CITOQUIMICO DE ORINA - Hospital Santa Margarita
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1. EQUIPO COUNTER 19 CP El mantenimiento preventivo habitual y la limpieza son necesarios para mantener el analizador hematol gico Wiener Lab Counter 19 CP en buenas condiciones de funcionamiento La limpieza es importante para que el funcionamiento del analizador sea eficaz y preciso El analizador dispone de funciones de limpieza autom tica que se realizan durante el funcionamiento normal Estas funciones incorporadas mantienen limpio el sistema fluidico Adem s de las funciones de limpieza autom ticas Wiener Lab Aconseja realizar en forma habitual el mantenimiento necesario para alargar la vida til del analizador y minimizar los problemas del sistema que dan lugar a la imprecisi n e inexactitud Utilizaci n de programa mantenimiento Se debe presionar MENU para acceder al men del sistema Seleccione reparaci n y luego mantenimiento La pantalla ofrece varios tipos de limpieza que son Diluente prime ceba de diluyente se debe realizar cada que se cambie este reactivo Rinse prime ceba de detergente se debe realizar cada que se cambie este reactivo Lyse prime ceba de lisante se debe realizar cada que se cambie este reactivo Zap aperturas limpieza el ctrica de aberturas se realiza para desobstruir las aberturas o evitar la obstrucci n Flush aperturas limpieza hidr ulica de aberturas se realiza para limpiar con agua las aberturas desobstruirlas o evitar la obstrucci n2. Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado Copacabana HEMATOLOGIA DELIA ROSA HERRERA HERN NDEZ Bacteri loga BLANCA LUZ SALDARRIAGA GAVIRIA Bacteri loga REVISADO POR APROBADO POR NOMBRE Delia Rosa Herrera Hern ndez Paulo Andres Gutierrez CARGO Bacteri loga Representante de la Direcci n FIRMA FECHA Septiembre de 2010 Septiembre de 2010 Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana CONTENIDO RECUENTO DE GL BULOS ROJOS RECUENTO DE RETICULOCITOS VELOCIDAD DE SEDIMENTACI N DE LOS GL BULOS ERITROSEDIMENTACION HEMATOCRITOS DE WINTROBE Y CAPILAR DETERMINACION DE HEMOGLOBINA RECUENTO DE LEUCOCITOS RECUENTO DIFERENCIAL RECUENTO E IDENTIFICACION DE PLAQUETAS TIEMPO DE SANGRIA PRUEBA DEL TORNIQUETE SIGNO DE LAZO RETRACCI N DEL COAGULO TIEMPO DE COAGULACION DE LA SANGRE TOTAL ROJOS PRUEBA DE CICLAJE O FORMACION DE CELULAS FALCIFORMES INVITRO INDICES CORPUSCULARES EOSINOFILOS EN MOCO NASAL HEMOPARASITOS EQUIPO HEMATOLOGIA CUIDADO Y MANTENIMIENTO DEL EQUIPO CALIBRACI N Y CONTROL DE CALIDAD PAR METROS LE DOS POR EL EQUIPO CONTROL DE CALIDAD INTERNO CONTROL DE CALIDAD EXTERNO CONTROL DE CALIDAD INTERNO DE EOSINOFILOS EN MOCO NASAL CONTROL DE CALIDAD INTERNO DE RECUENTO DE RETICULOCITOS CONTROL DE CALIDAD INTERNO DE HEMOPARASITOS CONTROL DE CALIDAD EXTERNO
3. HEMOPARASITOS 1 Limpiar varias veces el dedo escogido ndice y utilizar una lanceta 2 Puncionar con lanceta en la parte externa de la yema del dedo ndice 3 Limpiar la primera gota de sangre luego dejar caer directamente en la l mina o porta objetos 2 gotas una separada de la otra de un cm por 1 cm 4 Hacer un extendido y dejar secar m nimo 30 minutos RECUENTO DE HEMOPARASITOS Se realiza con base en el conteo de gl bulos blancos y utilizando una constante de 6700 Ejemplo 300 gl bulos blancos 9 trofozoitos 201 trofozoitos mm cubico 6700 Xx Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana EQUIPO HEMATOLOGIA El laboratorio est dotado actualmente de un equipo para hematolog a de cuarta generaci n el cual proporciona un cuadro hem tico automatizado con perforaci n de tapa entrega gr ficas de histogramas para gl bulos blancos gl bulos rojos plaquetas y da informaci n de disperso gramas para gl bulos blancos a los que agrupa en cinco tipos de c lulas Los recuentos celulares se hacen teniendo en cuenta algunas propiedades de las c lulas como Son malas conductoras de la electricidad Tienen variedad de tama os Tienen una densidad caracterizada para cada una Cada una refracta la luz con una intensidad diferente Tiene una composici n citoqu mica diferente y caracterizable para cada una La relaci n n cleo ci
4. Probe cleanser clearing limpieza con limpiador de sonda este procedimiento se realiza una vez por semana todos los mi rcoles se realiza un proceso de drenaje de ba os y l neas fluidicas con limpiador de sonda el cual es un detergente alcalino Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana E Z cleanser clearing limpieza con limpiador E Z este procedimiento se debe realizar todos los d as antes de apagar el analizador Se debe utilizar el limpiador E Z una soluci n isot nica basada en enzimas y agente humidificador para limpiar los tubos y el ba o Clean baths limpieza de ba os este procedimiento se realiza cuando se sospecha que los ba os se han contaminado Empty turbina vaciado de tubos este procedimiento se realiza cuando no se va a utilizar el analizador durante mucho tiempo o se va a realizar mantenimiento Reset tubing reinicio de tuber as procedimiento que se realiza para resetear las lineas fluidicas Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana CALIBRACI N Y CONTROL DE CALIDAD La calibraci n se hace con un est ndar cuando el valor de algunos de los par metros Hb Hto RBC PLT VCM no coincide con los valores del est ndar se debe cuadrar los coeficientes de calibraci n mediante una regla de tres Ejemplo cambio de coeficiente para la Hb Coef Conocido v
5. o peque o fibrina o residuos celulares Ps Indica PLT excesivamente peque as PI Indica PLT excesivamente grandes Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana CUIDADO Y MANTENIMIENTO DE LOS EQUIPOS EQUIPO ADVIA 60 Se debe hacer un enjuague del equipo al final del d a de trabajo es necesario correr un ciclo de stand by en espera presionar el comando stand by entonces el equipo realizar una limpieza completa con detergente y coloca el sistema en el modo quedar en espera Si se ha completado el d a de trabajo el equipo puede ser apagado Limpieza concentrada Se le debe hacer al equipo cada 8 d as con cloros Consiste en depositar 3cm de clorox en la c mara 1 y 3cm de clorox en la c mara 2 Permite la limpieza WBC de la c mara de rojos y blancos y dura RBC 3 minutos Cuando no se ha empleado el instrumento por 4 horas es necesario correr un ciclo de puesto en marcha Star Up antes de evaluar las muestras Despu s de la instalaci n del paquete de reactivos time pac se debe inspeccionar visualmente las l neas del reactivo y las bombas para detectar burbujas de aire si todav a aparecen burbujas de aire debe repetirse la preparaci n de los reactivos Despu s de cambiar e instalar el paquete de reactivo se debe dar un Star up puesta en marcha Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana
6. 36 Normocromica macrocitica Mayor de 96 Mayor de 32 32 36 normocromica Microcitica Menor de 82 Menor de 27 Menor de 32 hipocromica CLASIFICACION DE LAS ANEMIAS APARTIR DEL MCV Y EL ADE RDW CCV MCV DISMINUIDO MCV NORMAL MCV AUMENTADO Microcitica simple Normocitica Macrocitica simple ADE NORMAL Betatalasemia Perdida cr nica de Aplasia medular Alfatalasemia sangre Microcitica y Normocitica y Macrocitica con ADE anisocitosis anisocitosis anisocitosis AUMENTADA Ferropenia Anemia inflamatoria Anemia Delfa betatalasemia hipotiroidismo megaloblastica Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana EOSINOFILOS EN MOCO NASAL Se toma la muestra con aplicador est ril diferenciando la fosa derecha y fosa izquierda del paciente Se utiliza una placa porta objetos y se extiende la muestra en forma circular y suavemente en un extremo una fosa y en el otro extremo la otra fosa Se deja secar la muestra al aire y se fija con calor Para colorear se utiliza Wright por 10 minutos Luego de estar seca se lee en 100x con aceite de inmersi n y se cuenta 100 c lulas diferenciando los polimorfos nucleares neutr filos de los polimorfos nucleares eosin filos Se reporta en porcentaje Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana
7. lisis o anomal as hidr ulicas Tambi n si la sangre es demasiado vieja G3 Zona gt de 400 Fl presencia de metamielocitos Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana Alarmas que suministra el equipo counter 19 CP El sistema asignara indicadores a los histogramas anormales as R1 Indica anomal as en el lado izquierdo de la protuberancia de los linfocitos y la posible presencia de concentraciones de trombocitos megatrombocitos gl bulos rojos con n cleo gl bulos rojos insolubles residuos de prote nas y lipoides en la muestra o ruido el ctrico R2 Indica anomal as entre la protuberancia de linfocitos y el rea de c lulas de tama o medio as como la posible presencia de linfocitos o plasmocitos de car cter anormal linfocitos at picos granulocitos originales en la muestra eosinofilia o basofilia R3 Indica anomal as entre el rea de c lulas de tama o medio y los granulocitos as como la posible presencia de granulocitos inmaduros o una subpoblacion anormal en la muestra o bien eosinofilia R4 Indica anomal as en el lado derecho de la protuberancia de granulocitos y neutrofilia Rm Indica como m nimo la presencia de dos indicadores R Pm Indica la demarcaci n difusa entre el rea de gl bulos rojos y de trombocitos as como la posible presencia de trombocitos de gran tama o coagulaci n de trombocitos gl bulos rojos de tama
8. 100 Superficie de los 80 cuadros peque os 80x0 0025mm Profundidad de la c mara 0 1mm de donde el volumen de los 80 cuadrados es 80x0 0025x0 1 0 02mmY El n mero de c lulas rojas R x200x1 0 02 Rx200x5 0 Sea Rx10 000 nos da el n mero de c lulas rojas por mm de sangre Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado HEMATOLOGIA Copacabana Los valores normales en hombres 5 400 000 mm Mujeres 4 500 000 mm Los valores de los ni os fluct an mucho ya que dependen de la edad y hay diferencia en sexos hasta despu s de la pubertad Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana RECUENTO DE RETICULOCITOS Objetivo Contar los reticulocitos existentes en 500 gl bulos rojos y reportar su n mero en porcentaje Los reticulocitos son c lulas rojas j venes que poseen remanentes nucleares de RNA que s lo se aprecian con colorantes vitales como el azul de cresil brillante que precipita en restos de cido ribonucleico en forma de fina malla o ret culo M todo Colocar en un tubo 2 gotas de la muestra previamente mezcladas y 2 gotas del reactivo azul de cresil brillante mezclar y llevar al ba o Mar a a 37 C por 10 15 minutos Mezclar luego y hacer extendidos en l mina dejar secar al ambiente En 100x empezar a contar los reticulocitos existentes en varios campos hasta completar 500 c lulas rojas El resultad
9. DE HEMOPARASITOS BIBLIOGRAFIA O Hospital Santa Margarita pura del Estado H EMATO LOGIA RECUENTO DE GLOBULOS ROJOS Objetivo Contar el n mero de gl bulos rojos por mm de sangre Visualizaci n y conteo de los gl bulos rojos al diluir la sangre con soluci n salina 0 85 la cual se diluye y al mismo tiempo conserva la forma de los eritrocitos C mara de Neubauer Improved existen varios modelos la de Neubauer es una c mara de recuento doble las dos c maras est n divididas por el surco transversal y bordeada por hendiduras longitudinales La cuadricula tiene 3x3mm 9mmY T cnica Se usa como anticoagulante EDTA doble Oxalato La sangre que ha estado en reposo debe mezclarse suavemente de tal manera que la muestra sea homog nea para manejar mejor la pipeta est debe mantenerse en una posici n semihorizontal Se extrae sangre con mucha exactitud hasta la marca 0 5 el l quido diluente se aspira exactamente hasta la marca 101 se agita luego durante tres minutos se descartan las 3 4 primeras gotas para eliminar el l quido del capilar El recuento de gl bulos rojos se obtiene sumando las c lulas contadas en lo5 cuadros superior superior derecho inferior derecho inferior izquierdo y central 80 peque os en total Se debe tener en cuenta varios factores Diluci n de la sangre 1 200 en otras palabras se emplea 0 5 partes de sangre de 100 partes de diluci n 0 5
10. RNO DE EOSINOFILOS EN MOCO NASAL El control se realiza haciendo un extendido de la muestra que posteriormente son le dos por dos bacteri logas diferentes comparando los resultados Este control interno se realiza cada que llegue esta prueba ya que es muy espor dica Hospital Santa Margarita bano del Estado H E M ATO LOG A CONTROL DE CALIDAD INTERNO DE RECUENTO DE RETICULOCITOS Se hace recuento de una placa por dos bacteri logas diferentes y luego se comparan los resultados Este control se hace cada que llegue esta prueba por lo espor dico de los casos Hospital Santa Margarita bano del Estado H E M ATO LOG A CONTROL DE CALIDAD INTERNO DE HEMOPARASITOS El control interno se hace mediante la lectura de una placa por dos bacteri logas diferentes y luego se compara los resultados Este control se realiza cada que llegue esta prueba Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado _ HEMATOLOGIA Copacabana BIBLIOGRAFIA Manual del usuario Wiener Lab Counter CP autoanalizador Hematol gico Reporte grafico del cuadro hematico automatizaci n y relaci n con el FSP Aura Rosa Manascero Gomez 1 edici n Santa Fe de Bogot Programa de evaluaci n externa de calidad Qualitest Control Novalab secci n Hematolog a Examenes de laboratorio en la pr ctica corriente Zoraida Torregroza F
11. alor de hb le da por el equipo 1 8 13 5 14 4 1 15 Nuevo coeficiente Hb X Valor exacto del st del Hb Despu s de le do el est ndar se corre un control que nos permiten ver si el equipo esta calibrado o no Este control se puede montar d a por medio y seg n el resultado de este montamos de nuevo el calibrador Nota En caso de presentarse una falla en el equipo de Hematolog a el recuento de leucocitos se realizar en forma manual de la siguiente manera 1 Hacer diluci n 0 38ml del l quido diluyente m s 202 de sangre con EDTA 2 Agitar la pipeta de gl bulos blancos 3 Hacer recuento en la c mara de Neubauer y multiplicar el resultado por 50 Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana COUNTER 19 CP El control de calidad consiste en estrategias y procedimientos que miden la precisi n y estabilidad del analizador Los resultados suponen la fiabilidad de los resultados de muestra El control de calidad implica la medici n de materiales con caracter sticas estables conocidas en intervalos frecuentes El an lisis de los resultados con m todos estad sticos permite deducir que los resultados de muestra son fiables Actualmente en el laboratorio se ejecuta un programa de control de calidad de forma diaria con controles de nivel bajo normal y alto Los archivos del control de calidad que posee el equipo calculan la media la desviaci n est n
12. as para definir el tama o y el contenido de hemoglobina de los eritrocitos Prestan adem s una ayuda eficaz para la clasificaci n de las anemias Junto con el extendido de sangre perif rica proporcionan una clara visi n del tama o y contenido hemoglob nico del gl bulo rojo INDICE DE PRODUCCION DE RETICULOCITOS l P R reticulocitos corregido Tiempo de maduraci n La constante que se coloca en tiempo de maduraci n es 2 Cuando el l P R aumenta M dula sea hiperactiva V N 1 2 PROMEDIO DE VULUMEN CORPUSCULAR MCV este par metro define los conceptos de normocitosis macrocitosis y microcitosis tradicionales que asociados con el nuevo par metro del hemograma electr nico el ancho de distribuci n de los eritrocitos ADE es la piedra angular de la nueva clasificaci n morfol gica de las anemias M C V Hto X 10 GR V N 82 95 fentolitros 1 fentolitro 10 litros El M C V sirve para clasificar anemias como Normoc ticas M C V normal Macroc ticas M C V aumentado Microc ticas M C V disminuido Hospital Santa Manganita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana ANCHO DE DISTRIBUCION DE LOS ERITROCITOS ADE RDW CV es un par metro exclusivo del hemograma electr nico Corresponde al coeficiente de variaci n en el tama o de los eritrocitos que solo puede ser obtenido por m todos electr nicos Desde el punto de vista pr ctico el ADE es una forma electr
13. con 40X Cuente las plaquetas observadas en los 400 cuadros peque os Al enfocar se reconocer las plaquetas como peque as estructuras opacadas redondeadas o alargadas a veces con prolongaci n o dendritas Cuado se diluye la sangre con citrato de sodio 3 8 se observa gl bulos rojos y plaquetas Si se utiliza oxalato de amonio 1 se observa nicamente plaquetas CALCULO DE PLAQUETAS El n mero de plaquetas contadas se multiplica por 2 000 y as se obtendr el n mero de plaquetas en 1mm Valores normales 150 000 a 400 000 mm Es importante realizar conjuntamente el recuento de plaquetas por mmY extendido de sangre para colorear con Wright con el objeto de estudiar el tama o y la forma de las plaquetas Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana TIEMPO DE SANGRIA Pretende detectar alteraciones plaquetarias y vasculares La hemorragia provoca en la piel al lesionar peque os vasos se detiene por la liberaci n de sustancias vasoconstrictoras y por la agregaci n plaquetaria que taponan la lesi n Materiales Tensi metro lanceta desechable papel de filtro cron metro algod n y alcohol M todo Se coloca el tensi metro en el tercio superior del brazo y se infla a una presi n de 40mm de Hg Se limpia con alcohol una zona del antebrazo que est libre de venas y cicatrices Se deja secar el alcohol se hace tres punciones r pidas profu
14. dar y el coeficiente de variaci n de todos los par metros seleccionados Las medias calculadas mediante instrumentos de estos diez controles deber an estar dentro de los rangos esperados publicados por el fabricante Modo de calibrar el equipo El analizador proporciona 3 programas de calibraci n manual calibrador sangre reciente Se recomienda crear una tabla de registro para el analizador Esta tabla de registro debe contener toda la informaci n necesaria y pertinente para el analizador los elementos que se sugiere incluir en la tabla de registro son fecha de calibraci n numero de lote limites y resultados esperados Para acceder al programa de calibraci n en el equipo se entra por men se alo la opci n configuraci n y selecciono opci n contras digito numero 3000 Luego en el men entro por calibraci n y selecciono la opci n calibrador donde me muestra los par metros que se van a calibrar WBC RBC MCV PLT el numero del lote del control se recomienda utilizar el control nivel normal y la fecha de vencimiento Se debe especificar en la tabla los valores de referencia del calibrador media para cada uno de los par metros a calibrar Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana Se corre el control normal 5 veces como una muestra el analizador calculara autom ticamente los CV y los factores de calibraci n Las medias deben encontrarse en lo
15. e procede igual con el segundo y tercer tubo anotando los tiempos individuales El promedio de los tres tubos es el tiempo de coagulaci n Tambi n puede tomarse como total el tiempo de coagulaci n del tercer tubo Interpretaci n El valor normal es de 6 a 15 minutos un resultado menor indica una t cnica defectuosa un resultado mayor de 15minutos indica un defecto severo de algunos factores Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana PRUEBA DE CICLAJE O FORMACION DE CELULAS FALCIFORMES INVITRO Objetivo Demostrar la presencia de Hb S mediante la formaci n de c lulas falciformes invitro Se obtiene mediante la privaci n de ox geno a los gl bulos rojos a investigar M todo Por presi n del dedo ndice coloco una gota de sangre entre l mina y laminilla sellar con vaselina los bordes de la laminilla para evitar el secamiento de la preparaci n cubrir la l mina con una tapa de una caja de petri cubierta con papel de filtro mojado en su interior Lectura En el microscopio en 10X y posteriormente con objetivo de 40X a intervalos de tiempo diferente 15 minutos 30 minutos 1 hora 6 horas 12 horas y 24 horas La lectura se hace por presencia o no de drepanocitos Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana INDICES CORPUSCULARES Las constantes corpusculares son utilizad
16. etas MIC Indica presencia excesiva de microcitos en zona de medici n de plaquetas Verificar mediante recuento manual SCH Indica presencia de esquistocitos o agregados de plaquetas en la zona de medici n de las plaquetas Revisar la l mina SCL Indica presencia de c lulas peque as en la zona de 2 y 3 FI se debe efectuar un segundo ciclo de muestra y verificar los resultados haciendo un recuento manual de las plaquetas Alarmas de hemoglobina i Muestra que el blanco de HGB realizado durante el an lisis y el blanco de an lisis previo difieren y se encuentran fuera de los l mites de precisi n del sistema No obstante el instrumento suministra un resultado de acuerdo con el blanco previo de la HGB este resultado puede ser reportado Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana Alarmas de los leucocitos L1 N mero anormal de c lulas por agregados plaquetarios eritrocitos nucleados o linfocitos at picos en la zona de 30 60 FI en comparaci n con los linfocitos M2 Localizada en la zona de 130 160 FI presencia de linfoblastos de mielocitos de linfocitos anormales o de basofilia G1 En la zona de 160 220FI presencia de eosinofilia mielocitos y algunas veces neutrofilos polisegmentados G2 Desplazamiento anormal del pico de los granulocitos muestra anomal as en la membrana de los granulocitos y tambi n la posible
17. gativa si no se observa retracci n Observaciones La retracci n depende del n mero y funci n de las plaquetas es negativa en las trombocitopenias y trombopatias Tiene influencia el estado de los tubos el grado globular de anemia El volumen glomerular aumentada el porcentaje de fibrin geno la temperatura El tiempo que tarda la sangre en coagular debe tenerse en cuenta para la interpretaci n Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana TIEMPO DE COAGULACION DE LA SANGRE TOTAL Fundamento El contacto de la sangre venosa con una superficie extra a en este caso el vidrio produce la activaci n del factor XII que a su vez activa el factor XI continuando con el mecanismo de la coagulaci n hasta la formaci n del coagulo de fibrina Materiales Jeringa 3 tubos de vidrio ba o a 37 C cron metro algod n alcohol torniquete sangre M todo Se extrae 3ml de sangre venosa provocando que la aguja entre directamente a la vena Se pone en marcha el cron metro cuando la sangre entre a la jeringa se obtiene la muestra y se retira la aguja para depositar 1ml de sangre en cada tubo dej ndola deslizar por las paredes del tubo sin que se formen burbujas Los 3 tubos se colocan inmediatamente a 37 C cada 30 segundos se inclina el primer tubo formando un ngulo de 45 hasta que se pueda invertir completamente sin que la sangre se desplace S
18. ia arriba con lo cual genera una corriente ascendente y una fuerza que lo retarda S lo puede decirse que las variaciones de la eritrosedimentaci n se deben al modificarse la carga superficial de los eritrocitos la cual hace que se aglomeren y que estas modificaciones guarden relaci n con los componentes plasm ticos M todo Se toma la muestra anticuagulada preferiblemente con EDTA mezcl ndola previamente Se llena la pipeta de Westergren desde la marca 200 hasta 0 sin que queden burbujas Se coloca en la gradilla de Westergren en posici n fija y vertical sin ninguna inclinaci n El n mero de mm entre 0 y el menisco superior de las c lulas rojas se lee una hora despu s de haberla montado Valor Normal Ni os Var a con la edad Hombres Hasta 8mm en una hora Mujeres Hasta 15mm en una hora Causas de error El exceso de anticoagulante como oxalato la retarda y la heparina la altera Cualquier inclinaci n de la pipeta en un ngulo mayor o menor de 90 la acelera Hem lisis Las burbujas por disminuir la cantidad de sangre y dificultar su lectura Tiempo Se debe montar antes de dos horas de obtenida la muestra porque la estabilidad de la suspensi n sangu nea aumenta a medida que transcurre el tiempo Influye en el fen meno de sedimentaci n en condiciones normales Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado HEMATOLOGIA Copacabana Fibrin geno plasm
19. impedancia debe disponerse de conexi n con polo a tierra para conectar el equipo omitir esto causar interferencias especialmente con el recuento de plaquetas Cuando el n mero de c lulas es tan alto que se sale de la linealidad del equipo y esta trabajando con un equipo que no corrige con la segunda diluci n debe diluir la muestra con agua destilada diluci n 1 2 y multiplicar el resultado obtenido por 2 Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana Interpretaci n general del cuadro hem tico automatizado Los par metros relacionados con los gl bulos rojos Hb Hto de Gr VCM HCM y ADE son utilizados para el diagn stico y seguimiento de patolog as asociadas con la eficiencia en la funci n de estos el transporte gaseoso Su disminuci n constituye un grupo de patolog as conocidas como anemias y su aumento se conoce como poliglubulia Hematocrito Depende del n mero y tama o de los gl bulos rojos por tanto en estos sistemas el dato obtenido es el resultado de la relaci n directa entre el n mero de gl bulos rojos y el MCV Hemoglobina Medida directa por el m todo de cianometahemoglobina HCM Es la hemoglobina promedio por los hemat es se relaciona directamente con el hallazgo en periferia de hipocrom a CHCM Es la relaci n directa que existe entre la masa de gl bulos rojos expresada como hematocrito y su hemoglobina y debe estar en
20. mas po gt Si en el extendido se observa eritroblastos circulantes deber anotar el n mero encontrado y terminar de clasificar los 100 leucocitos y realizar la siguiente operaci n A Eritroblastos contados B N mero de gl bulos blancos por mm X B x A 100 A Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado HEMATOLOGIA Copacabana F rmula diferencial normal del adulto PNN 60 75 PNE 2 5 PNB 0 1 Linfoc 25 35 Monocit 3 8 F rmula diferencial de un ni o entre los 3 meses y los 3 a os PNN 40 50 PNE 1 5 PNB 0 1 Linfoc 50 60 Monocit 1 5 Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana RECUENTO E IDENTIFICACION DE PLAQUETAS Empleando la pipeta de gl bulos rojos llene hasta la marca 0 5 con sangre y con el l quido diluyente bien sea Citrato de sodio 3 8 u oxalato de amonio 1 hasta la marca 101 Agite inmediatamente 1 minuto con el fin de evitar formaci n de agregados plaquetarios Dejar reposar las pipetas 10 minutos si esta trabajando con oxalato de amonio 1 con el fin de lograr hem lisis total de gl bulos rojos Agitar de nuevo descartar las primeras gotas Llenar la c mara y colocarla en un ambiente h medo durante 10 minutos as las plaquetas se sedimentan Montar la c mara al microscopio enfocar con 10X y buscar el cuadrado central y enfocar
21. ndas y con 1cm de separaci n Se marca el cron metro y cada 30 segundos se limpia la sangre que corre con papel filtro teniendo cuidado de no tocar el sitio de la punci n Se anota el tiempo que tarda la hemorragia en detenerse en las tres punciones para obtener el promedio Interpretaci n El valor normal es de 2 6 minutos Se encuentra aumentado en las trombocitopenias s ndromes fibrinol ticos trastornos vasculares y despu s de la ingesta de aspirina Se debe tener cuidado de no puncionar vasos grandes que dar a un tiempo de sangr a alargado S despu s de 10 minutos la hemorragia continua se hace un vendaje con gasa est ril y seca El resultado se reporta mayor de 10 minutos Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana PRUEBA DEL TORNIQUETE SIGNO DE LAZO Determinar la fragilidad capilar al aumentar la fragilidad sangu nea La obstrucci n del flujo venoso por el aumento de la presi n puede ocasionar la ruptura de peque os vasos y la aparici n de petequias Materiales Tensi metro y cron metro M todo Se coloca el tensi metro en el brazo del paciente y se eleva a una presi n de 80mm de Hg manteniendo as por 5 minutos Despu s de este tiempo se retira el tensi metro y se espera 5 minutos para investigar la presencia de petequias en el brazo y en la mano Interpretaci n El resultado se reporta seg n el n mer
22. nica para determinar el grado de anisocitosis de los eritrocitos y en los extendidos de sangre perif rica se correlaciona en forma directa con este hallazgo morfol gico El ADE define los conceptos de homogeneidad normal y heterogeneidad elevado en la clasificaci n morfol gica de las anemias V N 11 5 14 5 PROMEDIO DE Hb CORPUSCULAR M C H se obtiene mediante la f rmula que relaciona la hemoglobina con el recuento de eritrocitos Representa la concentraci n en peso picogramos de hemoglobina en cada eritrocito M C H Hb X10 Hto VN 27 31 picogramos PROMEDIO DE LA CONCENTRACION DE Hb CORPUSCULAR M C H C se obtiene mediante la f rmula que relaciona la hemoglobina con el hematocrito Representa la concentraci n de hemoglobina expresada en gramos por decilitro de c lulas rojas empacadas Este par metro define el concepto de normocromia e hipocrom a el concepto de hipercrom a es mas hipot tico que real VN 32 36 g dl Clasifica las anemias en Normocr mica M C H C normal Hipocr mica M C H C disminuido Hipercr mica M C H C aumentado esta no existe porque el gl bulo rojo no puede contener m s hemoglobina de la que siempre contiene Hospital Santa Manganita Empresa Social del Estado Copacabana HEMATOLOGIA CLASIFICACION DE LA ANEMIA A PARTIR DE LOS INDICES ERITROCITARIOS TIPO ANEMIA MCV FL MCH pg MCHC g dl Normocitica 82 95 27 31 32
23. o Calibraci n del equipo Revisi n de controles internos Revisi n de reactivos Llamar al asesor de la casa comercial Este an lisis se reporta en la carpeta de controles de calidad externa SE ANEXA TECNICA DE LA CASA COMERCIAL Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana CONTROL DE CALIDAD EXTERNO DE PLACAS DE MALARIA Y LEISHMANIOSIS Es realizado por el Laboratorio Departamental quien env a cuatro placas dos placas de malaria y dos placas de leishmania Este envi lo realiza cada seis meses Estas placas son le das y reportadas por nuestro laboratorio y se envian los resultados nuevamente al Laboratorio Departamental de Salud P blica este laboratorio de referencia nos eval a y env a nuevamente el reporte Cuando llegan los resultados se analiza la concordancia en las lecturas y recuentos y se toman las medidas necesarias en caso de no concordancia Adem s se hace tres env os en el a o abril julio octubre al laboratorio Departamental los diez primeros d as del mes anterior de las placas positivas y negativas malaria leishmania realizadas en dichos meses El laboratorio Departamental eval a la concordancia de la lectura y las observaciones t cnicas en cuanto al extendido y la coloraci n de las placas Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana CONTROL DE CALIDAD INTE
24. o de petequias de 1 a 4 cruces M s de 10 petequias en antebrazo M s de 20 petequias en el brazo M s de 40 petequias en el antebrazo y dorso de la mano Es normal ver hasta 10 petequias en el brazo Observaciones Antes de iniciar la prueba se debe inspeccionar cuidadosamente el brazo para comprobar si hay petequias si aparecieron nuevas o aumentaron en tama o no se deben contabilizar las que aparecieron en el sitio donde se coloc el tensi metro La fragilidad capilar aumentada se asocia con la deficiencia de vitamina C trombocitopenia p rpura de Schenlein Henue p rpura senil diabetes sepsis hiperesplenismo Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana RETRACCION DEL COAGULO El co gulo formado en un tubo de vidrio retrae por acci n de las plaquetas y de la fibrina Materiales Tubo de ensayo de 12X75mm Ba o a 37 C jeringa aguja algod n alcohol torniquete M todo En un tubo de 12X75mm coloqu 2ml de sangre evitando la formaci n de burbujas Incube a 37 C observe el tubo cada 15 minutos sin agitarlo Interpretaci n Transcurrida una hora se observa la separaci n del co gulo de las paredes del tubo con presencia de suero alrededor del co gulo La retracci n o separaci n debe ser total a las 12horas el co gulo formado debe persistir 72 horas El resultado se reporta normal si hay retracci n Ne
25. o debe reportarse en porcentaje El n mero de reticulocitos es importante porque refleja la actividad de la m dula sea en general La respuesta de los reticulocitos es directamente proporcional al grado de anemia pero tambi n es un dato importante para saber si el paciente responde o no al tratamiento Valor relativo 100 x A A Nro De reticulocitos encontrados 500 El valor relativo se reporta en Valores de referencia Hombres 0 6 2 6 Mujeres 0 4 2 4 Reci n nacidos 2 5 6 5 desciende al nivel de adultos a la segunda semana Hospital Santa Margarita pura del Estado HEMATO LOGIA Valor absoluto A x B A Nro de gl bulos rojos mm cubico 500 B Nro De reticulocitos encontrados El valor absoluto se reporta por mm cubico Valores de referencia 60 000 mm cubico Porcentaje de reticulocitos corregido de reticulocitos x Hto del paciente Valor de Hto normal Nota Valor de Hto normal en hombres 45 Valor de Hto normal en mujeres 42 ndice de producci n de reticulocitos IPR IPR de reticulocitos corregido 2 VN 1 2 Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana VELOCIDAD DE SEDIMENTACION DE LOSGLOBULOS ROJOS O ERITROSEDIMENTACION El fen meno de la sedimentaci n ocurre porque los eritrocitos son m s densos que el medio circulante La ca da de los gl bulos rojos produce un desplazamiento del medio hac
26. rgarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana RECUENTO DE LEUCOCITOS Los leucocitos en contacto con el cido ac tico se visualizan f cilmente y las c lulas enucleadas como eritrocitos maduros se hemolizan La diluci n que obtenemos al llenar la pipeta hasta la marca 0 5 con sangre y llevarla hasta la maca 11 es de 1 20 y de 1 10 si se llena hasta la marca 1 con sangre Se eliminan las tres primeras gotas para descartar el l quido diluyente que queda en el tubo capilar y no ha estado en contacto con la sangre Los leucocitos se cuentan con 10X y en los cuadros de los extremos los cuales a su vez est n divididos en 16 m s peque os Es importante hacer el recuento en los dos ret culos Si la diluci n es 1 20 el n mero de leucocitos contados se multiplica por 50 para obtener el n mero de ellos por mm Hospital Santa Margarita pued del Estado H E M ATO LOG A RECUENTO DIFERENCIAL Objetivo Identificar y contar los leucocitos existentes en un extendido de sangre perif rica coloreada con Wright Enfocar con 10X los extendidos bien sea en l mina y buscar aquellos campos donde los gl bulos rojos est n bien distribuidos y se observe la morfolog a de los leucocitos Agregar aceite de inmersi n y enfocar con 100X Examinar y clasificar 100 leucocitos por sus caracter sticas morfol gicas Iniciar el recorrido siguiendo cualquiera de los dos esque
27. s rangos esperados que suministra el fabricante Los factores de calibraci n que suministra el fabricante son WBC 83 3 RBC 104 3 HGB 105 9 MCV 99 4 PLT 109 3 Hospital Santa Manganita empresa Social del stado HEMATOLOGIA PARAMETROS LEIDOS POR EL EQUIPO LEU Leucocitos mm ERI Eritr citos mm HB Hemoglobina g dl HTO Hematocrito PLT Plaquetas mm PTC Plaquetocrito VCM Volumen corpuscular medio um HCM Hemoglobina corpuscular promedio pg CCMH Concentraci n de hemoglobina corpuscular promedio g dl IDE Ancho de distribuci n eritrocitario VPM Volumen promedio de plaquetas um IDP Ancho de distribuci n plaquetario LIN Porcentaje de linfocitos MON Porcentaje de monocitos GRA Porcentaje de granulocitos LIN N mero de linfocitos MON N mero de monicitos GRAM N mero de granulocitos LIMITES DE LOS RANGOS DE LINEALIDAD WBC gt 80 000 mm RBC gt 7 5 mm PL gt 1 mill n mm HGB gt 23 g dl HTC gt 62 Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana CONTROL DE CALIDAD INTERNO Se monta diariamente un control de hematologia comercial nivel bajo medio y alto Verificando que entren los datos en los rangos establecidos y registrarlos en la hoja de seguimiento a la calibraci n del equipo FADX 13 adem s se debe anotar la conformidad o no conformidad del da
28. tico Prote nas plasm ticas totales Fracciones prote nicas y la relaci n entre las diversas fracciones entre s El tama o volumen forma y n mero de los eritrocitos Contenido de hemoglobina del eritrocito Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana HEMATOCRITOS DE WINTROBE Y CAPILAR Por un proceso de centrifugaci n a una velocidad y un tiempo determinado y con el uso de tubos especiales de vidrio obtenemos la separaci n de los diferentes componentes sangu neos conociendo la proporci n del volumen que ocupan los eritrocitos M todo de Wintrobe Sangre venosa anticoagulada con EDTA tubos de vidrio de 110mm de longitud y 3mm de di metro interno con una escala de 0 10mm de altura que va doblemente numerada en forma ascendente y descendente Aguja larga y roma 16 Micro m todo Hematocrito capilar Llena el tubo por capilaridad con sangre venosa anticoagulada previamente mezclada o con sangre sin anticoagular Sellar uno de los extremos con plastilina Centrifugar a 12 500 RPM por 3 minutos y leer en la escala o tabla Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG IA Copacabana DETERMINACION DE HEMOGLOBINA Se mide exactamente 2 ml del reactivo de Drabkin en un tubo de ensayo se mide 101 de sangre y se vierte en el Drabkin mezclar esperar 10 minutos y leer Hospital Santa Ma
29. to si el dato es no conforme se deben especificar los correctivos que se tomen Los ex menes sometidos a control interno Advia 60 son Hemoglobina Hematocrito Recuento de gl bulos rojos Recuento de gl bulos blancos Recuento de plaquetas Volumen corpuscular medio Porcentaje de polimorfonucleares Linfocitos Monocitos Los ex menes sometidos a control interno Counter 19 cp son Hemoglobina Hematocrito Recuento de gl bulos rojos Recuento de gl bulos blancos Recuento de plaquetas Volumen corpuscular medio Concentraci n de hemoglobina corpuscular media Hemoglobina corpuscular media Porcentaje de linfocitos Numero de linfocitos Porcentaje de granulocitos Numero de granulocitos Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana CONTROL DE CALIDAD EXTERNO CONTROL DE CALIDAD EXTERNO NOVALAB Consta de un control mensual En el equipo de hematolog a se corre este control como si fuera una muestra de cualquier paciente y los datos obtenidos son enviados a Novalab Se deben correr controles externos novalab cada mes se env an los resultados en las fechas establecidas y se analizan los resultados cuando son reportados por Novalab y as evaluar el funcionamiento del equipo Cada que llega un resultado se eval a cada uno de los par metros si alguno no entra en los rangos establecidos se toman las medidas correctivas necesarias com
30. toplasma es diferente para cada c lula V v V V V V Tecnolog a empleada Impedancia el ctrica Se basa en la ley Ohm y utiliza la propiedad de las c lulas de ser malas conductoras de la electricidad U Voltaje Ley Ohm U R R Resistencia Corriente Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana El sistema esta compuesto por Electrodos internos y externo c mara de reacci n y orificio de apertura Sistema de vac o diluctor y sistema de transductor discriminadores lectores e impresora Haz de luz monocr mica 550nm Las soluciones que trae el equipo son gt gt gt Agente lisante L quido diluctor isot nico conductor de electricidad y desparticularizado diluente Agente limpiador rinse Consideraciones iniciales para el an lisis automatizado gt Las muestras deben tomarse en el sistema de tubo al vac o evitar los micro co gulos de fibrina Guardar siempre la relaci n muestra anticoagulante existen tubos al vac o especiales para vol menes peque os de sangre para pacientes pedi tricos y geri tricos Tener la precauci n de esperar un tiempo de por lo menos 30 minutos despu s de tomada la muestra para que el tama o de las c lulas se estabilice con el anticoagulante EDTA tripotacico Si el resultado es urgente se debe realizar el recuento diferencial en forma manual Por ser un equipo de
31. tre 32 35 en caso contrario en periferia se debe encontrar aniso o poiquilocitosis importante o hem lisis intra vascular o podr a tratarse de un falso hallazgo por error en la toma de la muestra INFORME GRAFICO Histogramas Son gr ficas de frecuencia de vol menes celulares representado 2 en el eje de las X graficado contra un n mero relativo representado en el eje Y Por ser relativo no tiene equivalente numeral real El eje X se expresa en femtolitros El equipo reporta 3 histogramas 1 Histograma de gl bulos blancos 2 Histograma de gl bulos rojos 3 Histograma de plaquetas Hospital Santa Margarita Empresa Social del Estado H E M ATO LOG l A Copacabana Alarmas que suministra el equipo ADVIA 60 Siguiente a WBC RBC HCT y PLO Indica que el sistema ha analizado 3 veces la muestra pero que los 3 recuentos difieren y se encuentran fuera de limites de precisi n de los sistemas El resultado debe ser verificado mediante la repetici n de la muestra Indica que se hicieron 3 recuentos y 2 fueron aceptados el resultado puede ser reportado D Indica que se ha extendido el rango de linealidad para este par metro Se debe repetir la muestra usando una diluci n 1 2 y repetir cada que haya una reaparici n de la alarma H Muestra que el valor esta por encima del l mite superior L Muestra que el valor esta por debajo del l mite inferior Alarma de plaqu
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