E. coli O157 Latex Test [FR]
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1. es par des anticorps de lapin dirig s contre l antig ne somatique 0157 100 tests DR 622M latex de contr le Particules de latex bleues sensibilis es par des immunoglobulines de lapin non sp cifiques 100 tests DR 623M contr le positif Suspension d E coli 0157 inactiv 25 tests DR 624M contr le n gatif Suspension d E coli 0116 inactiv 25 tests DR 500G cartes tests 35 cartes jetables 3 MAT RIEL N CESSAIRE NON FOURNI oese solution saline 0 85 solution d sinfectante solution d hypochlorite de sodium gt 1 3 p p 4 PR CAUTIONS Exclusivement pour usage in vitro Ne pas congeler Ne pas m langer les r actifs appartenant des lots diff rents r actifs contiennent de l azide de sodium 0 1 Celui ci peut r agir avec les tuyauteries en plomb ou en cuivre et donner des compos s potentiellement explosifs Pour viter l accumulation dans les canalisations rincer abondamment imm diatement apr s limination du r actif 5 CONSERVATION Les r actifs doivent tre conserv s 2 8 C jusqu a la date de p remption indiqu e sur le coffret 6 CONTR LES Les suspensions de contr le doivent tre utilis es une fois par jour avant d effectuer les tests pour v rifier le bon fonctionnement des r actifs au latex Le contr le positif doit donner une agglutination bien visible avec le latex test en moins d une minute Le contr le n gatif ne doit pas pr2. Ce produit contient d azoture de sodium Nocif en cas d ingestion 13 REFERENCES 1 Borczyk A Lior H Crebin B 1987 Int J Food Microbiol 4 347 349 m Konowalchuk J Speirs J and Stavric S 1977 Infect Immun 18 775 779 Scotland S Day N and Rowe B 1980 FEMS Microbiol Lett 7 15 17 Centres for Disease Control 1982 Morbid Mortal Wkly 31 580 585 Karmali M Still B Petrick M and Lim C 1983 Lancet i 619 620 Johnson W Liroh H and Bezanson 1983 Lancet i 76 March S and Ratnam 1986 J Clin Microbiol 23 869 872 Krishnan C Fitzgerald V Dakin S and Behme R 1987 J Clin Microbial 25 1043 1047 god N CO e E 9 P A Chapman 1989 Evaluation of Commercial latex slide test for identifying Escherichia coli 0157 42 1109 1110 10 Bremer et al 1982 Journal of Clinical Microbiology Vol 15 No 4 p 703 L gende des symboles R f rence de catalogue Dispositif m dical de diagnostic in vitro Consulter le mode d emploi Limite de temp rature Code de lot A utiliser avant Fabricant M En AHER X4147C R vis Mars 2013 OXOID Limited Wade Road Basingstoke Hampshire RG24 8PW UK
3. senter d agglutination en une minute Si le contr le est incorrect ne pas utiliser le r actif 7 REMARQUES Ne pas toucher l chantillon avec le compte gouttes de fa on ne pas contaminer les latex Revisser correctement les bouchons apr s usage pour viter l vaporation ou la contamination des r actifs Remettre le coffret au r frig rateur apr s usage et veiller ce que les flacons restent en position verticale 8 CULTURE Les colonies tester peuvent tre pr lev es soit sur une g lose Mac Conkey au sorbitol Oxoid CM0813 colonies incolores soit sur un milieu non s lectif Il est n cessaire de tester environ 10 colonies diff rentes pour augmenter la probabilit de d tecter une souche d E coli 0157 qui peut se trouver en culture mixte avec d autres s rotypes L utilisation du latex de contr le permet de s assurer que la souche n est pas autoagglutinable 9 MODE OP RATOIRE 1 Ramener les r actifs au latex temp rature ambiante Bien m langer les suspensions de latex en agitant vigoureusement apr s avoir vid le compte gouttes 2 D poser une goutte de latex test sur un cercle de la lame de r action pr s du bord du cercle 3 Ajouter une goutte de solution saline l aide d une pipette Pasteur S assurer que le latex et la solution saline ne se m langent pas 4 Pr lever l oese une partie de la colonie tester et l mulsionner dans la solution saline de fa o
4. E coli 0157 Latex Test FR DROG620M 100 Tests 1 E coli 0157 TEST AU LATEX Test d agglutination au latex pour l identification d E coli 0157 Certaines souches d Escherichia coli ont t impliqu es dans des cas de colit h morragique et de syndrome ur mique h molytique Ces souches produisent des v ro cytotoxines Le s rotype d E coli reconnu comme le plus fr quemment responsable de cette pathologie est le s rotype 0157 H7 L isolement de ce s rotype partir d une selle diarrh ique et h morragique est le signe d une souche produisant une v rocytotoxine 3 436 78 Le test Oxoid met en vidence par agglutination de particules de latex sur lame les souches d E coli poss dant l antig ne 0157 Il est pr f rable d utiliser parall lement ce test la g lose Mac Conkey au sorbitol Oxoid CM0813 Les souches d E coli 0157 H7 ne fermentent pas le sorbitol et donnent donc des colonies incolores sur ce milieu contrairement la majorit des autres souches d E coli qui fermentent le sorbitol et donnent des colonies roses caract ristiques La g lose Mac Conkey au sorbitol permet une premi re orientation Les colonies qui ne fermentent pas le sorbitol peuvent alors tre test es avec le r actif au latex pour confirmer leur appartenance au s rogroupe 0157 et donc leur aptitude a produire une v ro cytotoxine 2 R ACTIFS DR 621M latex test Particules de latex bleues sensibilis
5. er le surnageant 11 LIMITES DU TEST Lorsqu un r sultat positif est obtenu avec une colonie non identifi e des tests biochimiques doivent tre r alis s pour confirmer qu il s agit bien d une souche d E coli Ni la g lose Mac Conkey au sorbitol ni le test au latex ne peuvent prouver que la souche isol e est une souche productrice de toxine A l inverse d autres s rotypes peuvent produire une v ro cytotoxine Certaines souches d Escherichia hermanii peuvent pr senter une fraction antig nique commune avec E coli 0157 et peuvent donc donner une r action crois e avec le test au latex Borczyk et coll E hermanii peut tre diff renci d E coli car il fermente le cellobiose pousse en pr sence de KCN et produit un pigment jaune qui peut appara tre tardivement 12 PERFORMANCE DU TEST Les essais cliniques ont montr une corr lation de 99 3 151 152 entre le test Oxoid et les antis rums disponibles La sensibilit du test est de 100 49 49 et la sp cificit de 99 101 103 l chantillon divergent a t test avec un troisi me antis rum et a t trouv positif en Ag 0157 Ceci tait en accord avec les r sultats du test Oxoid Le r actif Oxoid n a pas montr de r actions crois es avec d autres s rotypes d E coli ou des germes ne fermentant pas le sorbitol Il a t test sur diff rents milieux de culture et aucun n a donn d interf rence ATTENTION
6. n obtenir une suspension fine et homog ne 5 M langer cette suspension et le latex test en couvrant toute la surface du cercle de r action 6 Imprimer la lame un mouvement de rotation et observer lagglutination L agglutination doit appara tre en une minute maximum Ne pas utiliser de loupe pour la lecture 7 Si aucune agglutination n appara t tester une autre colonie S il y a agglutination tester l autre partie de la colonie avec le latex de contr le pour s assurer que la souche n est pas autoagglutinable 9 liminer la lame de r action dans une solution d sinfectante 10 INTERPR TATION DES R SULTATS L agglutination du latex test en moins d une minute signe un r sultat positif et indique la pr sence d E coli 0157 Si aucune agglutination n appara t en une minute le r sultat est n gatif et indique l absence de E coli 0157 Les r sultats ne peuvent pas tre interpr t s en cas d agglutination du latex de contr le Certaines souches d E coli s mulsionnent difficilement dans la solution saline et peuvent donc donner une r action filamenteuse avec le latex test et le latex de contr le Ce type de r action n est pas une v ritable agglutination et ne doit pas tre pris en compte Si cette r action filamenteuse est trop importante pour permettre une interpr tation correcte mettre la colonie en suspension dans 0 3 ml de solution saline Laisser s dimenter les particules et test
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