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LH ELISA (Serum)

1. 1 INTRODUZIONE Il test immuno enzimatico DEMEDITEC LH contiene materiale per la determinazione quantitativa di ormone luteinizzante LH in siero Questo test kit adatto soltanto per l uso diagnostico 2 PRINCIPIO DEL TEST Il test kit DEMEDITEC LH ELISA un test immunologico in fase solida con enzimi ancorati su un substrato ELISA basato sul principio sandwich micropozzetti sono ricoperti con un anticorpo monoclonale diretto contro un unico sito antigenico su una molecola LH Un aliquota di un campione di paziente contenente LH endogena viene incubato nel pozzetto ricoperto dell enzima coniugato che un anticorpo anti LH monoclonale coniugato alla perossidasi di rafano Dopo l incubazione il coniugato non legato eliminato attraverso lavaggi La quantit della perossidasi legata proporzionale alla concentrazione LH nel campione Dopo l aggiunta della soluzione substrato l intensit del colore sviluppato proporzionale alla concentrazione di LH nel campione del paziente PRECAUZIONI Questo kit adatto soltanto per l uso diagnostico in vitro Informazioni su sostanze pericolose contenute nel kit sono riportate nel regolamento di sicurezza Tutti i componenti del kit che contengono siero o plasma umano sono controllati e confermati negativi per la presenza di HIV I II HosAg e HCV con metodi conformi alle norme FDA Ciononostante tutti i componenti dovrebbero essere trattati come potenziali sostanze nocive ne
2. de Proclin 300 0 015 BND et 0 010 MIT comme agent de conservation 3 Enzyme Conjugate Conjugu enzymatique 1 flacon 11 mL pr t l emploi Anticorps anti LH conjugu la HRP contient 0 03 de Proclin 300 0 015 BND et 0 010 MIT comme agent de conservation 4 Substrate Solution Solution substrat 1 flacon 14 mL pr t l emploi T tram thylbenzidine TMB 5 Stop Solution Solution d arr t 1 flacon 14 mL pr t l emploi contient 1N acide solution Eviter les contacts avec la solution stop Cela pourrait engendrer irritations ou br lures de la peau BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane Bromonitrodioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one M thylisothiazolone Remarque Un Standard O suppl mentaire peut tre fourni sur demande 4 2 Equipement et mat riel requis mais non fournis Un spectrophotom tre lecteur de micro plaques calibr 450 10 nm Des micro pipettes de pr cision variables et calibr es Du papier absorbant De l eau distill e 4 3 Stockage et stabilit du kit Les r actifs contenus dans des flacons non ouverts stock s 2 C 8 C seront stables jusqu la date d expiration inscrite sur l tiquette Ne pas utiliser les r actifs au del de cette date Les r actifs contenus dans des flacons ouverts doivent tre stock s 2 C 8 C Les micro plaques doivent tre stock es 2 C 8 C Une fois la capsule d aluminium ouverte attention
3. 1 2 oo No Disposer le nombre de puits de micro titration d sir dans le support D poser 25 uL de chaque Standard Control et les chantillons avec de nouveaux c nes de pipette dans les puits appropri s D poser 100 uL d Enzyme Conjugate dans chaque puits Bien m langer pendant 10 secondes Il est important d obtenir un m lange parfait lors de cette tape Incuber pendant 30 minutes temp rature ambiante D canter le contenu des puits et rincer les puits 5 fois avec de l eau distill e 400 uL par puits Tapoter les puits sur du papier absorbant afin d liminer les gouttelettes r siduelles Remarque importante La sensibilit et la pr cision de ce test sont fortement d pendantes de la bonne r alisation des tapes de lavage Ajouter 100 pL de Substrate Solution chaque puits Incuber pendant 10 minutes temp rature ambiante Stopper la r action enzymatique en ajoutant 50 uL de Stop Solution chaque puits Lire la densit optique 450 10 nm l aide d un spectrophotom tre lecteur de micro plaques dans les 10 minutes apr s avoir ajout la Stop Solution Calcul des r sultats Calculer les valeurs moyennes des densit s optiques pour chaque s rie de standards contr les et chantillons Etablir la courbe talon en reportant la densit optique moyenne de chaque valeur standard en fonction de sa concentration en posant la densit optique en axe des ordonn es et la concentration en ax
4. 1 Substances parasites L h moglobine jusqu 4 mg mL la bilirubine jusqu 0 5 mg mL et les triglyc rides jusqu 30 mg mL n ont aucune influence sur les r sultats du dosage 10 2 Drogues parasites Jusqu pr sent nous ne connaissons aucune substance drogues capable d influencer la mesure de LH dans un chantillon 10 3 Effet de surdosage Jusqu 10 000 mIU mL of LH aucun effet de surdosage n a t d tect avec ce test 11 ASPECTS LEGAUX 11 1 Fiabilit des r sultats Ce test doit tre exactement utilis selon les instructions d utilisation du fabricant De plus les utilisateurs doivent strictement respecter les r gles de la bonne pratique de laboratoire ou autres lois nationales Cela est sp cialement le cas pour l utilisation des r actifs contr les Pour chaque test il est important d inclure un nombre suffisant de contr les afin de pouvoir valider l exactitude et la pr cision du test Les r sultats du test sont valides si et seulement si tous les contr les sont compris dans les gammes de mesure mentionn es et si tous les autres param tres du test sont galement compris dans les instructions de ce test En cas de doute ou d inqui tude contacter la DEMEDITEC 11 2 Cons quences th rapeutiques Les suites th rapeutiques ne devront jamais tre bas es sur les r sultats de laboratoire seuls m me si les tous les r sultats du test sont en accord avec les points mentionn s dans le
5. 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 4 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 5 SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION Only serum should be used in this assay Do not use haemolytic icteric or lipaemic specimens Please note Samples containing sodium azide should not be used in the assay 5 1 Specimen Collection Serum Collect blood by venipuncture e g Sarstedt Monovette 02 1388 001 allow to clot and separate serum by centrifugation at room temperature Do not centrifuge before complete clotting has occurred Patients receiving anticoagulant therapy may require increased clotting time 5 2 Specimen Storage and Preparation Specimens should be capped and may be stored for up to 48 hours at 2 C to 8 C prior to assaying Specimens held for a longer time should be frozen only once at 20 C prior to assay Thawed samples should be inverted several times prior to testing 5 3 Specimen Dilution If in an initial assay a specimen is found to contain more than the highest standard the specimens can be diluted with Standard 0 and reassayed as described in Assay Procedure For the calculation of the concentrations this dilution factor has to be taken into account Example a dilution 1 10 10 uL Serum 90 uL Standard O mix thoroughly b dilution 1 100 10 uL dilution a 1 10 90 uL Standard O mix thoroughly 6 ASSAY PROCEDURE 6 1 Gene
6. Der Gebrauch sollte gem der Vorschriften einer entsprechenden nationalen Gefahrenstoff Sicherheitsrichtlinie erfolgen e Reagenzien nicht nach dem auf dem Kit Etikett angegebenen Verfallsdatum verwenden e Alle im Kit Protokoll angegebenen Mengen m ssen genau eingehalten werden Optimale Ergebnisse k nnen nur durch Verwendung kalibrierter Pipetten und Mikrotiterplatten Leseger te erreicht werden Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 11 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 e Komponenten von Kits mit unterschiedlichen Lotnummern nicht untereinander vertauschen Es wird empfohlen keine Wells von verschiedenen Platten zu verwenden auch nicht wenn es sich um das gleiche Lot handelt Die Kits k nnen unter anderen Bedingungen gelagert oder versendet worden sein so dass die Bindungscharakteristik der Platten leicht unterschiedlich ausf llt e Chemikalien und zubereitete oder bereits benutzte Reagenzien m ssen gem den nationalen Gefahrenstoffvorschriften wie gef hrlicher Abfall behandelt werden e Materialsicherheitsdatenblatter f r dieses Produkt sind auf Anfrage direkt von der Firma DEMEDITEC Diagnostics GmbH erh ltlich Die Materialsicherheitsdatenbl tter entsprechen den Verordnungen der EU Richtlinie 91 155 EC 4 BESTANDTEILE DES KITS 4 1 Kitinhalt 1 Mi
7. El Kit DEMEDITEC LH ELISA es un ensayo en fase s lida de inmunoadsorci n unido a enzimas ELISA basado en el principio del s ndwich Los pocillos de las placas est n recubiertos con un anticuerpo monoclonal policlonal dirigido contra un nico foci antig nico en una mol cula de Hormona Luteinizante Se incuba una al cuota de una muestra perteneciente a un paciente que contiene Hormona Luteinizante end gena en los pocillos recubiertos con el enzima conjugado que es un anticuerpo anti Hormona Luteinizante conjugado con la peroxidasa end gena Despu s de la incubaci n se lava el conjugado que no se ha unido La cantidad de peroxidasa unida es proporcional a la concentraci n de Hormona Luteinizante en la muestra Cuando se a ade la soluci n del sustrato de la peroxidasa la intensidad del color desarrollado es proporcional a la concentraci n de Hormona Luteinizante en la muestra del paciente 3 PRECAUCIONES e Este kit es solamente para diagn stico in vitro e Para obtener informaci n de las sustancias peligrosas incluidas en el kit por favor mirar las hojas de los datos de seguridad del material e Todos los reactivos en este kit de ensayo que contienen suero o plasma humano se han ensayado y confirmado ser negativos para HIV I II HBsAg y HCV mediante procedimientos aprobados por la FDA Sin embargo todos los reactivos deben ser tratados tanto en su uso como dispensaci n como potencialmente biopeligrosos e Evitar contacto con St
8. NORMALI E consigliabile che ogni laboratorio determini i propri valori normali e anormali LH mimi Donne fase follicolare e luteale incremento di LH 20 200 Donne dopo la menopausa 20 100 8 CONTROLLO QUALIT E consigliabile utilizzare i campioni controllo secondo le norme di legge Attraverso l utilizzo dei campioni controllo si pu raggiungere una verifica dei risultati giorno per giorno Dovrebbero essere adoperati campioni controllo sia con un livello normale sia con uno patologico Le referenze con i rispettivi risultati del laboratorio QC sono elencati nel QC certificato che allegato al kit valori riportati nel QC certificato si riferiscono al lotto del kit attuale e dovrebbero essere utilizzati per un raffronto dei risultati E altres consigliabile di partecipare a programmi di sicurezza sulla qualit nazionali o internazionali per assicurarsi dell esattezza dei risultati Appropriati metodi statistici per l analisi dei valori controllo e delle rappresentazioni grafici dovrebbero essere adoperati Nel caso che i risultati del test non combaciano con il campo di accettazione indicato dal materiale di controllo i risultati dei pazienti devono essere considerati invalidi In questo caso si prega di controllare i seguenti fattori d errore pipette cronometri fotometro data di scadenza dei reagenti condizione di magazzinaggio e d incubazione metodi di aspirazione e di lavaggio Se dopo il controllo dei sud
9. a bien refermer le flacon Les kits ouverts conservent leur activit durant 6 semaines s ils sont stock s comme pr c demment mentionn 4 4 Pr paration des r actifs Amener tous les r actifs et le nombre de barrettes n cessaires au test temp rature ambiante avant utilisation Standards Reconstituer le contenu lyophilis des flacons de standards avec 1 0 mL d eau distill e Remarque Les standards reconstitut s sont stables deux mois 2 8 Pour un stockage prolong congeler a 20 4 5 Elimination des d chets relatifs au kit L limination des d chets relatifs au kit doit tre r alis e selon les r gles nationales en vigueur Les informations sp cifiques au kit sont pr sent es dans la fiche de s curit voir chapitre 13 4 6 Kits endommag s Dans le cas de dommages importants survenus au kit ou ses composants informer la DEMEDITEC au plus tard une semaine apr s r ception du kit Les composants endommag s ne doivent pas tre utilis s pour le test Ils doivent tre stock s jusqu ce qu une solution adapt e ait t trouv e Apr s cela ils doivent tre limin s selon les directives officielles en vigueur Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 30 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 5 ECHANTILLON Seul du
10. a cada pocillo Leer la OD a 450 10 nm con un lector de microplacas dentro de los 10 minutos despu s de la adici n de la Stop Solution C lculo de los Resultados Calcular los valores de absorbancia media para cada conjunto de est ndares controles y muestras de pacientes Construir una curva estandar mediante la representaci n de la absorbancia media obtenida para cada estandar frente a su concentraci n con el valor de absorbancia en el eje vertical Y y la concentraci n en el eje horizontal X Usando el valor de absorbancia media de cada muestra determinar la concentraci n correspondiente a partir de la curva estandar M todo automatizado Los resultados en la IFU se han calculado autom ticamente usando una curva de regresi n 4 PL 4 Par metros Logisticos Otras funciones de regresi n dar n lugar a resultados sensiblemente diferentes La concentraci n de las muestra puede leerse directamente de la curva de est ndares Las muestras con concentraciones superiores al mayor est ndar han de diluirse Para el c lculo de las concentraciones hay que tener en cuenta el factor de diluci n 6 3 1 Ejemplo de una Curva Est ndar Tipica Los siguientes datos son solamente para la explicaci n y no pueden ser utilizados en lugar de los datos generados en el momento del ensayo Est ndar Unidades pticas 450 nm Standard 0 0 miUImL Standard 1 10 miu mL Standard 2 20 mlU mL Standard 3 40 mIUimL Standard 4 100
11. de los datos de seguridad de este producto est n disponibles bajo pedido directamente a Demeditec Daignostics GmbH Las hojas de los datos de seguridad se ajustan a las demandas de las gu a europea EU Guideline 91 155 EC Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 23 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 4 COMPONENTES DEL KIT 4 1 Componentes del Kit 1 Microtiterwells Placas multipocillo 12x8 tiras separables 96 pocillos Pocillos recubiertos con anticuerpo anti Hormona Luteinizante monoclonal 2 Standard Standard 0 5 Estandar 6 viales liofilizados 1 mL Concentraciones 0 10 20 40 100 200 mIU mL Los est ndares est n calibrados seg n WHO 2nd International Standard parar LH IRP 80 552 Ver Preparaci n de los Reactivos Contiene 0 03 Proclin 300 0 015 BND y 0 010 MIT como conservante 3 Enzyme Conjugate Conjugado enzim tico 1 vial 11 mL listo para usar Anticuerpo anti Hormona Luteinizante conjugado con la Peroxidasa de r bano Contiene 0 03 Proclin 300 0 015 BND y 0 010 MIT como conservante 4 Substrate Solution Soluci n de sustrato 1 vial 14 mL listo para usar Tetrametilbencidina TMB 5 Stop Solution Soluci n de parada 1 vial 14 mL listo para usar contiene 1 N cida soluci n Evitar el contacto con la So
12. die Hormone LH und FSH verantwortlich f r die zyklische Veranderungen der Ovarien wahrend des Menstruationszyklus Der pl tzliche Konzentrationsanstieg von LH in der Zyklusmitte ovulatorischer Peak bewirkt den Eisprung Die Bestimmung von LH und FSH dient bei Frauen der Diagnose von primarer und sekundarer Amenorrh e und oder von Menstruationszyklen ohne Eisprung Erh hte LH und FSH Werte signalisieren einen prim ren Defekt der Ovarien der im allgemeinen mit primarer Amenorrh e verbunden ist Bei Mannern stimuliert LH zusammen mit FSH die Spermiogenese und die Hormonproduktion in den Testes Hohe LH Werte weisen auf eine prim re Hodenfunktionsst rung hin Zusammenfassend kann gesagt werden dass die Bestimmung von LH sowie von FSH in einer Vielzahl von klinischen Fallen angewendet wird u a bei Verdacht auf Hypogonadismus zum exakten Timing LH Peak Suche zur Bestimmung des Eisprungs im Rahmen der weiblichen Sterilit tsbehandlung und zur berwachung der klinischen Verabreichung von Gonadotropinen 2 TESTPRINZIP Der DEMEDITEC LH ELISA ist ein Festphasen Enzymimmunoassay der auf der Sandwichtechnik basiert Die Wells der Mikrotiterplatten sind mit einem monoklonalen Antik rper beschichtet der gegen eine definierte Antik rper Bindungsstelle des LH Molek ls gerichtet ist Die Proben werden in die beschichteten Wells gegeben und mit einem Enzym Konjugat inkubiert Das Konjugat enth lt einen anti LH Antik rper der mit Meerrettichper
13. la fiche de s curit Material Safety Data Sheets e Tous les r actifs de ce kit contenant du s rum ou du plasma humain ont t test s avec des r sultats n gatifs pour le VIH I II le HBsAg et le HCV selon les normes FDA en vigueur N anmoins lors de leur utilisation tous les r actifs de ce kit doivent tre manipul s avec pr caution e Eviter les contacts avec la Stop Solution celle ci contient 0 5 M de H S0O Cela pourrait engendrer irritations ou br lures de la peau e Ne jamais pipeter avec la bouche et viter tout contact de la peau ou des muqueuses avec les r actifs ou les chantillons e Ne pas fumer manger boire ou utiliser des produits cosm tiques dans les zones o les chantillons ou le kit ont t mani s e Porter des gants d examen lors de l utilisation des chantillons ou des r actifs Une contamination microbienne des chantillons ou des r actifs pourrait fausser les r sultats e L utilisation de ce kit devra tre en accord avec les normes ou recommandations nationales de s curit en vigueur concernant les produits risque biologique e Ne pas utiliser les r actifs au del de la date d expiration inscrite sur l emballage e Tous les volumes indiqu s doivent tre scrupuleusement respect s comme indiqu dans le protocole exp rimental Seule l utilisation de pipettes calibr es ou d un spectrophotom tre lecteur de micro plaques calibr garantit l obtention de r sultats optima
14. or exchanges invalidate any claim for replacement Claims submitted due to customer misinterpretation of laboratory results subject to point 11 2 are also invalid Regardless in the event of any claim the manufacturer s liability is not to exceed the value of the test kit Any damage caused to the test kit during transportation is not subject to the liability of the manufacturer 12 REFERENCES LITERATURE 1 Harris G W and Naftolinf The Hypothalamus and Control of Ovulation Brit Med Bullet 26 1 9 1970 2 Knobil E The Neuroendocrine Control of the Menstrual Cycle Rec Prog Horm Res 36 52 88 1980 3 Jeffcoate S L Clinics in Endocrinol Metab 4 521 543 1975 Whitely R J Keutmann H T and Ryan R J Endocrinology 102 1874 1978 5 Pierce J G and Parsons T F Glycoprotein hormones Structure and Function Annual Rev Biochem 50 465 495 1981 6 Bardin C W and Paulsen C A The Testes in Textbook of Endocrinology ed R H Williams M D W B Saunders Co 1981 7 Shome B and Parlow A F J Clin Endocrinol Metabl 39 199 202 1974 Shome B and Parlow A F J Clin Endocrinol Metabl 39 203 205 1974 9 Ross G T VandeWeile R L and Frantz A G Chapter 7 in The Ovaries and the Breasts in Textbook of Endocrinology R H Williams Ed W B Saunders Co 1981 10 Marshall J C Clinics in Endocrinal Metab 4 545 567 1975 11 Acosta A A M D
15. s rum doit tre utilis dans le cadre de ce test Ne pas utiliser des chantillons h molys s ict riques ou lip miques Remarque Les chantillons contenant de l azide de sodium ne doivent pas tre utilis s pour ce test 5 1 Pr l vement et pr paration des chantillons S rum Pr lever le sang par ponction veineuse ex Sarstedt Monovette 02 1388 001 laisser coaguler puis s parer le s rum par centrifugation temp rature ambiante Ne pas centrifuger avant que la coagulation ne soit termin e Les patients sous traitement anti coagulant peuvent demander un temps de coagulation plus important 5 2 Conservation des chantillons Les tubes contenant les chantillons doivent tre ferm s et peuvent tre stock s jusqu 48 heures 2 C 8 C avant d tre test s Les chantillons stock s pour un temps prolong doivent tre congel s 20 C avant d tre test s Les chantillons d congel s doivent tre retourn s plusieurs fois avant le test 5 3 Dilution de l chantillon Si lors d un test pr liminaire la concentration de l chantillon se r v le tre sup rieure celle du standard le plus concentr alors l chantillon doit tre dilu avec le Standard 0 et test de nouveau comme d crit dans R alisation du test Pour le calcul des concentrations ce facteur de dilution doit tre pris en consid ration Exemple a dilution 1 10 10 uL S rum 90 uL Standard 0 bien m lang
16. the assay is between 1 27 200 mIU mL 9 2 Specificity of Antibodies Cross Reactivity The following substances were tested for cross reactivity of the assay Hormone Tested Concentration produced Color intensity Equivalent to LH in Serum mIU mL hCG WHO 1 IRP 75 537 200 mIU mL TSH WHO 2 IRP 80 558 62 IU mL FSH WHO 1 IRP 68 40 200 mIU mL NOTE Pregnancy results in elevated levels of hCG the use of the LH enzyme immunoassay test is not recommended during pregnancy or immediately post partum Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany version 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 7 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 9 3 Sensitivity The analytical sensitivity of the DEMEDITEC ELISA was calculated by adding 2 standard deviations to the mean of 20 replicate analyses of the Zero Standard SO and was found to be 1 27 mIU mL 9 4 Reproducibility 9 4 1 Intra Assay The within assay variability is shown below E J i E PE ns 10 190 i 9 4 2 Inter Assay The between assay variability is shown below same 1 2 3 m o 10 to 9 5 Recovery Samples have been spiked by adding LH solutions with known concentrations in a 1 1 ratio The Recovery has been calculated by multiplication of the ratio of the measurements and the expected values with 100 Measur
17. tiempo mas largo han de congelarse s lo una vez a 20 C antes del ensayo Las muestras descongeladas deben invertirse varias veces antes del ensayo 5 3 Diluci n de las muestras Si en un ensayo inicial se encuentra una muestra que presenta valores mayores que el estandar mas concentrado ha de diluirse con Standard 0 y volver a ensayarse como se describe en el Procedimiento de Ensayo Para el c lculo de las concentraciones habr que tener en cuenta el factor de diluci n Ejemplo a diluci n 1 10 10 uL Suero 90 uL Standard O mezclar totalmente b diluci n 1 100 10 uL diluci n a 1 10 90 uL Standard O mezclar totalmente 6 PROCEDIMIENTO DE ENSAYO 6 1 Consideraciones generales Todos los reactivos y muestras han de estar a temperatura ambiente antes de su uso Todos los reactivos deben mezclarse sin formar espuma Una vez se ha comenzado el ensayo deben completarse todos los pasos sin interrupci n Utilizar puntas de pipeta de pl stico nuevas para cada est ndar control o muestra para evitar combinaciones cruzadas La absorbancia es funci n del tiempo de incubaci n y la temperatura Antes de comenzar el ensayo se recomienda que todos los reactivos est n preparados tapas removidas todos los pocillos que se necesiten asegurados en recipiente etc Esto asegurar un tiempo similar para cada paso de pipeteo sin que haya interrupciones Como regla general la reacci n enzim tica es linealme
18. ATTUAZIONE DEL TEST 19 7 VALORI NORMALI 21 8 CONTROLLO QUALIT nnnnnnnnnenennnnnnnn 21 9 CARATTERISTICHE DEL TEST 21 10 LIMITAZIONE DEL TEST coooccicininnncncnnnnininnincncnins 22 11 ASPETTI LEGALI 22 12 BIBLIOGRAFIA 22 1 INTRODUCCI N re 23 2 FUNDAMENTO DEL ENSAYO cocociccciciccocncocnos 23 3 PRECAUCIONES me 23 4 COMPONENTESDELKIT in 24 Bie MUESTRAS Herne 25 6 PROCEDIMIENTO DE ENSAYO coccccccicicconncncnos 25 7 VALORES ESPERADOS 27 8 CONTROL DE CALIDAD iii 27 9 CARACTER STICAS DEL ENSAYO 27 10 LIMITACIONES DE USO 28 11 ASPECTOSLEGALES ii 28 12 REFERENCIAS BIBLIOGRAFIA 28 1 INTRODUCTION serre 29 2 PRINCIPE DU TEST 29 3 PRECAUTIONS D UTILISATION 29 4 COMPOSITION DU KIT 30 5 ECHANTILLON i 31 6 REALISATION DU TEST 31 7 VALEURS ATTENDUES 33 8 CONTROLE DE QUALITE in 33 9 CARACTERISTIQUES DU TEST 33 10 LIMITES D UTILISATION 34 11 ASPECTS LEGAUX iii 34 12 REFERENCES BIBLIOGRAPHIE 34 SYMBOLS USED WITH DEMEDITEC ELISAS 35 Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 1 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 1 INTRODUCTION 1 1 Intended Use The DEMEDITEC LH ELISA Kit is an enzyme immunoas
19. GAL ASPECTS 11 1 Reliability of Results The test must be performed exactly as per the manufacturer s instructions for use Moreover the user must strictly adhere to the rules of GLP Good Laboratory Practice or other applicable national standards and or laws This is especially relevant for the use of control reagents It is important to always include within the test procedure a sufficient number of controls for validating the accuracy and precision of the test The test results are valid only if all controls are within the specified ranges and if all other test parameters are also within the given assay specifications In case of any doubt or concern please contact DEMEDITEC 11 2 Therapeutic Consequences Therapeutic consequences should never be based on laboratory results alone even if all test results are in agreement with the items as stated under point 11 1 Any laboratory result is only a part of the total clinical picture of a patient Only in cases where the laboratory results are in acceptable agreement with the overall clinical picture of the patient should therapeutic consequences be derived The test result itself should never be the sole determinant for deriving any therapeutic consequences 11 3 Liability Any modification of the test kit and or exchange or mixture of any components of different lots from one test kit to another could negatively affect the intended results and validity of the overall test Such modification and
20. LS USED WITH DEMEDITEC ELISAS Symbol English Deutsch Fran ais Espa ol Italiano C European Conformity On E normes Conformidad europea Conformit europea Consult instructions for use Gebrauchsanweisung beachten Consulter les instructions d utilisation Consulte las Instrucciones Consultare le istruzioni per l uso In vitro diagnostic device In vitro Diagnostikum Usage Diagnostic in vitro Para uso Diagn stico in vitro Per uso Diagnostica in vitro Nur f r Seulement dans le S lo para uso en For research use anly Forschungszwecke cadre de recherches investigaci n Solo a scopoidiiricer a Catalogue number Katalog Nr R f rence N mero de cat logo No di Cat Lot No Batch code Chargen Nr No de lot N mero de lote Lotto no Contains sufficient for lt n gt tests Ausreichend f r n Ans tze Contenu suffisant pour n tests Contenido suficiente para lt n gt ensayos Contenuto sufficiente per n saggi Storage Temperature Lagerungstemperatur Temp rature de conservation Temperatura de conservacion Temperatura di conservazione Expiration Date Mindesthaltbarkeits datum Date limite d utilisation Fecha de caducidad Data di scadenza SERIE Legal Manufacturer Hersteller Fabricant Fabricante Fabbricante Distributed b Distributor Vertreibe
21. The concentration of the samples can be read directly from this standard curve Samples with concentrations higher than that of the highest standard have to be further diluted or reported as gt 200 mlU mL For the calculation of the concentrations this dilution factor has to be taken into account 6 3 1 Example of Typical Standard Curve The following data is for demonstration only and cannot be used in place of data generations at the time of assay Optical Units 450 nm OD 450 nm Standard 0 0 mIU mL a Standard 1 10 mIU mL 1 500 Standard 5 200 mIU mL 1 000 0 500 0 000 10 100 1000 LH ELISA mIU ml Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 6 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 7 EXPECTED VALUES It is strongly recommended that each laboratory should determine its own normal and abnormal values In a study conducted with apparently normal healthy adults using the DEMEDITEC LH ELISA the following values are observed Population LH mIU mL Adult Female Follicular and luteal phase lt 20 LH Surge 20 200 Female post menopausal 20 100 The results alone should not be the only reason for any therapeutic consequences The results should be correlated to other clinical observations and diagnostic t
22. a duda o inquietud por favor contactar con DEMEDITEC 11 2 Consecuencias Terap uticas Las consecuencias terap uticas nunca deben basarse s lo en los resultados de laboratorio incluso si todos los resultados del ensayo est n de acuerdo con los asuntos fijados en el punto 11 1 Cualquier resultado de laboratorio es solamente una parte del cuadro cl nico de un paciente Solamente en los casos donde los resultados de laboratorio est n en acuerdo con todo el cuadro cl nico de un paciente se pueden derivar consecuencias terap uticas Nunca deben derivarse consecuencias terap uticas a partir de solamente el resultado obtenido en el ensayo 11 3 Responsabilidad Cualquier modificaci n del kit y o cambio o mezcla de cualquier componente procedentes de kits de lotes diferentes puede afectar negativamente a los resultados esperados y en la validez de todo el test Esas modificaciones y o cambios invalidad cualquier reclamaci n de reposici n Las reclamaciones emitidas debidas a una mala interpretaci n de los resultados de laboratorio por parte del comprador referidos al punto 11 2 son tambi n inv lidas A pesar de todo en el caso de cualquier reclamaci n la responsabilidad del fabricante no excede el valor del kit Cualquier da o provocado al kit durante su transporte no est sujeto a la responsabilidad del fabricante 12 REFERENCIAS BIBLIOGRAFIA Consultar el manual de usuario en ingl s Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner S
23. and Wright G L Journal of Clinical Immunoassays 6 41 1983 12 Brown J Wood eds Churchill Livingston Co New York 7 42 1980 13 Yen S S C Vela P and Rankin J J Clin Endocrinol Metab 30 434 442 1970 14 Cohen K L Metabolism 26 1165 1177 1977 15 Engvall E Methods in Endocrinology Volume 70 Van Vunakis H and Langone J J eds Academic Press New York 419 492 1980 16 Uotila M Ruoslahti E and Engvall E J Immunol Methods 42 11 15 1981 gt Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner Stra e 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 10 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 1 EINLEITUNG Der DEMEDITEC LH ELISA wird zur quantitativen Bestimmung des luteinisierenden Hormons LH in Serum eingesetzt Nur f r In vitro Diagnostik KLINISCHE BEDEUTUNG Luteinisierndes Hormon LH ist ein Glykoprotein das unter der Kontrolle des im Hypothalamus gebildeten Liberins Gonadotropin Releasing Hormon Gn RH synthetisiert und ausgesch ttet wird Wie FSH TSH und hCG besteht LH aus einer Alpha und einer Beta Untereinheit Wahrend die Aminos uresequenzen der Alpha Untereinheiten nahezu identisch sind sind die Beta Untereinheiten hormonspezifisch Sie determinieren die immunologischen Eigenschaften und die Spezifitat der Wirkungen auf die Zielorgane Bei Frauen sind
24. componenti deve avvenire una dichiarazione scritta alla ditta DEMEDITEC al piu tardi una settimana dopo il ricevimento del kit Componenti danneggiati non dovrebbero essere utilizzati per il test Questi componenti devono essere magazzinati fino ala soluzione del problema Dopo di che essi devono essere smaltiti secondo le norme ufficiali Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 18 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 5 CAMPIONI Nel test deve essere utilizzato solo siero Non usare campioni emolitici itterici o lipemici Attenzione Se i campioni contengono sodio azide non devono essere utilizzati per questo test 5 1 Collezione dei campioni Siero Collezionare sangue tramite puntura venale p es Sarstedt Monovette 02 1388 001 far coagulare e separare il siero centrifugando a temperatura ambiente Non centrifugare prima che la coagulazione sia completata Campioni di pazienti con una terapia anticoagulante possono richiedere pi tempo per la coagulazione 5 2 Magazzinaggio dei campioni campioni dovrebbero essere magazzinati ben chiusi fino a 48 ore a 2 C a 8 C Campioni magazzinati per un periodo pi lungo dovrebbero essere congelati solo una volta a 20 C prima dell analisi Congelare soltanto una volta Invertire campioni scongelati alcune volte prima d
25. crotiterwells 96 Wells 12x8 Wells einzeln brechbar Mit monoklonalem anti LH Antik rper beschichtet 2 Standard Standard 0 5 6 Fl schchen lyophilisiert je 1 mL Konzentrationen 0 10 20 40 100 200 mIU mL Die Standards sind kalibriert gegen den 2 Internationalen WHO Standard f r LH IRP 80 552 Siehe Vorbereitung der Reagenzien Enthalt 0 03 Proclin 300 0 015 BND und 0 010 MIT als Konservierungsmittel 3 Enzyme Conjugate Enzymkonjugat 1 Flaschchen 11 mL gebrauchsfertig Anti LH Antiserum mit Meerrettichperoxidase konjugiert Enthalt 0 03 Proclin 300 0 015 BND und 0 010 MIT als Konservierungsmittel 4 Substrate Solution Substratl sung 1 Fl schchen 14 mL gebrauchsfertig Substratl6sung TMB 5 Stop Solution Stoppl sung 1 Flaschchen 14 mL gebrauchsfertig enthalt 1 N Saure Kontakt mit der Stoppl sung vermeiden Kann Hautreizungen und Verbrennungen verursachen BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Anmerkung Zus tzlicher Standard O zur Probenverd nnung ist auf Anfrage erh ltlich 4 2 Nicht im Kit enthaltene aber erforderliche Ger te und Materialien Kalibriertes Mikrotiterplattenleseger t mit 450 10 nm Filter Kalibrierte variable Pr zisions Mikropipette Saugf higes Papier Aqua dest 4 3 Lagerung und Haltbarkeit des Kits Die unge ffneten Reagenzien behalten bei Lagerung um 2 C bis 8 C ihre Reaktivit t bis zum Verfallsdatum Nach dem V
26. dance with the procedures defined by an appropriate national biohazard safety guideline or regulation 14 Do not use reagents beyond expiry date as shown on the kit labels 15 All indicated volumes have to be performed according to the protocol Optimal test results are only obtained when using calibrated pipettes and microtiterplate readers 16 Do not mix or use components from kits with different lot numbers It is advised not to exchange wells of different plates even of the same lot The kits may have been shipped or stored under different conditions and the binding characteristics of the plates may result slightly different 17 Avoid contact with Stop Solution containing 0 5 M H2SO It may cause skin irritation and burns 18 Some reagents contain Proclin 300 BND and or MIT as preservatives In case of contact with eyes or skin flush immediately with water 19 TMB substrate has an irritant effect on skin and mucosa In case of possible contact wash eyes with an abundant volume of water and skin with soap and abundant water Wash contaminated objects before reusing them If inhaled take the person to open air 20 Chemicals and prepared or used reagents have to be treated as hazardous waste according to the national biohazard safety guideline or regulation 21 For information on hazardous substances included in the kit please refer to Material Safety Data Sheets Material Safety Data Sheets for this product are available upon request di
27. de stockage et d incubation m thodes d aspiration et de lavage Apr s avoir tester les points mentionn s si aucune erreur n est d tect e contacter votre distributeur ou directement la DEMEDITEC 9 CARACTERISTIQUES DU TEST 9 1 Zone de mesure Les limites du dosage sont comprises entre 1 27 100 mIU mL 9 2 Sp cificit des anticorps R action crois e Voir le manuel d utilisateur en version anglaise NOTE Une grossesse se manifeste par des taux lev s d hCG l utilisation d un test immunoenzymatique dirig contre la LH n est pas recommand lors de la grossesse ou imm diatement apr s l accouchement 9 3 Sensibilit de l analyse La sensibilit de l analyse a t calcul e partir de la moyenne la plus lev e de deux d viations standards de l analyse de vingt r plicats du Standard 0 et a t mesur e 1 27 mIU mL 9 4 Pr cision Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise 9 5 Recouvrement Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise 9 6 Lin arit Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 33 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 10 LIMITES D UTILISATION Toute utilisation impropre des chantillons ou toute modification du test peut influencer les r sultats 10
28. detti fattori non rilevabile alcun errore si prega di contattare il fornitore o direttamente la ditta DEMEDITEC 9 CARATTERISTICHE DEL TEST 9 1 Assay Dynamic Range Le concentrazioni determinabili con questo test stanno tra 1 27 200 mIU mL 9 2 Specificit degli anticorpi reazioni ad incrocio Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese NOTA In caso di gravidanza i livelli di hCG risultano elevati Percio l uso del test immunoenzimatico LH non e raccomandabile durante la gravidanza o nell immediato periodo post parto 9 3 Sensitivita analitica La sensitivit analitica stata calcolata dai valori medi piu due deviazioni standard di venti 20 repliche dello Standard 0 ed erano 1 27 mIU mL 9 4 Precisione Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 9 5 Ritrovato Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 9 6 Linearit Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jon 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 21 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 10 LIMITAZIONE DEL TEST Ogni manutenzione impropria dei campioni o modificazione del protocollo pu influenzare risultati 10 1 Sostanze interferenti Emoglobina fino a 4 mg mL bilirubina fino a 0 5 mg mL e trigliceridi fino a 30 m
29. e bis zu 30 mg mL haben keinen Einfluss auf das Testergebnis 10 2 Beeinflussung durch Medikamente Uns sind bislang keine Stoffe Medikamente bekannt geworden deren Einnahme die Messung des LH Gehaltes der Probe beeinflussen w rde 10 3 High Dose Hook Effekt Ein Hook Effekt tritt bei Proben mit bis zu 10 000 mIU mL LH nicht auf 11 RECHTLICHE GRUNDLAGEN 11 1 Zuverl ssigkeit der Ergebnisse Der Test muss exakt gem der Testanleitung des Herstellers abgearbeitet werden Dar ber hinaus muss der Benutzer sich strikt an die Regeln der GLP Good Laboratory Practice oder andere eventuell anzuwendende Regeln oder nationale gesetzliche Vorgaben halten Dies betrifft besonders den Gebrauch der Kontrollreagenzien Es ist sehr wichtig bei der Testdurchf hrung stets eine ausreichende Anzahl Kontrollen zur berpr fung der Genauigkeit und Pr zision mitlaufen zu lassen Die Testergebnisse sind nur g ltig wenn alle Kontrollen in den vorgegebenen Bereichen liegen und wenn alle anderen Testparameter die vorgegebenen Spezifikationen f r diesen Assay erf llen Wenn Sie bez glich eines Ergebnisses Zweifel oder Bedenken haben setzen Sie sich bitte mit der Firma DEMEDITEC in Verbindung 11 2 Therapeutische Konsequenzen Therapeutische Konsequenzen sollten keinesfalls nur aufgrund von Laborergebnissen erfolgen selbst dann nicht wenn alle Testergebnisse mit den in 11 1 genannten Voraussetzungen bereinstimmen Jedes Laborergebnis ist nur e
30. e des abscisses L utilisation de la densit optique moyenne pour chaque chantillon d termine la concentration correspondante partir de la courbe talon M thode automatique Les r sultats dans le IFU ont t calcul s de fa on automatique en utilisant une courbe de r gression 4 PL 4 Parameter Logistics D autres fonctions logistiques peuvent donner des r sultats l g rement diff rents La concentration des chantillons peut tre lue directement partir de cette courbe talon Les chantillons avec une concentration sup rieure celle du plus haut standard doivent tre dilu s de nouveau Pour le calcul des concentrations ce facteur de dilution doit tre pris en consid ration 6 3 1 Exemple typique de courbe talon Les r sultats suivants sont ici pr sent s titre d exemple et ne peuvent tre utilis s au moment de l essai Unit s optiques 450 nm Standard O 0 mIU mL Standard 1 10 mIU mL Standard 2 20 mIU mL Standard 3 40 mIU mL Standard 4 100 mIU mL Standard 5 200 mIU mL Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 32 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 7 VALEURS ATTENDUES Il est fortement recommand chaque laboratoire de d terminer ses propres valeurs normales ou anormales Dans une tude r alis e av
31. ec des adultes normaux et sains l aide du kit DEMEDITEC LH ELISA les valeurs suivantes sont observ es Population LH mIU mL Femmes phase folliculaire et lut ale lt 20 pic de LH 20 200 Femmes post m nopaus e 20 100 8 CONTROLE DE QUALITE Il est recommand d utiliser les chantillons contr les selon les r glementations nationales en vigueur L utilisation des chantillons contr les est recommand afin de s assurer jour apr s jour de la validit des r sultats Utiliser les contr les de valeurs normales et pathologiques Les contr les et les r sultats correspondants issus du laboratoire QC sont mentionn s dans le certificat QC fourni avec le kit Les valeurs et les limites mentionn es sur la fiche QC font toujours r f rence au lot de kit courant et doivent tre utilis es pour une comparaison directe avec les r sultats Il est galement recommand d utiliser les programmes d valuation de qualit nationaux ou internationaux afin de s assurer de l exactitude des r sultats Utiliser les m thodes d analyses statistiques appropri es pour l analyse des valeurs contr les et des tendances Si les r sultats ne correspondent pas aux limites tablies des contr les les r sultats concernant ces patients doivent tre consid r es comme non valides Dans ce cas tester les zones techniques suivantes m canisme de pipettage et temps spectrophotom tre dates d expiration des r actifs conditions
32. ed Conc Expected Recovery LH LH mIU mL mIU mL Endogenous LH 2 added LH because of a 1 1 dilution of serum with spike material Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 8 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 9 6 Linearity Measured Conc Expected Conc Recovery mIU mL mIU mL 4 2 10 LIMITATIONS OF USE Reliable and reproducible results will be obtained when the assay procedure is performed with a complete understanding of the package insert instruction and with adherence to good laboratory practice Any improper handling of samples or modification of this test might influence the results 10 1 Interfering Substances Haemoglobin up to 4 mg mL Bilirubin up to 0 5 mg mL and Triglyceride up to 30 mg mL have no influence on the assay results 10 2 Drug Interferences Until today no substances drugs are known to us which have an influence to the measurement of LH ina sample 10 3 High Dose Hook Effect No hook effect was observed in this test up to 10 000 mIU mL of LH Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner Stra e 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 9 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 11 LE
33. editec de e http www demeditec com 27 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 10 LIMITACIONES DE USO Cualquier manipulaci n inadecuada de las muestras o modificaciones del ensayo pueden influenciar los resultados 10 1 Sustancias que pueden interferir Hemoglobina hasta 4 mg mL Bilirrubina hasta 0 5 mg mL y Triglic ridos hasta 30 mg mL no influencian los resultados del ensayo 10 2 Interferencias con drogas Hasta ahora no se han encontrado sustancias drogas conocidas por nosotros que tengan influencia en la medida de Hormona Luteinizante en una muestra 10 3 Efecto Gancho Dosis Elevada No se ha observado efecto gancho en este ensayo hasta 10 000 mIU mL de Hormona Luteinizante 11 ASPECTOS LEGALES 11 1 Fiabilidad de los Resultados El ensayo debe realizarse exactamente de acuerdo a las instrucciones del fabricante Mas a n el usuario debe ajustarse estrictamente a las reglas BPL Buenas Pr cticas de Laboratorio o a otros est ndares y o leyes nacionales aplicables Esto es especialmente relevante para el uso de reactivos control Es importante incluir siempre dentro del procedimiento de ensayo un n mero suficiente de controles para validar la exactitud y la precisi n del ensayo Los resultados del ensayo son v lidos s lo si todos los controles se encuentran dentro de los rangos especificados y si todos los otros par metros del ensayo se encuentran dentro de las especificaciones dadas para el ensayo En cado de algun
34. ell uso 5 3 Diluizione dei campioni Se in un campione di siero viene trovata una concentrazione oltre lo standard piu alto questo campione pu essere diluito con lo Standard 0 e nuovamente determinato Della diluizione deve essere per tenuto conto Esempio a diluizione 1 10 10 uL siero 90 uL Standard 0 agitare bene b diluizione 1 100 10 uL della diluizione a 90 uL Standard 0 agitare bene 6 ATTUAZIONE DEL TEST 6 1 Indicazioni generali Tutti i reagenti e i campioni devono essere portati a temperatura ambiente e ben mescolati prima dell uso Evitare la formazione di schiume Una volta iniziato il procedimento del test questo deve essere portato alla fine senza interruzione Per ogni componente standard controllo o campione necessario utilizzare una nuova punta monouso per evitare reazioni incrociate La densit ottica dipende dal tempo d incubazione e dalla temperatura Perci si rende necessario di preparare tutti i reagenti di aprire i tappi dei flaconi e di appostare tutti i pozzetti nelle appropriate posizioni Soltanto una tale preparazione garantisce gli stessi tempi per ogni processo di pipettamento Come regola generale vale che la reazione enzimatica si svolge linearmente proporzionale con il tempo e con la temperatura Il pipettare degli standard controlli e campioni deve essere eseguito entro 6 minuti Fare attenzione soprattutto quando eseguito manualmente D
35. emeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jon 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 19 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 6 2 Eseguimento del test Ogni analisi deve includere una curva standard 1 Fissare i pozzetti necessari sul supporto 2 Pipettare 25 uL di ogni Standard Control e campione nei pozzetti cambiando ogni volta la punta monouso 3 Pipettare 100 uL Enzyme Conjugate in ogni pozzetto Agitare bene per 10 secondi E molto importante raggiungere un completo mescolamento 4 Incubare per 30 minuti a temperatura ambiente 5 Rovesciare la piastra per vuotare i pozzetti Lavare i pozzetti 5 volte con acqua distillata 400 uL in ogni pozzetto Rimuovere le gocce d acqua rimanenti rivoltando la piastra su carta assorbente Importante La sensibilit e la precisazione di questo kit sono fortemente influenzate dal corretto eseguimento del lavaggio Aggiungere 100 uL della Substrate Solution ad ogni pozzetto Incubare per 10 minuti a temperatura ambiente Fermare la reazione enzimatica aggiungendo 50 uL della Stop Solution ad ogni pozzetto Determinare la densit ottica a 450 10 nm con un fotometro per microtiter piastre entro 10 minuti dopo l aggiunta della Stop Solution O O NO 6 3 Rilevamento dei risultati Determinare i valori medi della densit ottica per ogni set di standard control
36. er b dilution 1 100 10 uL dilution a 1 10 90 uL Standard 0 bien m langer 6 R ALISATION DU TEST 6 1 Remarques g n rales Tous les r actifs et chantillons doivent tre amen s temp rature ambiante avant utilisation Tous les r actifs doivent tre m lang s sans formation de mousse Une fois la proc dure engag e toutes les tapes doivent tre r alis es sans interruption Utiliser un nouveau c ne de pipette pour chaque standard contr le ou chantillon ceci afin d viter toute contamination L absorbance est fonction du temps d incubation et de la temp rature Avant de commencer le test il est recommand de pr parer tous les r actifs bouchons ouverts de pr parer les puits des microplaques etc Cela garantira un intervalle de temps quivalent entre chaque tape sans interruption En r gle g n rale la r action enzymatique est lin airement proportionnelle au temps et la temp rature Le pipettage de tous les standards chantillons et contr les doit tre r alis en 6 minutes A noter sp cialement dans le cadre d un pipettage manuel Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 31 6 2 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 R alisation du dosage Chaque test doit inclure une courbe talon
37. er Verfallsdatum der Reagenzien Lagerungs und Inkubationsbedingungen Absaug und Waschmethode Sollten Sie nach berpr fung der vorgenannten Bereiche keinen Fehler erkannt haben setzen Sie sich bitte mit Ihrem Lieferanten oder direkt mit der Firma DEMEDITEC in Verbindung 9 ASSAY CHARACTERISTIKA 9 1 Messbereich Der Messbereich des Testes liegt zwischen 1 27 200 mIU mL 9 2 Spezifit t der Antik rper Kreuzreaktivit t Die Daten entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung Achtung W hrend der Schwangerschaft sind die hCG Werte erh ht Es wird empfohlen den LH ELISA nicht in der Schwangerschaft oder kurz nach der Geburt einzusetzen 9 3 Sensitivit t Die analytische Sensitivit t definiert als Mittelwert plus der zweifachen Standardabweichung des Standards 0 n 20 betr gt 1 27 mIU mL Die Daten zu 9 4 Pr zision 9 5 Wiederfindung 9 6 Linearit t entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 15 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 10 GRENZEN DES TESTS Jede unsachgem e Behandlung von Proben oder Modifikationen dieses Tests k nnen die Ergebnisse beeinflussen 10 1 Interferenzen Hamoglobin bis zu 4 mg mL Bilirubin bis zu 0 5 mg mL und Triglycerid
38. erfallsdatum die Reagenzien nicht mehr verwenden Nach dem ffnen sollten alle Reagenzien bei 2 C bis 8 C gelagert werden Die Mikrotiterwells sollten bei 2 8 C gelagert werden Der einmal ge ffnete Folienbeutel sollte stets sehr sorgf ltig wieder verschlossen werden Unter den beschriebenen Lagerbedingungen behalten ge ffnete Kits 6 Wochen ihre Reaktivit t 4 4 Vorbereitung der Reagenzien Alle Reagenzien sowie die ben tigte Anzahl von Wells sollen vor dem Gebrauch auf Raumtemperatur gebracht werden Standards Rekonstituieren Sie den lyophilisierten Inhalt der Standardfl schchen mit 1 0 mL destilliertem Wasser Achtung Bei 2 bis 8 sind die rekonstituierten Standards 2 Monate haltbar Bei einer l ngeren Aufbewahrung bei 20 einfrieren Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner Stra e 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 12 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 4 5 Entsorgung des Kits Die Entsorgung des Kits muss gem B den nationalen gesetzlichen Vorschriften erfolgen Spezielle Informationen f r dieses Produkt finden Sie im Materialsicherheitsdatenblatt Kapitel 13 4 6 Besch digte Testkits Im Falle einer starken Besch digung des Testkits oder der Komponenten muss die Firma DEMEDITEC in schriftlicher Form spatestens eine Woche nach Erhalt des Kits informiert werden Stark besch digte Ei
39. ests 8 QUALITY CONTROL Good laboratory practice requires that controls be run with each calibration curve A statistically significant number of controls should be assayed to establish mean values and acceptable ranges to assure proper performance It is recommended to use control samples according to state and federal regulations The use of control samples is advised to assure the day to day validity of results Use controls at both normal and pathological levels The controls and the corresponding results of the QC Laboratory are stated in the QC certificate added to the kit The values and ranges stated on the QC sheet always refer to the current kit lot and should be used for direct comparison of the results It is also recommended to make use of national or international Quality Assessment programs in order to ensure the accuracy of the results Employ appropriate statistical methods for analysing control values and trends If the results of the assay do not fit to the established acceptable ranges of control materials patient results should be considered invalid In this case please check the following technical areas Pipetting and timing devices photometer expiration dates of reagents storage and incubation conditions aspiration and washing methods After checking the above mentioned items without finding any error contact your distributor or DEMEDITEC directly 9 PERFORMANCE CHARACTERISTICS 9 1 Assay Dynamic Range The range of
40. g mL non influenzano i risultati di questo test 10 2 Droghe interferenti Fino ad oggi nessuna sostanza farmaco conosciuta a noi che abbia influenzato la determinazione di LH nel campione 10 3 Effetto Hook di alti dosaggi Nessun effetto hook di aglomerazione stato osservato in questo test fino a 10 000 mIU mL di LH 11 ASPETTI LEGALI 11 1 Affidabilit dei risultati Il test deve essere eseguito esattamente secondo il protocollo dato dal produttore Inoltre l utente deve seguire le regole del GLP Good Laboratory Practice o eventualmente altre regole comportamentali o disposizioni legali Questo vale soprattutto per l uso delle referenze E molto importante utilizzare un numero appropriato di referenze in parallelo ai campioni test per poter controllare l esattezza e la precisione del test risultati del test sono validi soltanto se tutte le referenze cadono nei margini prestabiliti e se tutti gli altri parametri del test soddisfano la specificazione per questo test Se esistono dubbi o domande su questi risultati si prega di contattare la ditta DEMEDITEC 11 2 Conseguenze terapeutiche Soltanto sulla base dei risultati dei laboratori non dovrebbero essere intraprese delle conseguenze terapeutiche di alcun tipo anche se i risultati del test sono d accordo con gli aspetti articolati nel punto 11 1 Ogni risultato di laboratorio soltanto una parte di un quadro clinico completo di un paziente Soltanto in casi in cui i
41. i los resultados del ensayo no se ajustan a los rangos aceptables establecidos en los controles los resultados obtenidos de los pacientes han de considerarse inv lidos En este caso por favor comprobar las siguientes reas t cnicas Pipeteo y tiempo empleado fot metro fecha de caducidad de los reactivos condiciones de almacenamiento e incubaci n m todos de aspiraci n y lavado Despu s de comprobar los asuntos mencionados arriba sin encontrar ning n error contactar con su distribuidor o con DEMEDITEC directamente 9 CARACTER STICAS DEL ENSAYO 9 1 Rango din mico del ensayo El rango del ensayo se encuentra entre 1 27 200 mIU mL 9 2 Especificidad de los Anticuerpos Reactividad Cruzada Consultar el manual de usuario en ingl s NOTA El embarazo produce niveles elevados de hCG El uso del inmunoensayo del enzima LH no se recomienda durante el embarazo o inmediatamente tras el parto 9 3 Sensibilidad Anal tica La sensibilidad anal tica se calcul a partir de la media mas dos desviaciones estandar de veinte 20 r plicas del Est ndar O y result ser 1 27 mIU mL 9 4 Precision Consultar el manual de usuario en ingl s 9 5 Recuperaci n Consultar el manual de usuario en ingl s 9 6 Linealidad Consultar el manual de usuario en ingl s Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany ween 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info dem
42. ia A Alv olos de aa Brunnar i Nnyad kia Microtiterwells microtitula o Mikrottterorande Mikrotiterplatta MIKPOTITAO OTAOEWG Antiserum Anti soro Antiserum Antiserum AVTIOP G Enzyme f Conjugado enzim tico Enzymkonjugat Enzymkonjugat ZUZEUYHEVO EVZUNO Conjugate Enzym Re Complexo enzim tico Enzymkompleks Enzymkomplex ZUNTT OKO EVZUNOL Complex Fi z Subst ate Solu o de substrato Substratopl sning Substratl sning Aaa Solution UTTOOTPWHATOG Stop Solution Solu o de paragem Stopoplasning Stopp l sning AldAuya TEppATIOpO Zero Standard Padr o zero Standard 0 Standard 0 Np rurro Mnd v Standard Calibrador Standard Standard Mp ruta Control Controlo Kontrol Kontroll Ekeyxog 2 Pu yioTik AidAuya Assay Buffer Tamp o de teste Assay buffer Assay Buffer E Taon Wash Solution Solu o de lavagem Vaskebuffer Tv tt l sning AldAupa TAUOEWG 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1 N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI Sample Diluent Conjugate Diluent Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Version 06 12 08 JS Updated 090519 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Email info demeditec de e http www demeditec com 36
43. in Teil des klinischen Gesamtbildes eines Patienten Nur in F llen in denen die Laborergebnisse in akzeptabler bereinstimmung mit dem allgemeinen klinischen Bild des Patienten stehen sollten therapeutische Konsequenzen eingeleitet werden Das Testergebnis allein sollte niemals als alleinige Grundlage f r die Einleitung therapeutischer Konsequenzen dienen 11 3 Haftung Jegliche Ver nderungen des Testkits und oder Austausch oder Vermischung von Komponenten unterschiedlicher Chargen von einem Testkit zu einem anderen k nnen die gew nschten Ergebnisse und die G ltigkeit des gesamten Tests negativ beeinflussen Solche Ver nderungen und oder Austausch haben den Ausschluss jeglicher Ersatzanspr che zur Folge Reklamationen die aufgrund von Falschinterpretation von Laborergebnissen durch den Kunden gem Punkt 11 2 erfolgen sind ebenfalls abzuweisen Im Falle jeglicher Reklamation ist die Haftung des Herstellers maximal auf den Wert des Testkits beschr nkt Jegliche Sch den die w hrend des Transports am Kit entstanden sind unterliegen nicht der Haftung des Herstellers 12 REFERENZEN LITERATUR Angaben zu den Referenzen entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner Stra e 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 16 Demeditec LH ELISA Serum DE1289
44. ionized water Timer Semi logarithmic graph paper or software for data reduction 4 3 Storage Conditions When stored at 2 C to 8 C unopened reagents will retain reactivity until expiration date Do not use reagents beyond this date Opened reagents must be stored at 2 C to 8 C Microtiter wells must be stored at 2 C to 8 C Once the foil bag has been opened care should be taken to close it tightly again Opened kits retain activity for six weeks if stored as described above 4 4 Reagent Preparation Bring all reagents and required number of strips to room temperature prior to use Standards Reconstitute the lyophilized contents of the standard vial with 1 mL Aqua dest Note The reconstituted standards are stable for 2 months at 2 to 8 For longer storage freeze at 20 4 5 Disposal of the Kit The disposal of the kit must be made according to the national regulations Special information for this product is given in the Material Safety Data Sheets 4 6 Damaged Test Kits In case of any severe damage to the test kit or components DEMEDITEC has to be informed in writing at the latest one week after receiving the kit Severely damaged single components should not be used for a test run They have to be stored until a final solution has been found After this they should be disposed according to the official regulations Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner Stra e 2 e D 24145 Kiel Germany ven 06
45. itec de e http www demeditec com 13 6 2 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 Testdurchf hrung Jeder Lauf muss eine Standardkurve beinhalten 1 2 ER Die ben tigte Anzahl Wells in der Halterung befestigen Je 25 uL Standards Kontrollen und Proben mit neuen Plastikspitzen in die entsprechenden Wells geben 100 uL Enzyme Conjugate in jedes Well geben F r 10 Sekunden gut sch tteln Es ist sehr wichtig in diesem Schritt eine komplette Durchmischung zu erreichen 30 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren Platte nicht abdecken Den Inhalt der Wells kr ftig aussch tteln Wells 5mal mit destilliertem Wasser waschen Verbleibende Fl ssigkeit durch Ausklopfen der Wells auf saugf higem Papier entfernen Achtung Die Sensitivit t und Pr zision dieses Assays wird erheblich beeinflusst von der korrekten Durchf hrung des Waschschrittes 100 uL Substrate Solution in jedes Well geben 10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren Die enzymatische Reaktion durch Zugabe von 50 uL Stop Solution in jedes Well abstoppen Die Optische Dichte bei 450 10 nm mit einem Mikrotiterplatten Leseger t innerhalb von 10 Minuten nach Zugabe der Stop Solution bestimmen Ergebnisermittlung Die durchschnittlichen Werte der Optischen Dichte OD f r jedes Set von Standards Controls und Patientenproben bestimmen Eine Standardkurve ermitteln durch Auftragen der mittleren Optischen Dichte jedes Standards gegen die Konzentration wobei der OD We
46. lamenti di sicurezza di questo prodotto possono essere richiesti direttamente dalla ditta Demeditec Diagnostics GmbH regolamenti di sicurezza corrispondono alle norme EU 91 155 EC e 0 0 y Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 17 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 4 COMPONENTI DEL KIT 4 1 Contenuto del kit 1 Microtiterwells 12x8 file separatamente staccabili 96 pozzetti Pozzetti ricoperti con l anti LH monoclonale anticorpo 2 Standard Standard 0 5 6 flaconi liofillizzati 1 mL Concentrazione 0 10 20 40 100 200 mIU mL Gli standard sono calibrati contro lo Standard Internazionale WHO 2 per LH IRP 80 552 Vedi preparazionedei reagenti Contiene 0 03 Proclin 300 0 015 BND e 0 010 MIT come conservante 3 Enzyme Coniugate Tracciante enzimatico 1 flacone 11 mL pronto all uso Anti LH anticorpo coniugato alla perossidasi di rafano Contiene 0 03 Proclin 300 0 015 BND e 0 010 MIT come conservante 4 Substrate Solution Soluzione di substrato 1 flacone 14 mL pronto all uso TMB benzidine tetrametilico 5 Stop Solution Soluzione d arresto 1 flacone 14 mL pronto all uso contiene 1 N acidic solution Evitare il contatto con la soluzione d arresto Pu causare irritazioni cutanee e ustioni BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxa
47. li e campioni 2 Costruire una curva standard riportare i valori medi della densit ottica OD di ogni standard contro la rispettiva concentrazione dove i valori delle OD si devono trovare sull asse verticale Y e le concentrazioni sull asse orizzontale X 3 Utilizzando il valore medio delle OD per ogni campione si determina la rispettiva concentrazione dalla curva standard 4 Metodo automatico risultati in IFU sono stati calcolati automaticamente usando un fitting avvicinamento con il 4 PL 4 Parameter Logistics Altri funzioni usati per l elaborazioni dei dati possono dare risultati leggermente differenti 5 La concentrazione dei campioni pu essere determinata direttamente dalla curva standard Campioni con una concentrazione piu elevata dello standard piu concentrato devono essere diluiti Di questo fattore di diluizione deve essere tenuto conto per il calcolo della concentrazione 6 3 1 Esempio di una curva standard seguenti dati sono a scopo dimostrativo soltanto e non possono sostituire i dati generati dall eseguimento del test Standard Densit ottiche 450 nm Standard 0_ 0 mIU mL Standard 1 10 mIU mL Standard 5 200 mIU mL Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jon 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 20 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 7 VALORI
48. lla manutenzione e nello smaltimento e Il contatto con la Stop Solution dovrebbe essere evitato perch contiene 0 5 M H2SO L acido solforico pu provocare irritazioni cutanee e ustioni e Non pipettare con la bocca ed evitare il contatto con componenti del kit con la pelle o con le mucose e Nelle aree in cui il test viene utilizzato non fumare mangiare bere o fare uso di prodotti cosmetici e Nella manutenzione dei campioni o reagenti del kit portare guanti di latex monouso La contaminazione dei reagenti o dei campioni con microbi pu dare risultati falsi e L utilizzo dovrebbe avvenire secondo regole che seguono le rispettive norme di sicurezza nazionali sulle sostanze nocive e Non utilizzare i reagenti dopo la scadenza indicata sul kit e Ogni indicazione sulla quantit indicata del protocollo del kit deve essere accuratamente seguito Risultati ottimali possono essere ottenuti soltanto con l uso di pipette calibrate e spettrofotometro calibrato e Componenti del kit con numeri di lotto diversi non devono essere combinati consigliabile di non utilizzare pozzetti di piastre diversi anche se si tratta dello stesso lotto kit potrebbero essere stati magazzinati o spediti a condizioni diverse cosicch le caratteristiche di legame potrebbero divergere leggermente e componenti chimici e reagenti preparati o gi utilizzati devono essere trattati e smaltiti secondo le norme di sicurezza nazionali sulle sostanze nocive e rego
49. lly Use the valid version of the package insert provided with the kit Be sure that everything is understood 4 The microplate contains snap off strips Unused wells must be stored at 2 C to 8 C in the sealed foil pouch and used in the frame provided 5 Pipetting of samples and reagents must be done as quickly as possible and in the same sequence for each step 6 Use reservoirs only for single reagents This especially applies to the substrate reservoirs Using a reservoir for dispensing a substrate solution that had previously been used for the conjugate solution may turn solution colored Do not pour reagents back into vials as reagent contamination may occur Mix the contents of the microplate wells thoroughly to ensure good test results Do not reuse microwells Do not let wells dry during assay add reagents immediately after completing the rinsing steps Allow the reagents to reach room temperature 21 26 C before starting the test Temperature will affect the absorbance readings of the assay However values for the patient samples will not be affected 10 Never pipet by mouth and avoid contact of reagents and specimens with skin and mucous membranes 11 Do not smoke eat drink or apply cosmetics in areas where specimens or kit reagents are handled 12 Wear disposable latex gloves when handling specimens and reagents Microbial contamination of reagents or specimens may give false results 13 Handling should be done in accor
50. luci n de parada Puede causar irritaci n y quemaduras en al piel BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane Bromonitrodioxano MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Metilisotiazolona Nota Se puede solicitar el Standard O para la diluci n de la muestra 4 2 Equipamiento y material requerido pero no provisto Lector de microplacas calibrado 450 10 nm Micropipetas de precisi n variable calibradas Papel absorbente Agua destilada 4 3 Almacenamiento y estabilidad del kit Cuando se almacena a2 8 C los reactivos sin abrir mantienen su reactividad hasta la fecha de caducidad No utilizar los reactivos m s all de esta fecha Los reactivos abiertos han de almacenarse a 2 C 8 C Las placas multipocillo han de almacenarse a 2 C 8 C Una vez se ha abierto la bolsa hay que tener cuidado y cerrarla de nuevo Los kits abiertos conservan su actividad durante 6 semanas si se almacenan como se ha descrito arriba 4 4 Preparaci n de los Reactivos Dejar que todos los reactivos y el n mero requerido de tiras alcancen la temperatura ambiente antes de usarse Standards Reconstituir los contenidos liofilizados de los viales de los est ndares con 1 mL de agua destilada Nota Los est ndares reconstituidos son estables durante 2 meses a2 8 Para per odos m s largos congelar a 20 C 4 5 Eliminaci n del Kit La eliminaci n del kit debe realizarse de acuerdo con las leyes nacionales En las hojas de da
51. me Information about other products is available at www demeditec com certified company User s Manual LH ELISA Serum DE1289 96 Wells C Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany ne 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 1 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 Contents Inhaltsverzeichnis Contenuti Contenido Contenu 1 INTRODUCTION re 2 2 PRINCIPLE OF THE TEST 3 3 WARNINGS AND PRECAUTIONS 3 4 REAGENTS n Oxon a Dupin sue 4 5 SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION 5 6 ASSAY PROCEDURE 5 7 EXPECTED VALUES ooocicicicincccoconoconcncncncncncncncncnn 7 8 QUALITY CONTROL 7 9 PERFORMANCE CHARACTERISTICS 7 10 LIMITATIONS OF USE 9 11 1 LEGAL ASPECTS ni ea 10 12 REFERENCES LITERATURE 10 1 EINLEITUNG aus nn ur 11 2 TESTPRINZIP i 11 3 VORSICHTSMABNAHMEN 11 4 BESTANDTEILE DES KITS 12 5 PROBENVORBEREITUNG cccccccciccccnnncncncncncncncnns 13 6 TESTDURCHFUHRUNG 0 cccce cece 13 7 ERWARTETE WERTE i 15 8 QUALITATS KONTROLLE i 15 9 ASSAY CHARACTERISTIKA oooccicininininincncncncns 15 10 GRENZEN DES TESTS iii 16 11 RECHTLICHE GRUNDLAGEN 16 12 REFERENZEN LITERATUR ii 16 1 INTRODUZIONE see 17 2 PRINCIPIO DEL TEST 17 3 PREGAUZI NI mt deter aa 17 4 COMPONENTI DEL KIT 18 O I 19 6
52. mlUImL Standard 5 200 mIU mL Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 26 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 7 VALORES ESPERADOS Se recomienda encarecidamente que cada laboratorio determine sus valores normales e inusuales En un estudio con adultos aparentemente sanos utilizando el DEMEDITEC LH ELISA se observaron los siguientes valores LH UL Mujeres Fase folicular y luteal Pico de LH 20 200 Mujeres posmenopausia 20 100 8 CONTROL DE CALIDAD Se recomienda usar muestras control de acuerdo con las leyes estatales y federales El uso de muestras control ser recomienda para asegurar la validez diaria de los resultados Usar controles tanto a niveles normal como patol gico Los controles y los correspondientes resultados del Laboratorio de control de calidad est n fijados en el certificado de control de calidad que acompa an al kit Los valores y los rangos fijados en la hoja del control de calidad se refieren siempre al kit actual y deben usarse para la comparaci n directa de los resultados Es recomendable tambi n hacer uso de programas de Aseguramiento de la Calidad nacionales o internacionales para asegurar la exactitud de los resultados Utilizar m todos estad sticos apropiados para el an lisis de los valores y tendencia de los controles S
53. ne MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Nota Ulteriore Standard 0 per la diluizione dei campioni pu essere richiesto alla ditta 4 2 Materiali richiesti ma non contenuti nel kit Uno spettrofotometro calibrato per micropozzetti 450 10 nm Micropipette calibrate di precisione a volume variabile Carta assorbente Acqua distillata 4 3 Magazzinaggio e stabilit del kit A 2 C a 8 i reagenti non aperti rimangono reattivi fino alla data di scadenza indicata Non usare reagenti oltre questa data Tutti i reagenti aperti devono essere magazzinati a 2 C a 8 C micropozzetti devono essere magazzinati a 2 C a 8 C Una volta aperti i pacchi questi devono essere richiusi accuratamente Test kits aperti rimangono attivi per 6 settimane se magazzinati alle condizioni sopra descritte 4 4 Preparazione dei reagenti Prima dell uso portare tutti i reagenti e il numero necessario di pozzetti a temperatura ambiente Standards Ricostituire il contenuto liofillizzato dei flaconi con gli standard con 1 0 mL acqua distillata Nota Gli standard ricostituiti sono stabili per 2 mesi a 2 a 8 Per periodi piu lunghi congelare a 20 4 5 Smaltimento del kit Lo smaltimento del kit deve avvenire secondo le regole a norma di legge Informazioni particolareggiate per questo prodotto si trovano nel regolamento di sicurezza capitolo 13 4 6 Test kits danneggiati Nel caso di gravi danneggiamenti del kit o dei suoi
54. nen normalen und abnormalen Werte ermittelt In einer Studie wurden die Proben von gesunden Erwachsenen untersucht Dabei ergaben sich mit dem DEMEDITEC LH ELISA folgende Werte Population LH mIU mL Erwachsene Frauen Follikel und Lutealphase lt 20 mit ovulatorischem Zyklus Ovulatorischer Peak 20 200 Menopause 20 100 8 QUALIT TS KONTROLLE Es wird empfohlen die Kontrollproben gem B den nationalen gesetzlichen Bestimmungen einzusetzen Durch die Verwendung von Kontrollproben wird eine Tag zu Tag Uberpr fung der Ergebnisse erzielt Es sollten Kontrollen sowohl mit normalem als auch pathologischem Level eingesetzt werden Die Kontrollen mit den entsprechenden Ergebnissen des QC Labors sind im QC Zertifikat das dem Kit beiliegt aufgef hrt Die im QC Blatt angegebenen Werte und Bereiche beziehen sich stets auf die aktuelle Kitcharge und sollten zum direkten Vergleich der Ergebnisse verwendet werden Es wird ebenfalls empfohlen an nationalen oder internationalen Qualitatssicherungs Programmen teilzunehmen um die Genauigkeit der Ergebnisse zu sichern Es sollten geeignete statistische Methoden zur Analyse von Kontroll Werten und Trends angewendet werden Wenn die Ergebnisse des Assays nicht mit den angegebenen Akzeptanzbereichen des Kontrollmaterials bereinstimmen sollten die Patientenergebnisse als ung ltig eingestuft werden In diesem Fall berpr fen Sie bitte die folgenden Bereiche Pipetten und Zeitnehmer Photomet
55. npoint ovulation and monitor endocrine therapy Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 2 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 2 PRINCIPLE OF THE TEST The DEMEDITEC LH ELISA Kit is a solid phase enzyme linked immunosorbent assay ELISA based on the sandwich principle The microtiter wells are coated with a monoclonal mouse antibody directed towards a unique antigenic site on a LH molecule An aliquot of patient sample containing endogenous LH is incubated in the coated well with enzyme conjugate which is an anti LH monoclonal antibody conjugated with horseradish peroxidase After incubation the unbound conjugate is washed off The amount of bound peroxidase is proportional to the concentration of LH in the sample Having added the substrate solution the intensity of colour developed is proportional to the concentration of LH in the patient sample 3 WARNINGS AND PRECAUTIONS 1 This kit is for in vitro diagnostic use only For professional use only 2 All reagents of this test kit which contain human serum or plasma have been tested and confirmed negative for HIV I II HBsAg and HCV by FDA approved procedures All reagents however should be treated as potential biohazards in use and for disposal 3 Before starting the assay read the instructions completely and carefu
56. nte proporcional al tiempo y a la temperatura El pipeteo de todos los est ndares muestras y controles debe estar completado en 6 minutos Tenerlo en cuenta especialmente para el pipeteo manual Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 25 6 2 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 Procedimiento de ensayo Cada uno debe incluir una curva de est ndares 1 2 3 yO O Asegurar el numero deseado de pocillos en el recipiente Dispensar 25 HL de cada Standard Control y muestras con puntas nuevas en los pocillos adecuados Dispensar 100 pL de Enzyme Conjugate a cada pocillo Mezclar totalmente durante 10 segundos Es importante mezclar completamente en este paso Incubar durante 30 minutes a temperatura ambiente Sacudir en rgicamente el contenido de los pocillos Lavar los pocillos 5 veces con agua destilada 400 uL por pocillo Realizar un golpe seco de los pocillos contra el papel absorbente para eliminar las gotas residuales Nota importante La sensibilidad y la precisi n de este ensayo se ve marcadamente influenciada por la realizaci n correcta del proceso de lavado Adicionar 100 uL de Substrate Solution a cada pocillo Incubar durante 10 minutes a temperatura ambiente Parar la reacci n enzim tica mediante la adici n de 50 uL de Stop Solution
57. nzelkomponenten sollten nicht f r den Testlauf verwendet werden Sie m ssen gelagert werden bis eine endg ltige L sung gefunden wurde Danach sollten Sie gem den offiziellen Richtlinien entsorgt werden 5 PROBENVORBEREITUNG Serum sollte in diesem Test als Probenmaterial eingesetzt werden Lip mische ikterische und oder stark h molysierte Proben sollten nicht verwendet werden Achtung Proben die Natriumazid enthalten sollten nicht verwendet werden 5 1 Probenentnahme Serum Blut durch Venenpunktion entnehmen z B mit Sarstedt Monovette 02 1388 001 gerinnen lassen und das Serum durch Zentrifugation bei Raumtemperatur abtrennen Vor der Zentrifugation muss die Gerinnung vollst ndig abgeschlossen sein Bei Patienten die Antikoagulantien erhalten kann die Gerinnungszeit l nger dauern 5 2 Probenaufbewahrung Proben sollten stets gut verschlossen sein und k nnen vor Testbeginn bis zu 48 Stunden bei 2 C bis 8 C gelagert werden F r eine l ngere Aufbewahrung sollten die Proben eingefroren bei 20 C bis zum Testbeginn gelagert werden Nur einmal einfrieren Aufgetaute Proben sollten vor Testbeginn vorsichtig durchmischt werden ohne Schaumbildung 5 3 Probenverd nnung Wenn in einem ersten Testdurchlauf bei einer Probe eine Konzentration h her als der h chste Standard gefunden wird kann diese Probe mit Standard O weiter verd nnt und nochmals bestimmt werden Die Verd nnung muss jedoch bei der Berechnung der K
58. onzentration beachtet werden Beispiel a Verd nnung 1 10 10 uL Serum 90 uL Standard O gr ndlich mischen b Verd nnung 1 100 10 uL Verd nnung a 1 10 90 uL Standard 0 gr ndlich mischen 6 TESTDURCHF HRUNG 6 1 Allgemeine Hinweise Alle Reagenzien und Proben m ssen vor Gebrauch auf Raumtemperatur gebracht und gut durchgemischt werden Dabei sollte Schaumbildung vermieden werden Wenn die Testdurchf hrung einmal begonnen wurde muss sie ohne Unterbrechung zu Ende gef hrt werden F r jeden Standard jede Kontrolle oder Probe eine neue Plastikspitze verwenden um Verschleppungen zu vermeiden Die Optische Dichte ist abh ngig von Inkubationszeit und Temperatur Deshalb ist es notwendig vor Beginn der Testdurchf hrung alle Reagenzien in einen arbeitsbereiten Zustand zu bringen die Deckel der Fl schchen zu ffnen alle ben tigten Wells in den Halter zu setzen Nur eine solche Vorbereitung garantiert gleiche Zeiten f r jeden Pipettiervorgang ohne Pausen Als generelle Regel gilt dass die enzymatische Reaktion linear proportional zu Zeit und Temperatur ist Das Pipettieren aller Standards Kontrollen und Proben sollte innerhalb von 6 Minuten durchgef hrt werden Beachten Sie dies besonders bei einem manuellen Testansatz Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner Stra e 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demed
59. op Solution que contiene H2SO 0 5 M Puede provocar irritaci n y quemaduras en la piel e Nunca pipetear con la boca y evitar el contacto de los reactivos y las muestras con la piel y con membranas mucosas e No fumar comer beber o usar cosm ticos en reas donde las muestras o los reactivos del kit estan siendo usados e Usar guantes de l tex cuando se utilicen las muestras y los reactivos La contaminaci n microbiana de los reactivos o las muestras puede dar resultados err neos e El manejo debe realizarse de acuerdo a los procedimientos definidos por las gu as o regulaci n nacionales de seguridad de sustancias biopeligrosas e No utilizar los reactivos despu s de su fecha de caducidad que aparece en las etiquetas del kit e Todos los vol menes indicados han de ser realizados de acuerdo con el protocolo Los resultados ptimos del ensayo se obtienen solo cuando se utilizan pipetas y lectores de microplacas calibrados e No mezclar o usar componentes de kits con distinto n mero de lote Se recomienda no intercambiar pocillos de distintas placas incluso si son del mismo lote Los kits pueden haber sido enviados o almacenados bajo diferentes condiciones y las caracter sticas de uni n de las placas pueden resultar diferentes e Los compuestos qu micos y los reactivos preparados o utilizados han de tratarse como residuos peligrosos de acuerdo con las gu as o regulaci n nacionales de seguridad de sustancias biopeligrosas e Las hojas
60. oxidase konjugiert ist Es wird ein Sandwichkomplex gebildet Das nicht gebundene Konjugat wird durch Waschen der Wells entfernt Anschlie end wird die Substratl sung zugegeben und die Farbentwicklung nach einer definierten Zeit gestoppt Die Intensit t der gebildeten Farbe ist proportional der LH Konzentration in der Probe Die Extinktion wird bei 450 nm mit einem Mikrotiterplattenleser gemessen 3 VORSICHTSMABNAHMEN e Dieser Kit ist nur zum in vitro diagnostischen Gebrauch geeignet e Informationen zu im Kit enthaltenen gefahrlichen Substanzen entnehmen Sie bitte dem Materialsicherheitsdatenblatt e Alle Bestandteile dieses Testkits die humanes Serum oder Plasma enthalten wurden mit FDA gepr ften Methoden auf HIV I II HbsAg und HCV getestet und als negativ best tigt Jedoch sollten alle Bestandteile im Umgang und bei der Entsorgung wie m gliche Gefahrenstoffe betrachtet werden e Der Kontakt mit der Stop Solution sollte vermieden werden da sie 0 5 M H2SO enth lt Schwefels ure kann Hautreizungen und Verbrennungen verursachen e Nicht mit dem Mund pipettieren und den Kontakt von Kitbestandteilen und Proben mit Haut und Schleimh uten vermeiden e Inden Bereichen in denen Proben oder Kitbestandteile verwendet werden nicht rauchen essen oder Kosmetika verwenden e Beim Umgang mit Proben oder Reagenzien Einweg Latexhandschuhe tragen Die Verunreinigung von Reagenzien oder Proben mit Mikroben kann zu falschen Ergebnissen f hren e
61. paragraphe 11 1 Tout r sultat n est qu une partie du tableau clinique complet d un patient Les suites th rapeutiques peuvent d couler des r sultats de laboratoire si et seulement si ceux ci sont en accord avec l ensemble du tableau clinique du patient Le r sultat du test en lui m me ne doit en aucun cas tre le seul d terminant des suites th rapeutiques suivre 11 3 Responsabilit Toute modification du kit et ou change ou m lange d un des composants de diff rents lots d un kit un autre pourrait affecter de fa on n gative les r sultats attendus et la validit du test dans son ensemble De telles modifications ou changes invalident toute r clamation pour remplacement Toutes les r clamations soumises relatives au paragraphe 11 2 et dues une mauvaise interpr tation des r sultats de laboratoire de la part du client sont galement invalides N anmoins en cas de r clamation la responsabilit du fabricant n est pas de d passer les limites de la valeur du kit Tout dommage caus au kit lors de son transport n est pas du ressort de la responsabilit du fabricant 12 REFERENCES BIBLIOGRAPHIE Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 34 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 SYMBO
62. r Distributeur Distribuidor Distributore y Content Content Inhalt Contenu Contenido Contenuto Volume No Volume No Volumen Anzahl Volume Num ro Volumen N mero Volume Quantit Microtiterwells Microtiterwells Mikrotiterwells ls aan Placas multipocillo Micropozzetti Antiserum Antiserum Antiserum Antis rum Antisuero Antisiero Enzym yi S Enzyme Conjugate Enzymkonjugat Conjugu enzymatique Conjugado enzim tico Tracciante enzimatico Conjugate Enzym Co px Enzyme Complex Enzymkomplex ah Complex enzim tico Complesso enzimatico r Subst ate Substrate Solution Substratl sung Solution substrat Soluci n de sustrato Soluzione di substrato Solution Stop Solution Stop Solution Stoppl sung Solution d arr t Soluci n de parada Soluzione d arresto p Zero Standard Zero Standard Nullstandard Zero Standard Estandar cero Standard zero Standard Standard Standard Standard Estandar Standard Control Control Kontrolle Contr le Control Controllo Assay Buffer Assay Buffer Assaypuffer Tampon d essai Tampon de ensayo Tampone del test Wash Solution Wash Solution Waschl sung Solution de lavage Soluci n de lavado Soluzione di lavaggio 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH S in idrossido di 1 N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI Sample Diluent Sample Diluent Probenverd nnungs Solution pour dilution Soluci n para diluci n Diluente dei campioni p P medium de l chantillon de la muestra P Conjugate Konj i iluti i iluci x jugatverd nnungs Sol
63. ral Remarks All reagents and specimens must be allowed to come to room temperature before use All reagents must be mixed without foaming Once the test has been started all steps should be completed without interruption Use new disposal plastic pipette tips for each standard control or sample in order to avoid cross contamination Absorbance is a function of the incubation time and temperature Before starting the assay it is recommended that all reagents are ready caps removed all needed wells secured in holder etc This will ensure equal elapsed time for each pipetting step without interruption As a general rule the enzymatic reaction is linearly proportional to time and temperature Pipetting of all standards samples and controls should be completed within 6 minutes Note this especially for manual pipetting Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner Stra e 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 5 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 6 2 Test Procedure Each run must include a standard curve 1 Secure the desired number of Microtiterwells in the holder 2 Dispense 25 uL of each Standard controls and samples with new disposable tips into appropriate wells 3 Dispense 100 pL Enzyme Conjugate into each well Thoroughly mix for 10 seconds It is important to have a complete mixing in
64. rectly from DEMEDITEC OPEN Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 3 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 4 REAGENTS 4 1 Reagents provided 1 Microtiterwells 12x8 break apart strips 96 wells Wells coated with anti LH antibody monoclonal 2 Standard Standard 0 5 6 vials lyophilized 1 mL Concentration 0 10 20 40 100 200 mIU mL The standards are calibrated against WHO 2 International Standard for LH IRP 80 552 see Preparation of Reagents contain 0 03 Proclin 300 0 015 BND and 0 010 MIT as preservative 3 Enzyme Conjugate 1 vial 11 mL ready to use Anti LH antibody conjugated to horseradish peroxidase contains 0 03 Proclin 300 0 015 BND and 0 010 MIT as preservative 4 Substrate Solution 1 vial 14 mL ready to use Tetramethylbenzidine TMB 5 Stop Solution 1 vial 14 mL ready to use contains 1 N acidic solution Avoid contact with the stop solution It may cause skin irritations and burns BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Note Additional Standard O for sample dilution is available on request 4 2 Materials required but not provided A microtiter plate calibrated reader 450 10 nm Calibrated variable precision micropipettes Absorbent paper Distilled or de
65. risultati di un test del laboratorio si accordano con il quadro clinico dell ammalato si possono intraprendere delle conseguenze terapeutiche Il risultato del test da solo non base sufficiente per lo stabilimento di una terapia 11 3 Responsabilit legali Ogni cambiamento del protocollo del test e o lo scambio o il mescolamento di componenti provenienti da cariche diverse possono influenzare negativamente i risultati e compromettere la validit del test Questi cambiamenti e o scambi annullano ogni diritto al risarcimento Si respingano inoltre tutti i richiami risultanti da interpretazioni sbagliate da parte dell utente secondo il paragrafo 11 2 Nel caso di reclamazione la garanzia del produttore limitato al valore massimo del test kit Ogni danno provocato durante il trasporto del kit non sottost alla responsabilit del produttore 12 BIBLIOGRAFIA Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Jon 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 22 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 1 INTRODUCCI N El Kit de inmunoensayo enzim tico DEMEDITEC LH ELISA proporciona los materiales necesarios para la determinaci n cuantitativa del Hormona Luteinizante LH en suero Este ensayo est dise ado solo para diagn stico in vitro 2 FUNDAMENTO DEL ENSAYO
66. ropin releasing factors GnRF which in turn stimulates the pituitary to increase FSH production and secretion 4 The rising FSH levels stimulate several follicles during the follicular phase one of these will mature to contain the egg As the follicle develops estradiol is secreted slowly at first but by day 12 or 13 of a normal cycle increasing rapidly LH is released as a result of this rapid estradiol rise because of direct stimulation of the pituitary and increasing GnRF and FSH levels These events constitute the pre ovulatory phase 11 Ovulation occurs approximately 12 to 18 hours after the LH reaches a maximum level After the egg is released corpus luteum is formed which secretes progesterone and estrogen two feedback regulators of LH 3 10 The luteal phase rapidly follows this ovulatory phase and is characterized by high progesterone levels a second estradiol increase and low LH and FSH levels 12 Low LH and FSH levels are the result of the negative feedback effects of estradiol and progesterone on the hypotalamic pituitary axis After conception the developing embryo produces hCG which causes the corpus luteum to continue producing progesterone and estradiol The corpus luteum regresses if pregnancy does not occur and the corresponding drop in progesterone and estradiol levels results in menstruation The hypothalamus initiates the menstrual cycle again as a result of these low hormone levels 12 Patients suffering from h
67. rt auf der vertikalen Y Achse und die Konzentration auf der horizontalen X Achse eingetragen wird Unter Verwendung der mittleren OD wird f r jede Probe die entsprechende Konzentration aus der Standardkurve ermittelt Automatische Methode Die in der Arbeitsanleitung ermittelten Werte wurden automatisch mit Hilfe der 4 Parameter Gleichung 4PL 4 Parameter Logistics 4 Parameter Rodbard bestimmt Andere Auswertungsfunktionen k nnen leicht abweichende Werte ergeben Die Konzentration der Proben kann direkt von der Standardkurve abgelesen werden Proben die eine h here Konzentration als die des h chsten Standards enthalten m ssen verd nnt werden Dieser Verd nnungsfaktor muss bei der Berechnung der Konzentration beachtet werden 6 3 1 Beispiel f r eine Standardkurve Nachfolgend wird ein typisches Beispiel f r eine Standardkurve mit dem DEMEDITEC ELISA gezeigt Diese Werte sollten nicht zur Berechnung von Patientendaten verwendet werden Standard Optische Dichte 450nm Standard 0 0 mIU mL Standard 1 10 mlUmL Standard 2 20 mili Standard 3 40 mIUimL Standard 4 100 mlUImL Standard 5 200 mIU mL Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 14 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 7 ERWARTETE WERTE Es wird empfohlen dass jedes Labor seine eige
68. say for the quantitative in vitro diagnostic measurement of the Luteinizing Hormone LH in serum 1 2 Summary and Explanation Luteinizing hormone LH is produced in both men and women from the anterior pituitary gland in response to luteinizing hormone releasing hormone LH RH or Gn RH which is released by the hypothalamus 1 3 LH also called interstitial cell stimulating hormone ICSH in men is a glycoprotein with a molecular weight of approximately 30 000 daltons 4 It is composed of two non covalently associated dissimilar amino acid chains alpha and beta 5 The alpha chain is similar to that found in human thyroid stimulating hormone TSH follicle stimulating hormone FSH and human chorionic gonadotropin hCG The difference between these hormones lie in the amino acid composition of their beta subunits which account for their immunological differentiation 6 8 The basal secretion of LH in men is episodic and has the primary function of stimulating the interstitial cells Leydig cells to produce testosterone The variation in LH concentrations in women is subject to the complex ovulatory cycle of healthy menstruating women and depends upon a sequence of hormonal events along the gonado hypothalamic pituitary axis The decrease in progesterone and estradiol levels from the preceeding ovulation initiates each menstrual cycle 9 10 As a result of the decrease in hormone levels the hypothalamus increases the secretion of gonadot
69. this step 4 Incubate for 30 minutes at room temperature 5 Briskly shake out the contents of the wells Rinse the wells 5 times with aqua dest 400 uL per well Strike the wells sharply on absorbent paper to remove residual droplets Important note The sensitivity and precision of this assay is markedly influenced by the correct performance of the washing procedure Add 100 uL of Substrate Solution to each well Incubate for 10 minutes at room temperature Stop the enzymatic reaction by adding 50 uL of Stop Solution to each well Determine the absorbance OD of each well at 450 10 nm with a microtiter plate reader It is recommended that the wells be read within 10 minutes after adding the Stop Solution O ON O 6 3 Calculation of Results 1 Calculate the average absorbance values for each set of standards controls and patient samples 2 Using semi logarithmic graph paper construct a standard curve by plotting the mean absorbance obtained from each standard against its concentration with absorbance value on the vertical Y axis and concentration on the horizontal X axis 3 Using the mean absorbance value for each sample determine the corresponding concentration from the standard curve 4 Automated method The results in the IFU have been calculated automatically using a 4 PL 4 Parameter Logistics curve fit 4 Parameter Logistics is the preferred method Other data reduction functions may give slightly different results 5
70. tos de seguridad se proporciona informaci n especial de este producto ver cap tulo 13 4 6 Kits de ensayo da ados En caso de que exista cualquier da o severo del kit de ensayo o de sus componentes ha de informarse por escrito a DEMEDITEC no mas tarde de una semana despu s de recibir el kit No deben utilizarse componentes da ados para llevar a cabo un ensayo Han de almacenarse hasta que se encuentre una soluci n Despu s de esto deben ser eliminados de acuerdo con las leyes oficiales Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 24 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 5 MUESTRAS En este ensayo debe usarse s lo suero No usar muestras hemol ticas ict ricas o lip micas Tener en cuenta No deben usarse muestras que contengan acida s dica 5 1 Toma de muestras Suero Recoger la sangre por punci n en la vena ej Sarstedt Monovette 02 1388 001 permitir coagulaci n y separar el suero por centrifugaci n a temperatura ambiente No centrifugar antes de la coagulaci n completa Las muestras de pacientes que reciben terapia anticoagulante requieren m s tiempo para coagular 5 2 Almacenamiento de las muestras Las muestras deben ser tapadas y pueden ser almacenadas hasta 48 horas a2 C 8 C antes del ensayo Las muestras almacenadas por un per odo de
71. traBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 28 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 1 INTRODUCTION Le kit de dosage immuno enzymatique DEMEDITEC LH ELISA propose les mat riaux requis pour la mesure quantitative d hormone lut inisante LH dans le s rum Ce kit est utiliser uniquement dans le cadre de tests diagnostiques in vitro 2 PRINCIPE DU TEST Le kit DEMEDITEC LH ELISA est bas sur une r action immuno enzymatique en sandwich en phase solide Les microplaques sont recouvertes avec un anticorps monoclonal dirig contre un antig ne sp cifique de la mol cule LH Un aliquot de l chantillon contenant le LH endog ne est incub dans un puits avec enzyme conjugu e c est dire un anticorps anti LH conjugu e avec la peroxidase de Raifort horseradish peroxidase HRP Apres l incubation le conjugu non li est limin durant le lavage des puits La quantit de conjugu HRP li e est proportionnelle a la concentration de LH contenu dans l chantillon Suite l addition de solution substrat l intensit de la coloration obtenue est proportionnelle la concentration de LH contenu dans l chantillon 3 PRECAUTIONS D UTILISATION e Ce kit est uniquement destin aux tests diagnostiques in vitro e Les informations concernant la toxicit des r actifs contenus dans ce kit sont pr sent es dans
72. ution pour dilution Soluci n para diluci n F Diluent Conjugate Diluent medium du conjugu del conjugado Diluente del tracciante Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Email info demeditec de e http www demeditec com Version 06 12 08 JS Updated 090519 35 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 Symbol Portugues Dansk Svenska EAAnvika C Conformidade com as Europaeisk Europeisk Eupwfraikr normas europeias overensstemmelse verensst mmelse 2upp ppwon Gonsulte as instru es Se brugsanvisning Se bruksanvisningen Eyxeipidio xpnotn de utiliza o Diagn stico in vitro In vitro diagnostik Diagnostik in vitro in vitro diayvwoTIK Cat logo n Katalognummer Katalog nummer API8u6 KaTaAdyou No do lote Lot nummer Batch nummer Ap 8u g Mapridos Indeholder Inneh ller tillr ckligt till Mepiex pgevo errapk s tilsttr kkeligt til n test n tester yla N EgET GEI SERE Temperatura de Opbevaringstemperatu A OEpyokpaoia conserva o r F rvaringstempratur amodrkeuong Prazo de validade Udlgbsdato Bast f re datum Huepounvia An ns Fabricante Producent Tillverkare KarackevaoT S Distributed by Content Conte do Indhold Innehall Mepiexbpevo Volume No Volume N mero Volumen antal Volym antal Oykog ap
73. ux ce test e Ne pas m langer ou utiliser des r actifs contenus dans des kits de lots diff rents Il est conseill de ne pas changer les puits de diff rentes plaques m me si celles ci proviennent du m me lot Les kits peuvent avoir t transport s ou stock s diff remment et les caract ristiques de liaison de chaque plaque pourraient ainsi tre modifi es e L limination des solutions chimiques et des r actifs contenus dans ce kit utilis s ou non doit tre en accord avec la r glementation nationale en vigueur concernant l limination des d chets risque biologique e La fiche de s curit concernant ce produit peut tre obtenue en contactant directement Demeditec Diagnostics GmbH Les fiches de s curit sont en accord avec les directives europ ennes EU 91 155 EC Demeditec Diagnostics GmbH e Lise Meitner StraBe 2 e D 24145 Kiel Germany en 06 12 08 Phone 49 0 431 71922 0 e Fax 49 0 431 71922 55 Updated 090519 Email info demeditec de e http www demeditec com 29 Demeditec LH ELISA Serum DE1289 4 COMPOSITION DU KIT 4 1 Contenu du kit 1 Microtiterwells Plaques de micro titratio 12x8 d tacher barrettes plaques de 96 puits Les puits sont recouverts avec un anticorps anti LH monoclonal 2 Standard Standard 0 5 6 flacons lyophilis s 1 mL Concentrations 0 5 10 20 50 100 mIU mL Les standards ont t calibr s selon le WHO 2 for LH IRP 80 552 contient 0 03
74. ypogonadism show increased concentrations of serum LH A decrease in steroid hormone production in females is a result of immature ovaries primary ovarian failure polycystic ovary disease or menopause in these cases LH secretion is not regulated 10 13 A similar loss of regulatory hormones occurs in males when the testes develop abnormally or anorchia exists High concentrations of LH may also be found in primary testicular failure and Klinefelter syndrome although LH levels will not necessarily be elevated if the secretion of androgens continues Increased concentrations of LH are also present during renal failure cirrhosis hyperthyroidism and severe starvation 10 14 A lack of secretion by the anterior pituitary may cause lower LH levels As may be expected low levels may result in infertility in both males and females Low levels of LH may also be due to the decreased secretion of GnRH by the hypothalamus although the same effect may be seen by a failure of the anterior pituitary to respond to GnRH stimulation Low LH values may therefore indicate some dysfunction of the pituitary or hypothalamus but the actual source of the problem must be confirmed by other tests 10 In the differential diagnosis of hypothalamic pituitary or gonadal dysfunction assays of LH concentration are routinely performed in conjunction with FSH assays since their roles are closely interrelated Furthermore the hormone levels are used to determine menopause pi

LH ELISA (Serum)

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