FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Melan-A Clone A103
Contents
1. FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 Les tapes de coloration et d incubation sont pr programm es dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTUS3 volume de distribution de 300 uL Autoprogram MelanA sans contre coloration ou MelanAH avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela garantit des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur la plateforme Dako Autostainer utilis e contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi2. 4 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Melan A Clone A103 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS633 ENGLISH Intended use For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Melan A Clone A103 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody is useful for the identification of melanomas 1 2 and if melanoma is ruled out for adrenocortical carcinomas 3 4 The antibody is also applicable as a useful marker for angiomyolipomas 5 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Synonym for antigen MART 1 Summary and explanation Melan A isolated as a melanoma specific antigen is a transmembrane protein composed of 118 amino acids with uncertain function 1 The Melan A gene was cloned from a human melanoma cell line and its expression on melanomas is recognized by autologous cytotoxic T cells 6 Melan A is expressed in skin retina and the majority of cultured melanocytes and melanomas whereas a vast variety of other tissues and cancers tested do not express Melan A 1 6 7 However Melan A is expressed in angiomyolipomas 5 Along with Melan A seven other m
3. autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi Synonyme de l antig ne MART 1 Resume et explication Le Melan A isol en tant qu antigene sp cifique des melanomes est une prot ine transmembranaire constitu e de 118 acides amin s dont la fonction est incertaine 1 Le gene Melan A a t clon partir d une lign e cellulaire de melanome humain et son expression sur les m lanomes est reconnue par les lymphocytes T cytotoxiques autologues 6 Le Melan A est exprim dans la peau la r tine et la majorit des m lanocytes et m lanomes mis en culture tandis qu une grande vari t d autres tissus et de cancers test s n expriment pas le Melan A 1 6 7 Cependant le Melan A est exprim dans les angiomyolipomes 5 Outre le Melan A sept autres antig nes des melanomes ont t identifi s MAGE 1 MAGE 3 tyrosinase gp100 gp75 BAGE 1 et GAGE 1 qui sont tous reconnus par les lymphocytes T cytotoxiques autologues 1 Se r f rer aux nstructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales R actifs fournis Anticorps monoclo
4. est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide de EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre la peau saine et le m lanome malin et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Interpr tation de la coloration Le sch ma de coloration cellulaire est cytoplasmique Caract ristiques de performance Tissus sains L anticorps marque la peau alors que l estomac le c lon le poumon le foie la rate le rein le testicule la vessie le sein l ovaire les cellules du muscle lisse et les tissus adipeux ne sont pas marqu s par l anticorps 1 5 Il a t signal que les cellules productrices de st ro des du cortex surr nal de l ovaire et du testicule taient marqu es par l anticorps 2 Tissus tumoraux Pour
5. 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlich Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Ob
6. Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte gesundes Hautgewebe und maligne Melanomzellen enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Auswertung der F rbung Das zellul re F rbemuster ist zytoplasmatisch Leistungsmerkmale Gesundes Gewebe Der Antik rper markiert Hautproben dagegen werden Proben von Magen Dickdarm Lunge Leber Milz Niere Hoden Harnblase Brus
7. Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended Staining procedure including materials required but not supplied The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTUS3 300 uL dispense volume Autoprogram MelanA without counterstaining or MelanAH with
8. counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer platform please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics 115277 002 IS633 MNI 2009 12 04 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient s
9. les m lanomes m tastatiques 16 cas sur 21 ont t marqu s par l anticorps avec un marquage cytoplasmique positif homog ne dans 80 90 des cellules de m lanomes l exception d un cas qui a pr sent une coloration focale 1 Lors d une autre tude l anticorps a marqu 10 n vi m lanocytaires b nins sur 10 7 m lanomes primaires sur 10 et 61 m lanomes m tastatiques sur 75 2 Sur 111 carcinomes principalement des ad nocarcinomes et des carcinomes cellules squameuses 40 tumeurs cellules germinales et 33 tumeurs pith lio des non melanocytaires diverses aucun marquage par l anticorps n a t observ L anticorps a marqu 5 ad nomes corticosurr naux sur 5 16 carcinomes corticosurr naux primaires sur 16 et 13 carcinomes corticosurr naux m tastatiques sur 13 ainsi que 4 tumeurs des cellules de Leydig du testicule sur 4 et 3 tumeurs des cellules de Sertoli Leydig de l ovaire sur 4 3 Lors d une autre tude portant sur 316 cas dont 21 tumeurs corticosurr nales 16 carcinomes m tastatiques de la surr nale 10 ph ochromocytomes et 269 carcinomes extra surr naux l anticorps a marqu 14 ad nomes corticosurr naux sur 14 7 carcinomes corticosurr naux sur 7 0 carcinome m tastatique de la surr nale sur 16 et 0 ph ochromocytome sur 10 Parmi les 269 carcinomes extra surr naux un seul carcinome s reux de l ovaire a t marqu 4 Lors d une tude 18 angiomyolipomes sur 18 ont t ma
10. tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conservation Conserver entre 2 et 8 Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il ny a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probleme li l anticorps contacter l assistance technique de Dako Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L amp paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pr traitement avec demasquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Targ
11. astatic adrenal cortical carcinomas and also 4 4 Leydig cell tumors of the testis and 3 4 Sertoli Leydig cell tumors of the ovary were labeled by the antibody 3 In another study of 316 cases including 21 adrenal cortical tumors 16 metastatic carcinomas to the adrenal 10 pheochromocytomas and 269 extra adrenal carcinomas the antibody labeled 14 14 adrenal cortical adenomas 7 7 adrenal cortical carcinomas 0 16 metastatic carcinomas to the adrenal and 0 10 pheochromocytomas Of the 269 extra adrenal carcinomas a single ovarian serous carcinoma was labeled 4 In a study of 18 angiomyolipomas all 18 were labeled by the antibody 5 In another report all three angiomyolipomas tested were labeled by the antibody 2 FRANCAIS Utilisation pr vue Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Melan A Clone A103 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps est utile pour l identification des m lanomes 1 2 et si le m lanome est exclu des carcinomes corticosurr naux 3 4 L anticorps est galement applicable comme marqueur pour les angiomyolipomes 5 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d
12. be und Karzinome Melan A nicht exprimiert 1 6 7 Melan A wird jedoch in Angiomyolipomen exprimiert 5 Neben Melan A wurden noch sieben weitere Melanomantigene identifiziert MAGE 1 MAGE 3 Tyrosinase gp100 gp75 BAGE 1 und GAGE 1 Diese werden alle von autologen zytotoxischen T Zellen erkannt 1 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Geliefertes Reagenz Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L NaN enth lt Klon A103 Isotyp IgG1 Kappa Immunogen Rekombinantes Protein in E coli exprimiert und Melan A entsprechend 1 Spezifit t Beim Western Blotting von Zelllysaten aus Melan A mRNA positiven Zelllinien markiert der Antik rper ein Proteinpaar von 20 22 kDa w hrend in Melan A mRNA negativen Zellinien keine Markierung nachgewiesen werden konnte 1 In den Immunpr zipitaten der Melan A positiven Zelllinien SK MEL 13 und SK MEL 19 markiert der Antik rper ein Melan A entsprechendes Proteinpaar mit einem Gewicht von 20 22 kDa w hrend in Melanom Zelllinien welche Me
13. e PG Brichard V Van Pel A W lfel T Schneider J Traversari C et al A new gene coding for a differentiation antigen recognized by autologous cytolytic T lymphocytes on HLA A2 melanomas J Exp Med 1994 180 35 42 7 Kawakami Y Eliyahu S Delgado CH Robbins PF Rivoltini L Topalian SL et al Cloning of the gene coding for a shared human melanoma antigen recognized by autologous T cells infiltrating into tumor Proc Natl Acad Sci 1994 91 3515 9 Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole Catalogue number Temperature limitation Use by Reference catalogue Limites de temp rature Utiliser avant Bestellnummer Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis In vitro diagnostic medical device Contains sufficient for lt n gt tests Manufacturer Dispositif medical de diagnostic in vitro Contenu suffisant pour lt n gt tests Fabricant In vitro Diagnostikum Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Consult instructions for use Batch code Voir les instructions d utilisation Numero de lot Gebrauchsanweisung beachten Chargenbezeichnung 115277 002 IS633 MNI 2009 12 04 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
14. elanoma antigens have been identified MAGE 1 MAGE 3 tyrosinase gp100 gp75 BAGE 1 and GAGE 1 which are all recognized by autologous cytotoxic T cells 1 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Reagent provided Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L NaN Clone A103 Isotype IgG1 kappa Immunogen Recombinant protein expressed in E coli corresponding to Melan A 1 Specificity In Western blotting of cell lysates from Melan A mRNA positive cell lines the antibody labels a protein doublet of 20 22 kDa whereas no labelling is detected in Melan A mRNA negative cell lines 1 In immunoprecipitates of Melan A positive cell lines SK MEL 13 and SK MEL 19 the antibody labels a protein doublet of 20 22 kDa corresponding to Melan A whereas no precipitation is detected in Melan A mRNA negative melanoma cell lines 1 Precautions 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing t
15. et Retrieval Solution High pH 50x Ref K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Ref K8010 K8004 Remarque apr s coloration les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires d paraffin es fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides R f K8020 115277 002 IS633 MNI 2009 12 04 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni Le syst me de visualisation recommand est le EnVision
16. inde 0 von 16 metastatischen Karzinomen der Nebenniere und 0 von 10 Ph ochromozytomen Von den brigen 269 extraadrenalen Karzinomen wurde nur ein einziger Fall eines ser sen Eierstock Karzinoms markiert 4 In einer Studie mit 18 Angiomyolipomen wurden alle 18 F lle durch den Antik rper markiert 5 Ein weiterer Bericht schildert 3 untersuchte Angiomyolipome welche ausnahmslos durch den Antik rper markiert wurden 2 References References Literatur Chen Y T Stockert E Jungbluth A Tsang S Coplan KA Scanlan MJ et al Serological analysis of Melan A MART 1 a melanocyte specific protein homogeneously expressed in human melanomas Proc Natl Acad Sci 1996 93 5915 9 2 Jungbluth AA Busam KJ Gerald WL Stockert E Coplan KA Iversen K et al An anti Melan A monoclonal antibody for the detection of malignant melanoma in paraffin embedded tissues Am J Surg Pathol 1998 22 595 602 3 Busam KJ Iversen K Coplan KA Old LJ Stockert E Chen Y T et al Immunoreactivity for A103 an antibody to Melan A Mart 1 in adrenocortical and other steroid tumors Am J Surg Pathol 1998 22 57 63 4 Loy TS Phillips RW Linder CL A103 immunostaining in the diagnosis of adrenal cortical tumors Arch Pathol Lab Med 2002 126 170 2 5 Jungbluth AA Iversen K Coplan K Williamson B Chen Y T Stockert T et al Expression of melanocyte associated markers gp 100 and Melan A MART 1 in angiomyolipomas Virchows Arch 1999 434 429 35 6 Couli
17. jekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram MelanA ohne Gegenf rbung oder MelanAH mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen
18. lan A mRNA negativ sind keine Pr zipitation nachgewiesen wird 1 Vorsichtsma nahmen 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Lagerung Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen 115277 002 IS633 MNI 2009 12 04 p
19. nal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone A103 Isotype IgG kappa Immunogene Prot ine recombinante exprim e dans E coli correspondant au Melan A 1 Specificite Lors d analyse par Western blot de lysats cellulaires provenant de lign es cellulaires positives ARNm du Melan A l anticorps marque un doublet prot ique de 20 22 kDa alors qu aucun marquage n est d tect dans les lign es cellulaires n gatives l ARNm du Melan A 1 Dans les immunopr cipit s de lign es cellulaires SK MEL 13 et SK MEL 19 positives au Melan A l anticorps marque un doublet prot ique de 20 22 kDa correspondant au Melan A alors qu aucune pr cipitation n est d tect e dans les lign es cellulaires n gatives l ARNm du Melan A 1 Pr cautions 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent
20. o form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Storage Store at 2 8 Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support Specimen preparation including materials required but not supplied The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004
21. pecimens The positive control tissue should include normal skin and malignant melanoma and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 Staining interpretation The cellular staining pattern is cytoplasmic Performance characteristics Normal tissues The antibody labels skin whereas stomach colon lung liver spleen kidney testis urinary bladder breast ovary smooth muscle and adipose tissues are not labelled by the antibody 1 5 The steroid producing cells of adrenal cortex ovary and testis have been reported to be labeled by the antibody 2 Abnormal tissues In metastatic melanomas 16 21 cases were labeled by the antibody showing positive homogeneous cytoplasmic staining in gt 80 90 of melanoma cells except one which displayed focal staining 1 In another study of 10 benign melanocytic nevi 10 primary melanomas and 75 metastatic melanomas the antibody labelled 10 10 benign melanocytic nevi 7 10 primary melanomas and 61 75 metastatic melanomas 2 Among 111 carcinomas mainly adenocarcinomas and squamous cell carcinomas 40 germ cell tumors and 33 miscellaneous non melanocytic epithelioid tumors none were labelled by the antibody The antibody labeled 5 5 adrenal cortical adenomas 16 16 primary and 13 13 met
22. rqu s par l anticorps 5 Dans un autre rapport les trois angiomyolipomes test s ont t marqu s par l anticorps 2 DEUTSCH Zweckbestimmung Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Melan A Clone A103 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper dient zur Erkennung von Melanomen 1 2 und falls Melanome ausgeschlossen werden k nnen Karzinomen der Nebennierenrinde 3 4 Der Antik rper kann auch als n tzlicher Marker f r Angiomyolipome dienen 5 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem en Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden Synonym f r das Antigen MART 1 Zusammenfassung und Erkl rung Melan A isoliert als ein melanomspezifisches Antigen ist ein Transmembranprotein mit ungekl rter Funktion das aus 118 Aminos uren besteht 1 Das Melan A Gen wurde aus einer menschlichen Melanomzelllinie geklont und seine Expression auf Melanomen wird von autologen zytotoxischen T Zellen erkannt 6 Melan A wird auf Zellen der Haut der Netzhaut und dem Gro teil der Melanozyten und Melanome aus Kultur exprimiert w hrend der weit berwiegende Teil anderer untersuchter Gewe
23. t Eierst cken glatter Muskulatur und Fettgeweben nicht markiert 1 5 Die steroidproduzierenden Zellen von Nebennierenrinde Eierst cken und Hoden wurden Berichten zufolge durch den Antik rper markiert 2 Pathologisches Gewebe Bei metastatischen Melanomen wurden 16 von 21 F llen durch den Antik rper markiert und zeigten eine positive homogene zytoplasmatische F rbung in ber 80 90 der Zellen Nur in einem Fall kam es zu einer rtlich begrenzten F rbung 1 In einer weiteren Studie mit 10 benignen Melanozyten Naevi 10 prim ren und 75 metastatischen Melanomen markierte der Antik rper 10 von 10 F llen der benignen Melanozyten Naevi 7 von 10 der prim ren und 61 von 75 der metastatischen Melanome 2 Von 111 Karzinomen haupts chlich Adenokarzinomen und Plattenepithelkarzinomen 40 Keimzelltumoren und 33 diversen epitheloiden Nicht Melanozyten Tumoren wurde kein einziger Fall durch den Antik rper markiert Der Antik rper markierte 5 von 5 Adenomen der Nebennierenrinde 16 von 16 prim ren und 13 von 13 metastatischen Nebennierenrindenkarzinomen sowie 4 von 4 Leydig Zelltumoren der Hoden und 3 von 4 Sertoli Leydig Zelltumoren der Eierst cke 3 In einer weiteren Studie mit 316 untersuchten F llen darunter 21 Nebennierenrindentumore 16 in die Nebenniere metastasierende Karzinome 10 Ph ochromozytome und 269 extraadrenale Karzinome markierte der Antik rper 14 von 14 Adenomen der Nebennierenrinde 7 von 7 Karzinomen der Nebennierenr
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