BD Neomycin Agar with 5% Sheep Blood
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1. du test Ensemencer l chantillon sans attendre d s son arriv e au laboratoire sur une bo te de P tri de BD Neomycin Agar with 5 Sheep Blood en roulant fermement l couvillon sur un tiers de la surface de la g lose Strier le reste de la bo te l aide d un ensemenceur anse st rilis afin d obtenir des colonies isol es Sans st riliser nouveau l anse piquer la g lose deux ou trois fois dans la zone pr sentant l ensemencement le plus important Cette op ration provoque une croissance de sous surface qui pr sente les r actions h molytiques les plus fiables Ensemencer galement une bo te de BD Columbia Agar with 5 Sheep Blood ou de BD Trypticase Soy Agar Il with 5 Sheep Blood afin de mettre en vidence les microorganismes d importance clinique qui risquent d tre inhib s sur le milieu s lectif Incuber les bo tes ensemenc es 35 2 C dans une atmosph re a robie compl ment e en dioxyde de carbone Examiner les bo tes au bout de 18 24 h et 48 h si n cessaire R sultats Apr s 18 48 h d incubation les streptocoques du groupe A et du groupe B ont form des colonies de petite taille 1 2 mm translucides ou opaques dont la couleur varie du blanc au gris et qui pr sentent une zone de b ta h molyse en p riph rie Ces colonies sont g n ralement de taille plus r duite que le contr le non s lectif Si des streptocoques b ta h molytiques sont pr sents les zones ayant t ensemenc es2. par piq re pr sentent une b ta h molyse plus vidente que celle visible en p riph rie des colonies PA 254444 02 ve Les Neisseria spp les b tonnets Gram n gatifs et la plupart des staphylocoques b ta h molytiques sont inhib s M me si les streptocoques des deux groupes A et B se d veloppent dans ce milieu il est possible de les diff rencier et d identifier leur appartenance l un ou l autre de ces groupes au moyen du test de sensibilit la bacitracine 0 04 unit effectu l aide de BD Taxo A discs Pour plus d informations consulter le Mode d emploi correspondant Le recours l utilisation d une trousse de groupage des streptocoques ou un syst me d identification biochimique constituent des m thodes d identification du groupe de Lancefield plus fiables CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCES ET LIMITES DE LA PROCEDURE La BD Neomycin Agar with 5 Sheep Blood est utilis e pour l isolement s lectif des streptocoques des groupes A et B M me si ce milieu est s lectif et inhibe g n ralement les b tonnets Gram n gatifs d autres microorganismes et d autres streptocoques p ex Streptococcus mitis peuvent s y d velopper et produire parfois des colonies b ta h molytiques Des tests biochimiques ou immunologiques doivent tre effectu s pour l identification finale des isolats La BD Neomycin Agar with 5 Sheep Blood est un milieu moins s lectif que la BD Group A Selective Strep Agar ssA en ce qui co
3. NULL MODE D EMPLOI RJ B D MILIEUX EN BOITES DE C PETRI PRETS A L EMPLOI PA 254444 02 Rev Juin 2003 BD Neomycin Agar with 5 Sheep Blood APPLICATION La BD Neomycin Agar with 5 Sheep Blood g lose n omycine avec 5 de sang de mouton est un milieu s lectif utilis pour l isolement des streptocoques des groupes A et B PRINCIPES ET EXPLICATION DE LA METHODE M thode microbiologique Les streptocoques du groupe A de Lancefield S pyogenes et les streptocoques du groupe B S agalactiae sont des bact ries Gram positives b ta h molytiques importantes sur le plan m dical Blanchette et Lawrence ont ajout de la n omycine une g lose au sang de mouton afin de favoriser la mise en vidence des streptocoques du groupe A de Lancefield et ceux du groupe B en emp chant la croissance des autres microorganismes h molytiques La plupart des staphylocoques les Enterobacteriaceae Neisseria Listeria et certaines Pseudomonas spp sont inhib s Les streptocoques autres que ceux appartenant aux groupes A et B peuvent galement se d velopper dans ce milieu La g lose n omycine additionn e de 5 de sang de mouton contient une Trypticase Soy Agar II TSA II qui sert de base pour le milieu Le sang de mouton d fibrin fournit l enrichissement n cessaire la croissance des microorganismes exigeants L incorporation de 30 ug mL de n omycine dans ce milieu provoque l limination de la flore normale ce qui facilite la mise
4. ROLE DE QUALITE PAR L UTILISATEUR Ensemencer des chantillons repr sentatifs avec les souches suivantes pour plus de d tails voir le document MODE D EMPLOI GENERAL Incuber les bo tes 35 2 C dans une atmosph re a robie compl ment e en dioxyde de carbone Examiner les bo tes de P tri au bout de 18 24 h afin de contr ler la b ta h molyse la croissance l inhibition la taille des colonies et les r actions h molytiques Souches Croissance Groupe A petite taille avec b ta h molyse Groupe B moyenne avec b ta h molyse Escherichia coli ATCC 25922 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inhibition partielle compl te b ta h molyse possible Sans ensemencement Rouge couleur sang M THODE Mat riaux fournis BD Neomycin Agar with 5 Sheep Blood bo tes de P tri Stacker de 90 mm Produits contr l s microbiologiquement Mat riaux non fournis Milieux de culture auxiliaires r actifs et mat riel de laboratoire requis Types d chantillons Il est possible d utiliser ce milieu avec tous les types d chantillons pr lev s sur des patients susceptibles d tre infect s avec des streptocoques du groupe A Streptococcus pyogenes et du groupe B Sfreptococcus agalactiae Les chantillons valables comprennent mais pas exclusivement les couvillons de gorge vaginaux ou pr lev s sur des nouveau n s voir aussi CARACTERISTIQUES DES PERFORMANCES ET LIMITES DE LA PROCEDURE Mode op ratoire
5. en vidence des streptocoques des groupes A et B REACTIFS BD Neomycin Agar with 5 Sheep Blood Formule par litre d eau purifi e Digestion pancr atique de 14 5 g cas ine Digestion papa que de semoule 5 0 de soja Chlorure de sodium 5 0 G lose 14 0 Facteurs de croissance 1 5 N omycine 0 03 Sang de mouton d fibrin 5 pH de 7 3 0 2 Ajust e et ou compl ment e en fonction des crit res de performances impos s PRECAUTIONS usage professionnel uniquement Ne pas utiliser de bo te de P tri pr sentant des signes de contamination microbienne d coloration dessiccation ou fissure ou d autres signes de d t rioration Consulter le document MODE D EMPLOI GENERAL pour plus d informations concernant les proc dures de manipulation aseptique les risques biologiques et l limination des produits usag s STOCKAGE ET DUREE DE CONSERVATION D s r ception conserver les bo tes de P tri dans l obscurit entre 2 et 8 C dans leur emballage d origine jusqu au moment de leur utilisation Ne pas les congeler ni les surchauffer Les bo tes peuvent tre ensemenc es jusqu la date de p remption indiqu e voir l tiquette de l emballage et incub es pendant les dur es recommand es PA 254444 02 Des bo tes provenant d une pile ouverte de 10 bo tes sont utilisables pour une semaine lorsqu elles sont conserv es entre 2 et 8 C dans un endroit propre CONT
6. ncerne l inhibition de la flore normalement pr sente dans la gorge Il est conseill d utiliser le milieu ssA lorsque seule la pr sence de streptocoques du groupe A est pr sum e REFERENCES 1 Blanchette L P and C Lawrence 1967 Group A streptococci screening with neomycin blood agar Am J Clin Pathol 48 411 443 2 Facklam R R and J A Washington Il 1991 Streptococcus and related catalase negative gram positive cocci In A Balows W J Hausler Jr K L Herrmann H D Isenberg and H J Shadomy ed Manual of clinical microbiology 5th ed American Society for Microbiology Washington D C CONDITIONNEMENT BD Neomycin Agar with 5 Sheep Blood N r f 254444 Milieux en bo tes de P tri pr ts l emploi 20 unit s par carton INFORMATIONS COMPLEMENTAIRES Pour plus d informations contacter le repr sentant local de BD BD Diagnostic Systems Tullastrasse 8 12 D 69126 Heidelberg Germany Phone 49 62 21 30 50 Fax 49 62 21 30 52 16 Reception Germany europe bd com BD Diagnostic Systems Europe Becton Dickinson France SA 11 rue Aristide Berg s 38800 Le Pont de Claix France Tel 33 476 68 3636 Fax 33 476 68 3292 http www bd com BD BD logo Trypticase Stacker Taxo and ssA are trademarks of Becton Dickinson and Company ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection 2003 Becton Dickinson and Company PA 254444 02 357
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