CA 15.3 - BIO 2000
Contents
1. 0 60 L008129212 60 1002 siedues4 CA 15 3 II Cancer Antigen 15 3 03045838 100 tests Avertissement Le taux de CA 15 3 dans un chantillon de patient peut tre plus ou moins lev selon le test pratiqu Le compte rendu du laboratoire doit donc toujours pr ciser la m thode de dosage du CA 15 3 utilis e Les taux de CA 15 3 d un patient obtenus partir de diff rentes m thodes ne peuvent tre compar s ceci pouvant conduire des erreurs d interpr tation m dicale En cas de changement de methode au cours du suivi th rapeutique les taux de CA 15 3 doivent tre confirm s pendant une p riode transitoire en effectuant des dosages en parall le par les deux m thodes Pour les Etats Unis conform ment la l gislation des Etats Unis ce produit ne peut tre vendu ou distribu qu des laboratoires d analyses m dicales et ce uniquement sur ordre d un m decin Son utilisation est exclusivement r serv e aux m decins ou aux laboratoires d analyses sur prescription m dicale Domaine d utilisation Test immunologique pour la determination quantitative in vitro du CA 15 3 dans le s rum et le plasma Parall lement d autres proc dures cliniques et diagnostiques la surveillance r guli re des taux de CA 15 3 avec le test CA 15 3 Il Elecsys apporte une aide dans e la d tection d une r cidive apr s r mission d un cancer du sein aux stades II et Ill e le contr le de la r ponse au t2. 22 431 445 9 Bablok W et al A General Regression Procedure for Method Transformation J Clin Chem Clin Biochem 1988 26 783 790 10 US Patent von NIH National Institute of health Pour de plus amples informations se r f rer au manuel d utilisation des analyseurs MODULAR ANALYTICS E170 Elecsys 1010 et Elecsys 2010 au dossier Information produit du test CA 15 3 Il Elecsys aux notices d utilisation des r actifs auxiliaires de CA 15 3 II CalSet PreciControl Tumor Marker et Diluent Universal Q Modifications importantes Les modifications concernant les donn es contenues dans le code barres doivent tre entr es manuellement O 2001 Roche Diagnostics CE 2001 09 sil Roche Diagnostics GmbH D 68298 Mannheim 2176718001 12 03 nS
3. 3000 U ml pour les chantillons dilu s 1 10 Dilution des chantillons Pour la pr dilution automatique des chantillons utiliser le milieu de dilution Diluent Universal Elecsys ees 2176718001 10 03 Elecsys 1010 2010 MODULAR ANALYTICS E170 Les chantillons qui apr s pr dilution pr sentent encore une concentration en CA 15 3 gt 300 U ml doivent tre dilu s manuellement au 1 10 avec Diluent Universal Elecsys La concentration obtenue avec l chantillon dilu doit tre gt 30 U ml Multiplier le r sultat obtenu par le facteur de dilution Domaines de r f rence R sultats d une tude multicentrique effectu e dans des centres hospitaliers aux Etats Unis en Espagne et en Allemagne d cembre 1999 e Sujets sains 95 des r sultats obtenus avec le test CA 15 3 Elecsys sur 272 chantillons de sujets sains taient lt 25 U ml e Sujets avec affections b nignes et femmes enceintes Distribution des concentrations en CA 15 3 chez ces sujets Affections Population lt 25 25 50 50 200 gt 200 totale U ml U ml U ml U ml n Distribution en foie pancr as v sicule biliaire 109 84 16 0 0 mammaire 58 88 12 0 0 gyn cologique 42 83 12 5 0 Insuffisance r nale aigud 37 81 19 0 0 Affection urologique 34 82 18 0 0 Infection bact rienne 28 96 0 0 Grossesse 34 97 3 0 e Patients pr sentant une affection maligne sauf affection mammaire Distribution des con
4. areil 20 25 C flacons ouverts au maximum 20 heures Pr l vement et pr paration des chantillons Seuls les chantillons suivants ont t test s S rum recueilli sur tubes standard ou contenant un gel s parateur Plasma recueilli sur h parinate d ammonium de lithium ou de sodium EDTA tripotassique L utilisation de plasma citrat conduit a l obtention de r sultats d env 24 inf rieurs ceux obtenus dans les chantillons s riques Crit re d acceptabilit recouvrement 90 110 de la valeur du s rum ou pente 0 9 1 1 coefficient de corr lation gt 0 95 ordonn e l origine lt 2 x limite de d tection analytique Stabilit cing jours entre 2 et 8 C trois mois 20 C En cas d utilisation de s rum recueilli sur tubes gel s parateur observer les indications donn es par le fabricant des tubes Les chantillons qui contiennent un pr cipit doivent tre centrifug s avant l analyse Ne pas utiliser d chantillons inactiv s par la chaleur Ne pas utiliser d chantillons ou solutions de contr le stabilis s par de l azide S assurer avant l analyse que la temp rature des chantillons des calibrateurs et des contr les est comprise entre 20 et 25 C En raison des risques d vaporation il est recommand de doser les chantillons les contr les et les calibrateurs dans les deux heures qui suivent leur mise en place sur les analyseurs CA 15 3 Il Elecsys R actifs e
5. centrations en CA 15 3 chez ces patients Carcinomes Population lt 25 25 50 50 200 gt 200 totale U ml U ml U ml U ml n Distribution en gastrique 36 75 14 8 3 hepatique 37 60 32 3 5 broncho pulmonaire 38 82 13 5 0 ovarien 34 47 21 29 3 gyn cologique 5 40 20 40 0 prostatique 48 79 17 4 0 colorectal 40 93 7 0 0 pancr atique 40 65 33 2 0 e Patientes pr sentant un cancer du sein Distribution des concentrations en CA 15 3 chez ces patientes la stadification UICC des patientes a t tablie lors du diagnostic initial avant tout traitement Les cas de r cidive montraient des m tastases M1 Population lt 25 25 50 50 200 gt 200 totale U ml U ml U ml U ml n Distribution en UICC 56 88 12 0 0 UICC II 126 85 13 2 0 UICC Ill 77 53 30 14 3 UICC IV 24 25 17 37 21 R cidives 75 15 25 36 24 Performances analytiques 5 Pr cision Les r sultats indiqu s ci dessous ont t obtenus avec des analyseurs Elecsys les r sultats obtenus au laboratoire peuvent diff rer de ceux ci La pr cision a t d termin e l aide de r actifs Elecsys de pools de s rums humains et de serums de contr le selon un protocole modifi EP5 A du N C C L S National Committee for Clinical Laboratory Standards Chaque chantillon a t analys 6 fois par jour pendant 10 jours n 60 pr cision intra s rie sur E170 n 21 Elecsys 1010 2010 Pr cision intra s rie Pr cision inte
6. dive Sur 44 patientes en r mission d un cancer du sein au stade Il ou Ill ne pr sentant aucun signe de maladie au d but du suivi volutif 20 ont montr une rechute clinique Pour 18 d entre elles 90 l augmentation des taux de CA 15 3 tait gt 25 Sur 24 patientes sans r cidive 17 71 avaient des taux de CA 15 3 constants augmentation jusqu 25 ou d croissants voir tableau ci dessous Diagnostic clinique r cidive oui non total Er oui 18 7 25 gre non 2 17 19 ES total 20 24 44 A partir de ce tableau les valeurs pr dictive positive et pr dictive n gative suivantes avec leur intervalle de confiance de 95 respectif ont t valu es Valeur pr dictive positive 72 50 87 Valeur pr dictive n gative 90 66 98 854 Elecsys 1010 2010 MODULAR ANALYTICS E170 Suivi de la r ponse au traitement Sur 60 patientes chez lesquelles un cancer du sein avec m tastases avait t diagnostiqu 23 ont r pondu au traitement selon les crit res cliniques Pour 18 d entre elle 78 la d croissance des taux de CA 15 3 taient gt 25 Sur 37 patientes ne r pondant pas au traitement 29 78 avaient des taux de CA 15 3 constants augmentation jusqu 25 ou croissants voir tableau ci dessous Diagnostic clinique r ponse th rapeutique g oui non total 5 2 lt oui 18 8 26 ae a non 5 29 34 551 total 23 37 60 a A partir de ce tableau les valeurs pr dictiv
7. e positive et pr dictive n gative suivantes avec leur intervalle de confiance de 95 respectif ont t valu es Valeur pr dictive positive 69 48 85 Valeur pr dictive n gative 85 68 95 Bibliographie 1 Hilkens J et al Monoclonal antibodies against human milkfat globule membranes detecting differentiation antigens of the mammary gland Prot Biol Fluids 1982 29 813 816 2 Hilkens J et al Monoclonal antibodies against human milkfat globule membranes detecting differentiation antigens of the mammary gland and its tumors Int J Cancer 1984 34 197 206 3 Kufe D et al Differential reactivity of a novel monoclonal antibody DF3 with human malignant versus benign breast tumor Hybridoma 3 1984 3 223 232 4 Sekine H et al Purification and characterization of a high molecular weight glycoprotein detectable in human milk and breast carcinomas J Immunology 1985 135 5 3610 3615 5 Guder WG Narayanan S Wisser H Zawta B List of Analytes Preanalytical Variables Brosch re in Samples From the Patient to the Laboratory GIT Verlag Darmstadt 1996 8 ISBN 3 928865 22 6 8 9 6 Documentation de Roche 7 Passing H Bablok W A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods J Clin Chem Clin Biochem 1983 21 709 720 8 Passing H Bablok W Comparison of Several Regression Procedures for Method Comparison Studies and Determination of Sample Sizes J Clin Chem Clin Biochem 1984
8. e prise d essai de 20 pl met l antig ne en pr sence de l anticorps monoclonal anti CA 15 3 sp cifique marqu la biotine et d un anticorps monoclonal anti CA 15 3 sp cifique marqu au ruthenium Il se forme un sandwich e 2 incubation Les microparticules tapiss es de streptavidine sont ajout es dans la cuvette r actionnelle Le complexe immunologique est fix la phase solide par une liaison streptavidine biotine e Le m lange r actionnel est transf r dans la cellule de mesure les microparticules sont maintenues au niveau de l electrode par un aimant L limination de la fraction libre est effectu e par le passage de ProCell Une difference de potentiel appliqu e l lectrode d clenche la production de luminescence qui est mesur e par un photomultiplicateur e Les r sultats sont obtenus l aide d une courbe de calibration Une courbe de r f rence est m moris e dans le code barres du r actif et est r ajust e pour l analyseur utilis par une calibration en deux points Ru bpy 3 Tris 2 2 bipyridyl rutheniumf ll Reactifs Contenu du coffret et concentrations Coffret CA 15 3 Il Elecsys R f 03045838 100 tests M Microparticules tapiss es de streptavidine 1 flacon contenant 6 5 ml bouchon transparent microparticules tapiss es de streptavidine 0 72 mg ml capacit de liaison 470 ng de biotine mg de microparticules conservateur R1 Anticorps anti CA 15 3 biotine 1
9. ettoyage pour la cellule de mesure e Ref 03023141 PC CC Cups 50 godets pour la thermor gulation de ProCell M et de CleanCell M e R f 03005712 ProbeWash M 12 x 70 ml solution de lavage pour la fin de la s rie et pour le ringage en cas de changement de r actif e Ref 12102137 AssayCups AssayTips Combimagazin M 48 blocs de 84 tubes a essai embouts de pipettes sacs pour d chets e R f 03023150 WasteLiner sacs pour d chets e Ref 03027651 SysClean Adapter M adaptateur M pour SysClean Pour les trois appareils e R f 11298500 SysClean Elecsys 5 x 100 ml solution de lavage du systeme Disponible uniquement aux Etats Unis e R f 11822217 CA 15 3 CalCheck Elecsys trois niveaux de concentration SANTE CA 15 3 Il Cancer Antigen 15 3 Mode op ratoire Pour garantir le bon fonctionnement du test se conformer au mode d emploi de l appareil utilis et v rifier que les r actifs les solutions auxiliaires et les consommables n cessaires la r alisation du test sont disponibles en quantit suffisante L analyseur effectue automatiquement l homog n isation des microparticules Les informations sp cifiques du test m moris es sur l tiquette code barres doivent tre saisies Si exceptionnellement le code barres ne peut tre lu par l appareil saisir manuellement la s rie des 15 chiffres inscrits sur l tiquette E170 Elecsys 2010 porter les r actifs r frig r s env 20 C avant le char
10. faisant appel a d autres anticorps Comparaison de m thodes Une comparaison entre le test CA 15 3 II Elecsys y et le test CA 15 3 Elecsys x effectu e sur des s rums de patients hospitalis s a permis d tablir les corr lations suivantes Nombre d chantillons analys s 52 Passing Bablok R gression Pente 1 06 95 de l intervalle de confiance 1 01 1 15 Ordonn e l origine 2 66 95 de l intervalle de confiance 0 99 5 97 Coefficient de corr lation 0 965 Les concentrations en CA 15 3 taient situ es entre env 6 et 280 U ml Performances cliniques du marqueur dans des suivis de patientes Dans une tude des cas de patientes ayant t suivies pour cancer du sein ont t examin s r trospectivement partir d au moins 4 r sultats de dosages par patientes effectu s au cours du suivi Les patientes ont t classifi es d apr s l observation clinique techniques d imagerie m dicale et autres examens cliniques selon les crit res progression r cidive r gression r ponse au traitement ou aucune modification de la maladie Les concentrations en CA 15 3 ont t dos es parall lement et la croissance l vation des concentrations gt 25 avec des taux de CA 15 3 gt 10 U ml en fin de progression et la d croissance du marqueur d croissance des concentrations gt 25 ont t d termin es en fonction des variations des concentrations D tection pr coce de r ci
11. flacon contenant 10 ml bouchon gris anticorps anti CA 15 3 monoclonal 115D8 de souris marqu la biotine 1 75 mg l tampon phosphate 20 mmol l pH 6 0 conservateur R2 Anticorps anti CA 15 3 Ru bpy 3 1 flacon contenant 10 ml bouchon noir anticorps anti CA 15 3 monoclonal DF3 de souris marqu au ruth nium 10 mg l tampon phosphate 100 mmol l pH 7 0 conservateur Pr cautions d emploi et mises en garde Pour diagnostic in vitro Observer les pr cautions habituelles de manipulation en laboratoire L elimination de tous les d chets doit tre effectu e conform ment aux dispositions l gales Pr paration des r actifs Les r actifs contenus dans le coffret sont pr ts l emploi et ne peuvent tre utilis s s par ment Elecsys 1010 2010 MODULAR ANALYTICS E170 Toutes les informations n cessaires au d roulement du test sont m moris es dans les codes barres des flacons r actifs et doivent tre saisies Conservation et stabilit Ranger le coffret CA 15 3 Il Elecsys entre 2 et 8 C en position verticale de mani re ce que toutes les microparticules soient rassembl es lors de l homog n isation qui precede l analyse Stabilit Avant ouverture entre 2 et 8 C jusqu la date de p remption indiqu e Apr s ouverture entre 2 et 8 C douze semaines Sur E170 et Elecsys 2010 huit semaines Sur Elecsys 1010 quatre semaines conservation altern e au r frig rateur et dans l app
12. gement et les placer dans le plateau r actifs de l appareil thermostat 20 C Eviter la formation de mousse L analyseur g re le contr le de la temp rature louverture et la fermeture des flacons Elecsys 1010 porter les r actifs r frig r s env 20 25 C et les placer dans le plateau r actifs chantillons de l appareil temp rature ambiante 20 25 C Eviter la formation de mousse Ouvrir les flacons avant la mise en route de l analyseur puis les refermer et les replacer au r frig rateur apr s la s rie de dosages Calibration Le test CA 15 3 Il Elecsys a t calibr par rapport au test Elecsys CA 15 3 lui m me calibr par rapport aux tests Enzymun Test CA 15 3 et CA 15 3 RIA de Centocor Fujirebio Diagnostics Le code barres du flacon r actif contient toutes les informations sp cifiques de la calibration du lot la courbe de r f rence y est m moris e Le r ajustement de la courbe pour l appareil utilis est effectu l aide des 2 solutions CA 15 3 Il CalSet Fr quence de calibration Effectuer une calibration par lot en utilisant un r actif frais ayant t enregistr au maximum 24 heures par l appareil Une nouvelle calibration est recommand e pour E170 Elecsys 2010 e apr s un mois 28 jours pour un m me lot de r actifs e apr s sept jours pour un m me flacon de r actif rest sur l appareil Elecsys 1010 e chaque nouveau coffret e apr s sept jours une te
13. leur initiale Chez les patients trait s par de fortes doses de biotine gt 5 mg jour il est recommand d effectuer le pr l vement de l chantillon au moins 8 heures apr s la derni re administration Le r sultat n est pas influence par le facteur rhumatoide jusqu a 1500 U ml ll n a pas t observ d effet crochet pour des concentrations lt 20 000 U ml L influence de 28 m dicaments fr quemment administr s a t recherch e in vitro aucune interf rence n a t observ e Comme pour tous les tests contenant des anticorps monoclonaux de souris on peut obtenir des r sultats erron s avec des s rums de patients ayant recu des anticorps monoclonaux de souris dans un but th rapeutique ou de diagnostic Ce risque est toutefois minimis dans le test CA 15 3 Il Elecsys Dans de rares cas des titres tr s lev s d anticorps anti streptavidine et anti ruth nium peuvent conduire des interf rences Pour le diagnostic les r sultats du test CA 15 3 II Elecsys doivent toujours tre confront s aux donn es de l anamn se du patient au tableau clinique et aux r sultats des autres examens Domaine de mesure 1 00 300 U ml d fini par la limite de d tection et le maximum de la courbe de r f rence Les taux situ s au dessous de la limite de d tection sont exprim s de la mani re suivante lt 1 00 U ml et les taux situ s au dessus du domaine de mesure de la mani re suivante gt 300 U ml ou gt
14. mp rature ambiante de 20 25 C e apr s trois jours une temp rature ambiante de 25 32 C E170 Elecsys 1010 et Elecsys 2010 e quand elle s av re n cessaire par ex si les r sultats des s rums de contr le se situent en dehors des limites de confiance Validation de la calibration Le logiciel de l appareil v rifie la validit de la courbe et affiche les anomalies Contr le de qualit Utiliser PreciControl Tumor Marker 1 Elecsys et PreciControl Tumor Marker 2 Elecsys ou d autres s rums de contr le appropri s ll est recommand de doser les s rums de contr le 1 et 2 en simple au moins une fois toutes les 24 heures pendant une routine pour chaque nouveau coffret et lors d une calibration Cette fr quence peut varier selon les exigences du laboratoire Les r sultats doivent se situer dans les limites de confiance Chaque laboratoire tablira la proc dure suivre si les r sultats sont situ s en dehors des limites de confiance Expression des r sultats E170 Elecsys 1010 et Elecsys 2010 calculent automatiquement le taux de CA 15 3 de chaque chantillon Les r sultats sont exprim s au choix en U ml ou en kU l Limites d utilisation Interf rences 5 La bilirubine lt 650 mg l ou 65 mg dl l h molyse Hb lt 3 0 g dl la lip mie Intralipid lt 15 g l ou 1500 mg dl la biotine lt 100 ng ml n influencent pas le r sultat crit re d acceptabilit recouvrement 10 par rapport la va
15. r s rie Echantillon X Ss CV Ss CV U ml U ml U ml S rum humain 1 38 0 0 81 2 1 1 38 3 6 S rum humain 2 85 5 2 72 3 2 3 66 4 3 Serum humain 3 179 4 56 2 6 6 60 3 7 PreciControl TM 1 24 5 0 62 2 5 0 87 3 6 PreciControl TM 2 67 6 2 48 3 7 2 83 4 2 0 LL 1008129212 60 1002 sreduery CA 15 3 ll Cancer Antigen 15 3 E170 Pr cision intra s rie Pr cision inter s rie Echantillon E Ss CV E s CV U ml U ml U ml U ml S rum humain 1 18 9 0 24 1 3 20 1 0 64 3 2 S rum humain 2 76 4 1 07 1 4 79 0 3 08 3 9 S rum humain 3 148 1 72 1 2 156 7 75 5 0 PreciControl TM 1 20 3 0 24 1 2 21 3 0 89 4 2 PreciControl TM 2 47 6 0 70 18 49 6 1 82 3 7 Sensibilit limite de d tection analytique lt 1 00 U ml La limite de d tection correspond au taux le plus faible de CA 15 3 mesurable qui puisse tre diff renci de zero Elle repr sente la concentration du standard le plus faible de la courbe de r f rence 2s calibrateur de r f rence standard 1 2s pr cision intra s rie n 21 Specificite analytique La d termination du CA 15 3 avec le test CA 15 3 II Elecsys est bas e sur l utilisation des anticorps monoclonaux 115D8 et DF3 qui sont uniquement a disposition aupr s de Fujirebio Diagnostics ses titulaires de licence et ses repr sentants Les caract ristiques de la m thode utilisant ces anticorps ne sont pas applicables aux m thodes
16. raitement chez les patientes atteintes d un cancer du sein avec m tastases Ce test par lectrochimiluminescence ECLIA est adapt aux dosages immunologiques sur les analyseurs Elecsys 1010 2010 et MODULAR ANALYTICS E170 module Elecsys de Roche Tous les appareils ne sont pas disponibles dans tous les pays G n ralit s Les taux mesur s de CA 15 3 sont d finis par l utilisation des anticorps monoclonaux 115D8 et DF3 dans un dosage en technique sandwich L anticorps monoclonal 115D8 est dirig contre les membranes de globules lipidiques de lait humain L anticorps DF3 est dirig contre une fraction membranaire issue de cellules d un carcinome d un sein metastasique Les d terminants antig niques 115D8 et DF3 mis en vidence par le test sont localis s sur une glycoprot ine d un poids mol culaire gt 400 kD Cet antig ne appel MAM 6 appartient un sous groupe de glycoprot ines sialyl es les mucines pith liales polymorphes Celles ci sont en r gle g n rale s cr t es dans la lumi re des cellules glandulaires et ne sont pas pr sentes dans la circulation Lorsque les cellules sont malignes leur membrane est perm able et les mucines pith liales polymorphes sont alors detectables dans le s rum avec le test CA 15 3 Principe M thode Sandwich Dur e totale du cycle analytique 18 minutes e 1 incubation Apr s une dilution automatique de l chantillon au 1 10 un
17. t mat riel n cessaires Contenu du coffret R f 03045838 Coffret CA 15 3 II Elecsys pour 100 tests eM Microparticules tapiss es de streptavidine e Ri Anticorps anti CA 15 3 biotine e R2 Anticorps anti CA 15 3 Ru bpy 3 R actifs et mat riel auxiliaires n cessaires e R f 03045846 CA 15 3 II CalSet Elecsys 4 x 1 ml e R f 11776452 PreciControl Tumor Marker Elecsys PreciControl Tumor Marker 1 pour 2 x 3 ml et PreciControl Tumor Marker 2 pour 2x3ml e R f 03183971 Diluent Universal Elecsys 2 x 40 ml milieu de dilution de l echantillon ou Ref 11732277 Diluent Universal Elecsys 2 x 18 ml milieu de dilution de l echantillon e Equipement habituel de laboratoire e Elecsys 1010 2010 ou MODULAR ANALYTICS E170 Mat riel auxiliaire pour Elecsys 1010 et Elecsys 2010 e R f 11662988 ProCell Elecsys 6 x 380 ml tampon syst me e R f 11662970 CleanCell Elecsys 6 x 380 ml solution de nettoyage pour la cellule de mesure e R f 11930346 SysWash Elecsys 1 x 500 ml additif la solution de lavage e R f 11933159 Adaptateur pour SysClean e R f 11706829 Assay Cup Elecsys 1010 12 x 32 cuvettes r actionnelles ou R f 11706802 Assay Cup Elecsys 2010 60 x 60 cuvettes r actionnelles e R f 11706799 Assay Tip Elecsys 2010 30 x 120 embouts de pipette Mat riel auxiliaire pour MODULAR ANALYTICS E170 e R f 12135019 ProCell M 1 x 21 tampon syst me e Ref 12135027 CleanCell M 1 x 21 solution de n
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