Primer informe de Cylindrocarpon destructans (Zinss
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1. Cat lica de Oriente 2006 22 41 51 7 Zentmyer GA Phytophthora cinnamomi and diseases 1t causes Am Phytopathol Soc Monogr No 10 1980 96 p 8 Vitale A Aiello D Guarnaccia V Perrone G Stea G Polizzi G First Report of Root Rot Caused by Ilyonectria Neonectria macrodidyma on Avocado Persea americana in Italy J Phytopathol 2012 160 156 159 9 Dann E Forsberg L Kooke A Pegg K Shivas R Tan Y The Cylindro complex of avocado root pathogens En Memorias del VII Congreso Mundial del Aguacate Cairns Australia 2011 1 12 p 10 Bonilla T S nchez P Gonzales M P rez M Neofusicoccum parvum y Phytium vexans nuevos pat genos del aguacate descritos en Andaluc a En Memorias del VII Congreso Mundial del Aguacate Cairns Australia 2011 1 5 p 11 Morales JG Enfermedades de poscosecha del fruto de aguacate Fitosanidad En Memorias del III Congreso Latinoamericana del Aguacate Santiago de Chile Chile 2009 1 44p 12 Besoain X Piontelli E Pudrici n negra en raicillas de palto Persea americana por Cylindrocarpon destructans patogenicidad y aspectos epidemiol gicos B Micol gico 1999 14 1 2 41 477 13 Navarro R Enfermedades del aguacate Persea americana Rev Sociedad de Ingenieros Agr nomos de Antioquia 1987 1 1 23 28 14 Buritic PE Directorio de pat genos y enfermedades de las plantas de importancia econ mica en Colombia Universidad Nacional de Colombia Sede Medell2. Leyenda A C destructans creciendo en APDA abundante micelio a reo y textura algodonosa A C destructans growing in PDAA abundant mycelia and cottony texture B C destructans creciendo en agar jugo V 8 B C destructans growing in V8 juice agar Rev Protecci n Veg Vol 28 No 1 2013 32 10 pm ES ES 10 um FIGURA 3 Estructuras microsc picas del aislamiento de C destructans proveniente de plantas enfermas de aguacate del Departamento Antioquia Colombia C destructans microscopic structures Leyenda A macroconidias del aislamiento observaci n microscopio de luz 1000X A isolate macroconidia light microscopy observation 1000X B clamidosporas del ais lamiento observaci n microscopio de luz 1000X B isolate chlamydospores light microscopy observation 1000X o teleomorfica descrita como Neonectria radicicola 12 17 19 El g nero Cylindrocarpon fue descrito por primera vez en el a o 1913 16 Este g nero est clasificado dentro del grupo de los hongos mitosp ricos su forma sexual corresponde al g nero Neonectria el cual se ubica dentro de la familia Nectriaceae orden Hypocreales clase Ascomycetes 21 22 Si bien Cylindrocarpon fue descrito a principios del siglo XX la primera aproximaci n detallada a este g nero fue efec tuada en la d cada de los a os 60 del siglo XX 16 Estudios filogen ticos recientes han confirmado la co rrespondencia Neonectria Cylindr
3. avocado plants 1 x 10 conidia ml Pictures were taken 80 days after inoculation Pictures are representative from 5 plant replicas per treatment Leyenda A y B pruebas de patogenicidad en casa malla A and B net house pathogenicity tests C amarillamiento foliar en pl ntulas inoculadas C leaf yellowing on inoculated plants D muerte descendente en pl ntulas inoculadas D dieback of inoculated plants E diferencias en el desarrollo del sistema radicular en los distintos tratamientos E root development differences observed as result of different treatments F pudrici n negra de ra ces de pl ntulas inoculadas con C destructans F black root rot of seedlings inoculated with C destructans TABLA 1 Variables de desarrollo de las plantas evaluadas en las pruebas de patogenicidad Plant development variables evaluated in the pathogenicity tests Longitud de Numero de Biomasa Altura del Di metro del Biomasa Tratamiento ra z cm ra ces ra ces g tallo cm tallo cm a rea 2 XES XES XES XES XES XES 30 07 5a 24 4a 5 10 42 a 3784 6a 0 68 0 1a 6 49 1la 10 84 0 20 16 4b 18 4b 198 1c 2450 5c 0 60 0 1b 3 91 1b 24 72 5 ab 21 60 3ab 2 6141b 29 27 5b 0 66 0 1a 5 25 1 ab Valores con diferente letra en cada columna presentan diferencias estad sticamente significativas seg n la prueba de Duncan P lt 0 05 Means followed by a different letter represents statistically significant differences deter
4. hongo Los resultados obtenidos su gieren que la cepa aislada de C destructans ejerci un efecto detrimental sobre las variables de crecimien to y desarrollo de las plantas susceptibles de aguaca te Fig 4 Tabla 1 Los s ntomas en campo Fig 1 e invernadero Fig 4 y las descripciones morfol gicas del aislamiento Figs 2 y 3 concuerdan con lo notificado por diversos autores para la enfermedad del aguacate denominada pudrici n negra de ra ces causada por el hongo C destructans 12 13 15 la que fue informada en vive ros y plantas reci n sembradas en campo en otros pa ses Esta enfermedad no apareci registrada en los directorios de pat genos de plantas ni en la literatura revisada para Colombia 5 8 9 12 13 14 15 20 En este trabajo se presentaron s ntomas en plan tas con menos de un mes de trasplantadas al campo y provenientes del vivero lo cual podr a indicar una in fecci n desde esa fase o la presencia de in culo en el suelo del campo La reducci n en el desarrollo de las pl ntulas de P americana en presencia C destructans se debe a que el hongo penetra por ra ces y las necrosa causando 33 AN FIGURA 4 Pruebas de patogenicidad de C destructans en plantas de aguacate 1 x 10 conidias ml Las fotografias se tomaron a 80 dias despu s de la inoculaci n Las figuras son representativas de una muestra de 5 pl ntulas por cada tratamiento C destructans pathogenicity tests in
5. n Instituto Colombiano Agropecuario ICA Santaf de Bogot 1999 329p 15 Zilberstem M Noy M Levy E Elkind G Zeidan M Teverovski E Ben Ze ev I Wilting disease of young avocado trees caused by Neonectria radicicola in Israel In 6th World Avocado Congress Vina Del Mar Chile 2007 25 30 p 16 Booth C The genus Cylindrocarpon Mycol Papers 1966 104 1 56 17 Samuels G Brayford D Variation in Nectria radicicola and its anamorph Cylindrocarpon destructans Mycol Res 1990 94 433 4472 18 Aproare Sat Linea base o diagn stico de campo Informativo el aguacate 2009 2 1 5 7 19 Chaverri P Salgado C HirookaY Rossman A Samuels G Delimitation of Neonectria and Cylindrocarpon Nectriaceae Hypocreales Ascomycota and related genera with Cylindrocarpon like anamorphs Stud Mycol 2011 68 57 78 20 Ben Ya acov A Frenkel M Sensitivity of avocado rootstocks to Verticillium wilt Calif Avocado Soc Yearb 1973 57 111 113 21 Brayford D Honda B Mantiri F Samuels G Neonectria and Cylindrocarpon the Nectria mammoidea group and species lacking microconidia Mycologia 2004 96 572 597 35 22 Mantiri F Samuels G Rahe J Honda B Phylogenetic relationships in Neonectria species having Cylindrocarpon anamorphs inferred from mitochondrial ribosomal DNA sequences Can J Botany 2001 79 334 340 23 Halleen F Schroers H Groenewald J Crous P Novel species of Cylindrocarpon Neonectria and Campylo
6. Rev Protecci n Veg Vol 28 No 1 2013 27 35 ART CULO ORIGINAL Primer informe de Cylindrocarpon destructans Zinss Scholten afectando pl ntulas de aguacate Persea americana Mill en Colombia G Ram rez Gilf J G Morales Osorio Ingeniero Agr nomo estudiante de Maestr a en Ciencias Agrarias Universidad Nacional de Colombia Sede Medell n Departamento de Ciencias Agron micas Campus El Volador Bloque 11 A A 1779 Medell n Colombia Laboratorio de Estudios Moleculares en Las Ciencias Agrarias Correo electr nico jgramireg unal edu co PhD Profesor Universidad Nacional de Colombia sede Medell n Departamento de Ciencias Agron micas Medell n Colombia Correo electr nico jgmoraleso unal edu co RESUMEN En visita de campo a un cultivo de aguacate ubicado en el departamento de Antioquia en Colombia se observaron pl ntulas con menos de un mes de trasplante al campo con s ntomas de amarillamiento foliar flacidez de las hojas retraso en el crecimiento y pudrici n de ra ces sintomatolog a asociada a la marchitez del aguacate Basado en un diagn stico de campo las plantas enfermas se sometieron al tratamiento habitual para Phytophthora cinnamomi Rands pat geno com nmente asociado a la marchitez sin obtener respuesta positiva A partir de estas plantas se tomaron muestras de ra ces y se trasladaron al Laboratorio de Sanidad Vegetal de la Universidad Nacional de Colombia sede Medell n donde se procesaron y se s
7. aislado de C destructans obtenido en los medios y se utiliz la metodolog a de Besoain y Piontelli 12 con un nivel de inoculo de 10 conidios ml con agua destilada es t ril Se realizaron tres tratamientos aplicaci n de 300ml de soluci n con propagulos directamente a cada bolsa con sustrato 10 semillas sumergidas en solu ci n con prop gulos por 15 min T1 y un control con aplicaci n de agua destilada est ril sin propagulos T Se utilizaron 5 pl ntulas por cada tratamiento El experimento se culmin a los 80 d as de haber sido inoculadas las plantas 17 durante el per odo se registraron semanalmente todos los s ntomas que apa recieron Al final se midieron los siguientes par metros en las plantas longitud de ra z y tallo n mero de ra ces di metro del tallo biomasa seca de ra z y parte a rea y rea foliar Para comprobar que el aislamiento inoculado e iden tificado con base en caracter sticas morfol gicas es tuviera relacionado con los s ntomas que se observa ron durante el per odo despu s de la inoculaci n se re aisl el microrganismo tomando tejidos de ra z y sembr ndolos en los medios semi selectivos Rev Protecci n Veg Vol 28 No 1 2013 30 Para este experimento se aplico un diseno com pletamente al azar con tres tratamientos y cinco repe ticiones Para comprobar las variedades de desarrollo se realiz un ANOVA y las diferencias significativas se establecieron a trav s
8. carpon gen nov associated with black foot disease of grapevines Vitis spp Stud Mycol 2004 50 431 455 24 Mahfuzur R Punja Z Factors influencing development of root rot on ginseng caused by Cylindrocarpon destructans Phytopathology 2005 95 1381 1390 25 Reeleder R Brammal R Pathogenicity of Pythiums species Cylindrocarpon destructans and Rhizoctonia solani to ginseng seedling in Ontario Can J Plant Pathol 1994 16 311 316 Recibido 17 2 2012 Aceptado 11 10 2012 Rev Protecci n Veg Vol 28 No 1 2013
9. cticamente desconocido consecuencia de esto se realizan diag n sticos err neos los cuales llevan a realizar pr cti cas inadecuadas de manejo ocasionando controles errados costosos y con resultados poco efectivos y eficientes 5 6 18 Tamayo 5 plante que durante el establecimiento de las plantaciones se generan p rdi das entre 30 y 50 En Colombia solo se han reporta do P cinnamomi Verticillium sp A mellea Cylindrocladium sp Rosellinia sp Fusarium sp Rhizoctonia sp y los nematodos Helicotylenchus sp Rotylenchulus sp y Pratylenchus sp 5 6 13 14 Hasta la fecha no se conoce en el pa s la enferme dad del aguacate denominada pudrici n negra de ra ces 5 13 14 la cual se caracteriza por presentar marchitez y amarillamiento foliar causando r pidamente la muerte de las pl ntulas especialmente en los pri meros estados de desarrollo y se considera que el agente causal es el hongo Cylindrocarpon destructans 12 Esta enfermedad ha sido descrita en Sur frica Israel Espa a Chile Italia y Australia afectando plan tas en vivero donde potencialmente puede causar gran des p rdidas econ micas y regularmente es confundi da con FP cinnamomi 8 9 12 15 En un lote de aguacate ubicado en el Municipio de Don Matias en el Departamento de Antioquia Colom bia se encontraron 20 plantas enfermas con sintomas t picos de marchitez a las cuales previamente se les hab a realizado tratamiento r
10. de la prueba de medias de Duncan p lt 0 05 Los c lculos se realizaron usando el programa computacional SAS 8 0 RESULTADOS Y DISCUSI N Se encontr que el 4 76 de las plantas de agua cate con copa variedad Hass en el lote presentaron s ntomas de marchitez los que aparecieron entre 20 y 30 d as despu s de su trasplante ddt al campo Las plantas sintom ticas se presentaron dentro del lote sin un patr n de distribuci n espacial definido y mos traron en las etapas iniciales 20 60 ddt amarillamiento generalizado retraso en el crecimiento y flacidez de tejidos foliares Fig A B Para el tercer mes la sintomatolog a progres hacia defoliaci n Fig 1C y necrosis descendente terminando con la muerte de las plantas Estos aspectos no fueron observados en plantas sanas sembradas simult neamente Fig 1E Rev Protecci n Veg Vol 28 No 1 2013 En el examen de las plantas muertas se observ necrosis radical Fig 1D S ntomas similares en la parte a rea y ra z se informaron con frecuencia en los cultivos de aguacate y com nmente se asociaron con la tristeza causada por el Oomycete P cinnamoni Sin embargo esta sintomatologia puede ser ocasio nada tambien por multiples factores los cuales pue den tener un origen bi tico o abi tico 5 6 7 En este campo el tratamiento a base de mefenoxam y clorotalonil Ridomil Gold que utiliz el productor no fue efectivo y no se recuperaron las plantas en
11. de tratamientos costosos con mol culas de uso espec fico para oomycetos los cuales no fueron efec tivos sobe el pat geno y termina con la muerte de los rboles 18 Aislamiento y caracterizaci n de la cepa en me dios de cultivo A partir de las muestras de ra ces obtenidas de las plantas con s ntomas de marchitez se obtuvo un ais lamiento tipo cuyo micelio se caracteriz en APDA por presentar crecimiento r pido y que alcanz entre 30 60mm a 28 C a los diez d as despu s de la siem bra El micelio a reo present textura aterciopelada o lanosa y en el anverso exhibi coloraci n hialina de tonalidad beige Despu s de 7 9 d as de incubaci n esta coloraci n se torn caf crema mientras que el reverso tom diferentes tonos de amarillo naranja y marr n Fig 2 El crecimiento en medio V8 fue m s lento que en APDA Las colonias presentaron micelio algodonoso y disperso de coloraci n blanca a crema en el adnverso y marr n en el reverso Fig 2 Por su parte en los medios semi selectivos para Phytophthora spp V8 PARPH y V8 NARPH no se logr recuperar ning n tipo de aislamiento 31 A partir del tejido del hongo crecido en APDA y V8 y de estructuras presentes sobre ra ces de plantas con marchitez incubadas en c mara h meda se ob servaron macroconidias en esporodoquio lisas de for mas rectas o ligeramente curvadas cil ndricas a fusoides con los extremos rectos o redondeados base de in
12. embraron en los medios semi selectivos para Phytophthora spp V8 PARPH y V8 NARPH y PDA acidificado APDA y V8 para hongos Se aisl consistentemente el hongo Cylindrocarpon destructans Zinss Scholten y en ning n caso P cinnamomi El aislamiento se inocul en plantas de aguacate las cuales mostraron amarillamiento y flacidez de las hojas retraso en el crecimiento y pudrici n de ra ces sintomatolog a com n a la marchitez que adem s concuerda con lo informado para la enfermedad conocida como pudrici n negra de ra ces de aguacate De los tejidos de plantas inoculadas se pudo re aislar el hongo confirmando todos los postulados de Koch Los resultados encontrados en este trabajo sugirieron la presencia de esta enfermedad por primera vez en Colombia Palabras clave Cylindrocarpon destructans pudricion negra de ra ces de aguacate First report of Cylindrocarpon destructans Zinss Scholten affecting avocado Persea americana Mill seedling in Colombia ABSTRACT In a visit to an avocado plantation located in the department of Antioquia in Colombia seedlings with less than one month of being transplanted to the field were observed with leaf yellowing leaf flaccidity growth delay and root rot symptoms associated with avocado wilt Based on a field diagnosis the diseased plants were subjected to the habitual treatment for Phytophthora cinnamomi Rands a pathogen commonly associated with the wilt without a positive response Samples we
13. fermas con marchitez Este producto sist mico es eficaz para oomycetos como Phytophthora spp y no act a apropiadamente sobre hongos u otros microorganismos lo que hizo pensar desde el inicio del estudio que el agente causal de la sintomatolog a observada no era un oomyceto o era una cepa de un oomyceto resistente al producto utili zado por ello se llev a cabo el estudio del agente etiol gico Patolog as como la marchitez asociadas a m lti ples agentes causales un diagn stico basado nica LAR EA FIGURA 1 Din mica de la sintomatolog a en pl ntulas de aguacate en campo afectadas con C destructans Symptom dynamics in avocado plants infected with C destructans in the field Leyenda A s ntomas iniciales en campo A initial symptoms in the field B s ntomas 60 d as despu s de la identificaci n en campo B symptoms 60 days after in field detection C s ntomas 90 d as despu s de la detecci n en campo C symptoms 90 days after in field _ detection D pudrici n negra en el sistema de ra ces afectado por C destructans D black root rot in the root system affected by C destructans E plantas sanas a los 3 meses de edad E three months old healthy plants EN i pad mente en la sintomatologia observada en campo pue de conducir a un control equivocado pues usualmente es dirigido al control de P cinnamomicomo unico agen te causal Por ello frecuentemente se hacen aplica ciones
14. iento en mm a los 10 dias 25 C 24 25 Por su parte en el estudio microscopico de evaluaron 29 longitud L ancho A ambos expresados en um relacion L A y el numero de septos macroconidias y microconidias En las clamidosporas se midio el dia metro 16 17 Las mediciones para determinar tamanos y rela ciones de caracteristicas taxonomicas del aislado se realizaron en 20 estructuras individuales Para los da tos obtenidos se determino la media y la respectiva desviacion estandar en el programa Excel de Microsoft Pruebas de patogenicidad sobre P americana Se utilizaron semillas de P americana raza guatemalteca por presentar mayor susceptibilidad a los patogenos asociados a la marchitez 20 Se reali z un tratamiento hidrot rmico a 48 50 C 80min para desinfecci n superficial seguido de ba o en mezcla de fungicida carbox n captan 15min 5 Posterior mente se realiz un pre tratamiento para acelerar la germinaci n el cual consisti en la remoci n de la testa corte basal de 2 a 4mm y corte apical de 10 a 20mm 1 Las semillas se sembraron en bolsas 22cm de di metro y 44cm de altura calibre 3 5 con sustrato 50 suelo 25 cascarilla de arroz 25 humus previa mente esterilizado en autoclave 15 libras de presi n dos ciclos de 1h Las plantas se mantuvieron en con diciones de casa de malla y se fertilizaron con solu ci n nutritiva Hoagland La inoculaci n de hizo a partir del
15. mined by the Duncan test PS 0 05 principalmente decaimiento y muerte de plantas usual les especialmente de coniferas y ginseng Pana mente jovenes 17 23 Algunas especies de quinquefolius L entre otras especies 23 24 25 Cylindrocarpon ocasionan enfermedades en plantas de iy l En general las patolog as ocasionadas por vivero plantaciones j venes de vid semilleros foresta Cylindrocarpon spp presentan poca trascendencia Rev Protecci n Veg Vol 28 No 1 2013 34 aunque en algunas ocasiones provocan perdidas eco nomicas muy importantes 12 15 Se informo que los hongos pertenecientes al g nero Cylindrocarpon se desarrollan preferiblemente en condiciones de sa turaci n de agua 24 25 situaci n similar a las re portadas para otros pat genos del suelo en cultivos de aguacate como ocurre con el pat genos P cinnamomi 4 5 6 7 La confusi n en el diagn stico de los agentes causales de enfermedades que presentan s ntomas similares ocasiona grandes p rdidas econ micas por el uso de productos costosos y la p rdida de los rbo les usualmente en edad productiva En el cultivo del aguacate frecuentemente se responsabiliza al oomycete P cinnamomi de los s ntomas de la tristeza y en este trabajo se demostr que pueden estar aso ciados a otros pat genos como C destructans Los productos fitosanitarios que controlan organis mos oomycetos como los basados en mefenoxam metalaxyl y cimoxa
16. nil no son efectivos para el control de C destructans por lo que resulta imprescindible implementar un sistema de diagn stico oportuno y pre ciso de este hongo para poder efectuar tratamientos efectivos y eficaces de la enfermedad As mismo resulta importante incrementar los con troles en la calidad de las plantas provenientes de vive ro con el fin de evitar la dispersi n de enfermedades desde esos sitios REFERENCIAS 1 Bernal A Cipriano A Tecnolog a para el cultivo de Aguacate Manual t cnico 5 CORPOICA Centro de Investigaci n la Selva R onegro Antioquia 2008 241p 2 Guerrero T Nieves B Barriga F Aguirre S Coria V Recuperaci n de arboles de aguacate infectados con Phytophthora cinnamomi Rands bajo control biol gico y qu mico En Memorias del VII Congreso Mundial del Aguacate Cairns Australia 2011 20 43 p 3 Mej a A Cadena Productiva del Aguacate en Colombia Consejo Nacional del Aguacate En Memorias del II Encuentro de la cadena productiva del aguacate R onegro Antioquia Colombia 2010 1 30p 4 P rez M Significant Avocado Diseases Caused by Fungi and Oomycetes Eur J Plant Sci Biotech 2008 2 1 1 24 Rev Protecci n Veg Vol 28 No 1 2013 5 Tamayo PJ Enfermedades del aguacate Rev Polit cnica 2007 4 52 71 6 Ciro D Rendon K Navarro R Reconocimiento de la pudrici n de ra ces Phytophthora cinnamomi en aguacate Persea americana en Antioquia Rev Universidad
17. ocarpon En esos Rev Protecci n Veg Vol 28 No 1 2013 estudios qued demostrado que Cylindrocarpon y Neonectria son monofil ticos 21 22 Pruebas de patogenicidad sobre P americana Las pl ntulas sembradas en suelo inoculado TO mostraron amarillamiento foliar a los 30ddi a los 50 ddi se observ flacidez foliar y retraso en el crecimien to respecto al testigo sin inocular T Hacia los 70 ddi las pl ntulas bajo TO iniciaron un proceso de defoliaci n con muerte descendente En la inspecci n visual de las ra ces de las plantas enfermas se encontr necrosis Las pl ntulas provenientes de semillas inoculadas con el hongo T1 presentaron sintomatolog a similar al tratamiento TO pero la aparici n de s ntomas requi ri mayor tiempo 45 ddi Fig 4 En las plantas testi go T no se observaron s ntomas durante el periodo de evaluaci n Se observ un incremento significativo P lt 0 05 en la longitud y n mero de ra ces en el testigo no inoculado T comparado con la inoculaci n con propagulos del hongo al sustrato T0 La biomasa de ra ces y la altura del tallo disminuyeron significativamente cuando se inocul el hongo al sue lo TO o ala semilla T1 con relaci n al testigo sin hongo T P lt 0 05 Tabla 1 Se observ una disminuci n significativa P lt 0 05 en las variables di metro del tallo y biomasa a rea en el tratamiento donde se adicionaron al sustrato los prop gulos del
18. r de los r boles son afectados por diversos microrganismos que producen s ntomas a reos poco espec ficos lo que difi culta su correcto diagn stico y manejo En este cultivo se inform Phytophthora cinnamomi Rands como el pat geno m s limitante del cultivo se alando que este Oomycete puede causar p rdidas del 90 4 5 6 7 Otros pat genos que afectan ra ces y la base tallo son Phytophthora heveae Thompson Phytophthora citricola Sawada Verticillium sp Armillaria mellea Vahl Fr Kumm Cylindrocladium sp Rosellinia sp Fusarium solani Sacc Fusarium oxysporum Schlecht Fusarium equiseti Corda Sacc sensu Gordon Rev Protecci n Veg Vol 28 No 1 2013 Rhizoctonia sp Phymatotrichum omnivorum Shear Duggar Cylindrocladiella sp Cylindrocarpon sp Phytium sp y los nematodos Helicotylenchus sp Rotylenchulus sp y Pratylenchus sp 4 5 8 9 10 11 12 La complejidad de esta enfermedad se en cuentra en el hecho de que muchos de estos pat genos expresan en la planta s ntomas similares caracteriza dos por marchitez generalizada estancamiento del desarrollo p rdida de vigor color y brillo as como amarillamiento de las hojas y finalmente en estados avanzados la muerte de los rboles afectando plan tas en todos sus estados de desarrollo 4 5 6 En Colombia las enfermedades adquiridas a trav s de la ra z son muy poco estudiadas y el impacto de estas en los cultivos establecidos es pr
19. re taken from these plants and transferred to the Plant Protection Laboratory of the National University of Colombia headquarters Medellin where they were processed and cultured on the semi selective media for Phytophthora spp V8 PARPH and V8 NARPH and acidified PDA APDA and V8 for fungi Cylindrocarpon destructans Zinss Scholten was the fungus consistently isolated in any case P cinnamomi was isolated The isolate was inoculated in avocado plants and they showed leaf yellowing leaf flaccidity growth delay and rotten roots symptoms commonly observed in avocado wilt and which in addition are similar to those reported for avocado black root rot disease From the inoculated tissues the same fungus could be re isolated confirming Koch s postulates The results observed in this work suggested the presence of this disease in Colombia for the first time Key words Cylindrocarpon destructans avocado root rot 28 INTRODUCCION El aguacate es una fruta cotizada a nivel interna cional por su sabor y caracteristicas nutricionales Ac tualmente se cultiva en 59 paises en regiones tropica les y sub tropicales 1 Mexico ocupa el primer lugar en plantaciones comerciales con 49 y en los ltimos a os Colombia increment r pidamente el rea sem brada hasta ubicarse en segundo lugar con 13 se guido por Chile 10 y Estados Unidos 7 otros pa ses productores son Sud frica Israel Per Aus tralia Espa a y Kenia los cuales
20. seccionaron en trozos peque os aproximadamente 0 5 cm Luego se introdujeron en cabina de flujo laminar se esterilizaron superficialmente con etanol 70 30s y se hicieron lavados con agua destilada est ril 30s hipoclorito de sodio al 3 30s y por ltimo con agua destilada est ril 30s Despu s de la desinfestaci n superficial se cortaron trozos pe que os 3mm aproximadamente y se sembraron en los medios semi selectivos para Phytophthora spp jugo V8 clarificado suplementado con pimaricina 0 01 g L ampicilina 0 250 g L rifampicina 0 01 g L pentacloronitrobenceno 0 1 g L e hymexazol 0 05 g L V8 PARPH y jugo V8 clarificado suplementado con nistatina 0 01 g L ampicilina 0 250 g L rifampicina 0 01 g L pentacloronitrobenceno 0 1 g L e hymexazol 0 05 g L V8 NARPH 4 7 papa dextro sa agar PDA acidificado con acido lactico APDA y para hongos jugo V8 clarificado V8 Las cajas Petri se incubaron a 28 C por 15 dias sometidas a 12 horas de luz y 12 de oscuridad Unicamente se obtuvieron aislamientos en el me dio V8 y APDA Se observaron en el microscopio de luz Nikon Eclipse E200 y se identificaron utilizan do las claves generales descritas para hongos y las espec ficas para el g nero Cylindrocarpon sp 16 17 19 Se evaluaron variables macro y microscopicas En las primeras se determino textura de las colonias co lor de anverso reverso pigmentacion y el crecimiento del aislam
21. serci n ligeramente protuberante con presencia de 1 a 3 septos usualmente 3 Fig 3A La longitud media para las macroconidias fue 30 22 3 81 um y 5 80 1 2 um de ancho y una relaci n L A de 5 22 Se observ poca abundancia de microconidias y cuando estuvieron presentes exhibieron aspecto liso elipsoides a cil ndricas forma recta o ligeramente curvada con extremos redondeados y presencia de O 1 septo La longitud media de las microconidias fue 9 87 3 3 um de largo 2 30 0 4 um de ancho y relaci n L A de 4 24 um En los medios de cultivos se identificaron clamidosporas de coloraci n hialina y marr n globosas lisas aisladas o en cadenas o agru padas de forma intercalar o terminal Fig 3B con di metro promedio de 9 80 2 0 um Las descripciones y los par metros morfom tricos correspondieron a un microorganismo clasificado en el g nero Cylindrocarpon A partir de las claves espe cificas para este grupo 16 17 se determin que el microrganismo aislado de las ra ces de plantas de aguacate variedad Hass con s ntomas de marchitez correspondi a Cylindrocarpon destructans Zinss Scholten En este trabajo no se observ la fase sexual FIGURA 2 Caracter sticas de las colonias de Cylindrocarpon destructans en los medios de cultivo papa dextrosa agar acidificado APAD y jugo V 8 agar Cylindrocarpon destructans colony characteristics on acidified potato dextrose agar PDAA and V8 juice agar media
22. suman 21 2 3 En Colombia se siembra aguacate desde el nivel del mar hasta los 2500 msnm principalmente para el mercado local La producci n se caracteriza por la siembra de rboles nativos principalmente El aumen to del consumo per capita interno y su potencial exportador como fruta fresca y procesada condujo al incremento de la siembra de variedades mejoradas aptas para varios climas destac ndose la variedad Hass para clima frio moderado La mayor rea sem brada de esta variedad se encuentra en el departa mento de Antioquia con 2300 ha y con una proyecci n de 10 000 ha al 2015 1 3 El r pido incremento del rea sembrada podr a traer problemas de sobreoferta interna por lo cual hay que considerar los mercados externos y as aprovechar al m ximo el n mero de tratados de libre comercio que se est n firmando y gestionando en la actualidad Los mercados de exportaci n exigen productos que cum plan principios b sicos de inocuidad trazabilidad que su producci n sea amigable con el medio ambiente y que busque la salud y bienestar social del productor 3 Esta situaci n plantea grandes retos tecnol gicos para garantizar la sostenibilidad del cultivo entre ellos los relativos al manejo sanitario de las plantaciones El cultivo del aguacate presenta un n mero impor tante de problemas fitosanitarios dentro de los cuales se destacan por su importancia las enfermedades radiculares Las ra ces y el sistema vascula
23. utinario contra P cinnamomi ya que se asumi que este pat geno era el responsable de esta sintomatolog a El control se aplic usando un producto con los ingredientes acti vos mefenoxam y clorotalonil Ridomil Gold 5 pero sin resultados positivos al tratamiento El objetivo del estudio fue determinar el agente etiol gico responsable de la sintomatolog a observada en el aguacate en el lote ubicado en el Departamento de Antioquia Colombia MATERIALES Y METODOS Las muestras se tomaron en 6 plantas al azar de un total de 20 que presentaban sintomas de marchi tez El campo de 2ha 420 plantas sembrado a 7x7m de aguacate variedad Hass injertado en patr n desco nocido de 25 d as de trasplantadas estaba ubicado en el municipio de Don Mat as vereda Piedrahita Antioquia Colombia 6 32 02 N 75 24 53 O Se tomaron tejidos de ra ces y base del tallo que se en volvieron en servilletas de papel y se transportaron en bolsas de pl sticas hasta el laboratorio de Sanidad Vegetal de La Universidad Nacional de Colombia sede Medell n En el laboratorio se realizaron los procedi mientos de lavado de muestras esporulaci n en c mara h meda aislamiento e identificaci n de microorganismos y las pruebas de patogenicidad Aislamiento y caracterizaci n de la cepa en me dios de cultivo En el laboratorio los tejidos de ra z y base del tallo se lavaron con abundante agua del acueducto se se caron al aire y se
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