Taq`Ozyme HS
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1. r actionnel de transcription inverse Matrice d ADN 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr WWW ozyme fr 2 Le m lange r actionnel est vortex doucement puis centrifug bri vement pour rassembler l chantillon au fond du tube 3 Programmation du thermocycleur Etape Temp rature Temps Cycles 25 35 ou Tm 5 C sur le Tm le plus bas des deux amorces si le Tm des amorces est diff rent de 60 C 8 pour ADNg gt 1 kb une optimisation peut tre n cessaire voir Optimisations dans le Manuel d Utilisation PR CAUTIONS Eviter les cong lations d cong lations r p t es La Taq Ozyme HS n est pas adapt e pour des amplicons de plus de 5 kb 6 kb en plas mide Si besoin voir la section Produits Associ s COMPOSANTS 5 x 50 ul Tagq Ozyme HS 10 x 1 mi tampon de r action 5X TAMPON DE R ACTION Le tampon de r action 5X contient des dNTPs 5 mM du MgCl 15 mM ainsi que des additifs de stabilisation et des ete de PCR Sa composition est confidentielle2. un tampon de r action 5X contenant des dNTPs du MgCl des amplificateurs de PCR et des stabilisateurs aux concentrations op timales Les optimisations particuli res si elles peuvent tre n ces saires sont ainsi facilit es D FINITION DE L UNIT Une unit est d finie comme la quantit d enzyme qui incorpore 10 nmoles de dNTPs dans un fragment d ADN en 30 min 74 C 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr WWW ozyme fr PROTOCOLE STANDARD Ce protocole est adapt pour une r action de 50 HI partir de matrices purifi es Les amorces ont pr f rentiellement une temp rature de fusion Tm proche de 60 C C est un point de d part pour les optimisations Voir les sections Optimisations et Protocoles sp cifiques PCR sur colonie PCR multiplexe dans le Manuel d Utili sation en ligne Apr s d cong lation compl te de chaque r actif bien homog n iser l aide d un vortex puis centrifuger bri vement tous les r actifs avant leur utilisation 1 Les r actifs sont m lang s dans un micro tube st rile dans l ordre suivant R actif Volume Conc finale Eau st rile redistill e q s p 50 ll Tampon de r action 5X 10 pl ANOEGE anti sens Taq Ozyme HS _Tag Ozyme HS 5 u p u Hl 0 25 o oM 1 25 unit s 50 1 25 unit s 50 pI Plasmide 10 ng Entre ADNg 200 ng 50 pg et 500 ng ADNc non dilu lt Sul 50 ul q s p quantit suffisante pour 8 aliquot d un m lange
3. www ozyme fr MANUEL D UTILISATION www ozyme fr proto taqhs mm r m PRODUITS ASSOCI S Taq Ozyme Taq Ozyme Purple Mix Takara Ex Taq ou Takara LA Taq PCR gt 5 Kb Advantage GC2 Polymerase Mix jusqu 90 de GC ExactLadder DNA PreMix 100 bp Plus ExactLadder DNA PreMix 2 Log ExactLadder DNA PCR PreMix dNTP PreMix 4 x 10 mM dNTP PreMix 4 x 25 mM POUR COMMANDER www ozyme fr OZYME Parc d Activit s du Pas du lac 10 Avenue Amp re 78180 Montigny Le Bretonneux France Email commande ozyme fr T l 33 0 1 34 60 15 16 Fax 33 0 1 34 60 92 12 NUMERO DE FICHE TECHNIQUE OZYAO02 1250 07 714 PRODUIT A USAGE DE RECHERCHE UNIQUEMENT 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr Des femmes et des hommes au service de vos recherches LEl KOPAT TRES 5 x 250 unit s R F RENCE OZYA002 1250 CONCENTRATION 5 unit s l VOLUME 5 x 50 pl STOCKAGE 20 C DUREE DE VIE un an r ception dans les conditions recommand es DESCRIPTIF La Taq Ozyme HS est une Taq ADN Polym rase recombinante ther mostable d marrage chaud Hot Start L enzyme est inactiv e gr ce un anticorps anti Taq permettant la pr paration du m lange r actionnel temp rature ambiante ex PCR haut d bit Cette ca ract ristique vite l amplification des dim res d amorces et des hy bridations non sp cifiques basse temp rature Cette enzyme est fournie avec
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