est ce qu une m thode Une m thode inclut tous les param tres d acquisition et d analyse de donn es ainsi que les t ches pr et post analyse pour un chantillon donn le cas ch ant Les fichiers de m thodes disponibles m sont affich s dans l Explorateur ChemStation Afin de faciliter la navigation il est possible d ajouter des emplacements de m thodes suppl mentaires dans l arborescence de s lection de l Explorateur ChemStation l aide de l onglet Paths de la bo te de dialogue Preferences Comprendre votre ChemStation Agilent 45 2 M thodes Parties d une m thode 46 Une m thode est identifi e par un nom comportant jusqu 40 caract res alphanum riques Le nom de fichier porte toujours l extension M qui l identi fie en tant que m thode Les m thodes sont stock es dans des r pertoires qui comprennent les fichiers correspondants chaque composant des m thodes Chaque m thode comporte q
196. oints l aide de graduations verticales d tecte le sommet de chaque pic c est dire le temps de r tention migra tion construit une ligne de base et calcule l aire la hauteur et la largeur de chaque pic Ce processus est contr l par des param tres appel s v nements d int grat ion Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Les algorithmes d int gration de la ChemStation L algorithme d int gration ChemStation est la deuxi me version d une nou velle g n ration qui vise plus de robustesse de fiabilit et de simplicit d uti lisation Possibilit s d int gration Les algorithmes d int gration comprennent les possibilit s principales suivantes une possibilit d auto int gration utilis e pour tablir les param tres d int gration initiaux la capacit de d finir diff rentes tables d v nements d int gration pour chaque signal de chromatographe d lectroph rogramme si vous utilisez plusieurs signaux ou d tecteurs une d finition interactive des v nements d int gration permettant aux uti lisateurs de s lectionner sur un graphique le moment des v nements une int gration manuelle ou lastique de chromatogrammes d lecrop hor grammes n cessitant une interpr tation humaine vous pouvez aussi enregistrer ces v nements dans la m thode et les utiliser dans le cadre du processus automatis affichage et impression des r sultats d int gration e
197. olonne Recalib Interval Intervalle de r talonnage qui sp cifie un r talonnage effectu tous les trois chantillons Tableau 22 Table de s quence de BRACK M 1 1 BRACK M 2 talonnage 1 Bracket Remplacement 3 Encadrem ent 2 2 BRACK M 2 talonnage 2 Bracket Remplacement 3 Encadrem ent 3 10 BRACKM 1 4 11 BRACKM 1 5 12 BRACK M 1 6 13 BRACKM 1 7 14 BRACKM 1 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation S quences d talonnage cyclique avec encadrement Ordre d analyse d une s quence encadrante Method Name DataFile Name 12 13 14 15 16 17 Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Brack M Vial Inj No No 1 1 1 2 2 1 2 2 10 1 11 1 12 1 1 1 1 2 2 1 2 2 13 1 14 1 1 1 1 2 2 1 2 2 c1 03001 d c1 03002 d c2 03001 d c2 03002 d 010 0301 d 011 0301 d 012 0301 d c1 03003 d c1 03004 d c2 03003 d c2 03004 d 010 0301 d 011 0301 4 012 0301 d c1 03003 d c1 03004 d c2 03003 d c2 03004 d 013 0301 d 014 0301 d c1 03005 d c1 03006 d c2 03005 d c2 03006 d 013 0301 d 014 0301 d c1 03005 d c1 03006 d c2 03005 d c2 03006 d DDR DD DDR R R Report A R Report R R Report A R Report Print Calibration Table for for for for Calibration Calibration Calibration Calibration Run No Sample Analysis no report Sample Analysis no report
198. omatisation 8 Param tres de sequence La bo te de dialogue Sequence Parameters comporte des informations commu nes tous les flacons d chantillons d une s quence Vous pouvez utiliser cette bo te de dialogue pour e s lectionner le r pertoire de donn es l aide de la zone de liste d roulante Path et saisir les informations relatives au nom de l op rateur le nom de l op rateur saisi dans la bo te de dialogue access level est indiqu par d f aut e indiquer le mode de traitement de la s quence en choisissant des param t res de m thode et d analyse sp cifiques Par exemple vous pouvez e ex cuter la liste de v rification de l ex cution e effectuer uniquement l acquisition e proc der uniquement au retraitement pour les donn es acquises l aide de la version B 01 03 ou d une version ant rieure de la ChemStation avec l option Unique Folder Creation OFF Les donn es de s quences acquises via la ChemStation version B 01 03 ou version ant rieure ou avec l option Unique folder Creation OFF doivent tre retrait es via l option reprocess de la vue Method and Run Control Les donn es de s quences acquises avec la version B 02 01 ou ult rieure de la ChemStation doivent tre retrait es l aide de l option reprocess propos e dans la Data Analysis Navigation table Lorsque vous s lectionnez l option reprocess deux avez deux possibilit s soit utiliser les donn es d chan
199. ompos le rapport de la taille du qualificateur et de la taille du pic principal est compar aux limites talonn es La taille d signe la hauteur ou l aire selon le param t re de calcul d fini dans Specify Report Sp cification de rapport Comprendre votre ChemStation Agilent 147 148 Identification des pics Les pics qualificateurs peuvent tre talonn s de la m me mani re que les compos s cibles L utilisateur ne doit pas sp cifier le rapport de qualificateur pr vu Le rapport de qualificateur attendu est calcul automatiquement les deux mesures sont effectu es au temps de r tention du compos Le param tre QualTolerance d finit la plage acceptable du rapport de qualifi cateur par exemple 20 La tol rance peut tre d finie dans la table d talonnage de l interface utilisa teur Identification Details D tails d identification et est exprim e en pour centage absolu Pour un talonnage multiniveau ChemStation calcule une tol rance de qualifi cateur minimale sur la base des rapports de qualificateur mesur s chaque niveau d talonnage La tol rance de qualificateur minimale est calcul e l aide de l quation suivante 1 a minimum qualifier tolerance 2 1 x 100 qx o q est le rapport de qualificateur mesur au niveau i Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 La proc dure d identification Lorsqu il tente d identifier les pics le log
200. omprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 Facteur de tra ne USP USP t t distance en min entre le front de pic et TR mesur e 5 de la hauteur du pic W5 o largeur de pic 5 de la hauteur de pic min W50 H Pa ligne de base ea H5 temps We Figure 46 Param tres de performance Nombre de plateaux th oriques par colonne USP ASTM n M thode tangentielle USP ASTM Th 2 n 16 E Wg o Comprendre votre ChemStation Agilent 265 11 Evaluation de l aptitude du syst me Wp largeur de base min M thode de largeur mi hauteur ASTM Th 2 n 5 sa Wo o W o largeur de pic mi hauteur min M thode 5 x cart type 25 Tr 2 n E o W 4 largeur de pic 4 4 de la hauteur de pic min M thode de variance _ MI M2 ou Mx moment statistique x voir galement Moments statistiques page 262 Nombre de plateaux th oriques par m tre N 1 m N 100x I o n nombre de plateaux th oriques 1 longueur de colonne cm 266 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 R tention relative USP ASTM s lectivit alpha Concernant les pics a et b TR du pic a lt TR du pic b Kib alpha alpha 2 1 a ou K facteur de capacit du pic x R solution USP ASTM R Concernant les pics a et b TR du pic a lt
201. on de donn es impression de rapports affichage des param tres de la m thode d acquisition etc Vous pouvez d velopper chaque ligne de cette table en cli quant sur le signe plus gauche de la ligne pour configurer les options d acquisition e Signal Liste les acquisitions et permet d indiquer celles qui doivent tre charg es La s lection de l affichage des acquisitions s applique chaque analyse General Info Informations g n rales Liste les d tails d en t te concer nant l analyse Instrument curves Courbes d instrument Permet de s lectionner les courbes de donn es d instrument afficher avec le chromatogramme et ou l lectroph rogramme et sur l impression Comprendre votre ChemStation Agilent 219 9 R vision retraitement des donn es et r vision par lot Barre d outils de la table de navigation La Navigation Table comporte deux barres d outils permettant de r viser des donn es d analyse simple et ou de s quence ou de retraiter des donn es de s quence Outils de r vision des donn es La fonction de r vision de la table de navigation permet de naviguer automati quement ou manuellement dans les acquisitions charg es En fonction de l option s lectionn e dans Preferences Signal Review le syst me peut int grer automatiquement l acquisition et imprimer un rapport pour chaque fichier lorsqu il est charg La m thode appliqu e au fichier de donn es est indiqu e dans le m
202. onfigure les param tres de traitement de donn es qui influent sur les calculs de quantification d terminant la quantit ou la concentration des composants d chantillon correspondant chaque pic Etalonnage et r talonnage Configure les param tres de traitement de donn es relatifs l talonnage ainsi que la fr quence de l talonnage Champs personnalis s D finit les propri t s des champs personnalis s disponibles pour la m thode qui sont associ s aux chantillons ou aux compos s Les champs personnali s s permettent d ajouter des informations sp cifiques un chantillon ou un compos dans un chantillon Rapport D finit le format du rapport devant s imprimer au terme d une analyse Comprendre votre ChemStation Agilent 47 2 48 M thodes Liste de v rification de l ex cution D finit les parties d une m thode qui sont ex cut es lorsque la m thode est appliqu e La liste de v rification de l ex cution peut tre utilis e pour e l acquisition l enregistrement et le traitement de donn es pour g n rer un rapport e l ex cution d une partie de la m thode uniquement e l acquisition et l enregistrement de donn es sans les analyser e l ex cution d une nouvelle analyse de fichiers de donn es existants e l utilisation de vos propres macros pour l analyse des donn es et le traite ment pr analyse et post analyse e l enregistrement des r sultats
203. os tal onn dans le chromatogramme e temps de r tention migration k e sym trie e largeur de pic e nombre de plateaux e r solution e rapport signal bruit et e nom du compos 252 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l aptitude du syst me 11 D finition du bruit Le bruit peut tre d fini partir des valeurs de points de donn es sur une plage de temps s lectionn e d un signal Il existe trois modes de traitement du bruit e selon le principe de l cart type sd x 6 de la r gression lin aire de la d r ive e selon le principe de cr te cr te correction de la d rive et e selon la m thode ASTM ASTM E 685 93 Il est possible de calculer le bruit pour sept plages du signal au maximum Les plages sont d finies via les param tres d aptitude syst me des options de rap port Calcul du bruit selon le principe 6 x cart type lin aire R gression bruit pente d rive xSd SCOR Sd cart type temps Figure 42 Bruit calcul par 6 x l cart type La r gression lin aire est calcul e partir de tous les points de donn es dans une plage de temps donn e voir Analyse de r gression page 272 Le bruit est d fini par la formule suivante N 6 x Std Comprendre votre ChemStation Agilent 253 11 254 Evaluation de l aptitude du syst me o N est le bruit bas sur la m thode 6 x cart type et Std est l
204. os illustrant l utilisation de la plupart des commandes Ce fichier tant disponible en ligne vous pouvez copier les exemples et la syntaxe de commande directement dans les fichiers source de vos propres macros Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Structure de r pertoires ChemStation La structure des r pertoires du logiciel ChemStation est illustr e dans l exem ple suivant Elle comporte des r pertoires g n riques partag s par tous les instruments configur s et des r pertoires sp cifiques des instruments Le pro gramme d installation du logiciel cr e un sous r pertoire du r pertoire ChemStation par d faut CHEM32 pour chaque instrument configur avec le num ro de l instrument Les donn es les m thodes et les s quences de l ins trument sont stock es par d faut dans son sous r pertoire Il est possible d ajouter d autres sous r pertoires pour les donn es les m thodes et les s q uences dans Preferences Pr f rences L Explorateur ChemStation permet de naviguer aux nouveaux emplacements afin de charger des donn es des m t hodes et des s quences Ces nouveaux emplacements sont galement disponi bles dans chaque zone de s lection des options de menu ChemStation par exemple pour les param tres de chemin d acc s dans les param tres de s q uence Les sous r pertoires ChemStation sont Comprendre votre ChemStation Agilent 37 1 Fonctionnalit s de la
205. our certaines constructions de ligne de base des petites aires peuvent tre au dessus de la ligne de base et au dessous du signal mais ne font pas partie des pics identifi s Ces aires ne sont normalement ni mesur es ni pr sent es dans les rapports Si l option unassigned peaks Pics non attribu s est acti v e ces aires sont mesur es et mentionn es dans le rapport comme tant des pics non attribu s Le temps de r tention migration pour ces aires est le point central entre le d but et la fin de l aire comme indiqu sur la Figure 23 page 105 0 482 0 832 0 581 Figure 23 Pics non attribu s Codes de s paration des pics Dans les rapports chaque pic se voit attribuer un code deux trois ou quatre caract res d crivant le mode de trac de la ligne de base Comprendre votre ChemStation Agilent 105 4 106 Int gration c gt c 3 n TT Tv lt D x 1 Z 0 Caract res 1 et 2 Le premier caract re indique la ligne de base du d but du pic le deuxi me caract re d crit la ligne de base la fin du pic Le pic a commenc ou s est arr t sur la ligne de base Le pic a commenc ou s est arr t par une ligne verticale de vall e Le pic a commenc ou s est arr t pendant la p n tration de la ligne de base Le pic a commenc ou s est arr t sur une ligne de base horizontale forc e Le pic a commenc ou s est arr t sur un point forc Le pic a t int gr manuellement
206. our objet de conserver les param tres d acquisition il est recommand de ne pas modifier cette m t hode lors des r visions ult rieures des donn es DA M d signe la m thode d analyse de donn es individuelle pour un fichier de donn es sp cifique En cas d actualisation de la table d talonnage par exemple les m thodes DA M sont diff rentes pour chaque analyse Dans la version B 03 01 ou une version ult rieure de la ChemStation ce comportement peut tre d sactiv en d s le ctionnant l option Cr ation de dossiers uniques Comprendre votre ChemStation Agilent Acquisition de donn es 3 Moniteurs en temps r el Il existe deux types de moniteurs en temps r el le moniteur de signaux et le moniteur de spectres Moniteur de signaux en temps r el Le moniteur de signaux en temps r el permet de contr ler plusieurs signaux et s ils sont pris en charge par l instrument associ les trac s de performan ces de l instrument dans la m me fen tre Vous pouvez s lectionner votre convenance les signaux visualiser et r gler l heure et l axe d absorbance Les d tecteurs qui prennent en charge cette fonction sont dot s d un bouton de stabilisation Affichez la r ponse de signal absolu dans la ligne du message en d pla ant le curseur en forme de croix sur l cran Moniteur de spectres en temps r el Le moniteur de spectres en temps r el n est disponible que sur les ChemSta tions qui prennent en ch
207. peuvent tre s lectionn es Pond ration Description Uniforme Lin aire quantit Lin aire r ponse Quadratique quantit Tous les points d talonnage ont la m me importance dans la courbe Un point d talonnage pour la quantit x poss de un facteur de pond ration 1 x normalis par rapport la plus petite quantit de telle sorte que le facteur de pond ration le plus lev soit 1 La normalisation est effectu e en multipliant la pond ration par la plus petite quantit Par exemple la pond ration d un point d talonnage de quantit x est 1 x o a d signe la plus petite quantit de compos talon pr par e dans les talons Si l origine est int gr e il lui est attribu la moyenne des pond rations des autres points d talonnage Un point d talonnage de r ponse y poss de un facteur de pond ration de 1 Y normalis par rapport la plus faible r ponse de sorte que le facteur de pond ration le plus lev soit 1 La normalisation est effectu e en multipliant la pond ration par la plus faible r ponse Par exemple la pond ration d un point d talonnage de quantit y est 1 y o b d signe la r ponse correspondant la plus faible quantit de compos talon pr par e dans les talons Si l origine est int gr e il lui est attribu la moyenne des pond rations des autres points d talonnage Un point d talonnage de quantit x poss de un facteur de pond
208. pillaire Le r talonnage automatique a lieu habituellement au d but d une s quence d analyses ou intervalles r guliers durant une s quence d un programme pour compenser les facteurs ayant un impact sur les performances d analyse Il existe deux m thodes pour sp cifier le r talonnage de s quence automatique e les s quences d talonnage explicite ou e les s quences d talonnage cyclique R talonnage en mode de pr f rence Unique Folder Creation ON Mode Cr ation de dossiers uniques activ Pendant une op ration de r talonnage la table d talonnage de la m thode utilis e est mise jour en fonction des param tres d finis pour cette m thode En mode de stockage Unique Folder Creation ON Mode Cr ation de dossiers uniques activ les m thodes r talonn es sont disponibles dans le conteneur des donn es de s quence La table d talonnage de la m thode de s quence est mise jour pendant ce processus En outre la m thode DA M de chaque fichier de donn es contient l talonnage mis jour utilis pour la cr ation des r sultats R talonnage en mode de pr f rence Unique Folder Creation OFF Mode Cr ation de dossiers uniques d sactiv Pendant une op ration de r talonnage la table d talonnage de la m thode utilis e est mise jour en fonction des param tres d finis pour cette m thode En mode de stockage Unique Folder Creation OFF Mode Cr ation de dossiers uniques d
209. ponse Calibration table level No update Aucune No update Aucune Cyclic recalibration interval 1 999 Niveau de mise jour mise jour 1 999 Intervalle de table d talonnage r talonnage cyclique 1 999 1 999 Moyenne Moyenne Blank Blanc Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Tableau 16 Param tres de r talonnage de la table de s quence CAL Level Niveau Update RT Mettre Update RF Mettre Interval Intervalle d talonnage jour le temps de jour le facteur de r tention r ponse Remplacement Remplacement Bracket Encadrement Delta delta Ce tableau indique les colonnes de la table de s quence contenant les param t res de r talonnage et les valeurs que vous pouvez entrer No Update Aucune mise jour Ne change pas le facteur de r ponse ou le temps de r tention migration Remplacement Remplace les temps de r tention migration pr c dents et la r ponse aires ou hauteurs par ceux de l analyse en cours seulement La r ponse n est pas modifi e pour les pics introuvables dans cette analyse d talonnage Moyenne Etablit les temps de r tention migration pr c dents et les r ponses aires ou hauteurs pour chaque pic en se basant sur l analyse d talonnage originale et tous les r talonnages depuis lors S il manque un pic dans l un des r talo nnages la r ponse moyenne correspondante n est pas affect e Bracket Encadremen
210. pour les chantillons concern s Le facteur de r ponse d un pic de composant donn correspond l inverse de la pente de la courbe d talonnage passant par ce point et l origine L talonnage simple pr sente un inconv nient la r ponse du d tecteur en fonction de la concentration d un chantillon est cens e tre lin aire et passer par l origine sur un trac de la concentration en fonction de la r ponse Ce n est pas toujours le cas et des r sultats inexacts peuvent tre g n r s R ponse 100 Courbe d talonnage Concentation ng ul Figure 34 courbe d talonnage simple Comprendre votre ChemStation Agilent 157 7 158 talonnage Pour obtenir des r sultats quantitatifs exacts une courbe d talonnage doit comporter au moins deux niveaux Ces niveaux doivent encadrer les quantit s recherch es dans les chantillons inconnus R ponse 1000 Courbe d talonnage 100 1 10 Concentration ng pl Figure 35 Courbe d talonnage deux niveaux Par exemple si vous souhaitez quantifier un compos et que la concentration des chantillons inconnus devrait tre comprise entre 1 et 10 ng ul la courbe d talonnage doit alors comporter au moins deux niveaux voir Figure 35 page 158 Limites quantitatives ChemStation permet de d finir des plages de quantification valides en terme de quantit absolue de chaque composant talonnage multiniveau L talonnage plusieurs niveaux peut
211. prendre votre ChemStation Agilent 183 184 Automatisation relatives la table de s quence et aux talons sont fournies sous forme cod e dans les colonnes Tbl s q et Etal FR TR Reportez vous l aide en ligne pour une description de ces codes Vous pouvez obtenir une version papier de la s quence partielle en cliquant sur le bouton Print La bo te de dialogue Partial Sequence suivante appara t lorsque la m thode SimpResg et la table de s quence illustr es plus loin dans le Tableau 20 page 206 et le Tableau 21 page 207 sont actives Les chantillons 1 2 4 5 et 8 sont marqu s pour traitement Partial Sequence GC6890 1 x Select the parts of the sequence to run Spacebar toggles selection Sel Run Vial Method Data File Seq Tb Calib RF RT Sample Name Ae 5 TOTAV AV Calibration A 4 2 smPREG 002Fo30m F030 Sampei LOLAV AV Calibration A jes 1 siMmPREG c1iF04002 F 04 02 1 01 AvAv Calbrationa s 3 smPReG 0o3Fo4m Foso Sampe2 s 1 siMmPReG ciFos00 F 06501 _ 1 01 AvAv Calibrationa TOTAVAV Calibration A C hi2 4 simPReEG o04Fo50 F0501 Samples DIDID D ID D DN oD oD on H TOTAVAV Calibration A 14 f1 siMmPREG ciFosoo2 F 06 02 1 01 AV AV CalbrationA C his 1 siMmPREG c2Fo6001 F0601 202AV AV CalbrationA he i simPREG cC2F06001 F 06 01 Control hiz i simPREG _ c1Fo7001 Fo701 _ 1 01 Av Av Calibration A xl HETTI
212. primantes par exemple avec d autres ordina teurs de laboratoire mais galement des informations fichiers de donn es m thodes etc Client serveur Le logiciel ChemStation peut tre install sur un serveur r seau adapt puis t l charg sur les PC clients suivant les besoins Chaque configuration sp cif ique d un client garantit un environnement adapt pour diff rentes techniques et chaque utilisateur tandis que l installation centralis e du logiciel vite la gestion de copies multiples de la m me installation de ChemStation dans un m me environnement de travail Commande des instruments sur un r seau local Le logiciel ChemStation permet la commande d instruments et l acquisition de donn es sur un r seau local pour les syst mes Agilent 7890 GC Agilent 6890 GC le module de commande analogique num rique Agilent 35900E et le sys t me Agilent s rie 1100 1200 LC Des instruments peuvent tre ais ment pilo Comprendre votre ChemStation Agilent 33 1 34 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Commande des instruments t s et contr l s en les connectant un r seau local sur lequel r side le PC ChemStation Cette configurationpermet de localiser le PC ChemStation dis tance des instruments qu il commande Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Documentation La documentation comporte des sections consacr es aux sujets suivants e Installation
213. qu s lors du charge ment d un fichier de donn es utilisant cette m thode Si le fichier de donn es contient des v nements manuels suppl mentaires ils sont appliqu s apr s les v nements de la m thode Quand la case Manual Events est coch e l utilisa teur n est jamais invit sauvegarder les v nements dans le fichier de don n es Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Conversion d v nements d int gration manuelle enregistr s dans une m thode Dans les versions de la ChemStation ant rieures la version B 04 01 les v nements d int gration manuelle taient enregistr s dans la m thode et non dans le fichier de donn es individuel Pour enregistrer sp cifiquement les v nements manuels dans un fichier de donn es il tait pr f rable d utiliser la m thode individuelle DA M pour chaque fichier de donn es en particulier Le menu Int gration de la vue Data Analysis comporte les options suivantes pour convertir des v nements d int gration manuelle dans la m thode en v ne ments enregistr es dans le fichier de donn es ou continuer travailler avec des v nements manuels enregistr s dans la m thode Update Manual Events of Method sauvegarde les nouveaux v nements manuels extraits dans la m thode Apply Manual Events from Method applique les v nements manuels actuelle ment sauvegard s dans la m thode au fichier de donn es actuellement charg
214. que mais capable de collecter simultan ment des donn es manant de plusieurs d tecteurs Les cinq ver sions disponibles sont e la ChemStation mono instrument pour les syst mes de chromatographie en phase gazeuse CPG r f rence produit G2070BA e la ChemStation mono instrument pour les syst mes de chromatographie en phase liquide CPL r f rence produit G2170BA e la ChemStation mono instrument pour syst mes d lectrophor se capillaire EC r f rence produit G1601BA Comprendre votre ChemStation Agilent 11 1 12 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent e la ChemStation mono instrument pour les syst mes de couplage de chroma tographie en phase liquide d tecteur de masse CPL MSD r f rence pro duit G2710BA et e la ChemStation mono instrument analogique num rique A N pour l acquisition de donn es analogiques avec contr le d v nements externes r f rence produit G2072BA Afin d optimiser les capacit s de contr le des instruments du logiciel ChemsS tation il est possible d installer des modules suppl mentaires d acquisition et de contr le des donn es d instruments permettant de cr er des configura tions int grant plusieurs instruments et techniques Modules d instruments suppl mentaires Modules d instruments suppl mentaires disponibles e module suppl mentaire de contr le d instruments et d acquisition de don n es CPG r f rence produit G2071BA module suppl
215. quel chaque compos est rapport comme pourcentage de tous les compos s pr sents La r ponse du d tecteur des pics est corrig e avant le calcul de chaque pourcentage ESTD g n re un rapport de la quantit r elle de chaque substance dans les uni t s de votre choix Les quantit s sont calcul es par le biais d une table d tal onnage cr e pr c demment L utilisation d un talon externe exige la connaissance du volume inject du m lange talon ESTD g n re un rapport de la quantit relative de chaque substance comme pourcentage de l chantillon inject Les quantit s sont calcul es par le biais d une table d talonnage cr e pr c demment L utilisation d un talon externe exige la connaissance du volume inject du m lange talon ISTD g n re un rapport de la quantit r elle de chaque substance Les quanti t s sont calcul es au moyen d une courbe d talonnage cr e pr c demment Gr ce l utilisation d un talon interne dans l chantillon et le m lange talon l utilisateur n a pas besoin de conna tre ni de contr ler le volume de l chant illon inject Cela corrige galement toute variation des performances de l ins trument entre les analyses Comprendre votre ChemStation Agilent 235 10 Utilisation des rapports ChemStation ISTD g n re un rapport de la quantit relative de chaque substance comme pourcentage de l chantillon inject Gr ce l utilisation d un talon interne
216. quence S quence chantillons prioritaires Une s quence en cours d analyse peut tre interrompue une fois la m thode en cours termin e La s quence peut tre interrompue pour permettre l analyse d un chantillon prioritaire via la m me m thode ou une m thode diff rente La s quence peut alors tre reprise l endroit o elle a t interrompue avec l chantillon concern S quen age avec des chantillons de contr le Vous pouvez sp cifier des chantillons de contr le dans le champ Sample Type Type d chantillon de la table de s quence La m thode utilis e pour analy ser l chantillon de contr le doit contenir une table d talonnage o sont indi qu es les limites d chantillon de contr le pour l un des compos s En cas de d passement des limites d chantillon de contr le sp cifi es la s quence est arr t e et un message est consign dans le journal Si vous utilisez l un des sty les de rapport ChemStation les limites d chantillon de contr le sont galem ent imprim es sur les rapports g n r s pour ces analyses Pour plus d informations sur le mode de d finition d une s quence avec des chantillons de contr le reportez vous la section How To Comment faire de l aide en ligne 182 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Arr t d une s quence L analyse active prend fin avant que la s quence s arr te Une s quence arr t e ne peut absolument pas tr
217. quence Table Table de s quence Short Court shoulder detection D tection d paulement shutdown arr t Signal Options Options de signal Slope sensitivity Sensibilit de pente Spectrum Spectre Split Peak Pic d doubl Standard Data Analysis liste de v rification de l ex cution Standard Statistic Statistiques standard Standard Statistics Statistiques standard Statistics Statistique pour les analyses d chant illon Statistics for Calibration Runs Statistiques portant sur les analyses d talonnage Status Etat SUlLabel Type Application gt Statistics for Calibrated and Sample Runs SUILabel Type Application gt Statisti ques pour les analyses talonn es et Statistiques pour les analyses d chantillons Summary R capitulatif T Tail Skim Height Ratio Rapport hauteur tra ne d approxima tion Tangent Skim Approximation tangentielle U Unique Folder Creation mode Cr ation de dossiers uniques activ Unique folder Creation OFF Mode Cr ation de dossiers uniques d sactiv Unique Folder Creation OFF Mode Cr ation de dossiers uniques d sactiv Unique Folder Creation ON Mode Cr ation de dossiers uniques activ Unique pdf file name Nom de fichier pdf unique Update Method Mettre jour la m thode Update Manual Events of Method Mettre jour les v nements manuels de la m thode Update Master Method Mettre jour la m thode de r f rence Update Sequen
218. quences d talonnage cyclique un niveau 201 S quences d talonnage cyclique plusieurs niveaux 202 Utilisation simultan e d talonnages explicites et cycliques 206 S quences d talonnage cyclique avec encadrement 208 S quences de r talonnage cyclique utilisant plusieurs flacons qui contiennent la m me dilution d talon 212 9 R vision retraitement des donn es et r vision par lot 217 Table de navigation de la vue Data Analysis Analyse de donn es 218 D finition de la r vision par lot 224 Activation de la fonctionnalit de r vision par lot avec l option d int gration ChemStation OpenLAB 225 Configuration de lot 226 Fonctions de r vision 229 G n ration de rapports par lot 230 10 Utilisation des rapports ChemStation 231 Qu est ce qu un rapport 232 dition des r sultats 233 Comprendre votre ChemStation Agilent Sommaire R sultats quantitatifs 235 Valeurs de champ personnalis de g n ration de rapport 237 Styles de rapports 238 Autres param tres de style de rapport 241 Destination du rapport 242 Rapport r capitulatif de s quence 244 1 Evaluation de l aptitude du syst me 249 D finition du bruit 253 Calcul de la sym trie des pics 258 Calculs et formules d aptitude syst me 260 D finitions g n rales 261 D finition des tests de performances 262 D finitions de la reproductibilit 269 Acc s au nombre en double pr cision stock en interne 274 12 V rificatio
219. r tez vous l aide en ligne Comprendre votre ChemStation Agilent 179 Automatisation Cr ation de s quences s quences et mod les de s quence 180 Utilisez la table de s quence pour indiquer les chantillons les m thodes et les flacons analyser dans la s quence La table de s quence r pertorie chaque chantillon de la s quence dans l ordre d analyse En outre elle contient les informations relatives au flacon la m thode et l talonnage n cessaires chaque chantillon Utilisation de l diteur de table de s quence Pour modifier l apparence et le contenu de la table de s quence vous pouvez ouvrir l diteur en cliquant sur le symbole de liste en bas droite de la table L diteur de table de s quence s ouvre et permet de sp cifier l affichage ou non de certaines colonnes dans la table De plus vous pouvez modifier les largeurs de colonnes pour chaque colonne de la table Selon les logiciels install s d autres champs de colonnes peuvent tre ajout s par exemple le champ Tar get Mass Masse cible si un CPL SM est install ou le champ Study Etude pour l installation d un module compl mentaire ChemStore Utilisation du bouton Insert Vial Range Ins rer une plage de Si plusieurs chantillons utilisent la m me m thode vous pouvez les saisir rapidement dans la table de s quence via la fonction Insert Vial Range Ins r er une plage de flacons Cette fonction copie le nom de la m thod
220. r sultats calcul s sont multipli s avant l impression du rapport Le facteur de dilution permet de modifier l chelle des r sultats ou de corriger les modifications apport es la composition de l chantillon pendant l analyse pr alable Vous pouvez galem ent recourir au facteur de dilution n importe quelle autre fin n cessitant l utilisation d un facteur constant Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Quantit d chantillon Si les calculs de ESTD ou ISTD sont s lectionn s les rapports ESTD et ISTD donnent des valeurs relatives et non absolues la quantit de chaque compo sant est exprim e en pourcentage de la quantit de l chantillon La quantit d chantillon est utilis e dans les rapports ESTD et ISTD pour convertir la quantit absolue de chaque composant analys en une quantit relative en la divisant par la valeur sp cifi e Comprendre votre ChemStation Agilent 125 5 Quantification Proc dures de calcul non talonn Les proc dures de calcul non talonn es ne n cessitent pas de table d talonn age surface et hauteur La proc dure de calcul de pourcentage d aire aire indique la surface de chaque pic dans l analyse sous forme de pourcentage de la somme des surfa ces de tous les pics de l analyse Le pourcentage d aire aire ne n cessite pas d talonnage pr alable et ne d pend pas de la quantit d chantillon injec t dans les limit
221. r de lot de la s quence b e le fichier journal de la s quence log Au cours du retraitement les diff rentes m thodes DA M des fichiers de don n es sont mises jour ainsi que le fichier de commande b Gr ce aux fonctions de retraitement Data Analysis il est possible de modifier le mod le de s quence s dans le conteneur de donn es afin de modifier le multiplicateur la dilution etc ou d utiliser une autre m thode pour le retrai tement Par d faut le param tre de retraitement de s quence parts of method to run pour l analyse de donn es est d fini sur Reprocessing only et l option Use Sequence Table Information est s lectionn e Ces valeurs par d faut permettent de modifier les param tres du mod le de s quence et d ex cuter un retraite ment sans devoir modifier nouveau les param tres de s quence dans Data Analysis Si vous n avez pas modifi explicitement la m thode dans le mod le de s q uence le syst me utilise les m thodes de s quence stock es dans le conteneur de donn es pour retraiter la s quence Il s agit des m thodes initialement utili s es lors de l acquisition des donn es Notez que m me si l option load DA method from data file dans Preferences Signal Review Options est s lectionn e le syst me utilise la m thode du conteneur de s quence pour le retraitement et non la m thode DA M des fichiers de donn es Comprendre votre ChemStation Agilent R v
222. r tous les v nements des chromatogrammes actuellement affich s e annuler les derniers v nements d int gration manuelle fonction disponi ble jusqu ce que l v nement soit sauvegard Lorsque vous passez au fichier de donn es suivant pendant la r vision dans la Navigation Table la ChemStation v rifie les v nements d int gration manuelle non sauvegard s et demande l utilisateur s il souhaite sauvegarder ces v nements Les v nements manuels enregistr s dans le fichier de donn es pendant la r vision dans la Navigation Table n interf rent pas avec les v nements d int g ration manuelle enregistr s pendant la r vision dans le mode Batch Ces deux modes de r vision sont totalement s par s des v nements manuels d un fichier de donn es Comprendre votre ChemStation Agilent 117 4 118 Int gration Dans les versions de la ChemStation ant rieures la version B 04 01 les v nements d int gration manuelle taient enregistr s dans la m thode et non dans le fichier de donn es individuel Dans la version B 04 01 cette proc dure peut toujours tre utilis e Le menu Integration de la vue Data Analysis fournit les points suivants qui permettent de g rer les v nements d int gration manuelle avec la m thode e Update Manual Events of Method sauvegarde les nouveaux v nements manuels extraits dans la m thode e Apply Manual Events from Method applique les v ne
223. rd de Microsoft tel qu il est d fini dans la documentation de d veloppement de logiciels Windows Ces fichiers sont compatibles avec le format Aldus Placeable Metafile APM utilis par de nombreux progiciels propri taires Les donn es de rapports sous forme de tableau sont enregistr es au format Data Interchange Format DIF Ce format est compatible avec les tableurs tels que Microsoft Windows EXCEL Quel que soit le style de rapport s lectionn seules les informations du style de rapport Court sont enregistr es Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports ChemStation 10 CSV Dans les rapports avec l extension CSV Comma Separated Values les valeurs sont s par es par une virgule Ce format tr s simple permet de repr senter des donn es tabul es et est accept par la plupart des tableurs et bases de donn es Quel que soit le style de rapport s lectionn seules les informations du style de rapport Court sont enregistr es Un m me rapport peut contenir plusieurs fichiers DIF et CSV Pour chaque bloc de rapport le premier fichier par exemple REPORTOO CSV doit contenir les informations d en t te Les fichiers suivants contiennent les r sultats tabu l s Si les r sultats sont tri s par temps de r tention migration un seul fichier est requis pour la table enti re par exemple REPORTO1 CSV Si les r sultats sont tri s par signal une table distincte est alors n cessaire pour chaque s
224. res d finis par l utilisateur se pr sentent sous forme de tableaux de tendance et peuvent tre utilis s pour d terminer des limites op ratoires r alistes Ces limites peuvent ensuite tre int gr es la m thode afin de v rifier qu elle respecte les limites sp cifi es par analyse d chantillons talons Fonctionnement du syst me Le kit de v rification ChemStation qui fait partie du logiciel standard v rifie automatiquement l installation et le fonctionnement corrects des composants d valuation des donn es du logiciel en comparant les r sultats g n r s lors de l ex cution du test des valeurs connues pr enregistr es Ce kit de v rificat ion permet l utilisateur de d finir ses propres fichiers de donn es et m thod es qui serviront de base au test Tra abilit originalit et qualit des donn es Le journal d ex cution consigne les transactions de l ensemble du syst me Il enregistre galement tous les v nements inhabituels tels que erreurs modi fications de param tres en cours d analyse ainsi que l tat de l instrument avant et apr s chaque analyse Une copie de l extrait de journal correspondant est enregistr e avec chaque fichier de donn es Comprendre votre ChemStation Agilent 31 1 32 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Les conditions de fonctionnement r elles de l instrument pression d bit et temp rature par exemple relev es au cours de chaque analyse sont
225. rformances et bruit Preference Pr f rence Preferences Pr f rences Preferences Signal Review ision Preferences Signal Review Option Pr f rences Options d acquisi tion r vision Preferences Signal Review Options ision Print Imprimer Print Current Sequence Imprimer la s quence en cours Q Quantification Parameters Param tres de quantification Pr f rences Options d acquisition r v Pr f rences Options d acquisition r v Remove Manual Events from Method Supprimer les v nements manuels de la m thode Report to file Rapport vers fichier Report to HTM Rapport vers HTM Report to PDF Rapport vers PDF Report to printer Rapport vers imprimante reprocess Retraiter Reprocessing only Retraiter uniquement Review DAD Test Examen du test DAD Run Time Checklist liste de v rification de l ex cution S Sample Information Informations d chantillon Sample Summary R capitulatif d chantillon save as Enregistrer sous Save as New Database Enregistrer en tant que nouvelle base de donn es Save Current Sequence Enregistrer la s quence en cours Sequence S quence Sequence Method M thode de s quence Sequence Output Sortie de s quence Comprendre votre ChemStation Agilent Glossaire d IU Sequence Parameters Param tres de s quence Sequence Summary Parameters Param tres r capitulatifs de s quence Sequence Summary Reporting Rapport r capitulatif de s quence Se
226. rit les principes de l identification des pics Comprendre votre ChemStation Agilent 3 Dans ce guide talonnage Ce chapitre d crit les fonctionnalit s d talonnage dans la ChemStation Automatisation Ce chapitre pr sente les principes de l automatisation Il d crit l utilisation de s quences dans la ChemStation le processus d analyse d une s quence et la personnalisation des s quences R vision retraitement des donn es et r vision par lot Ce chapitre d crit les possibilit s de r vision des donn es et les proc dures de retraitement de donn es de s quence Il pr sente galement les principes de r vision par lot de configuration par lot les fonctions de r vision et la g n ra tion de rapports 10 Utilisation des rapports ChemStation 11 Ce chapitre d crit la notion de rapport Il contient des informations concer nant les rapports de r sultats les r sultats quantitatifs les styles et la destina tion des rapports et les rapports r capitulatifs de s quence Evaluation de l aptitude du syst me Ce chapitre d crit les fonctions de la ChemStation permettant d valuer les performances de l instrument d analyse avant son utilisation pour les analy ses d chantillons et de la m thode d analyse avant son fonctionnement dans des conditions standard Il d crit galement la v rification des performances d analyse avant et pendant les analyses de routine 12 V rification du syst
227. rs de l affichage automatique seuls les types d chantillon affich s dans la table apparaissent Les analyses sont affich es dans leur ordre d apparition dans la table La r vision automatique peut tre interrompue et reprise ult rieurement ou arr t e Les fonctions standard de la ChemStation sont disponibles avec la r vision par lot Elles incluent l talonnage l utilisation manuelle de chromatogram mes par exemple par lissage ou int gration manuelle Les modifications apport es un fichier de donn es peuvent tre marqu es et enregistr es avec le fichier de commande Les chromatogrammes r vis s sont marqu s d un ast risque dans la table de lots Vous pouvez galement annuler les modifica tions du chromatogramme en cours uniquement ou toutes celles des chroma togrammes du lot Lorsqu une analyse est charg e les options de traitement s lectionn es sont ex cut es Si l analyse a d j t trait e et les modifications enregistr es cette analyse est charg e Ce processus est plus rapide que le chargement de l ana lyse non trait e car aucun traitement n est n cessaire talonnage dans le cadre de la r vision par lot L talonnage dans le cadre de la r vision par lot ne d pend pas des param tres de r talonnage de la table de s quence La premi re tape de l talonnage par lot remplace syst matiquement les entr es de temps de r ponse et de r tent ion de la table d talonnage Pour les talo
228. rs et des modules d instrument Elles affichent l tat des diff rents compos s et le cas ch ant les conditions en cours par exemple les donn es relatives la pression au gradient et au d bit Barre d tat L interface utilisateur graphique du syst me ChemStation se compose de bar res d outils et d une barre d tat dans la vue Method and Run Control Contr le de m thode et d analyse La barre d tat comprend un champ d tat du syst me et des informations sur la s quence et la m thode charg es En cas de modification apr s leur chargement elles sont identifi es par une ic ne repr sentant un engrenage jaune Sur les modules Agilent s rie 1100 1200 pour CPL un symbole jaune EMF avertissement de maintenance pr dictive signale l utilisateur que les limites d utilisation d finies pour les consomma bles par exemple la lampe sont d pass es Comprendre votre ChemStation Agilent 69 3 70 Acquisition de donn es Diagramme du syst me Si cette option est prise en charge par les instruments d analyse configur s par exemple les modules Agilent s rie 1100 1200 pour CPL ou CPG Agilent s rie 6890 vous pouvez afficher un sch ma graphique de votre syst me ChemStation Un simple coup d il suffit alors v rifier l tat du syst me S l ectionnez l option System Diagram Diagramme de syst me dans le menu View Affichage de la vue Method and Run Control Contr le de m thode et d analyse pour
229. rt oire C WINDOWS PCS BatchReview 1 L entr e par d faut _BatchReview 0 d sactive la fonctionnalit Comprendre votre ChemStation Agilent 225 9 R vision retraitement des donn es et r vision par lot Configuration de lot Un lot est un ensemble de fichiers de donn es s lectionn par l utilisateur trait selon une m thode d finie par celui ci Tous les fichiers de donn es du lot sont trait s via la m me m thode Les tapes de traitement ex cut es lorsqu un nouvel chantillon est charg pour r vision sont s lectionnables int gration identification quantification cr ation de rapports Toutes les analyses d talonnage du lot permettent de cr er une table d tal onnage simple l aide des moyennes des facteurs de r ponse utilis e ult r ieurement en vue de la quantification Table de lots Les analyses sont affich es dans une table de lots que l utilisateur peut configurer e le nombre et le contenu des colonnes de la table peuvent tre sp cifi s e les analyses peuvent tre tri es par index d analyse ordre dans lequel elles ont t acquises quels que soient les autres crit res type d chantillon chantillons de contr le puis talons et chantillons normaux puis par index d analyse dans chaque type d chantillon m thode si plusieurs m thodes ont servi acqu rir les analyses puis par index d analyse dans chaque m thode e Les chantillons les c
230. s Si par exemple votre s quence doit se r talo nner toutes les 6 injections d chantillon param trez l intervalle sur 6 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Tableau 23 S quence de r talonnage cyclique utilisant 3 flacons d finis pour chaque niveau Num ro Nom Sample Type Nom de m thode Nombre Niv UpdRT Upd RF Interval de d chantillon Type d injections eau Mettre Mettre Interval flacon d chantillon jour le jour le le temps de facteur r tention de r ponse 1 Etala Etalonnage M thode A 1 1 Moyenne Moyenne 6 2 Etalb Etalonnage M thode A 1 1 Moyenne Moyenne 6 3 Etalc Etalonnage M thode A 1 1 Moyenne Moyenne 6 5 Eta2a Etalonnage M thode A 1 2 Moyenne Moyenne 6 6 Eta2b Etalonnage M thode A 1 2 Moyenne Moyenne 6 7 Eta2c Etalonnage M thode A 1 2 Moyenne Moyenne 6 10 Echantillon10 Echantillon M thode A 6 11 Echantillon11 Echantillon M thode 6 12 Echantillon12 Echantillon M thode A 6 13 Echantillon13 Echantillon M thode A 6 14 Echantillon14 Echantillon M thode 6 L ordre d ex cution est le suivant Vial 1 Calla Flacon 1 Etala Vial 5 Cal2a Flacon 5 Eta2a 6 injections partir du flacon 10 Sample10 Echantillon10 Vial 2 Cal1b Flacon 2 Etalb Via 6 Cal2b Flacon 6 Eta2b 6 injections partir du flacon 11 Sample11 Echantillon11 Vial 3 Callc Flacon 3 Etalc Vial 7 Cal2c Flacon 7 Eta2c 6 injections partir du flacon 12
231. s 262 d finitions g n rales 261 G graduations 74 groupage 88 H hauteur de rejet 111 112 l IC 271 informations sur les m thodes 46 int gration automatique 114 int gration manuelle 116 int gration tangentielle 100 int gration graduations 74 intervalle de confiance 271 L largeur de pic initiale 111 largeur de pic la hauteur x 264 tangente 264 ligne de base initiale 77 78 limites quantitatives 158 liste de v rification de l ex cution 48 M m thode ex cution 56 modifier 53 r pertoire 55 m thodes Comprendre votre ChemStation Agilent enregistr es 49 mod le de s quence 174 modules d valuation des donn es 12 modules d instruments 12 moments statistiques 263 mu tiniveau talonnage 158 tiples pics de r f rence 146 tiplicateur 129 mu mu nombre de plateaux 265 norm rapport 131 0 obliquit 263 optimisation de l int gration 113 origine connecter 161 forcer 161 ignorer 161 inclure 161 traitement 161 P p n tration de la ligne de base 97 performances d finition des tests 262 personnaliser rapports 26 pic de solvant 109 pic n gatif 80 pic fen tre de temps de r tention 143 hauteur 126 quantification 122 146 r ponse 146 289 Index pics de r f rence multiples 146 Pics non attribu s 105 pic sym trie 258 ilotage de l instrument 46 T plusieurs niveaux s quences cycliques 202 pond ration lin aire 162 points d
232. s de la r vision par lot proprement dite Durant le chargement d un lot l analyste doit uniquement s lectionner la m thode utiliser pour ce lot puis choisir les diff rents fichiers de donn es analyser Il peut v rifier l exacti tude de l talonnage les performances de l instrument et les int grations effec tu es avant d approuver les r sultats Les param tres d int gration de chromatogramme modifi s peuvent tre enregistr s avec le fichier de donn es afin de garantir la tra abilit des donn es Cet environnement interactif donne galement acc s toutes les autres fonctions d analyse de donn es tel les que la puret des pics la recherche en biblioth que etc La r vision par lot utilise les m mes registres d analyse de donn es ChromReg et Chromkes que l analyse de donn es standard Par cons quent cette fonction ne doit pas tre utilis e dans une session en ligne en cours d analyse Comprendre votre ChemStation Agilent R vision retraitement des donn es et r vision par lot 9 Activation de la fonctionnalit de r vision par lot avec l option d int gration ChemStation OpenLAB Lorsque l option d int gration ChemStation OpenLAB est install e la fonction de r vision par lot n est pas disponible par d faut Afin de pouvoir utiliser la r vision par lot cette fonctionnalit doit tre activ e par une entr e dans la section PCS du fichier Chemstation ini Ce fichier se trouve dans le r pe
233. s emplacements de s quences mod les de s quences l arborescence de s lection de l Explorateur l aide de l onglet Chemins de la bo te de dialogue Pr f rences Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Bo te de dialogue Preferences Pr f rences Onglet Sequence S quence Dans l onglet Sequence S quence l utilisateur a le choix entre deux mod les de stockage des donn es Ces modes d finissent le stockage des donn es de s quence dans ChemStation Unique Folder Creation ON Mode Cr ation de dossiers uniques activ Ce mode de stockage des donn es tablit un lien solide et permanent entre les donn es brutes et la m thode Chaque fichier de donn es qu il soit acquis dans une s quence ou lors d une analyse simple est reli deux m thodes au minimum la m thode utilis e pour l acquisition des donn es et celle utilis e pour l analyse des donn es Les donn es de s quence sont enregistr es dans un conteneur de donn es de s quence portant un nom de conteneur de s quence d fini Il est possible de sp cifier des conventions de noms mod les de noms pour ces conteneurs de s quence dans l onglet Sequence S quence de la bo te de dialogue Preferen ces Pr f rences Si aucun mod le de nom n est sp cifi la d finition de nom de s quence par d faut est utilis e L onglet Sequence S quence est utilis exclusivement pour l acquisition de donn es et n est donc pr sen
234. s les rapports corrects 138 Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 R gles de correspondance des pics Les r gles suivantes concernent la proc dure de correspondance des pics si un pic d chantillon se situe dans la fen tre de correspondance d un pic de composant provenant de la table d talonnage il adopte les attributs de ce composant si plusieurs pics d chantillon se situent dans la fen tre de correspondance le pic le plus proche du temps de r tention migration pr vu est identifi comme ce composant si un pic correspond une r f rence ou un talon interne le plus grand pic de la fen tre est identifi comme ce composant si des qualificateurs de pic sont galement utilis s le rapport de pic doit tre associ la fen tre de correspondance des pics pour identifier le pic de composant si le pic correspond un pic de qualification le pic dont les mesures sont les plus proches du pic principal du compos est identifi et si un pic d chantillon ne se situe pas dans une fen tre de correspondance il est r pertori dans les composants inconnus Comprendre votre ChemStation Agilent 139 6 Identification des pics Types d identification des pics Vous pouvez utiliser diff rentes techniques pour tablir la correspondance entre les pics d chantillon et ceux de la table d talonnage du logiciel ChemsS tation Temps de r tention migration absolu Le temps
235. s sont appel s ADC1 MTH et ADC2 MTH DAMETHOD REG Pour l valuation des donn es LALST REG Contient les param tres de l chantillonneur automatique Agilent s rie 1100 1200 lorsqu un syst me CPL modulaire classique est configur Les fichiers de m thodes des autres modules Agilent s rie 1100 1200 suivent les m mes conventions Ixxx1 reg o xxx correspond l acronyme du module AgilentSamplerDriver Contient les param tres de l chantillonneur automatique 1 RapidControl xxx x Agilent s rie 1100 1200 lorsqu un syst me CPL modulaire est ml configur Il existe des fichiers xml diff rents pour chaque l ment des param tres indiqu par l l ment xxx dans le nom de fichier Des fichiers xml semblables sont disponibles pour les autres modules Comprendre votre ChemStation Agilent 55 2 M thodes Pendant l ex cution d une m thode Les parties de la m thode ex cuter au d marrage d une analyse sont indi qu s dans la bo te de dialogue Run Time Checklist Liste de contr le d ana lyse La liste de contr le d analyse comporte huit l ments e commande ou macro pr analyse e acquisition de donn es e analyse de donn es standard e m thode d analyse du second signal GC uniquement e analyse de donn es personnalis e e enregistrement des donn es BPL e commande ou macro post analyse e enregistrement d une copie de la m thode avec les donn es RUN M Lors de l ex cution d une
236. se et diff rents param tres d valuation La ChemStation propose deux modes de stockage des donn es pour vous per mettre de choisir le mod le adapt votre processus de traitement Ces modes ont une influence sur l utilisation de la s quence e Mode Cr ation de dossiers uniques activ e Mode Cr ation de dossiers uniques d sactiv Pour des raisons de coh rence des donn es d chantillons le mode Cr ation de dossiers uniques activ utilise les s quences comme des mod les de s quence qui permettent de r p ter l acquisition ces mod les ne sont toute fois pas utilis s lors d un retraitement dans la vue Contr le de m thode et d analyse Un conteneur de donn es de s quence comportant tous les fichiers correspondants est cr lors de l ex cution d un mod le de s quence Un nou veau conteneur de donn es de s quence est cr chaque r utilisation d un mod le Le mode Cr ation de dossiers uniques d sactiv permet de stocker toutes les donn es dans un m me r pertoire tant donn que les fichiers s de s q uences ne sont pas utilis s comme mod les de s quences la r ex cution d une s quence risque d craser les donn es actuelles si le r pertoire de donn es n est pas modifi par l utilisateur Les s quences mod les de s quences disponibles s sont affich s dans l Explorateur ChemStation Pour y acc der rapidement et facilement vous pouvez ajouter d autre
237. ser sur le postulat que l chantillon s lectionn est bien repr sentatif de toutes les donn es Moyenne d chantillon M La valeur moyenne M d un chantillon al atoire constitu de N mesures est calcul e partir de cet ensemble limit de N valeurs uniques X observ es index l aide d un compteur cons cutif i sur la base de la formule suivante N nombre d observations discr tes X valeur des observations discr tes index es par i cart type d chantillon S Prenons un chantillon al atoire de taille N L cart type S de l chantillon de taille finie s lectionn et extrait de la population globale de donn es est d t ermin par Comprendre votre ChemStation Agilent 269 11 Evaluation de l aptitude du syst me e 4 M isl S N 1 Deux points diff rencient l cart type d chantillon S de l cart type pour la totalit de la population s e la place de la valeur moyenne r elle seule la valeur moyenne d chant illon M est utilis e et e la division s effectue par N 1 au lieu de N cart type relatif ETR USP L cart type relatif se d finit ainsi S RSD 100 M cart type de la moyenne Sm Prenons M en tant que moyenne d chantillon et S en tant qu cart type de l chantillon ou N 1 L cart type Sy de la moyenne d chantillon M est d f ini par S Diz M JN Prenons un exemple afin d illustrer notr
238. siens 92 Attribution de la ligne de base 95 Construction de la ligne de base par d faut 95 Le d but de la ligne de base 96 Graduations 96 La fin de la ligne de base 96 P n tration de la ligne de base 97 che Agilent Technologies n 4 72 Int gration Rapport pic vall e 98 Int gration tangentielle 100 Pics non attribu s 105 Codes de s paration des pics 105 Mesure d aire de pic 108 D termination de l aire 108 Unit s et facteurs de conversion 110 v nements d int gration 111 Ev nements initiaux 111 v nements programm s 114 Int gration automatique 114 Int gration manuelle 116 Ce chapitre d crit les principes de l int gration des algorithmes d int gration de la ChemStation Il d crit l algorithme d int gration l int gration et l int gration manuelle Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Qu est ce que l int gration L int gration identifie les pics dans un signal et calcule leur taille L int gration est une tape indispensable pour e la quantification e les calculs de puret des pics ChemStations pour les syst mes LC 3D CE CE MS et LC MS uniquement et e la recherche de biblioth que spectrale ChemStation pour les syst mes LC 3D CE CE MS et LC MS uniquement Comprendre votre ChemStation Agilent 73 4 int gration Description 74 Lorsqu un signal est int gr le logiciel identifie les temps de d but et de fin de chaque pic et marque ces p
239. sont galement calcul es Si la pente et la courbure sont toutes deux inf rieures au seuil deux aires somm es sont ajout es et compar es la ligne de base pr c dente Si la nouvelle valeur est inf rieure la ligne de base pr c dente cette nouvelle valeur remplace imm diatement la pr c dente Si la nouvelle valeur est sup rieure la pr c dente elle est enregistr e en tant que valeur possible de nouvelle ligne de base et confirm e si une ou plusieurs valeurs sont confor mes aux crit res de pente et de lin arit de la courbure Cette derni re limita tion n est pas appliqu e si les pics n gatifs sont autoris s Pendant le suivi de la ligne de base un contr le doit galement tre effectu pour d tecter les sol vants mont e rapide Ceux ci peuvent tre trop rapides pour la d tection de front montant Au moment o la pente montante est confirm e le crit re de solvant peut ne plus tre valide A la premi re occurrence le premier point de donn es est sur la ligne de base Il est remplac par la moyenne sur 2 T si le signal est sur la ligne de base La ligne de base est ensuite red finie chaque p riode T voir Figure 4 page 79 Identification des points cardinaux d un pic L int grateur d termine qu un pic pourrait d buter lorsque les points de ligne de base potentielle se situent hors de l enveloppe de la ligne de base et que la courbure de la ligne de base d passe une certaine valeur d f
240. stiques chromatographiques d lect roph rogramme d termin es par l analyse d un talon bien d fini L identification de ces composants est une tape n cessaire dans la quantifica tion si la m thode d analyse a recours la quantification Les caract ristiques du signal de chaque composant concern sont stock es dans la table d talonn age de la m thode L objectif de la proc dure d identification des pics vise comparer chaque pic du signal aux pics stock s dans la table d talonnage La table d talonnage contient les temps de r tention migration pr vus pour les composants concern s Un pic correspondant au temps de r tent ion migration d un pic dans la table d talonnage re oit les attributs de ce composant par exemple nom et facteur de r ponse Les pics qui ne correspon dent pas ceux de la table d talonnage sont class s dans la cat gorie des pics inconnus Cette proc dure est contr l e par e le temps de r tention migration de la table d talonnage pour les pics d sig n s comme pics de r f rence e les fen tres de temps de r tention migration sp cifi es pour les pics de r f rence e les temps de r tention migration dans la table d talonnage pour les pics talonn s qui ne sont pas des pics de r f rence e la fen tre de temps de r tention migration sp cifi e pour ces pics normaux pas de r f rence et e la pr sence de tout pic de qualification suppl mentaire dan
241. t Les chantillons sont encadr s par des talonnages pr chantillon et post chantillon L valuation a lieu apr s l analyse du dernier talon de l encadrement Les donn es d talonnage existantes sont remplac es par les r sultats de l analyse d talonnage du d but de l encadrement La moyenne des talonnages de fin de l encadrement est tablie sur celle de la table d talonn age Comprendre votre ChemStation Agilent 197 8 Automatisation Interval Intervalle L intervalle d termine la fr quence d un talonnage lors d une s quence Cette fr quence correspond au nombre d injections d chantillon effectu es avant les injections d talons suivantes Au d but de l analyse un talonnage est ex cut et les r sultats facteurs de r ponse sont saisis dans la table d tal onnage Ces r sultats sont ensuite utilis s dans les calculs quantitatifs ult r ieurs Une fois le nombre d injections sp cifi effectu un autre talonnage est ex cut et les r sultats sont saisis dans la table d talonnage crasant ainsi les r sultats de l analyse d talonnage pr c dente Delta delta Le calcul de la valeur delta delta permet de comparer les facteurs de r p onse d une analyse ceux entr s manuellement dans une table d talonnage La valeur delta est ensuite appliqu e tous les pics talonn s de la table Vous pouvez identifier plusieurs talons internes Les facteurs de r ponse mesur
242. t capacit d int grer au moins 1 000 pics par chromatogramme lectroph ro gramme d finitions de param tres d int gration permettant de r gler ou de modifier les param tres de l int grateur de base pour le rejet d aire le rejet de hau teur la largeur de pic et la sensibilit de pente param tres de contr le de la ligne de base par exemple forcer la ligne de base maintenir la ligne de base ligne de base passant par tous les points vall es ligne de base au niveau de la vall e suivante insertion d une ligne de base arri re partir de la fin du pic en cours contr le de la sommation d aires reconnaissance de pic n gatif Comprendre votre ChemStation Agilent 75 4 76 Int gration traitement d int gration tangentielle incluant les commandes de d finition des pics de solvant et possibilit de d finir des tables d v nements de calculs d int gration tan gentielle sur front ou tra n e individuellement pour tous les signaux de chromatographe d lectroph rogramme possibilit de param tres de correction de ligne de base sans relation au signal commandes de l int grateur d finissant les plages de temps de r tent ion migration pour le bon fonctionnement de l int grateur attribution de l paulement de pic par l utilisation d une d riv e seconde ou degr de calculs de courbure chantillonnage am lior de points de donn es non quidistants pour de meilleures performances a
243. t plateaux et la r solution pour chaque pic Le calcul du pic mi hauteur est diff rent de la formule de calcul de largeur de pic la plus complexe utilis e par l int grateur Les valeurs d efficacit et de r solution sont bas es sur la largeur de pic calcul e L en t te du rapport reprend toutes les informations pertinentes pour la m thode y compris l instrument la colonne capillaire l chantillon et les param tres d acquisi tion Le signal est galement trac e Performance Noise combine le style de rapport Performances avec les calculs des plages de bruits d finies dans la bo te de dialogue Modifier une plage de bruits du menu Conformit du syst me En outre le bruit est cal cul comme six fois l cart type en tant que bruit pic pic et bruit ASTM La d rive et la d viation sont galement d termin es e Performance Extended g n re un rapport tendu reprenant l ensemble des param tres des calculs de performances de pic ainsi que les trac s de cha que pic Ces trac s incluent la ligne de base les tangentes ainsi que les lar geurs de pic aux hauteurs d finies Ce type de rapport n inclut que les pics talonn s En plus des param tres imprim s pour le style de rapport Performances d autres param tres de performances de pic sont d termin s les temps de d but et de fin de pic l asym trie l exc s la largeur de pic le facteur de tra ne USP l intervalle de temps
244. t de corr lation est affich avec le graphique de la courbe d tal onnage Le coefficient de corr lation correspond la racine carr e du coeffi cient de r gression et est une mesure de l ajustement de la courbe d talonnage entre les points de donn es La valeur du coefficient comporte trois d cimales dans la plage 0 000 1 000 o 0 000 pas d ajustement 1 000 ajustement parfait Comprendre votre ChemStation Agilent talonnage 7 Le r sidu relatif est affich pour chaque niveau d talonnage Il est calcul l aide de la formule suivante Response calibrated RESPONSE salculated relRES Peame OO 100 eSponse calculated o relRES r sidu relatif en pourcentage La r ponse calcul e repr sente le point sur la courbe d talonnage L cart type des r sidus qui appara t dans certains rapports et lorsque les courbes et la table d talonnage sont imprim es est calcul l aide de la for mule suivante n 2 ReSP atibratedi ReSPoatcutatedi i ResSTD n 2 o ResSTD cart type du r sidu Respcalibratedi r ponse talonn e pour le point i Respcalculatedi r ponse calcul e pour le point i n nombre de points d talonnage Comprendre votre ChemStation Agilent 155 7 talonnage chantillons inconnus Un chantillon inconnu est un chantillon contenant une quantit inconnue du compos quantifier Pour d terminer la quantit du compos dans u
245. t indiqu e dans la bo te de dialogue Recalibration Settings Param tres de r talonnage Weight Response x 100 l MeasRespons Response Weigh 7 100 Remplacement Les nouvelles valeurs des r ponses remplacent les anciennes valeurs Modes de r talonnage Le logiciel ChemStation propose deux modes de r talonnage Vous pouvez proc der un r talonnage interactif ou un r talonnage automatique pen dant une s quence d analyses automatis e Le r talonnage interactif consiste suivre directement les tapes du processus de r talonnage l aide du logi ciel ChemStation apr s avoir inject un ou plusieurs chantillons talons Le r talonnage s quentiel consiste sp cifier quel moment le r talonnage est effectu mais le r talonnage est ensuite effectu automatiquement par le logiciel Pour plus d informations voir la section R talonnage automatique page 195 Pour plus d informations sur la proc dure de r talonnage l aide du logiciel voir la proc dure correspondante dans l aide en ligne R talonnage des pics non identifi s Vous pouvez r talonner les pics non identifi s de trois fa ons Absence de r talonnage Lorsqu un pic figurant dans la table d talonnage n est pas identifiable dans les r sultats d int gration l talonnage est abandonn Dans le cadre d une s quence la s quence est galement abandonn e Comprendre votre
246. t la m me dilution d talon 212 S quence de r talonnage cyclique utilisant des flacons d talonnage laronde 212 R talonnages cycliques avec utilisation d un flacon diff rent pour chaque talonnage 214 S quence encadrante utilisant des flacons diff rents pour les encadre ments ouvrant et fermant 214 Ce chapitre pr sente les principes de l automatisation Il d crit l utilisation de s quences dans la ChemStation le processus d analyse d une s quence et la personnalisation des s quences Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Qu est ce que l automatisation L automatisation d signe l analyse sans surveillance de plusieurs injections Le composant s quentiel du logiciel ChemStation permet d automatiser l acquisition l valuation des donn es et la g n ration des rapports Comprendre votre ChemStation Agilent 173 Automatisation D finition d une s quence et d un mod le de s quence 174 Une s quence est une s rie d instructions permettant d automatiser l analyse d chantillons Une s quence permet d injecter automatiquement chaque chantillon puis d acqu rir et d analyser les donn es conform ment la m thode sp cifi e pour l chantillon en question Chaque flacon d chantillon utilis dans une s quence peut tre analys avec une m thode analytique diff rente et donc utiliser diff rentes combinaisons de conditions de chromatographie d lect rophor
247. t que pour les syst mes en ligne Le mod le de nom de s quence peut comporter plusieurs sections Le syst me attribue automatiquement un nom au conteneur de donn es de s quence en fonction des sections de mod le de nom de s quence que vous avez s lectionn es Les fichiers de donn es les m thodes le journal de s quence les fichiers s quence_nom s et s quence_nom b de cette s quence pr cise sont enregistr s dans le conteneur des donn es de s quence Le conteneur de donn es de s q uence est cr au d marrage de la s quence Les fichiers de s quence s servent de mod les de s quence Ce concept vous permet d ex cuter les fichiers s quences s plusieurs reprises sans craser les donn es existantes ni modifier les param tres de s quence Si aucun chiffre ni d lai n est utilis dans le mod le de nom de s quence le syst me introduit automatiquement un compteur de mani re viter d craser les donn es Comprendre votre ChemStation Agilent 175 176 Automatisation Lorsque qu un m me mod le de s quence est utilis pour la deuxi me s q uence la troisi me s quence et les s quences suivantes un compteur est ajou t au nom du conteneur de s quences Unique Folder Creation OFF Mode Cr ation de dossiers uniques d sactiv Dans ce mode de stockage des donn es le nom de la m thode repr sente le seul lien entre le fichier de donn es et la m thode utilis e pour l acquisition et
248. t un extrait est stock avec chaque fichier de donn es Les conditions de l instrument d bit temp rature pression composition des solvants pour chromatographes en phase liquide etc peuvent tre enregis tr es et stock es avec chaque fichier de donn es Il est possible d afficher et de repr senter graphiquement ces param tres afin de confirmer la qualit de chaque analyse La nature exacte des param tres enregistr s d pend la fois de la technique et des capacit s de l instrument configur Au moins une fen tre d affichage permet de surveiller en temps r el les don n es acquises par l instrument Ces donn es s affichent en unit s de mesure r elles par exemple en mUA en volts en degr s ou en bars Chaque fen tre affiche des signaux de chromatographie lectrophor se superpos s ou des param tres d instrument par exemple la pression Le syst me offre la possibi lit de r gler et d enregistrer les param tres d affichage par d faut permettant ainsi aux utilisateurs de configurer les param tres voulus comme param tres par d faut de l instrument La fen tre est dot e d un zoom et le curseur permet d afficher tout moment une partie sp cifique du signal d acquisition Comprendre votre ChemStation Agilent Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent 1 Au cours d une analyse toutes les fonctionnalit s du logiciel ChemStation peu vent tre utilis es via la copie hors ligne Lorsque l acquisition
249. talon externe et talon interne Rapport d talon externe Le rapport ESTD r pertorie les r sultats avec les unit s de votre choix ou avec chaque compos comme pourcentage de tous les compos s pr sents La pro c dure d talon externe exige la connaissance pr cise du volume inject relatif Comprendre votre ChemStation Agilent 233 10 Utilisation des rapports ChemStation des talons et des chantillons inconnus La fiabilit du rapport d talon externe est limit e par la reproductibilit de l injection et d autres facteurs susceptibles de varier d un chantillon l autre Rapport d talon interne La proc dure d talon interne permet de surmonter les limites de la proc dure d talon externe Une quantit connue pr cise pas n cessairement la m me de l talon interne est ajout e aux talons et l chantillon inconnu Le temps de r ponse de chaque compos concern est divis par le temps de r ponse n cessaire l talon interne pour fournir un rapport de r ponse Les courbes d talonnage repr sentent un trac de ce rapport de r ponse et du rapport de quantit Ces donn es sont utilis es dans le calcul des r sultats rapport s Ainsi les erreurs de volume d injection ou les l g res modifications apport es au chromatographe l lectroph rogramme et affectant tous les compos s de fa on similaire sont annul es Le rapport ISTD r pertorie les r sultats dans les unit s de votre
250. talonnage automatique Pour plus d informations sur les m thodes et les s quences voir la section Automatisation page 28 et l aide en ligne Configuration du syst me Le syst me instrumental est configur l aide du programme d dition de configuration Il est possible de d finir les instruments leurs adresses GPIB ou LAN les r pertoires utilis s pour les donn es s quences et m thodes et les d finitions de couleur pour le logiciel ChemStation Pour plus d informations consultez les manuels fournis avec les modules ChemStation additionnels Comprendre votre ChemStation Agilent 15 1 16 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Mod le de donn es Le logiciel ChemStation est con u sur un mod le de donn es reposant sur une structure de m moire appel e registre Les registres sont des structures poly valentes capables de contenir des informations et des donn es d analyse la fois pour les valeurs en deux dimensions par exemple temps intensit et en trois dimensions par exemple temps intensit longueur d onde Le logiciel ChemStation fournit des commandes et des fonctions visant construire d velopper extraire les registres et condition de ne pas affec ter les donn es principales modifier ces registres Pour plus d informations consultez le guide de macroprogrammation disponible dans l aide en ligne Conventions de noms de fichiers Conventions de noms Les r gles ci
251. te ront sur les param tres suivants e temps de r tention migration e aire e hauteur e quantit e largeur de pic en fonction du style de rapport reportez vous Styles de rapports page 238 e sym trie Les calculs statistiques ne distinguent pas les diff rents niveaux d talonnage au sein d une s quence faisant appel des m thodes d talonnage multini veaux En d autres termes les param tres tributaires du niveau de concentra tion comme par exemple l aire la hauteur ou la quantit voir la bo te de dialogue Options et limites des statistiques tendues sont tous regroup s quel que soit le niveau d talonnage Les Statistics for Calibration Runs n ont donc aucun int r t pour les m thodes d talonnage multiniveaux dans les s quenc es Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports ChemStation 10 R capitulatif L option Summary permet d imprimer une vue d ensemble de la s rie d chant illons analys s et des m thodes adopt es Si l option R capitulatif est s lect ionn e avec d autres options de r capitulatif de s quence les num ros de page faisant r f rence d autres sections du rapport r capitulatif de s quence seront inclus Il existe deux styles de r capitulatifs Le style Sample Summary pr sente sous forme de tableau les informations rela tives aux analyses d chantillons effectu es dans la s quence ainsi que certai
252. temps entre les points de donn es et nombre de points de don n es au del du pic e moments statistiques MO M4 e largeur de pic mi hauteur calcul e par les m thodes r elle 5 x cart type tangentielle et de tra ne et e les rapports plateaux colonne et plateaux m tre calcul s par les m thodes largeur de pic mi hauteur 5 x cart type tangentielle et statistique Comprendre votre ChemStation Agilent 25 1 26 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Les utilisateurs peuvent d finir leurs propres plages d valuation et limites de bruit pour ces crit res de performances Les valeurs en dehors des limites d f inies par l utilisateur sont indiqu es dans le rapport Pour plus d informations sur les calculs de conformit du syst me voir la sec tion Evaluation de l aptitude du syst me page 249 Rapports r capitulatifs de s quence Les rapports r capitulatifs de s quence sont g n r s apr s une s rie d analy ses automatis es Ils peuvent aller d un bref r sum des chantillons analys s une analyse graphique d taill e de r p tabilit ou de tendances sur des param tres s lectionn s par l utilisateur pour diff rents chantillons analys s par la m me m thode Pour plus d informations sur les rapports r capitulatifs de s quence repor tez vous l aide en ligne et la section Rapport r capitulatif de s quence page 244 Rapports personnalis s
253. terminer l aire et la hauteur du pic final Les r sultats d int gration sont g n r s sous la forme d une liste de r sult ats d int gration Identification et quantification des pics En utilisant les temps de r tention migration et les qualificateurs de pic facultatifs le logiciel identifie les pics en les associant aux composants connus d finis dans la table d talonnage Le logiciel utilise la hauteur ou l aire des pics pour calculer la quantit de chacun des composants d tect s l aide des param tres d talonnage sp c ifi s dans la table d talonnage Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Recherche dans la biblioth que spectrale Logiciels ChemStation pour les syst mes CPL 3D EC EC SM et CPL SM uniquement Pour tous les pics dot s de spectres UV visible une recherche est automatique ment effectu e dans la biblioth que spectrale pr d finie afin d identifier les composants de l chantillon sur la base des spectres UV visible Pour plus d informations reportez vous Comprendre votre module spectral Contr le de la puret des pics logiciels ChemStation pour les syst mes CPL 3D EC EC SM et CPL SM uniquement Vous pouvez calculer le facteur de puret d un pic dot de spectres UV visible et consigner cette valeur dans un registre Pour que la puret des pics soit automatiquement calcul e la fin de chaque analyse comme partie int grante de la m thode cochez la case Check Pur
254. tillon inconnu d pendent du type de quantification Chaque proc dure de calcul utilise l aire du pic ou sa hauteur pour le calcul et g n re un type de rapport diff rent Comprendre votre ChemStation Agilent 123 5 Quantification Facteurs de correction 124 Les calculs de quantification utilisent quatre facteurs de correction le facteur de r ponse absolu le multiplicateur le facteur de dilution et la quantit d chantillon Ces facteurs sont utilis s dans les proc dures d talonnage pour compenser les variations de r ponse du d tecteur aux diff rents composants des chantillons concentrations dilutions d chantillons quantit s d chant illons et pour la conversion d unit s Facteur de r ponse absolu Le facteur de r ponse absolu d un composant d chantillon repr sente la quan tit du composant divis e par l aire ou la hauteur mesur e du pic du compo sant dans l analyse d un m lange talon Le facteur de r ponse absolu qui est utilis par chaque proc dure de calcul talonn e corrige les diff rences de r ponse que le d tecteur pr sente vis vis des diff rents composants d chantillon Multiplicateur Facteur Le multiplicateur est utilis dans chaque formule de calcul pour multiplier le r sultat de chaque composant Le multiplicateur peut tre utilis pour conver tir les unit s exprimant les quantit s de dilution Le facteur de dilution est le nombre par lequel tous les
255. tillons d finies lors de l analyse initiale de l chantillon soit utiliser les donn es d chantillons actualis es en cochant la case Use Sequence Table information puis en entrant les nouvelles donn es dans cette table e Indiquez les actions effectuer en fin de s quence l aide des param tres d shutdown Comprendre votre ChemStation Agilent 177 8 Automatisation e Sp cifiez l utilisation ou non de codes barres dans la s quence ainsi que le traitement d une non concordance de codes barres en partant du principe qu un lecteur de codes barres est install sur le syst me 178 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Table de s quence La table de s quence d termine les m thodes utilis es pour analyser les flacons d chantillon ainsi que l ordre d analyse des flacons Cette table com porte galement des informations sur chaque chantillon parmi lesquelles le nom les param tres de quantification et les param tres de r talonnage Les instruments qui prennent en charge le double chantillonnage CPG sont r pertori s dans la zone de groupe Injector Injecteur S lectionnez Front Avant ou Back Arri re pour afficher les lignes de la table de s quence ainsi que l tat d ex cution en cours de l injecteur concern Pour obtenir la description des colonnes figurant dans cette table et conna tre leur mode d interaction avec les informations stock es dans la m thode repo
256. tions dans les deux sens et d ex cuter des fonctions distance Comprendre votre ChemStation Agilent 27 1 28 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent Personnalisation Des commandes puissantes permettent de personnaliser la ChemStation Ces commandes peuvent tre group es de mani re ex cuter automatiquement une fonction sp cifique le groupe ainsi constitu s appelle une macro Les utilisateurs qui cr ent des macros peuvent d finir leurs propres variables int grer des constructions conditionnelles ou it ratives effectuer des E S phy siques gestion de fichiers et interaction de l utilisateur imbriquer leurs macros et programmer et changer des donn es avec d autres applications MS DOS ou Microsoft Windows Pour plus d informations sur la personnalisation reportez vous au Guide de programmation de macro disponible dans le syst me d aide en ligne Automatisation ChemStation peut ex cuter des s quences multim thodes Il est possible de d finir le jeu de param tres de s quence de mani re utili ser des fichiers g n r s automatiquement ou des fichiers num rot s s quent iellement avec un pr fixe de 15 caract res maximum d fini par l utilisateur Vous pouvez non seulement choisir d ex cuter des analyses compl tes ou des s quences de retraitement de donn es uniquement mais galement s lect ionner une s rie de commandes d arr t propres une technique ou une macro d arr
257. tisation S quences d talonnage cyclique avec encadrement Dans une s quence d talonnage cyclique avec encadrement la table d tal onnage utilis e pour calculer les r sultats quantitatifs inconnus est g n r e en tablissant la moyenne des r sultats de l talonnage en cours avec ceux de l talonnage pr c dent Cette nouvelle table d talonnage donne une repr s entation plus pr cise de la r ponse de l instrument au moment de l analyse de l chantillon Exemple Consid rons la situation suivante e La r ponse de l instrument a d riv e Trois injections d un m lange identique de deux compos s sont sp cifi es e Deux injections sont sp cifi es en tant qu talons et une injection en tant qu chantillon e Les premi re et troisi me injections sont des talons e La deuxi me injection est un chantillon Afin d obtenir un r sultat quantitatif pr cis pour l injection 2 l chantillon vous devez interpoler les deux talons voir la figure Ce processus est appel encadrement 208 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Instrument Temps d riv pes C C talonnage 1 chantillon talonnage 2 Figure 41 Encadrement Fonctionnement d une s quence encadrante e Les premiers flacons d talonnage sont analys s e Les flacons d chantillon sont analys s e Les flacons d talonnage suivants sont analys s e La table d talonnage est cr e
258. total de tous les produits Response RF pour tous les pics y compris le pic x M repr sente le multiplicateur D repr sente le facteur de dilution Le multiplicateur et le facteur de dilution sont extraits des Calibration Settings dans la bo te de dialogue Sample Information ou la table de s quence Comprendre votre ChemStation Agilent 131 5 Quantification Calcul ISTD 132 La proc dure ISTD limine les inconv nients de la m thode ESTD en ajoutant une quantit connue d un composant servant de facteur de normalisation Ce composant l talon interne est ajout la fois aux talons et aux chantillons inconnus Le logiciel se sert des facteurs de r ponse appropri s obtenus d un talonnage pr c dent enregistr dans la m thode A l aide de la concentration de l talon interne et des aires ou hauteurs des pics de l analyse le logiciel calcule la concentration des composants Le compos utilis comme talon interne doit tre similaire tant du point de vue chimique qu au niveau du temps de r tention migration au compos tal onn mais doit s en distinguer chromatographiquement Tableau 13 Proc dure ISTD Avantages Inconv nients La variation de quantit inject e n est pas L talon interne doit tre ajout chaque primordiale chantillon La d rive d instrument est compens e par l talon interne Les effets dus la pr paration de l chantillon sont r duits si le comportement
259. tres d talonnage ou Calibration Curve Courbe d talonn age RF Amount Ratio X Response Ratio Rapport de r ponse RFx Rapport de quantit Figure 29 Rapport de quantit Comprendre votre ChemStation Agilent 133 5 Quantification Analyse 2 Echantillon inconnu 1 La r ponse du compos dans l chantillon inconnu est divis e par la r p onse de l talon interne dans l chantillon inconnu pour donner un rapport de r ponse pour ce dernier 2 Un rapport de quantit pour l chantillon inconnu est calcul l aide de l quation de la courbe de r gression d termin e l tape 2 ci dessus et de la quantit r elle d ISTD dans l chantillon Calcul ISTD des pics talonn s Les quations permettant de calculer la quantit r elle d un composant tal onn x pour un talonnage un seul niveau sont Response Response Ratio Response srp Actual Amount of x RF Response Ratio Actual Amount of ISTD M D o RF repr sente le facteur de r ponse pour le compos x La quantit r elle Actual Amt d ISTD repr sente la valeur entr e dans la bo te de dialogue Param tres d talonnage ou Informations d chantillon pour l talon interne ajout l chantillon inconnu M repr sente le multiplicateur D repr sente le facteur de dilution Si le type de rapport ISTD est s lectionn l quation suivante permet de cal culer la quantit relative de
260. u retraitement de la s quence Pour utiliser la m thode du conteneur de s quences actualis e lors de l acquisition de donn es copiez la m thode concern e partir du conteneur de donn es de s q uence dans l un des chemins d finis pour la m thode ou utilisez l option save as pour enregistrer la m thode mise jour en tant que m thode de r f rence La m thode nouvelle mise jour est alors disponible en tant que m t hode de r f rence dans la vue des m thodes de l Explorateur ChemSta tion Comprendre votre ChemStation Agilent 49 2 50 M thodes e De plus deux copies de la m thode utilis e pour analyser un chantillon sont enregistr es avec les fichiers de donn es ACQ M et DA M ACQ M cor respond la m thode d acquisition DA M correspond la m thode d ana lyse de donn es DA M est la m thode charg e avec le fichier de donn es si vous avez coch la case Load DA method from data file sous l onglet Signal Options de la bo te de dialogue Preferences Les modifications apport es cette m thode v nements d int gration programm s par exemple sont propres au fichier de donn es associ et ne sont pas r percut es dans la m thode de s quence ou dans la m thode de r f rence La table de navigation permet de mettre jour des m thodes individuelles et des m thodes de s quence avec leur m thode de s quence ou de r f rence cor respondante en cliquant avec le
261. uantit peut appara tre dans le rapport ou tre utilis e dans d autres calculs requis par les valeurs Multiplier Mul tiplicateur Dilution Factor Facteur de dilution ou Sample Amount Quantit d chantillon Si le rapport d talonnage externe est s lectionn l quation permettant de calculer la quantit absolue d un composant x est Absolute Amt ofx Response RF M D o Responsex repr sente la r ponse du pic x RFx repr sente le facteur de r ponse du composant x calcul comme suit Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Amount RF Response M repr sente le multiplicateur D repr sente le facteur de dilution R ponse RF x R ponse x Y amam Quantit x Quantit Figure 28 Facteur de r ponse Le multiplicateur et le facteur de dilution sont lus dans les Calibration Settings ou les Sample Information Si le rapport ESTD est s lectionn et que la quantit d chantillon est diff r ente de z ro la quantit relative d un composant x est calcul e comme suit Relve Amtofr Absolute Amt of x 100 Sample Amount o La Quantit absolue de x est calcul e comme indiqu ci dessus dans le calcul d talonnage externe Comprendre votre ChemStation Agilent 129 5 Quantification La quantit d chantillon est obtenue partir de la zone Sample Information Informations d chantillon ou de la bo te de dialogue Calibration Settings
262. uatre composants e informations sur la m thode e commande des instruments e analyse de donn es e liste de v rification de l ex cution Informations sur les m thodes Cette section fournit des informations descriptives sur les m thodes Pilotage de l instrument Configure les param tres qui commandent l instrument ou ses composants Avec un instrument de CPL certains param tres composition de la phase mobile d bit volume d injection longueur d onde du d tecteur etc comman dent la pompe l injecteur et le d tecteur Avec un instrument de CPG des param tres tels que la temp rature ou la pression d injection et le d bit de colonne remplie commandent l instrument Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Traitement des donn es Cette fonctionnalit permet de d finir les param tres qui r gissent le traite ment des donn es D tails des signaux D finit les signaux et leurs propri t s utilis es pour l valuation des donn es v nements d int gration Configure les v nements programm s qui interviennent des temps de r t ention migration sp cifiques d un chromatogramme lectrophor gramme Ces v nements programm s permettent de modifier le mode d int gration du signal Identification des pics Configure les param tres de traitement des donn es associ s l identification des pics dans le chromatogramme l lectrophor gramme Quantification des pics C
263. umente les tapes de d veloppement et de test conduites dans le cadre du cycle de d veloppem ent Le processus de d veloppement est conforme la norme ISO 9001 Il est document avec les protocoles de revalidation sur site dans leRecueil de vali dation Agilent ChemStation pour la chromatographie liquide Sp cification et utilisation des m thodes e M thodes globales la sp cification compl te des instruments et de l ana lyse des donn es est stock e un emplacement unique Ces m thodes com portent des sp cifications de plages pour des compos s individuels afin de garantir que les r sultats de quantification ne sont pas appliqu s l ext r ieur de la plage d talonnage e Je journal d historique de modification des m thodes permet d enregistrer automatiquement les modifications apport es une m thode valid e ainsi que la date de ces modifications Il est galement possible d ajouter en com mentaire la justification de la modification dans le journal d historique L historique des modifications est automatiquement enregistr au format binaire comme faisant partie int grante de la m thode Afin d viter tout acc s non autoris aux enregistrements cet historique est prot g par le sch ma d acc s des utilisateurs d crit ci dessous L historique des modifica tions peut tre affich et imprim e Dans chaque m thode il est possible de d finir des limites pour chaque compos pour un certain nombre
264. uments ainsi qu une pr sentation graphique anim e de l tat de chaque analyse en cours Il est possible de d sactiver le diagramme d instrument s il n est pas n cessaire afin d conomiser de la m moire et d autres ressources Windows Comprendre votre ChemStation Agilent 19 1 20 Fonctionnalit s de la ChemStation Agilent La vue Data Analysis Analyse de donn es ajoute la barre d outils standard des modes d analyse de donn es sp cifiques int gration talonnage cr ation de rapports annotations comparaison de signaux etc ainsi que des modes sp cialis s si les modules correspondants sont install s Chacun de ces modes d analyse est associ des outils sp cifiques La vue Report Designer Concepteur de rapports permet l utilisateur de configurer graphiquement la mise en page d un style de rapport sp cifique selon un processus graphique orient objet Elle utilise galement un ensemble de barres d outils sp cifiques pour cette t che Acquisition de donn es Que le logiciel soit en cours d ex cution dans une fen tre active ou r duit sous forme d ic ne l cran indique le temps d analyse coul ainsi que l tat de l instrument qui fait l objet d un contr le et d une mise jour permanents Les transactions effectu es au cours de l analyse y compris les erreurs ainsi que les conditions de l instrument au d but et la fin de l analyse sont enregis tr es dans le journal du syst me don
265. utomatisation Utilisation simultan e d talonnages explicites et cycliques Ce type de s quence comprend la fois des talonnages explicites et cycliques Cette fonction permet de r talonner compl tement la m thode en d but de s quence r talonnage explicite puis de mettre jour l talonnage r talo nnage cyclique au cours de la s quence Deux lignes d talonnage pour chaque niveau d talonnage dans la table de s quence doivent tre sp cifi es Une ligne d talonnage est r serv e l entr e de r talonnage explicite et l autre l entr e de r talonnage cycli que e La table de s quence doit contenir des entr es pour chaque ligne d talonn age De plus tous les flacons de r talonnage cyclique doivent appara tre avant les entr es de r talonnage explicite et les entr es d chantillon Exemple La table de s quence ci dessous illustre une m thode talonn e un niveau SimpRes Elle a t abr g e pour simplifier l exemple Tableau 20 Table de s quence de SIMPREG 1 1 SimpReg 1 talonnage 1 Moyenne Moyenne 3 2 1 SimpReg 1 talonnage 1 Remplac Remplac ement ement 3 2 SimpReg 1 4 3 SimpReg 1 5 4 SimpReg 1 6 5 SimpReg 1 7 6 SimpReg 1 Il existe deux entr es pour le niveau d talonnage simple 206 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 e La premi re ligne d talonnage est destin e au m me niveau mais elle cal cul
266. ve un enregistrement de l analyse Tous les messages d erreur et les changements d tat importants du logiciel ChemStation sont consign s dans le journal Pour les syst mes LC uniquement Contient les courbes d instrument gradients temp rature pression etc le volume d injection et la description du solvant Contient des informations de colonne Pour les syst mes GC il contient galement le volume d injection Comprendre votre ChemStation Agilent 65 3 66 Acquisition de donn es Tableau 7 Fichiers de donn es Nom Description GLPSAVE REG Partie du fichier de donn es int gr e lorsque l option Save GLP Data Enregistrer les donn es BPL est activ e M_INTEV REG Contient les v nements d int gration manuelle La m thode peut tre enregistr e avec les fichiers de r sultats run m Dans ce cas le r pertoire de m thode est enregistr en tant que sous r pertoire du r pertoire de fichiers de donn es l aide de l option Enregistrer la m thode avec les donn es de la liste de v rification de l ex cution Pour les donn es acquises avec la version B 02 01 ou une version ult rieure de la ChemStation chaque dossier de donn es D comporte les deux dossiers de m thodes suivants e m thode d acquisition ACQ M pour chaque fichier de donn es e m thode d analyse de donn es DA M pour chaque fichier de donn es tant donn qu une m thode d acquisition ACQ M a p
267. vec des fichiers de donn es CPL DAD recons truits partir des spectres DAD Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Description g n rale Pour int grer un chromatogramme lectroph rogramme l int grateur 1 d finit la ligne de base initiale 2 surveille et met jour en continu la ligne de base 3 identifie le temps de d but pour un pic et marque ce point avec une gradua tion verticale 4 d termine l emplacement du sommet de chaque pic et imprime le temps de r tention migration 5 identifie le temps de fin du pic et marque ce point avec une graduation ver ticale 6 construit une ligne de base et 7 calcule l aire la hauteur et la largeur de chaque pic Ce processus est contr l par des v nements d int gration Les v nements les plus importants sont les sensibilit de pente initiale largeur de pic aire de rejet et hauteur de rejet le logiciel permet de d finir des valeurs initiales pour ces v nements entre autres Les valeurs initiales prennent effet au d b ut du chromatogramme De plus la fonction d int gration automatique com porte un ensemble d v nements initiaux que vous pouvez optimiser plus avant Dans la plupart des cas les v nements initiaux donnent de bons r sultats d int gration sur la totalit du chromatogramme mais il est parfois souhaita ble de mieux contr ler la progression d une int gration Le logiciel permet de contr ler le mode d int gration
268. vi la pente est la d riv e premi re et la courbure la seconde d riv e L enveloppe de ligne de base peut tre vue comme un c ne dont la pointe se situe au point de donn es en cours Les niveaux d accepta tion sup rieure et inf rieure du c ne sont e pente montante courbure d calage de ligne de base doit tre inf rieur au niveau de seuil e pente montante courbure d calage de ligne de base doit tre plus posi tive c est dire moins n gative que le niveau de seuil Au fur et mesure de l acceptation de nouveaux points de donn es le c ne avance jusqu l apparition d une rupture Pour tre accept comme point de ligne de base un point de donn es doit r p ondre aux conditions suivantes e il doit se trouver l int rieur de l enveloppe de ligne de base d finie Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 e la courbure de la ligne de base au point de donn e d termin e par les fil tres de d rivation doit tre inf rieure une valeur critique d termin e par le r glage de sensibilit de pente en cours Le point de ligne de base initial tabli au d but de l analyse est ensuite r vis continuellement une fr quence d termin e par la largeur du pic pour la moyenne mobile des points de donn es inclus dans l enveloppe de la ligne de base sur une p riode d termin e par la largeur du pic L int grateur suit et r vise p riodiquement la ligne de base pour co

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