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DE4399 Estradiol US 1

1. A Y 2 D D E medi Product information _ 16 Information about other products is available at www demeditec com certified company User s Manual Estradiol sensitive ELISA CE DE4399 96 Wells Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Va 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 1 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 Contents Inhaltsverzeichnis Contenuti Contenido Contenu 1 INTRODUCCI N rs 24 2 FUNDAMENTO DEL ENSAYO 24 3 PRECAUCIONES ie 24 4 COMPONENTES DEL KIT aaisaisiiseeseneinernaean 25 5 MUESTRAS 26 6 PROCEDIMIENTO DE ENSAYO 26 7 VALORESESPERADOS 28 8 CONTROLDEGALIDAD 28 9 CARACTER STICAS DEL ENSAYO 28 10 LIMITACIONES DE USO sissiseeseieeeieeinereeen 29 11 ASPECTOS LEGALES 29 12 REFERENCIAS ii 29 1 INTRODUCTION ii 30 2 PRINCIPE DUTEST 30 3 PRECAUTIONS D UTILISATION 30 4 COMPOSITION DU KIT 31 5 ECHANTILLON i 32 6 R ALISATION DU TEST 32 7 VALEURS ATTENDUES 34 8 CONTROLE DE QUALITE eee 34 9 CARACTERISTIQUES DU TEST 34 10 LIMITES D UTILISATION 35 11 ASPECTS LEGAUX 35 12 REFERENCES ii 35 SYMBOLS USED WITH DEMEDITEC ELISA S 36 Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Ki
2. Tutti i reagenti aperti devono essere magazzinati a 2 8 C micropozzetti devono essere magazzinati a 2 8 C Una volta aperti i pacchi questi devono essere richiusi accuratamente Test kits aperti rimangono attivi per due mesi se magazzinati alle condizioni sopra descritte 4 3 Preparazione dei reagenti Prima dell uso portare tutti i reagenti e il numero necessario di pozzetti a temperatura ambiente Wash Solution Diluire 30 mL Wash Solution concentrata con 1170 mL di acqua deionizzata fino ad un volume finale di 1200 mL La soluzione di lavaggio diluita stabile per 2 settimane a temperatura ambiente 44 Smaltimento del kit Lo smaltimento del kit deve avvenire secondo le regole a norma di legge Informazioni particolareggiate per questo prodotto si trovano nel regolamento di sicurezza capitolo 13 Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany io 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 19 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 4 5 Test kits danneggiati Nel caso di gravi danneggiamenti del kit o dei suoi componenti deve avvenire una dichiarazione scritta alla ditta DEMEDITEC al piu tardi una settimana dopo il ricevimento del kit Componenti danneggiati non dovrebbero essere utilizzati per il test Questi componenti devono essere magazzinati fino ala soluzione del problema Dopo di che essi devono esse
3. chantillons ou des r actifs Une contamination microbienne des chantillons ou des r actifs pourrait fausser les r sultats e L utilisation de ce kit devra tre en accord avec les normes ou recommandations nationales de s curit en vigueur concernant les produits a risque biologique e Ne pas utiliser les r actifs au del de la date d expiration inscrite sur l emballage e Tous les volumes indiqu s doivent tre scrupuleusement respect s comme indiqu dans le protocole exp rimental Seule l utilisation de pipettes calibr es ou d un spectrophotom tre lecteur de micro plaques calibr garantit l obtention de r sultats optimaux ce test e Ne pas m langer ou utiliser des r actifs contenus dans des kits de lots diff rents Il est conseill de ne pas changer les puits de diff rentes plaques m me si celles ci proviennent du m me lot Les kits peuvent avoir t transport s ou stock s diff remment et les caract ristiques de liaison de chaque plaque pourraient ainsi tre modifi es e L elimination des solutions chimiques et des r actifs contenus dans ce kit utilis s ou non doit tre en accord avec la r glementation nationale en vigueur concernant l limination des d chets risque biologique e La fiche de s curit concernant ce produit peut tre obtenue en contactant directement Demeditec Diagnostics GmbH Les fiches de s curit sont en accord avec les directives europ ennes EU 91 155 EC Demeditec
4. partir de la moyenne la plus faible de deux d viations standards de l analyse de vingt r plicats du Standard 0 et a t mesur e lt 1 399 pg mL 9 4 Precision Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise 9 5 Recouvrement Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise 9 6 Lin arit Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 34 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 10 LIMITES D UTILISATION 10 1 Substances parasites Toute utilisation impropre des chantillons ou toute modification du test peut influencer les r sultats 10 2 Drogues parasites Jusqu a pr sent nous ne connaissons aucune substance drogues capable d influencer la mesure d oestradiol dans un chantillon 10 3 Effet de surdosage Aucun effet de surdose n a t observ avec ce test 11 ASPECTS LEGAUX 11 1 Fiabilit des r sultats Ce test doit tre exactement utilis selon les instructions d utilisation du fabricant De plus les utilisateurs doivent strictement respecter les r gles de la bonne pratique de laboratoire ou autres lois nationales Cela est sp cialement le cas pour l utilisation des r actifs contr les Pour chaque test il est important d inclure un nombre suffisant de contr les afin d
5. 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 11 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 i De sc 1 EINLEITUNG Der DEMEDITEC Estradiol sensitive ELISA wird zur quantitativen Bestimmung von Estradiol in Serum und Plasma eingesetzt Nur f r In vitro Diagnostik 2 TESTPRINZIP Der DEMEDITEC Estradiol sensitive ELISA ist ein Festphasen Enzymimmunoassay der auf dem Prinzip der kompetetiven Bindung basiert Die Wells der Mikrotiterplatten sind mit einem polyklonalen Antik rper beschichtet der gegen eine Antik rper Bindungsstelle des Estradiol Molek ls gerichtet ist Die Proben werden in die beschichteten Wells gegeben und zusammen mit einem Estradiol Enzymkonjugat inkubiert W hrend der Inkubation konkurriert das Estradiol aus der Probe mit dem Estradiol Enzymkonjugat um die freien Bindungsstellen auf den beschichteten Wells Das nicht gebundene Konjugat wird durch Waschen der Wells entfernt Anschlie end wird die Substratl sung zugegeben und die Farbentwicklung nach einer definierten Zeit gestoppt Die Intensit t der gebildeten Farbe ist umgekehrt proportional der Estradiol Konzentration in der Probe Die Extinktion wird bei 450 nm mit einem Mikrotiterplattenleser gemessen 3 VORSICHTSMABNAHMEN e Dieser Kit ist nur zum in vitro diagnostischen Gebrauch geeignet e Informationen zu im Kit enthaltenen gef hrlichen Substanzen entnehmen Sie bitte dem Materialsi
6. Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany io 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 30 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 4 COMPOSITION DU KIT 4 1 Contenu du kit 1 Microtiterwells Plaques de micro titratio 12x8 d tacher barrettes plaques de 96 puits Les puits sont recouverts avec un anticorps anti oestradiol polyclonal 2 Standard Standard 0 4 5 flacons 1 mL pr t l emploi Concentrations 0 3 10 50 200 pg mL Conversion 1 pg mL 3 67 pmol L Contient 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate comme agent de conservation 3 Sample Diluent Solution pour dilution de l chantillon 1 flacon x mL pr t l emploi contient 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate comme agent de conservation 4 Enzyme Conjugate Conjugu enzymatique 1 flacon 25 mL pr t l emploi oestradiol conjugu e la HRP contient 0 03 de Proclin 0 015 BND et 0 010 MIT comme agent de conservation 5 Substrate Solution Solution substrat 1 flacon 25 mL pr t l emploi T tram thylbenzidine TMB 6 Stop Solution Solution d arr t 1 flacon 14 mL pr t a l emploi contient 1N acide solution Eviter les contacts avec la solution stop Cela pourrait engendrer irritations ou br lures de la peau 7 Wash Solution Solution de lavage 1 flacon concentr 40X voir Pr paration des r
7. Origin of oestrogen in normal men and women with testicular feminisation J Clin Endcrinol Metabol 49 905 1979 Peckham M J and McElwain T J Testicular tumours J Clin Endocrinol Metab 4 665 692 1975 Taubert H d and Dericks Tan J s E Induction ofr ovulation by clomiphene citrate in combination with high doses of oestrogens or nasal application of LH RH In Ovulation in the Human Eds Crosignandi P G and Mishell D R pp 265 73 Academic Press New York 1976 Fishel S B Edwards R G Purdy J M Steptoe P C Webster J Walters E cohen J Fehilly C Hewitt J and Rowland G Implantation abortion and birth after in vitro fertilisation using the natural menstrual cycle or follicular stimulation with clomiphene citrate and human menopausal gonadotropin J In Vitro Fertil Embryo Transfer 1 24 28 1985 Wramsby H Sundstorm P and Leidholm P Pregnancy rate in relation to number of cleaved eggs replaced after in vitro fertilisation of stimulating cycles monitored by serum levels of oestradiol and progesterone as sole index Human Reproduction 2 325 28 1987 Ratcliff W A Carter G D et al Estradiol assays applications and guidelines for the provision of clinical biochemistry service Ann Clin Biochem 25 466 483 1988 Tietz N W Textbook of Clinical Chemistry Saunders 1986 Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany yee 4 07 09 Phone
8. Solution Solu o de lavagem Vaskebuffer Tv tt l sning AldAupa TAUOEWG 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1 N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI Sample Diluent Conjugate Diluent Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Version 4 07 09 JS Updated 090818 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Email info demeditec de e http www demeditec com 37
9. chets relatifs au kit doit tre r alis e selon les r gles nationales en vigueur Les informations sp cifiques au kit sont pr sent es dans la fiche de s curit voir chapitre 13 Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 31 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 4 5 Kits endommag s Dans le cas de dommages importants survenus au kit ou ses composants informer la DEMEDITEC au plus tard une semaine apr s r ception du kit Les composants endommag s ne doivent pas tre utilis s pour le test Ils doivent tre stock s jusqu a ce qu une solution adapt e ait t trouv e Apr s cela ils doivent tre limin s selon les directives officielles en vigueur 5 ECHANTILLON S rum ou plasma EDTA H parine ou citrate plasma peuvent tre utilis s pour ce test Ne pas utiliser des chantillons h molys s ict riques ou lip miques Remarque Les chantillons contenant de l azide de sodium ne doivent pas tre utilis s pour ce test 5 1 Pr l vement et pr paration des chantillons S rum Pr lever le sang par ponction veineuse ex Sarstedt Monovette 02 1388 001 laisser coaguler puis s parer le s rum par centrifugation temp rature ambiante Ne pas centrifuger avant que la coagulation ne soit termin e Les patients sous traitement ant
10. concentraci n de Estradiol en la muestra Despu s de la adici n de la soluci n sustrato la intensidad de color desarrollado es inversamente proporcional a la concentraci n de Estradiol en la muestra del paciente 3 PRECAUCIONES e Este kit es solamente para diagn stico in vitro e Para obtener informaci n de las sustancias peligrosas incluidas en el kit por favor mirar las hojas de los datos de seguridad del material e Todos los reactivos en este kit de ensayo que contienen suero o plasma humano se han ensayado y confirmado ser negativos para HIV I II HBsAg y HCV mediante procedimientos aprobados por la FDA Sin embargo todos los reactivos deben ser tratados tanto en su uso como dispensaci n como potencialmente biopeligrosos e Evitar contacto con Stop Solution que contiene HSO 0 5 M Puede provocar irritaci n y quemaduras en la piel e Nunca pipetear con la boca y evitar el contacto de los reactivos y las muestras con la piel y con membranas mucosas e No fumar comer beber o usar cosm ticos en reas donde las muestras o los reactivos del kit est n siendo usados e Usar guantes de l tex cuando se utilicen las muestras y los reactivos La contaminaci n microbiana de los reactivos o las muestras puede dar resultados err neos e El manejo debe realizarse de acuerdo a los procedimientos definidos por las gu as o regulaci n nacionales de seguridad de sustancias biopeligrosas e No utilizar los reactivos despu s de su fecha
11. deve includere una curva standard 1 2 O O N 9 Fissare i pozzetti necessari sul supporto Pipettare 100 uL di ogni Standard Control e campione nei pozzetti cambiando ogni volta la punta monouso Pipettare 200 uL Enzyme Conjugate in ogni pozzetto Agitare bene per 10 secondi E molto importante raggiungere un completo mescolamento Incubare per 4 ore a temperatura ambiente Rovesciare la piastra per vuotare i pozzetti Lavare i pozzetti 3 volte con Wash Solution diluita 400 uL in ogni pozzetto Rimuovere le gocce d acqua rimanenti rivoltando la piastra su carta assorbente Importante La sensibilit e la precisazione di questo kit sono fortemente influenzate dal corretto eseguimento del lavaggio Aggiungere 200 uL della Substrate Solution ad ogni pozzetto Incubare per 30 minuti a temperatura ambiente Fermare la reazione enzimatica aggiungendo 100 uL della Stop Solution ad ogni pozzetto Determinare la densit ottica a 450 10 nm con un fotometro per microtiter piastre entro 10 minuti dopo l aggiunta della Stop Solution 6 3 Rilevamento dei risultati _ Determinare i valori medi della densit ottica per ogni set di standard controlli e campioni Costruire una curva standard riportare i valori medi della densit ottica OD di ogni standard contro la rispettiva concentrazione dove i valori delle OD si devono trovare sull asse verticale Y e le concentrazioni sull asse orizzontale X Utilizzando il valore
12. diluito con il Sample Diluent e nuovamente determinato Della diluizione deve essere per tenuto conto Esempio a diluizione 1 10 10 uL siero 90 uL Sample Diluent agitare bene b diluizione 1 100 10 uL della diluizione a 90 uL Sample Diluent agitare bene 6 ATTUAZIONE DEL TEST 6 1 Indicazioni generali Tutti i reagenti e i campioni devono essere portati a temperatura ambiente e ben mescolati prima dell uso Evitare la formazione di schiume Una volta iniziato il procedimento del test questo deve essere portato alla fine senza interruzione Per ogni componente standard controllo o campione necessario utilizzare una nuova punta monouso per evitare reazioni incrociate La densit ottica dipende dal tempo d incubazione e dalla temperatura Perci si rende necessario di preparare tutti i reagenti di aprire i tappi dei flaconi e di appostare tutti i pozzetti nelle appropriate posizioni Soltanto una tale preparazione garantisce gli stessi tempi per ogni processo di pipettamento Come regola generale vale che la reazione enzimatica si svolge linearmente proporzionale con il tempo e con la temperatura Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 20 6 2 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 Eseguimento del test Ogni analisi
13. ensayo inicial se encuentra una muestra que presenta valores mayores que el est ndar mas concentrado ha de diluirse con Sample Diluent y volver a ensayarse como se describe en el Procedimiento de Ensayo Para el c lculo de las concentraciones habr que tener en cuenta el factor de diluci n Ejemplo a diluci n 1 10 10 uL Suero 90 uL Sample Diluent mezclar totalmente b diluci n 1 100 10 uL diluci n a 1 10 90 uL Sample Diluent mezclar totalmente 6 PROCEDIMIENTO DE ENSAYO 6 1 Consideraciones generales Todos los reactivos y muestras han de estar a temperatura ambiente antes de su uso Todos los reactivos deben mezclarse sin formar espuma Una vez se ha comenzado el ensayo deben completarse todos los pasos sin interrupci n Utilizar puntas de pipeta de pl stico nuevas para cada est ndar control o muestra para evitar combinaciones cruzadas La absorbancia es funci n del tiempo de incubaci n y la temperatura Antes de comenzar el ensayo se recomienda que todos los reactivos est n preparados tapas removidas todos los pocillos que se necesiten asegurados en recipiente etc Esto asegurar un tiempo similar para cada paso de pipeteo sin que haya interrupciones Como regla general la reacci n enzim tica es linealmente proporcional al tiempo y a la temperatura Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany bed 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71
14. il coniugato non legato lavato via La quantit della perossidasi coniugata legata inversamente proporzionale alla concentrazione di Estradiolo nel campione Dopo l aggiunta della soluzione substrato l intensit del colore sviluppato inversamente proporzionale alla concentrazione di Estradiolo nel campione del paziente 3 PRECAUZIONI e Questo kit adatto soltanto per l uso diagnostico in vitro e Informazioni su sostanze pericolose contenute nel kit sono riportate nel regolamento di sicurezza e Tutti i componenti del kit che contengono siero o plasma umano sono controllati e confermati negativi per la presenza di HIV I II HosAg e HCV con metodi conformi alle norme FDA Ciononostante tutti i componenti dovrebbero essere trattati come potenziali sostanze nocive nella manutenzione e nello smaltimento e Il contatto con la Stop Solution dovrebbe essere evitato perch contiene 0 5 M H2SO L acido solforico pu provocare irritazioni cutanee e ustioni e Non pipettare con la bocca ed evitare il contatto con componenti del kit con la pelle o con le mucose e Nelle aree in cui il test viene utilizzato non fumare mangiare bere o fare uso di prodotti cosmetici e Nella manutenzione dei campioni o reagenti del kit portare guanti di latex monouso La contaminazione dei reagenti o dei campioni con microbi pu dare risultati falsi e L utilizzo dovrebbe avvenire secondo regole che seguono le rispettive norme di sicurezza nazionali su
15. kkeligt til n test n tester Cat logo n Katalognummer Katalog nummer ApiB8i c KaTaAdyou RUO No do lote Lot nummer Batch nummer Ap 8u g Mapridos Indeholder Inneh ller tillr ckligt till Mepiex pevo errapk s yla N EgET GEI Ens E Temperatura de Opbevaringstemperatu A OepyoKpacia conservac o r F rvaringstempratur amodrkeuong Prazo de validade Udlgbsdato Bast f re datum Huepounvia An ns Fabricante Producent Tillverkare Kataokeuaotng Distributed by Content Conte do Indhold Innehall Mepiexbpevo Volume No Volume N mero Volumen antal Volym antal Oykog apia A Alv olos de aa Brunnar i Mnyad kia Microtiterwells microtitula o Mikrottterorande Mikrotiterplatta MIKPOTITAO OTAOEWG Antiserum Anti soro Antiserum Antiserum AVTIOP G Enzyme f Conjugado enzim tico Enzymkonjugat Enzymkonjugat ZUZEUYHEVO EVZUNO Conjugate Enzym Re Complexo enzim tico Enzymkompleks Enzymkomplex ZUNTT OKO EVZUNOL Complex Fi Subsi ate Solu o de substrato Substratoplosning Substratl sning Aaa Solution UTTOOTPWHATOG Stop Solution Solug o de paragem Stopoplasning Stopp l sning AraAupa TEPPaTIO O Zero Standard Padr o zero Standard 0 Standard 0 Mp rtutto Mnd v Standard Calibrador Standard Standard Mp ruta Control Controlo Kontrol Kontroll Ekeyxog 2 Pu yioTik Al MU A Assay Buffer Tamp o de teste Assay buffer Assay Buffer E Taon Wash
16. los siguientes valores Poblaci n Percentil 5 95 10 36 pg mL Mujeres premenop usica 13 191 pg mL posmenop usica 11 65 pg mL 8 CONTROL DE CALIDAD Se recomienda usar muestras control de acuerdo con las leyes estatales y federales El uso de muestras control ser recomienda para asegurar la validez diaria de los resultados Usar controles tanto a niveles normal como patol gico Los controles y los correspondientes resultados del Laboratorio de control de calidad est n fijados en el certificado de control de calidad que acompa an al kit Los valores y los rangos fijados en la hoja del control de calidad se refieren siempre al kit actual y deben usarse para la comparaci n directa de los resultados Es recomendable tambi n hacer uso de programas de Aseguramiento de la Calidad nacionales o internacionales para asegurar la exactitud de los resultados Utilizar m todos estad sticos apropiados para el an lisis de los valores y tendencia de los controles Si los resultados del ensayo no se ajustan a los rangos aceptables establecidos en los controles los resultados obtenidos de los pacientes han de considerarse inv lidos En este caso por favor comprobar las siguientes reas t cnicas Pipeteo y tiempo empleado fot metro fecha de caducidad de los reactivos condiciones de almacenamiento e incubaci n m todos de aspiraci n y lavado Despu s de comprobar los asuntos mencionados arriba sin encontrar ning n error cont
17. medio delle OD per ogni campione si determina la rispettiva concentrazione dalla curva standard Metodo automatico risultati in IFU sono stati calcolati automaticamente usando un fitting avvicinamento con il 4 PL 4 Parameter Logistics Altri funzioni usati per l elaborazioni dei dati possono dare risultati leggermente differenti La concentrazione dei campioni pu essere determinata direttamente dalla curva standard Campioni con una concentrazione piu elevata dello standard piu concentrato devono essere diluiti Di questo fattore di diluizione deve essere tenuto conto per il calcolo della concentrazione 6 3 1 Esempio di una curva standard In seguito riportato un esempio di una curva standard con DEMEDITEC ELISA Standard Densit ottiche 450 nm Standard 1_ 8 pg mL Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 21 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 7 VALORI NORMALI consigliabile che ogni laboratorio determini i propri valori normali e anormali In uno studio condotto su persone apparentemente sane usando il test DEMEDITEC Estradiol ELISA i seguenti valori sono stati ottenuti Populazione 5 95 Percentile 10 36 pg mL Donne pre menopausa 13 191 pg mL post menopausa 11 65 pg mL 8 CONTROLLO QUALIT consigliabile
18. to use contain 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate as preservatives 4 Enzyme Conjugate 1 vial 25 mL ready to use Estradiol conjugated to horseradish Peroxidase contains 0 03 Proclin 300 0 015 BND and 0 010 MIT as preservatives 5 Substrate Solution 1 vial 25 mL ready to use TMB 6 Stop Solution 1 vial 14 mL ready to use contains 1N acidic solution Avoid contact with the stop solution It may cause skin irritations and burns 7 Wash Solution 1 vial 30 mL 40X concentrated see Preparation of Reagents BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Note Additional Sample Diluent for sample dilution is available upon request 4 1 1 Equipment and material required but not provided A microtiter plate calibrated reader 450 10 nm Calibrated variable precision micropipettes Absorbent paper Distilled or Deionized water Timer Linear linear graph paper or software for data reduction 4 2 Storage and stability of the Kit When stored at 2 8 C unopened reagents will retain reactivity until expiration date Do not use reagents beyond this date Opened reagents must be stored at 2 8 C Microtiter wells must be stored at 2 8 C Once the foil bag has been opened care should be taken to close it tightly again Opened kits retain activity for two months if stored as described above Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145
19. werden Beispiel a Verd nnung 1 10 10 uL Serum 90 uL Sample Diluent gr ndlich mischen b Verd nnung 1 100 10 uL Verd nnung a 1 10 90 uL Sample Diluent gr ndlich mischen 6 TESTDURCHFUHRUNG 6 1 Allgemeine Hinweise Alle Reagenzien und Proben m ssen vor Gebrauch auf Raumtemperatur gebracht und gut durchmischt werden Dabei sollte Schaumbildung vermieden werden Wenn die Testdurchf hrung einmal begonnen wurde muss sie ohne Unterbrechung zu Ende gef hrt werden F r jeden Standard jede Kontrolle oder Probe eine neue Plastikspitze verwenden um Verschleppungen zu vermeiden Die Optische Dichte ist abh ngig von Inkubationszeit und Temperatur Deshalb ist es notwendig vor Beginn der Testdurchf hrung alle Reagenzien in einen arbeitsbereiten Zustand zu bringen die Deckel der Fl schchen zu ffnen alle ben tigten Wells in den Halter zu setzen Nur eine solche Vorbereitung garantiert gleiche Zeiten f r jeden Pipettiervorgang ohne Pausen Als generelle Regel gilt dass die enzymatische Reaktion linear proportional zu Zeit und Temperatur ist Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 14 6 2 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 Testdurchf hrung Jeder Lauf muss eine Standardkurve beinhalten 1 2 3 op No Die ben tigte Anzahl Well
20. 001 allow to clot and separate serum by centrifugation at room temperature Do not centrifuge before complete clotting has occurred Patients receiving anticoagulant therapy may require increased clotting time Plasma Whole blood should be collected into centrifuge tubes containing anti coagulant and centrifuged immediately after collection E g for EDTA plasma Sarstedt Monovette red cap 02 166 001 for Heparin plasma Sarstedt Monovette orange cap 02 165 001 for Citrate plasma Sarstedt Monovette green cap 02 167 001 5 2 Specimen Storage Specimens should be capped and may be stored for up to 5 days at 2 8 C prior to assaying Specimens held for a longer time should be frozen only once at 20 C prior to assay Thawed samples should be inverted several times prior to testing 5 3 Specimen Dilution If in an initial assay a specimen is found to contain more than the highest standard the specimens can be diluted with Sample Diluent and reassayed as described in Assay Procedure For the calculation of the concentrations this dilution factor has to be taken into account Example a Dilution 1 10 10 uL Serum 90 uL Sample Diluent mix thoroughly b Dilution 1 100 10 uL dilution a 1 10 90 uL Sample Diluent mix thoroughly Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany yee 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e
21. 2 Specificit degli anticorpi reazioni ad incrocio Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 9 3 Sensitivita analitica La sensitivit analitica stata calcolata dai valori medi meno due deviazioni standard di venti 20 repliche dello Standard 0 ed erano lt 1 399 pg mL 9 4 Precisione Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 9 5 Ritrovato Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 9 6 Linearit Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 22 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 10 LIMITAZIONE DEL TEST 10 1 Sostanze interferenti Ogni manutenzione impropria dei campioni o modificazione del protocollo pu influenzare risultati 10 2 Droghe interferenti Fino ad oggi nessuna sostanza farmaco conosciuta a noi che abbia influenzato la determinazione di Estradiolo nel campione 10 3 Effetto Hook di alti dosaggi Nessun effetto gancio effetto hook stato osservato in questo test 11 ASPETTI LEGALI 11 1 Affidabilit dei risultati Il test deve essere eseguito esattamente secondo il protocollo dato dal produttore Inoltre l utente deve seguire le regole del GLP Good Laboratory Practice o eventualmente altre regole comportamen
22. 9 Following ovulation estradiol levels fall rapidly until the luteal cells become active resulting in a secondary gentle rise and plateau of estradiol in the luteal phase During pregnancy maternal serum Estradiol levels increase considerably to well above the pre ovulatory peak levels and high levels are sustained throughout pregnancy 10 Serum Estradiol measurements are a valuable index in evaluating a variety of menstrual dysfunctions such as precocious or delayed puberty in girls 11 and primary and secondary amenorrhea and menopause 12 Estradiol levels have been reported to be increased in patients with feminising syndromes 14 gynaecomastia 15 and testicular tumors 16 In cases of infertility serum Estradiol measurements are useful for monitoring induction of ovulation following treatment with for example clomiphene citrate LH releasing hormone LH RH or exogenous gonadotropins 17 18 During ovarian hyperstimulation for in vitro fertislisation IVF serum estradiol concentrations are usually monitored daily for optimal timing of human chorionic gonadotropin hCG administration and oocyte collection 19 2 PRINCIPLE OF THE TEST The DEMEDITEC Estradiol sensitive ELISA Kit is a solid phase enzyme linked immunosorbent assay ELISA based on the principle of competitive binding The microtiter wells are coated with a polyclonal antibody directed towards an antigenic site on the Estradiol molecule Endogenous Estradiol of
23. 922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 26 6 2 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 Procedimiento de ensayo Cada uno debe incluir una curva de est ndares 1 2 3 E Asegurar el n mero deseado de pocillos en el recipiente Dispensar 100 HL de cada Standard Control y muestras con puntas nuevas en los pocillos adecuados Dispensar 200 uL de Enzyme Conjugate a cada pocillo Mezclar totalmente durante 10 segundos Es importante mezclar completamente en este paso Incubar durante 4 horas a temperatura ambiente Sacudir en rgicamente el contenido de los pocillos Lavar los pocillos 3 veces con Wash Solution diluida 400 uL por pocillo Realizar un golpe seco de los pocillos contra el papel absorbente para eliminar las gotas residuales Nota importante La sensibilidad y la precisi n de este ensayo se ve marcadamente influenciada por la realizaci n correcta del proceso de lavado Adicionar 200 uL de Substrate Solution a cada pocillo Incubar durante 30 minutes a temperatura ambiente Parar la reacci n enzim tica mediante la adici n de 100 uL de Stop Solution a cada pocillo Leer la OD a 450 10 nm con un lector de microplacas dentro de los 10 minutos despu s de la adici n de la Stop Solution C lculo de los Resultados Calcular los valores de absorbancia media para cada conjunto de est ndares controles y muestras de pacientes Construir una curva est ndar mediante la re
24. H concentration of oestrogens and androgens in human ovarian venous plasma and follicular fluid throughout the menstrual cycle J Endocrinol 71 77 85 1976 Abraham G E Odell W D Swerdloff R S and Hopper K Simultaneous radioimmunoassay of plasma FSH LH progesterone 17 hydroxyprogesterone and estradiol 178 during the menstrual cycle J Clin Endocrinol Metab 34 312 18 1972 March C M Goebelsmann U Nakumara R M and Mishell D R Roles of oestradiol and progesterone in eliciting midcycle luteinising hormone and follicle stimulating hormone surges J clin Endicrinol Metab 49 507 12 1979 Simpson E R and McDonald P C Endocrinology of Pregnancy In Textbook of Endocrinology Ed Williams R H pp412 22 Saunders Company Philadelphia 1981 Jenner M R Kelch R P et al Hormonal Changes in prepubertal children pubertal females and in precocious puberty premature thelarche hypogonadism and in a child with feminising tumour J clin Endocrinol 34 521 1982 Goldstein D et al Correlation between oestradiol and progesterone in cycles with luteal phase deficiency Fertil Steril 37 348 54 1982 Kirschner M A therole of hormones in the etiology of human breast cancer Cancer 39 2716 26 1977 Odell W D and Swerdloff R D Abnormalities of gonadal function in men clin Endocr 8 149 80 1978 McDonald P c Madden J C Brenner P F Wilson J D and Siiteri P K
25. Kiel Germany een 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 4 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 4 3 Preparation of Reagents Allow all reagents and required number of strips to reach room temperature prior to use Wash Solution Add deionized water to the 40X concentrated Wash Solution Dilute 30 mL of concentrated Wash Solution with 1170 mL deionized water to a final volume of 1200 mL The diluted Wash Solution is stable for 2 weeks at room temperature 4 4 Disposal of the Kit The disposal of the kit must be made according to the national regulations Special information for this product is given in the Material Safety Data Sheets see chapter 13 4 5 Damaged Test Kits In case of any severe damage to the test kit or components DEMEDITEC has to be informed in writing at the latest one week after receiving the kit Severely damaged single components should not be used for a test run They have to be stored until a final solution has been found After this they should be disposed according to the official regulations 5 SPECIMEN Serum or plasma EDTA Heparin or citrate plasma can be used in this assay Do not use haemolytic icteric or lipaemic specimens Please note Samples containing sodium azide should not be used in the assay 5 1 Specimen Collection Serum Collect blood by venipuncture e g Sarstedt Monovette 02 1388
26. a interpretazioni sbagliate da parte dell utente secondo il paragrafo 11 2 Nel caso di reclamazione la garanzia del produttore limitato al valore massimo del test kit Ogni danno provocato durante il trasporto del kit non sottost alla responsabilit del produttore 12 BIBLIOGRAFIA Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 23 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 1 INTRODUCCI N El Kit de inmunoensayo enzim tico DEMEDITEC Estradiol sensitive proporciona los materiales necesarios para la determinaci n cuantitativa del Estradiol en suero y plasma Este ensayo est dise ado solo para diagn stico in vitro 2 FUNDAMENTO DEL ENSAYO El Kit DEMEDITEC Estradiol sensitive ELISA es un ensayo en fase s lida de inmunoadsorci n unido a enzimas ELISA basado en el principio de uni n competitiva Los pocillos de las placas est n recubiertos con un anticuerpo policlonal dirigido contra un foci antig nico en la mol cula Estradiol En las muestras de los pacientes Estradiol compite con un conjugado Estradiol peroxidasa de r bano en la uni n al anticuerpo inmovilizado Despu s de la incubaci n el conjugado no unido se lava La cantidad de conjugado de peroxidasa unido es inversamente proporcional a la
27. a patient sample competes with an Estradiol horseradish peroxidase conjugate for binding to the coated antibody After incubation the unbound conjugate is washed off The amount of bound peroxidase conjugate is reverse proportional to the concentration of Estradiol in the sample After addition of the substrate solution the intensity of colour developed is reverse proportional to the concentration of Estradiol in the patient sample 3 PRECAUTIONS e This kit is for in vitro diagnostic use only e For information on hazardous substances included in the kit please refer to Material Safety Data Sheets e All reagents of this test kit which contain human serum or plasma have been tested and confirmed negative for HIV I II HBsAg and HCV by FDA approved procedures All reagents however should be treated as potential biohazards in use and for disposal e Avoid contact with Stop Solution containing 0 5 M H2SO It may cause skin irritation and burns e Never pipet by mouth and avoid contact of reagents and specimens with skin and mucous membranes e Do not smoke eat drink or apply cosmetics in areas where specimens or kit reagents are handled Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany oon 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 3 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 e Wear disposable latex gloves when handling specime
28. actar con su distribuidor o con DEMEDITEC directamente 9 CARACTER STICAS DEL ENSAYO 9 1 Rango din mico del ensayo El rango del ensayo se encuentra entre 0 200 pg mL 9 2 Especificidad de los Anticuerpos Reactividad Cruzada Consultar el manual de usuario en ingl s 9 3 Sensibilidad Anal tica La sensibilidad anal tica se calcul a partir de la media menos dos desviaciones est ndar de veinte 20 r plicas del Est ndar 0 y result ser lt 1 399 pg mL 9 4 Precisi n Consultar el manual de usuario en ingl s 9 5 Recuperaci n Consultar el manual de usuario en ingl s 9 6 Linealidad Consultar el manual de usuario en ingl s Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany bed 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 28 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 10 LIMITACIONES DE USO 10 1 Sustancias que pueden interferir Cualquier manipulaci n inadecuada de las muestras o modificaciones del ensayo pueden influenciar los resultados 10 2 Interferencias con drogas Hasta ahora no se han encontrado sustancias drogas conocidas por nosotros que tengan influencia en la medida de Estradiol en una muestra 10 3 Efecto Gancho Dosis Elevada No se ha observado efecto gancho en este ensayo 11 ASPECTOS LEGALES 11 1 Fiabilidad de los Resultados El ensayo debe realizarse exactamente de acue
29. actifs BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane Bromonitrodioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one M thylisothiazolone Remarque Un Sample Diluent pour la dilution de l chantillon peut tre fourni sur demande 4 1 1 Equipementet mat riel requis mais non fournis Un spectrophotom tre lecteur de micro plaques calibr 450 10 nm Des micro pipettes de pr cision variables et calibr es Du papier absorbant De l eau distill e 4 2 Stockage et stabilit du kit Les r actifs contenus dans des flacons non ouverts stock s 2 8 C seront stables jusqu la date d expiration inscrite sur l tiquette Ne pas utiliser les r actifs au dela de cette date Les r actifs contenus dans des flacons ouverts doivent tre stock s 2 8 C Les micro plaques doivent tre stock es 2 8 C Une fois la capsule d aluminium ouverte attention bien refermer le flacon Les kits ouverts conservent leur activit durant deux mois s ils sont stock s comme pr c demment mentionn 4 3 Pr paration des r actifs Amener tous les r actifs et le nombre de barrettes n cessaires au test temp rature ambiante avant utilisation Wash Solution Diluer 30 mL de Wash Solution concentr e avec 1170 mL d eau d sionis e pour un volume final de 1200 mL Remarque La solution de lavage dilu e est stable deux semaines temp rature ambiante 4 4 Elimination des d chets relatifs au kit L limination des d
30. ard 0 Estandar 0 Standard zero Standard Standard Standard Standard Estandar Standard Control Control Kontrolle Contr le Control Controllo Assay Buffer Assay Buffer Assaypuffer Tampon d essai Tamp n de ensayo Tampone del test Wash Solution Wash Solution Waschl sung Solution de lavage Soluci n de lavado Soluzione di lavaggio 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOHi idrossido di sodio 1N 1 N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI Probenverd nnungs Solution pour dilution Soluci n para diluci n PRE Sample Diluent Sample Diluent medium de l chantillon de la muestra Pileta der campioni Conjugate F f Konjugatverd nnungs Solution pour dilution Soluci n para diluci n i Diluent Conjugate Diluent medium du conjugu del conjugado Diluente del tracciante Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Email info demeditec de e http www demeditec com Version 4 07 09 JS Updated 090818 36 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 Symbol Portugues Dansk Svenska EAAnvika C Conformidade com as Europaeisk Europeisk Eupwrtraikh normas europeias overensstemmelse verensst mmelse 2upp ppwon Gonsulte as instru es Se brugsanvisning Se bruksanvisningen Eyxeipidio xpnotn de utilizagao Diagn stico in vitro In vitro diagnostik Diagnostik in vitro in vitro diayvwoTIK Ese tilsttr
31. asurement of Estradiol in serum and plasma 1 2 Summary and Explanation Estradiol 1 3 5 10 estratriene 3 17 diol 17 estradiol E2 is a C18 steroid hormone with a phenolic A ring This steroid hormone has a molecular weight of 272 4 It is the most potent natural Estrogen produced mainly by the Graffian follicle of the female ovary and the placenta and in smaller amounts by the adrenals and the male testes 1 2 3 Estradiol E2 is secreted into the blood stream where 98 of it circulates bound to sex hormone binding globulin SHBG and to a lesser extent to other serum proteins such as albumin Only a small fraction circulates as free hormone or in the conjugated form 4 5 Estrogenic activity is affected via estradiol receptor complexes which trigger the appropriate response at the nuclear level in the target sites These sites include the follicles uterus breast vagine urethra hypothalamus pituitary and to a lesser extent the liver and skin In non pregnant women with normal menstrual cycles estradiol secretion follows a cyclic biphasic pattern with the highest concentration found immediately prior to ovulation 6 7 The rising estradiol concentration is understood to exert a positive feedback influence at the level of the pituitary where it influences the secretion of the gonadotropins follicle stimulating hormone FSH and luteinising hormone LH which are essential for folicular maturation and ovulation respectively 8
32. ated by addition of half of the values determined for the undiluted samples and half of the values of the known solutions The Recovery has been calculated by multiplication of the ratio of the measurements and the expected values with 100 Added Concentration Measured Conc Expected Conc Recovery 1 1 v v pg mL pg mL pg mL UNE 0 90 9 101 3 114 3 110 9 112 6 114 3 89 6 91 8 99 2 Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany yee 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 9 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 10 LIMITATIONS OF USE 10 1 Interfering Substances Any improper handling of samples or modification of this test might influence the results 10 2 Drug Interferences Until today no substances drugs are known to us which have an influence to the measurement of Estradiol in a sample 10 3 High Dose Hook Effect No hook effect was observed in this test 11 LEGAL ASPECTS 11 1 Reliability of Results The test must be performed exactly as per the manufacturer s instructions for use Moreover the user must strictly adhere to the rules of GLP Good Laboratory Practice or other applicable national standards and or laws This is especially relevant for the use of control reagents It is important to always include within the test procedure a sufficient number of controls for val
33. ationalen gesetzlichen Bestimmungen einzusetzen Durch die Verwendung von Kontrollproben wird eine Tag zu Tag berpr fung der Ergebnisse erzielt Es sollten Kontrollen sowohl mit normalem als auch pathologischem Level eingesetzt werden Die Kontrollen mit den entsprechenden Ergebnissen des QC Labors sind im QC Zertifikat das dem Kit beiliegt aufgef hrt Die im QC Blatt angegebenen Werte und Bereiche beziehen sich stets auf die aktuelle Kitcharge und sollten zum direkten Vergleich der Ergebnisse verwendet werden Es wird ebenfalls empfohlen an nationalen oder internationalen Qualit tssicherungs Programmen teilzunehmen um die Genauigkeit der Ergebnisse zu sichern Es sollten geeignete statistische Methoden zur Analyse von Kontroll Werten und Trends angewendet werden Wenn die Ergebnisse des Assays nicht mit den angegebenen Akzeptanzbereichen des Kontrollmaterials bereinstimmen sollten die Patientenergebnisse als ung ltig eingestuft werden In diesem Fall berpr fen Sie bitte die folgenden Bereiche Pipetten und Zeitnehmer Photometer Verfallsdatum der Reagenzien Lagerungs und Inkubationsbedingungen Absaug und Waschmethode Sollten Sie nach berpr fung der vorgenannten Bereiche keinen Fehler erkannt haben setzen Sie sich bitte mit Ihrem Lieferanten oder direkt mit der Firma DEMEDITEC in Verbindung 9 ASSAY CHARACTERISTIKA 9 1 Messbereich Der Messbereich des Testes liegt zwischen 0 200 pg mL 9 2 Spezifit t der Antik rper K
34. cherheitsdatenblatt e Alle Bestandteile dieses Testkits die humanes Serum oder Plasma enthalten wurden mit FDA gepr ften Methoden auf HIV I II HosAg und HCV getestet und als negativ best tigt Jedoch sollten alle Bestandteile im Umgang und bei der Entsorgung wie m gliche Gefahrenstoffe betrachtet werden e Der Kontakt mit der Stop Solution sollte vermieden werden da sie 0 5 M H2SO enth lt Schwefels ure kann Hautreizungen und Verbrennungen verursachen e Nicht mit dem Mund pipettieren und den Kontakt von Kitbestandteilen und Proben mit Haut und Schleimh uten vermeiden e Inden Bereichen in denen Proben oder Kitbestandteile verwendet werden nicht rauchen essen oder Kosmetika verwenden e Beim Umgang mit Proben oder Reagenzien Einweg Latexhandschuhe tragen Die Verunreinigung von Reagenzien oder Proben mit Mikroben kann zu falschen Ergebnissen f hren e Der Gebrauch sollte gem der Vorschriften einer entsprechenden nationalen Gefahrenstoff Sicherheitsrichtlinie erfolgen e Reagenzien nicht nach dem auf dem Kit Etikett angegebenen Verfallsdatum verwenden e Alle im Kit Protokoll angegebenen Mengen m ssen genau eingehalten werden Optimale Ergebnisse k nnen nur durch Verwendung kalibrierter Pipetten und Mikrotiterplatten Leseger te erreicht werden e Komponenten von Kits mit unterschiedlichen Lotnummern nicht untereinander vertauschen Es wird empfohlen keine Wells von verschiedenen Platten zu verwenden auch nicht wenn es sich
35. dard 0 4 Est ndan 5 viales 1 mL listo para usar Concentraciones 0 3 10 50 200 pg mL Conversi n 1 pg mL 3 67 pmol L Contiene 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate como conservante 3 Sample Diluent Soluci n para diluci n de la muestra 1 vial 3 mL listo para usar Contiene 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate como conservante 4 Enzyme Conjugate Conjugado enzim tico 1 vial 25 mL listo para usar Estradiol conjugado con la Peroxidasa de rabano contiene 0 03 Proclin 300 0 015 BND 0 010 MIT como conservante 5 Substrate Solution Soluci n de sustrato 1 vial 25 mL listo para usar Tetrametilbencidina TMB 6 Stop Solution Soluci n de parada 1 vial 14 mL listo para usar contiene 1 N cida soluci n Evitar el contacto con la Soluci n de parada Puede causar irritaci n y quemaduras en al piel 7 Wash Solution Soluci n de lavado 1 vial 30 mL concentrado 40X ver Preparaci n de los Reactivos BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane Bromonitrodioxano MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Metilisotiazolona Note Se puede solicitar el Sample Diluent para la diluci n de la muestra 4 1 1 Equipamiento y material requerido pero no provisto Lector de microplacas calibrado 450 10 nm Micropipetas de precisi n variable calibradas Papel absorbente Agua destilada 4 2 Almacenamiento y estabilidad del kit Cuando se almacena a 2 8 C los reactivos s
36. de caducidad que aparece en las etiquetas del kit e Todos los vol menes indicados han de ser realizados de acuerdo con el protocolo Los resultados ptimos del ensayo se obtienen solo cuando se utilizan pipetas y lectores de microplacas calibrados e No mezclar o usar componentes de kits con distinto n mero de lote Se recomienda no intercambiar pocillos de distintas placas incluso si son del mismo lote Los kits pueden haber sido enviados o almacenados bajo diferentes condiciones y las caracter sticas de uni n de las placas pueden resultar diferentes e Los compuestos qu micos y los reactivos preparados o utilizados han de tratarse como residuos peligrosos de acuerdo con las gu as o regulaci n nacionales de seguridad de sustancias biopeligrosas e Las hojas de los datos de seguridad de este producto est n disponibles bajo pedido directamente a Demeditec Diagnostics GmbH Las hojas de los datos de seguridad se ajustan a las demandas de las gu a europea EU Guideline 91 155 EC Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany io 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 24 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 4 COMPONENTES DEL KIT 4 1 Componentes del Kit 1 Microtiterwells Placas multipocillo 12x8 tiras separables 96 pocillos Pocillos recubiertos con anticuerpo anti Estradiol policlonal 2 Standard Stan
37. e pouvoir valider l exactitude et la pr cision du test Les r sultats du test sont valides si et seulement si tous les contr les sont compris dans les gammes de mesure mentionn es et si tous les autres param tres du test sont galement compris dans les instructions de ce test En cas de doute ou d inqui tude contacter la DEMEDITEC 11 2 Cons quences th rapeutiques Les suites th rapeutiques ne devront jamais tre bas es sur les r sultats de laboratoire seuls m me si les tous les r sultats du test sont en accord avec les points mentionn s dans le paragraphe 11 1 Tout r sultat n est qu une partie du tableau clinique complet d un patient Les suites th rapeutiques peuvent d couler des r sultats de laboratoire si et seulement si ceux ci sont en accord avec l ensemble du tableau clinique du patient Le r sultat du test en lui m me ne doit en aucun cas tre le seul d terminant des suites th rapeutiques a suivre 11 3 Responsabilit Toute modification du kit et ou change ou m lange d un des composants de diff rents lots d un kit un autre pourrait affecter de fagon n gative les r sultats attendus et la validit du test dans son ensemble De telles modifications ou changes invalident toute r clamation pour remplacement Toutes les r clamations soumises relatives au paragraphe 11 2 et dues une mauvaise interpr tation des r sultats de laboratoire de la part du client sont galement invalides N anmoi
38. el Germany 1 INTRODUCTION 3 2 PRINCIPLE OF THE TEST i 3 3 PR CAUTIONS 3 4 REAGENTS iii 4 5 SPECIMENS nennen 5 6 TEST PROCEDURE 6 7 EXPECTED VALUES iieii 7 8 QUALITY CONTROL ii 7 9 ASSAY CHARACTERISTICS seeseeseesaneeneenn 8 10 LIMITATIONS OF USE 10 11 LEGAL ASPECTS eepe 10 12 REFERENCES siii asien 11 1 EINLEITUNG an 12 2 TESTPRINZIP ie 12 3 VORSICHTSMABNAHMEN 12 4 BESTANDTEILE DES KITS in 13 5 PROBENVORBEREITUNG s 14 6 TESTDURCHFUHRUNG i 14 7 ERWARTETE WERTE o ae 16 8 _ QUALITATS KONTROLLE 16 9 ASSAY CHARACTERISTIKA e seasaeaesareenn 16 10 GRENZEN DES TESTS in 17 11 RECHTLICHE GRUNDLAGEN 17 12 REFERENZEN ii 17 1 INTRODUZIONE ee 18 2 PRINCIPIO DEL TEST 18 3 PRECAUZIONI e 18 4 COMPONENTI DEL KIT 19 5 CAMPION 20 6 ATTUAZIONE DEL TEST 20 7 VALORI NORMALI ii 22 8 CONTROLLO QUALIT nennen 22 9 CARATTERISTICHE DEL TEST 22 10 LIMITAZIONE DEL TEST 23 11 ASPETTI LEGALI i 23 12 BIBLIOGRAFIA 23 Version 4 07 09 JS Updated 090818 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Email info demeditec de e http www demeditec com 2 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 E E e s a 1 INTRODUCTION 1 1 Intended Use The DEMEDITEC Estradiol sensitive ELISA is an enzyme immunoassay for the quantitative in vitro diagnostic me
39. endet werden Achtung Proben die Natriumazid enthalten sollten nicht verwendet werden 5 1 Probenentnahme Serum Blut durch Venenpunktion entnehmen z B mit Sarstedt Monovette 02 1388 001 gerinnen lassen und das Serum durch Zentrifugation bei Raumtemperatur abtrennen Vor der Zentrifugation muss die Gerinnung vollst ndig abgeschlossen sein Bei Patienten die Antikoagulantien erhalten kann die Gerinnungszeit l nger dauern Plasma Die Blutentnahme erfolgt mit R hrchen die ein Antikoagulanz enthalten Das Plasma wird als Uberstand nach einer Zentrifugation gewonnen z B f r EDTA Plasma Sarstedt Monovette roter Deckel 02 166 001 f r Heparinplasma Sarstedt Monovette oranger Deckel 02 165 001 f r Zitratplasma Sarstedt Monovette gr ner Deckel 02 167 001 5 2 Probenaufbewahrung Proben sollten stets gut verschlossen sein und k nnen vor Testbeginn bis zu 5 Tage bei 2 8 C gelagert werden F r eine l ngere Aufbewahrung sollten die Proben eingefroren bei 20 C bis zum Testbeginn gelagert werden Nur einmal einfrieren Aufgetaute Proben sollten vor Testbeginn vorsichtig durchmischt werden ohne Schaumbildung 5 3 Probenverdinnung Wenn in einem ersten Testdurchlauf bei einer Probe eine Konzentration h her als der h chste Standard gefunden wird kann diese Probe mit Sample Diluent weiter verd nnt und nochmals bestimmt werden Die Verd nnung muss jedoch bei der Berechnung der Konzentration beachtet
40. entes da ados para llevar a cabo un ensayo Han de almacenarse hasta que se encuentre una soluci n Despu s de esto deben ser eliminados de acuerdo con las leyes oficiales 5 MUESTRAS En este ensayo pueden usarse suero o plasma plasma EDTA Heparina o citrato No usar muestras hemol ticas ict ricas o lip micas Tener en cuenta No deben usarse muestras que contengan acida s dica 5 1 Toma de muestras Suero Recoger la sangre por punci n en la vena ej Sarstedt Monovette 02 1388 001 permitir coagulaci n y separar el suero por centrifugaci n a temperatura ambiente No centrifugar antes de la coagulaci n completa Las muestras de pacientes que reciben terapia anticoagulante requieren m s tiempo para coagular Plasma Toda la sangre ha de recogerse en tubos de centr fuga que contengan anticoagulante y centrifugar inmediatamente tras la recogida Ej Para plasma EDTA Sarstedt Monovette tapa roja 02 166 001 para plasma Heparina Sarstedt Monovette tapa naranja 02 165 001 para plasma Citrato Sarstedt Monovette tapa verde 02 167 001 5 2 Almacenamiento de las muestras Las muestras deben ser tapadas y pueden ser almacenadas hasta 5 d as a 2 8 C antes del ensayo Las muestras almacenadas por un per odo de tiempo mas largo han de congelarse s lo una vez a 20 C antes del ensayo Las muestras descongeladas deben invertirse varias veces antes del ensayo 5 3 Diluci n de las muestras Si en un
41. ertig Estradiol mit Meerrettichperoxidase konjugiert Enth lt 0 03 Proclin 300 0 015 BND und 0 010 MIT als Konservierungsstoffe 5 Substrate Solution Substratl sung 1 Fl schchen 25 m l gebrauchsfertig TMB 6 Stop Solution Stoppl sung 1 Fl schchen 14 m l gebrauchsfertig Enth lt 1 N saure L sung Kontakt mit der Stoppl sung vermeiden Kann Hautreizungen und Verbrennungen verursachen 7 Wash Solution Waschl sung 40X konzentriert 1 Fl schchen 30 m l Siehe Vorbereitung der Reagenzien BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Anmerkung Zus tzliches Sample Diluent zur Probenverd nnung ist auf Anfrage erh ltlich 4 1 1 Nicht im Kit enthaltene aber erforderliche Ger te und Materialien Kalibriertes Mikrotiterplattenleseger t mit 450 10 nm Filter Kalibrierte variable Pr zisions Mikropipette Saugf higes Papier Aqua dest 4 2 Lagerung und Haltbarkeit des Kits Die unge ffneten Reagenzien behalten bei Lagerung um 2 8 C ihre Reaktivit t bis zum Verfallsdatum Nach dem Verfallsdatum die Reagenzien nicht mehr verwenden Nach dem Offnen sollten alle Reagenzien bei 2 8 C gelagert werden Die Mikrotiterwells sollten bei 2 8 C gelagert werden Der einmal ge ffnete Folienbeutel sollte stets sehr sorgf ltig wieder verschlossen werden Unter den beschriebenen Lagerbedingungen behalten ge ffnete Kits zwei Monate ihre Reaktivit t 4 3 Vorbereitung der Reage
42. hantillons doivent tre amen s temp rature ambiante avant utilisation Tous les r actifs doivent tre m lang s sans formation de mousse Une fois la proc dure engag e toutes les tapes doivent tre r alis es sans interruption Utiliser un nouveau c ne de pipette pour chaque standard contr le ou chantillon ceci afin d viter toute contamination L absorbance est fonction du temps d incubation et de la temp rature Avant de commencer le test il est recommand de pr parer tous les r actifs bouchons ouverts de pr parer les puits des microplaques etc Cela garantira un intervalle de temps quivalent entre chaque tape sans interruption En r gle g n rale la r action enzymatique est lin airement proportionnelle au temps et la temp rature Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 32 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 6 2 Realisation du dosage Chaque test doit inclure une courbe talon 1 2 o ON O Disposer le nombre de puits de micro titration d sir dans le support D poser 100 uL de chaque Standard Control et les chantillons avec de nouveaux c nes de pipette dans les puits appropri s D poser 200 uL d Enzyme Conjugate dans chaque puits Bien m langer pendant 10 secondes II est importa
43. http www demeditec com 5 6 6 1 6 2 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 TEST PROCEDURE General Remarks All reagents and specimens must be allowed to come to room temperature before use All reagents must be mixed without foaming Once the test has been started all steps should be completed without interruption Use new disposal plastic pipette tips for each standard control or sample in order to avoid cross contamination Absorbance is a function of the incubation time and temperature Before starting the assay it is recommended that all reagents are ready caps removed all needed wells secured in holder etc This will ensure equal elapsed time for each pipetting step without interruption As a general rule the enzymatic reaction is linearly proportional to time and temperature Assay Procedure Each run must include a standard curve 1 Secure the desired number of Microtiter wells in the frame holder 2 Dispense 100 uL of each Standard Control and samples with new disposable tips into appropriate wells 3 Dispense 200 uL Enzyme Conjugate into each well Thoroughly mix for 10 seconds It is important to have a complete mixing in this step 4 Incubate for 4 hours at room temperature 5 Briskly shake out the contents of the wells Rinse the wells 3 times with diluted Wash Solution 400 uL per well Strike the wells sharply on absorbent paper to remove residual droplets Important note The sensit
44. i 1 mL pronto all uso Concentrazioni 0 3 10 50 200 pg mL Conversione 1 pg mL 3 67 pmol L Contiene 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate come conservante 3 Sample Diluent Diluente dei campioni 1 flacone 3 mL pronto all uso Contiene 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate come conservante 4 Enzyme Conjugate Tracciante enzimatico 1 flacone 25 mL pronto all uso Estradiolo coniugato alla perossidasi di rafano Contiene 0 03 Proclin 300 0 015 BND e 0 010 MIT come conservante 5 Substrate Solution Soluzione di substrato 1 flacone 25 mL pronto all uso TMB benzidine tetrametilico 6 Stop Solution Soluzione d arresto 1 flacone 14 mL pronto all uso contiene 1 N acidic solution Evitare il contatto con la soluzione d arresto Pu causare irritazioni cutanee e ustioni 7 Wash Solution Soluzione di lavaggio 1 flacone 30 mL concentrata 40X vedi preparazione dei reagenti BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Nota Ulteriore Sample Diluent pu essere richiesto alla ditta 4 1 1 Materiali richiesti ma non contenuti nel kit Uno spettrofotometro calibrato per micropozzetti 450 10 nm Micropipette calibrate di precisione a volume variabile Carta assorbente Acqua distillata 4 2 Magazzinaggio e stabilit del kit A 2 8 C i reagenti non aperti rimangono reattivi fino alla data di scadenza indicata Non usare reagenti oltre questa data
45. i coagulant peuvent demander un temps de coagulation plus important Plasma Le sang total doit tre pr lev dans des tubes de centrifugation contenant un anti coagulant et centrifug imm diatement apr s le pr l vement ex pour EDTA plasma Sarstedt Monovette bouchon rouge 02 166 001 pour h parine plasma Sarstedt Monovette bouchon orange 02 165 001 pour citrate plasma Sarstedt Monovette bouchon vert 02 167 001 5 2 Conservation des chantillons Les tubes contenant les chantillons doivent tre ferm s et peuvent tre stock s jusqu a cing jours a 2 8 C avant d tre test s Les chantillons stock s pour un temps prolong doivent tre congel s a 20 C avant d tre test s Les chantillons d congel s doivent tre retourn s plusieurs fois avant le test 5 3 Dilution de l chantillon Si lors d un test pr liminaire la concentration de l chantillon se r v le tre sup rieure a celle du standard le plus concentr alors l chantillon doit tre dilu avec le Sample Diluent et test de nouveau comme d crit dans R alisation du test Pour le calcul des concentrations ce facteur de dilution doit tre pris en consid ration Exemple a dilution 1 10 10 uL S rum 90 uL Sample Diluent bien m langer b dilution 1 100 10 uL dilution a 1 10 90 uL Sample Diluent bien m langer 6 REALISATION DU TEST 6 1 Remarques g n rales Tous les r actifs et c
46. idating the accuracy and precision of the test The test results are valid only if all controls are within the specified ranges and if all other test parameters are also within the given assay specifications In case of any doubt or concern please contact DEMEDITEC 11 2 Therapeutic Consequences Therapeutic consequences should never be based on laboratory results alone even if all test results are in agreement with the items as stated under point 11 1 Any laboratory result is only a part of the total clinical picture of a patient Only in cases where the laboratory results are in acceptable agreement with the overall clinical picture of the patient should therapeutic consequences be derived The test result itself should never be the sole determinant for deriving any therapeutic consequences 11 3 Liability Any modification of the test kit and or exchange or mixture of any components of different lots from one test kit to another could negatively affect the intended results and validity of the overall test Such modification and or exchanges invalidate any claim for replacement Claims submitted due to customer misinterpretation of laboratory results subject to point 11 2 are also invalid Regardless in the event of any claim the manufacturer s liability is not to exceed the value of the test kit Any damage caused to the test kit during transportation is not subject to the liability of the manufacturer Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Me
47. ient for lt n gt tests Ausreichend f r n Ans tze Contenu suffisant pour n tests Contenido suficiente para lt n gt ensayos Contenuto sufficiente per n saggi Storage Temperature Lagerungstemperatur Temperature de conservation Temperatura de conservacion Temperatura di conservazione Expiration Date Mindesthaltbarkeits datum Date limite d utilisation Fecha de caducidad Data di scadenza BL Legal Manufacturer Hersteller Fabricant Fabricante Fabbricante Distributed by Distributor Vertreiber Distributeur Distribuidor Distributtore Content Content Inhalt Contenu Contenido Contenuto Volume No Volume No Volumen Anzahl Volume Num ro Volumen N mero Volume Quantit Microtiterwells Microtiterwells Mikrotiterwells Se deumlero Placas multipocillo Micropozzetti Antiserum Antiserum Antiserum Antis rum Antisuero Antisiero Enzym yi S Enzyme Conjugate Enzymkonjugat Conjugu enzymatique Conjugado enzim tico Tracciante enzimatico Conjugate Enzym yine Enzyme Complex Enzymkomplex Complexe Complex enzim tico Complesso enzimatico Complex enzymatique r Subst ate Substrate Solution Substratl sung Solution substrat Soluci n de sustrato Soluzione di substrato Solution Stop Solution Stop Solution Stoppl sung Solution d arr t Soluci n de parada Soluzione d arresto Zero Standard Zero Standard Nullstandard Stand
48. in abrir mantienen su reactividad hasta la fecha de caducidad No utilizar los reactivos m s all de esta fecha Los reactivos abiertos han de almacenarse a 2 8 C Las placas multipocillo han de almacenarse a 2 8 C Una vez se ha abierto la bolsa hay que tener cuidado y cerrarla de nuevo Los kits abiertos conservan su actividad durante dos meses si se almacenan como se ha descrito arriba 4 3 Preparaci n de los Reactivos Dejar que todos los reactivos y el n mero requerido de tiras alcancen la temperatura ambiente antes de usarse Wash Solution Mezclar 30 mL de Wash Solution concentrada con 1170 mL de agua desionizada hasta un volumen final de 1200 mL La soluci n del lavado diluida es estable durante 2 semanas a temperatura ambiente 4 4 Eliminaci n del Kit La eliminaci n del kit debe realizarse de acuerdo con las leyes nacionales En las hojas de datos de seguridad se proporciona informaci n especial de este producto ver cap tulo 13 Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 25 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 4 5 Kits de ensayo da ados En caso de que exista cualquier da o severo del kit de ensayo o de sus componentes ha de informarse por escrito a DEMEDITEC no mas tarde de una semana despu s de recibir el kit No deben utilizarse compon
49. ion avec le conjugu e la HRP pour la liaison l anticorps Apr s incubation le conjugu non li est limin durant le lavage des puits La quantit de peroxidase li e est inversement proportionnelle a la concentration d oestradiol contenue dans l chantillon Suite l addition de solution substrat l intensit de coloration obtenue est inversement proportionnelle a la concentration d oestradiol contenue dans l chantillon 3 PRECAUTIONS D UTILISATION e Ce kit est uniquement destin aux tests diagnostiques in vitro e Les informations concernant la toxicit des r actifs contenus dans ce kit sont pr sent es dans la fiche de s curit Material Safety Data Sheets e Tous les r actifs de ce kit contenant du s rum ou du plasma humain ont t test s avec des r sultats n gatifs pour le VIH I II le HBsAg et le HCV selon les normes FDA en vigueur N anmoins lors de leur utilisation tous les r actifs de ce kit doivent tre manipul s avec pr caution e Eviter les contacts avec la Stop Solution celle ci contient 0 5 M de H2SO Cela pourrait engendrer irritations ou br lures de la peau e Ne jamais pipeter avec la bouche et viter tout contact de la peau ou des muqueuses avec les r actifs ou les chantillons e Ne pas fumer manger boire ou utiliser des produits cosm tiques dans les zones o les chantillons ou le kit ont t mani s e Porter des gants d examen lors de l utilisation des
50. ise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Version 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 nda 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 6 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 6 3 1 Example of Typical Standard Curve The following data is for demonstration only and cannot be used in place of data generations at the time of assay Standard O 0 pg mL Standard 1 3 pg mL Standard 2 10 pg mL Standard 3_ 50 pg mL Standard 4 200 pg mL 7 EXPECTED VALUES It is strongly recommended that each laboratory should determine its own normal and abnormal values In a study conducted with apparently normal healthy adults using the DEMEDITEC Estradiol ELISA the following values are observed Population 5 95 Percentile 10 36 pg mL pre menopausal 13 191 pg mL post menopausal 11 65 pg mL Females The results alone should not be the only reason for any therapeutic consequences The results should be correlated to other clinical observations and diagnostic tests 8 QUALITY CONTROL Good laboratory practice requires that controls be run with each calibration curve A statistically significant number of controls should be assayed to establish mean values and acceptable ranges to assure proper performance It is recommended to use control samples according to state and federal regulations The use of control samples is advised to assure the day to day validity of result
51. itner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany bed 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 10 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 12 REFERENCES 1 2 13 14 16 17 20 21 Tsang B K Armstrong D T and Whitfield J F Steroid biosyntheses by isolated human ovarian follicular cells in vitro J Clin Endocrinol Metab 51 1407 11 1980 Gore Langton R E and Armstrong D T Follicular stoidogenesis and its control In The physiology of Reproduction Ed Knobil E and Neill J et al pp 331 85 Raven Press New York 1988 Hall P F Testicular Steroid Synthesis Organization and Regulation In The Physiology of Reproduction Ed Knobil E and Neill J et al pp 975 98 Raven Press New York 1988 Siiteri P K Murai J T Hammond G L Nisker J A Raymoure W J and Kuhn R W The serum transport of steroid hormones Rec Prog Horm Res 38 457 510 1982 Martin B Rotten D Jolivet A and Gautray J P Binding of steroids by proteins in follicular fluid of the human ovary J Clin Endicrinol Metab 35 443 47 1981 Baird D T Ovarian steroid secretion and metabolism in women In The Endocrine Function of the Human Ovary Eds James V H T Serio M and Giusti G pp 125 33 Academic Press New York 1976 McNastty K P Baird D T Bolton a Chambers P Corker C S and McLean
52. ittelt Automatische Methode Die in der Arbeitsanleitung ermittelten Werte wurden automatisch mit Hilfe der 4 Parameter Gleichung 4 PL 4 Parameter Logistics 4 Parameter Rodbard bestimmt Andere Auswertungsfunktionen k nnen leicht abweichende Werte ergeben Die Konzentration der Proben kann direkt von der Standardkurve abgelesen werden Proben die eine h here Konzentration als die des h chsten Standards enthalten m ssen verd nnt werden Dieser Verd nnungsfaktor muss bei der Berechnung der Konzentration beachtet werden 6 3 1 Beispiel f r eine Standardkurve Nachfolgend wird ein typisches Beispiel f r eine Standardkurve mit dem DEMEDITEC ELISA gezeigt Diese Werte sollten nicht zur Berechnung von Patientendaten verwendet werden Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 15 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 7 ERWARTETE WERTE Es wird empfohlen dass jedes Labor seine eigenen normalen und abnormalen Werte ermittelt In einer Studie wurden die Proben von gesunden Erwachsenen untersucht Dabei ergaben sich mit dem DEMEDITEC Estradiol ELISA folgende Werte Population 5 95 Perzentile 10 36 pg mL Frauen pre menopausal 13 191 pg mL post menopausal 11 65 pg mL 8 QUALITATS KONTROLLE Es wird empfohlen die Kontrollproben gem den n
53. ivity and precision of this assay is markedly influenced by the correct performance of the washing procedure 6 Add 200 uL of Substrate Solution to each well 7 Incubate for 30 minutes at room temperature 8 Stop the enzymatic reaction by adding 100 uL of Stop Solution to each well 9 Determine the absorbance OD of each well at 450 10 nm with a microtiter plate reader It is recommended that the wells be read within 10 minutes after adding the Stop Solution 6 3 Calculation of Results 1 Calculate the average absorbance values for each set of standards controls and patient samples 2 Construct a standard curve by plotting the mean absorbance obtained from each standard against its concentration with absorbance value on the vertical Y axis and concentration on the horizontal X axis 3 Using the mean absorbance value for each sample determine the corresponding concentration from the standard curve 4 Automated method The results in the IFU have been calculated automatically using a 4 PL 4 Parameter Logistics curve fit 4 Parameter Logistics is the preferred method Other data reduction functions may give slightly different results 5 The concentration of the samples can be read directly from this standard curve Samples with concentrations higher than that of the highest standard have to be further diluted For the calculation of the concentrations this dilution factor has to be taken into account Demeditec Diagnostics GmbH e L
54. lle sostanze nocive e Non utilizzare i reagenti dopo la scadenza indicata sul kit e Ogni indicazione sulla quantit indicata del protocollo del kit deve essere accuratamente seguito Risultati ottimali possono essere ottenuti soltanto con l uso di pipette calibrate e spettrofotometro calibrato e Componenti del kit con numeri di lotto diversi non devono essere combinati consigliabile di non utilizzare pozzetti di piastre diversi anche se si tratta dello stesso lotto kit potrebbero essere stati magazzinati o spediti a condizioni diverse cosicch le caratteristiche di legame potrebbero divergere leggermente e componenti chimici e reagenti preparati o gi utilizzati devono essere trattati e smaltiti secondo le norme di sicurezza nazionali sulle sostanze nocive e regolamenti di sicurezza di questo prodotto possono essere richiesti direttamente dalla ditta Demeditec Diagnostics GmbH regolamenti di sicurezza corrispondono alle norme EU 91 155 EC Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany io 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 18 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 4 COMPONENTI DEL KIT 4 1 Contenuto del kit 1 Microtiterwells Micropozetti 12x8 file separatamente staccabili 96 pozzetti Pozzetti ricoperti con l anti Estradiolo anticorpo policlonale 2 Standard Standard 0 4 5 flacon
55. ns en cas de r clamation la responsabilit du fabricant n est pas de d passer les limites de la valeur du kit Tout dommage caus au kit lors de son transport n est pas du ressort de la responsabilit du fabricant 12 REFERENCES Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany bed 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 35 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 SYMBOLS USED WITH DEMEDITEC ASSAY S Symbol English Deutsch Francais Espanol Italiano M M European Conformity CE Konfirmit ts kennzeichnung Conforme aux normes europ ennes Conformidad europea Conformit europea Consult instructions for use Gebrauchsanweisung beachten Consulter les instructions d utilisation Consulte las Instrucciones Consultare le istruzioni per l uso BE In vitro diagnostic device In vitro Diagnostikum Ussage Diagnostic in vitro Diagn stico in vitro Per uso Diagnostica in vitro Nur f r Seulement dans le S lo para uso en rae RUO For research use only Forschungszwecke cadre de recherches investigacion Soloa Scopodiri erca Catalogue number Katalog Nr R f rence N mero de cat logo No di Cat Lot No Batch code Chargen Nr No de lot N mero de lote Lotto no Contains suffic
56. ns and reagents Microbial contamination of reagents or specimens may give false results e Handling should be in accordance with the procedures defined by an appropriate national biohazard safety guideline or regulation e Do not use reagents beyond expiry date as shown on the kit labels e All indicated volumes have to be performed according to the protocol Optimal test results are only obtained when using calibrated pipettes and microtiterplate readers e Do not mix or use components from kits with different lot numbers It is advised not to exchange wells of different plates even of the same lot The kits may have been shipped or stored under different conditions and the binding characteristics of the plates may result slightly different e Chemicals and prepared or used reagents have to be treated as hazardous waste according the national biohazard safety guideline or regulation e Safety Data Sheets for this product are available upon request directly from Demeditec Diagnostics GmbH The Safety Data Sheets fit the demands of EU Guideline 91 155 EC 4 REAGENTS 4 1 Reagents provided 1 Microtiterwells 12x8 break apart strips 96 wells Wells coated with a anti Estradiol antibody polyclonal 2 Standard Standard 0 4 5 vials 1 mL ready to use Concentrations 0 3 10 50 200 pg mL Conversion 1 pg mL 3 67 pmol L contain 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate as preservatives 3 Sample Diluent 1 vial 3 mL ready
57. nt d obtenir un m lange parfait lors de cette tape Incuber pendant 4 heures a temp rature ambiante D canter le contenu des puits et rincer les puits 3 fois avec de la Wash Solution dilu e 400 uL par puits Tapoter les puits sur du papier absorbant afin d liminer les gouttelettes r siduelles Remarque importante La sensibilit et la pr cision de ce test sont fortement d pendantes de la bonne r alisation des tapes de lavage Ajouter 200 uL de Substrate Solution chaque puits Incuber pendant 30 minutes a temp rature ambiante Stopper la r action enzymatique en ajoutant 100 uL de Stop Solution a chaque puits Lire la densit optique a 450410 nm l aide d un spectrophotom tre lecteur de micro plaques dans les 10 minutes apr s avoir ajout la Stop Solution 6 3 Calcul des r sultats Calculer les valeurs moyennes des densit s optiques pour chaque s rie de standards contr les et chantillons Etablir la courbe talon en reportant la densit optique moyenne de chaque valeur standard en fonction de sa concentration en posant la densit optique en axe des ordonn es et la concentration en axe des abscisses L utilisation de la densit optique moyenne pour chaque chantillon d termine la concentration correspondante a partir de la courbe talon M thode automatique Les r sultats dans le IFU ont t calcul s de facon automatique en utilisant une courbe de r gression 4 PL 4 Parameter Logistic
58. nzien Alle Reagenzien sowie die ben tigte Anzahl von Wells sollen vor dem Gebrauch auf Raumtemperatur gebracht werden Wash Solution Die 40 fach konzentrierte Wash Solution 30 mL mit 1170 mL destilliertem Wasser auf ein Gesamtvolumen von 1200 mL verd nnen Die verd nnte Waschl sung ist bei Raumtemperatur f r 2 Wochen stabil 4 4 Entsorgung des Kits Die Entsorgung des Kits muss gem den nationalen gesetzlichen Vorschriften erfolgen Spezielle Informationen f r dieses Produkt finden Sie im Materialsicherheitsdatenblatt Kapitel 13 Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 13 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 4 5 Besch digte Testkits Im Falle einer starken Besch digung des Testkits oder der Komponenten muss die Firma DEMEDITEC in schriftlicher Form sp testens eine Woche nach Erhalt des Kits informiert werden Stark besch digte Einzelkomponenten sollten nicht f r den Testlauf verwendet werden Sie m ssen gelagert werden bis eine endg ltige L sung gefunden wurde Danach sollten Sie gem den offiziellen Richtlinien entsorgt werden 5 PROBENVORBEREITUNG Serum oder Plasma EDTA Heparin oder Zitratplasma kann in diesem Test als Probenmaterial eingesetzt werden Lip mische ikterische und oder stark h molysierte Proben sollten nicht verw
59. oid Cross Reactivity Steroid Cross Reactivity Estradiol 11 Desoxycorticosterone Estron 21 Desoxycortisol Estriol Dihydrotestosterone Androstenedione Dihydroepiandrosterone Androsterone 20 Dihydroprogesterone Corticosterone 11 Hydroxyprogesterone 17a Hydroxyprogesterone 17a Pregnenolone 17a Progesterone Pregnanediol Pregnantriol Pregnenolone Progesterone Testosterone o Epiandrosterone 16 Epiestriol Estradiol 3 sulfate Estradiol 3 glucuronide Estradiol 17a Estriol 16 glucuronide Estrone 3 sulfate Dehydroepiandrosterone 11 Desoxycortisol ooooooooooo0o000o0 O0000000000 9 3 Analytical Sensitivity The analytical sensitivity was calculated from the mean minus two standard deviations of twenty 20 replicate analyses of Standard O and was found to be lt 1 399 pg mL 9 4 Precision 9 4 1 Intra Assay Variation The within assay variability is shown below sample n Mean pgimb even 9 4 2 Inter Assay Variation The between assay variability is shown below Sample n Mean pgimt Cv Ca Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 9 5 Recovery Samples have been spiked by adding Estradiol solutions with known concentrations in a 1 1 ratio The expected values were calcul
60. olge Reklamationen die aufgrund von Falschinterpretation von Laborergebnissen durch den Kunden gem Punkt 11 2 erfolgen sind ebenfalls abzuweisen Im Falle jeglicher Reklamation ist die Haftung des Herstellers maximal auf den Wert des Testkits beschr nkt Jegliche Sch den die w hrend des Transports am Kit entstanden sind unterliegen nicht der Haftung des Herstellers 12 REFERENZEN Angaben zu den Referenzen entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 17 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 1 INTRODUZIONE Il test immuno enzimatico DEMEDITEC Estradiol sensitive ELISA contiene materiale per la determinazione quantitativa di Estradiolo in siero e plasma Questo test kit adatto soltanto per l uso diagnostico 2 PRINCIPIO DEL TEST Il test DEMEDITEC Estradiol sensitive ELISA un test immunologico in fase solida con enzimi ancorati su un substrato ELISA basato sul principio del legame competitivo micropozzetti sono ricoperti con un anticorpo diretto contro un unico sito antigenico della molecola Estradiolo Estradiolo endogeno di un campione compete con il Estradiolo coniugato alla per ossidasi di rafano per il sito di legame sull anticorpo ancorato nel micropozzo Dopo l incubazione
61. presentaci n de la absorbancia media obtenida para cada est ndar frente a su concentraci n con el valor de absorbancia en el eje vertical Y y la concentraci n en el eje horizontal X Usando el valor de absorbancia media de cada muestra determinar la concentraci n correspondiente a partir de la curva est ndar M todo automatizado Los resultados en la IFU se han calculado autom ticamente usando una curva de regresi n 4 PL 4 Par metros Log sticos Otras funciones de regresi n dar n lugar a resultados sensiblemente diferentes La concentraci n de las muestra puede leerse directamente de la curva de est ndares Las muestras con concentraciones superiores al mayor est ndar han de diluirse Para el c lculo de las concentraciones hay que tener en cuenta el factor de diluci n 6 3 1 Ejemplo de una Curva Est ndar Tipica Los siguientes datos son solamente para la explicaci n y no pueden ser utilizados en lugar de los datos generados en el momento del ensayo Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany bed 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 27 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 7 VALORES ESPERADOS Se recomienda encarecidamente que cada laboratorio determine sus valores normales e inusuales En un estudio con adultos aparentemente sanos utilizando el DEMEDITEC Estradiol ELISA se observaron
62. rdo a las instrucciones del fabricante Mas a n el usuario debe ajustarse estrictamente a las reglas BPL Buenas Pr cticas de Laboratorio o a otros est ndares y o leyes nacionales aplicables Esto es especialmente relevante para el uso de reactivos control Es importante incluir siempre dentro del procedimiento de ensayo un n mero suficiente de controles para validar la exactitud y la precisi n del ensayo Los resultados del ensayo son v lidos s lo si todos los controles se encuentran dentro de los rangos especificados y si todos los otros par metros del ensayo se encuentran dentro de las especificaciones dadas para el ensayo En cado de alguna duda o inquietud por favor contactar con DEMEDITEC 11 2 Consecuencias Terap uticas Las consecuencias terap uticas nunca deben basarse s lo en los resultados de laboratorio incluso si todos los resultados del ensayo est n de acuerdo con los asuntos fijados en el punto 11 1 Cualquier resultado de laboratorio es solamente una parte del cuadro cl nico de un paciente Solamente en los casos donde los resultados de laboratorio est n en acuerdo con todo el cuadro cl nico de un paciente se pueden derivar consecuencias terap uticas Nunca deben derivarse consecuencias terap uticas a partir de solamente el resultado obtenido en el ensayo 11 3 Responsabilidad Cualquier modificaci n del kit y o cambio o mezcla de cualquier componente procedentes de kits de lotes diferentes puede afectar negati
63. re smaltiti secondo le norme ufficiali 5 CAMPIONI Siero o plasma EDTA Eparina or citrate plasma pu essere usato per questo test Non usare campioni emolitici itterici o lipemici Attenzione Se i campioni contengono sodio azide non devono essere utilizzati per questo test 5 1 Collezione dei campioni Siero Collezionare sangue tramite puntura venale p es Sarstedt Monovette 02 1388 001 far coagulare e separare il siero centrifugando a temperatura ambiente Non centrifugare prima che la coagulazione sia completata Campioni di pazienti con una terapia anticoagulante possono richiedere pi tempo per la coagulazione Plasma Il sangue dovrebbe essere collezionato in tubetti da centrifuga contenenti un anticoagulante e centrifugando immediatamente dopo la puntura P es per EDTA plasma Sarstedt Monovette red cap 02 166 001 per eparina plasma Sarstedt Monovette orange cap 02 165 001 per citrate plasma Sarstedt Monovette green cap 02 167 001 5 2 Magazzinaggio dei campioni campioni dovrebbero essere magazzinati ben chiusi fino a 5 giorni a 2 8 C Campioni magazzinati per un periodo pi lungo dovrebbero essere congelati solo una volta a 20 C prima dell analisi Congelare soltanto una volta Invertire campioni scongelati alcune volte prima dell uso 5 3 Diluizione dei campioni Se in un campione di siero viene trovata una concentrazione oltre lo standard piu alto questo campione pu essere
64. reuzreaktivit t Die Daten entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung 9 3 Analytische Sensitivit t Die analytische Sensitivit t definiert als Mittelwert minus der zweifachen Standardabweichung des Standards 0 n 20 betr gt lt 1 399 pg mL Die Daten zu 9 4 Pr zision 9 5 Wiederfindung 9 6 Linearit t entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 16 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 10 GRENZEN DES TESTS 10 1 Interferenzen Jede unsachgem e Behandlung von Proben oder Modifikationen dieses Tests k nnen die Ergebnisse beeinflussen 10 2 Beeinflussung durch Medikamente Uns sind bislang keine Stoffe Medikamente bekannt geworden deren Einnahme die Messung des Estradiol Gehaltes der Probe beeinflussen w rde 10 3 High Dose Hook Effekt Ein Hook Effekt tritt in diesem Test nicht auf 11 RECHTLICHE GRUNDLAGEN 11 1 Zuverl ssigkeit der Ergebnisse Der Test muss exakt gemaB der Testanleitung des Herstellers abgearbeitet werden Dar ber hinaus muss der Benutzer sich strikt an die Regeln der GLP Good Laboratory Practice oder andere eventuell anzuwendende Regeln oder nationale gesetzliche Vorgaben halten Dies betrifft besonders den Gebrauch der Kont
65. rollreagenzien Es ist sehr wichtig bei der Testdurchf hrung stets eine ausreichende Anzahl Kontrollen zur berpr fung der Genauigkeit und Pr zision mitlaufen zu lassen Die Testergebnisse sind nur g ltig wenn alle Kontrollen in den vorgegebenen Bereichen liegen und wenn alle anderen Testparameter die vorgegebenen Spezifikationen f r diesen Assay erf llen Wenn Sie bez glich eines Ergebnisses Zweifel oder Bedenken haben setzen Sie sich bitte mit der Firma DEMEDITEC in Verbindung 11 2 Therapeutische Konsequenzen Therapeutische Konsequenzen sollten keinesfalls nur aufgrund von Laborergebnissen erfolgen selbst dann nicht wenn alle Testergebnisse mit den in 11 1 genannten Voraussetzungen bereinstimmen Jedes Laborergebnis ist nur ein Teil des klinischen Gesamtbildes eines Patienten Nur in Fallen in denen die Laborergebnisse in akzeptabler Ubereinstimmung mit dem allgemeinen klinischen Bild des Patienten stehen sollten therapeutische Konsequenzen eingeleitet werden Das Testergebnis allein sollte niemals als alleinige Grundlage f r die Einleitung therapeutischer Konsequenzen dienen 11 3 Haftung Jegliche Ver nderungen des Testkits und oder Austausch oder Vermischung von Komponenten unterschiedlicher Chargen von einem Testkit zu einem anderen k nnen die gew nschten Ergebnisse und die Gultigkeit des gesamten Tests negativ beeinflussen Solche Ver nderungen und oder Austausch haben den Ausschluss jeglicher Ersatzanspr che zur F
66. s D autres fonctions logistiques peuvent donner des r sultats l g rement diff rents La concentration des chantillons peut tre lue directement partir de cette courbe talon Les chantillons avec une concentration sup rieure celle du plus haut standard doivent tre dilu s de nouveau Pour le calcul des concentrations ce facteur de dilution doit tre pris en consid ration 6 3 1 Exemple typique de courbe talon Ci dessous est repr sent un exemple typique de courbe talon r alis e avec le DEMEDITEC ELISA Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 33 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 7 VALEURS ATTENDUES Il est fortement recommand a chaque laboratoire de d terminer ses propres valeurs normales ou anormales Dans une tude r alis e avec des adultes normaux et sains a l aide du kit DEMEDITEC Estradiol ELISA les valeurs suivantes sont observ es Population 5 95 Pourcentage 10 36 pg mL Femmes pr m nopaus es 13 191 pg mL post m nopaus es 11 65 pg mL 8 CONTROLE DE QUALITE Il est recommand d utiliser les chantillons contr les selon les r glementations nationales en vigueur L utilisation des chantillons contr les est recommand afin de s assurer jour apr s jour de la validit des r sul
67. s Use controls at both normal and pathological levels The controls and the corresponding results of the QC Laboratory are stated in the QC certificate added to the kit The values and ranges stated on the QC sheet always refer to the current kit lot and should be used for direct comparison of the results It is also recommended to make use of national or international Quality Assessment programs in order to ensure the accuracy of the results Employ appropriate statistical methods for analysing control values and trends If the results of the assay do not fit to the established acceptable ranges of control materials patient results should be considered invalid In this case please check the following technical areas Pipetting and timing devices photometer expiration dates of reagents storage and incubation conditions aspiration and washing methods After checking the above mentioned items without finding any error contact your distributor or DEMEDITEC directly Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jorn 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 7 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 9 ASSAY CHARACTERISTICS 9 1 Assay Dynamic Range The range of the assay is between 0 200 pg mL 9 2 Specificity of Antibodies Cross Reactivity The following substances were tested for cross reactivity of the assay Ster
68. s in der Halterung befestigen Je 100 uL Standard Control und Proben mit neuen Plastikspitzen in die entsprechenden Wells geben 200 uL Enzyme Conjugate in jedes Well geben F r 10 Sekunden gut sch tteln Es ist sehr wichtig in diesem Schritt eine komplette Durchmischung zu erreichen 4 Stunden bei Raumtemperatur inkubieren Den Inhalt der Wells kr ftig aussch tteln Wells 3mal mit verd nnter Wash Solution waschen Verbleibende Fl ssigkeit durch Ausklopfen der Wells auf saugf higem Papier entfernen Achtung Die Sensitivit t und Pr zision dieses Assays wird erheblich beeinflusst von der korrekten Durchf hrung des Waschschrittes 200 uL Substrate Solution in jedes Well geben 30 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren Die enzymatische Reaktion durch Zugabe von 100 uL Stop Solution in jedes Well abstoppen Die Optische Dichte bei 450110 nm mit einem Mikrotiterplatten Leseger t innerhalb von 10 Minuten nach Zugabe der Stop Solution bestimmen 6 3 Ergebnisermittlung Die durchschnittlichen Werte der Optischen Dichte OD f r jedes Set von Standards Controls und Patientenproben bestimmen Eine Standardkurve ermitteln durch Auftragen der mittleren Optischen Dichte jedes Standards gegen die Konzentration wobei der OD Wert auf der vertikalen Y Achse und die Konzentration auf der horizontalen X Achse eingetragen wird Unter Verwendung der mittleren OD wird f r jede Probe die entsprechende Konzentration aus der Standardkurve erm
69. tali o disposizioni legali Questo vale soprattutto per l uso delle referenze E molto importante utilizzare un numero appropriato di referenze in parallelo ai campioni test per poter controllare l esattezza e la precisione del test risultati del test sono validi soltanto se tutte le referenze cadono nei margini prestabiliti e se tutti gli altri parametri del test soddisfano la specificazione per questo test Se esistono dubbi o domande su questi risultati si prega di contattare la ditta DEMEDITEC 11 2 Conseguenze terapeutiche Soltanto sulla base dei risultati dei laboratori non dovrebbero essere intraprese delle conseguenze terapeutiche di alcun tipo anche se i risultati del test sono d accordo con gli aspetti articolati nel punto 11 1 Ogni risultato di laboratorio soltanto una parte di un quadro clinico completo di un paziente Soltanto in casi in cui i risultati di un test del laboratorio si accordano con il quadro clinico dell ammalato si possono intraprendere delle conseguenze terapeutiche Il risultato del test da solo non base sufficiente per lo stabilimento di una terapia 11 3 Responsabilit legali Ogni cambiamento del protocollo del test e o lo scambio o il mescolamento di componenti provenienti da cariche diverse possono influenzare negativamente i risultati e compromettere la validit del test Questi cambiamenti e o scambi annullano ogni diritto al risarcimento Si respingano inoltre tutti i richiami risultanti d
70. tats Utiliser les contr les de valeurs normales et pathologiques Les contr les et les r sultats correspondants issus du laboratoire QC sont mentionn s dans le certificat QC fourni avec le kit Les valeurs et les limites mentionn es sur la fiche QC font toujours r f rence au lot de kit courant et doivent tre utilis es pour une comparaison directe avec les r sultats Il est galement recommand d utiliser les programmes d valuation de qualit nationaux ou internationaux afin de s assurer de l exactitude des r sultats Utiliser les m thodes d analyses statistiques appropri es pour l analyse des valeurs contr les et des tendances Si les r sultats ne correspondent pas aux limites tablies des contr les les r sultats concernant ces patients doivent tre consid r es comme non valides Dans ce cas tester les zones techniques suivantes m canisme de pipettage et temps spectrophotom tre dates d expiration des r actifs conditions de stockage et d incubation m thodes d aspiration et de lavage Apr s avoir tester les points mentionn s si aucune erreur n est d tect e contacter votre distributeur ou directement la DEMEDITEC 9 CARACTERISTIQUES DU TEST 9 1 Zone de mesure Les limites du dosage sont comprises entre 0 200 pg mL 9 2 Sp cificit des anticorps R action crois e Voir le manuel d utilisateur en version anglaise 9 3 Sensibilit de l analyse La sensibilit de l analyse a t calcul e
71. um das gleiche Lot handelt Die Kits k nnen unter anderen Bedingungen gelagert oder versendet worden sein so dass die Bindungscharakteristik der Platten leicht unterschiedlich ausf llt e Chemikalien und zubereitete oder bereits benutzte Reagenzien m ssen gem den nationalen Gefahrenstoffvorschriften wie gef hrlicher Abfall behandelt werden e Materialsicherheitsdatenbl tter f r dieses Produkt sind auf Anfrage direkt von der Firma Demeditec Diagnostics GmbH erh ltlich Die Materialsicherheitsdatenbl tter entsprechen den Verordnungen der EU Richtlinie 91 155 EC Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany io 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 12 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 4 BESTANDTEILE DES KITS 4 1 Kitinhalt 1 Microtiterwells 96 Wells 12x8 Wells einzeln brechbar mit anti Estradiol Antik rper polyklonal beschichtet 2 Standard Standard 0 4 5 Fl schchen je 1 m l gebrauchsfertig Konzentrationen 0 3 10 50 200 pg mL Umrechnungsfaktor 1 pg mL 3 67 pmol L Enth lt 0 03 Proclin 300 und 0 005 Gentamycinsulfat als Konservierungsstoffe 3 Sample Diluent Probenverd nnungsmedium 1 Fl schchen 3 m l gebrauchsfertig Enth lt 0 03 Proclin 300 und 0 005 Gentamycinsulfat als Konservierungsstoffe 4 Enzyme Conjugate Enzymkonjugat 1 Fl schchen 25 m l gebrauchsf
72. utilizzare i campioni controllo secondo le norme di legge Attraverso l utilizzo dei campioni controllo si pu raggiungere una verifica dei risultati giorno per giorno Dovrebbero essere adoperati campioni controllo sia con un livello normale sia con uno patologico Le referenze con i rispettivi risultati del laboratorio QC sono elencati nel QC certificato che allegato al kit valori riportati nel QC certificato si riferiscono al lotto del kit attuale e dovrebbero essere utilizzati per un raffronto dei risultati E altres consigliabile di partecipare a programmi di sicurezza sulla qualit nazionali o internazionali per assicurarsi dell esattezza dei risultati Appropriati metodi statistici per l analisi dei valori controllo e delle rappresentazioni grafici dovrebbero essere adoperati Nel caso che i risultati del test non combaciano con il campo di accettazione indicato dal materiale di controllo i risultati dei pazienti devono essere considerati invalidi In questo caso si prega di controllare i seguenti fattori d errore pipette cronometri fotometro data di scadenza dei reagenti condizione di magazzinaggio e d incubazione metodi di aspirazione e di lavaggio Se dopo il controllo dei suddetti fattori non rilevabile alcun errore si prega di contattare il fornitore o direttamente la ditta DEMEDITEC 9 CARATTERISTICHE DEL TEST 9 1 Assay Dynamic Range Le concentrazioni determinabili con questo test stanno tra 0 200 pg mL 9
73. vamente a los resultados esperados y en la validez de todo el test Esas modificaciones y o cambios invalidad cualquier reclamaci n de reposici n Las reclamaciones emitidas debidas a una mala interpretaci n de los resultados de laboratorio por parte del comprador referidos al punto 11 2 son tambi n inv lidas A pesar de todo en el caso de cualquier reclamaci n la responsabilidad del fabricante no excede el valor del kit Cualquier da o provocado al kit durante su transporte no est sujeto a la responsabilidad del fabricante 12 REFERENCIAS Consultar el manual de usuario en ingl s Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany bed 4 07 09 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090818 Email info demeditec de e http www demeditec com 29 Demeditec Estradiol sensitive ELISA DE4399 1 INTRODUCTION Le kit de dosage immuno enzymatique DEMEDITEC Estradiol sensitive ELISA propose les mat riaux requis pour la mesure quantitative d oestradiol dans le s rum ou le plasma Ce kit est utiliser uniquement dans le cadre de tests diagnostiques in vitro 2 PRINCIPE DU TEST Le kit DEMEDITEC Estradiol sensitive ELISA est bas sur une r action immuno enzymatique comp titive Les micro plaques sont recouvertes avec un anticorps polyclonal dirig contre un antig ne sp cifique de la mol cule oestradiol L oestradiol endog ne contenu e dans l chantillon du patient entre en comp tit

DE4399 Estradiol US 1

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