SOX-11 (MRQ-58) - Menarini Diagnostics
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1. Cet anticorps colore des tissus sains comme indiqu dans la documentation publi e tude De Tissus Pathologiques Total Cas des Cas Tissu Positifs Testes Notes Lymphome NK T 0 6 Lymphome folliculaire 0 4 Lymphome lymphocytaire a 0 4 petits lymphocytes Lymphome de la zone 0 3 marginale Lymphome anaplasique 0 3 grandes cellules Leuc mie tricholeucocytes 0 2 Advanced Solutions for Advanced Pathology MEN Template 0 2 tude De Tissus Sains continu tude De Tissus Pathologiques continu Total Total Cas des Cas Cas des Cas Tissu Positifs Testes Notes Tissu Positifs Testes Notes Parathyroide 0 1 Carcinome colorectal 0 21 Pituitaire 0 1 Carcinome canalaire invasif 1 23 Testicule 0 1 du sein Thyro de 0 1 Lymphome du manteau 6 6 Sein 0 1 o A R i Cet anticorps colore les tumeurs comme indiqu dans la documentation Un cas de carcinome canalaire infiltrant du sein est positif pour le SOX 11 Amygdale 0 1 Thymus 0 1 Moelle osseuse 0 1 D Poumon 0 1 epannage Coeur 0 1 sophage 0 1 1 Si le contr le positif pr sente une coloration plus faible que celle ean 3 i attendue v rifier les autres contr les positifs test s pendant le m me cycle de coloration pour d terminer si cela est d lanticorps Intestin gr le 0 1 PORN Si ee z primaire ou l un des r ac2. foie cerveau sein rein en fonction du type de technique d immunocoloration utilis e Comme avec tout test immunohistochimique un r sultat n gatif signifie que lantigene na pas t d tect et non pas que lantig ne tait absent des cellules ou du tissu test s Limitations Sp cifiques Les produits base d anticorps pr dilu s sont optimis s pour tre pr ts l emploi En raison de la possibilit de variation au niveau de la fixation et du traitement des tissus il peut tre n cessaire d augmenter ou de diminuer la dur e d incubation de lanticorps primaire en fonction des chantillons individuels En association avec les syst mes de d tection et les accessoires lanticorps d tecte le ou les antig nes qui r sistent aux proc dures de routine comme la fixation au formol le traitement et la coupe des tissus Les utilisateurs qui s cartent des proc dures de test recommand es demeurent comme ils le seraient dans nimporte quelle situation responsables de l interpr tation et de la validation des r sultats des patients R sum Des R sultats Attendus Se reporter aux tableaux de r activit suivants Etude De Tissus Sains Total Cas des Cas Tissu Positifs Test s Notes Cerveau 0 1 Cortex adr nal 0 1 Ovaire 0 1 Pancr as 0 1 A MENARINI diagnostics MENARINI SOX 11 MRQ 58 Mouse Monoclonal Antibody mPath
3. limmunohistochimie est une proc dure en plusieurs tapes n cessitant une formation sp cialis e pour le choix des r actifs appropri s la s lection des tissus la fixation le traitement la pr paration des lames d immunohistochimie et l interpr tation des r sultats de la coloration R serv un usage en laboratoire Pour utilisation en diagnostic in vitro 4 La coloration du tissu d pend de la manipulation et du traitement de ce tissu avant coloration Les fixation cong lation d cong lation lavage s chage chauffage ou coupe incorrects ou une contamination par d autres tissus ou liquides peuvent entra ner des art facts un pi geage de lanticorps ou des faux n gatifs Des r sultats incoh rents peuvent tre la cons quence de variations dans les m thodes de fixation et d inclusion ainsi que d irr gularit s inh rentes au tissu 5 Une contre coloration incompl te ou excessive peut compromettre l interpr tation correcte des r sultats 6 L interpr tation clinique de toute coloration positive ou de son absence doit tre valu e dans le contexte de l historique clinique de la morphologie d autres crit res histopathologiques ainsi que d autres tests diagnostiques Cet anticorps est con u pour tre utilis le cas ch ant dans une gamme d anticorps La r alisation de la coloration rel ve de la responsabilit d un pathologiste qualifi devant tre familiaris avec les anticorps les r actifs
4. conditions accepter la responsabilit de l interpr tation des r sultats des patients Ce produit nest pas concu pour tre utilis en cytom trie en flux Les r actifs peuvent pr senter des r actions inattendues sur des tissus qui nont pas t test s auparavant En raison de la variabilit biologique de l expression antig nique dans les n oplasmes ou dautres tissus pathologiques la possibilit d obtenir des r actions inattendues sur des groupes de tissus d j test s ne peut cependant pas tre totalement limin e Contacter le service apr s vente de A Menarini Diagnostics en documentant les r actions inattendues soupconn es Les tissus provenant de personnes infect es par le virus de l h patite B et contenant l antig ne de surface du virus de l h patite B HBsAg peuvent pr senter une coloration non sp cifique avec la peroxydase de raifort Lorsqu ils sont utilis s au cours des tapes de blocage les s rums normaux ayant la m me origine animale que les antis rums secondaires peuvent donner des faux n gatifs ou des faux positifs cause de l effet des auto anticorps ou des anticorps naturels Des faux positifs peuvent appara tre en raison de liaisons non immunologiques des prot ines ou des produits de r action du substrat Ils peuvent galement tre provoqu s par une activit pseudoperoxydasique rythrocytes une activit de la peroxydase endog ne cytochrome C ou de la biotine endog ne par exemple
5. distinguer le MCL de potentiels Advanced Solutions for Advanced Pathology analogues morphologiques tels que la leuc mie lymphoide chronique Lymphome petites cellules CLL SLL Le lymphome folliculaire FL et le lymphome de la zone marginale MZL par coloration immunohistochimique IHC de CD5 CD23 et CD101 Le MCL et le CLL expriment tous les deux CD5 mais en g n ral le MCL contrairement au CLL nexprime pas CD23 par l IHC Le FL nexprime ni CD5 ni CD23 mais exprime CD10 la plupart du temps tandis que le MZL est typiquement n gatif pour les 3 antig nes Par cons quent le MCL se caract rise par une surexpression de la cyclin D1 m me si environ 5 10 de MCL nexpriment pas la cyclin D1 et peuvent alors faire lobjet d un diagnostic erron en raison d une trop grande confiance accord e l IHC de la cyclin D1 La reconnaissance du MCL cyclin D1 n gatif est difficile car il peut ressembler morphologiquement et ph notypiquement d autres lymphomes petites cellules B4 Malgr le caract re limit des informations cliniques concernant le MCL cyclin D1 n gatif les donn es publi es indiquent que le comportement des variantes est tout aussi agressif que celui du MCL conventionnel D un autre c t les patients atteints de lymphomes cellules B imitant le MCL b n ficient d une issue plus favorable que ceux atteints d un v ritable MCL Par cons quent il est important de trouver des marqueurs fiables p
6. un marqueur du MCL y compris le MCL cyclin D1 n gatif avec morphologie typique Leurs tudes indiquent que l IHC du SOX 11 est int ressante dans la d termination des caract ristiques pathologiques du DLBCL CD5 Un usage de routine de lanti SOX 11 pour les cas suspect s de DLBCL CD5 pourrait faciliter l identification de cas suppl mentaires de MCL blastique cyclin D1 n gatif En r sum l expression nucl aire de la prot ine de SOX 11 est fortement associ e avec le MCL cyclin D1 la fois positif et n gatif La d tection de ce facteur de transcription est un marqueur biologique utile pour l identification des v ritables MCL cyclin D1 n gatifs LIHC du SOX 11 est int ressante dans la d termination des caract ristiques pathologiques du DLBCL CD5 Un usage de routine de lanti SOX 11 pour les cas suspect s de DLBCL CD5 pourrait faciliter l identification de cas suppl mentaires de MCL blastique cyclin D1 n gatif SOX 11 peut aussi tre d tect dans certains BL LBL et T PLL bien que les diff rences morphologiques et ph notypiques de ces tumeurs permettent de reconnaitre facilement les cas de MCL cyclin D1 n gatif Principes Et Proc dures Lanticorps primaire en question peut tre utilis comme anticorps primaire pour la coloration immunohistochimique des coupes de tissus fix s dans du formol et inclus en paraffine En g n ral la coloration immunohistochimique utilis e conjointement avec un syst me de d tect
7. 1 14 8 Weigle B et al Highly specific overexpression of the transcription factor SOX 11 in human malignant gliomas Oncol Rep 2005 13 139 44 9 Zeng W et al Cyclin D1 negative blastoid mantle cell lymphoma identified by SOX 11 expression Am J Surg Pathol 2012 36 214 219 Advanced Solutions for Advanced Pathology MEN Template 0 2 mPath E 2 g A MENARINI diagnostics
8. SOX 11 MRQ 58 Mouse Monoclonal Antibody Identification du Produit R f cat Description 44795 SOX 11 0 1 M MRQ 58 44796 SOX 11 1 M MRQ 58 44388 SOX 11 RTU M MRQ 58 D finitions Des Symboles E pr t l emploi concentr E ascite E s rum El surnageant 2 plage de dilution du produit concentr num ro du document distribu par Application Cet anticorps est concu pour tre utilis en diagnostic in vitro DIV Lanticorps SOX 11 est con u l attention des laboratoires qualifi s afin de d tecter de mani re qualitative par microscopie optique la pr sence d antig nes associ s dans des coupes de tissus fix s au formol et inclus en paraffine en utilisant des techniques d analyses IHC immunohistochimiques Lemploi de cet anticorps est indiqu apr s des diagnostics cliniques diff rentiels pour faciliter l identification et la diff renciation des lymphomes cellules du manteau dans le contexte de gammes danticorps des ant c dents cliniques du patient et d autres tests de diagnostic valu s par un pathologiste qualifi R sum Et Explication Le lymphome cellules du manteau MCL repr sente 5 10 des n oplasmes cellules B matures et est une maladie agressive g n tiquement caract ris e par une surexpression de la cyclin D1 CCND1 due la translocation sp cifique t 11 14 q13 q32 Il est n cessaire de
9. e positifs et n gatifs avant d interpr ter les r sultats Tissu De Contr le Positif Le contr le positif color doit tre examin en premier pour v rifier que tous les r actifs fonctionnent correctement La pr sence d un produit de r action color de mani re appropri e dans les cellules cibles indique une r activit positive Consulter la notice du syst me de d tection utilis pour conna tre les r actions color es attendues Selon la dur e d incubation et la puissance de l h matoxyline utilis e une contre coloration donnera une coloration bleu p le bleu fonc des noyaux cellulaires Une contre coloration incompl te ou excessive peut compromettre l interpr tation correcte des r sultats Si le tissu de contr le positif ne pr sente pas de coloration positive appropri e les r sultats des pr l vements des patients sont alors consid r s comme non valides Tissu De Contr le N gatif Le tissu de contr le n gatif doit tre examin apr s le tissu de contr le positif afin de v rifier le marquage sp cifique de l antig ne cible par lanticorps primaire L absence de coloration sp cifique dans le tissu de contr le n gatif confirme l absence de r activit crois e de lanticorps avec les cellules ou les composants cellulaires En cas de coloration sp cifique dans le tissu de contr le n gatif les r sultats obtenus avec les chantillons de patients sont consid r s comme non valides Toute coloration n
10. ermettant l identification du MCL cyclin D1 n gatif en pratique clinique SOX 11 le g ne de la SRY r gion Y d terminatrice du sexe box 11 un facteur de transcription est normalement exprim dans le syst me nerveux central humain en d veloppement le m dulloblastome et le gliome Dans une s rie d tudes4 l expression du SOX 11 a t tudi e dans 54 cas de MCL cyclin D1 positif et 209 autres n oplasmes lymphoides Il est int ressant de noter que presque tous les cas de MCL taient fortement positifs pour lanti SOX 11 50 54 93 avec un sch ma nucl aire La coloration tait intense et relativement homog ne dans la plupart des cellules En comparaison avec la coloration de lanti cyclin D1 la r activit d anti SOX 11 tait plus forte et plus homog ne 5 leuc mies lymphomes lymphoblasiques cellules T et B ont montr une forte expression nucl aire de SOX 11 Un cas de lymphome de hodgkin deux des huit BL et deux des trois leuc mies MENARINI M mPath A Menarini Diagnostics S r l Via Sette Santi 3 50131 Firenze Italy MEN38221000 FR Rev 0 0 td cell Marque Corporation 6600 Sierra College Blvd Rocklin California 95677 USA Lee EMERGO EUROPE Molenstraat 15 2513 BH The Hague NL CE A MENARINI diagnostics SOX 11 MRQ 58 Mouse Monoclonal Antibody prolymphocytaires cellules T taient galement positifs L expression de la prot ine SOX 11 a
11. globulines pr dilu es pour ce produit est comprise entre 15 35 ug ml Lanticorps primaire concentr en question contient un r actif pr t a lemploi Les formes pr dilu e et concentr e de cet anticorps sont dilu es dans Tampon Tris pH 7 3 7 7 avec 1 de BSA et lt O 1 dazoture de sodium La plage de concentration en immunoglobulines concentr es pour ce produit est comprise entre 400 900 ug ml La plage de dilution de travail recommand e pour le concentr s tend de 1 25 1 100 elle est indiqu e sur l tiquette du produit Isotype IgG Reconstitution M lange Dilution Titrage Lanticorps pr dilu est pr t l emploi et optimis pour la coloration Aucun m lange reconstitution dilution ou titrage ne sont n cessaires Lanticorps concentr est optimis pour tre dilu dans les limites de la plage de dilution Lutilisateur doit valider la dilution de travail du produit concentr Des diff rences dans les proc dures techniques et de traitement du tissu au sein du laboratoire peuvent se traduire par une variabilit importante des r sultats et n cessiter de ce fait l utilisation r guli re de contr les Consulter le paragraphe Proc dures de contr le qualit Mat riel Et R actifs N cessaires Mais Non Fournis Les r actifs et le mat riel suivants peuvent tre requis pour la coloration mais ne sont pas fournis avec lanticorps primaire Tissu de contr le positif et n gatif Lames de microsco
12. ion streptavidine biotine permet de visualiser les antig nes par le biais de l application s quentielle d un anticorps sp cifique anticorps primaire dirig contre lantigene d un anticorps secondaire anticorps de liaison dirig contre lanticorps primaire d un complexe d enzymes et d un substrat chromog ne avec des tapes de lavage interm diaires Un syst me de d tection base de polym res et sans biotine peut tre utilis le cas ch ant Lactivation enzymatique du chromog ne g n re un produit de r action visible au niveau du site antig nique L chantillon peut ensuite tre contre color et recouvert d une lamelle Les r sultats sont interpr t s au moyen d un microscope optique et contribuent poser un Advanced Solutions for Advanced Pathology MEN Template 0 2 Path diagnostic diff rentiel des processus physiopathologiques qui peuvent tre associ s ou non un antig ne sp cifique Les produits pr dilu s sont dilu s de fa on optimale pour pouvoir tre utilis s avec un large ventail de kits de d tection propos s par d autres fabricants Mat riel Et M thodes Consulter l tiquette du produit pour les informations suivantes particuli res au lot 1 Concentration d immunoglobulines anticorps 2 Informations d taill es concernant l origine R actifs Fournis Lanticorps primaire pr dilu en question contient un r actif pr t l emploi La plage de concentration en immuno
13. ivants peuvent constituer un tissu de contr le positif pour la s rie d anticorps primaire en question Tissu De Contr le Positif Tissu Visualisation Lymphome du manteau Nucl aire Amygdale normale Nucl aire Des tissus de contr le positifs connus doivent tre utilis s uniquement pour v rifier que les performances des tissus trait s et des r actifs de test sont correctes et non comme une aide la formulation d un diagnostic sp cifique sur des chantillons de patients Si les tissus de contr le positifs ne pr sentent pas de coloration positive appropri e les r sultats des pr l vements des patients doivent alors tre consid r s comme non valides Tissu De Contr le N gatif Il est possible d utiliser le m me tissu pour le tissu de contr le positif que pour le tissu de contr le n gatif Les diff rents types de cellules pr sents dans la plupart des coupes de tissus offrent des sites de contr le n gatif internes mais ceci doit tre v rifi par l utilisateur Les composants ne pr sentant pas de coloration doivent d montrer l absence de coloration sp cifique et fournir une indication sur la coloration de fond non sp cifique En cas de coloration sp cifique dans les sites du tissu de contr le n gatif les r sultats obtenus avec les chantillons de patients doivent tre consid r s comme non valides Diff rences Inexpliqu es Les diff rences inexpliqu es dans les contr les doive
14. les gammes diagnostiques et les m thodes de coloration utilis s La coloration doit tre r alis e dans un laboratoire autoris et accr dit sous le contr le d un pathologiste responsable de lexamen des lames color es et de la pertinence des contr les positif et n gatif 7 Des anticorps et r actifs pr ts l emploi sont fournis la dilution optimale pour une utilisation conforme aux instructions Tout cart par rapport aux proc dures de test recommand es peut invalider les r sultats attendus Des contr les appropri s doivent tre utilis s et document s Les utilisateurs doivent quelles que soient les conditions accepter la responsabilit de l interpr tation des r sultats des patients 8 Des produits sont fournis sous forme concentr e afin que l utilisateur puisse ensuite les diluer et les utiliser de facon optimale condition que ce dernier tablisse des techniques de validation appropri es et sy conforme Lutilisateur doit valider l emploi d ventuels diluants autres que ceux recommand s dans la pr sente Une fois que l aptitude l emploi de l anticorps primaire a t valid e tout cart par rapport aux proc dures de test recommand es peut invalider les r sultats attendus Des contr les appropri s doivent tre utilis s et document s Les utilisateurs doivent quelles que soient les Advanced Solutions for Advanced Pathology MEN Template 0 2 10 11 12 13 14 mPath
15. nageant du s rum bovin Les produits contenant du s rum de veau foetal et ceux contenant de la s rum albumine bovine sont achet s des fournisseurs commerciaux Les certificats d origine pour les produits dorigine animale utilis s dans ces produits sont conserv s par Cell Marque Les certificats attestent que les produits d origine bovine proviennent de pays o le risque li lenc phalopathie spongiforme bovine BSE est minime et indiquent que les tats Unis et le Canada sont les pays de provenance de ces produits 11 Comme pour tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre mises en place Mode D Emploi Proc dure Etape Par Etape Protocoles de coloration recommand s pour lanticorps primaire en question Coloration Manuelle 1 D paraffiner r hydrater et restaurer les pitopes la m thode privil gi e consiste utiliser des techniques de restauration antig nique par la chaleur HIER Cette m thode privil gi e permet de d paraffiner de r hydrater et de restaurer les pitopes simultan ment Enfin rincer 5 reprises avec de l eau distill e ou d sionis e 2 En cas d utilisation d un syst me de d tection de type HRP placer les lames dans un r actif de blocage du peroxyde d hydrog ne pendant 10 minutes rincer En cas d utilisation d un syst me de d tection de type AP omettre cette tape 3 Appliquer lanticorps et incuber pendant 10 30 minute
16. nt tre imm diatement transmises au service apr s vente de A Menarini Diagnostics Si les r sultats du contr le qualit ne correspondent pas aux attentes les r sultats des patients ne sont pas valides Consulter Advanced Solutions for Advanced Pathology MEN Template 0 2 mPath le paragraphe R solution des probl mes de cette notice Identifier et rem dier au probl me puis refaire la proc dure compl te sur les chantillons des patients R actif De Contr le N gatif Un r actif de contr le n gatif doit tre test pour chaque chantillon afin de faciliter l interpr tation des r sultats Un r actif de contr le n gatif est utilis la place de lanticorps primaire pour valuer la coloration non sp cifique La lame doit tre trait e avec un r actif de contr le n gatif correspondant l esp ce h te de lanticorps primaire et ayant de pr f rence une concentration en IgG identique La dur e d incubation pour le r actif de contr le n gatif doit correspondre celle de lanticorps primaire Interpr tation Des R sultats La proc dure d immunocoloration provoque la pr cipitation d un produit de r action color au niveau des sites antig niques localis s par l anticorps primaire Consulter la notice du syst me de d tection appropri pour conna tre les r actions color es attendues Un pathologiste qualifi expert en proc dures immunohistochimiques doit valuer les tissus de contr l
17. on sp cifique si pr sente aura un aspect diffus Une coloration claire sporadique du tissu conjonctif peut galement tre observ e dans les coupes provenant de tissus qui ne sont pas fix s de fa on optimale Des cellules intactes doivent tre utilis es pour interpr ter les r sultats de la coloration Les cellules n crotiques ou d g n r es pr sentent une coloration non sp cifique Tissus De Patients Les chantillons de patients doivent tre examin s en dernier L intensit de la coloration positive doit tre valu e en tenant compte de la coloration de fond du r actif de contr le n gatif Comme avec tout A MENARINI diagnostics MENARINI SOX 11 MRQ 58 Mouse Monoclonal Antibody test immunohistochimique un r sultat n gatif signifie que lantigene en question na pas t d tect et non pas que lantig ne est absent des cellules ou du tissu test s Une gamme d anticorps peut faciliter l identification de faux n gatifs voir le paragraphe R sum des r sultats attendus La morphologie de chaque chantillon de tissu doit galement tre examin e l aide d une coupe color e l h matoxyline et l osine lors de l interpr tation des r sultats immunohistochimiques Les r sultats morphologiques et les donn es cliniques pertinentes du patient doivent tre interpr t s par un pathologiste qualifi Limitations 1 Ce r actif est r serv un usage professionnel dans la mesure o
18. pe charg es positivement Etuve capable de maintenir une temp rature de 58 60 C 5 C AWN Cuves ou bains de coloration MENARINI v A MENARINI diagnostics SOX 11 MRQ 58 Mouse Monoclonal Antibody 5 Minuteur 6 Xyl ne ou substitut du xyl ne 7 Ethanol ou alcool 8 Eau d ionis e ou distillee 9 Autocuiseur lectrique pour l tape de pr traitement des tissus 10 Syst me de d tection et chromog ne 11 Solutions de lavage 12 H matoxyline ou un autre contre colorant 13 Diluants pour anticorps 14 R actif de blocage du peroxyde utiliser avec de la HRP 15 R actif de blocage de l avidine 16 R actif de contr le n gatif 17 Milieu de montage 18 Lamelles de montage 19 Microscope optique 40 400x Conservation Et Manipulation Conserver entre 2 et 8 C Ne pas congeler Pour assurer une distribution correcte du r actif et la stabilit de lanticorps remettre le capuchon sur le flacon apr s chaque cycle et ranger imm diatement celui ci en position verticale dans le r frig rateur Chaque r actif base d anticorps comporte une date de p remption Lorsqu il est correctement conserv le r actif reste stable jusqu la date indiqu e sur l tiquette Ne pas utiliser le r actif au del de la date de p remption pour la m thode de conservation prescrite Aucun signe vident n indique l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doi
19. rmol dont le pH n est pas neutre formol Placenta 0 1 neutre tamponn L paisseur du tissu peut galement y contribuer Pour conna tre les mesures correctives prendre consulter le paragraphe Proc dure tape par tape ou contacter le service apr s vente de A Menarini Diagnostics Bibliographie 1 Salaverria et al Mantle cell lymphoma from pathology and molecular pathogenesis to new therapeutic perspectives Haematologica 2006 91 11 6 Fu K et al Cyclin D1 negative mantle cell lymphoma a clinicopathologic study based on gene expression profiling Blood 2005 106 4315 21 Katzenberger T et al Delineation of distinct tumour profiles in mantle cell lymphoma by detailed cytogenetic interphase genetic and morphological analysis Br J Haematol 2008 142 538 50 Mozos A et al SOX 11 expression is highly specific for mantle cell lymphoma and identifies the cyclin D1 negative subtype Haematologica 2009 94 1555 1562 A MENARINI diagnostics MENARINI SOX 11 MRQ 58 Mouse Monoclonal Antibody 5 Wlodarska et al Translocations targeting CCND2 CCND3 and MYCN do occur in t 11 14 negative mantle cell lymphomas Blood 2008 111 5683 90 6 Hargrave M et al Expression of the SOX 11 gene in mouse embryos suggests roles in neuronal maturation and epithelio mesenchymal induction Dev Dyn 1997 210 79 86 7 Lee CJ et al Differential expression of SOX4 and SOX 11 in medulloblastoma J Neurooncol 2002 57 20
20. s rincer A MENARINI diagnostics MENARINI SOX 11 MRQ 58 Mouse Monoclonal Antibody 4 Avec un syst me de d tection de polym re en 2 tapes appliquer lamplificateur conform ment aux instructions du fabricant 5 Appliquer le r actif de d tection en respectant le nombre de minutes d application recommand par le fabricant puis rincer 6 Appliquer une quantit suffisante de chromog ne et incuber pendant 1 10 minutes rincer 7 D shydrater et recouvrir d une lamelle Proc dures De Contr le Qualit Tissu De Contr le Positif Un tissu de contr le positif doit tre test avec chaque proc dure de coloration r alis e Ce tissu peut contenir des composants cellulaires o tissulaires la fois positifs et n gatifs et peut servir la fois de tissu de contr le positif et n gatif Les tissus de contr le doivent tre de r cents pr l vements d autopsie de biopsie ou de chirurgie pr par s ou fix s d s que possible d une mani re identique aux tissus de patients L utilisation d une coupe de tissu fix ou trait diff remment de l chantillon du patient servira fournir un contr le pour tous les r actifs et toutes les tapes de la m thode l exception de la fixation et du traitement des tissus Un tissu pr sentant une faible coloration positive conviendra mieux pour assurer un contr le qualit optimal et pour d tecter de faibles niveaux de d t rioration des r actifs Les tissus su
21. s de patients et tout le mat riel entrant en contact avec ceux ci doivent tre manipul s comme des substances biologiques dangereuses et tre limin s en prenant les pr cautions qui s imposent Ne jamais pipeter la bouche 4 viter toute contamination microbienne des r actifs car cela pourrait entra ner des r sultats erron s 5 Lutilisateur doit valider les dur es et temp ratures d incubation Les r actifs pr dilu s pr ts l emploi sont dilu s de fa on optimale et toute dilution suppl mentaire peut entra ner une perte de coloration de l antig ne 7 Les r actifs concentr s peuvent tre dilu s de facon optimale en fonction de la validation de l utilisateur L utilisateur doit galement valider tout diluant utilis qui nest pas sp cifiquement recommand dans la pr sente afin den tablir la compatibilit et l effet sur la stabilit 8 Lorsqu il est utilis selon les instructions ce produit nest pas class comme substance dangereuse L agent de conservation du r actif pr sente une concentration inf rieure O 1 dazoture de sodium et ne r pond pas aux crit res du r glement europ en REACH Enregistrement valuation et autorisation des produits chimiques en mati re de substances dangereuses pour la concentration indiqu e 9 Lutilisateur doit valider toute condition de conservation autre que celle sp cifi e dans la notice 10 Le diluant peut contenir de la s rum albumine bovine et le sur
22. t examin e par immunohistochimie pour les 12 cas de MCL cyclin D1 n gatif et tous ont montr une forte coloration nucl aire positive en comparaison avec les MCL cyclin D1 positifs L expression de SOX 11 a t tudi dans des chantillons de r actif compos de tissu damygdale de ganglion lymphatique et de rate Aucune expression na t observ e dans aucun compartiment lymphocytaire Seule une coloration cytoplasmique a t not e dans les cellules des centres germinatifs r actifs Zeng et al9 a valu l expression de SOX 11 par immunohistochimie sur 140 cas de n oplasmes cellules B matures dont 4 cas suspect s de MCL blastique qui nexprimaient pas la cyclin D1 et 8 cas de lymphome diffus grandes cellules B DLBCL CD5 positif L expression nucl aire de SOX 11 a t trouv e dans le MCL cyclin D1 positif 30 30 100 et dans un cas de MCL cyclin D1 n gatif avec morphologie typique SOX 11 tait exprim dans le lymphome de Burkitt 1 5 20 et le lymphome lymphoblastique 2 3 T LBL 2 2 B LBL total 4 5 80 alors que tous les autres cas de DLBCL y compris le DLBCL CD5 positif et autres n oplasmes petites cellules B taient n gatifs Les 4 cas suspect s de MCL blastique taient galement anti SOX 11 positifs Ces cas avaient un caryotype complexe incluant des anomalies 12p Ainsi les auteurs ont confirm les rapports ant c dents qui signalaient que lexpression nucl aire de SOX 11 constituait
23. tifs secondaires communs C lon 0 1 2 pires Bacay sous 2 2 Si le contr le positif sav re n gatif v rifier les autres contr les Foie 0 1 de 2 x 7 positifs test s pendant le m me cycle pour d terminer si la cause Glande salivaire g sous jacente se rattache lanticorps primaire ou l un des r actifs V sicule biliaire 0 1 secondaires communs Il se peut que les tissus aient t mal pr lev s Rein 0 L fix s ou d paraffin s Suivre la proc dure ad quate de pr l vement Vessie 0 1 de conservation et de fixation Prostate 0 1 3 En cas de coloration de fond excessive des taux lev s de biotine Ut rus 0 1 endog ne peuvent tre pr sents Une tape de blocage de la biotine Trompe de Fallope 0 1 doit tre incluse moins qu un syst me de d tection sans biotine Ur tre 0 1 soit utilis auquel cas la biotine pr sente nest pas un facteur d cisif Col de l ut rus z 1 pour la coloration de fond Muscle squelettique 0 i 4 r la Oa ma pas t limin e la proc dure de Mudei 3 paraffinage doit tre r p t e Pants o 1 5 Si les coupes de tissus se d tachent des lames v rifier que les lames PRE sont charg es positivement Parmi les autres causes susceptibles Nerf p riph rique 0 1 ec 2 r near z 4 d avoir un impact n gatif sur ladh rence du tissu notons un s chage M sothelium 0 1 insuffisant de la coupe tissulaire sur la lame avant la coloration ou Graisse E 1 une fixation dans du fo
24. vent tre test s en m me temps que les chantillons de patients Contacter le service apr s vente de A Menarini Diagnostics en cas de signe d instabilit du r actif Recueil Et Pr paration Des chantillons Pour L analyse Les tissus fix s au formol neutre tamponn inclus en paraffine et trait s en routine peuvent tre utilis s avec cet anticorps primaire Il est recommand de fixer les tissus au formol neutre tamponn 10 Il se peut que des r sultats variables soient obtenus en raison d une fixation prolong e ou de processus sp ciaux comme la d calcification des pr parations de moelle osseuse Chaque coupe doit avoir une paisseur appropri e environ 3 um et tre plac e sur une lame de verre charg e positivement Les lames contenant une coupe de tissu peuvent tre cuites pendant au moins 2 heures mais pas plus de 24 heures dans une tuve une temp rature de 58 60 C 5 C Avertissements Et Pr cautions 1 Prendre des pr cautions raisonnables lors de la manipulation des r actifs Porter des gants jetables et des blouses de laboratoire lors de la manipulation de substances soupconn es d tre canc rig nes ou toxiques exemple xylene Advanced Solutions for Advanced Pathology MEN Template 0 2 Path 2 viter tout contact des yeux et des muqueuses avec les r actifs Si des r actifs entrent en contact avec des zones sensibles laver abondamment l eau 3 Les chantillon
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