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1. AAAA LL ZZ AAAA LL LL sf rsitul lunii YYYY AA GG YYYY AA AA ayin sonu GGGG MM DD GGGG MM MM kraj meseca TTTT MM A2 FFTT MM MM koneu Mecaya MOIOIOK AA KK HOKOKOK AA AA a AbIH Con GGGG MM DD GGGG MM MM kraj mjeseca Catalog number Katalogov islo Katalognummer Catalogusnummer Kataloogi number Tuotenumero Num ro catalogue Bestellnummer Api udg karaA you Katal gussz m Numero di catalogo Katalogo numeris Numer katalogowy N mero do cat logo Katal gov slo N mero de cat logo KatanoxeH Homep Num r de catalog Katalog numaras Katalo ki broj Homep no karanory Karanor Hemipi Authorized Representative in the European Community Autorizovany z stupce pro Evropskou unii Autoriseret repraesentant i EU Erkend vertegenwoordiger in de Europese Unie Volitatud esindaja Euroopa N ukogus Valtuutettu edustaja Euroopan yhteis ss Repr sentant agr pour la C E E Autorisierte EG Vertretung Efouaiodornu vos avrimp curroc orny Eupurraikr Koiv rnra Hivatalos k pviselet az Eur pai Uni ban Rappresentante autorizzato nella Comunit europea galiotasis atstovas Europos Bendrijoje Autorisert representant i EU Autoryzowane przedstawicielstwo w Unii Europejskiej Representante autorizado na Uni o Europeia Autorizovany z stupca v Eur pskom spolo enstve Representante autorizado en la Comunidad Europea Auktoriserad represent2. DE LA METHODE l acridine orange se lie aux acides nucl iques des cellules et des bact ries Quand ils sont observ s en lumi re UV les ADN et ARN monobrins pr sentent une fluorescence orange tandis que les ADN double brins apparaissent en vert A faible pH 3 5 4 0 les bact ries et les champignons se colorent en orange vif Le mat riel cellulaire se colore de vert p le jaune 2 Les noyaux des leucocytes activ s peuvent se colorer en orange jaune ou rouge selon le niveau de production accrue d ARN Les rythrocytes soit sont incolores soit apparaissent vert p le REACTIFS Les compte gouttes du r actif l acridine orange contiennent 0 5 mL d une solution 0 01 96 de hydrochlorure de 3 6 bis dim thylamino acridine dans un tampon ac tate 0 5 M Avertissements et Pr cautions R serv au diagnostic in vitro Appliquer les proc dures de laboratoire en vigueur pour manipuler et jeter tout mat riau infectieux Eviter tout contact avec la peau Rincer soigneusement avec de l eau si renvers Instructions de conservation conserver temp rature ambiante 15 30 C Prot ger de la lumiere D t rioration du produit ce r actif est fourni dans une ampoule herm tiquement ferm e ce qui assure le maintien de la stabilit chimique de la solution jusqu la date de p remption La solution colorante doit tre orange transparente et ne montrer aucun signe de pr cipit METHODE Mat riel fourni compte goutt
3. Determinados restos pueden producir fluorescencia en los frotis te idos con naranja de acridina y pueden distinguirse por su morfolog a al examinarlos con mayor aumento 4 La tinci n con naranja de acridina no distingue entre los organismos gram positivos y gram negativos Se puede realizar la tinci n de Gram directamente sobre el frotis coloreado con naranja de acridina CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO4 Meseguer et al realizaron un estudio en el que se procesaron un total de 1 592 cultivos de sangre sin signos macrosc picos de crecimiento bacteriano durante las primeras 12 24 horas de incubaci n utilizando colorante naranja de acridina y subcultivo an nimo 121 cultivos de sangre 7 696 dieron resultado positivo con alguno de los dos m todos 105 86 896 fueron detectados con colorante naranja de acridina y subcultivo 5 4 196 mediante subcultivo solamente y 11 9 196 mediante colorante naranja de acridina solamente La diferencia entre los 116 cultivos de sangre con resultado positivo mediante naranja de acridina y los 110 cultivos de sangre con resultado positivo mediante subcultivo no fue significativa estad sticamente p 0 1 DISPONIBILIDAD N de cat Descripci n 261182 Cuentagotas de reactivo de naranja de acridina paquete de 50 cuentagotas caja BIBLIOGRAFIA Ver References en el texto en ingl s Manufacturer Vyrobce Producent Fabrikant Tootja Valmistaja Fabricant Hersteller Karaokeuaotng G
4. M ikke uds ttes for lys Weghoudvan licht Hoida eemal valgusest Suojattava valolta Conserver l abri de la lumi re Vor Licht sch tzen uAd te ro pakpid at quc F ny nem rheti Tenere al riparo dalla luce Laikyti atokiau nuo ilumos altini M ikke utsettes for lys Przechowywa z dala od r de wiat a Manter ao abrigo da luz Uchov vajte mimo dosahu svetla Mantener alejado de la luz Far ej uts ttas f r ljus Nasere or csetnuHa A se feri de lumin Igiktan uzak tutun Dr ite dalje od svetlosti Xpauwre B TemHoTe KapaHrbinaHraH enne vera Dr ati dalje od svjetla 7 TT Becton Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks MD 21152 USA 800 638 8663 www bd com ds Benex Limited Rineanna House Shannon Free Zone Shannon County Clare Ireland ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection BD BD Logo and BBL are trademarks of Becton Dickinson and Company 2010 BD
5. orange klar und ohne Anzeichen von Pr zipitation sein VERFAHREN Mitgeliefertes Arbeitsmaterial Tropfpipetten f r Acridinorange Ben tigtes jedoch nicht mitgeliefertes Arbeitsmaterial Zus tzliche Kulturmedien Reagenzien Qualit tskontrollorganismen sowie Laborger te die f r dieses Verfahren erforderlich sind Gebrauchsanleitung 1 Die zu f rbende Probe auf einen Glasobjekttr ger ausstreichen und lufttrocknen lassen 2 Ausstrich 2 Min mit Methanol fixieren 50 100 96 bersch ssiges Methanol abgie en und Ausstrich lufttrocknen lassen 3 Die Tropfpipette senkrecht halten DABEI MUSS DIE PIPETTE VOM ANWENDER WEGWEISEN Die Mitte mit Daumen und Zeigefinger fassen und leicht zusammendr cken bis die Ampulle in der Tropf pipette bricht Vorsicht Die Ampulle nur einmal in der Mitte brechen Danach die Tropfpipette nicht weiter manipulieren da dabei das Plastik durchbrochen werden kann und Verletzungen auftreten k nnen 4 Mit dem unteren Ende der Pipette mehrmals auf die Arbeitsfl che klopfen Dann die Pipette umdrehen um die richtige Tropfenabgabe des Reagenz zu gew hrleisten 3 5 Objekttr ger 2 Min lang mit Acridinorange bedecken Gut mit Leitungswasser absp len und lufttrocknen lassen 7 Ausstriche mit einem Fluoreszenzmikroskop mit 100 bis 400facher Vergr erung untersuchen und das Ergebnis bei 1000facher Vergr erung mit einem Olimmersionsobjektiv best tigen Qualit tskontrolle durch den Anw
6. procedure Test Procedure 1 Prepare a smear of the specimen to be stained on a glass slide and air dry 2 Fix the smear in methanol 50 100 for 2 min drain off excess methanol and allow smear to air dry 3 Hold reagent dropper upright and POINT TIP AWAY FROM YOURSELF Grasp the middle with thumb and forefinger and squeeze gently to break ampule inside the dropper Caution Break ampule close to its center one t me only Do not manipulate the dropper any further as the plastic may puncture and injury may occur 4 Tap bottom of dropper on tabletop a few times Then invert for convenient drop by drop dispensing of reagent 5 Flood the slide with acridine orange stain for 2 min 6 Rinse thoroughly with tap water and allow to air dry 7 Using a fluorescence microscope examine smears initially at 100X to 400X then confirm findings at 1000X using an oil immersion objective User Quality Control 1 Examine the staining solution for signs of deterioration see Product Deterioration 2 Check the performance of the stain with fresh cultures of Escherichia coli and Haemophilus influenzae Quality control requirements must be performed in accordance with applicable local state and or federal regulations or accreditation requirements and your laboratory s standard Quality Control procedures It is recommended that the user refer to pertinent NCCLS guidance and CLIA regulations for appropriate Quality Control practices RESUL
7. Revisions SO 0191 5 Rev from Rev to ECO 0703 2010 06 5348 10 Notes 1 BD Cat Number 261182 2 Blank Sheet Size Length 11 Width 18 Number of Pages 8 Number of Sheets 1 Page Size Length 11 Width 4 5 Final Folded Size 4 5 x 1 875 Style see illustrations below 4 an HEADER HEADER d ni DER 3 4 HEADER mA 5 6 7 See Specification Control Number N A for Material Information Ink Colors Printed two sides x Yes _ No No of Colors 1 PMS 2755 Blue Graphics are approved by Becton Dickinson and Company Supplier has the responsibility for using the most current approved revision level Label Design COMPANY CONFIDENTAL THIS DOCUMENT IS a BD Becton Dickinson and Company THE PROPERTY OF BECTON DICKINSON AND RI 7 Lovetoni Circle Proofer COMPANY AND IS NOT TO BE USED OUTSIDE THE COMPANY WITHOUT WRITTEN PERMISSION Sparks MD 21152 USA Category and Description Sheet 1 of 9 Package Insert L001122 Acridine Orange Reagent Droppers Scale N A Checked By Part Number BD Acridine Orange Reagent Droppers English pages 1 2 Italiano pagine 4 5 C L001122 Frangais pages 2 3 Espanol p ginas 5 6 2010 06 Deutsch Seiten 3 4 Pokyny vam poskytne mistni z stupce spole nosti BD Kontakt den lokale BD repr sentant for at f instruktioner Kasutusjuhiste suhtes kontakteeruge oma kohaliku BD esindajaga Um Anleitung
8. TS Microorganisms usually stain a brilliant orange on a black light green or yellow background LIMITATIONS OF THE PROCEDURE 1 Acridine orange provides presumptive information on microorganisms which may be present in the specimen Since microorganisms seen in smears may arise from external sources i e collection devices water used slides etc all positive smears should be confirmed by culture 2 A minimum of approximately 10 CFU mL are required for detection by this method 3 3 Certain types of debris may fluoresce in acridine orange smears and can be distinguished on the basis of morphology when viewed at higher magnification 4 Acridine orange staining does not distinguish between gram positive and gram negative organisms Gram staining may be performed directly over the acridine orange stained smear PERFORMANCE CHARACTERISTICS 4 Meseguer et al conducted a study where a total of 1 592 blood cultures without macroscopic signs of bacterial growth in the first 12 24 hours of incubation were processed using both acridine orange stain and blind subculture One hundred and twenty one 7 6 blood cultures were positive by either method of these 105 86 8 were detected by both acridine orange stain and subculture 5 4 1 by subculture alone and 11 9 1 by acridine orange stain alone The difference between the 116 blood cultures positive by acridine orange and the 110 blood cultures positive by subculture was not statisticall
9. allido giallo 1 Ogni contagocce contiene una quantita di reagente sufficiente per colorare un vetrino PRINCIPI DELLA PROCEDURA L arancio di acridina si lega con gli acidi nucleici di cellule e batteri Allorch osservati alla luce UV DNA e RNA monoelica emettono una fluorescenza arancio mentre il DNA bielica appare verde A basso pH 3 5 4 0 batteri e funghi assumono una colorazione arancio brillante e il materiale cellulare si colora invece di verde pallido giallo 2 possibile che i nuclei di leucociti attivati assumano una colorazione arancio gialla o rossa a seconda del grado di maggiore produzione di RNA Gli eritrociti assumono una colorazione verde pallido oppure non ne sviluppano alcuna REAGENTI contagocce di Reagente Arancio di Acridina contengono 0 5 mL di soluzione allo 0 01 di 3 6 bis dimetilamino acridina cloridrato in tampone acetato 0 5 M Avvertenze e precauzioni Per uso diagnostico in vitro Seguire le procedure di laboratorio stabilite per quanto riguarda il trattamento e l eliminazione di materiale infetto Evitare il contatto con la pelle Sciacquare con cura con acqua in caso di fuoriuscita Modalit di conservazione conservare a temperatura ambiente a 15 30 C Proteggere dalla luce Deterioramento del prodotto questo reagente ermeticamente sigillato in una fiala che protegge la soluzione da instabilit chimiche fino alla data di scadenza La soluzione di colorazione deve essere di c
10. ant i EU Oropusupax npegcrasuten 8 EU Reprezentant autorizat in Uniunea European Avrupa Toplulu u Yetkili Temsilcisi Ovla eni predstavnik u Evropskoj zajednici YnonnoMouenubtii npeactagnTenb B EBponeiickom coo6ujecrae EBpona KaybimgacThiFbiHAAarb yekinerri kin Autorizuirani predstavnik u EU In Vitro Diagnostic Medical Device L ka sk za zen ur en pro diagnostiku in vitro In vitro diagnostisk medicinsk anordning Medisch hulpmiddel voor in vitro diagnose In vitro diagnostika meditsiiniaparatuur L kinn llinen in vitro diagnostiikkalaite Dispositif medical de diagnostic in vitro Medizinisches In vitro Diagnostikum In vitro Siayvworikh open cuokeur In vitro diagnosztikai orvosi eszk z Dispositivo medico diagnostico in vitro In vitro diagnostikos prietaisas In vitro diagnostisk medisinsk utstyr Urzadzenie medyczne do diagnostyki in vitro Dispositivo m dico para diagn stico in vitro Medicinska pom cka na diagnostiku in vitro Dispositivo m dico de diagn stico in vitro Medicinsk anordning f r in vitro diagnostik MeguunHewm ypen 3a Anarhoctuka nH Burpo Aparatur medical de diagnosticare in vitro In Vitro Diyagnostik Tibbi Cihaz Medicinski uredaj za in vitro dijagnostiku Mequuuncku npubop ana auarHioctuki in vitro KacaHgbi xargaviga Xypriaerih meguunHanbik quarHoctuka acnabbi Medicinska pomagala za In Vitro Dijagnostiku Temperature limitation Teplotni omezeni Tempe
11. e con arancio di acridina non differenzia gli organismi gram positivi da quelli gram negativi La colorazione di Gram pu essere eseguita direttamente sullo striscio colorato con arancio di acridina PERFORMANCE4 Meseguer et al hanno condotto uno studio nel corso del quale hanno complessivamente analizzato 1 592 emocolture senza segni macroscopici di crescita batterica nelle prime 12 24 ore di incubazione utilizzando sia colorazione con arancio di acridina che subcoltura in cieco Centoventuno emocolture 7 6 sono risultate positive a tutte e due o a una delle due metodiche di queste 105 86 8 sono state rilevate mediante colorazione con arancio di acridina e subcoltura 5 4 1 mediante sola subcultura e 11 9 1 mediante sola colorazione con arancio di acridina La differenza tra le 116 emocolture positive con arancio di acridina e le 110 positive con subcoltura non risultata statisticamente significativa p gt 0 1 DISPONIBILITA N di cat Descrizione 261182 Contagocce di Reagente Arancio di Acridina 50 contagocce scatola BIBLIOGRAFIA Vedere References nel testo inglese BD Cuentagotas de reactivo BBL de naranja de acridina Espanol USO PREVISTO Los cuentagotas de reactivo de naranja de acridina se utilizan para la detecci n por fluorescencia microsc pica de los microorganismos en frotis directos RESUMEN Y EXPLICACION La naranja de acridina colorante de fluorocromo tamponado a un pH bajo difere
12. e gef rbten Ausstrich durchgef hrt werden LEISTUNGSMERKMALE4 Meseguer et al f hrten eine Studie durch bei der insgesamt 1592 Blutkulturen ohne makroskopische Anzeichen von Bakterienwachstum im Verlauf der ersten 12 24 h Inkubationsstunden sowohl mit Acridinorange Farbstoff als auch in Form einer Blind Subkultur verarbeitet wurden Mit jeder der beiden Methoden erwiesen sich einhundertundeinundzwanzig Blutkulturen 7 6 als positiv Darunter wurden 105 86 8 sowohl mit Acridinorange Farbstoff als auch durch Subkultivierung nachgewiesen 5 4 1 allein durch Subkultivierung und 11 9 1 allein mittels Acridinorange Farbstoff Die Differenz zwischen den 116 Blutkulturen die sich mit Acridinorange als positiv erwiesen und den 110 Blutkulturen die sich durch Subkultivierung als positiv erwiesen war von statistischer Bedeutung p gt 0 1 LIEFERBARE PRODUKTE Best Nr Beschreibung 261182 Tropfpipetten f r Acridinorange Reagenz 50 Pipetten Karton LITERATURNACHWEIS S References im englischen Text BD Contagocce di Reagente Arancio di Acridina Italiano USO PREVISTO contagocce di Reagente Arancio di Acridina sono usati per la rilevazione con microscopio a fluorescenza di microrganismi in strisci diretti SOMMARIO E SPIEGAZIONE L arancio di acridina una colorazione a fluorocromo tamponata a basso pH differenzia batteri con colorazione arancio brillante da tessuti e cellule umane con colorazione verde p
13. en zu erhalten wenden Sie sich bitte an Ihren BD Kundendienst Etr koivwvrjoTe HE TOV TOTTIK avTITIPOGWTTO rnc BD yia o nyiss A haszn lati utas t st k rje a BD helyi kepviseletet l Contattare il rappresentante BD di zona per ottenere il foglietto illustrativo Naudojimo instrukcijy teiraukit s vietos BD jgaliotojo atstovo Kontakt din lokale BD representant for mer informasjon Aby uzyska instrukcje uzytkowania skontaktuj sie z lokalnym przedstawicielstwem BD Contacte o seu representante local da BD para obter instru es In trukcie z skate u miestneho z stupcu spolo nosti BD Kontakta lokal Becton Dickinson representant f r anvisningar Ceppikere ce c MecrHua npencrasuten Ha BD 3a mHcrpykaum Contactati reprezentantul dumneavoastr local BD pentru instructiuni Talimatlar igin yerel BD temsilcilerinize danisin Obratite se svom lokalnom predstavniku kompanije BD za uputstva Ana nonyuenusi UHCTPyKUM CBSDKeTeCb C MECTHbIM npeacraBHTeneM komnaHuu BD O3iHisniH xeprinikri BA ekiniHe xyriHin Hyckay anbiHbi3 Kontaktiraj lokalnog predstavnika BD za upute INTENDED USE BBL Acridine Orange Reagent Droppers are used for fluorescent microscopic detection of microorganisms in direct smears SUMMARY AND EXPLANATION Acridine orange a fluorochrome stain buffered at a low pH differentiates between bright orange stained bacteria and pale green to yellow stained human cells and tissue Each droppe
14. ender 1 Die F rbel sung auf Anzeichen von Verfall pr fen siehe Produktverfall 2 Die Wirksamkeit der F rbung mit frischen Kulturen von Escherichia coli und Haemophilus influenzae berpr fen Die Qualit tskontrollen m ssen unter Einhaltung der rtlich landesweit und oder bundesweit geltenden Bestimmungen oder der Auflagen der Akkreditierungsorganisationen sowie den Standard Qualit tskontrollverfahren Ihres Labors erfolgen Es wird empfohlen die korrekten Qualit tskontrollverfahren den geltenden NCCLS Richtlinien und CLIA Bestimmungen zu entnehmen ERGEBNISSE Mikroorganismen f rben sich normalerweise leuchtend orange auf einem schwarzen hellgr nen oder gelben Hintergrund VERFAHRENSBESCHR NKUNGEN 1 Acridinorange dient als pr sumtive Information ber eventuell in der Probe vorhandene Mikroorganismen Da die in Ausstrichen auftretenden Mikroorganismen auch aus externen Quellen stammen k nnen wie z B Entnahmebeh lter Wasser Objekttr ger usw sollten alle positiven Ausstriche durch eine Kultur best tigt werden 2 Zum Nachweis mit diesem Verfahren sind mindestens ca 104 KBE ml erforderlich 3 3 Bestimmte Verunreinigungen k nnen in Acridinorange Ausstrichen fluoreszieren und sind bei entsprechender Vergr erung anhand der Morphologie zu erkennen 4 Acridinorange F rbungen unterscheiden nicht zwischen grampositiven und gramnegativen Organismen Gram F rbungen k nnen unmittelbar auf dem acridinorang
15. es du r actif l acridine orange Mat riel requis mais non fourni milieux de culture r actifs organismes de contr le de la qualit et mat riel de laboratoire requis par cette proc dure Mode d emploi 1 Pr parer un frottis de l chantillon colorer sur une lame de verre propre et laisser s cher l air 2 Fixer le frottis au m thanol 50 100 96 pendant 2 min goutter l exc s de m thanol et laisser le frottis s cher l air 3 Tenir le compte gouttes verticalement et POINTER L EXTREMITE A L OPPOSE DE SOI Saisir le milieu entre le pouce et l index et presser doucement pour casser l ampoule l int rieur du compte gouttes Attention casser l ampoule pr s de son centre seulement une fois Ne pas manipuler davantage le compte gouttes car le plastique pourrait se percer et des blessures pourraient en r sulter 4 Tapoter le fond du compte gouttes sur le comptoir plusieurs fois Puis inverser pour pouvoir apporter le r actif goutte goutte 5 Inonder la lame avec l acridine orange pendant 2 min Rincer soigneusement l eau du robinet et laisser s cher l air 7 Utiliser un microscope fluorescence pour examiner le frottis d abord au grossissement 100 400 puis confirmer les observations au grossissement 1000 en utilisant l objectif huile d immersion Contr le de qualit r alis par l utilisateur 1 Inspecter la solution colorante la recherche de signes de d t rioration voir D
16. fo y seque al aire 7 Utilizando un microscopio fluorescente inspeccione los frotis a un aumento entre 100 x y 400 x y despu s confirme los hallazgos a 1000 x utilizando un objetivo de inmersi n de aceite Control de calidad por parte del usuario 1 Examine la soluci n colorante para ver si hay signos de deterioro ver Deterioro del producto 2 Compruebe el rendimiento del colorante con cultivos frescos de Escherichia coli y Haemophilus influenzae El control de calidad debe llevarse a cabo conforme a la normativa local y o nacional a los requisitos de los organismos de acreditaci n y a los procedimientos est ndar de control de calidad del laboratorio Se recomienda consultar las instrucciones de NCCLS y normativas de CLIA correspondientes para obtener informaci n acerca de las pr cticas adecuadas de control de calidad RESULTADOS Los microorganismos suelen tefiirse de color naranja brillante sobre un fondo negro verde claro o amarillo LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO 1 La naranja de acridina proporciona informaci n presunta sobre los microorganismos que puedan estar presentes en la muestra Como los microorganismos observados en frotis pueden tener un origen externo es decir de los dispositivos de recogida el agua utilizada el portaobjetos etc todos los frotis positivos deben ser confirmados mediante un cultivo 2 Se requiere un m nimo de aproximadamente 104 UFC ml para la detecci n por este m todo 3 3
17. ncia entre las bacterias que evidencian un color naranja brillante y las c lulas y tejido humano que tienen un color entre verde p lido y amarillo Cada cuentagotas contiene suficiente reactivo para tefiir un portaobjetos PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO La naranja de acridina se une a los cidos nucleicos de las c lulas y bacterias Cuando se mira bajo la luz ultravioleta el DNA de cadena simple y el RNA evidencian una fluorescencia de color naranja y el DNA de cadena doble evidencia un color verde A un pH bajo 3 5 4 0 las bacterias y hongos se tifien de color naranja brillante El material celular adquiere un color entre verde p lido y amarillo 2 Los n cleos de los leucocitos activados pueden tefiirse de color naranja amarillo o rojo en funci n de la intensidad del aumento de la producci n de RNA Los eritrocitos son incoloros o tienen un color verde p lido REACTIVOS Los cuentagotas de reactivo de naranja de acridina contienen 0 5 mL de una soluci n al 0 01 de 3 6 bis dimetilamino acridina clorhidrato en un tamp n de acetato de 0 5 M Advertencias y precauciones Para uso diagn stico in vitro Siga el procedimiento de laboratorio que ha sido establecido para la manipulaci n y desecho de materiales infecciosos Evite el contacto con la piel Si se derrama enjuague con abundante agua Instrucciones para el almacenamiento Conserve a temperatura ambiente entre 15 30 C Proteger de la luz Deterioro del produc
18. olore arancio trasparente e non presentare segni di precipitazione PROCEDURA Materiale fornito contagocce di Reagente Arancio di Acridina Materiali richiesti ma non forniti terreni di coltura ausiliari reagenti organismi per controllo di qualit e attrezzatura da laboratorio necessaria per questa procedura Istruzioni per l uso 1 Preparare uno striscio del campione da colorare su un vetrino pulito di vetro e lasciare asciugare all aria 2 Fissare lo striscio in metanolo 50 10096 per 2 min eliminare quindi il metanolo in eccesso e lasciare asciugare all aria 3 Tenere il contagocce di reagente in posizione verticale e RIVOLGERE LA PUNTA IN DIREZIONE OPPOSTA RISPETTO ALL OPERATORE Stringere delicatamente la parte centrale con il pollice e l indice per rompere la fiala dentro il contagocce Attenzione rompere la fiala in prossimit della parte centrale una sola volta Non manipolare ulteriormente il contagocce in quanto cosi facendo si pu forare la plastica e causare lesioni 4 Picchiettare alcune volte il fondo del contagocce sul piano di lavoro quindi capovolgere il contagocce per facilitare la dispensazione goccia a goccia del reagente 5 Ricoprire il vetrino di colorazione di arancio di acridina per 2 min Sciacquare con cura con acqua corrente e lasciare asciugare all aria 7 Con un microscopio a fluorescenza esaminare gli strisci inizialmente a 100 x 400 x quindi confermare i riscontri a 1000 x usando
19. r contains sufficient reagent to stain one slide PRINCIPLES OF THE PROCEDURE Acridine orange binds to nucleic acids of cells and bacteria When viewed under UV light single stranded DNA and RNA fluoresce orange whereas double stranded DNA appears green At low pH 3 5 4 0 bacteria and fungi stain bright orange Cellular material stains pale green to yellow 2 Nuclei of activated leukocytes may stain orange yellow or red depending upon the degree of increased RNA production Erythrocytes either have no color or appear pale green REAGENTS Acridine Orange Reagent Droppers contain 0 5 mL of a 0 01 solution of 3 6 bis dimethyl amino acridine hydrochloride in a 0 5 M acetate buffer Warnings and Precautions For in vitro Diagnostic Use Follow proper laboratory procedures in handling and disposing of infectious materials Avoid contact with skin Rinse thoroughly with water if spilled Storage Instructions Store at room temperature 15 30 C 59 85 F Protect from light Product Deterioration This reagent is hermetically sealed in an ampule which affords protection of the solution from chemical instability until the expiration date The staining solution should be orange clear and without evidence of precipitation PROCEDURE Material Provided Acridine Orange Reagent Droppers Materials Required But Not Provided Ancillary culture media reagents quality control organisms and laboratory equipment as required for this
20. raturbegraensning Temperatuurlimiet Temperatuuri piirang L mp tilarajoitus Temp rature limite Zul ssiger Temperaturenbereich Opio Bepuokpacias H m rs kleti hat r Temperatura limite Laikymo temperat ra Temperaturbegrensning Ograniczenie temperatury Limita o da temperatura Ohrani enie teploty Limitaci n de temperatura Temperaturbegr nsning TemnepatypHn orpaHuseHma Limitare de temperatur S cakl k sinirlamasi Ograni enje temperature OrpaunueHne reuneparypei TemneparypaHbi uiekrey Dozvoljena temperatura Batch Code Lot K d slo ar e Batch kode Lot Chargenummer lot Partii kood Er koodi LOT Code de lot Lot Chargencode Chargenbezeichnung Kw lk g Trapridas Naptida T tel sz ma Lot Codice del lotto partita Partijos numeris Lot Batch kode Serie Kod partii seria C digo do lote Lote K d s rie ar a C digo de lote Lote Satskod parti Kon Naptuga Num r lot Lotul Parti Kodu Lot Kod serije Kog naptun not Tontama konnt Lot kod Contains sufficient for n tests Dostate n mnozstvi pro n test Indeholder tilstr kkeligt til n test Voldoende voor n tests K llaldane n testide jaoks Sis lt on riitt v n testej varten Contenu suffisant pour n tests Ausreichend f r n Tests Mepi xel errapkrj rroo rra lt n gt eteTdceic n teszthez elegend Conten
21. rte Fluorochromf rbung dient zur Unterscheidung zwischen leuchtendorange gef rbten Bakterien und bla gr nen bis gelb gef rbten humanen Zellen und Gewebe 1 Jede Tropfpipette enth lt ausreichend Reagenz zur F rbung eines Objekttr gers VERFAHRENSPRINZIP Acridinorange bindet sich an die Nukleins uren von Zellen und Bakterien Unter UV Licht haben einstr ngige DNA und RNA eine fluoreszierende orangene Farbe w hrend ein doppelstr ngiges DNA eine gr ne Farbe aufweist Bei niedrigem pH 3 5 4 0 f rben sich die Bakterien und Pilze leuchtendorange Zellmaterial f rbt blaBgr n bis gelb 2 Je nach dem Grad der erh hten RNA Produktion nehmen die Nuklei der aktivierten Leukozyten eine orange gelbe oder rote Farbe an Erythrozyten sind entweder farblos oder bla gr n REAGENZIEN Tropfpipetten f r Acridinorange Reagenz enthalten 0 5 mL einer 0 0196igen L sung von 3 6 bis di methylamino Acridin Hydrochlorid in einem 0 5 M Azetat Puffer Warnungen und Vorsichtsma nahmen In vitro Diagnostikum Die zur Handhabung und Entsorgung infekti ser Materialien geltenden Laborvorschriften beachten Kontakt mit Haut vermeiden Bei Versch tten gr ndlich mit Wasser sp len Aufbewahrung Bei Raumtemperatur 15 30 C lagern Vor Licht sch tzen Produktverfall Dieses Reagenz befindet sich in einer hermetisch verschlossenen Ampulle die das Produkt bis zum Verfallsdatum vor chemischer Instabilit t sch tzt Die F rbel sung sollte
22. t rioration du produit 2 V rifier la performance du colorant avec des cultures fraiches d Escherichia coli et d Haemophilus influenzae Effectuer les contr les de qualit conform ment la r glementation nationale et ou internationale aux exigences des organismes d homologation concern s et aux proc dures de contr le de qualit en vigueur dans l tablissement Il est recommand a l utilisateur de consulter les directives NCCLS et la r glementation CLIA concern es pour plus d informations sur les modalit s de contr le de qualit RESULTATS Les microorganismes en g n ral apparaissent orange vif sur un fond noir vert p le ou jaune LIMITES DE LA METHODE 1 l acridine orange donne une information pr sum e quant la presence de microorganismes dans l chantillon Puisque les microorganismes mis en vidence sur les frottis peuvent avoir une origine externe c d outils de pr l vement l eau utilis e lames etc tous les frottis positifs doivent tre confirm s par culture 2 Il faut au minimum environ 104 UFC ml pour pouvoir faire la mise en vidence par cette m thode 3 3 Certains types de d bris peuvent pr senter une fluorescence sur frottis l acridine orange il est possible de les reconnaitre gr ce la morphologie lorsqu ils sont observ s au plus fort grossissement 4 Le colorant l acridine orange ne permet pas de distinguer les organismes Gram positif des organismes Gram n ga
23. tif La coloration de Gram peut tre effectu e directement sur le frottis color l acridine orange CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCES4 Meseguer et al ont men une tude dans laquelle 1 592 h mocultures ne pr sentant aucun signe macroscopique de croissance bact rienne dans les premi res 12 24 heures d incubation ont t trait es la fois avec du colorant acridine orange et par repiquage l aveugle Cent vingt et une h mocultures 7 6 96 se sont r v l es positives avec les deux m thodes parmi elles cent cinq 86 8 96 ont t d tect es par le colorant acridine orange et par le repiquage cinq 4 1 96 par le seul repiquage et onze 9 1 uniquement par le colorant acridine orange La diff rence entre les cent seize h mocultures rendues positives sous l effet du colorant acridine orange et les cent dix h mocultures rendues positives par le repiquage ne constitue pas un r sultat statistiquement significatif p gt 0 1 MATERIEL DISPONIBLE N cat Description 261182 50 compte gouttes du r actif l acridine orange emball s carton BIBLIOGRAPHIE voir la rubrique References du texte anglais BD Tropfpipetten f r Acridinorange Reagenz Deutsch VERWENDUNGSZWECK Tropfpipetten f r Acridinorange Reagenz dienen zum mikroskopischen Nachweis von Mikro organis men durch Fluoreszenzf rbung in direkten Ausstrichen ZUSAMMENFASSUNG UND ERKL RUNG Acridinorange eine bei einem niedrigen pH gepuffe
24. to Este reactivo est sellado herm ticamente en una ampolla la cual protege la soluci n contra la inestabilidad quimica hasta la fecha de caducidad La soluci n colorante debe ser de color naranja transparente y sin indicios de precipitaci n PROCEDIMIENTO Material suministrado Cuentagotas de reactivo de naranja de acridina Materiales necesarios pero no suministrados Medios de cultivo auxiliar reactivos organismos de control de calidad y el equipo de laboratorio que se requiere para llevar a cabo este procedimiento Instrucciones de uso 1 Prepare un frotis de la muestra a te ir en un portaobjetos de vidrio limpio y s quelo al aire 2 Fije el frotis en metanol 50 100 durante 2 min elimine luego el metanol sobrante y seque el frotis al aire 3 Mantenga el cuentagotas de reactivo en posici n vertical CON LA PUNTA DIRIGIDA HACIA AFUERA Sujete el cuentagotas por la parte media entre el pulgar y el dedo indice y apri telo con cuidado para romper la ampolla dentro del cuentagotas Precauci n Rompa una sola vez la ampolla cerca de su parte central No manipule m s el cuentagotas porque puede perforarse el pl stico y causar lesiones 4 Golpee suavemente unas cuantas veces la parte inferior del cuentagotas sobre la mesa Despu s invi rtalo para que el reactivo pueda ser dispensado c modamente gota a gota 5 Inunde el portaobjetos con el colorante de naranja de acridina durante 2 min Enju guelo bien con agua del gri
25. un obiettivo a immersione in olio Controllo di qualit per l utilizzatore 1 Verificare che la soluzione di colorazione non presenti segni di deterioramento vedere Deterioramento del prodotto 2 Controllare la performance della colorazione con colture fresche di Escherichia coli e Haemophilus influenzae Le procedure prescritte per il controllo di qualit devono essere effettuate in conformit alle norme vigenti o ai requisiti di accreditazione e alla prassi di controllo di qualit del laboratorio specifico Per una guida alla prassi di controllo di qualit appropriata si consiglia di consultare le norme CLIA e la documentazione NCCLS in merito RISULTATI I microrganismi assumono generalmente una colorazione arancio brillante su fondo nero verde chiaro o giallo LIMITAZIONI DELLA PROCEDURA 1 L arancio di acridina fornisce informazioni presuntive su microrganismi eventualmente presenti nel campione Poich i microrganismi osservati negli strisci possono originare da fonti esterne vale a dire dispositivi di prelievo acqua utilizzata vetrini ecc tutti gli strisci positivi devono essere confermati mediante coltura 2 Perla rilevazione con questo metodo sono necessari circa almeno 104 UFC ml 3 3 possibile che alcuni tipi di detriti emettano fluorescenza negli strisci di arancio di acridina e possano essere distinti in base alla loro morfologia allorch osservati con un ingrandimento maggiore 4 La colorazion
26. uto sufficiente per n test Pakankamas kiekis atlikti n testy Innholder tilstrekkelig for n tester Zawiera ilo wystarczaj c do n test w Cont mo suficiente para n testes Obsah vystaci na n testov Contenido suficiente para n pruebas R ckertill n antal tester Cerepxxauuero e nocrare Ho 3a lt n gt Tecra Con ine suficient pentru n teste lt n gt testleri i in yeterli miktarda i erir Sadr aj dovoljan za n testova octaTouHo nna n TecTo a lt n gt recrrepi y niH xerkinikri Sadr aj za n testova Consult Instructions for Use Prostudujte pokyny k pou it L s brugsanvisningen Raadpleeg gebruiksaanwijzing Lugeda kasutusjuhendit Tarkista k ytt ohjeista Consulter la notice d emploi Gebrauchsanweisung beachten Zuu oukeufteite Tig oonyies xprjong Olvassa el a haszn lati utas t st Consultare le istruzioni per l uso Skaitykite naudojimo instrukcijas Se i bruksanvisningen Zobacz instrukcja u ytkowania Consulte as instru es de utiliza o Pozri Pokyny na pou vanie Consultar las instrucciones de uso Se bruksanvisningen Hanpasete cnpaska B nHctpykumute aa ynotpe a Consulta i instruc iunile de utilizare Kullan m Talimatlar na ba vurun Pogledajte uputstvo za upotrebu Cm pykoBoncrBo No akennyataynn Ma ganany HyckaynbifbIMeH TAHbICLIN anbiHbIs Koristi upute za upotrebu Keep away from light Nevystavujte sv tlu
27. y rt Ditta produttrice Gamintojas Producent Fabricante V robca Tillverkare Npovssoguten Produc tor retici Proizvo a Mponasogutent ATKapyLubl Use by Spotfebujte do Anvendes for Houdbaar tot Kasutada enne Viimeink ytt p iv A utiliser avant Verwendbar bis Huepoynia Angng Felhaszn lhat s g d tuma Usare entro Naudokite iki Brukes for Stosowa do Utilizar em Pou ite do Usar antes de Anv nd fore Wsnonasaitre no A se utiliza pana la Son kullanma tarihi Upotrebiti do AcnonbsoBarTe no ae in na qananyra Upotrijebiti do YYYY MM DD YYYY MM MM end of month RRRR MM DD RRRR MM MM konec m sice AAAA MM DD AAAA MM MM slutning af m ned JJJJ MM DD JJJJ MM MM einde maand AAAA KK PP AAAA KK KK kuu l pp VVVV KK PP VVVV KK kuukauden loppuun menness AAAA MM JJ AAAA MM MM fin du mois JJJJ MM TT JJJJ MM MM Monatsende EEEE MM HH EEEE MM MM r Aoc rou priva EEEE HH NN EEEE HH HH h nap utols napja AAAA MM GG AAAA MM MM fine mese MMMM MM DD MMMM MM MM m nesio pabaiga AAAA MM DD AAAA MM MM slutten av m neden RRRR MM DD RRRR MM MM koniec miesiaca AAAA MM DD AAAA MM MM fim do m s RRRR MM DD RRRR MM MM koniec mesiaca aaaa mm dd aaaa mm mm fin del mes AAAA MM DD AAAA MM MM slutet p m naden TITT MM A2 FFTT MM MM kpaa Ha Meceua
28. y significant p gt 0 1 AVAILABILITY Cat No Description 261182 BBL Acridine Orange Reagent droppers packaged 50 droppers carton REFERENCES 1 Kronvall G and E Myhre 1977 Differential staining of bacteria in clinical specimens using acridine orange buffered at low pH Acta Pathol Microbiol Scand Sect B 85 249 254 2 Lauer B A L B Reller and S Mirrett 1981 Comparison of acridine orange and Gram stains for detection of microorganisms in cerebrospinal fluid and other clinical specimens J Clin Microbiol 14 201 205 3 McCarthy L R and J E Senne 1980 Evaluation of acridine orange stain for detection of microorganisms in blood cultures J Clin Microbiol 11 281 285 4 Meseguer M L de Rafael M Baquero M Martinez Ferrer and M Martinez Lopez Brea 1984 Acridine orange stain in the early detection of bacteria in blood cultures Eur J Clin Microbiol 3 113 115 amp BD Compte gouttes du r actif l acridine orange Frangais APPLICATION Les compte gouttes du r actif l acridine orange servent la d tection microscopique par fluorescence de microorganismes dans des frottis directs RESUME ET EXPLICATION l acridine orange un colorant fluorochrome tamponn faible pH diff rencie les bact ries color es en orange vif et les tissus humains ou cellules humaines vert p le a jaune 1 Chaque compte gouttes contient suffisamment de r actif pour colorer une lame PRINCIPES
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