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HCG ELISA - DRG Diagnostics GmbH

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1. Utilisez uniquement la version valide d instructions d utilisation qui est incluse dans le kit Les informations concernant la toxicit des r actifs contenus dans ce kit sont pr sent es dans la fiche de s curit Material Safety Data Sheets Tous les r actifs de ce kit contenant du s rum ou du plasma humain ont t test s avec des r sultats n gatifs pour le VIH VII le HBsAg et le HCV selon les normes FDA en vigueur N anmoins lors de leur utilisation tous les r actifs de ce kit doivent tre manipul s avec pr caution Eviter les contacts avec la Stop Solution celle ci contient 0 5 M de H gt SO Cela pourrait engendrer irritations ou brdlures de la peau Ne jamais pipeter avec la bouche et viter tout contact de la peau ou des muqueuses avec les r actifs ou les chantillons Ne pas fumer manger boire ou utiliser des produits cosm tiques dans les zones o les chantillons ou le kit ont t mani s Porter des gants d examen lors de l utilisation des chantillons ou des r actifs Une contamination microbienne des chantillons ou des r actifs pourrait fausser les r sultats L utilisation de ce kit devra tre en accord avec les normes ou recommandations nationales de s curit en vigueur concernant les produits risque biologique Ne pas utiliser les r actifs au del de la date d expiration inscrite sur l emballage Tous les volumes indiqu s doivent tre sc
2. Durante las primeras seis semanas de embarazo las concentraciones de hCG en suero se doblan aproximadamente de dos d as Despu s del parto los niveles de hCG caen r pidamente y desaparecen completamente a los pocos d as Niveles muy bajos de hCG pueden presentarse en embarazos ect picos ver Braunstein G a o First trimester chorionic gonadotropin measurements as an aid in the diagnosis of early pregnancy disorders In American Journal of Obstetrics and Gynaecology V 131 No 1 pp 25 32 May 1978 St Louis mientras que condiciones como coriocarcinoma neoplasmas trofoblasticos o no trofoblasticos o mola hidatiforme pueden mostrar concentraciones muy elevadas de hCG PRECAUCI N 1 Para la detecci n del embarazo en suero se utiliza un ensayo cualitativo con un punto limite de 50 mIU mL Deben repetirse los resultados negativos o dudosos con una muestra fresca obtenida al menos 48 horas tras la primera muestra 2 Se ha visto que los ensayos inmunol gicos de embarazo pueden dar falsos resultados en casos de varias enfermedades como artritis reumatoide y mielomas En esos casos la interpretaci n de los ensayos de embarazo han de realizarse cuidadosamente Vers 8 0 2014 11 vk 29 DRG HCG ELISA EIA 1469 8 CONTROL DE CALIDAD Se recomienda usar muestras control de acuerdo con las leyes estatales y federales El uso de muestras control se recomienda para asegurar la validez diaria de los resultados Usar controles
3. Il procedimento del test identico a quello del metodo quantitativo soltanto i passaggi 8 e 9 sono omessi 6 4 Rilevamento dei risultati quantitativo 1 Determinare i valori medi della densit ottica per ogni set di standard controlli e campioni Costruire una curva standard riportare i valori medi della densit ottica DO di ogni standard contro la rispettiva concentrazione dove i valori delle DO si devono trovare sull asse verticale Y e le concentrazioni sull asse orizzontale X 3 Utilizzando il valore medio delle DO per ogni campione si determina la rispettiva concentrazione dalla curva standard 4 Metodo automatico valori riportati in questo istruzioni per l uso sono stati determinati tramite l equazione a 4 parametri methodi preferiti sono 4 Parameter Rodbard oppure 4 Parameter Marquardt Altri funzioni usati per l elaborazioni dei dati possono dare risultati leggermente differenti 5 La concentrazione dei campioni pu essere determinata direttamente dalla curva standard Campioni con una concentrazione pi elevata dello standard pi concentrato devono essere diluiti Di questo fattore di diluizione deve essere tenuto conto per il calcolo della concentrazione 6 4 1 Esempio di una curva standard tipica seguenti dati sono a scopo dimostrativo soltanto e non possono sostituire i dati generati dall eseguimento del test Densit ottiche 450 nm Standard 1 6 miUimL Standard 2_ 50 miumL Standard 3_ 20
4. Questi componenti devono essere magazzinati fino ala soluzione del problema Dopo di che essi devono essere smaltiti secondo le norme ufficiali Vers 8 0 2014 11 vk 19 DRG HCG ELISA EIA 1469 5 CAMPIONI Siero o plasma EDTA Eparina or citrate plasma pu essere usato per questo test Non usare campioni emolitici itterici o lipemici Attenzione Se i campioni contengono sodio azide non devono essere utilizzati per questo test 5 1 Collezione dei campioni Siero Collezionare sangue tramite puntura venale p es Sarstedt Monovette per siero far coagulare e separare il siero centrifugando a temperatura ambiente Non centrifugare prima che la coagulazione sia completata Campioni di pazienti con una terapia anticoagulante possono richiedere pi tempo per la coagulazione Plasma Il sangue dovrebbe essere collezionato in tubetti da centrifuga contenenti un anticoagulante p es Sarstedt Monovette con un adeguata preparazione per il plasma e centrifugando immediatamente dopo la puntura 5 2 Magazzinaggio dei campioni I campioni dovrebbero essere magazzinati ben chiusi fino a 5 giorni a 2 C a 8 C Campioni magazzinati per un periodo pi lungo dovrebbero essere congelati solo una volta a 20 C prima dell analisi Congelare soltanto una volta Invertire campioni scongelati alcune volte prima dell uso 5 3 Diluizione dei campioni Se in un campione di siero viene trovata una concentrazione oltre lo standard piu alto
5. 2 Inter Assay The between assay variability is shown below 9 5 Recovery Samples have been spiked by adding hCG solutions with known concentrations in a 1 1 ratio The expected values were calculated by addition of half of the values determined for the undiluted samples and half of the values of the known solutions The Recovery has been calculated by multiplication of the ratio of the measurements and the expected values with 100 100 50 111 30 95 25 97 100 50 94 200 99 500 50 9 6 Linearity Dilution Mean Conc mIU mL Recovery 88 86 90 96 90 86 93 99 94 Vers 8 0 2014 11 vk 9 DRG HCG ELISA EIA 1469 10 LIMITATIONS OF USE Reliable and reproducible results will be obtained when the assay procedure is performed with a complete understanding of the package insert instruction and with adherence to good laboratory practice Any improper handling of samples or modification of this test might influence the results 10 1 Interfering Substances Haemoglobin up to 4 mg mL Bilirubin up to 0 5 mg mL and Triglyceride up to 30 mg mL have no influence on the assay results 10 2 Drug Interferences Until today no substances drugs are known to us which have an influence to the measurement of hCG in a sample 10 3 High Dose Hook Effect No hook effect was observed in this test up to13 300 mlU mL of hCG 11 LEGAL ASPECTS 11 1 Reliability of Results The test must be performed
6. apr s jour de la validit amp des r sultats Utiliser les contr les de valeurs normales et pathologiques Les contr les et les r sultats correspondants issus du laboratoire QC sont mentionn s dans le certificat QC fourni avec le kit Les valeurs et les limites mentionn es sur la fiche QC font toujours r f rence au lot de kit courant et doivent tre utilis es pour une comparaison directe avec les r sultats Il est galement recommand d utiliser les programmes d valuation de qualit nationaux ou internationaux afin de s assurer de l exactitude des r sultats Utiliser les m thodes d analyses statistiques appropriees pour l analyse des valeurs contr les et des tendances Si les r sultats ne correspondent pas aux limites tablies des contr les les r sultats concernant ces patients doivent tre consid r es comme non valides Dans ce cas tester les zones techniques suivantes m canisme de pipettage et temps spectrophotom tre dates d expiration des r actifs conditions de stockage et d incubation m thodes d aspiration et de lavage Apres avoir tester les points mentionn s si aucune erreur n est d tect e contacter votre distributeur ou directement la DRG 9 CARACTERISTIQUES DU TEST 9 1 Zone de mesure Les limites du dosage sont comprises entre 5 1000 mlU mL 9 2 Sp cificit des anticorps R action crois e Voir le manuel d utilisateur en version anglaise 9 3 Sensibilit de l analy
7. customer misinterpretation of laboratory results subject to point 11 2 are also invalid Regardless in the event of any claim the manufacturer s liability is not to exceed the value of the test kit Any damage caused to the test kit during transportation is not subject to the liability of the manufacturer 12 REFERENCES LITERATURE 1 Thomas Labor und Diagnose 5 Auflage Mann K H rmann R und pp 996 ff 2 Mann K Saller B Hoermann R Related Articles Clinical use of HCG and hCG beta determinations Scand J Clin Lab Invest Suppl 1993 216 97 104 3 Braunstein GD Vaitukaitis JL Carbone PP and Ross GT Ectopic production of human chorionic gonadotropin by neoplasms Ann Intern Med 1973 78 39 45 4 Cacciatore B Tiitinen A Stenman UH Ylostalo P Related Articles Normal early pregnancy serum hCG levels and vaginal ultrasonography findings Br J Obstet Gynaecol 1990 Oct 97 10 899 903 Vers 8 0 2014 11 vk 10 DRG HCG ELISA EIA 1469 Deutsch 1 EINLEITUNG Der DRG HCG ELISA wird zur quantitativen Bestimmung von humanem Chorionadotropin hCG in Serum und Plasma eingesetzt Nur f r In vitro Diagnostik 2 TESTPRINZIP Der DRG HCG ELISA ist ein Festphasen Enzymimmunoassay der auf der Sandwichtechnik basiert Die Wells der Mikrotiterplatten sind mit einem monoklonalen Antik rper beschichtet der gegen eine definierte Antik rper Bindungsstelle des hCG Molek ls gerichtet ist Die Proben werden in die beschicht
8. da o provocado al kit durante su transporte no est sujeto a la responsabilidad del fabricante 12 REFERENCIAS BIBLIOGRAF A Consultar el manual de usuario en ingl s Vers 8 0 2014 11 vk 31 DRG HCG ELISA EIA 1469 Francais 1 INTRODUCTION Le kit de dosage immuno enzymatique DRG HCG ELISA propose les mat riaux requis pour la mesure quantitative de gonadotrophine chorionique humaine hCG dans le s rum ou le plasma Ce kit est utiliser uniquement dans le cadre de tests diagnostiques in vitro 2 PRINCIPE DU TEST Le kit DRG HCG ELISA est bas sur une r action immuno enzymatique en sandwich en phase solide Les microplaques sont recouvertes avec un anticorps monoclonal dirig contre un antig ne sp cifique de la mol cule hCG Un aliquot de l chantillon contenant le la hCG endog ne est incub dans un puits avec l enzyme conjugu e c est a dire un anticorps anti a subunit monoclonal conjugu e avec la peroxidase de Raifort horseradish peroxidase HRP Apres l incubation le conjugu non li est limin durant le lavage des puits La quantit de conjugu HRP li e est proportionnelle a la concentration de HCG contenu e dans l chantillon Suite l addition de solution substrat l intensit de la coloration obtenue est proportionnelle la concentration de hCG contenu e dans l chantillon 3 PRECAUTIONS D UTILISATION Ce kit est uniquement destin aux tests diagnostiques in vitro
9. enceintes doivent tre dilu s au 1 100e dans le tampon de dilution d chantillon Sample Diluent avant de commencer l essai Voir 5 3 1 Disposer le nombre de puits de micro titration d sir dans le support 2 D poser 25 HL de chaque Standard Control et les chantillons avec de nouveaux c nes de pipette dans les puits appropri s 3 D poser 100 pL d Enzyme Conjugate dans chaque puits Bien m langer pendant 10 secondes Il est important d obtenir un m lange parfait lors de cette tape 4 Incuber pendant 30 minutes temp rature ambiante 5 D canter le contenu des puits et rincer les puits 5 fois avec de l eau distill e 400 uL par puits Tapoter les puits sur du papier absorbant afin d liminer les gouttelettes r siduelles Remarque importante La sensibilit et la pr cision de ce test sont fortement d pendantes de la bonne r alisation des tapes de lavage Ajouter 100 uL de Substrate Solution chaque puits Incuber pendant 10 minutes a temp rature ambiante Stopper la r action enzymatique en ajoutant 50 pL de Stop Solution chaque puits Lire la densit optique 450 10 nm l aide d un spectrophotom tre lecteur de micro plaques dans les 10 minutes apr s avoir ajout la Stop Solution ND 6 3 Protocole d essai m thode qualitative Ce protocole diff rencie les s rums positifs enceinte des chantillons n gatifs en comparant les taux d hCG contenus dans les chantillons ave
10. entre muestras positivas embarazada y negativas mediante la comparaci n de los niveles de hCG de la muestra con el diluyente de las muestras 0 mIU mL y el est ndar 2 50 mIU mL Las muestras de pacientes se corren en paralelo con el diluyente de las muestras 0 mIU mL y el est ndar 2 50 mIU mL El procedimiento de ensayo es id ntico con el M todo cuantitativo pero se omiten los pasos 8 y 9 6 4 C lculo de los Resultados M todo Cuantitativo 1 Calcular los valores de absorbancia media para cada conjunto de est ndares controles y muestras de pacientes 2 Construir una curva est ndar mediante la representaci n de la absorbancia media obtenida para cada est ndar frente a su concentraci n con el valor de absorbancia en el eje vertical Y y la concentraci n en el eje horizontal X 3 Usando el valor de absorbancia media de cada muestra determinar la concentraci n correspondiente a partir de la curva est ndar 4 M todo automatizado Los resultados en las instrucciones de uso se han calculado autom ticamente usando una curva de regresi n 4 Par metros 4 Par metros Rodbard o 4 Par metros Marquardt son los m todos preferidos Otras funciones de regresi n dar n lugar a resultados sensiblemente diferentes 5 La concentraci n de las muestras puede leerse directamente de la curva de est ndares Las muestras con concentraciones superiores al mayor est ndar han de diluirse Para el c lculo de las concentraciones hay
11. inclure un nombre suffisant de contr les afin de pouvoir valider l exactitude et la pr cision du test Les r sultats du test sont valides si et seulement si tous les contr les sont compris dans les gammes de mesure mentionn es et si tous les autres param tres du test sont galement compris dans les instructions de ce test En cas de doute ou d inqui tude contacter la DRG 11 2 Cons quences th rapeutiques Les suites th rapeutiques ne devront jamais tre bas es sur les r sultats de laboratoire seuls m me si les tous les r sultats du test sont en accord avec les points mentionn s dans le paragraphe 11 1 Tout r sultat n est qu une partie du tableau clinique complet d un patient Les suites th rapeutiques peuvent d couler des r sultats de laboratoire si et seulement si ceux ci sont en accord avec l ensemble du tableau clinique du patient Le r sultat du test en lui m amp me ne doit en aucun cas tre le seul d terminant des suites th rapeutiques a suivre 11 3 Responsabilit Toute modification du kit et ou change ou m lange d un des composants de diff rents lots d un kit a un autre pourrait affecter de fa on n gative les r sultats attendus et la validit du test dans son ensemble De telles modifications ou changes invalident toute r clamation pour remplacement Toutes les r clamations soumises relatives au paragraphe 11 2 et dues une mauvaise interpr tation des r sultats de laboratoire
12. into appropriate wells 3 Dispense 100 pL Enzyme Conjugate into each well Thoroughly mix for 10 seconds It is important to have a complete mixing in this step 4 Incubate for 30 minutes at room temperature 5 Briskly shake out the contents of the wells Rinse the wells 5 times with distilled water 400 uL per well Strike the wells sharply on absorbent paper to remove residual droplets Important note The sensitivity and precision of this assay is markedly influenced by the correct performance of the washing procedure Add 100 uL of Substrate Solution to each well Incubate for 10 minutes at room temperature Stop the enzymatic reaction by adding 50 uL of Stop Solution to each well Determine the absorbance OD of each well at 450 10 nm with a microtiter plate reader It is recommended that the wells be read within 10 minutes after adding the Stop Solution NN 6 3 Test Procedure Qualitative Method This procedure differentiates positive pregnant from negative samples by comparing the sample hCG levels with Sample Diluent 0 mIU mL and Standard 2 50 mIU mL Patient samples are run in parallel with the Sample Diluent 0 mIU mL and the 50 mIU mL Standard 2 The assay procedure is identical with the Quantitative Method but step 8 and 9 is omitted 6 4 Calculation of Results Quantitative 1 Calculate the average absorbance values for each set of standards controls and patient samples 2 Using linear graph
13. modificazione del protocollo pu influenzare risultati 10 1 Sostanze interferenti Emoglobina fino a 4 mg mL bilirubina fino a 0 5 mg mL e trigliceridi fino a 30 mg mL non influenzano i risultati di questo test 10 2 Droghe interferenti Fino ad oggi nessuna sostanza farmaco conosciuta a noi che abbia influenzato la determinazione di hCG nel campione 10 3 Effetto Hook di alti dosaggi Nessun effetto hook di aglomerazione stato osservato in questo test fino a 13 300 mIU mL di hCG Vers 8 0 2014 11 vk 23 DRG HCG ELISA EIA 1469 11 ASPETTI LEGALI 11 1 Affidabilit dei risultati Il test deve essere eseguito esattamente secondo il protocollo dato dal produttore Inoltre l utente deve seguire le regole del GLP Good Laboratory Practice o eventualmente altre regole comportamentali o disposizioni legali Questo vale soprattutto per l uso delle referenze molto importante utilizzare un numero appropriato di referenze in parallelo ai campioni test per poter controllare l esattezza e la precisione del test risultati del test sono validi soltanto se tutte le referenze cadono nei margini prestabiliti e se tutti gli altri parametri del test soddisfano la specificazione per questo test Se esistono dubbi o domande su questi risultati si prega di contattare la ditta DRG 11 2 Conseguenze terapeutiche Soltanto sulla base dei risultati dei laboratori non dovrebbero essere intraprese delle conseguenze terapeutich
14. paper construct a standard curve by plotting the mean absorbance obtained from each standard against its concentration with absorbance value on the vertical Y axis and concentration on the horizontal X axis 3 Using the mean absorbance value for each sample determine the corresponding concentration from the standard curve 4 Automated method The results in the Instructions for Use have been calculated automatically using a 4 Parameter curve fit 4 Parameter Rodbard or 4 Parameter Marquardt are the preferred methods Other data reduction functions may give slightly different results 5 The concentration of the samples can be read directly from this standard curve Samples with concentrations higher than that of the highest standard have to be further diluted or reported as gt 1000 mlU mL For the calculation of the concentrations this dilution factor has to be taken into account 6 4 1 Example of Typical Standard Curve The following data is for demonstration only and cannot be used in place of data generations at the time of assay Optical Units 450 nm Standard 1 6 mIU mL Standard 2 50 mIU mL Standard 3 200 mIU mL Standard 4 500 mIU mL Standard 5 1000 mIU mL Vers 8 0 2014 11 vk 6 DRG HCG ELISA EIA 1469 6 5 Qualitative Results For a qualitative analysis of the hCG level the color development of the specimen is compared with the color of the Sample Diluent 0 mIU mL and Standard 2 50 mIU mL If the bl
15. que tener en cuenta el factor de diluci n 6 4 1 Ejemplo de una Curva Est ndar Tipica Los siguientes datos son solamente para la explicaci n y no pueden ser utilizados en lugar de los datos generados en el momento del ensayo Est ndar Unidades pticas 450 nm Standard 1 6 UML Standard 2 50 mIU mL Standard 3 200 miUimt Standard 4 500 miU mL Standard 5 1000 mIU mL Vers 8 0 2014 11 vk 28 DRG HCG ELISA EIA 1469 6 5 Resultados Cualitativos Para un an lisis cualitativo de los niveles de hCG el desarrollo del color de la muestra se compara con el color del diluyente de las muestras 0 mIU mL y del est ndar 2 50 mIU mL Si el color azul es menos intenso que el color del est ndar 2 50 mIU mL la muestra se considera negativa Si el color azul es mas intenso que el color del estandar 2 50 mIU mL la muestra se considera positiva 7 VALORES ESPERADOS Se recomienda encarecidamente que cada laboratorio determine sus valores normales e inusuales 7 1 Adultos normales sanos no embarazadas En un estudio con adultos aparentemente sanos utilizando el DRG HCG ELISA se observaron los siguientes valores Edad a os N v lido hCG mIU mL aoe SEPE 7 2 Niveles normales de hCG en suero durante el embarazo RE I E I A EES Po 40 1000 14 10500 80000 e 2200 7400 1 7000 6400 o 2900 190000 18 4500 5000 o 98 18500 205000 19 3300 40000 IA 14500 125000
16. questo campione pu essere diluito con Sample Diluent e nuovamente determinato Della diluizione deve essere per tenuto conto Esempio a diluizione 1 10 10 uL campione 90 uL Sample Diluent agitare bene b diluizione 1 100 10 uL della diluizione a 90 uL Sample Diluent agitare bene NOTA sieri di donne gravide devono essere diluiti 1 100 nel Sample Diluent prima di incominciare l analisi 6 ATTUAZIONE DEL TEST 6 1 Indicazioni generali Tutti i reagenti e i campioni devono essere portati a temperatura ambiente e ben mescolati prima dell uso Evitare la formazione di schiume Una volta iniziato il procedimento del test questo deve essere portato alla fine senza interruzione Per ogni componente standard controllo o campione necessario utilizzare una nuova punta monouso per evitare reazioni incrociate La densit ottica dipende dal tempo d incubazione e dalla temperatura Perci si rende necessario di preparare tutti i reagenti di aprire i tappi dei flaconi e di appostare tutti i pozzetti nelle appropriate posizioni Soltanto una tale preparazione garantisce gli stessi tempi per ogni processo di pipettamento Come regola generale vale che la reazione enzimatica si svolge linearmente proporzionale con il tempo e con la temperatura Vers 8 0 2014 11 vk 20 DRG HCG ELISA EIA 1469 6 2 Eseguimento del test metodo quantitativo Ogni analisi deve includere una curva standard NOTA
17. s ict riques ou lip miques Remarque Les chantillons contenant de l azide de sodium ne doivent pas tre utilis s pour ce test 5 1 Pr l vement et pr paration des chantillons S rum Pr lever le sang par ponction veineuse ex Sarstedt Monovette pour s rum laisser coaguler puis s parer le s rum par centrifugation temp rature ambiante Ne pas centrifuger avant que la coagulation ne soit termin e Les patients sous traitement anti coagulant peuvent demander un temps de coagulation plus important Plasma Le sang total doit tre pr lev dans des tubes de centrifugation contenant un anti coagulant Sarstedt Monovette avec une pr paration appropri e de plasma et centrifug imm diatement apr s le pr l vement 5 2 Conservation des chantillons Les tubes contenant les chantillons doivent tre ferm s et peuvent tre stock s jusqu cinq jours 2 C 8 C avant d tre test s Les chantillons stock s pour un temps prolong doivent tre congel s 20 C avant d tre test s Les chantillons d congel s doivent tre retourn s plusieurs fois avant le test 5 3 Dilution de l chantillon Si lors d un test pr liminaire la concentration de l chantillon se r v le tre sup rieure a celle du standard le plus concentr alors l chantillon doit tre dilu avec le Sample Diluent et test de nouveau comme d crit dans R alisation du test Pour le calcul des concentrations ce f
18. sieri di donne gravide devono essere diluiti 1 100 nel Sample Diluent prima di incominciare l analisi 1 Fissare i pozzetti necessari sul supporto 2 Pipettare 25 pL di ogni Standard controllo e campione nei pozzetti cambiando ogni volta la punta monouso 3 Pipettare 100 uL Enzyme Conjugate in ogni pozzetto Agitare bene per 10 secondi E molto importante raggiungere un completo mescolamento 4 Incubare per 30 minuti a temperatura ambiente 5 Rovesciare la piastra per vuotare i pozzetti Lavare i pozzetti 5 volte con acqua distillata 400 pL in ogni pozzetto Rimuovere le gocce d acqua rimanenti rivoltando la piastra su carta assorbente Importante La sensibilit e la precisazione di questo kit sono fortemente influenzate dal corretto eseguimento del lavaggio Aggiungere 100 uL della Substrate Solution ad ogni pozzetto Incubare per 10 minuti a temperatura ambiente Fermare la reazione enzimatica aggiungendo 50 uL della Stop Solution ad ogni pozzetto 2 9 7 Determinare la densit ottica a 450 10 nm con un fotometro per microtiter piastre entro 10 minuti dopo l aggiunta della Stop Solution 6 3 Eseguimento del test metodo qualitativo Questo procedimento distingue campioni positivi gravidanza da campioni negativi comparando i livelli hCG con quelli del Sample Diluent 0 mIU mL e dello Standard 2 50 mIU mL campioni dei pazienti vanno analizzati assieme al Sample Diluent 0 mIU mL e allo Standard 2 50 mIU mL
19. this dilution factor has to be taken into account Example a dilution 1 10 10 uL sample 90 uL Sample Diluent mix thoroughly b dilution 1 100 10 uL dilution a 1 10 90 uL Sample Diluent mix thoroughly NOTE Sera of pregnant women must be diluted 1 100 in Sample Diluent before starting the assay 6 ASSAY PROCEDURE 6 1 General Remarks All reagents and specimens must be allowed to come to room temperature before use All reagents must be mixed without foaming Once the test has been started all steps should be completed without interruption Use new disposal plastic pipette tips for each standard control or sample in order to avoid cross contamination Absorbance is a function of the incubation time and temperature Before starting the assay it is recommended that all reagents are ready caps removed all needed wells secured in holder etc This will ensure equal elapsed time for each pipetting step without interruption Asa general rule the enzymatic reaction is linearly proportional to time and temperature Vers 8 0 2014 11 vk 5 DRG HCG ELISA EIA 1469 6 2 Test Procedure Quantitative Method Each run must include a standard curve NOTE Sera of pregnant women must be diluted 1 100 in Sample Diluent before starting the assay see chapter 5 3 1 Secure the desired number of Microtiter wells in the frame holder 2 Dispense 25 uL of each Standard Control and samples with new disposable tips
20. 0 mIU mL Standard 4_ 500 mIU mL Standard 5 1000 mIU mL Vers 8 0 2014 11 vk 21 DRG HCG ELISA EIA 1469 6 5 Risultati qualitativi Per una analisi qualitativa dei livelli hCG lo sviluppo del colore dei campioni paragonato a quello del Sample Diluent 0 mIU mL e dello Standard 2 50 mIU mL Se il colore blu meno intenso di quello dello Standard 2 50 mIU mL il campione da considerare negativo Se il colore blu pi intenso o uguale a quello dello Standard 2 50 mIU mL il campione da considerare positivo 7 VALORI NORMALI consigliabile che ogni laboratorio determini i propri valori normali e anormali 7 1 Adulti normali sani non in gravidanza In uno studio condotto su persone apparentemente sane usando il test DRG HCG ELISA i seguenti valori sono stati ottenuti E ann POG ii ae 7 2 Livelli normali di hCG nel siero durante la gravidanza po 2200 74200 1 7000 6400 8 2900 190000 1 4500 50000 9 18500 205000 1 3300 40000 1 14500 25000 Durante le prime sei settimane di gravidanza la concentrazione di hCG nel siero ha un tempo di raddoppiamento di circa due giorni Dopo il parto i livelli hCG cadono rapidamente e diventano zero dopo pochi giorni Valori molto bassi di hCG possono essere trovati in casi di gravidanza ectopica extra uterina vedi Braunstein G a o First trimester chorionic gonadotropin measurements as an aid in the diagnosis of ea
21. 31 No 1 pp 25 32 May 1978 St Louis while conditions like choriocarcinoma trophoblastic or nontrophoblastic neoplasms or hydatiform moles may result in very high hCG concentrations CAUTION 1 For the detection of pregnancy in serum a qualitative assay is used with a cut off point of 50 mIU mL Negative or borderline results should be repeated on a fresh specimen obtained at least 48 hours after the first specimen 2 It has been shown that immunological pregnancy tests may yield false results in cases of several diseases such as rheumatoid arthritis or myelomas In such cases the interpretation of the pregnancy test should be done carefully Vers 8 0 2014 11 vk 7 DRG HCG ELISA EIA 1469 8 QUALITY CONTROL Good laboratory practice requires that controls be run with each calibration curve A statistically significant number of controls should be assayed to establish mean values and acceptable ranges to assure proper performance It is recommended to use control samples according to state and federal regulations The use of control samples is advised to assure the day to day validity of results Use controls at both normal and pathological levels The controls and the corresponding results of the QC Laboratory are stated in the QC certificate added to the kit The values and ranges stated on the QC sheet always refer to the current kit lot and should be used for direct comparison of the results It is also recommended t
22. 5 3 Diluci n de las muestras Si en un ensayo inicial se encuentra una muestra que presenta valores mayores que el est ndar mas concentrado ha de diluirse con Sample Diluent y volver a ensayarse como se describe en el Procedimiento de Ensayo Para el c lculo de las concentraciones habr que tener en cuenta el factor de diluci n Ejemplo a diluci n 1 10 10 uL muestra 90 uL Sample Diluent mezclar totalmente b diluci n 1 100 10 uL diluci n a 1 10 90 uL Sample Diluent mezclar totalmente NOTA El suero de las mujeres embarazadas debe diluirse 1 100 en el diluyente de las muestras antes de comenzar el ensayo 6 PROCEDIMIENTO DE ENSAYO 6 1 Consideraciones generales Todos los reactivos y muestras han de estar a temperatura ambiente antes de su uso Todos los reactivos deben mezclarse sin formar espuma Una vez se ha comenzado el ensayo deben completarse todos los pasos sin interrupci n Utilizar puntas de pipeta de pl stico nuevas para cada est ndar control o muestra para evitar combinaciones cruzadas La absorbancia es funci n del tiempo de incubaci n y la temperatura Antes de comenzar el ensayo se recomienda que todos los reactivos est n preparados tapas removidas todos los pocillos que se necesiten asegurados en recipiente etc Esto asegurar un tiempo similar para cada paso de pipeteo sin que haya interrupciones Como regla general la reacci n enzim tica es linealmente proporcional
23. BSC code 99 688 Voir Pr paration des r actifs Contient agent de conservation sans mercure 3 Sample Diluent Solution pour dilution de l chantillon 1 flacon 10 mL pr t a emploi 0 mIU mL Contient agent de conservation sans mercure 4 Enzyme Conjugate Conjugu enzymatique 1 flacon 11 mL pr t emploi Anticorps anti a subunit conjugu a la HRP Contient agent de conservation sans mercure 5 Substrate Solution Solution substrat 1 flacon 14 mL pr t a l emploi Tetramethylbenzidine TMB 6 Stop Solution Solution d arr t 1 flacon 14 mL pr t l emploi contient 0 5 M de H SO Eviter les contacts avec la solution stop Cela pourrait engendrer irritations ou br lures de la peau Remarque Un Sample Diluent pour la dilution de l chantillon peut tre fourni sur demande 4 2 Equipement et mat riel requis mais non fournis Un spectrophotom tre lecteur de micro plaques calibr 450 10 nm ex le lecteur de microplaques de DRG Instruments GmbH Des micro pipettes de pr cision variables et calibr es Du papier absorbant Deleau distill e 4 3 Stockage et stabilit du kit Les r actifs contenus dans des flacons non ouverts stock s 2 C 8 C seront stables jusqu la date d expiration inscrite sur l tiquette Ne pas utiliser les r actifs au del de cette date Les r actifs contenus dans des flacons ouverts doivent tre stock s 2 C 8 C Les mi
24. ISA EIA 1469 6 2 Testdurchf hrung quantitative Methode Jeder Lauf muss eine Standardkurve beinhalten Achtung Seren von Schwangeren m ssen vor Testbeginn 1 100 mit Sample Diluent verd nnt werden Siehe Kapitel 5 3 1 Die bendtigte Anzahl Wells in der Halterung befestigen 2 Je 25 iL Standard Kontrollen und Proben mit neuen Plastikspitzen in die entsprechenden Wells geben 3 100 HL Enzyme Conjugate in jedes Well geben F r 10 Sekunden gut sch tteln Es ist sehr wichtig in diesem Schritt eine komplette Durchmischung zu erreichen 4 30 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren 5 Den Inhalt der Wells kr ftig aussch tteln Wells 5 mal mit destilliertem Wasser waschen 400 uL pro Well Verbleibende Fl ssigkeit durch Ausklopfen der Wells auf saugf higem Papier entfernen Achtung Die Sensitivit t und Pr zision dieses Assays wird erheblich beeinflusst von der korrekten Durchf hrung des Waschschrittes 100 uL Substrate Solution in jedes Well geben 10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren Die enzymatische Reaktion durch Zugabe von 50 uL Stop Solution in jedes Well abstoppen Die Optische Dichte bei 450 10 nm mit einem Mikrotiterplatten Leseger t innerhalb von 10 Minuten nach Zugabe der Stop Solution bestimmen nm 6 3 Testdurchfihrung qualitative Methode Dieses Verfahren erm glicht die Unterscheidung zwischen positiven Schwangerschaftsnachweis und negativen Proben durch Vergleich der Patientenproben mit Sam
25. Instructions for Use HCG ELISA EIA 1469 vi 96 wells Ml Manufacturer DRG DRG Instruments GmbH Germany Division of DRG International Inc Frauenbergstr 18 D 35039 Marburg Telefon 49 0 6421 17000 Fax 49 0 6421 1700 50 Internet www drg diagnostics de E mail drg drg diagnostics de CE Distributed by DRG HCG ELISA EIA 1469 Contents Inhaltsverzeichnis Contenuti Contenido Contenu 0 NOD IAWGN D da da N 2 ONOOaARWBHNDN da da N 2 NN O O1 ND INTRODUCTION serres 2 PRINCIPLE OF THE TEST 2 WARNINGS AND PRECAUTIONS 0cooocciccccccncocicocans 3 REAGENTS ii 4 SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION 5 ASSAY PROCEDURE ee 5 EXPECTED NORMAL VALUES ii 7 QUALITY CONTROL mice 8 PERFORMANCE CHARACTERISTICS 8 LIMITATIONS OF USE ee 10 LEGAL ASPECTS 10 REFERENCES LITERATURE i 10 EINLEITUNG nee cis eee at 11 MENA 11 VORSICHTSMARNAHMEN eee 11 BESTANDTEILE DES KITS 12 PROBENVORBEREITUNG mu 13 TESTDURCHFUHRUNG in 13 ERWARTETE WERTE ere 15 QUALIT TS KONTROLLE nennennn 16 ASSAY CHARACTERISTIKA nnnn 16 GRENZEN DES TESTS iii 16 RECHTLICHE GRUNDLAGEN ccoccocococicicincncncacinns 17 REFERENZEN LITERATUR anna 17 INTRODUZIONE ie 18 PRINCIPIO DEL TEST ie 18 PRECAUZION a id 18 COMPONENTI DEL KIT o i 19 CAMPIONI nn no
26. acteur de dilution doit tre pris en consid ration Exemple a dilution 1 10 10 uL de l chantillon 90 uL Sample Diluent bien m langer b dilution 1 100 10 uL dilution a 1 10 90 uL Sample Diluent bien m langer Remarque les s rums de femmes enceintes doivent tre dilu s au 1 100e dans le tampon de dilution d chantillon Sample Diluent avant de commencer l essai 6 R ALISATION DU TEST 6 1 Remarques g n rales Tous les r actifs et chantillons doivent tre amen s temp rature ambiante avant utilisation Tous les r actifs doivent tre m lang s sans formation de mousse Une fois la proc dure engag e toutes les tapes doivent tre r alis es sans interruption Utiliser un nouveau c ne de pipette pour chaque standard contr le ou chantillon ceci afin d viter toute contamination L absorbance est fonction du temps d incubation et de la temp rature Avant de commencer le test il est recommand de pr parer tous les r actifs bouchons ouverts de pr parer les puits des microplaques etc Cela garantira un intervalle de temps quivalent entre chaque tape sans interruption En r gle g n rale la r action enzymatique est lin airement proportionnelle au temps et la temp rature Vers 8 0 2014 11 vk 34 DRG HCG ELISA EIA 1469 6 2 Realisation du dosage m thode quantitative Chaque test doit inclure une courbe talon Remarque les s rums de femmes
27. al tiempo y a la temperatura Vers 8 0 2014 11 vk 27 DRG HCG ELISA EIA 1469 6 2 Procedimiento de ensayo M todo Cuantitativo Cada uno debe incluir una curva de estandares NOTA El suero de las mujeres embarazadas debe diluirse 1 100 en el diluyente de las muestras antes de comenzar el ensayo ver 5 3 1 Asegurar el numero deseado de pocillos en el recipiente 2 Dispensar 25 HL de cada Standard controlo y muestras con puntas nuevas en los pocillos adecuados 3 Dispensar 100 uL de Enzyme Conjugate a cada pocillo Mezclar totalmente durante 10 segundos Es importante mezclar completamente en este paso 4 Incubar durante 30 minutes a temperatura ambiente 5 Sacudir en rgicamente el contenido de los pocillos Lavar los pocillos 5 veces con agua destilada 400 uL por pocillo Realizar un golpe seco de los pocillos contra el papel absorbente para eliminar las gotas residuales Nota importante La sensibilidad y la precisi n de este ensayo se ve marcadamente influenciada por la realizaci n correcta del proceso de lavado Adicionar 100 uL de Substrate Solution a cada pocillo Incubar durante 10 minutes a temperatura ambiente Parar la reacci n enzim tica mediante la adici n de 50 HL de Stop Solution a cada pocillo Leer la OD a 450 10 nm con un lector de microplacas dentro de los 10 minutos despu s de la adici n de la Stop Solution ONO 6 3 Procedimiento de ensayo M todo Cualitativo Este procedimiento diferencia
28. as dos desviaciones est ndar de veinte 20 r plicas del Sample Diluent y result ser lt 5 mIU mL 9 4 Precision Consultar el manual de usuario en ingl s 9 5 Recuperaci n Consultar el manual de usuario en ingl s 9 6 Linealidad Consultar el manual de usuario en ingl s 10 LIMITACIONES DE USO Cualquier manipulaci n inadecuada de las muestras o modificaciones del ensayo pueden influenciar los resultados 10 1 Sustancias que pueden interferir Hemoglobina hasta 4 mg mL Bilirrubina hasta 0 5 mg mL y Triglic ridos hasta 30 mg mL no influencian los resultados del ensayo 10 2 Interferencias con drogas Hasta ahora no se han encontrado sustancias drogas conocidas por nosotros que tengan influencia en la medida de hCG en una muestra 10 3 Efecto Gancho Dosis Elevada No se ha observado efecto gancho en este ensayo hasta 13000 mIU mL de hCG Vers 8 0 2014 11 vk 30 DRG HCG ELISA EIA 1469 11 ASPECTOS LEGALES 11 1 Fiabilidad de los Resultados El ensayo debe realizarse exactamente de acuerdo a las instrucciones del fabricante Mas aun el usuario debe ajustarse estrictamente a las reglas BPL Buenas Practicas de Laboratorio o a otros estandares y o leyes nacionales aplicables Esto es especialmente relevante para el uso de reactivos control Es importante incluir siempre dentro del procedimiento de ensayo un numero suficiente de controles para validar la exactitud y la precisi n del ensayo Los resultad
29. ato per micropozzetti 450 10 nm p es il DRG Instruments Microtiterplate Reader Micropipette calibrate di precisione a volume variabile Carta assorbente Acqua distillata 4 3 Magazzinaggio e stabilit del kit A2 Ca8 C i reagenti non aperti rimangono reattivi fino alla data di scadenza indicata Non usare reagenti oltre questa data Tutti i reagenti aperti devono essere magazzinati a 2 C a 8 C micropozzetti devono essere magazzinati a 2 C a 8 C Una volta aperti i pacchi questi devono essere richiusi accuratamente 4 4 Preparazione dei reagenti Prima dell uso portare tutti i reagenti e il numero necessario di pozzetti a temperatura ambiente Standards Ricostituire il contenuto liofilizzato dei flaconi con gli standard con 1 0 mL acqua distillata e far riposare per almeno 10 minuti Mescolare alcune volte prima dell uso Nota Gli standard ricostituiti sono stabili per 2 mesi a 2 C a 8 Per periodi pi lunghi congelare a 20 TC 4 5 Smaltimento del kit Lo smaltimento del kit deve avvenire secondo le regole a norma di legge Informazioni particolareggiate per questo prodotto si trovano nel regolamento di sicurezza capitolo 13 4 6 Test kits danneggiati Nel caso di gravi danneggiamenti del kit o dei suoi componenti deve avvenire una dichiarazione scritta alla ditta DRG al piu tardi una settimana dopo il ricevimento del kit Componenti danneggiati non dovrebbero essere utilizzati per il test
30. bnisse zu sichern Es sollten geeignete statistische Methoden zur Analyse von Kontroll Werten und Trends angewendet werden Wenn die Ergebnisse des Assays nicht mit den angegebenen Akzeptanzbereichen des Kontrollmaterials bereinstimmen sollten die Patientenergebnisse als ung ltig eingestuft werden In diesem Fall berpr fen Sie bitte die folgenden Bereiche Pipetten und Zeitnehmer Photometer Verfallsdatum der Reagenzien Lagerungs und Inkubationsbedingungen Absaug und Waschmethode Sollten Sie nach berpr fung der vorgenannten Bereiche keinen Fehler erkannt haben setzen Sie sich bitte mit Ihrem Lieferanten oder direkt mit der Firma DRG in Verbindung 9 ASSAY CHARACTERISTIKA 9 1 Messbereich Der Messbereich des Testes liegt zwischen 5 1000 mIU mL 9 2 Spezifit t der Antik rper Kreuzreaktivit t Die Daten entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung 9 3 Sensitivit t Die analytische Sensitivit t definiert als Mittelwert plus der zweifachen Standardabweichung des Sample Diluent n 20 betr gt lt 5 mIU mL Die Daten zu 9 4 Reproduzierbarkeit Pr zision 9 5 Wiederfindung 9 6 Linearitat entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung 10 GRENZEN DES TESTS Jede unsachgem e Behandlung von Proben oder Modifikationen dieses Tests k nnen die Ergebnisse beeinflussen 10 1 Interferenzen H moglobin bis zu 4 mg mL Bilirubin bis zu 0 5 mg mL und Triglycerid
31. c le tampon de dilution O mIU mL et le standard 2 50 mIU mL Les chantillons de patients sont trait s en parall le du tampon de dilution 0 mIU mL et le standard 2 50 mIU mL Le protocole d essai est identique celui de la m thode quantitative mais les tapes 8 et 8 sont omises 6 4 Calcul des r sultats m thode quantitative 1 Calculer les valeurs moyennes des densit s optiques pour chaque s rie de standards contr les et chantillons 2 Etablir la courbe talon en reportant la densit optique moyenne de chaque valeur standard en fonction de sa concentration en posant la densit optique en axe des ordonn es et la concentration en axe des abscisses 3 L utilisation de la densit optique moyenne pour chaque chantillon d termine la concentration correspondante partir de la courbe talon 4 Methode automatique Les r sultats dans les instructions d utilisation ont t calcul s de fa on automatique en utilisant une courbe de r gression 4 Param tres 4 param tres Rodbard ou 4 param tres Marquardt sont les m thodes favorites D autres fonctions logistiques peuvent donner des r sultats l g rement diff rents 5 La concentration des chantillons peut tre lue directement partir de cette courbe talon Les chantillons avec une concentration sup rieure celle du plus haut standard doivent tre dilu s de nouveau Pour le calcul des concentrations ce facteur de dilution doit tre pris en consi
32. cro plaques doivent tre stock es 2 C 8 C Une fois la capsule d aluminium ouverte attention bien refermer le flacon 4 4 Pr paration des r actifs Amener tous les r actifs et le nombre de barrettes n cessaires au test temp rature ambiante avant utilisation Standards Reconstituer le contenu lyophilis des flacons de standards avec 1 0 mL d eau distill e et laisser incuber au minimum 10 minutes M langer plusieurs fois avant utilisation Remarque Les standards reconstitut s sont stables deux mois 2 C 8 Pour un stockage prolong congeler 20 4 5 Elimination des d chets relatifs au kit L limination des d chets relatifs au kit doit tre r alis e selon les r gles nationales en vigueur Les informations sp cifiques au kit sont pr sent es dans la fiche de s curit voir chapitre 13 4 6 Kits endommag s Dans le cas de dommages importants survenus au kit ou ses composants informer la DRG au plus tard une semaine apr s r ception du kit Les composants endommag s ne doivent pas tre utilis s pour le test Ils doivent tre stock s jusqu ce qu une solution adapt e ait t trouv e Apr s cela ils doivent tre limin s selon les directives officielles en vigueur Vers 8 0 2014 11 vk 33 DRG HCG ELISA EIA 1469 5 ECHANTILLON S rum ou plasma EDTA H parine ou citrate plasma peuvent tre utilis s pour ce test Ne pas utiliser des chantillons h molys
33. d ration 6 4 1 Exemple d une courbe standard typique Les r sultats suivants sont ici pr sent s titre d exemple et ne peuvent tre utilis s au moment de l essai Unit s optiques 450 nm Standard 1_ 6 mIU mL Standard 2_ 50 mIU mL Standard 3_ 200 mIU mL Standard 4_ 500 mIU mL Standard 5 1000 mIU mL Vers 8 0 2014 11 vk 35 DRG HCG ELISA EIA 1469 6 5 R sultats qualitatifs Pour une analyse qualitative du taux d hCG le d velopement color de l chantillon est compar a la couleur du tampon de dilution 0 mlU mL et du standard 2 50 mlU mL Si la couleur bleue est moins intense que la couleur du standard 2 50 mIU mL l chantillon est alors consid r comme n gatif Si la couleur bleue est plus intense ou quivalente celle du standard 2 50 mIU mL l chantillon est alors consid r comme positif 7 VALEURS ATTENDUES Il est fortement recommand a chaque laboratoire de d terminer ses propres valeurs normales ou anormales 7 1 Adultes normaux sains non enceintes Dans une tude r alis e avec des adultes normaux et sains l aide du kit DRG HCG ELISA les valeurs suivantes sont observ es Age ans Valid N hCG mIU mL i 7 2 Taux d hCG seriques normaux au cours de la grossesse Pp 2200 74200 1 7000 6400 8 2900 190000 18 4500 5000 92 18500 205000 1 3300 4000 12 14500 125000 PO Au cours des six premi res semaines de grossesse l
34. de la part du client sont galement invalides N anmoins en cas de r clamation la responsabilit du fabricant n est pas de d passer les limites de la valeur du kit Tout dommage caus au kit lors de son transport n est pas du ressort de la responsabilit du fabricant 12 REFERENCES BIBLIOGRAPHIE Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise Vers 8 0 2014 11 vk 38 SYMBOLS USED WITH DRG ELISAS DRG HCG ELISA EIA 1469 Symbol English Deutsch Frangais Espanol Italiano CN MA European Conformity Consult instructions for use CE Konformit ts kennzeichnung Gebrauchsanweisung beachten Conforme aux normes europ ennes Consulter les instructions d utilisation Conformidad europea Consulte las Instrucciones Conformit europea Consultare le istruzioni per l uso BE In vitro diagnostic device In vitro Diagnostikum Usage Diagnostic in vitro Para uso Diagn stico in vitro Per uso Diagnostica in vitro Nur fur Seulement dans le S lo para uso en D RUO For research use only Forschungszwecke cadre de recherches investigaci n able a s opodiiricerca Catalogue number Katalog Nr R f rence N mero de cat logo No di Cat T Lot No Batch code Chargen Nr No de lot N mero de lote Lotto no Contains sufficient for lt n gt tests Ausreichend f r n Ans tze Contenu suffisant pour n tests Contenido suficie
35. dg ltige L sung gefunden wurde Danach sollten Sie gem den offiziellen Richtlinien entsorgt werden Vers 8 0 2014 11 vk 12 DRG HCG ELISA EIA 1469 5 PROBENVORBEREITUNG Serum oder Plasma EDTA Heparin oder Zitratplasma kann in diesem Test als Probenmaterial eingesetzt werden Lip mische ikterische und oder stark hamolysierte Proben sollten nicht verwendet werden Achtung Proben die Natriumazid enthalten sollten nicht verwendet werden 5 1 Probenentnahme Serum Blut durch Venenpunktion entnehmen z B mit Sarstedt Monovette f r Serum gerinnen lassen und das Serum durch Zentrifugation bei Raumtemperatur abtrennen Vor der Zentrifugation muss die Gerinnung vollstandig abgeschlossen sein Bei Patienten die Antikoagulantien erhalten kann die Gerinnungszeit langer dauern Plasma Die Blutentnahme erfolgt mit Rohrchen die ein Antikoagulanz enthalten z B Sarstedt Monovette mit entsprechender Plasma Pr parierung Das Plasma wird als Uberstand nach einer Zentrifugation gewonnen 5 2 Probenaufbewahrung Proben sollten stets gut verschlossen sein und k nnen vor Testbeginn bis zu 5 Tage bei 2 C bis 8 C gelagert werden Fur eine langere Aufbewahrung sollten die Proben eingefroren bei 20 C bis zum Testbeginn gelagert werden Nur einmal einfrieren Aufgetaute Proben sollten vor Testbeginn vorsichtig durchmischt werden ohne Schaumbildung 5 3 Probenverdinnung Wenn in einem ersten Testdurchlauf bei einer P
36. e bis zu 30 mg mL haben keinen Einfluss auf das Testergebnis 10 2 Beeinflussung durch Medikamente Uns sind bislang keine Stoffe Medikamente bekannt geworden deren Einnahme die Messung des hCG Gehaltes der Probe beeinflussen w rde 10 3 High Dose Hook Effekt Ein Hook Effekt tritt bei Proben mit bis zu 13 300 mIU mL hCG nicht auf Vers 8 0 2014 11 vk 16 DRG HCG ELISA EIA 1469 11 RECHTLICHE GRUNDLAGEN 11 1 Zuverl ssigkeit der Ergebnisse Der Test muss exakt gem der Testanleitung des Herstellers abgearbeitet werden Dar ber hinaus muss der Benutzer sich strikt an die Regeln der GLP Good Laboratory Practice oder andere eventuell anzuwendende Regeln oder nationale gesetzliche Vorgaben halten Dies betrifft besonders den Gebrauch der Kontrollreagenzien Es ist sehr wichtig bei der Testdurchf hrung stets eine ausreichende Anzahl Kontrollen zur berpr fung der Genauigkeit und Pr zision mitlaufen zu lassen Die Testergebnisse sind nur g ltig wenn alle Kontrollen in den vorgegebenen Bereichen liegen und wenn alle anderen Testparameter die vorgegebenen Spezifikationen f r diesen Assay erf llen Wenn Sie bez glich eines Ergebnisses Zweifel oder Bedenken haben setzen Sie sich bitte mit der Firma DRG in Verbindung 11 2 Therapeutische Konsequenzen Therapeutische Konsequenzen sollten keinesfalls nur aufgrund von Laborergebnissen erfolgen selbst dann nicht wenn alle Testergebnisse mit den in 11 1 genannten Vorausset
37. e di alcun tipo anche se i risultati del test sono d accordo con gli aspetti articolati nel punto 11 1 Ogni risultato di laboratorio soltanto una parte di un quadro clinico completo di un paziente Soltanto in casi in cui i risultati di un test del laboratorio si accordano con il quadro clinico dell ammalato si possono intraprendere delle conseguenze terapeutiche Il risultato del test da solo non base sufficiente per lo stabilimento di una terapia 11 3 Responsabilit legali Ogni cambiamento del protocollo del test e o lo scambio o il mescolamento di componenti provenienti da cariche diverse possono influenzare negativamente i risultati e compromettere la validit del test Questi cambiamenti e o scambi annullano ogni diritto al risarcimento Si respingano inoltre tutti i richiami risultanti da interpretazioni sbagliate da parte dell utente secondo il paragrafo 11 2 Nel caso di reclamazione la garanzia del produttore limitato al valore massimo del test kit Ogni danno provocato durante il trasporto del kit non sottost alla responsabilit del produttore 12 BIBLIOGRAFIA Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese Vers 8 0 2014 11 vk 24 DRG HCG ELISA EIA 1469 1 INTRODUCCION El Kit de inmunoensayo enzim tico DRG HCG proporciona los materiales necesarios para la determinaci n cuantitativa del Gonadotropina cori nica HCG en suero y plasma Este ensayo esta disefiado solo para diagnostico in v
38. eagents have to be treated as hazardous waste according to the national biohazard safety guideline or regulation For information on hazardous substances included in the kit please refer to Safety Data Sheets Safety Data Sheets for this product are available upon request directly from DRG Vers 8 0 2014 11 vk 3 DRG HCG ELISA EIA 1469 4 REAGENTS 4 1 Reagents provided 1 Microtiterwells 12 x 8 break apart strips 96 wells Wells coated with anti B hCG antibody monoclonal 2 Standard Standard 1 5 5 vials lyophilized 1 0 mL Concentrations 5 50 200 500 1000 mIU mL Conversion 1 pg mL 0 00916 mIU mL The concentrations of the DRG HCG Kit standards match the international Reference material Chorionic Gonadotropin Reference reagent 2001 NIBSC Code number 99 688 See Reagent Preparation Contain non mercury preservative 3 Sample Diluent 1 vial 10 mL ready to use 0 mIU mL Contains non mercury preservative 4 Enzyme Conjugate 1 vial 11 mL ready to use Monoclonal antibody against the alpha subunit conjugated to horseradish peroxidase Contains non mercury preservative 5 Substrate Solution 1 vial 14 mL ready to use Tetramethylbenzidine TMB 6 Stop Solution 1 vial 14 mL ready to use contains 0 5 M H2SO Avoid contact with the stop solution It may cause skin irritations and burns Note Additional Sample Diluent for sample dilution is available upon request 4 2 Materials required but n
39. es concentrations d hCG s riques pr sentent un temps de doublement d environ 2 jours Suite la d livrance les taux d hCG chutent rapidement pour dispara tre compl tement apr s quelques jours De faibles taux d hCG peuvent tre d tect s lors de grossesses ectopiques voir Braunstein G a o First trimester chorionic gonadotropin measurements as an aid in the diagnosis of early pregnancy disorders In American Journal of Obstetrics and Gynaecology V 131 No 1 pp 25 32 May 1978 St Louis alors que des conditions telles que des choriocarcinomes des n oplasmes trophoblastiques ou non trophoblastiques ou encore des moles hydatiformes peuvent engendrer de tr s fortes concentrations d hCG Pr cautions 1 Pour la d tection d une grossesse dans un s rum un essai qualitatif est utilis avec un point limite de 50 mIU mL Des r sultats n gatifs ou a la limite doivent tre r p t s a partir d chantillons frais obtenus au moins 48 heures apr s le premier pr l vement 2 Il a t montr que des tests immunologiques de grossesse peuvent amener a de faux r sultats en cas de pathologies s v res telles que l arthrite rhumato de ou les my lomes Vers 8 0 2014 11 vk 36 DRG HCG ELISA EIA 1469 8 CONTROLE DE QUALITE Il est recommande d utiliser les chantillons contr les selon les r glementations nationales en vigueur L utilisation des chantillons contr les est recommande afin de s assurer jour
40. eten Wells gegeben und mit einem Enzymkonjugat inkubiert Das Konjugat enth lt monoklonale gegen die Alpha Kette des HCG Molek ls gerichtete Antik rper die mit Meerrettichperoxidase konjugiert sind Es wird ein Sandwichkomplex gebildet Das nicht gebundene Konjugat wird durch Waschen der Wells entfernt Anschlie end wird die Substratl sung zugegeben und die Farbentwicklung nach einer definierten Zeit gestoppt Die Intensit t der gebildeten Farbe ist proportional der hCG Konzentration in der Probe Die Extinktion wird bei 450 nm mit einem Mikrotiterplattenleser gemessen 3 VORSICHTSMABNAHMEN Dieser Kit ist nur zum in vitro diagnostischen Gebrauch geeignet Nur die g ltige im Testkit enthaltene Gebrauchsanweisung verwenden Informationen zu im Kit enthaltenen gef hrlichen Substanzen entnehmen Sie bitte dem Sicherheitsdatenblatt Alle Bestandteile dieses Testkits die humanes Serum oder Plasma enthalten wurden mit FDA gepr ften Methoden auf HIV I II HbsAg und HCV getestet und als negativ best tigt Jedoch sollten alle Bestandteile im Umgang und bei der Entsorgung wie m gliche Gefahrenstoffe betrachtet werden Der Kontakt mit der Stop Solution sollte vermieden werden da sie 0 5 M H2SO enth lt Schwefels ure kann Hautreizungen und Verbrennungen verursachen Nicht mit dem Mund pipettieren und den Kontakt von Kitbestandteilen und Proben mit Haut und Schleimh uten vermeiden In den Bereichen in denen Probe
41. exactly as per the manufacturer s instructions for use Moreover the user must strictly adhere to the rules of GLP Good Laboratory Practice or other applicable national standards and or laws This is especially relevant for the use of control reagents It is important to always include within the test procedure a sufficient number of controls for validating the accuracy and precision of the test The test results are valid only if all controls are within the specified ranges and if all other test parameters are also within the given assay specifications In case of any doubt or concern please contact DRG 11 2 Therapeutic Consequences Therapeutic consequences should never be based on laboratory results alone even if all test results are in agreement with the items as stated under point 11 1 Any laboratory result is only a part of the total clinical picture of a patient Only in cases where the laboratory results are in acceptable agreement with the overall clinical picture of the patient should therapeutic consequences be derived The test result itself should never be the sole determinant for deriving any therapeutic consequences 11 3 Liability Any modification of the test kit and or exchange or mixture of any components of different lots from one test kit to another could negatively affect the intended results and validity of the overall test Such modification and or exchanges invalidate any claim for replacement Claims submitted due to
42. fessional use only All reagents of this test kit which contain human serum or plasma have been tested and confirmed negative for HIV III HBsAg and HCV by FDA approved procedures All reagents however should be treated as potential biohazards in use and for disposal Before starting the assay read the instructions completely and carefully Use the valid version of instructions for use provided with the kit Be sure that everything is understood The microplate contains snap off strips Unused wells must be stored at 2 C to 8 C in the sealed foil pouch and used in the frame provided Pipetting of samples and reagents must be done as quickly as possible and in the same sequence for each step Use reservoirs only for single reagents This especially applies to the substrate reservoirs Using a reservoir for dispensing a substrate solution that had previously been used for the conjugate solution may turn solution colored Do not pour reagents back into vials as reagent contamination may occur Mix the contents of the microplate wells thoroughly to ensure good test results Do not reuse microwells Do not let wells dry during assay add reagents immediately after completing the rinsing steps Allow the reagents to reach room temperature 21 C to 26 C before starting the test Temperature will affect the absorbance readings of the assay However values for the patient samples will not be affected Never pipet by mouth and avoid contact of rea
43. gents and specimens with skin and mucous membranes Do not smoke eat drink or apply cosmetics in areas where specimens or kit reagents are handled Wear disposable latex gloves when handling specimens and reagents Microbial contamination of reagents or specimens may give false results Handling should be done in accordance with the procedures defined by an appropriate national biohazard safety guideline or regulation Do not use reagents beyond expiry date as shown on the kit labels All indicated volumes have to be performed according to the protocol Optimal test results are only obtained when using calibrated pipettes and microtiterplate readers Do not mix or use components from kits with different lot numbers It is advised not to exchange wells of different plates even of the same lot The kits may have been shipped or stored under different conditions and the binding characteristics of the plates may result slightly different Avoid contact with Stop Solution containing 0 5 M H2SO It may cause skin irritation and burns Some reagents contain Proclin 300 BND and or MIT as preservatives In case of contact with eyes or skin flush immediately with water TMB substrate has an irritant effect on skin and mucosa In case of possible contact wash eyes with an abundant volume of water and skin with soap and abundant water Wash contaminated objects before reusing them If inhaled take the person to open air Chemicals and prepared or used r
44. itro 2 FUNDAMENTO DEL ENSAYO El Kit DRG HCG ELISA es un ensayo en fase s lida de inmunoadsorci n unido a enzimas ELISA basado en el principio del sandwich Los pocillos de las placas estan recubiertos con un anticuerpo monoclonal dirigido contra un Unico foci antig nico en una mol cula de HCG Se incuba una alicuota de una muestra perteneciente a un paciente que contiene HCG end gena en los pocillos recubiertos con el enzima conjugado que es un anticuerpo monoclonal anti a subunit conjugado con la peroxidasa end gena Despu s de la incubaci n se lava el conjugado que no se ha unido La cantidad de peroxidasa unida es proporcional a la concentraci n de HCG en la muestra Cuando se a ade la soluci n del sustrato de la peroxidasa la intensidad del color desarrollado es proporcional a la concentraci n de HCG en la muestra del paciente 3 PRECAUCIONES Este kit es solamente para diagn stico in vitro Por favor se usa solo la version valida de la metodico t cnico incluido aqui en el kit Para obtener informaci n de las sustancias peligrosas incluidas en el kit por favor mirar las hojas de los datos de seguridad del material Todos los reactivos en este kit de ensayo que contienen suero o plasma humano se han ensayado y confirmado ser negativos para HIV I II HBsAg y HCV mediante procedimientos aprobados por la FDA Sin embargo todos los reactivos deben ser tratados tanto en su uso como dispensaci n como potencia
45. keit des Kits Die unge ffneten Reagenzien behalten bei Lagerung um 2 C bis 8 C ihre Reaktivit t bis zum Verfallsdatum Nach dem Verfallsdatum die Reagenzien nicht mehr verwenden Nach dem ffnen sollten alle Reagenzien bei 2 C bis 8 C gelagert werden Die Mikrotiterwells sollten bei 2 C bis 8 C gelagert werden Der einmal ge ffnete Folienbeutel sollte stets sehr sorgf ltig wieder verschlossen werden 4 4 Vorbereitung der Reagenzien Alle Reagenzien sowie die ben tigte Anzahl von Wells sollen vor dem Gebrauch auf Raumtemperatur gebracht werden Standards Rekonstituieren Sie den lyophilisierten Inhalt der Standardfl schchen mit 1 0 mL destilliertem Wasser und lassen Sie die Fl schchen mindestens 10 Minuten ruhen Vor Gebrauch mehrmals vorsichtig sch tteln Achtung Bei 2 bis 8 sind die rekonstituierten Standards 2 Monate haltbar F r eine l ngere Aufbewahrung bei 20 einfrieren 4 5 Entsorgung des Kits Die Entsorgung des Kits muss gem den nationalen gesetzlichen Vorschriften erfolgen Spezielle Informationen f r dieses Produkt finden Sie im Materialsicherheitsdatenblatt Kapitel 13 4 6 Besch digte Testkits Im Falle einer starken Besch digung des Testkits oder der Komponenten muss die Firma DRG in schriftlicher Form sp testens eine Woche nach Erhalt des Kits informiert werden Stark besch digte Einzelkomponenten sollten nicht f r den Testlauf verwendet werden Sie m ssen gelagert werden bis eine en
46. lla manutenzione e nello smaltimento Il contatto con la Stop Solution dovrebbe essere evitato perch contiene 0 5 M H SO L acido solforico pu provocare irritazioni cutanee e ustioni Non pipettare con la bocca ed evitare il contatto con componenti del kit con la pelle o con le mucose Nelle aree in cui il test viene utilizzato non fumare mangiare bere o fare uso di prodotti cosmetici Nella manutenzione dei campioni o reagenti del kit portare guanti di latex monouso La contaminazione dei reagenti o dei campioni con microbi pu dare risultati falsi L utilizzo dovrebbe avvenire secondo regole che seguono le rispettive norme di sicurezza nazionali sulle sostanze nocive Non utilizzare i reagenti dopo la scadenza indicata sul kit Ogni indicazione sulla quantit indicata del protocollo del kit deve essere accuratamente seguito Risultati ottimali possono essere ottenuti soltanto con l uso di pipette calibrate e spettrofotometro calibrato Componenti del kit con numeri di lotto diversi non devono essere combinati consigliabile di non utilizzare pozzetti di piastre diversi anche se si tratta dello stesso lotto kit potrebbero essere stati magazzinati o spediti a condizioni diverse cosicch le caratteristiche di legame potrebbero divergere leggermente componenti chimici e reagenti preparati o gi utilizzati devono essere trattati e smaltiti secondo le norme di sicurezza nazionali sulle sostanze n
47. lls einzeln brechbar Mit anti B hCG Antik rper monoklonal beschichtet 2 Standard Standard 1 5 5 Fl schchen lyophilisiert je 1 0 mL Konzentrationen 5 50 200 500 1000 mIU mL Umrechnungsfaktor 1 pg mL 0 00916 mIU mL Die DRG HCG Standards entsprechen dem 1 WHO Referenzreagenz 2001 NIBSC Code Nr 99 688 Siehe Vorbereitung der Reagenzien Enth lt quecksilberfreies Konservierungsmittel 3 Sample Diluent Probenverd nnungsmedium 1 Fl schchen 10 mL gebrauchsfertig 0 mIU mL Enth lt quecksilberfreies Konservierungsmittel 4 Enzyme Conjugate Enzymkonjugat 1 Fl schchen 11 mL gebrauchsfertig monoklonaler Antik rper gegen die Alpha Kette mit Meerrettichperoxidase konjugiert Enth lt quecksilberfreies Konservierungsmiittel 5 Substrate Solution Substratl sung 1 Fl schchen 14 mL gebrauchsfertig Substratl sung TMB 6 Stop Solution Stoppl sung 1 Fl schchen 14 mL gebrauchsfertig enth lt 0 5 M H2SO4 Kontakt mit der Stoppl sung vermeiden Kann Hautreizungen und Verbrennungen verursachen Anmerkung Zus tzliches Sample Diluent zur Probenverd nnung ist auf Anfrage erh ltlich 4 2 Erforderliche aber nicht enthaltene Ger te und Materialien Kalibriertes Mikrotiterplattenleseger t mit 450 10 nm Filter z B das DRG Instruments Mikrotiterplattenleseger t Kalibrierte variable Pr zisions Mikropipette Saugf higes Papier Destilliertes Wasser 4 3 Lagerung und Haltbar
48. lmente biopeligrosos Evitar contacto con Stop Solution que contiene H2SO 0 5 M Puede provocar irritaci n y quemaduras en la piel Nunca pipetear con la boca y evitar el contacto de los reactivos y las muestras con la piel y con membranas mucosas No fumar comer beber o usar cosm ticos en reas donde las muestras o los reactivos del kit est n siendo usados Usar guantes de l tex cuando se utilicen las muestras y los reactivos La contaminaci n microbiana de los reactivos o las muestras puede dar resultados err neos El manejo debe realizarse de acuerdo a los procedimientos definidos por las gu as o regulaci n nacionales de seguridad de sustancias biopeligrosas No utilizar los reactivos despu s de su fecha de caducidad que aparece en las etiquetas del kit Todos los vol menes indicados han de ser realizados de acuerdo con el protocolo Los resultados ptimos del ensayo se obtienen solo cuando se utilizan pipetas y lectores de microplacas calibrados No mezclar o usar componentes de kits con distinto n mero de lote Se recomienda no intercambiar pocillos de distintas placas incluso si son del mismo lote Los kits pueden haber sido enviados o almacenados bajo diferentes condiciones y las caracter sticas de uni n de las placas pueden resultar diferentes Los compuestos qu micos y los reactivos preparados o utilizados han de tratarse como residuos peligrosos de acuerdo con las gu as o regulaci n
49. n Journal of Obstetrics and Gynaecology V 131 No 1 pp 25 32 May 1978 St Louis ACHTUNG 1 F r den Schwangerschaftsnachweis mit der qualitativen Methode werden 50 mIU mL als Grenzwert eingesetzt Proben mit negativem oder grenzwertigem Ergebnis werden als zweifelhaft betrachtet Zur Best tigung des Ergebnisses 48 Stunden sp ter eine weitere Patientenprobe nehmen und nochmals bestimmen 2 Es hat sich gezeigt dass bei einem immunologischen Schwangerschaftstest einige Erkrankungen rheumatische Arthritis maligne Tumore das Testergebnis beeinflussen k nnen In solchen F llen muss die Interpretation der Ergebnisse besonders sorgf ltig durchgef hrt werden Vers 8 0 2014 11 vk 15 DRG HCG ELISA EIA 1469 8 QUALITATS KONTROLLE Es wird empfohlen die Kontrollproben gem den nationalen gesetzlichen Bestimmungen einzusetzen Durch die Verwendung von Kontrollproben wird eine Tag zu Tag berpr fung der Ergebnisse erzielt Es sollten Kontrollen sowohl mit normalem als auch pathologischem Level eingesetzt werden Die Kontrollen mit den entsprechenden Ergebnissen des QC Labors sind im QC Zertifikat das dem Kit beiliegt aufgef hrt Die im QC Blatt angegebenen Werte und Bereiche beziehen sich stets auf die aktuelle Kitcharge und sollten zum direkten Vergleich der Ergebnisse verwendet werden Es wird ebenfalls empfohlen an nationalen oder internationalen Qualit tssicherungs Programmen teilzunehmen um die Genauigkeit der Erge
50. n oder Kitbestandteile verwendet werden nicht rauchen essen oder Kosmetika verwenden Beim Umgang mit Proben oder Reagenzien Einweg Latexhandschuhe tragen Die Verunreinigung von Reagenzien oder Proben mit Mikroben kann zu falschen Ergebnissen f hren Der Gebrauch sollte gem der Vorschriften einer entsprechenden nationalen Gefahrenstoff Sicherheitsrichtlinie erfolgen Reagenzien nicht nach dem auf dem Kit Etikett angegebenen Verfallsdatum verwenden Alle im Kit Protokoll angegebenen Mengen m ssen genau eingehalten werden Optimale Ergebnisse k nnen nur durch Verwendung kalibrierter Pipetten und Mikrotiterplatten Leseger te erreicht werden Komponenten von Kits mit unterschiedlichen Lotnummern nicht untereinander vertauschen Es wird empfohlen keine Wells von verschiedenen Platten zu verwenden auch nicht wenn es sich um das gleiche Lot handelt Die Kits k nnen unter anderen Bedingungen gelagert oder versendet worden sein so dass die Bindungscharakteristik der Platten leicht unterschiedlich ausf llt Chemikalien und zubereitete oder bereits benutzte Reagenzien m ssen gem den nationalen Gefahrenstoffvorschriften wie gef hrlicher Abfall behandelt werden Sicherheitsdatenbl tter f r dieses Produkt sind auf Anfrage direkt von der Firma DRG Instruments GmbH erh ltlich Vers 8 0 2014 11 vk 11 DRG HCG ELISA EIA 1469 4 BESTANDTEILE DES KITS 4 1 Kitinhalt 1 Microtiterwells 96 Wells 12 x 8 We
51. na corionica hCG in siero e plasma Questo test kit adatto soltanto per l uso diagnostico 2 PRINCIPIO DEL TEST Il test kit DRG HCG ELISA un test immunologico in fase solida con enzimi ancorati su un substrato ELISA basato sul principio sandwich micropozzetti sono ricoperti con un anticorpo monoclonale diretto contro un unico sito antigenico su una molecola hCG Un aliquota di un campione di paziente contenente hCG endogeno a viene incubato nel pozzetto ricoperto dell enzima coniugato che un anticorpo monoclonale anti a subunit coniugato alla perossidasi di rafano Dopo l incubazione il coniugato non legato eliminato attraverso lavaggi La quantit della perossidasi legata proporzionale alla concentrazione hCG nel campione Dopo l aggiunta della soluzione substrato l intensit del colore sviluppato proporzionale alla concentrazione di hCG nel campione del paziente 3 PRECAUZIONI Questo kit adatto soltanto per l uso diagnostico in vitro Si prega di usare la versione valida dell inserto del pacco a disposizione con il kit Informazioni su sostanze pericolose contenute nel kit sono riportate nel regolamento di sicurezza Tutti i componenti del kit che contengono siero o plasma umano sono controllati e confermati negativi per la presenza di HIV I II HbsAg e HCV con metodi conformi alle norme FDA Ciononostante tutti i componenti dovrebbero essere trattati come potenziali sostanze nocive ne
52. nacionales de seguridad de sustancias biopeligrosas Las hojas de los datos de seguridad de este producto est n disponibles bajo pedido directamente a DRG Instruments GmbH Vers 8 0 2014 11 vk 25 DRG HCG ELISA EIA 1469 4 COMPONENTES DEL KIT 4 1 Componentes del Kit 1 Microtiterwells Placas multipocillo 12 x 8 tiras separables 96 pocillos Pocillos recubiertos con anticuerpo anti B hCG monoclonal 2 Standard Standard 1 5 Est ndar 5 viales liofilizados 1 0 mL Concentraciones 5 50 200 500 1000 mIU mL Conversi n 1 pg mL 0 00916 mIU mL Los estandares estan calibrados segun el material de referencia Chorionic Gonadotropin Reference reagent 2001 NIBSC c digo 99 688 Ver Preparaci n de los Reactivos Contiene conservante sin mercurio 3 Sample Diluent Soluci n para diluci n de la muestra 1 vial 10 mL listo para usar 0 mIU mL Contiene conservante sin mercurio 4 Enzyme Conjugate Conjugado enzimatico 1 vial 11 mL listo para usar Anticuerpo anti a subunit conjugado con la Peroxidasa de rabano Contiene conservante sin mercurio 5 Substrate Solution Soluci n de sustrato 1 vial 14 mL listo para usar Tetrametilbencidina TMB 6 Stop Solution Soluci n de parada 1 vial 14 mL listo para usar contiene 0 5 M H2S0 Evitar el contacto con la Soluci n de parada Puede causar irritaci n y quemaduras en al piel Note Se puede solicitar el Sample Diluent para la dil
53. nazionali o internazionali per assicurarsi dell esattezza dei risultati Appropriati metodi statistici per l analisi dei valori controllo e delle rappresentazioni grafici dovrebbero essere adoperati Nel caso che i risultati del test non combaciano con il campo di accettazione indicato dal materiale di controllo i risultati dei pazienti devono essere considerati invalidi In questo caso si prega di controllare i seguenti fattori d errore pipette cronometri fotometro data di scadenza dei reagenti condizione di magazzinaggio e d incubazione metodi di aspirazione e di lavaggio Se dopo il controllo dei suddetti fattori non rilevabile alcun errore si prega di contattare il fornitore o direttamente la ditta DRG 9 CARATTERISTICHE DEL TEST 9 1 Assay Dynamic Range Le concentrazioni determinabili con questo test stanno tra 5 1000 mIU mL 9 2 Specificit degli anticorpi reazioni ad incrocio Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 9 3 Sensitivita analitica La sensitivit analitica stata calcolata dai valori medi piu due deviazioni standard di venti 20 repliche dello Sample Diluent ed erano lt 5 mIU mL 9 4 Precisione Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 9 5 Ritrovato Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 9 6 Linearita Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 10 LIMITAZIONE DEL TEST Ogni manutenzione impropria dei campioni o
54. no nononcnn nn cn ca nanan 20 ATTUAZIONE DEL TEST aieisaionoaraeereerrire1raen 20 VALORI NORMALI ere 22 CONTROLLO QUALIT un 23 CARATTERISTICHE DEL TEST 23 LIMITAZIONE DEL TEST ue 23 ASPETTI LEGALI ur 24 BIBLIOGRAFIA cer 24 Vers 8 0 2014 11 vk 1 11 INTRODUCCI N ee 25 2 FUNDAMENTO DEL ENSAYO oociicicinocccociccnnnicincs 25 3 PRECAUCIONES i 25 4 COMPONENTES DEL KIT 26 5 MUESTRAS suisse ii 27 6 PROCEDIMIENTO DE ENSAYO enee 27 7 VALORES ESPERADOS eee 29 8 CONTROL DE CALIDAD 0 in 30 9 CARACTER STICAS DEL ENSAYO 30 10 LIMITACIONES DE USO i 30 11 ASPECTOS LEGALES i 31 12 REFERENCIAS BIBLIOGRAFIA 31 1 INTRODUCTION 32 2 PRINCIPE DU TEST 32 3 PRECAUTIONS D UTILISATION 32 4 COMPOSITION DU KIT 33 5 ECHANTILLONS 34 6 REALISATION DU TEST 34 7 VALEURS ATTENDUES 36 8 CONTROLE DE QUALITE i 37 9 CARACTERISTIQUES DU TEST 37 10 LIMITES D UTILISATION 37 11 ASPECTS LEGAUX 0 eee teens 38 12 REFERENCES BIBLIOGRAPHIE 38 SYMBOLS USED WITH DRG ELISAS 39 DRG HCG ELISA EIA 1469 English 1 INTRODUCTION 1 1 Intended Use The DRG HCG ELISA is an enzyme immunoassay for the quantitative in vitro diagnostic measurement of intact human chorionic gonadotropin hCG in serum or plasma 1 2 Summary and Explanation Chorionic Gonadot
55. nte para lt n gt ensayos Contenuto sufficiente per n saggi Storage Temperature Lagerungstemperatur Temp rature de conservation Temperatura de conservacion Temperatura di conservazione Expiration Date Mindesthaltbarkeits datum Date limite d utilisation Fecha de caducidad Data di scadenza ni SE Legal Manufacturer Hersteller Fabricant Fabricante Fabbricante Distributed by Distributor Vertreiber Distributeur Distribuidor Distributore Content Content Inhalt Contenu Contenido Contenuto Volume No Volume No Volumen Anzahl Volume Num ro Volumen N mero Volume Quantit Microtiterwells Microtiterwells Mikrotiterwells en Placas multipocillo Micropozzetti Antiserum Antiserum Antiserum Antis rum Antisuero Antisiero Enzyme Enzyme Conjugate Enzymkonjugat Conjugu enzymatique Conjugado enzimatico Tracciante enzimatico Conjugate Enzyme Enzyme Complex Enzymkomplex Complexe Complex enzimatico Complesso enzimatico Complex enzymatique Substrate Substrate Solution Substratl sung Solution substrat Soluci n de sustrato Soluzione di substrato Solution Stop Solution Stop Solution Stoppl sung Solution d arr t Soluci n de parada Soluzione d arresto Zero Standard Zero Standard Nullstandard Zero Standard Estandar cero Standard zero Standard Standard Standard Standard Est ndar Standard Control Control Kontrolle Contr le Con
56. o make use of national or international Quality Assessment programs in order to ensure the accuracy of the results Employ appropriate statistical methods for analysing control values and trends If the results of the assay do not fit to the established acceptable ranges of control materials patient results should be considered invalid In this case please check the following technical areas Pipetting and timing devices photometer expiration dates of reagents storage and incubation conditions aspiration and washing methods After checking the above mentioned items without finding any error contact your distributor or DRG directly 9 PERFORMANCE CHARACTERISTICS 9 1 Assay Dynamic Range The range of the assay is between 5 1000 mIU mL 9 2 Specificity of Antibodies Cross Reactivity The following substances were tested for cross reactivity of the assay Produced Colour Intensity Equivalent to hLH 300 mIU mL 9 hLH 200 mIU mL lt 5 hLH 80 mIU mL lt 5 TSH 75 uIU mL 10 TSH 50 IU mL 6 TSH 25 plU mL lt 5 FSH 200 mIU mL lt 5 FSH 50 mIU mL lt 5 9 3 Sensitivity The analytical sensitivity of the DRG ELISA was calculated by adding 2 standard deviations to the mean of 20 replicate analyses of Sample Diluent and was found to be lt 5 mIU mL 9 4 Reproducibility 9 4 1 Intra Assay The within assay variability is shown below Sample n Mean mIU mL CV A Vers 8 0 2014 11 vk 8 DRG HCG ELISA EIA 1469 9 4
57. ocive regolamenti di sicurezza di questo prodotto possono essere richiesti direttamente dalla ditta DRG Instruments GmbH Vers 8 0 2014 11 vk 18 DRG HCG ELISA EIA 1469 4 COMPONENTI DEL KIT 4 1 Contenuto del kit 1 Microtiterwells Micropozetti 12 x 8 file separatamente staccabili 96 pozzetti Pozzetti ricoperti con Panti B hCG anticorpo monoclonale 2 Standard Standard 1 5 5 flaconi liofilizzati 1 0 mL Concentrazione 5 50 200 500 1000 mIU mL Conversione 1 pg mL 0 00916 mlU ml Gli standard sono calibrati contro lo Standard Internazionale Reference reagent 2001 NIBSC Code 99 688 Vedi preparazionedei reagenti Contiene conservante senza mercurio 3 Sample Diluent Diluente dei campioni 1 flacone 10 mL pronto all uso 0 mIU mL Contiene conservante senza mercurio 4 Enzyme Conjugate Tracciante enzimatico 1 flacone 11 mL pronto all uso Anticorpo monoclonale anti a subunit coniugato alla perossidasi di rafano Contiene conservante senza mercurio 5 Substrate Solution Soluzione di substrato 1 flacone 14 mL pronto all uso TMB benzidine tetrametilico 6 Stop Solution Soluzione d arresto 1 flacone 14 mL pronto all uso contiene 0 5 M H2SO Evitare il contatto con la soluzione d arresto Pu causare irritazioni cutanee e ustioni Nota Ulteriore Sample Diluent pu essere richiesto alla ditta 4 2 Materiali richiesti ma non contenuti nel kit Uno spettrofotometro calibr
58. onentes ha de informarse por escrito a DRG no mas tarde de una semana despu s de recibir el kit No deben utilizarse componentes da ados para llevar a cabo un ensayo Han de almacenarse hasta que se encuentre una soluci n Despu s de esto deben ser eliminados de acuerdo con las leyes oficiales Vers 8 0 2014 11 vk 26 DRG HCG ELISA EIA 1469 5 MUESTRAS En este ensayo pueden usarse suero o plasma plasma EDTA Heparina o citrato No usar muestras hemoliticas ict ricas o lip micas Tener en cuenta No deben usarse muestras que contengan acida s dica 5 1 Toma de muestras Suero Recoger la sangre por punci n en la vena ej Sarstedt Monovette para el suero permitir coagulaci n y separar el suero por centrifugaci n a temperatura ambiente No centrifugar antes de la coagulaci n completa Las muestras de pacientes que reciben terapia anticoagulante requieren mas tiempo para coagular Plasma Toda la sangre ha de recogerse en tubos de centrifuga que contengan anticoagulante Ej Sarstedt Monovette con una preparaci n adecuada para el plasma y centrifugar inmediatamente tras la recogida 5 2 Almacenamiento de las muestras Las muestras deben ser tapadas y pueden ser almacenadas hasta 5 d as a 2 C a 8 C antes del ensayo Las muestras almacenadas por un per odo de tiempo mas largo han de congelarse s lo una vez a 20 C antes del ensayo Las muestras descongeladas deben invertirse varias veces antes del ensayo
59. os del ensayo son validos s lo si todos los controles se encuentran dentro de los rangos especificados y si todos los otros parametros del ensayo se encuentran dentro de las especificaciones dadas para el ensayo En cado de alguna duda o inquietud por favor contactar con DRG 11 2 Consecuencias Terap uticas Las consecuencias terap uticas nunca deben basarse s lo en los resultados de laboratorio incluso si todos los resultados del ensayo estan de acuerdo con los asuntos fijados en el punto 11 1 Cualquier resultado de laboratorio es solamente una parte del cuadro clinico de un paciente Solamente en los casos donde los resultados de laboratorio est n en acuerdo con todo el cuadro clinico de un paciente se pueden derivar consecuencias terap uticas Nunca deben derivarse consecuencias terap uticas a partir de solamente el resultado obtenido en el ensayo 11 3 Responsabilidad Cualquier modificaci n del kit y o cambio o mezcla de cualquier componente procedentes de kits de lotes diferentes puede afectar negativamente a los resultados esperados y en la validez de todo el test Esas modificaciones y o cambios invalidad cualquier reclamaci n de reposici n Las reclamaciones emitidas debidas a una mala interpretaci n de los resultados de laboratorio por parte del comprador referidos al punto 11 2 son tambi n inv lidas A pesar de todo en el caso de cualquier reclamaci n la responsabilidad del fabricante no excede el valor del kit Cualquier
60. ot provided A microtiter plate calibrated reader 450 10 nm e g the DRG Instruments Microtiter Plate Reader Calibrated variable precision micropipettes Absorbent paper Distilled or deionized water Timer Linear graph paper or software for data reduction 4 3 Storage Conditions When stored at 2 C to 8 C unopened reagents will retain reactivity until expiration date Do not use reagents beyond this date Opened reagents must be stored at 2 C to 8 C Microtiter wells must be stored at 2 C to 8 C Once the foil bag has been opened care should be taken to close it tightly again 4 4 Reagent Preparation Bring all reagents and required number of strips to room temperature prior to use Standards Reconstitute the lyophilized content of the standard vials with 1 0 mL deionized water and let stand for 10 minutes in minimum Mix several times before use Note The reconstituted standards are stable for 2 months at 2 to 8 For longer storage freeze at 20 4 5 Disposal of the Kit The disposal of the kit must be made according to the national regulations Special information for this product is given in the Material Safety Data Sheet 4 6 Damaged Test Kits In case of any severe damage to the test kit or components DRG has to be informed in writing at the latest one week after receiving the kit Severely damaged single components should not be used for a test run They have to be stored
61. ple Diluent 0 mIU mL und dem Standard 2 mit 50 mIU mL Testdurchf hrung wie unter Quantitative Methode beschrieben Die Schritte 8 und 9 entfallen 6 4 Ergebnisermittlung quantitative Methode 1 Die durchschnittlichen Werte der Optischen Dichte OD f r jedes Set von Standards Controls und Patientenproben bestimmen 2 Eine Standardkurve ermitteln durch Auftragen der mittleren Optischen Dichte jedes Standards gegen die Konzentration wobei der OD Wert auf der vertikalen Y Achse und die Konzentration auf der horizontalen X Achse eingetragen wird 3 Unter Verwendung der mittleren OD wird f r jede Probe die entsprechende Konzentration aus der Standardkurve ermittelt 4 Automatische Methode Die in der Gebrauchsanweisung angegebenen Werte wurden automatisch mit Hilfe der 4 Parameter Gleichung bestimmt 4 Parameter Rodbard oder 4 Parameter Marquardt sind die bevorzugten Methoden Andere Auswertungsfunktionen k nnen leicht abweichende Werte ergeben 5 Die Konzentration der Proben kann direkt von der Standardkurve abgelesen werden Proben die eine h here Konzentration als die des h chsten Standards enthalten m ssen verd nnt werden Dieser Verd nnungsfaktor muss bei der Berechnung der Konzentration beachtet werden 6 4 1 Beispiel f r eine Standardkurve Nachfolgend wird ein typisches Beispiel f r eine Standardkurve mit dem DRG ELISA gezeigt Diese Werte sollten nicht zur Berechnung von Patientendaten verwendet werden Opti
62. rly pregnancy disorders In American Journal of Obstetrics and Gynaecology V 131 No 1 pp 25 32 May 1978 St Louis mentre casi di coriocarcinoma neoplasie trofoblastiche o non trofoblastiche o mola hydatiforma possono presentare concentrazioni molto alti di hCG PRECAUZIONI 1 Per la determinazione di gravidanza si usa il procedimento qualitativo con un valore soglia di 50 mIU mL Risultati negativi o borderline dovrebbero essere ripetuti con campioni freschi al pi tardi 48 ore dopo l analisi dei primi campioni 2 E stato riportato che test di gravidanza immunologici possono risultare falsi in casi di malattie gravi come artrite reumatica o mieloma In questi casi il test di gravidanza dovrebbe essere interpretato con molta precisione Vers 8 0 2014 11 vk 22 DRG HCG ELISA EIA 1469 8 CONTROLLO QUALIT consigliabile utilizzare i campioni controllo secondo le norme di legge Attraverso l utilizzo dei campioni controllo si pu raggiungere una verifica dei risultati giorno per giorno Dovrebbero essere adoperati campioni controllo sia con un livello normale sia con uno patologico Le referenze con i rispettivi risultati del laboratorio QC sono elencati nel QC certificato che allegato al kit valori riportati nel QC certificato si riferiscono al lotto del kit attuale e dovrebbero essere utilizzati per un raffronto dei risultati altres consigliabile di partecipare a programmi di sicurezza sulla qualit
63. robe eine Konzentration h her als der h chste Standard gefunden wird kann diese Probe mit Sample Diluent weiter verd nnt und nochmals bestimmt werden Die Verd nnung muss jedoch bei der Berechnung der Konzentration beachtet werden Beispiel a Verd nnung 1 10 10 uL Probe 90 uL Sample Diluent gr ndlich mischen b Verd nnung 1 100 10 uL Verd nnung a 1 10 90 uL Sample Diluent gr ndlich mischen Achtung Seren von Schwangeren m ssen vor Testbeginn 1 100 mit Sample Diluent verd nnt werden 6 TESTDURCHF HRUNG 6 1 Allgemeine Hinweise Alle Reagenzien und Proben m ssen vor Gebrauch auf Raumtemperatur gebracht und gut durchmischt werden Dabei sollte Schaumbildung vermieden werden Wenn die Testdurchf hrung einmal begonnen wurde muss sie ohne Unterbrechung zu Ende gef hrt werden F rjeden Standard jede Kontrolle oder Probe eine neue Plastikspitze verwenden um Verschleppungen zu vermeiden Die Optische Dichte ist abh ngig von Inkubationszeit und Temperatur Deshalb ist es notwendig vor Beginn der Testdurchf hrung alle Reagenzien in einen arbeitsbereiten Zustand zu bringen die Deckel der Fl schchen zu ffnen alle ben tigten Wells in den Halter zu setzen Nur eine solche Vorbereitung garantiert gleiche Zeiten f r jeden Pipettiervorgang ohne Pausen Als generelle Regel gilt dass die enzymatische Reaktion linear proportional zu Zeit und Temperatur ist Vers 8 0 2014 11 vk 13 DRG HCG EL
64. ropin hCG is a glycoprotein hormone which is normally produced by the placenta during pregnancy After conception the hCG concentration increases rapidly to reach a peak near the end of the first trimester High concentrations are observed throughout pregnancy After delivery hCG levels fall rapidly and become undetectable after a few days Structurally intact hCG molecules are composed of an alpha and a beta subunit with a molucular weight of 38 4 kDa The alpha subunit is nearly identical to the alpha subunits of other glycoprotein hormones such as Thyroid Stimulating Hormone TSH Luteinizing Hormone LH and Follicle Stimulating Hormone FSH The differences in the beta subunit of the respective hormones account for their biological specificity and immunochemical distinctiveness Monoclonal antibodies recognizing unique sites on the beta chain of the hCG molecule are essential for differentiation between hCG and LH FSH and TSH HCG Assays are used for the early detection of pregnancy 1 In addition to the elevated hCG levels during pregnancy high concentrations of hCG may be associated with neoplasms of trophoblastic and nontrophoblastic origin such as hydatiform mole chorionepithelioma embryonal cell carcinoma and many others 2 HCG is commonly elevated in different testicular tumors and is thus used as a tumormarker for testicular tumors in combination with AFP There is a good correlation between changes in hCG levels and respon
65. rupuleusement respect s comme indiqu dans le protocole exp rimental Seule l utilisation de pipettes calibr es ou d un spectrophotom tre lecteur de micro plaques calibr garantit l obtention de r sultats optimaux ce test Ne pas m langer ou utiliser des r actifs contenus dans des kits de lots diff rents Il est conseill de ne pas changer les puits de diff rentes plaques m me si celles ci proviennent du m me lot Les kits peuvent avoir t transport s ou stock s differemment et les caract ristiques de liaison de chaque plaque pourraient ainsi tre modifi es L elimination des solutions chimiques et des r actifs contenus dans ce kit utilis s ou non doit tre en accord avec la r glementation nationale en vigueur concernant l limination des d chets risque biologique La fiche de s curit concernant ce produit peut tre obtenue en contactant directement DRG Instruments GmbH Vers 8 0 2014 11 vk 32 DRG HCG ELISA EIA 1469 4 COMPOSITION DU KIT 4 1 Contenu du kit 1 Microtiterwells Plaques de micro titration 12 x 8 d tacher barrettes plaques de 96 puits Les puits sont recouverts avec un anticorps anti B hCG monoclonal 2 Standard Standard 1 5 5 flacons lyophilis s 1 mL Concentrations 5 50 200 500 1000 mIU mL Conversion 1 pg mL 0 00916 mlU mL Les standards ont t calibr s selon les r f rences Chorionic Gonadotropin Reference reagent 2001 NI
66. sche Dichte 450 nm Standard 1 5 mIU mL Standard 2 50 miumL Standard 3_ 200 mIU mL Standard 4 500 mIU mL Standard 5 1000 mIU mL Vers 8 0 2014 11 vk 14 DRG HCG ELISA EIA 1469 6 5 Qualitative Ergebnisse Fur die qualitative Auswertung wird die Farbintensitat der Probe mit der Farbintensitat des Sample Diluent und des Standard 2 mit 50 mIU mL verglichen Ist die Farbintensit t der Probe geringer als die des Standard 2 mit 50 mIU mL ist die Probe als negativ zu betrachten Ist die Farbintensit t der Probe gleich oder st rker als die des Standard 2 mit 50 mIU mL ist die Probe als positiv zu betrachten 7 ERWARTETE WERTE Es wird empfohlen dass jedes Labor seine eigenen normalen und abnormalen Werte ermittelt 7 1 Gesunde nicht schwangere Erwachsene In einer Studie wurden die Proben von gesunden Erwachsenen untersucht Dabei ergaben sich mit dem DRG HCG ELISA folgende Werte Population Alter Jahre UN hCG mIU ml lt 50 7 2 Serum hCG Werte in der Schwangerschaft woche mIU mL woche mIU mL A O 2200 74200 16 7000 64000 8 2900 190000 1 4500 5000 e 18500 205000 19 3300 4000 A A AAA 7 AS Anmerkung Bei Spontanaborten und bei Vorliegen einer ektopischen Schwangerschaft werden niedrigere Werte ermittelt Siehe hierzu Braunstein G a o First trimester chorionic gonadotropin measurements as an aid in the diagnosis of early pregnancy disorders In America
67. se La sensibilit de l analyse a t calcul e partir de la moyenne la plus lev e de deux d viations standards de l analyse de vingt r plicats du Sample Diluent et a t mesur e a lt 5 mIU mL 9 4 Precision Voir le manuel de Putilisateur en version anglaise 9 5 Recouvrement Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise 9 6 Linearite Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise 10 LIMITES D UTILISATION Toute utilisation impropre des chantillons ou toute modification du test peut influencer les r sultats 10 1 Substances parasites L h moglobine jusqu 4 mg mL la bilirubine jusqu 0 5 mg mL et les triglyc rides jusqu 30 mg mL n ont aucune influence sur les r sultats du dosage 10 2 Drogues parasites Jusqu pr sent nous ne connaissons aucune substance drogues capable d influencer la mesure de hCG dans un chantillon 10 3 Effet de surdosage Jusqu 13300 mIU mL de hCG aucun effet de surdosage n a t d tect avec ce test Vers 8 0 2014 11 vk 37 DRG HCG ELISA EIA 1469 11 ASPECTS LEGAUX 11 1 Fiabilit des r sultats Ce test doit tre exactement utilis selon les instructions d utilisation du fabricant De plus les utilisateurs doivent strictement respecter les r gles de la bonne pratique de laboratoire ou autres lois nationales Cela est sp cialement le cas pour l utilisation des r actifs contr les Pour chaque test il est important d
68. se to therapy 3 Extragonadal germ cell cancers in the absence of clinically or ultrasonographically detectable testicular abnormalities have beein observed as well Over 50 of patients with malignant insulinomas have elevated hCG levels the hormone is not detected in association with benign adenomas Ectopic secretion of hCG also have been found in a small percentage of patients with adenocarcinoma of the ovary pancreas and stomach hepatomas and islet cell carcinomas 2 PRINCIPLE OF THE TEST The DRG HCG ELISA Kit is a solid phase enzyme linked immunosorbent assay ELISA based on the sandwich principle The microtiter wells are coated with a monoclonal mouse antibody directed towards a unique antigenic site on an hCG molecule An aliquot of patient sample containing endogenous hCG is incubated in the coated well with enzyme conjugate which is a monoclonal antibody directed against the alpha chain of hCG conjugated with horseradish peroxidase After incubation the unbound conjugate is washed off The amount of bound peroxidase is proportional to the concentration of hCG in the sample Having added the substrate solution the intensity of colour developed is proportional to the concentration of hCG in the patient sample Vers 8 0 2014 11 vk 2 Ni OO N 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 DRG HCG ELISA EIA 1469 WARNINGS AND PRECAUTIONS This kit is for in vitro diagnostic use only For pro
69. tanto a niveles normal como patoldgico Los controles y los correspondientes resultados del Laboratorio de control de calidad estan fijados en el certificado de control de calidad que acompa an al kit Los valores y los rangos fijados en la hoja del control de calidad se refieren siempre al kit actual y deben usarse para la comparaci n directa de los resultados Es recomendable tambi n hacer uso de programas de Aseguramiento de la Calidad nacionales o internacionales para asegurar la exactitud de los resultados Utilizar m todos estad sticos apropiados para el an lisis de los valores y tendencia de los controles Si los resultados del ensayo no se ajustan a los rangos aceptables establecidos en los controles los resultados obtenidos de los pacientes han de considerarse inv lidos En este caso por favor comprobar las siguientes reas t cnicas Pipeteo y tiempo empleado fot metro fecha de caducidad de los reactivos condiciones de almacenamiento e incubaci n m todos de aspiraci n y lavado Despu s de comprobar los asuntos arriba mencionado sin encontrar ning n error contactar con su distribuidor o con DRG directamente 9 CARACTER STICAS DEL ENSAYO 9 1 Rango din mico del ensayo El rango del ensayo se encuentra entre 5 1000 mIU mL 9 2 Especificidad de los Anticuerpos Reactividad Cruzada Consultar el manual de usuario en ingl s 9 3 Sensibilidad Anal tica La sensibilidad anal tica se calcul a partir de la media m
70. trol Controllo Assay Buffer Assay Buffer Assaypuffer Tampon d essai Tamp n de ensayo Tampone del test Wash Solution Wash Solution Waschl sung Solution de lavage Soluci n de lavado Soluzione di lavaggio 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH T a RressHe di 1NHCI 1NHCI 1NHCI 1N HCI 1N HCI Sample Diluent Sample Diluent ee oe sie diluci n Diluente dei campioni a Conjugate Diluent SA ee ni dilution Li diluci n Diluente del tracciante Vers 8 0 2014 11 vk 39
71. uci n de la muestra 4 2 Equipamiento y material requerido pero no provisto Lector de microplacas calibrado 450 10 nm ej DRG Instruments Microtiter Plate Reader Micropipetas de precisi n variable calibradas Papel absorbente Agua destilada 4 3 Almacenamiento y estabilidad del kit Cuando se almacena a 2 C 8 C los reactivos sin abrir mantienen su reactividad hasta la fecha de caducidad No utilizar los reactivos mas alla de esta fecha Los reactivos abiertos han de almacenarse a 2 C 8 C Las placas multipocillo han de almacenarse a 2 C 8 C Una vez se ha abierto la bolsa hay que tener cuidado y cerrarla de nuevo 4 4 Preparaci n de los Reactivos Dejar que todos los reactivos y el n mero requerido de tiras alcancen la temperatura ambiente antes de usarse Standards Reconstituir los contenidos liofilizados de los viales de los est ndares con 1 0 mL de agua destilada y dejar reposar como m nimo durante 10 minutos Mezclar varias veces antes de usar Nota Los est ndares reconstituidos son estables durante 2 meses a 2 8 Para per odos m s largos congelar a 20 C 4 5 Eliminaci n del Kit La eliminaci n del kit debe realizarse de acuerdo con las leyes nacionales En las hojas de datos de seguridad se proporciona informaci n especial de este producto ver cap tulo 13 4 6 Kits de ensayo da ados En caso de que exista cualquier da o severo del kit de ensayo o de sus comp
72. ue color is less intense than the color of the 50 mIU mL Standard the sample is considered as negative If the blue color is more intense than or equal to the color of the 50 mIU mL Standard the sample is considered as positive 7 EXPECTED NORMAL VALUES It is strongly recommended that each laboratory should determine its own normal and abnormal values The results alone should not be the only reason for any therapeutic consequences The results should be correlated to other clinical observations and diagnostic tests 7 1 Normal healthy adults non pregnant In a study conducted with apparently normal healthy adults using the DRG HCG ELISA the following values are observed Age years Valid N hCG mIU mL A ire 7 2 Normal serum hCG levels during pregnancy Concentration mIU mL 12500 95000 10500 80000 9000 70000 6 2200 7420 16 7000 64000 5500 56000 8 2900 190000 18 4500 50000 9 18500 205000 19 3300 40000 2500 32000 1800 25000 120 14500 125000 During the first six weeks of pregnancy serum hCG concentrations have a doubling time of approximately two days After delivery hCG levels fall rapidly and disappear completely after a few days Very low levels of hCG can be present in ectopic pregnancies see Braunstein G a o First trimester chorionic gonadotropin measurements as an aid in the diagnosis of early pregnancy disorders In American Journal of Obstetrics and Gynaecology V 1
73. until a final solution has been found After this they should be disposed according to the official regulations Vers 8 0 2014 11 vk 4 DRG HCG ELISA EIA 1469 5 SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION Serum or plasma EDTA heparin or citrate plasma can be used in this assay Do not use haemolytic icteric or lipaemic specimens Please note Samples containing sodium azide should not be used in the assay 5 1 Specimen Collection Serum Collect blood by venipuncture e g Sarstedt Monovette for serum allow to clot and separate serum by centrifugation at room temperature Do not centrifuge before complete clotting has occurred Patients receiving anticoagulant therapy may require increased clotting time Plasma Whole blood should be collected into centrifuge tubes containing anti coagulant e g Sarstedt Monovette with the appropriate plasma preparation and centrifuged immediately after collection 5 2 Specimen Storage and Preparation Specimens should be capped and may be stored for up to 5 days at 2 C to 8 C prior to assaying Specimens held for a longer time should be frozen only once at 20 C prior to assay Thawed samples should be inverted several times prior to testing 5 3 Specimen Dilution If in an initial assay a specimen is found to contain more than the highest standard the specimens can be diluted with Sample Diluent and reassayed as described in Assay Procedure For the calculation of the concentrations
74. zungen bereinstimmen Jedes Laborergebnis ist nur ein Teil des klinischen Gesamtbildes eines Patienten Nur in F llen in denen die Laborergebnisse in akzeptabler bereinstimmung mit dem allgemeinen klinischen Bild des Patienten stehen sollten therapeutische Konsequenzen eingeleitet werden Das Testergebnis allein sollte niemals als alleinige Grundlage f r die Einleitung therapeutischer Konsequenzen dienen 11 3 Haftung Jegliche Ver nderungen des Testkits und oder Austausch oder Vermischung von Komponenten unterschiedlicher Chargen von einem Testkit zu einem anderen k nnen die gew nschten Ergebnisse und die G ltigkeit des gesamten Tests negativ beeinflussen Solche Ver nderungen und oder Austausch haben den Ausschluss jeglicher Ersatzanspr che zur Folge Reklamationen die aufgrund von Falschinterpretation von Laborergebnissen durch den Kunden gem Punkt 11 2 erfolgen sind ebenfalls abzuweisen Im Falle jeglicher Reklamation ist die Haftung des Herstellers maximal auf den Wert des Testkits beschr nkt Jegliche Sch den die w hrend des Transports am Kit entstanden sind unterliegen nicht der Haftung des Herstellers 12 REFERENZEN LITERATUR Angaben zu den Referenzen entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung Vers 8 0 2014 11 vk 17 DRG HCG ELISA EIA 1469 Italiano 1 INTRODUZIONE Il test immuno enzimatico DRG HCG ELISA contiene materiale per la determinazione quantitativa di gonadotropi

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