Les méthodes alternatives en expérimentation
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1. des animaux elle repr sente moins de 10 de l utilisation d animaux des fins exp rimentales en Europe figure 1 Les m thodes alternatives en exp rimentation animale peuvent tre regroup es de la fa on suivante les m thodes de remplacement in vitro mod les cel lulaires in silico mod les biomath matiques utilisant des bases de donn es issues d exp rimentation in vivo ou in vitro chimie analytique regroupement de substances et m thodes de r f rences crois es les m thodes de r duction optimisation des protocoles in vivo ex vivo m thodes statistiques par lesquelles on obtient plus d informations partir d un seul protocole contr le de la variabilit de la r ponse par les param tres environnementaux et le statut sanitaire et g n tique des animaux omics techniques d analyse explorant au niveau mol culaire la synth se des prot ines mod les animaux transg niques les m thodes de raffinement diminution de la douleur examen clinique imagerie du petit animal in vivo IRM ultrasons bioluminescence scintigraphie tomographie t l m trie enregistrement de param tres physiologiques en continu utilisation d esp ces r put es moins sensibles sachant que ces m thodes sont aussi des m thodes de r duction ce jour seule la r glementation sur les cosm tiques interdit lerecours al exp rimentation animale Les m thodes alterna tives sontle plus souvent rec2. par principe a toute exp rimentation animale les r pondants des associations environnement et san t revendiquent leur r le de pr curseurs et de lanceurs d alerte lls m nent des combats souvent personnalis s et se voient en levier de l action publique Par principe ils d fendent la pertinence des m thodes alternatives suivent et appuient le d veloppement des l gislations europ ennes tout comme ils se positionnent plut t contre l exp rimentation animale Le dialogue permet d tablir les bases de la confiance entre les groupes de populations _ L aS 3a 12_INERIS REFERENCES LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR N Cette synth se a t labor e sur la base de 2361 r pondants au questionnaire grand public 285 membres du groupe Facebook 10 lanceurs d alerte et 3 groupes de discussion les r pondants des associations de d fense de l envi ronnement ont des positions moins syst matiques que les suivants vis vis des organismes auxquels ils font confiance pour s informer Ils croient l ind pendance de la recherche mais consid rent eux aussi que les questions de s curit des substances chimiques ne sont pas du seul ressort des experts les r pondants des associations de d fense des animaux sont majoritaires dans l chantillon associatif et engag s depuis 1976 dans la d fense de la cause animale Ils militent pou
3. finie d s l origine et mise en uvre dans le projet PICASO Alternatives Afin d identifier les attentes soci tales quatre outils ont t utilis s des groupes de discussion un groupe Facebook un questionnaire aux lanceurs d alerte et un questionnaire grand public 2361 r pondants Le panorama tir des diff rents questionnements fait appa ra tre dans l chantillon trois groupes de populations les scientifiques les militants et les personnes n appartenant aucune association On peut ainsi voir se dessiner les populations entre lesquelles il serait possible d tablir d s maintenant le dialogue Bien que l exp rimentation animale occupe encore aujourd hui une place centrale pour valuer la toxicit des substances les tudes toxicologiques ont n anmoins we O2 INERIS REFERENCES_LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR IL RESSORT DE L ENQU TE PICASO ALTERNATIVES QU UNE MAJORIT DES R PONDANTS CONSID RE QU IL EST ENCORE TROP T T POUR SE PASSER TOTALEMENT DE L EXP RIMENTATION ANIMALE CEPENDANT LES PR OCCUPATIONS SUR LA SOUFFRANCE ANIMALE ET SUR LA S CURIT D UTILISATION DES SUBSTANCES CHIMIQUES SONT TR S PR SENTES ET PARTAG ES tendance avec la double volution du corpus r glementaire bien tre animal substances chimiques laisser une plus large place aux m thodes alternatives LINERIS d veloppe ou value des m thodes alternatives en vue de la mi
4. 001 we 24 _INERIS REFERENCES LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR annexes 26 ANNEXE 1 Les r seaux et la recherche 28 ANNEXE 2 Analyse simplifi e des avanc es et des enjeux des m thodes alternatives en exp rimentation animale CEECEELEECECEE CEE EEE EEE seers EEE EEE TEE TEE EEE EE EEE TEE EEE EEE EEE CEE EEE EEE EEE EEE EEE EEE EEE EEE ET EEE EEE EEE CEE EEE EEE TETE 30 ANNEXE 3 Liens utiles ANNEXE 1 y Il existe plusieurs alliances pour la recherche visant a coordonner les acteurs d un domaine afin de concevoir des programmes th matiques f d rateurs dont AVIESAN Alliance nationale pour les sciences de la vie et de la sant et AllEnvi Alliance nationale de recherche pour l environnement L INERIS compte partager avec celles ci son expertise dans le domaine des m thodes alternatives en exp rimentation animale et des perturbateurs endocriniens LES R SEAUX ET LA RECHERCHE LES 14 PARTENAIRES DE FRANCOPA RANCOPA a t inaugur e le 16 novembre 2007 sous la forme d un Groupement d int r t scientifique GIS m thodes alternatives Dans un cadre d valuation du danger et du contr le des produits de sant des produits cosm tiques et des subs tances chimiques elle rassemble des partenaires fran ais ayant comme objectif FRANCOPA CREE commun de promou LES CONDITIONS voir les m thodes per D UNE PLUS FORTE me
5. Les travaux de d veloppement et de validation s orienteront vers une prise en compte plus exhaustive des m canismes d actions des perturbateurs endocriniens PE dans le but de valider des tests in vitro et in vivo aptes fonder un diagnostic sur le potentiel PE des substances chimiques et de les int grer dans une strat gie de tests raisonn e et pertinente chezle poisson Concernantle d veloppement de tests surembryon et larve de poisson l INERIS continuera galement partici per au raffinement des m thodes in vivo avec la recherche des biomarqueurs qui permettent des exp rimentations dont le contenu scientifique est largement am lior Les travaux sur l valuation de la toxicit g n rale et du passage trans membranaire des substances chimiques se poursuivront Axe 2 les approches in silico Les travaux porteront sur l optimisation et la validation de m thodes math matiques qui soutiennent la toxico logie et l cotoxicologie pr dictive mod les QSAR pour FEUILLE DE ROUTE 2013 2020 DE LA RECHERCHE L INERIS Faire la preuve du concept d velopper et valoriser scientifiquement les m thodes alternatives Contribuer leur pr validation construire le lien entre R amp D et outils op rationnels Optimiser et contribuer la validation des approches pr dictives pr dire les r sultats des tests mod les PBPK pour int grer les r sultats de mod les QSAR et de tests in vitro mod les d
6. al Evaluation of the OECD QSAR application Toolbox and Toxtree for Predicting and Profiling the Carcinogenic Potential of Chemicals SAR and QSAR in Environmental Research 2010 21 n 7 8 p 731 752 Benigni R et al The Benigni Bossa Rulebase for Mutagenicity and Carcinogenicity A module of Toxtree EUR 23241 EN 2008 ISSN 1018 5593 http www oecd org env ehs risk assessment theoecdqsartoolbox htm Interface graphique de Toxtree 2 6 0 ae oN Uo LA RECHERCHE L INERIS p L am lioration des m thodologies d valuation de la toxicit et de l cotoxicit de substances chimiques repose en partie sur le questionnement autour des m thodes alternatives dans le domaine de la toxicologie et de l cotoxicologie pr dictives Le travail s int gre dans celui plus large de l quipe qui cherche d velopper des outils de caract risation de la toxicit et de l cotoxicit des substances chimiques L Institut ne travaille cependant pas sur tous les types d effets est en particulier exclue la canc rog nicit e d fi est scientifique et applicatif Il faut en effet disposer de m thodes pertinentes et pr dictives d effets biologiques non totalement caract ris s et d autre part reconnues par les utilisateurs gestionnaires et industriels Les travaux de l INERIS porteront donc sur ces 2 aspects 3 AXES DE TRAVAIL INTERD PENDANTS Axe 1 les approches in vitro
7. de la s curit environnementale Cr en 1990 l INERIS est un tablis sement public caract re industriel et commercial plac sous la tutelle du minist re charg de l cologie du d veloppement durable et de nergie Il emploie 587 personnes bas es prin cipalement Verneuil en Halatte dans l Oise Parc Technologique Alata B P 2 60550 Verneuil en Halatte T l 03 44 55 66 77 Fax 03 44 55 66 99 e mail ineris ineris fr www ineris fr
8. depuis plusieurs ann es sur les m thodes alternatives Le recours a ces m thodes exigence thique est aussi une n cessit pratique dans un contexte r glementaire influant et au dela dans un besoin de recherche socialement responsable y compris en accompagnement l innovation d veloppement de nou veaux produits solutions de substitution L co toxicologie pr dictive est une priorit pour l Institut qui dispose depuis 2006 d un comit d thique sur la question de l exp rimenta tion animale Enfin d j dot de capacit s de mod lisation d essais et de dispositifs exp rimentaux d envergure l image de ses m socosmes l INERIS entour de ses partenaires aca d miques en Picardie a vu ses quipements structurants se renforcer Ainsi la plateforme exp rimentale pour la validation etle d veloppement des m thodes alternatives a t soutenue dansle cadre du Contrat de Projet Etat R gion 2007 2013 Les l ments scientifiques r glementaires et soci taux compil s dans ce dossier ne sont pas exhaustifs Ils reposent sur un tat des lieux constitu en interne l INERIS sur la base de donn es collect es aux niveaux national et europ en note 1_ Dispositif exp rimental clos qui permet d tudier les effets des polluants en simulant moyenne chelle les conditions d un milieu aquatique PICASO ALTERNATIVES LA PRISE EN COMPTE DES ATTENTES SOCIETALES EN MATIERE DE METHODES ALTERNATIVE
9. les omics sont peu utilis es dans le panorama actuel S agis sant des omics les perspectives de recherche sur les signatures g nomiques et les puces ADN sont impor tantes Enfin la toxicocin tique est un l ment indis pensable la compr hension des m canismes toxiques et la pr diction des r sultats in vivo a partir de l in vitro par des mod les PBPK Sous 5 7 ans la toxicocin tique devrait tre un facteur d am lioration pr pond rant des strat gies de tests int gr s ITS sms N ANNEXE 3 v LIENS UTILES ECOPA European COnsensus Platform for Alternatives www ecopa eu AltTox Non animal Methods for Toxicity Texting www alttox org ALTWEB Alternatives to Animal Testing on the Web http altweb jhsph edu ASAT Assuring Safety Without Animal Testing www asat initiative eu AXLR8 Accelerating the Transition to a Toxicity Pathway based Paradigm for Chemical Safety Assessment throught Internationally co ordinated Research and Technology Development www axir8 eu CAAT Johns Hopkins University Center for Alternatives to Animal Testing http caat jhsph edu EURL ECVAM European Union Reference Laboratory for Alternatives to Animal Testing http ihcp jrc ec europa eu our_labs eurl ecvam EPAA European Partnership for Alternative Approaches to Animal Testing Www epaa eu com EUROECOTOX European Network for Alternatives Testing Strategies in Ecotoxicology www euroecot
10. recherche fond s sur les 3R conduits en Europe et l international Dans son 5 rapport d tape publi en 2012 sur les avan c es de la recherche en mati re de strat gies de tests alternatifs AXLR8 esquisse une premi re feuille de route d une recherche collaborative et innovante en mati re de m thodes alternatives l horizon 2020 Les effets prioritaires cancer reproduction d veloppe ment syst me immunitaire et allergies et toxicit chronique doses r p t es Les moyens privil gi s le d veloppement la qualification et l int gration d outils in vitro bas s sur la biologie humaine en lien avec les outils in silico en particulier pour relier les r sultats in vitro au monde r el Mod lisation num rique et cs techniques d estimation Techniques EE de pointe Omics bio informatique et biologie computationnelle R seaux et valorisation ete Les leviers les partenariats public priv une strat gie top down centr e sur l identification et la compr hen sion des m canismes d action toxique et des d terminants de sant au niveau individuel homme et populationnel cosyst me note 9_ Alternative Testing Strategies Progress Report 2012 ISBN 978 3 9814126 5 9 http axir8 eu R partition du financement des projets sur les m thodes alternatives source PICASO Alternatives REPERE NB ces projets repr sentent 1 5 du budget total allou
11. rentes composantes de la soci t y est d cid e Signature de l avenant Grenelle au contrat d objectifs Etat INERIS qui fixe notamment pour objectif l largissement de la gouvernance scientifique de nouveaux acteurs SEPTEMBRE 2009 Le conseil d administration est inform des modalit s d volution de la gouvernance scientifique de l Institut discut es lors du s minaire de juin MARS 2010 R union de pr figuration de la CORE l INERIS JUIN 2010 1 participation de la CORE au s minaire des orientations scientifiques et techniques de l INERIS portant sur la pr paration du contrat d objectifs 2011 2015 de l Institut SEPT PUIS D C 2010 L INERIS adopte par d lib ration du conseil d administration la charte nationale de l expertise qui pr voit dans son article 9 des dispositions particuli res relatives au devoir d alerte Le protocole de gestion des ressources publiques sign avec l Etat en d cembre pr voit donc pour lINERIS d entreprendre l investigation en amont des suites a donner en cas d expression en son sein d un risque notamment a caract re environnemental ou sanitaire et pr cise que A 22 INERIS REFERENCES LES MEIHODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE les rapports qui en seront issus ont vocation a tre pr sent s la CORE pour avis OCT ET NOV 2010 1s r unions de travail de la CORE qui s implique notamment
12. sur les travaux de hi rarchisation des substances chimiques conduits par l Institut AVRIL 2011 Parution au Journal Officiel de l arr t minist riel relatif aux comit s d orientation scientifique et technique de l Institut national de l environnement industriel et des risques La CORE est officiellement cr e SEPTEMBRE 2011 Le conseil d administration est inform de l largissement du comit de suivi de la charte de d ontologie un membre de la CORE issu du coll ge associations SEPT OCT 2011 Les membres de la CORE sont nomm s par le Directeur g n ral de l INERIS apres consultation du conseil scientifique pour une dur e de trois ans renouvelable AVRIL 2012 Le conseil d administration de l INERIS approuve la proposition de nomination du pr sident et vice pr sident de la CORE 2013 Poursuite des activit s de la CORE et organisation de 5 r unions ONG WWW INERIS FR CONCLUSION wv LES M THODES ALTERNATIVES RE OIVENT UN ACCUEIL POSITIF MAIS LUCIDE es attentes soci tales en mati re de recours aux m thodes alternatives en exp rimenta tion animale apparaissent en majorit rai sonn es et coh rentes avec l avanc e de la recherche et les volutions r glementaires malgr cer tains comportements st r otyp s Il ressort de l enqu te PICASO Alternatives qu une majorit des r pondants consid re qu il est encore trop t t pour se
13. NERIS CONCILIER PROTECTION ANIMALE ET AM LIORATION DE LA PR DICTION D CEMBRE 2013 les m thodes alternatives en exp rimentation animale INERIS pour un d veloppement durable SOMMAIRE INERIS R F RENCES 02 RESUME NON TECHNIQUE Concilier protection animale et am lioration de la pr diction 04 INTRODUCTION Un d fi relever 06 DE QUOI PARLE T ON Les m thodes alternatives CELL E CEE EEE EEE CEE CEE CEE CEE EEE EEE CEE EEE CCE CEE CC EEE CE 08 amp CONTEXTE Remplacer R duire Raffiner l exp rimentation animale nono sono s sonne nes none ese see seessesec eee see ses eeeseseesesesessesesesessscsesseseseseseeesees 12 LES ATTENTES SOCIETALES Une opinion structur e en 3 groupes 14 LA RECHERCHE L INERIS Les axes de recherche Feuille de route 2013 2020 Quelques publications r centes 23 CONCLUSION Les m thodes alternatives re oivent un accueil positif mais lucide OCELEEEELCE EEE EEE CEE CEE EEE CEE EEE EEE CEE EEE CCE CE CE 25 ANNEXES Annexe 1 Les r seaux et la recherche Annexe 2 Analyse simplifi e des avanc es et des enjeux Annexe 3 Liens utiles R SUM NON TECHNIQUE w J INERIS acteur de la toxicologie pr dictive travaille depuis plusieurs ann es sur les m thodes alternatives en exp rimentation animale Le recours a ces m thodes exi gence thique est aussi une n cessit pratique dans un contexte r glementaire qui les pr c
14. NS PARTAG ES SONT FAVORABLES LA CONSTRUCTION D UN COLLECTIF SANS POUR AUTANT PERDRE LA SP CIFICIT DE CHACUN C EST AUSSI UNE FORME DE RECONNAISSANCE DE L EXPERTISE ASSOCIATIVE QUI POURRAIT PERMETTRE D ENVISAGER DES PROGRAMMES DE RECHERCHE ACTION SUR DES THEMATIQUES SENSIBLES DANS L OPINION et ou de d veloppement et d innovation responsables Les plateformes qui se mettent en place permettront association de partenaires publics et priv s autour du partage de donn es l chelle nationale et europ enne en d finissant une gouvernance transparente et ouverte toutes les parties prenantes l image de ce qui est propos dans la strat gie nationale sur les perturbateurs endocriniens EN MATI RE D ATTENTES SOCI TALES QUELLES EVOLUTIONS L INERIS SUITE PICASO ALTERNATIVES Au del du sujet scientifique sp cifiquement trait dans PICASO Alternatives le retour d exp rience en tirer pour l Institut concerne de fa on plus globale sa capacit ren forcer la dimension soci tale dans son expertise scientifique et technique et sa recherche Les principaux constats sont les suivants dans un environnement concurrentiel et mondialis o tout est plus rapide et avec la privatisation croissante de l activit scientifique l inqui tude et la m fiance de la soci t au regard de la science et de la technologie s accroit les experts ne sont pas suffisamment sensibilis s la d
15. S EN EXPERIMENTATION ANIMALE Mise en uvre d une m thode de criblage in vitro l image de ses m socosmes l INERIS a vu ses quipements structurants se renforcer pour la validation et le d veloppement des m thodes alternatives DE QUOI PARLE T ON o La terminologie m thodes alternatives a t introduite en 1978 par David Smyth Elle regroupe les m thodes permettant de satisfaire un ou plusieurs principes des 3R Remplacer R duire Raffiner a pr vention des ventuels effets n fastes li s une exposition un ou plusieurs agents chimiques physiques ou biologiques pr sents dans notre environnement constitue un enjeu majeur de sant publique Pour valuer ces effets l exp ri mentation animale occupe encore aujourd hui une place centrale Ainsi elle permet d identifier la nature des effets toxiques r sultant de diverses condi tions d exposition rigoureusement contr l es les doses ayant induit ces effets toxiques la pertinence pour l homme de l effet observ chez l animal Depuis quelques ann es sous l impulsion de la r glemen tation europ enne les tudes toxicologiques ont n an moins tendance laisser une plus large place aux m thodes alternatives M me si aujourd hui l exp rimentation ani male des fins d valuation de la s curit des produits chimiques est fortement remise en cause par les d fenseurs LES M THODES ALTERNATIVES
16. alement reconnues utilis es par les The Use of Alternatives to Testing on Animals for gouvernements l industrie et les laboratoires ind pen the REACH Regulation source ECHA 2011 dants pour valuer la s curit des produits chimiques Elles sont principalement utilis es pour les tests r glemen taires de s curit la notification et l enregistrement des E gt gt gt UNE METHODE REGLEMENTAIREMENT RECEVABLE DOIT APPORTER LES PREUVES QU ELLE EST APPLICABLE DE FA ON FIABLE ET R P TABLE EN DEHORS DES LABORATOIRES DE RECHERCHE produits chimiques D autres organismes comme le CEN en Europe et l ISO l international produisent des normes centr es sur la qualit des milieux Mais ils ne disposent pas de programme de standardisation sp cifique sur les m thodes alternatives En recherche fondamentale et appliqu e les m thodes alternatives sont utilisables librement sans contrainte de standardisation Ces m thodes sont scientifiquement reconnues par le processus classique de la validation par les pairs i e la publication dans des revues scientifiques Ces m thodes reconnues du point de vue scientifique peuvent tre utilis es par les industriels en amont d un processus de validation r glementaire pour du criblage par exemple Lorsque les m thodes alternatives passent par un pro cessus de validation r glementaire r gi par des instances telles que ECVAM ou l OCDE on parle de m thodes v
17. alid es La validation r glementaire est plus contrai gnante et longue que la validation scientifique dans la mesure o une m thode recevable doit apporter outre ce qui est demand pour la reconna tre scientifiquement les preuves qu elle est applicable de fa on fiable et r p table en dehors des laboratoires de recherche Le r glement REACH permet de faire appel des m thodes recon nues c t des m thodes valid es dans les dossiers r glementaires Une tape interm diaire de pr valida tion pourrait augmenter la valorisation de la recherche et faciliter le passage la normalisation ou la validation r glementaire note 5_ Comit europ en de normalisation note 6_ Comit international de normalisation z z PHYSIOLOGIE FINALITES TOXICOLOGIE PREDICTIVE BIOLOGIE SCIENCES M DICALE A PREUVE PR DICTION EN REGLEMENTAIRE DEVELOPPEMENT a A A METHODE VALIDATION PE R GLEMENTAIRE VALIDATION nu ne u DE TYPE CERTIFICATION NORMALISATION RECHERCHE TRANSLATIONNELLE ET STARTS UP KIT ET OUTILS PR VALIDATION PAR LES PAIRS RECHERCHE ET D VELOPPEMENT A IN VIVO OPTIMIS RAFFIN imagerie biomarqueurs R DUIRE OUTILS IN VITRO mod les cellulaires lt 4 RAFFINER IN SILICO mod les math matiques REMPLACER o Le processus de validation Si le d veloppement de l co toxicologie pr dictive est une priorit de PINERIS l Institut joue aussi un r le dans la reconnaissan
18. alit des milieux sont largement valoris es et repr sentent plus du tiers des publications scientifiques de l INERIS Les travaux s appuient sur des installations d essais en toxicologie et co toxicologie animalerie poisson mammifere plateforme de mod lisation bioessais et sur des campagnes de terrain faune aquatique Enfin le p le est impliqu dans de nom breuses structures mixtes S agissant plus sp cifiquement des m thodes alterna tives l Institut travaille leur d veloppement depuis une vingtaine d ann es avec deux axes de recherche en co toxicologie Il contribue galement au processus de pr validation r cemment renforc en Europe avec la cr ation du R seau europ en de laboratoires pour la validation des m thodes alternatives Enfin l Institut est membre fonda teur de la plateforme nationale pour le d veloppement des m thodes alternatives en exp rimentation animale FRAN COPA et assure le secr tariat g n ral de l infrastructure de recherche en toxicologie pr dictive Antiopes La compr hension des m canismes d action en particulier le potentiel perturbateur endocrinien PE d une substance est un pr alable au d veloppement des axes de recherche et de validation des m thodes alternatives l INERIS Ces axes de recherche concernent LE D VELOPPEMENT ET LA PRE VALIDATION DE TESTS IN VITRO AXE 1 pour l valuation du potentiel perturbateur endo crinien PE des su
19. aux Sciences du vivant g nomique et biotechnologie de la sant dans les 6 et 7 programmes cadre La participation des laboratoires fran ais de recherche publique et priv e repr sente 8 au total 21 Uo PR CONISATIONS DE LA CORE SUR LES TRAVAUX DE L INERIS LA CORE EN QUELQUES MOTS La Commission d Orientation de la Recherche et de l Expertise CORE est l une des instances de gouvernance de l INERIS Officialis e par l arr t minist riel du 26 avril 2011 relatif aux comit s d orientation scientifique et technique de l INERIS elle marque le passage d une gouvernance uniquement scientifique une gouvernance scientifique et soci tale por tant galement sur les activit s d expertise et d appui aux pouvoirs publics Fort de quinze membres elle r unit en six coll ges des repr sentants de diff rents secteurs de la soci t monde acad mique industriels Organisations Non Gouvernementales ONG syndicats lus et Etat Elle concr tise la d marche d ouverture la soci t de l INERIS La CORE a trois grandes missions partager les enjeux et les questionnements soci taux appuyer la diffusion des r sultats des recherches et expertises de l INERIS contri buer la programmation de ses travaux scien tifiques et techniques CHRONOLOGIE DE LA D MARCHE D OUVERTURE LA SOCI T DE L INERIS AVRIL 2005 Visite de la d l gation de parlemen
20. bstances chimiques laboration de tests rapides et sensibles sur embryon etlarve de poisson pour l valuation du potentiel PE de polluants organiques environnementaux approche de criblage valuation des effets sur la reproduction chezle poisson approche int gr e in vitro in vivo identification de substances toxiques dans l environnement couplage in vitro frac 14 _INERIS R F RENCES _LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR gt gt gt UNE M THODE DE R DUCTION RAFFINEMENT LE PROJET NEMO D veloppement et soumission d une m thode alternative l OCDE le test EAZSY D monstration du passage R amp D un outil op rationel en vue de sa validation r glementaire Ei L valuation du potentiel perturbateur endocrinien PE des substances chimiques leurs d tections et leurs identifications dans les milieux aquatiques constituent des enjeux majeurs en raison des risques pos s par ces substances sur les populations et les cosyst mes Dans ce contexte I INERIS et l Institut national de la sant et de la recherche m dicale Inserm ont r cemment d ve lopp un bioessai in vivo chez l embryon de poisson z bre transg nique exprimant une prot ine fluorescente verte GFP sous le contr le du promoteur du g ne cyp 19a1b de poisson z bre Le g ne cyp 19a b code l aromatase c r brale qui s exprime dans le cerveau et est exclusive ment r gul e par les strog
21. canismes et objectifs prioritaires Axe 3 les r seaux et partenariats Dans les ann es venir INERIS en association troite avec ses partenaires du p le applicatif en toxicologie cotoxi cologie s engagera dans la d marche de reconnaissance de ces m thodes a diff rents niveaux la validation du concept par les chercheurs et la pr validation Cette action trans versale concernera dans une large mesure des m thodo logies d velopp es par d autres Par ailleurs les liens avec l UTC et l Universit de Picardie Jules Verne UPJV seront renforc s au niveau r gional autour du couplage d outils in vitro et in silico en toxicologie pr dictive et des analyses math matiques Dans cet esprit INERIS a propos la mise en place dans le cadre de la Strat gie nationale sur les perturbateurs endo criniens SNPE d un partenariat public priv autour d une entre tats plateforme permettantla pr validation de m thodes d essai et d valuation du caract re perturbateur endocrinien de substances et de m langes Celle ci doit porter des m thodes non encore valid es un bon niveau de qualification et garantir une bonne cr dibilit dans le dialogue entre parties prenantes et pour les groupes d experts les utilisant offrir une s curit juridique raisonnable dansle d veloppement de substances notamment dans un contexte de substitu tion permettre une bonne reconnaissance europ enne et acc l
22. ce de ces m thodes tout d abord avec la validation du concept par les chercheurs Mais face au besoin croissant en m thodes alternatives l Institut va plus loin compte tenu du temps n cessaire la validation r glementaire et du besoin utiliser en confiance ces m thodes dans d autres contextes l INERIS r fl chit la mise en place d un processus de pr validation 10 _INERIS R F RENCES LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR LE CENTRE EUROP EN POUR LA VALIDATION DES M THODES ALTERNATIVES ECVAM Le Centre europ en pour la validation des m thodes alternatives ECVAM a t cr par la Commission europ enne en 1991 en vue de coordonner le d veloppement et la validation de m thodes alternatives en exp rimentation animale EA Cet organisme fait partie du Centre commun de recherche de l Union Europ enne JRC et d pend de l Institut pour la sant et la protection du consommateur IHCP Face aux besoins croissants de d veloppement et de validation de nouvelles m thodes il est devenu le Laboratoire europ en de r f rence pour les m thodes alternatives en exp rimen tation animale EURL ECVAM en 2011 En 2013 EURL ECVAM met en place et coordonne le R seau europ en de laboratoires pour la validation des m thodes alternatives EU NETVAL Le R seau accom pagne le Laboratoire de r f rence dans ses projets de validation y compris sur les aspe
23. cts formation diss mi nation et identification des m thodes qui ont le potentiel de r duire raffiner ou remplacer les animaux utilis s des fins scientifiques Il contribuera aussi au d veloppement 7 Les 14 laboratoires du r seau EU NETVAL 3 juillet 2013 1 EUROPEAN COMMISSION COORDINATOR 2 BELGIUM 3 CZECH REPUBLIC de documents guides proc dures mat riels de formation et outils de collaboration pour faciliter le d veloppement la validation et l acceptation des m thodes alternatives Le 3 juillet 2013 l EURL ECVAM a annonc les 14 premiers laboratoires dont l ECVAM du r seau EU NETVAL Ces laboratoires disposent d infrastructures de test in vitro res pectant les Bonnes pratiques de laboratoires BPL cette date l INERIS est le seul Institut fran ais au sein de ce r seau Enfin l ECVAM s appuie sur le r seau PARERE pour l valuation pr liminaire de la pertinence r glementaire d une nouvelle m thode alternative L INERIS repr sente la France dans ce r seau mmmmm http ihcp jrc ec europa eu our labs eurl ecvam The European Union Reference Laboratory for Alternatives to Animal Testing EURL ECVAM GLP Test Facility spra Italy Scientific Institute of Public Health WIV ISP Biological Standardisation Unit Brussels National Reference Laboratory for Experimental Immunotoxicology Praha 4 FRANCE INERIS Institut National de l Environnement Industriel et des Ris
24. e r gulation hormonale en appui l valuation des effets des perturbateurs endocriniens Pour cela des projets de recherche seront d velopp s pour am liorer l applicabilit des outils existants et la qualit des pr dictions issues de m thodes alternatives sera valu e Lincertitude associ e aux paradoxes de similarit dans les QSAR sera davantage caract ris e L Institut participera galement des groupes europ ens de r flexion autour d une meilleure reconnais sance et d une validation des m thodes alternatives in silico 18_INERIS REFERENCES LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR M CANISMES v PASSAGE TRANSMEMBRANAIRE PERTURBATION ENDOCRINIENNE R GULATION HORMONALE Be yoo ee eee ee eee eee eee errr eee ee we AXE 1 APPROCHE N VITRO D veloppement de test in vitro Raffinement des m thodes in vivo Couplage in vitro in vivo STRAT GIES AXE 2 APPROCHE JN SILICO Approche pr dictives QSAR Approches int gratives PBPK OBJECTIFS v eere gt PREUVE DU CONCEPT or PR VALIDATION lt DE TESTS INTEGRES sors gt OPTIMISATION ET VALIDATION AXE 3 RESEAUX ET PARTENARIATS Au niveau Europ en Au niveau national Sons eee reer errr ere rere rere errr errr rrr rer errr rrr rrr errr rrr re rrr rere ere rere reece rrr rere errr errr rere rrr Les 3 axes de recherche sur les m thodes alternatives M thodes m
25. e36069 www plosone org Analyse in vivo de la fluorescence chez des poissons z bres transg niques expos s une substance N Uo gt gt gt LES DEUX AXES DE RECHERCHE PEUVENT DONNER LIEU A TERME A DES LOGIQUES SUBSTITUTIVES PURES MAIS ELLES S INSCRIVENT GALEMENT DANS LES STRATEGIES DE TESTS INTEGRES ITS PERMETTANT DE REDUIRE LE NOMBRE D ESSAIS SUR ANIMAUX tionnement physico chimique analyse chimique Les recherches sont financ es par le Plan National de recherche sur les perturbateurs endocriniens l Agence Nationale de la Recherche ANR et le post Grenelle et r alis es dans le cadre de collaborations pour l valuation de la toxicit g n rale et du pas sage transmembranaire des substances chimiques barri res alv olo capillaire au niveau du poumon h ma to enc phalique au niveau du cerveau h mato testicu laire au niveau des gonades et h mato placentaire entre la m re et l embryon ou le f tus Les projets aff rents ces objectifs sont effectu s dans le cadre des programmes de l ANR avec des collaborations nationales et r gionales LE D VELOPPEMENT ET LA PR VALIDATION DE MOD LES MATH MATIQUES AXE 2 pour l valuation de la dangerosit des substances gr ce des m thodes informatiques mod les QSARs Quantitative Structure Activity Relationship et PBPK Phy siologically Based PharmacoKinetic Ces mod les sont capables d exploiter des info
26. ection des Risques Accidentels de l INERIS d veloppe des mod les num riques bas s sur la corr lation entre la structure mol culaire d une substance chimique et ses propri t s physicochimiques dangereuses comme l explosivit Voisins des mod les d velopp s en toxicologie qui relient la structure d une mol cule son activit biologique les QSARs ils sont appel s QSPR Quantitative Structure Property Relationship Ces mod les sont con us pour pouvoir tre utilis s dans un cadre r glementaire www ineris fr predimol FN ANNEXE 2 vwv La cartographie propos e est une repr sentation simpliste d une th matique extr mement complexe tant du point de vue scientifique que r glementaire et soci tal Elle ne saurait en aucun cas refl ter la richesse des d veloppements et l exhaustivit des applications en la mati re Son objet est de visualiser l tat des lieux actuel et les principaux axes de progres l horizon 2020 par grands types d effets et de m thodes ANALYSE SIMPLIFI E LES EFFETS La toxicit syst mique doses r p t es canc rog nicit en particulier non g notoxique reprotoxicit est aujourd hui avec la toxicit environnementale le domaine le moins bien couvert par le recours aux m thodes alternatives Les besoins de recherche sont importants etla substitution totale ne peut pas tre envi sag e ce stade Des logiques de criblage pr dominent
27. emple de recours aux mod les math matiques R gression par la m thode des moindres carr s permettant de pr dire la toxicit chronique des substances chimiques sur la daphnie en fonction de la toxicit aigu Si l information aigu el 4 3 est disponible elle peut permettre dans de nombreux cas de s affranchir de la r alisation du test chronique Toxicit aigu CONTEXTE REMPLACER R DUIRE RAFFINER L EXP RIMENTATION ANIMALE UN CORPUS DE R GLEMENTATIONS EN FRANCE ET EN EUROPE La r glementation sur le bien tre animal En France la loi du 10 juillet 1976 est la premi re l gis lation traitant de la protection de l animal qui a inspir les dispositions actuelles du Code Rural r glementant l ensemble des pratiques vis a vis des animaux En Europe les principes applicables l exp rimentation animale sont d abord d finis par une directive de 1986 qui d cline la r gle des 3R En 2009 l Office parlementaire d valuation des choix scientifiques et technologiques OPECST rend un rapport sur les principes applicables al exp rimentation animale et les m thodes alternatives celles ci L tude commandit e par le Bureau de l Assem bl e nationale est concomitante a la r vision de la directive europ enne de 1986 Il en ressort qu afin de r pondre aux pr occupations soci tales autour d une d marche thique en exp rimentation animale
28. es finalit s du P le est le d veloppement de m thodes alternatives op rationnelles dans le domaine du risque environnemental Mise en culture d algues vertes afin d am liorer la capacit de pr diction des essais et dela mod lisation en co toxicologie ainsi que l investigation en biologie fondamentale et appliqu e Le p le contribuera l extension et la mont e en cr dibilit des m thodes en d veloppant et qualifiant de nouveaux outils pr dictifs L animation du p le est l un des principaux enjeux de recherche du contrat d objectifs 2011 2015 de l INERIS Les objectifs sp cifiques tudier les expositions aux m langes de substances et aux risques mergents Am liorer une co toxicologie pr dictive alternative aux exp rimentations animales Analyser le comportement physique des substances Caract riser mesurer et surveiller les effets des subs tances notamment mergentes Les jalons de 2011 2015 Mise en uvre op rationnelle de la nouvelle animalerie Accueil des quipes ext rieures pour le transfert des m thodes en toxicologie pr dictive pour r pondre aux attentes des industriels Diffusion des premiers logiciels d velopp s par la plate forme de mod lisation PREDIMOL ms note 13_ Ce rapport a t actualis le 30 novembre 2011 et amend le 10 f vrier 2012 note 14_ Depuis 2007 dans un autre contexte que lexp rimentation animale la Dir
29. et issu de for ts g r es durablement Le label Imprim Vert garantit des travaux d impression propres et respectueux de l environnement INERIS R f rences d cembre 2013 M thodes alternatives Parc technologique Alata B P 2 60550 Verneuil en Halatte t l 03 44 55 66 77 fax 03 44 55 66 99 e mail ineris ineris fr www ineris fr A contribu ce dossier La Direction des Risques Chroniques en particulier Eric Thybaud R daction C line Boudet INERIS Conception amp r alisation graphique Efil 02 47 47 03 20 www efil fr Impression Gibert et Clarey Chambray l s Tours Cr dits photographiques INERIS Michel Chanterelle PROPOS DE L INERIS L Institut national de l environnement in dustriel et des risques INERIS a pour mission de contribuer la pr vention des risques que les activit s cono miques font peser sur la sant la s curit des personnes et des biens et sur l environnement m ne des pro grammes de recherche visant mieux comprendre les ph nom nes suscep tibles de conduire aux situations de risques ou d atteintes l environnement et la sant et d velopper sa capaci t d expertise en mati re de pr vention Ses comp tences scientifiques et tech niques sont mises la disposition des pouvoirs publics des entreprises et des collectivit s locales afin de les aider prendre les d cisions les plus appro pri es une am lioration
30. il est n cessaire de disposer de m thodes reconnues ou valid es La nouvelle directive 2010 63 UE du Parlement Euro p en et du Conseil relative la protection des animaux utilis s a des fins scientifiques se base elle aussi sur les principes thiques structur s par la r gle des 3R Applicable depuis le 1 janvier 2013 elle demande pour une proc dure donn e quel que soit le domaine que soient choisies en priorit les m thodes alternatives reconnues par l Union Europ enne si elles existent La r glementation sur les substances chimiques En ce d but du XXI si cle les pr occupations des citoyens sont nombreuses autour de la sant ou de lali mentation et de nouvelles inqui tudes apparaissent en lien avec des fili res ou des produits mergents Le public r clame une utilisation s re des b n fices de la chimie Plusieurs r glementations europ ennes appellent au d veloppement de m thodes alternatives de mani re AFIN DE R PONDRE AUX PR OCCUPATIONS SOCIETALES AUTOUR D UNE D MARCHE THIQUE EN EXP RIMENTATION ANIMALE IL EST N CESSAIRE DE DISPOSER DE M THODES RECONNUES OU VALID ES incitative ou contraignante notamment celles relatives aux cosm tiques aux produits pharmaceutiques et aux produits chimiques Avec REACH Enregistrement valuation Autorisation et Restriction des Substances Chimiques fabriqu es impor t es distribu es et utilis es dans l Union Eu
31. imension soci tale de leurs travaux un besoin thique et une attente de la soci t au regard de la capacit de pr diction de la science et de sa fiabilit sont identifi s Sur cette base certaines pistes de r flexion pour ren forcer la dimension soci tale l INERIS sont mises largir les actions de dialogue et d ouverture a la soci t a d autres acteurs que les ONG et associations de consommateurs favoriser les approches multidisciplinaires multi risques multi impacts de la recherche encourager la collaboration entre les sciences sociales et naturelles pour am liorer la m thode de travail l coute mutuelle et l thique expliquer au public organis les implications et les limites inh rentes aux conclusions des recherches et expertises scientifiques pour favoriser l ancrage scien tifique encourager une approche holistique d anticipation des enjeux qui prenne en compte un ventail r aliste a un instant t de situations potentiellement risque et d inci dences socio conomiques sur des sujets mergents exploiter le potentiel pr visionnel de la science afin de r pondre aux besoins sociaux notamment sur les sujets mergents tout en tant conscient des limites des pr visions scientifiques note 12_ Certaines formulations sont inspir es des travaux de l UNESCO 2000 World Conference on Science Science for the twenty first century a new commitment ISBN 1 903 598
32. imentation apparaissent en majorit raisonn es et coh rentes avec l avanc e de la recherche l analyse des enjeux et les volutions r glementaires Il res sort de l enqu te PICASO Alternatives qu une majorit des r pondants consid re qu il est encore trop t t pour se passer totalement de l exp rimentation animale Cependant les pr occupations sur la souffrance animale et sur la s curit d utilisation des substances chimiques sont tr s pr sentes et partag es Au del du sujet scientifique sp cifiquement trait dans PICASO Alternatives le retour d exp rience en tirer pour l INERIS concerne de fa on plus globale sa capacit renforcer la dimension soci tale dans son expertise scientifique et technique et sa recherche INTRODUCTION vwv L INERIS accompagne le d veloppement des m thodes alternatives pour r pondre aux pr occupations soci tales autour d une d marche thique en exp rimentation animale LE D FI DES M THODES ALTERNATIVES EN EXP RIMENTATION ANIMALE raditionnellement les tudes toxicologiques sont conduites sur des animaux Les volutions r gle mentaires etles exigences thiques ont t promo trices du d veloppement de nouvelles approches en vue d am liorer la pr diction des effets toxiques tout en r duisant les essais sur les animaux Les m thodes alternatives en exp rimentation animale sont utilis es en recherche fondamentale pour la r alisat
33. ion d tudes vis es r glementaire de travaux cliniques et aussi d op rations de criblage en mati re de d veloppement de nouvelles mol cules Dans le domaine de la recherche ces diff rentes m thodes sont des outils pr cieux qui permettent de mieux comprendre la physiologie des organismes et les m canismes des effets des substances sur ces derniers Ce d veloppement repose sur des avanc es intervenues dans le domaine des sciences du vivant sans que l objectif des d ve loppeurs n ait t forc ment d am liorer les pr dictions sur les dangers potentiels des substances r glement es ni m me de d velopper des m thodes alternatives en exp rimentation animale En effet les chercheurs consid rent avant tout l int r t de ces m thodes en tant qu outils d investigation etnon en tant que m thodes alternatives Il convient donc de noter la difficult inh rente l identification tant des financements que des quipes de recherche sur les m thodes alternatives Parmi les difficult s rencontr es on trouve l absence d une nomenclature des m thodes permettant aux acteurs en amont de s y sentir investis et la difficult du passage dela recherche amont vers des outils op rationnels Concernant la toxicologie et l cotoxicologie les fortes attentes soci tales en mati re de sant environnement et les avan c es scientifiques r alis es vis vis de la compr hension des m canismes d effets obligent repense
34. l image de ce qui est d velopp en mutag nicit domaine dans lequel la qualit des tests in vitro certes existants reste am liorer afin de r duire le nombre de faux positifs qui implique un recours quasi syst matique et r glement l in vivo Les strat gies de tests int gr s ITS ayant fait l objet d un criblage pr alable l aide de QSAR par exemple et le 2R in vivo in vivo respectant les principes de R duction Raffinement repr sentent des axes majeurs de progr s Dans le domaine de l co toxicologie pour les essais sur vert br s les avanc es concernent principalement l tude de modes d action en particulier le caract re perturbateur endocrinien des substances sur des lign es cellulaires de poisson ou sur des esp ces transg niques poisson amphibien 28 _INERIS REFERENCES LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE DES AVANCEES ET DES ENJEUX DES METHODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE Sites internet du TSAR et de l ECVAM consultation ao t 2013 Tableau de synth se AltTox mis jour en f vrier 2013 sur la validation et l acceptation r glementaire des m thodes alternatives et ITS Rapport ECHA 2011 sur usage des m thodes alternatives dans le contexte de REACH Rapport AXLR8 2012 sur les avanc es de la recherche en mati re de strat gies de tests alternatifs Rapport EURL ECVAM 2013 sur les avanc es du d veloppement de la
35. la Science L expression l gard des animaux de laboratoire d un respect sur leur caract re d tres sensibles est concr tis e par l adoption du principe des 3R par la prise en compte du rapport pr judice aux animaux b n fice pour l homme par la g n ralisation des comit s d thique et par le d veloppement de diverses mesures de bien traitance La reconnaissance qu en biologie en g n ral la d marche exp rimentale utilise sans a priori et de mani re objective l ensemble des possibilit s m thodologiques qu elle a cr es La d finition et la proposition d un dialogue soci tal fond sur la connaissance et le respect mutuel vont dans le sens de renforcer le d veloppement la validation l utilisation la valorisation et la reconnais sance des m thodes alternatives dans une logique de strat gies de tests int gr s des fins r glementaire note 10_ Plus d info www opal association org note 11_ Acad mie V t rinaire de France Commission relations homme animaux Recherche scientifique et exp rimentation animale Etat de la question Mai 2012 Une mise jour de ce rapport a t r alis e en avril 2013 gt gt gt a gt gt gt CONCLUSION PICASO ALTERNATIVES A MONTR QUE SOCI T CIVILE ET SCIENTIFIQUES TRAVAILLENT DES CHELLES DE TEMPS DIFF RENTES L COUTE LES NOMBREUX CHANGES LES INFORMATIONS ET ACTIO
36. matiques Il existe aussi des m thodes de r duction en particulier l optimisation des protocoles in vivo et les m thodes statistiques et des m thodes de raffinement comme l imagerie du petit animal in vivo Les m thodes alternatives sont le plus souvent recommand es dans des approches int gratives combinant l ensemble des outils disponibles afin de n utiliser l animal qu en dernier recours Les d fis de la feuille de route 2013 2020 de la recherche l INERIS sur l am lioration des m thodologies d valuation de la toxicit et de l cotoxicit des substances chimiques reposent en partie sur le questionnement autour des m thodes alternatives dans le domaine de la toxicologie et del cotoxicologie pr dictives Aussi l Institut poursuivra ses travaux sur les approches in vitro et in silico principa lement autour des m canismes d action des perturbateurs endocriniens mais aussi des passages transmembranaires et de la r gulation hormonale D j membre fondateur de FRANCOPA Plateforme fran aise d di e au d ve loppement la validation et la diffusion de m thodes alternatives en exp rimentation animale d Antiopes Infrastructure de recherche en toxicologie pr dictive et partenaire d alliances pour la recherche il renforcera ses r seaux et partenariats r gionaux et nationaux autour d quipements structurants Les attentes soci tales en mati re de recours aux m thodes alternatives en exp r
37. nes L embryon de poisson tant translucide la fluorescence de la GFP peut tre facilement mesur e Une originalit du test r side dans sa derni re tape qui consiste quantifier la GFP par des techniques d imagerie du petit animal vivant Compte tenu de ses caract ristiques le bioessai est utilisable pour tester les effets des substances seules mais aussi pour les m langes 21 compos s sur 45 test s ont induit l expres sion de la GFP des degr s variables Le d veloppement de ce test a en particulier mis en relief la capacit de biotransformation des substances PE En effet une fois d grad es par l organisme certaines substances n in duisant pas elle m me d effet cestrog nique produisent des m tabolites qui eux en provoquent Cet outil vient compl ter les dispositifs in vitro existants il a avantage d int grer le devenir des polluants dans l organisme ce que les tests cellulaires ne permettent pas II pr sente donc un r el int r t pour l valuation de substances chimiques avant leur mise sur le march comme le requiert REACH mais aussi pour la surveillance des milieux aquatiques mise en place par la directive cadre sur l eau Ce bio essai fait l objet d un projet de ligne directrice qui a t d pos l OCDE en novembre 2012 ss Brion et al Screening Estrogenic Activities of Chemicals or Mixtures n Vivo Using Transgenic cyp19a1b GFP Zebrafish Embryos PLoS ONE 2012 7 5 p
38. o te outil de l OCDE QSAR Toolbox Cette bo te outils et Toxtree sont incontournables dans un contexte r glementaire Ils permettent l utilisateur de recourir plusieurs mod les et notamment au syst me Benigni Bossa constitu de 3 mod les QSAR int gr s a Toxtree qui servent pr dire le potentiel mutag ne et carcinog ne des substances chimiques sur la seule base de leur structure chimique L objectif de l tude tait double fournir une validation scientifique des trois mod les QSAR qui forment le syst me Benigni Bossa et mettre en vi dence les probl mes relatifs l utilisation pratique des deux outils lors de l application du m me syst me Les r sultats principaux de cette double tude montrent que les principes de validation de l OCDE pour les mod les QSARs ne sont pas rigoureusement respect s et que les performances des AA Interface graphique de la bo te outils QSAR de POCDE 3 1 0 21 outils sont inf rieures celles d clar es par le mode d emploi du syst me Benigni Bossa De plus plusieurs probl mes strictement li s des d tails d impl mentation informatique du syst me Benigni Bossa l int rieur des deux outils peuvent donner lieu des r sultats pr dictifs erron s ind pendamment de la validit scientifique du syst me L outil Toxtree pr sente une transparence sup rieure la bo te outils QSAR ms Mombelli et
39. ommand es dans des approches int gratives combinant l ensemble des outils alternatifs dispo nibles afin de n utiliser l animal qu en dernier recours lorsque les autres m thodes n ont pas permis d apporter les informa tions suffisantes On parle alors de strat gies de tests int gr s ITS qu ilest possible d laborer lorsque la connaissance sur les m canismes d action est suffisante sms note 2_ Alternatives to Animal Experiments ISBN 0 85967 396 0 note 3_ The Principles of Human Experimental Technique ISBN 10 0900767782 ISBN 13 978 0900767784 Les m thodes alternatives en image tests in vitro et mod lisation de la structure mol culaire a O6_INERIS REFERENCES LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR LA R GLE DES 3R Production et contr le 7 de qualit en m decine Sn v t rinaire e F Essais toxicologiques a i et autres valuations de la s curit Production et contr le de qualit en 38 1 m decine humaine tnt et dentisterie Ftudes de biologie fondamentale 12 2 Autres Les diff rents domaines d application de l exp rimentation animale source 6 rapport sur les statistiques concernant le nombre d animaux utilis s des fins exp rimentales et P Recherche et d veloppement en m decine humaine d autres fins scientifiques en Europe CE 2010 A MPN AAE A GATENE Toxicit chronique Un ex
40. onise et au dela dans un contexte de recherche socialement responsable y com pris en accompagnement l innovation Dans le cadre de sa strat gie d ouverture la soci t l Ins titut a par ailleurs engag des actions visant renforcer son dialogue avec la soci t civile organis e sur des sujets qui repr sentent des enjeux soci taux S agissant des m thodes alternatives en exp rimentation animale l INERIS a ainsi coordonn un projet de recherche PICASO Alternatives sur la Place des m thodes alternatives en exp rimentation animale dans le domaine sant environnement prise en compte des attentes soci tales 2011 2013 Le Programme REPERE du Minist re en charge de l cologie qui finance le projet explore les voies de la participation de la soci t civile organis e au pilotage de la recherche et de l expertise PICASO Alternatives a t pilot en partenariat avec colo gie Sans Fronti re ESF l Association Nationale de D fense des Consommateurs et Usagers CLCV et la Coordination Nationale M dicale Sant Environnement CNMSE sous l gide d un tiers veilleur sociologue La partie soci tale du pr sent dossier de r f rence consiste en une synth se issue de ce projet de recherche En effet la question des m thodes alternatives en exp rimentation animale n est pas uniquement scientifique et technique C est tout l int r t d une collaboration sciences soci t telle qu elle a t d
41. ox eu EUSAAT European Society for Alternatives to Animal testing www eusaat org FRAME Fund for the Replacement of Animals in Medical Experiments www frame org uk FRANCOPA Plateforme nationale pour le d veloppement des m thodes alternatives en exp rimentation animale www francopa fr InterNICHE International Network for Humane Education www interniche org LFDA La Fondation droit animal thique et sciences www fondation droit animal org IVTIP In Vitro Testing Industrial Platform www ivtip org NC3Rs UK National Centre for the Replacement Refinement and Reduction of Animals in Research www nc3rs org uk NKCA National Knowledge Centre on Alternatives www nkca nl algemeen menu english SPTC Soci t de pharmaco toxicologie cellulaire htto sptc free fr NORINA Norwegian Inventory of Alternatives http oslovet veths no TSAR Tracking System for Alternative test methods Review Validation and Approval in the Context of EU Regulations on Chemicals htto tsar jrc ec europa eu IVTS In Vitro Toxicology Society www ivts org uk OCDE Organisation de coop ration et de d veloppement conomiques www oecd org 30_INERIS REFERENCES LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR D PEFC 10 31 2607 Certifi PEFC pefc france org wh w Q D Urn ve agit pout Ce document est imprim sur un papier 100 PEFC blanchi sans chlore
42. passer totalement de l exp rimentation animale Cependant les pr occupations sur la souffrance animale et sur la s curit d utilisation des substances chimiques sont tr s pr sentes et partag es Les m thodes alternatives re oivent un accueil positif mais lucide mettant l accent sur le besoin d un recul et d une fiabilit jug s encore insuffisants Ainsi de nombreuses pistes destin es instaurer la confiance sont propos es par les r pon dants du projet REPERE PICASO Alternatives L enjeu actuel de l ouverture des sciences vers la soci t civile consiste faire conna tre les limites des connaissances et les progr s r alis s Il remet aussi la responsabilit de l exp rimentateur consid r e par certains comme le 4 me R au c ur de la question du raffinement de exp rimentation animale Enfin les enjeux g opo litiques de l thique de l exp rimentation animale ne doivent pas tre sous estim s ce qui doit conduire proposer des d marches rationnelles bas es sur des fondements accept s par tous Les volutions r glementaires structurelles et organi sationnelles r centes en Europe comme en France titre d exemple les fondements de la pratique de l exp rimentation animale nonc s en 2012 par l Acad mie V t rinaire de France sont les suivants Le recours l exp rimentation animale est indispensable aux progr s de la connaissance dans l tat actuel de
43. pyrene based on n Vitro Essays and Toxicokinetic Toxicodynamic Models Toxicology Letters 2011 vol 201 1 p 8 14 Pery et al Prediction of Dose Hepatotoxic Response in Humans based on Toxicokine tic Toxicodynamic Modeling with or without n Vivo Data a Case Study with Acetaminophen Toxicology Letters 2013 220 1 p 26 34 Pery et al Substance Tailored Testing Strategies in Toxicology an n Silico Methodo logy based on QSAR Modeling of Toxicological Thresholds and Monte Carlo Simulations of Toxicological Testing Regul Toxicol Pharmacol 2010 56 p 82 92 Quignot N Bois F Y A Computational Model to Predict Rat Ovarian Steroid Secretion from n Vitro Experiments with Endocrine Disruptors PLos ONE 2013 8 1 p e53891 Santos R et al Relationship between DNA Damage in Sperm after Ex Vivo Exposure and Abnormal Embryo Development in the Progeny of the Three Spined Stickleback Reproductive Toxicology 2013 36 p 6 11 Tebby C Mombelli E A Kernel based Method for Assessing Uncertainty on Individual QSAR Predictions Molecular Informatics 2012 31 10 p 741 751 we 20 INERIS REFERENCES LES METHODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR LA RECHERCHE EUROP ENNE L HORIZON 2020 Ea AXLR8 action de coordination financ e par le 7 pro gramme cadre de recherche et d veloppement PCRD de la Commission Europ enne est le point focal de la coordination des programmes de
44. ques Verneuil en Halatte 5 FINLAND FICAM Finnish Centre for Alternative Methods School of Medicine University of Tampere Tampere 6 GERMANY Celonic GmbH J lich 7 GERMANY Harlan Cytotest Cell Research GmbH Rossdorf 8 GERMANY PRIMACYT Cell Culture Technology GmbH Schwerin 9 ITALY Istituto Zooprofilattico Sperimentale della Lombardia e dell Emilia Romagna Bruno Ubehtini Brescia 10 NETHERLANDS RIKILT Institute of Food Safety Wageningen 11 NETHERLANDS The Netherlands Organisation for Applied Scientific Research TNO Research Group Pharmacokinetics amp Human Studies and TNO Triskelion BV Zeist 12 SPAIN Eurofins Biolab S L U Barcelona 13 SPAIN Spanish National Centre for Microbiology Instituto de Salud Carlos Ill Madrid 14 SWEDEN SP Sveriges Tekniska Forskningsinstitut Medicinteknik KMm Boras Uo LES ATTENTES SOCI TALES _ La question des m thodes alternatives en exp rimentation animale n est pas uniquement scientifique et technique Elle ne peut se traiter sans r flexion pr alable sur les approches philosophiques et sociologiques qui sous tendent la th matique C est tout l int r t d une collaboration sciences soci t telle qu elle a t d finie d s l origine et mise en uvre dans le projet PICASO Alternatives programme REPERE 2011 2013 duquel est tir e la synth se qui suit Source d inqui tude collective et ancienne d une part d inq
45. r dire la performance de plusieurs strat gies de test et les co ts mon taire et thique nombre d animaux sacrifier associ s chacune d entre elles Son p rim tre d application n est pas limit la toxicologie r glementaire pour les substances existantes mais il peut tre tendu des substances en cours de d veloppement Ce projet a en outre permis d int grer des avanc es m thodologiques dans le domaine de la toxicologie pr dictive in silico avec des outils informatiques d avant garde au sein de la plateforme infor matis e MAPS Materials Processes and Simulations ms note 7_ Avenant Grenelle au contrat d objectifs Etat INERIS 2009 note 8_ Projet ANR 2007 conduit par l INERIS et Scienomics Plus d info Pery A R Desmots S Mombelli E Substance tailored Testing Strategies in Toxicology an in Silico Methodology Based on QSAR Modeling of Toxicological Thresholds and Monte Carlo Simulations of Toxicological Testing Regul Toxicol Pharmacol 56 2010 p 82 92 http scienomics com WWW INERIS FR UNE M THODE DE PREDICTION N SILICO LE SYSTEME BENIGNI BOSSA Les outils QSAR dans un contexte r glementaire validation du syst me Benigni Bossa pour l analyse du potentiel mutagene et carcinogene d une substance chimique par l INERIS Ea En 2010 l INERIS s est associ au Centre de traitement de l information scientifique CTIS pour valuer une partie des mod les QSAR de la b
46. r l interdiction totale du recours a exp rimentation animale L homog n it des r ponses de ce groupe qui tait le plus motiv dans cette enqu te montre un certain dogmatisme bas sur une question de principe peu susceptible d voluer leurs informations ne provenant que de leurs propres sources Ces r pondants ne croient pas en une recherche ind pendante sur les effets des substances chimiques et estiment que les questions de s curit ne peuvent pas tre du seul ressort des experts LES PERSONNES N APPARTENANT A AUCUNE ASSOCIATION Elles repr sentent deux tiers de l chantillon Ces r pondants manifestent une v ritable inqui tude sur la s curit des substances chimiques ils se sentent expos s au quotidien sont partag s sur l ind pendance de la recherche et sur la confiance accorder aux r sultats des tests sur animaux Ils sont dans une demande de s curit raisonn e et contr lable et sont partisans de commissions plurielles et ouvertes la Des groupes de discussion anim s par la CLCV Un groupe Facebook anim par ESF Un questionnaire aux lanceurs d alerte coordonn par la CNMSE Un questionnaire grand public diffus par l INERIS et relay par ses partenaires Nota L laboration du questionnaire a donn lieu de nombreuses discussions au sein du comit de pilotage du projet PICASO Alternatives Suite au constat d un nombre trop important de questions et aux difficul
47. r les approches traditionnelles de l valuation des effets des substances A ces dispositions s ajoute le besoin de disposer d outils de criblage fort d bit pour tre en mesure de tester rapidement des mol cules dont le nombre ne cesse de cro tre Ce constat pousse une g n ralisation du recours ces nouveaux outils mais aussi l adoption d une nouvelle vision de l approche pr dictive qui WWW INERIS FR O4 _INERIS REFERENCES LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE estprivil gi e Les acteurs engag s dansle d veloppementou l utilisation des m thodes alternatives sont r unis au sein de plateformes Il s agit de cr er les conditions d une plus forte acceptabilit du recours aux m thodes alternatives dans les pratiques de la recherche et de l enseignement et de faire en sorte que ce mouvement se traduise au niveau r glementaire Euvrer la reconnaissance par l ensemble des parties pre nantes de ces m thodes alternatives est le principal enjeu Le d fi est d obtenir de tous les acteurs et groupes concern s lareconnaissance de la pertinence des m thodes alternatives dans un certain nombre de domaines leur validation dans un contexte r glementaire leur utilisation en tant qu outil de criblage industriel ou qu objet d tude dans des publications scientifiques et enfin la reconnaissance de leur cr dibilit par tous LINERIS acteur de la toxicologie pr dictive travaille
48. rer le passage une reconnaissance multilat rale eA LA RECHERCHE L INERIS 4 QUELQUES PUBLICATIONS RECENTES Beaudouin R Pery A Comparison of Species Sensitivity Distributions based on Population or Individual Endpoints Environmental Toxicology and Chemistry 2013 32 5 p 1173 1177 Bois F Y Computational Pharmacokinetics at a Crossroads Editorial In Silico Pharmacology 2013 1 1 part 5 Brion et al Screening Estrogenic Activities of Chemicals or Mixtures n Vivo Using Transgenic cyp19a1b GFP Zebrafish Embryos PLoS ONE 2012 7 5 p e36069 Garric J Thybaud E Mod les de toxicologie environnementale Lahmani M Marano F Houdy P Dir Les Nanosciences Tome 4 Nanotoxicologie et nano thique Paris Belin 2010 p 401 417 Hubert Ph Toulhoat P Les m thodes alternatives en mati re d exp rimentation animale Annales des Mines Responsabilit et Environnement 2013 71 p 19 23 Mombelli E Pery A A Linear Model to Predict Chronic Effects of Chemicals on Daphnia Magna Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology 2011 87 5 p 494 498 Mombelli et al Evaluation of the OECD QSAR Application Toolbox and Toxtree for Predicting and Profiling the Carcinogenic Potential of Chemicals SAR and QSAR in Environmental Research 2010 21 n 7 8 p 731 752 Pery A et al Predicting n Vivo Gene Expression in Macrophages after Exposure to Benzo a
49. rmations physico chimiques et les r sultats des tests in vitro pour proposer une valuation du risque sur le vivant Cette activit est soutenue par des programmes europ ens 6 et 7 programmes cadres nationaux ANR post Grenelle avec des collaborations internationales et nationales Cette capacit a permis de contribuer a la mise en place de la premi re chaire de mod lisation math matique pour la toxicologie syst mique al Universit Technologique de Compiegne UTC LES STRATEGIES DE TESTS INTEGRES ITS Les deux axes de recherche pr c dents peuvent donner lieu a terme des logiques substitutives pures mais elles s inscrivent galement dans les strat gies de tests int gr s ITS permettant de r duire le nombre d essais sur animaux en s lectionnant les s ries de tests qui optimisent le gain 16_INERIS REFERENCES LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE Elevage et reproduction de poissons z bres d information toxicologique au moindre co t exp rimental Dans le domaine des ITS le projet CANTO a permis de r pondre a deux des besoins r currents dans le domaine de la toxicologie pr dictive l valuation de l incertitude li e aux pr dictions QSAR et la pr diction de la performance d une batterie de tests en fonction de la seule structure mol culaire de la substance toxicit inconnue Pour ces deux besoins il propose des solutions innovantes qui per mettent de p
50. rop enne on observe deux changements de mentalit majeurs le renversement de la preuve ce n est plus aux autori t s administratives de d montrer la toxicit d une subs tance mais aux industriels den d montrer la ma trise des risques la n cessit de d velopper des m thodes alternatives en exp rimentation animale selon la r gle des 3R Le recours aux m thodes alternatives pour les substances chimiques est aujourd hui une n cessit car les exi gences de REACH qui d finit des crit res de reconnais sance des m thodes alternatives requi rent des r sultats rapides et fiables note 4_ Cosm tiques R glement CE N 1223 2009 Produits pharmaceutiques Directive 2001 83 CE Produits chimiques R glement REACH CE N 1907 2006 Classification tiquetage et emballage des substances et m langes CLP UE N 2086 2011 O8 _INERIS REFERENCES LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR LA R GLEMENTATION REACH 4 L w Le Observation a la loupe binoculaire de daphnies Au niveau international l Organisation de coop ration et de d veloppement conomiques OCDE joue un r le essentiel dans la mise en place de lignes directrices sur les protocoles exp rimentaux ainsi que sur les m thodes alternatives Les lignes directrices de l OCDE pour les tests sur les produits chimiques sont un ensemble de m thodes D INFO d essais internation
51. se en uvre de strat gies de tests int gr s permettant de rempla cer r duire ou raffiner selon les principes exprim s par la r gle des 3R le recours al exp rimentation animale prin cipalement dans le domaine de l valuation de la s curit des produits chimiques Si le d veloppementdel co toxi cologie pr dictive est une priorit de l INERIS l Institut joue aussi un r le dans la reconnaissance de ces m thodes tout d abord avec la validation du concept par les chercheurs Mais face au besoin croissant en m thodes alternatives l Institut va plus loin compte tenu du temps n cessaire la validation r glementaire et du besoin utiliser en confiance ces m thodes dans d autres contextes l INERIS r fl chit la mise en place d un processus de pr validation afin de faciliter la valorisation de la recherche dans ce domaine Ce processus doit accompagner le passage de la R amp D la normalisation ou la validation r glementaire C est aussi le seul institut fran ais respectant les bonnes pratiques de laboratoire qui a rejoint le 3 juillet 2013 le r seau europ en des laboratoires pour la validation des m thodes alterna tives coordonn par le Centre europ en pour la validation des m thodes alternatives ECVAM Les m thodes alternatives en exp rimentation animale reposent principalement sur des m thodes de remplace ment in vitro mod les cellulaires ou in silico mod les math
52. souffrance animale Mais pour argumenter leur discours et asseoir leur cr dibilit les associations se r f rent et utilisent les donn es scientifiques voire commanditent elles m mes des tudes www programme repere fr a LA RECHERCHE L INERIS L Institut travaille au d veloppement de m thodes alternatives en exp rimentation animale depuis une vingtaine d ann es avec deux axes de recherche les approches in vitro et in silico LES AXES DE RECHERCHE es activit s de recherche men es au sein du p le Dangers etimpact sur le vivant de la Direction des risques chroniques de l INERIS alimentent les connaissances sur les substances chimiques La participation aux r seaux d experts tels ceux de l OCDE et de ECVAM permet d changer sur les strat gies m thodo logiques et exp rimentales d velopp es et contribue leur conf rer une validation internationale Toutes ces activit s Subvention INERIS P190 gt Appels d offre europ ens Appels d offre nationaux R partition des travaux de recherche INERIS en lien avec les m thodes alternatives selon la source de financement L ensemble de ces activit s de recherche mobilise environ 15 quivalents temps plein ETP la Direction des risques chroniques de l INERIS pour un budget annuel de l ordre de 1 5 ME source PICASO Alternatives REPERE 2013 de recherche sur les substances chimiques et la qu
53. t s de terminologie ou de compr hension de certaines formulations une nouvelle version a t labor e apr s une pr enqu te Cela est consid r comme une premi re tape de la rencontre souhait e entre soci t civile et sp cialistes dans le projet soci t pour valuer la s curit des substances Ils s opposent par principe l exp rimentation animale et consid rent en majorit que certaines m thodes alternatives sont au moins aussi pertinentes en particulier pour tester les m langes tout en tant conscients des limites Ils sont demandeurs d une biod gradabilit totale des produits mis sur le march On peut ainsi voir se dessiner les populations entre les quelles il est possible d tablir d s maintenant le dialogue certaines associations sont tr s sensibles la fois au bien tre animal et au besoin de confiance dans l valuation des produits chimiques Pour ces associations l enjeu du dialogue est la prise en compte de leurs attentes et l ancrage scientifique de leurs connaissances Pour les scientifiques tablir un rapport de confiance avec ces populations permet d asseoir l insertion soci tale de leurs travaux et d en am liorer la valorisation Il est par ailleurs important de souligner que le rejet par prin cipe en r f rence la question pos e de l exp rimentation animale des associations se situe dans le champ de l motion nel en r action au long d ni de la
54. taires de la commission D veloppement durable et am nagement du territoire AU cours de sa visite la commission a encourag l Institut d velopper la capacit de ses experts et chercheurs participer au d bat public SEPTEMBRE 2006 Le renforcement de la capacit des experts participer au d bat public i est inscrit dans le contrat d objectifs 2006 2010 sign entre l Etat et INERIS 2007 2008 Renforcement de l ouverture la soci t de l Institut en parall le du Grenelle de l Environnement D marrage des r unions ONG AVRIL 2008 Organisation de la premi re rencontre d bat avec des repr sentants d ONG et d associations en vue d changer sur les r sultats de travaux de recherche ou d expertise de l Institut 24 autres d bats ont t organis s depuis lors MAI 2008 Le conseil d administration donne un avis favorable l volution envisag e par l INERIS de ses instances d valuation scientifique et technique Il engage l Institut effectuer les d marches n cessaires pour pr ciser ses propositions OCTOBRE 2008 Signature d une charte d ouverture la soci t avec l IRSN et l AFSSET JUIN 2009 Ouverture du s minaire scientifique annuel de l Institut la soci t civile La cr ation d une Commission d orientation de la recherche et de l expertise CORE compos e de repr sentants des diff
55. tre envisag dans les prochaines ann es LES M THODES Les tests in vitro sont actuellement les plus utilis s ils sont une alternative classique en irritation oculaire ou cutan e L analyse de l origine des donn es pr sen t es lors de la premi re phase d enregistrement dans REACH d cembre 2010 montre que la majorit des donn es est issue de tests in vivo classiques pour les autres types d effets Le recours aux QSAR repr sente quant lui moins de 0 5 des essais en toxicologie et moins de 4 des essais en cotoxicologie Les axes de progr s pour les m thodes de remplacement in vitro et in silico ensemble des m thodes de pr diction sont pour les premi res le d veloppement du g nie tissulaire et des EM Tests quasi inexistants Outils de screening pr diction BE in vitro in silico ITS E Processus de validation UE en cours in vitro ex vivo 2R in vivo Tests r glement s E UE OCDE in vitro A Cartographie simplifi e des avanc es et des enjeux des m thodes alternatives en exp rimentation animale pour l valuation des potentiels toxiques des substances chimiques tests sur organes entiers reconstitu s pour les secondes l am lioration de la mise a disposition et du partage de donn es de qualit via les plateformes d changes ainsi qu une meilleure connaissance des m canismes d action et v nements mol culaires Les m thodes de r duction comme l ex vivo et
56. ttant de r duire la ACCEPTATION souffrance animale DU RECOURS de recourir une AUX M THODES m thode bio infor ALTERNATIVES matique un test cellulaire en substi tution d un test sur animal ou de r duire le nombre d animaux utilis s au cours de ce test FRANCOPA est membre de la plateforme europ enne ECOPA European Consensus Platform for Alternatives Parmi les recommandations du rapport FRANCOPA D INFO remis en 2010 Madame la ministre de l Enseignement www francopa fr a 26 _INERIS REFERENCES _LES M THODES ALTERNATIVES EN EXPERIMENTATION ANIMALE WWW INERIS FR sup rieur et de la Recherche intitul Etat des lieux des m thodes alternatives dans le domaine de l exp rimenta tion animale en France la recommandation 10 pr conise de cr er un infocentre pour faire conna tre les actions et partager les r sultats entre les diff rents secteurs Linfocentre a t inaugur le 2 juillet 2012 FRANCOPA organise r guli rement des colloques dis pense de l exp rimentation animale dans le contexte r glementaire lecture crois e ANTIOPES UNE INFRASTRUCTURE NATIONALE DE RECHERCHE EN TOXICOLOGIE PREDICTIVE Linfrastructure de recherche ANTIOPES a t d velopp e dans le but de r pondre aux d fis du Plan national sant environnement Sur la base de son r seau scientifique de partenaires elle a pour objectifs de coupler les approches in vitro in silico et in vi
57. ui tudes individuelles li es aux affaires r p titives ces derni res ann es d autre part le d veloppement et la s curit des substances chimiques sont l objet de nombreuses demandes UN PANORAMA QUI FAIT APPARA TRE 3 GROUPES DE POPULATIONS Ce panorama est tir de l analyse du questionnaire grand public labor dans le cadre de PICASO Alternatives L chantillon est constitu de 2361 r pondants LES SCIENTIFIQUES Minoritaires dans l chantillon PICASO Alternatives ils constituent un groupe relativement peu homog ne Conscients des limites ou des besoins de validation des connaissances les r pondants appliquent le doute scien tifique Parfois confront s de violentes revendications ils continuent faire progresser leurs disciplines Ils sont assez peu engag s dans le d bat public et s expriment majoritairement en utilisant un vocabulaire technique devant des auditoires sp cialis s En France ils estiment tre peu valoris s et leurs recherches insuffisamment reconnues LES MILITANTS Ils constituent un groupe tr s h t rog ne dans l chantillon les r pondants des associations de consommateurs se situent dans des attitudes rationnelles et bien inform es Ils sont plut t favorables au d veloppement des m thodes alternatives tout en mettant des r serves sur le in silico Ils sont partag s sur l effet pr dictif pour l homme des tests sur animaux ainsi que sur l opposition
58. validation et de l acceptation r glementaire des m thodes alternatives dans le contexte de la directive cosm tique Tous les documents sont disponibles sur les sites internet des organismes Rapport du GIS FRANCOPA 2010 sur l tat des lieux des m thodes alternatives dans le domaine de l exp rimentation animale en France mis jour en 2012 WWW INERIS FR Besoin de recherche et de d veloppement D veloppement Int gration _ Validation Optimisation 2020 2016 ll p l Horizon d atteinte des 3R Non d termin Doses Canc rog nicit Reprotoxicit Environnement Mutag nicit Sensibilisation r p t es Existence des Irritation cutan es et oculaire corrosion cutan e phototoxicit Toxicit cutan e aigu m thodes alternatives La toxicit locale b n ficie des avanc es pr alables en cosm tique la corrosion et l irritation cutan e l irrita tion oculaire et la phototoxicit sont des domaines d j bien couverts par le recours aux tests in vitro principe de Remplacement qui peuvent encore tre optimis s En situation interm diaire on retrouve la toxicit aigu et la sensibilisation cutan e pour lesquelles des tests in vitro et des strat gies de r duction raffinement 2R in vivo se d veloppent Le remplacement total des tests animaux pour l tude de la sensibilisation cutan e peut
59. vo et de regrouper des moyens francais de recherche en toxicologie environnementale pour construire les outils de la toxicologie pr dictive ANTIOPES se structure autour de l approche syst mique Plus pr cis ment cette approche se fonde sur la capacit a pr dire a partir d un m canisme cellulaire ou mol culaire les effets sur l organisme entier Il s agit donc de travailler sur le d veloppement de biomarqueurs et de mod les aux diff rents niveaux du vivant Le r seau est actuellement constitu d une vingtaine d quipes sur toute la France appartenant divers orga nismes de tutelles l INERIS l INSERM le CEA l INRA plusieurs universit s Paris Diderot Universit de Techno logie de Compi gne UTC Institut Polytechnique Lasalle de Beauvais Universit Picardie Jules Verne UPJV Uni versit de Marseille Universit de Metz et des instances industrielles CRITT CHIMIE PLASTURGIE LE P LE NATIONAL APPLICATIF EN TOXICOLOGIE ET ECOTOXICOLOGIE Le p le national applicatif en toxicologie a t cr par le minist re en charge de l cologie au sein de l INERIS Il s organise autour de la Fondation universitaire de l UTC de l Unit p rinatalit et risques toxiques P riTox del UPJV de l Institut Lasalle Beauvais et du r seau ANTIOPES Il a t soutenu en partie par un financement post Grenelle destin a augmenter les moyens humains en toxicologie et en co toxicologie L une des principal
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