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BD Dermatophyte Agar

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1. tre ensemenc sur des milieux non s lectifs adapt s tel qu une BD Columbia Agar with 5 Sheep Blood Il se peut que certains champignons saprophytes produisent des r actions faussement positives apr s 2 semaines d incubation sur BD Dermatophyte Agar REFERENCES 1 Taplin D et al 1969 Isolation and recognition of dermatophytes on a new medium DTM Arch Dermatol 99 203 2 MacFaddin J D 1985 Media for isolation cultivation identification maintenance of medical bacteria vol 1 p 275 284 Williams amp Wilkins Baltimore MD 3 Sutton D A 2003 Specimen collection transport and processing mycology n Murray P R E J Baron J H Jorgensen M A Pfaller and R H Yolken ed Manual of clinical microbiology 8 ed American Society for Microbiology Washington D C 4 Summerbell R C 2003 Trichophyton Microsporum Epidermophyton and agents of superficial mycoses In Murray P R E J Baron J H Jorgensen M A Pfaller and R H Yolken ed Manual of clinical microbiology 8th ed American Society for Microbiology Washington D C 5 Larone D H 1995 Medically important fungi a guide to identification 3 edition ASM Press Washington PA 254429 03 3 CONDITIONNEMENT BD Dermatophyte Agar N r f 254429 Milieux en bo tes de P tri pr ts l emploi 20 unit s INFORMATIONS COMPLEMENTAIRES Pour plus d informations contacter le repr sentant local de BD BD Diagnostic System
2. and Streptomycin de mani re d celer la pr sence de tous les pathog nes fongiques pr sents dans l chantillon PA 254429 03 2 Fermer les bo tes de P tri avec du ruban adh sif ou placer les bo tes dans un r cipient afin de r duire l vaporation du milieu et incuber pendant 3 6 jours une temp rature comprise entre 25 et 30 C Si aucune croissance n est d tect e continuer l incubation pendant encore une semaine ou plus si n cessaire Noter que certains champignons n cessitent une p riode d incubation sup rieure 3 semaines R sultats Examiner les bo tes apr s 3 6 jours pour v rifier si l indicateur a chang de couleur du jaune au rouge ou au rose et pour contr ler l apparition de colonies dermatophytes typiques Un changement de couleur vers le rouge peut galement se produire en pr sence de Candida sp Une interpr tation des tests avant 2 semaines d incubation ne pourra tre qu incertaine Les r sultats des milieux bas s sur g lose de Sabouraud mentionn s ci dessus doivent tre pris en consid ration pour compl ter le diagnostic et ce particuli rement si aucune croissance n a t obtenue sur la BD Dermatophyte Test Medium Agar En raison du tr s grand nombre de dermatophytes existants aucun d tail ne peut tre fourni ici quant leur morphologie Consulter les documents cit s en r f rence CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCES ET LIMITES DE LA PROCEDURE La BD Dermatophyte Agar conv
3. 45 Staphylococcus aureus Inhibition compl te ATCC 25923 Non ensemenc e Jaune transparent l g rement opaque Incubation 5 7 jours 4 5 jours 42 48 h METHODE Mat riaux fournis BD Dermatophyte Agar bo tes de P tri Stacker de 90 mm Produit soumis contr le microbiologique Mat riaux non fournis Milieux de culture auxiliaires r actifs et mat riel de laboratoire requis Types d chantillons Il s agit d un milieu diff rentiel s lectif servant l isolement de dermatophytes issus d chantillons cliniques comme les ongles les cheveux et les pr l vements cutan s voir galement la rubrique CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCES ET LIMITES DE LA PROCEDURE Les couvillons issus de zones infect es ne sont pas des chantillons appropri s pour le pr l vement de dermatophytes Consulter les documents de r f rence pour obtenir une description compl te du pr l vement et des types d chantillons Mode op ratoire du test Les chantillons tels qu ongles cheveux etc doivent tre d pos s au centre de la surface des milieux Les particules paisses doivent si possible tre l g rement press es sur la surface l aide d une pince st rile pour assurer le contact avec le milieu Toujours inclure une bo te de BD Sabouraud Glucose Agar BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol ou BD Sabouraud Agar with Penicillin
4. M MODE D EMPLOI MILIEUX RIJ BD EN BOITES DE PETRI C PRETS A L EMPLOI PA 254429 03 Rev June 2003 BD Dermatophyte Agar APPLICATION La BD Dermatophyte Agar g lose dermatophyte est un milieu s lectif utilis pour l isolement de champignons pathog nes partir de sources cutan es comme la peau les cheveux et les ongles PRINCIPES ET EXPLICATION DE LA METHODE M thode microbiologique En 1969 Taplin et al ont d velopp ce milieu en vue de l isolement de dermatophytes partir de l sions cutan es comme la dermatomycose et partir de cheveux d ongles et de peau Ce milieu est recommand pour l isolement des dermatophytes II est particuli rement efficace pour isoler les genres Microsporum Trichophyton et Epidermophyton favorise en outre le d veloppement de Candida albicans Dans la BD Dermatophyte Agar les peptones fournissent de l azote et lorsqu elles sont m tabolis es par les dermatophytes produisent des l ments alcalins Lorsque les peptones sont m tabolis es en produits alcalins l indicateur au rouge de ph nol passe du jaune au rouge Du glucose est ajout en tant qu l ment nutritif pour permettre une acidification par les champignons capables d utiliser principalement le glucose La plupart des champignons autres que les dermatophytes y compris les levures et les moisissures si elles sont capables de se d velopper dans le milieu utilisent le glucose Il en r sulte la formation d ac
5. ide Aucun changement de couleur de l indicateur de pH le rouge de ph nol ne se produit Le cycloheximide est un inhibiteur pour les moisissures et les levures non pathog nes La gentamicine et la t tracycline sont des inhibiteurs antibact riens Quelques microorganismes notamment les saprophytes les levures et les bact ries sont capables de se d velopper dans le milieu et de faire passer l indicateur du rouge au jaune Ils sont facilement reconnaissables de par la morphologie caract ristique de leurs colonies REACTIFS BD Dermatophyte Agar Formule par litre d eau purifi e Digestion papa que de semoule de 10 0 g soja Glucose 10 0 Rouge de ph nol 0 2 Cycloh ximide 0 5 Gentamicine 0 1 Chlorhydrate de t tracycline 0 1 G lose 20 0 pH 5 5 0 2 Ajust e et ou compl ment e en fonction des crit res de performances impos s PRECAUTIONS A usage professionnel uniquement Ne pas utiliser les bo tes si elles pr sentent des signes de contamination microbienne d coloration ou dessiccation ou d autres signes de d t rioration Consulter le document MODE D EMPLOI GENERAL pour conna tre les proc dures de manipulation aseptique les risques biologiques ainsi que les m thodes d limination des produits utilis s PA 254429 03 1 STOCKAGE ET DUREE DE CONSERVATION D s r ception conserver les bo tes de P tri dans l obscurit entre 2 et 8 C dans leur emballage d
6. ient l isolement des dermatophytes p ex Trichophyton Epidermophyton et Microsporum et ne doit tre utilis e que pour la mise en vidence de champignons partir d infections superficielles peau cheveux et ongles De plus Candida albicans se d veloppe dans ce milieu car elle est r sistante au cycloh ximide La BD Dermatophyte Agar n est pas un milieu d isolement universel pour les champignons Pour cela l un des milieux bas s sur g lose de Sabouraud mentionn s ci dessus doit tre utilis Certains champignons pathog nes dont certaines souches de Microsporum sont inhib s par le cycloh ximide Les moisissures et levures inhib es sur ce milieu g n rent parfois des infections cutan es Tous les chantillons doivent de ce fait tre galement ensemenc s dans l un des milieux suivants BD Sabouraud Glucose Agar BD Sabouraud Agar with Chloramphenicol BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol ou BD Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin Les tests de confirmation appropri s doivent tre effectu s afin d effectuer l identification finale des pathog nes isol s sur ces milieux La BD Dermatophyte Agar et les milieux bas s sur g lose de Sabouraud mentionn s ci dessus ne conviennent pas l isolement de bact ries car ces milieux sont galement susceptibles de g n rer des infections de la peau Par cons quent si un risque d infection bact rienne ne peut pas tre exclu l chantillon doit
7. origine jusqu au moment de leur utilisation Ne pas les congeler ni les surchauffer Les bo tes peuvent tre ensemenc es jusqu leur date de p remption voir tiquette sur l emballage et incub es pendant le d lai d incubation recommand Des bo tes provenant d une pile ouverte de 10 bo tes sont utilisables pour une semaine lorsqu elles sont conserv es entre 2 et 8 C dans un endroit propre CONTROLE DE QUALITE PAR L UTILISATEUR Ensemencer les chantillons repr sentatifs avec les souches ci dessous pour plus d informations voir le document MODE D EMPLOI GENERAL Incuber les bo tes de P tri en a robie entre 25 et 30 C pendant les d lais indiqu s sous le tableau Croissance Souches Trichophyton mentagrophytes Petites colonies blanches d aspect pelucheux zones ATCC 9533 rouges dans le milieu situ en p riph rie des colonies Trichophyton equinum Petites colonies blanches d aspect pelucheux zones ATCC 22443 rouges dans le milieu situ en p riph rie des colonies Candida albicans Colonies de couleur blanche cr me et de taille petite ATCC 10231 moyenne milieu jaune ou comportant des zones rouges en p riph rie des colonies Aspergillus niger ATCC Inhibition partielle compl te 16404 Saccharomyces cerevisiae Inhibition compl te NCPF 1211 Escherichia coli ATCC 25922 Inhibition compl te Pseudomonas aeruginosa Inhibition compl te ATCC 101
8. s Tullastrasse 8 12 D 69126 Heidelberg Germany Phone 49 62 21 30 50 Fax 49 62 21 30 52 16 Reception Germany europe bd com BD Diagnostic Systems Europe Becton Dickinson France SA 11 rue Aristide Berg s 38800 Le Pont de Claix France Tel 33 476 68 3636 Fax 33 476 68 3292 http www bd com BD BD logo and Stacker are trademarks of Becton Dickinson and Company ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection 2003 Becton Dickinson and Company PA 254429 03 4

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