www.gbo.com/bioscience
Contents
1. paration par centrifugation en gradient rapide reproductible et d un co t raisonnable avec une efficacit quivalente aux m thodes immunobilles OncoQuick se pr sente sous la forme d un tube polypropyl ne avec une barri re poreuse ins r e au dessus d une solution de s paration d velopp e sp cifiquement Jusqu 30 ml de sang total anticoagul sont d pos s directement dans le tube OncoQuick et centrifug s En dehors des rythrocytes et des granulocytes le milieu de s paration permet l limination virtuelle des lymphocytes et des cellules mononucl es Les cellules tumorales circulantes sont concentr es l interface Apr s collecte la fraction enrichie en cellules est lav e Les cellules tumorales sont alors disponibles pour toutes les m thodes classiques de recherche OncoQuick a t d velopp en coop ration entre Hexal Gentech et Greiner Bio One et est r serv un usage recherche seulement Nouveau les tubes OncoQuick 50 ml disposent dor navant d anneaux qui stabilisent la barri re poreuse afin d assurer une meilleure r sistance et utilisation par exemple durant la centrifugation cytotoxic Epyrogenic R f rence 227 255 Description et milieu s parateur St rilit as Volume de l chantillon 15 30 ml sang Qt par carton 4 emballage chantillon disponible 1 fois seulement Tubes OncoQuick avec barri re poreuse OncoQuick Enrichissement en cellul2. Quelle que soit la s paration conduite sur milieu Ficoll Paque PLUS ou avec un autre milieu R f rence 163 288 163 289 Description avec barri re avec barri re poreuse poreuse Volume ml 12 12 Milieu de s paration pr rempli avec Ficoll Paque PLUS St rilit as Volume de l chantillon 3 8 ml sang Qt par sachet carton 50 500 50 500 3 8ml sang Leucosep Leucosep S paration performante des lymphocytes et mononucl aires sang et moelle osseuse Caract ristiques e Elimination des granulocytes e Concentration directement et rythrocytes partir de sang total e Pas de contamination e Hemplissage simplifi rythrocytaire travers barri re poreuse e Pas de blocage des e S paration rapide en marqueurs 15 minutes temp rature e Pr rempli avec milieu ambiante Ficoll Paque PLUS e Aucun quipement ou e Disponible non rempli pour dispositif additionnel utilisation avec d autres n cessaire milieux s parateurs s parateur quel que soit le volume de l chantillon Greiner Bio One poss de le tube Leucosep adapt Le mode d emploi Leucosep et informations compl mentaires sont disponibles sur www gbo com bioscience Nouveau les tubes Leucosep M 50 ml disposent dor navant d anneaux qui stabilisent la barri re poreuse afin d assurer une meilleure r sistance et utilisation par exemple durant la centrifugation 163 290 227 288 avec barri re avec barri r
3. aeneo anno senbe doJoI A SLE V 1H ei amp ojounuuuJ e eiGojougioeg eibojolqoJolW t SJeuie uoo segn G ooch 9 9Jre n29 o A eiDojoig 7 eiudejboje1suo 8 uoneJjedoes e senbipinjOoJollA sdiuoorg OL eiuoBoA LL Sul EILENN Z L seindn2 SSQNIONIN Cl sellosseooy Y seneo sonbe doJoIn VIH eiGojoueoeg SJOUIR UON areno senbipinjjOJOl A SL seindno eumno SIS eiBojounuiu e 8BoloIqoioIn seqn S oDejedig 9 al6oloig eiudeJ amp oje1suo 9 uoneJedes 6 sdiuooig OL eiuoBoA9 LL sejpjeAnoO ZL SOQNJOIOIN L SaJllosseooy Y L b o c bi o oO ke a N co CO CO st LO IE oO oooo o 5 o E o z 3 z z C D o 2 O 2 EES 2 gees AO TD a c e LO _ CO O Se SC o p e O p o Qu CO c gESSg2 amp D Q 5 5 5 Q a 22323 353 ND l o C O E Eggs N e 8338 6 amp e 232220 0o C REV M 1 Culture 2 HTS 3 Immunologie HLA 4 Microbiologie Bact riologie 12 Couvercles 11 Cryog nie 10 Biochips 9 S paration 8 Cristallographie 7 Biologie 6 Pipetage 5 Tubes Films 13 Microtubes Cupules 14 Accessoires Cellulaire Microplaques Containers Mol culaire Microfluidiques o paration Diff rentes techniques de s paration peuvent tre utilis es pour enrichir certaines mol cules ADN ARN prot ines organelles v sicules micelles cellules etc sp cifiquement partir de m langes biologiques complexes cellules et homog nats de tiss
4. e 227 289 227 290 Tubes Leucosep Tubes Leucosep Tubes Leucosep Tubes Leucosep M Tubes Leucosep M Tubes Leucosep TM avec barri re avec barri re poreuse poreuse poreuse poreuse 12 50 50 50 pr rempli avec Ficoll Paque M PLUS as 3 8 ml sang 15 30mlsang 15 30mlsang 15 30 ml sang 50 500 25 250 25 300 25 900 Les tubes Leucosep pr remplis de Ficoll Paque PLUS sont conditionn s par Greiner Bio One Ficoll Paque PLUS est une marque d pos e de GE Healthcare as produit en condition aseptique www gbo com bioscience 913 1 Culture 2 HTS 3 Immunologie HLA 4 Microbiologie Bact riologie 12 Couvercles 11 Cryog nie 10 Biochips 9 S paration 8 Cristallographie 7 Biologie 6 Pipetage 5 Tubes Films 13 Microtubes Cupules 14 Accessoires Cellulaire Microplaques Containers Mol culaire Microfluidiques 1 Culture Cellulaire 2 HTS Microplaques 3 Immunologie HLA 4 Microbiologie Bact riologie 5 Tubes Containers 6 Pipetage 7 Biologie Mol culaire 8 Cristallographie 9 S paration 10 Biochips Microfluidiques 11 Cryog nie 12 Couvercles Films 13 Microtubes Cupules 14 Accessoires Leucosep Guide d utilisation Leucosep M thode L eucosep fut concu pour un isolement optimal des lymphocytes et mononucl aires PBMOs du sang total humain ou de la moelle oss
5. es tumorales circulantes diss min es partir de sang total Caract ristiques e R sultat en 45 minutes e Pas d quipement e R cup ration reproductible laboratoire additionnel gt 100 Pas de billes magn tiques e Elimination des cellules du e Pas de blocage des sang jusqu 6 unit s log mol cules marqueur e Enrichissement directement partir de sang total Blood Centrifugation 9 Tumor Cells Ec Platelets Leukocytes m s Q9 Erythrocytes Washing RT PCR FACS Cell Culture FISH Tumor Cells Des informations sur l utilisation d OncoQuick peuvent tre trouv es sur www gbo com bioscience Gentech Forschungs GmbH 227 250 Tubes OncoQuick avec barri re poreuse et milieu s parateur as 15 30 ml sang 10 as produit en condition aseptique www gbo com bioscience 915 1 Culture 12 Couvercles 11 Cryog nie 10 Biochips 9 S paration 8 Cristallographie 7 Biologie 6 Pipetage 5 Tubes 4 Microbiologie 3 Immunologie 2 HTS HLA Films 13 Microtubes Cupules 14 Accessoires Cellulaire Microplaques Bact riologie Containers Mol culaire Microfluidiques
6. euse selon un gradient de densit s tablissant durant la centrifugation Le constituant cl de L eucosep est la barri re poreuse incorpor e l int rieur du tube centrifuger en polypropyl ne translucide Cette barri re est en poly thyl ne de haut grade Elle pr sente une porosit homog ne et permet un gain de temps d exploitation de l chantillon L chantillon de sang total avec anticoagulant ou de moelle osseuse peut tre plac directement dans le tube Leucosep La barri re poreuse vite tout m lange entre le pr l vement et le milieu s parateur Lors de la centrifugation lymphooytes et mononucl aires sont s par s des l ments non d sir s par gradient de densit et viennent constituer une interphase au dessus du milieu s parateur Lorsque la s paration est achev e la barri re poreuse emp che toute contamination cellulaire de la fraction enrichie lors de sa r colte Pr paration lt Pr parer le milieu s parateur temp rature ambiante lt Remplir le tube Leucosep avec le milieu s parateur 3 ml de milieu si les tubes R f 163 289 ou R f 163 290 sont utilis s 15 ml de milieu si les tubes R f 227 289 ou H f 227 290 sont utilis s lt Refermer les tubes contenant le milieu s parateur avec le bouchon vissant et centrifuger pendant 30 secondes 1000 g temp rature ambiante Le milieu s parateur se retrouve ainsi en dessous de la barri re poreuse lt Lorsque des tube
7. lieu s parateur f agr gats erythrocytes et granulocytes Le pr l vement et l limination des 5 10 premiers mm de plasma vitent la contamination ventuelle par les plaquettes 4 R colter la fraction cellulaire enrichie lymphooytes mononucl aires l aide d une Pasteurpette ou en pla ant dans un tube centrifuger les phases situ es au dessus de la barri re poreuse Cette derni re vitant en effet toute contamination par les rythrocytes ou les granulocytes 5 Laver la fraction cellulaire enrichie lymphoocytes mononucl aires avec 10 ml de tampon phospat PBS centrifuger pendant 10 minutes 250 g 6 R p ter l tape de lavage 2 fois remettre en suspension l agr gat cellulaire dans 5 ml de PBS Attention Utiliser les chantillons biologiques et dispositifs de pr l vements sanguins conform ment aux proc dures en vigueur dans votre tablissement En cas de contact ou contamination avec l chantillon sanguin ou autres pig res dispositifs etc un traitement m dical appropri devra tre initi consid rant le caract re potentiel contaminant HBV HOV HIV ou autres de l chantillon ou du dispositif ayant servi au pr l vement OncoQuick OncoQuick 221250 OncoQuick est un syst me simple rapide et efficace d enrichissement des cellules tumorales circulantes relargu es par des tumeurs solides ou des m lanomes malins OncoQuick combine les avantages de la s
8. llules par gradient de densit est la m thode la plus largement utilis e de par sa simplicit et sa robustesse Avec le produit Leucosep Greiner Bio One atteint son objectif d optimisation du gradient de densit par centrifugation simple d utilisation En compl ment le produit OncoQuick fut d velopp pour largir l application au secteur oncologie cytotoxic Epyrogenic Leucosep Tubes Leucosep 12 ml et 50 ml 2202689 221290 163 289 Leucosep fut con u pour un isolement optimal des lymphocytes et des mononucl aires PBMCs de sang total humain ou de la moelle osseuse Le constituant cl de Leucosep est la barri re poreuse incorpor e l int rieur du tube centrifuger en polypropyl ne translucide Cette barri re est en poly thyl ne de haut grade Elle pr sente une porosit homog ne et permet un gain de temps d exploitation de l chantillon L chantillon de sang total avec anticoagulant ou de moelle osseuse peut tre plac directement dans le tube Leucosep La barri re poreuse vite tout m lange entre le pr l vement et le milieu s parateur Lors de la centrifugation lymphocytes et mononucl aires sont s par s des l ments non d sir s par gradient de densit et viennent constituer une interphase au dessus du milieu s parateur Lorsque la s paration est achev e la barri re poreuse emp che toute contamination cellulaire de la fraction enrichie lors de sa r colte
9. s pr remplis R f 163 288 ou R f 227 288 sont utilis s les tapes suscit es ne sont pas concern es Manipuler simplement ces tubes temp rature ambiante lt Les tubes sont maintenant pr ts recevoir l chantillon de sang total ou de moelle osseuse aspir e La dilution de l chantillon avec une solution saline quilibr e n est pas obligatoire mais elle peut contribuer la qualit de la s paration Pour l chantillon sanguin une dilution de 1 pour 2 pour l chantillon de moelle osseuse une dilution de 1 pour 4 sont recommand es 914 www gbo com bioscience Proc dure Sah o Apr s centrifugation 4 R colter avec pipette pasteur ou en d cantant dans un autre tube centrifuger 1 Placer d licatement l chantillon avec anticoagulant sang ou moelle osseuse aspir e dilu si n cessaire directement du tube pr l vement vers l int rieur du tube Leucosep 3 8 ml d chantillon pour les tubes R f 163 288 163 289 ou 163 290 15 30 ml d chantillon pour les tubes H f 227 288 227 289 ou 227 290 2 Centrifuger 10 minutes 1000 g temp rature ambiante ou 15 minutes 800 g temp rature ambiante avec rotor angulaire Oter le frein de la centrifugeuse 3 A l issue de la centrifugation les diff rentes phases constitu es du haut vers le bas sont a Plasma b fraction cellulaire enrichie Lymphocytes et mononucl aires c milieu s parateur d barri re poreuse e mi
10. us sang urine et autres fluides biologiques de facon pouvoir les tudier s par ment La s paration de ces fluides peut tre bas e soit sur la diff rence de vitesse de s dimentation des diff rentes particules dans un fluide ou sur leur diff rence de densit La centrifugation en gradient de densit nomm e aussi centrifugation en bande l quilibre ou isopycnique exploite le principe de l quilibre des particules d une certaine densit dans une solution environnante de densit quivalente La premi re application de la centrifugation en gradient a t publi e dans les ann es 1950 Depuis les organelles cellulaires sont enrichies gr ce des gradients de saccharose ll est incontestable que le savoir acquis sur ces produits enrichis a contribu tablir les bases de la biologie moderne www gbo com bioscience l a t d couvert depuis peu que l enrichissement en cellules de mammif res demandait des milieux de s paration plus complexes du fait de leur sensibilit aux fluctuations osmotiques Noble et Boyum ont d crit une m thode permettant de s parer les cellules mononucl es du sang total et de la moelle pini re en 1967 et 1968 Sur la base de ces travaux scientifiques de nombreuses applications biom dicales en recherche et en diagnostic de routine actuelles requi rent des populations de cellules intactes viables et fonctionnelles comme mat riel de d part La s paration de telles ce
Download Pdf Manuals
Related Search
www.gbo.com/bioscience