Monoclonal Mouse
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1. aide de l appareil PT Link de Dako r f PT100 PT101 Pour plus de d tails se reporter au Guide d utilisation du PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice du produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 K8014 Les param tres suivants doivent tre utilis s pour le PT Link temp rature de pr chauffage 65 C temp rature et dur e du d masquage d pitope 97 C pendant 20 1 minutes refroidissement jusqu a 65 C Retirer le portoir a lames Autostainer contenant les lames de la cuve du PT Link et plonger imm diatement les lames dans un r cipient une cuve par ex station de rin age du PT Link r f PT109 contenant du tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 dilu a temp rature ambiante Laisser les lames dans le tampon de lavage pendant 1 a 5 minutes Coupes incluses en paraffine Comme pr paration alternative des chantillons le d paraffinage et le d masquage d pitope peuvent tre r alis s dans l appareil PT Link en utilisant une proc dure modifi e Consulter le Guide d utilisation du PT Link pour obtenir des instructions Une fois que la proc dure de coloration est termin e les coupes doivent tre d shydrat es claircies et mont es l aide d un milieu de montage permanent Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traite2. protocol as the patient specimens The positive control tissue should include rhabdomyosarcoma and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 The cellular staining pattern is nuclear although traces of cytoplasmic staining are acceptable Normal tissues The antibody labels the nuclei of myoblasts from human fetal limbs whereas no reactivity is observed in adult skeletal muscle 1 Abnormal tissues The antibody labeled the majority of routinely processed rhabdomyosarcomas and Wilms tumors No immunoreactivity has been observed in Ewing s sarcoma pPNET or in neuroblastomas Nuclear expression of myogenin has been reported to be inversely related to the degree of cellular differentiation of rhabdomyosarcoma tumor cells 1 Ref 15067 Pour utilisation diagnostique in vitro L anticorps FLEX Monoclonal Mouse Anti Myogenin Clone F5D Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin a tre utilis en immunohistochimie avec les appareils Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps marque la myog nine dans les tissus sains et n oplasiques tels que le rhabdomyosarcome et la tumeur de Wilms 1 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morph
3. ul Anwendungsvolumen Autoprogramm Myog ohne Gegenf rbung oder MyogH mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dies gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte bei Raumtemperatur durchf hren N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die Protokolle auf dem verwendeten Autostainer Ger t nicht verf gbar sind wenden Sie sich an den technischen Kundendienst von Dako Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenfarbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protok
4. 600 Glostrup Denmark Tel 805 566 6655 Tel 45 4485 9500 Fax 805 566 6688 Fax 45 4485 9595 Technical Support 800 424 0021 Customer Service 800 235 5763 www dako com Consult instructions for use Consulter les instructions d utilisation Gebrauchsanweisung beachten Authorized representative in the European Community Repr sentant Autoris dans la Communaut Europ enne Autorisierter Repr sentant in der EU 307694EFG_001 6 6
5. Antik rper erkennt ein Epitop das in der Aminos ure Region 138 158 des Myogenin Proteins lokalisiert ist er markiert nachweislich Myogenin in kultivierten Myotuben des Menschen der Maus und der Ratte und in Gewebeproben von neugeborenen Katzen M usen und Ratten 6 1 F r Fachpersonal 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 C aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfallsdatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien nicht entsprechend den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen die Bedingungen vom Anwender gepr ft werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle 307694EFG_001 4 6 Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Farbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der Farbung Leistungsmer
6. Va ko English Intended use Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied 118551 001 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Myogenin Clone F5D Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code 1S067 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Myogenin Clone F5D Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody labels myogenin protein in normal and neoplastic tissue such as rhabdomyosarcoma and Wilms tumor 1 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist The myogenin gene is a member of a family of myogenic regulatory genes which includes MyoD myf5 and MRF4 These genes encode a set of transcription factors which are essential for muscle development Transfections of myogenin into multipotential mesodermal cells have been shown to convert the mesodermal cells to myoblasts 2 4 Expression of myogenin is restricted to cells of skeletal muscle origin 2 The myogenin protein has been shown to exist as a dimer or tetramer but is most commonly present in higher ord
7. auf 65 C abk hlen Das Autostainer Objekttr gergestell mit den Objekttr gern aus dem PT Link Beh lter herausnehmen und die Objekttr ger sofort in einen Beh lter z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd nntem auf Zimmertemperatur gebrachtem EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 eintauchen Die Objekttr ger f r 1 5 Minuten im Waschpuffer belassen Paraffineingebettete Schnitte Alternativ k nnen Entparaffinierung und Epitopdemaskierung im PT Link unter Verwendung eines modifizierten Verfahrens durchgef hrt werden Weitere Informationen finden Sie im PT Link Benutzerhandbuch Nach Abschluss des F rbeverfahrens m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und unter Verwendung eines permanenten Fixiermittels auf die Objekttr ger aufgebracht werden Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder w hrend des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von Dako Silanized Slides Code Nr S3003 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software von Autostainer Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 pl Anwendungsvolumen oder FLEXRTU3 300
8. edure including materials required but not supplied Staining interpretation Performance characteristics Fran ais Utilisation pr vue R sum et explication 118551 001 used for PT Link Pre heat temperature 65 C epitope retrieval temperature and time 97 C for 20 1 minutes cool down to 65 C Remove Autostainer slide rack with slides from the PT Link tank and immediately dip slides into a jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 containing diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 Leave slides in Wash Buffer for 1 5 minutes Paraffin embedded sections As alternative specimen preparation both deparaffinization and epitope retrieval can be performed in the PT Link using a modified procedure See the PT Link User Guide for instructions After the staining procedure has been completed the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of Dako Silanized Slides Code 3003 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus in
9. er complexes 5 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone F5D 6 Isotype IgG1 kappa Rat myogenin peptide aa 73 94 conjugated to carrier protein and fusion peptide containing myogenin aa 30 224 6 The antibody recognizes an epitope located in amino acid region 138 158 of the myogenin protein and has been found to label myogenin in human mouse and rat cultured myotubes and in neonatal cat mouse and rat tissue specimens 6 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN3 a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solu
10. gulatory proteins myogenin and MyoD1 in small blue round cell tumors of childhood Am J Pathol 1995 147 1799 810 Wright WE Sassoon DA Lin VK Myogenin a factor regulating myogenesis has a domain homologous to MyoD Cell 1989 56 607 17 Aurad F Pinset C Chafey P Gros F Monterras D Myf5 MyoD myogenin and MRF4 myogenic derivatives of the embryonic mesenchymal cell line C3H10T1 2 exhibit the same adult muscle phenotype Differentiation 1994 55 185 92 Weintraub H Davis R Tapscott S Thayer M Krause M Benezra R et al The myoD gene family Nodal point during specification of the muscle cell lineage Science 1991 251 761 6 Farmer K Catala F Wright WE Alternative multimeric structures affect myogenin DNA binding activity J Biol Chem 1992 267 5631 6 Wright WE Dac Korytko I Farmer K Monoclonal antimyogenin antibodies define epitopes outside the DHLH domain where binding interferes with protein protein and protein DNA interaction Dev Genet 1996 19 131 8 Temperature limitation In vitro diagnostic medical device Limites de temp rature Dispositif m dical de diagnostic in vitro ml Zulassiger Temperaturbereich In vitro Diagnostikum Lec REP Dako North America Inc Dako Denmark A S Batch code Contains sufficient for lt N gt tests 6392 Via Real Code du lot Contenu suffisant pour lt n gt tests Chargenbezeichnung Inhalt ausreichend f r n Ans tze Produktionsvej 42 Carpinteria California 93013 USA DK 2
11. kmale 118551 001 Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten Farbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erklaren lasst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verstandigen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um Starke geschnitten werden Es ist eine Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER Verfahren erforderlich Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 K8014 erzielt werden Entparaffinierte Schnitte Die Vorbehandlung entparaffinierter formalinfixierter paraffineingebetteter Gewebeschnitte sollte mit dem System Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 erfolgen Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 K8014 durchf hren F r das PT Link System sollten die folgenden Parameter verwendet werden Vorw rmtemperatur 65 C Temperatur und Zeit f r Epitopdemaskierung 97 C f r 20 1 Minuten
12. le pathologiste qui r alise l evaluation d sire une intensit de coloration diff rente un ingenieur d application un sp cialiste de l assistance technique de Dako peut 307694EFG_001 3 6 Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance Deutsch Zweckbestimmung Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat Vorsichtsma nahmen Lagerung 118551 001 tre contact pour obtenir des informations sur la reprogrammation du protocole V rifier que les performances du protocole modifi sont toujours valides en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit la section Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l h matoxyline l aide du produit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons de patients Le tissu de contr le positif doit comprendre un rhabdomyosarcome et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action semblables ceux d crits pour ce tissu la section Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le r actif de contr le n gatif recommand est le produit FLEX Negative C
13. ment ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames Dako Silanized Slides r f S3003 Le syst me de visualisation recommand est le syst me EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 Les tapes de coloration et les temps d incubation sont pr programm s dans le logiciel des appareils Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTU3 volume de distribution de 300 uL Programme automatique Myog sans contre coloration ou MyogH avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es a temp rature ambiante Pour plus de d tails se reporter au Manuel de l op rateur sp cifique l appareil Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l appareil Dako Autostainer utilis contacter l assistance technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si
14. oll wie die Patientenproben getestet werden Als positive Kontrole sollte Rhabdomyosarkomgewebe verwendet werden und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Das zellulare Farbemuster ist nuklear Es sind jedoch auch Spuren von zytoplasmatischer Farbung zulassig Normale Gewebe Der Antik rper markiert die Kerne von Myoblasten von menschlichen f talen Extremit ten wohingegen keine Reaktion im Skelettmuskelgewebe von Erwachsenen beobachtet werden konnte 1 Pathologische Gewebe Der Antik rper markiert die Mehrzahl von routinem ig aufbereiteten Rhabdomyosarkomen und Wilms Tumoren Es wurde keine Immunoreaktivitat beim Ewing Sarkom Peripheren Primitiven Neuroektodermalen Tumoren PNET oder bei Neuroblastomen beobachtet Berichten zufolge steht die nukle re Expression von Myogenin in umgekehrter Beziehung zum Grad der Zelldifferenzierung von Tumorzellen des Rhabdomyosarkoms 1 307694EFG_001 5 6 References Bibliographie Literaturangaben Catalogue number R f rence du catalogue Bestellnummer Manufacturer Fabricant Hersteller Use by Utiliser jusque Verwendbar bis PT0020 Rev C Edition 04 08 118551 001 Wang NP Marx J McNutt MA Rutledge JC Gown AM Expression of myogenic re
15. ologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi Le g ne de la myog nine fait partie de la famille des g nes de r gulation de la myog n se comprenant MyoD myf5 et MRF4 Ces g nes codent pour un ensemble de facteurs de transcription essentiels au d veloppement musculaire Il a t montr que la transfection de myog nine dans des cellules m sodermiques pluripotentes transforme les cellules m sodermiques en myoblastes 2 4 L expression de la myog nine est limit e aux cellules d origine musculaire squelettique 2 Il a t montr que la myog nine existe sous forme de dim re ou de t tram re mais elle est le plus fr quemment pr sente sous forme plus complexe 5 Se reporter aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du systeme de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales 307694EFG_001 2 6 R actifs fournis Immunog ne Sp cificit Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais n
16. on fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 118551 001 Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone F5D 6 Isotype IgG kappa Peptide issu de la myog nine de rat acides amin s 73 a 94 conjugu a une prot ine de transport et un peptide de fusion contenant les acides amin s 30 a 224 de la myog nine 6 L anticorps reconnait un pitope situ dans une r gion regroupant les acides amin s 138 a 158 de la myog nine et il a t montr qu il marque la myog nine dans des myotubes en culture humains de souris et de rat et dans des chantillons tissulaires n onataux de chat de souris et de rat 6 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaNs un produit chimique hautement toxique sous sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri
17. ontrol Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus r f IS750 Le sch ma de coloration cellulaire est nucl aire bien que des traces de coloration cytoplasmique soient acceptables Tissus sains L anticorps marque les noyaux de myoblastes issus de membres provenant de foetus humains alors qu aucune r activit n est observ e avec le muscle squelettique adulte 1 Tissus tumoraux L anticorps a marqu la majorit des rhabdomyosarcomes et des tumeurs de Wilms trait s de mani re habituelle Aucune r activit avec l anticorps n a t observ e pour le sarcome d Ewing la tumeur neuroectodermique primitive p riph rique pPNET ou les neuroblastomes Il a t rapport que l expression nucl aire de la myog nine est inversement li e au degr de diff renciation cellulaire des cellules tumorales des rhabdomyosarcomes 1 Code Nr 15067 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Myogenin Clone F5D Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Geraten bestimmt Dieser Antik rper markiert Myogenin Protein in normalem und neoplastischem Gewebe wie z B beim Rhabdomyosarkom und beim Wilms Tumor 1 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden Farbung sollte durch morphologische Studien mit geeigneten Kontrollen erganzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankenge
18. pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date limite de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patients Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Le pr traitement avec un d masquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire Pour obtenir des r sultats optimaux pr traiter les tissus l aide du produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 K8014 Coupes d paraffin es Il est recommand de pr traiter les coupes de tissus fix s au formol et inclus en paraffine qui ont t d paraffin es l
19. schichte und anderer diagnostischer Tests des Patienten vorgenommen werden Das Myogenin Gen geh rt zur Familie der Myogenic Regulatory Factors die MyoD myf5 und MRF4 einschlie t Diese Gene kodieren eine Gruppe von Transkriptionsfaktoren die fur die Entwicklung der Muskulatur notwendig sind Es wurde nachgewiesen dass Transfektion von Myogenin in multipotene mesodermale Zellen die mesodermalen Zellen in Myoblasten umwandelt 2 4 Die Expression von Myogenin ist auf Zellen beschrankt die aus den Skelettmuskeln stammen 2 Es wurde nachgewiesen dass das Myogenin Protein als Dimer oder Tetramer vorkommt jedoch am haufigsten in Komplexen mit mehreren Untereinheiten anwesend ist 5 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako bzw den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualitatskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der Farbung 9 Allgemeine Beschrankungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Clone F5D 6 Isotyp IgG Kappa An ein Tr gerprotein konjugiertes Ratten Myogeninpeptid Aminos uren 73 94 und ein Fusionspeptid das Myogenin Protein Aminos uren 30 224 enth lt 6 Der
20. struments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram Myog without counterstaining or MyogH with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same
21. tion should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 C Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 K8014 Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 K8014 The following parameters should be 307694EFG_001 1 6 Staining proc
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