Gélose CFC (base)
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1. 504 Mars 2006 Microbiologie des aliments D nombrement des Pseudomonas spp dans les viandes et produits base de viande et les volailles M thode de routine Les mentions port es sur les tiquettes sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2009 02 09 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis Code document BK118 F 2001 04 7 4 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr2. G lose CFC base DOMAINE D UTILISATION La g lose CFC est un milieu s lectif destin aux isolement et d nombrement des Pseudomonas pigment s et non pigment s qui provoquent la contamination des viandes et des produits base de viande ou de volailles au cours de leur conservation par r frig ration Elle peut galement convenir au contr le bact riologique d autres types de produits alimentaires tels que les produits laitiers HISTORIQUE La formule du milieu de base constitue une modification du milieu de King A dans lequel le chlorure de magn sium et le sulfate de potassium favorisent la production de pyocyanine En 1976 le suppl ment s lectif CFC a t mis au point par Mead et Adams afin de permettre le d veloppement s lectif de la majorit des Pseudomonas psychrophiles qui contaminent les produits d origine aviaire PRINCIPES La peptone pancr atique de g latine et la Tryptone constituent les substrats nutritifs n cessaires la multiplication rapide des Pseudomonas La production de pyocyanine pigment bleu non fluorescent soluble dans l eau et le chloroforme est stimul e en pr sence de chlorure de magn sium et de sulfate de potassium La concentration en c phalosporine permet d inhiber la majeure partie des germes contaminants et plus particuli rement les ent robact ries les staphylocoques et les streptocoques La fucidine inhibe le d veloppement des Acinetobacter Moraxella sans intervenir
3. de suppl ment reconstitu BS022 reconstitu chaque flacon de 200 mL de g lose de base reliqu fi e BMO96 Homog n iser parfaitement Transf rer 1 mL du produit analyser et de ses dilutions d cimales dans des bo tes de Petri st riles Couler 15 mL de milieu complet Homog n iser parfaitement Laisser solidifier sur une surface froide __Incuber 25 C pendant 48 et 72 heures si n cessaire NOTA Il est galement possible d ensemencer en surface des bo tes pr coul es ISO 13720 LECTURE Proc der au comptage des bo tes ne contenant pas plus de 300 colonies Les colonies pigment es ou fluorescentes peuvent tre consid r es comme appartenir pr somptivement au genre Pseudomonas Il est n cessaire de confirmer les r sultats par des tests compl mentaires appropri s tels que recherche de l oxydase utilisation a robie des sucres sur g lose de Kligler BK0O34 FORMULE TYPE du milieu complet pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 litre de milieu Peptone pancr atique de g latine 16 0 g OR aa R aA 10 0 g Sulfate de potassium sssessseeseeeeeenressserrrretnntrstttrssennn rnrn nenesene 10 09 Chlorure de magn sium 225 NN AN lors 1 49 Agar agar bact riologique 35arahssmtutnenen nie 12 09 sCEIMIdE 2588 nn e a p ER aa Ea OR RE E 10 0 mg FUCIdIN Osses aaa ne ee a dr 10 0 mg C phalosporine nantes mener dernmeseniaitnss
4. e 50 0 mg pH du milieu pr t l emploi 25 C 7 2 0 2 2 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr CONTR LE QUALITE Milieu d shydrat de base poudre blanc cr me fluide et homog ne Milieu pr par complet g lose blanch tre R ponse culturale typique sur milieu complet apr s 72 heures d incubation 25 C Croissance Pseudomonas aeruginosa CIP 82 118 PR gt 50 Pseudomonas putida ATCC 12633 Pa gt 50 Pseudomonas fluorescens ATCC 13525 Pr gt 50 Staphylococcus aureus ATCC 25923 inhib e score 0 STOCKAGE CONSERVATION Milieu de base d shydrat 2 30 C La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu de base pr par en flacons 6 mois 2 8 titre indicatif Milieu complet pr par en bo tes avec suppl ment 8 jours 2 8C l abri de la lumi re titre indicatif Milieu de base pr t liqu fier en flacons Suppl ment s lectif pour g lose CFC Stocker entre 2 et 8 C l abri de la lumi re La date de p remption est mentionn e sur l tiquette PRESENTATION Code Milieu de base pr t liqu fier sans c trimide ni fucidine ni c phalosporine en flacons Pack de 10 flacons de 200 mL BM09608 Milieu de base d shydrat sans c
5. sur la croissance des Pseudomonas Les levures contaminantes sont inhib es par le c trimide La c phalosporine la fucidine et le c trimide sont apport s extemporan ment dans le milieu PREPARATION Mettre en suspension 49 4 g de milieu d shydrat de base BK118 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e Porter lentement le milieu bullition sous agitation constante et ly maintenir durant le temps n cessaire sa dissolution R partir en flacons raison de 100 mL par flacon __ St riliser l autoclave 121 C pendant 15 minutes NOTA 1 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr Une liqu faction partielle de l agar entra nera in vitablement une alt ration significative de la consistance du gel du milieu solidifi apr s st rilisation et refroidissement MODE D EMPLOI Avec le milieu de base pr t liqu fier BMO96 ou bien si le milieu est pr par l avance partir du milieu d shydrat faire fondre la g lose pendant le minimum de temps n cessaire sa reliqu faction totale __Refroidir et maintenir 44 47 C Ajouter st rilement 1 mL de suppl ment s lectif CFC reconstitu BS022 dans chaque flacon de 100 mL ainsi pr par partir du milieu de base d shydrat ou bien 2 mL
6. trimide ni fucidine ni c phalosporine Flacon de 500 g BK118HA Suppl ment s lectif pour g lose CFC Coffret de 10 flacons qsp 500 mL BS02208 3 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr SUPPORT PHOTO R f rence produit BK118HA BS02208 ou BM09608 BS02208 Utilisation L isolement et le d nombrement des Pseudomonas Pseudomonas aeruginosa G lose CFC R f BM09608 BS02208 Incubation 48 heures 25 C Caract ristiques colonies jaunes verd tres parfois fluorescentes et souvent avec une coloration ayant tendance diffuser dans la g lose REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES BARNES E M and THORNLEY M 1966 The spoilage flora of eviscerated chickens stored at different temperatures Journal of Food Technology 1 113 119 MEAD G C and ADAMS B W 1977 A selective medium for the rapid isolation of pseudomonads associated with poultry meat spoilage British Poultry Science 18 661 670 ISO 13720 D cembre 1995 Viandes et produits base de viande D nombrement des Pseudomonas spp XP CEN ISO TS 11133 2 V 08 104 2 Janvier 2004 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture NF V 04
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