Hoefer SE600/SE660
Contents
1. S usa um estoque de poder que CE marcou ou seguranca registrada por um nacionalmente reconhecido testando laborat rio A tampa de seguranca deve estar em lugar antes de ligar o estoque de poder leva a um estoque de poder Desliga todos controlos de estoque de poder e desconecta os chumbos de poder antes de retirar a tampa de seguranca Circulam s gua ou 50 50 glicol de gua ethylene pelo exchanger de calor se for assim equiparam N o ligue o exchanger de calor a uma torneira de gua nem qualquer fonte de refrigerante onde a press o de gua n o regulado Nunca introduz anticongelante nem qualquer org nico solvente em qualquer parte do instrumento Org nico solvente causar agress o irrepar vel unidade N o opera com temperaturas de buffer acima do m ximo especificou especificac es t cnicas Superaquecer causar agress o irrepar vel a unidade pv Informaci n Importante Spanish Si este equipo es utilizado en una manera no especificado por Hoefer Inc la protecci n proporcionado por el equipo puede ser danada Este instrumento es dise ado para el uso interior del laboratorio s lo S lo accesorios y partes aprobaron o suministraron por Hoefer Inc puede ser utilizado para operar para mantener y para atender a este producto S lo utiliza una alimentaci n que es CE marc o la seguridad certificada por un nacionalmente reconocido probando el laboratorio La ta2. Widerspr chliche Ergebnisse f r das gleiche System und Einstellungen zeigen m gliche Probleme wie undichte Strom falscher Puffer Konzentrationen hohe Salzkonzentrationen oder inkonsistent chemische Qualit t berpr fen Band Fortschritt nach 5 min und wieder nach 1 h ein Auge auf die Wanderungsgeschwindigkeit des Tracking Farbstoff Die Strecke ist abgeschlossen wenn die Markerfarbstoff erreicht den Boden des Gels Sehen Sie sich das Puffer Ebene und wenn n tig erg nzen es als erforderlich um die obere Elektrode unter Wasser zu halten Ein kleines Volumen von Puffer kann an einer Platte eingekerbt oder Dichtung oder Puffer auslaufen kann durch das Gel passieren Hinweis Verwenden Sie nur flexible Kunststoff neugierigen Werkzeuge zur Vermeidung von Splittern der Glasplatten Nach der Elektrophorese Sobald die Tracking Farbstoff erreicht den Boden des Gels schalten Sie die Stromversorgung trennen Sie die Leitungen und entfernen Sie den Sicherheitsdeckel mit dem Finger Hebel zwischen dem Deckel und der Oberseite des Warmetauschers Gerade nach oben heben um nicht zu verbiegen die Bananenstecker Wenn Kiihlmittel zirkuliert stoppen den Fluss und ziehen Sie die Armaturen oder Schl uche Ziehen Sie die obere Pufferkammer Montage Gie en Sie den Puffer in ein Waschbecken Installieren Sie die Assembly im Dual Gel Caster und lassen Sie dann die Sandwiches durch Drehen und Entfernen der Nocken Q
3. utzerhandbuch Deutsch Hoefer SE600 SE660 Standard Dual gek hlte Gel Elektrophorese Einheit b SE600 IM German Rev C0 06 12 H O e fe r Inhalts Wichtige Informationen ueeaaa aaa aa Ee RR ee ji Elektro und Elektronikger tegesetz ElektroG vii Gel Elektrophorese Einheit Funktion und Beschreibung 1 Technische Daten asses sos owa PAPA 2 Auspacken und Inventur aaa ee ee 4 Bedienungsanleitung Bereiten Sie die Gel Sandwich 8 Acrylamidgelen e aueaaa aaa aaa aaa aaa ee ee 12 Gradientengele aeaaa aaa aa aaa AR Ee ee 14 Probenvorbereitung und Loading 11 16 Bleu TEE 18 Trennung der Probe sans 23 Pflege und Wartung 26 Fehlerbebebung aa aaa ee ee RE ee 27 Bibliographie lea 31 Bestelltmtormationen nn en 34 pi Wichtige Informationen Deutsch Wenn diese Ausr stung gewisserma en nicht angegeben durch Hoefer Inc verwendet wird kann der durch die Ausr stung zur Verf gung gestellte Schutz verschlechtert werden Dieses Instrument wird f r den Innenlaborgebrauch nur daf r entworfen Nur Zus tze und Teile genehmigten oder lieferten durch Hoefer Inc kann f r das Funktionieren das Aufrechterhalten und die Wartung dieses Produktes verwendet werden Verwenden Sie nur eine Energieversorgung die CE gekennzeichnet oder durch ein national anerkanntes Probe
4. Schrauben Sie die Klammern aus den Sandwiches und zu entfernen Vorsichtig lockern und schieben Sie dann beide weg Abstandshalter Verwenden Sie den Hoefer Wunderkeil Gelplatte Trennung Werkzeug um die Platten zu trennen Heben Sie die Glasplatte mit dem Gel befestigt Behandeln Sie das Gel mit Sorgfalt um Besch digungen zu vermeiden Die Platte umdrehen und Position das Gel tief ber dem Farbegestell Pry einer Ecke des Gels vom Glas und lassen Sie ihn in das Fach fallen lassen oder wenn das Gel ist dick genug sind heben Sie ihn und legen Sie sie in das Fach ein Um ein Verspritzen zu vermeiden f gen F rbung oder Fixierl sung mit der Schale nach wird das Gel bertragen Reinigen Sie das Gerat wie im nachsten Abschnitt beschrieben e p25 e Nicht autoklavieren oder heizen jeden Teil ber 45 C e Verwenden Sie keine organischen L sungsmittel Scheuermittel starke Reinigungsl sungen oder starke S uren oder Basen die Kammern zu s ubern e Nicht einweichen das laminierte Dichtung Hinweis Wenn das alte Rohr gerissen oder gebrochen ist schitzen Sie Ihre Hand mit dicken Handschuhen einem Tuch oder Kiichenpapier bevor Sie den Schlauch p26 Pflege und Wartung Reinigung Unmittelbar nach jedem Gebrauch griindlich die oberen und unteren Pufferkammern mit Wasser und anschlie end gr ndlich mit destilliertem Wasser Behandeln Sie die obere Pufferkammer mit Sorgfalt um eine
5. blitt git av utstyret kan bli svekket Dette instrumentet er utformet for innend rs laboratoriumbruk bare Bare tilbeh r og deler godkjente eller forsynte ved Hoefer Inc kan bli brukt for drive vedlikeholde og O piv betjene dette produktet bruker Bare en kraftforsyning som er CE merket eller sikkerhet som ha blitt sertifisert av et som nasjonalt ha blitt anerkjent praver laboratorium Sikkerheten lokket ma veere pa plass for forbinding kraftforsyningene blyene til en kraftforsyning Vender all kraftforsyningsstyring av og frakopler kreftene blyene for fjerning sikkerheten lokket Sirkulerer bare vann eller 50 50 vann ethylene glykol gjennom oppvarmingen veksleren i sa fall utstyrer Ikke forbind oppvarmingen veksleren til en vanntapp eller noe kjalemiddelkilde hvor vannet trykket er unregulated Introduserer Aldri antifreeze eller noe organisk losemiddel inn i noe del av instrumentet Organiske losemiddler vil for rsake irreparabel skade pa enheten Driver med buffertemperaturer over maksimum ikke spesifiserte teknisk spesifikasjoner A overoppheting vil for rsake irreparabel skade pa enheten Wazne Informacje Polish Je eli ten sprz t jest wykorzystywany w spos b nie okre lone przez Hoefer Inc do ochrony przewidzianej przez urz dzenie mo e zosta obni ony Instrument ten jest przeznaczony do u ytku w laboratoriach kryty tylko Tylko akcesori w i cz ci zatwierdzone lub dostarczone
6. kopplar bort kraften blyen f re flytta sakerheten locket Cirkulerar bara vatten eller 50 50 vatten ethylene glycol genom v rmen exchanger i sa utrustad fall Inte kopplar varmen exchanger till en vatten kran eller n got kylmedel k lla dar vattnet trycket ar unregulated Inf r aldrig kylvatska eller nagot organiska l sningsmedel in i nagon del av instrumentet Organiskt l sningsmedel ska orsaka irreparable skada till enheten Anv nd inte med buffert temperaturer ver det h gsta angivna tekniska specifikationerna verhettning skulle orsaka irreparabla skador pa enheten e pvi Deutsch English French Italian Spanish Swedish x La 1 A La Elektro und Elektronikger tegesetz ElektroG Dieses Symbol kennzeichnet elektrische und elektronische Ger te die nicht mit dem gew hnlichen unsortierten Hausm ll entsorgt werden d rfen sondern separat behandelt werden m ssen Bitte nehmen Sie Kontakt mit einem autorisierten Beauftragten des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung Ihres Ger tes zu erhalten This symbol indicates that the waste of electrical and electronic equipment must not be disposed as unsorted municipal waste and must be collected separately Please contact an authorized representative of the manufacturer for information concerning the decommissioning of your equipment Ce symbole indique que les d chets relatifs a l quipement lectrique et
7. 2X Probenpuffer und hochreines Wasser auf die gew nschte Konzentration zu erzielen Erhitzen des Rohres in kochendem Wasser fiir 90 Sekunden dann erlauben auf Raumtemperatur abk hlen gelassen Behandelte Proben k nnen bei 40 bis 80 C f r zuk nftige Auflagen gelagert werden W rme Membranproteine bis 60 C f r 20 Minuten Nicht verwendete Probe bei 4 C Unterlegen Sie die Probe in die Vertiefungen mit einem spitzen Mikrospritze oder Gel loading Pipettenspitze Tabelle 2 Probenvolumen fiir Standard Gr Ren Kamm Volumen der Probe ul pro 1 mm Tiefe Anzahl der Kamm Dicke mm Vertiefungen 0 75 1 0 1 5 10 6 2 8 3 12 4 12 5 8 TA 11 5 15 4 3 5 7 8 6 20 3 1 4 1 6 2 28 2 1 2 7 4 1 1 1 ref prep 4 90 6 121 9 183 1 2 ref prep 4 85 6 112 9 171 e p17 Abb 7 Anbringen Gel Sandwiches an der oberen Pufferkammer Wenn die Assembly Lecks bringen Sie es zu einem Waschbecken und teilweise freizugeben damit die Nocken Puffer ablaufen lassen von der oberen Kammer Demontieren berpr fen Ausrichtung aller Sandwich Bauteile und ggf einstellen A Entfernen Nocken aus den unteren Nocken L cher Legen Sie die obere Kammer auf die Sandwiches und legen Sie dann die Nocken in die oberen L cher cam Grat kurzes Ende nach unten zeigt B Der endg ltige Nockenposition nicht gezeigt muss vertikal so dass die Anordnung in den unteren Pufferkammer passt d az
8. Besch digung des Bananenstecker Reinigen Sie Dichtungen mit einem milden Reinigungsmittel und sp len mit destilliertem Wasser Lassen Sie an der Luft trocknen Saubere Glasplatten und Abstandhalter mit einer verd nnten L sung eines Labor Reiniger wie RBS 35 dann gr ndlich mit Leitungswasser und destilliertem Wasser Glasplatten k nnen auch mit aber nicht in gespeichert S ure Reinigungsl sungen behandelt werden Ersetzen eines W rmetauschers Glasrohr 0 Entfernen Sie den Schlauch durch gleichzeitiges Drehen und schieben Sie ihn nach unten so weit wie m glich bis das obere Ende ist frei von der oberen Tulle F hren Sie das Rohr so dass es die Montage wird klar dann heben Sie den Schlauch aus der unteren se Fetten Sie die AuBenseite der beiden Enden des neuen Rohres mit Silikonfett Twist und schieben Sie ein Ende des Rohres in die untere Ose Dann rutscht das andere Ende in die obere Ose oben vorsichtig mit einer leichten Drehung bis zum Anschlag berpr fen Sie dass der Schwingungsd mpfer nicht eingeklemmt wird Fehlerbehebung problem Gel Sandwich Lecks beim Wirken Probenbeh lter besch digten oder unregelm ige Unvollst ndige Gelpolymerisation verursachen Verschmutzte oder besch digte abhilfe Platten Abstandshalter und die Dichtung muss vollst ndig sauber Waschen Sie wenn n tig Komponenten Ersetzen gechipt Platten vor allem wenn in der N he
9. CA e p18 Endmontage Obere Pufferkammer 0 Sp len Sie beide Puffer Kammern mit Wasser und destilliertem Wasser gr ndlich vor jedem Gebrauch Hinweis Bevor Sie das erste Mal Zerlegen Sie das Ger t und waschen mit einer verd nnten L sung eines Labor Waschmittel und gut nachsp len zun chst mit Wasser und dann mit destilliertem Wasser Entfernen Sie alles Gel Einhaltung der AuBenseite der Gel Sandwiches Wenn das Ausfiihren nur einer Gel Blockieren Sie die zweite obere Pufferkammer Schlitz durch die Installation des Acryl Puffer Damm mit dem Gerat mitgeliefert Fit Schellen auf dem Damm darauf achtend die Klammer und endet Damm Kanten auszurichten Installieren Sie die Dummy Gel Schrauben nach au en in der zweiten Wiege im Dual Gel Caster Bringen Sie die Gel Sandwich auf die obere Pufferkammer Drehen Sie den oberen Pufferkammer um und legen eine geschlitzte Dichtung in die beiden Aussparungen Sandwich Halter Sowohl der Schlitz in der Dichtung und der Schlitz in der Aussparung m ssen deckungsgleich sein Beide Dichtungen sind geschlitzt verwendet auch wenn das Ausf hren nur einer Gel Sandwich werden Rillen entlang jedem Steckplatz helfen die Dichtung an Ort und Stelle Zus tzlich kann eine kleine Menge des Gels Dichtung an jedem Ende der Dichtung aufgebracht werden vor der Installation hin damit der Dichtung gegen die obere Pufferkammer Lassen Sie die Sandwiches aus d
10. OSC pp 10 4 1 10 4 13 1992 Anderson N G Anderson N L and Tollaksen S L Proteins of human urine I Concentration and analysis by two dimensional electrophoresis Clin Chem Jul 25 7 1199 2210 1979 Anderson Leigh and Anderson Norman G High resolution two dimensional electrophoresis of human plasma proteins Proc Natl Acad Sci USA 74 5421 5425 1977 Anderson L Two Dimensional Electrophoresis Operation of the ISO DALT System Second Edition Large Scale Biology Press 1991 Bravo R Schafer R Willecke K MacDonald Bravo H Fey S J and Celis J E More than one third of the discernible mouse polypeptides are not expressed in a Chinese hamster mouse embryo fibroblast hybrid that retains all mouse chromosomes Proc Natl Acad Sci USA Apr 79 7 2281 2285 1982 Hurkman W J and Tanaka C K Solubilization of Plant Membrane Proteins for Analysis by Two Dimensional Gel Electrophoresis Plant Physiology 81 802 806 1986 Mets L J and Bogorad L Two dimensional polyacrylamide gel electrophoresis an improved method for ribosomal proteins Anal Biochem Jan 57 1 200 210 1974 O Farrell P H High resolution two dimensional electrophoresis of proteins J Biol Chem May 25 250 10 4007 4021 1975 Bjellqvist B et al Isoelectric focusing in immobilized pH gradients principle methodology and some applications J Biochem Biophys Methods 6 317 339 1982
11. den unteren Ecke Oberfl chen durch die Abstandhalter und Platten erstellt wenn Sie Ihre Sandwiches auch nach mehreren Versuchen der Ausrichtung auslaufen fortzusetzen E y Hinweis Beim Drehen der Nocken ist es einfacher zu halten der Zauberer ausgewogene wenn Sie sowohl in Richtung der Mitte des Zaubernden drehen Abb 5 Caster Komponenten und Setup Setzen Sie den laminierten Dichtung in das Casting Docking Station siehe Abb 5 mit dem Schaum nach unten ein Legen Sie die Klemmvorrichtung in der Casting Wiege schrauben Seite nach auBen Fir 24 cm Platten legen Sie das Sandwich so dass die Klemme l nger an der Spitze ist Legen Sie eine Nocke in das Loch auf jeder Seite des Geltr ger mit dem Kamm kurzes Ende nach oben zeigt Verschlie en Sie die Gel Sandwich gegen die Gie en Dichtung durch Drehen der beiden Nocken soweit erforderlich in der Regel 90 bis 150 bis zu 180 Die Nockenwirkung dr ckt die Platten sich in die Dichtung und den Boden des Sandwich abzudichten Die Dichtung ist erledigt wenn die Glaskante erscheint dunkler und fast transparent gegen die Dichtung Schalten Sie die Cam ber diesen Punkt Glasplatte Abstandhalter Nockenloch schaum nach Klemme unten Nockenloch Gie en Wiegen 2 Nockenloch Nocken installieren grat am ende Nockenloch e pll e p12 Acrylamidgelen 0 Bereiten Sie die Monomerl sung und gieBen Si
12. der Abstandshalter gechipt berpr fen Sie den Zaubernden Dichtung f r Schnitte oder Risse und ersetzen Sie sie gegebenenfalls Teile falsch berpr fen Platte und Spacer Ausrichtung gegebenenfalls ausgerichtet korrigieren Over Klemmung Luftblasen Drehen Nocken nur so weit wie n tig um eine Dichtung gew hnlich 90 bis 150 aber bis zu 180 zu schaffen Auf jeder Abstandhalter einen d nnen Film von Gel Seal Verbindung zum unteren u eren Ecke nur Verwenden Sie kein Silikonfett Luftblasen entfernen bevor Sie K mme Schieben Kamm in L sung in einem Winkel Wenn Kamm entfernt werden muss f gen Sie mehr Monomerl sung vor dem Wiedereinsetzen des Kammes Unvollst ndige oder versp tete Polymerisation Erlauben Sie Acrylamidgelen f r mindestens 1 h eingestellt Debris in Brunnen Sp len Sie nicht polymerisierte Gel mit Probenpuffer Comb Entfernung Chemicals Nehmen Sie den Kamm in einem leichten Winkel und ganz langsam um eine Besch digung des Gels Agarosegele Senken Sie den Kamm nicht mehr als 1 cm in das Gel Verwenden Sie nur den letzten Best nde der hochwertigsten Reagenzien Wenn das trockene Ammoniumpersulfat nicht bei Zugabe zu Wasser knistern mit frischen Lager zu ersetzen Steigern TEMED oder APS Konzentration oder beides pH Wert L sungen mit extremen pH Werten insbesondere sauer d rfen nicht polymerisieren Sauerstoff Entfernen von Sau
13. fehlt wenden Sie an Ihr regionales Vertriebsb ro berpr fen Sie alle Teile auf Besch digungen die aufgetreten sind w hrend das Ger t war auf der Durchreise haben mag Sollte eines der Teile besch digt ist setzen sofort den Spediteur Achten Sie darauf das gesamte Verpackungsmaterial f r Schadensersatzanspr che zu halten oder zu bedienen sollte es notwendig das Ger t zur ckgeben zu werden Niedrigere Pufferkammer Die untere Pufferkammer ist transparent was erlaubt visuelle Verfolgung von Elektrophorese Verfahren Die Kammer ist chemisch best ndig gegen gemeinsame Elektrophorese Puffer aber nicht gegen organische L sungsmittel oder starke S uren oder Laugen Temperaturen ber 45 C kann dazu f hren die Kammer zu verziehen Obere Pufferkammer Die obere Pufferkammer ist chemisch best ndig gegen die Elektrophorese Puffer aber nicht beschr nkt auf organische L sungsmittel oder starke S uren oder Laugen Die obere Elektrode Kathode verl uft entlang der Bergr cken Mitte und endet an der Bananenstecker Die obere Kammer verlangt von 0 5 bis 0 8 Liter Puffer f llen nicht h her als die Spitze der Kunststoff Rippen Warmetauscher Der W rmetauscher ist f r jede Anwendung installiert werden da sie die untere Elektrode Anode die entlang der Unterseite des Rahmens verl uft beherbergt Wenn ein Thermostatenbad verbunden ist reguliert der W rmetauscher des Puffers Temperatur in der unteren K
14. ja uitrust Verbind de hitte exchanger naar een waterkraan of koelmiddelbron niet waar de waterdruk niet geregulariseerd is Stel Nooit antivriesmiddel of organische oplosmiddelen in deel van het instrument voor Organische oplosmiddelen zullen onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Bedien niet met buffertemperaturen boven het maximum specificeerde technische specificaties Oververhittend zal onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Important Information English If this equipment is used in a manner not specified by Hoefer Inc the protection provided by the equipment may be impaired This instrument is designed for indoor laboratory use only Only accessories and parts approved or supplied by Hoefer Inc may be used for operating maintaining and servicing this product Only use a power supply that is CE marked or safety certified by a nationally recognized testing laboratory The safety lid must be in place before connecting the power supply leads to a power supply Turn all power supply controls off and disconnect the power leads before removing the safety lid Circulate only water or 50 50 water ethylene glycol through the heat exchanger if so equipped Do not connect the heat exchanger to a water tap or any coolant source where the water pressure is unregulated Never introduce antifreeze or any organic solvent into any part of the instrument Organic solvents will cause irreparable dam
15. lectronique ne doivent pas tre jet s comme les ordures m nag res non tri es et doivent tre collect s s par ment Contactez un repr sentant agr du fabricant pour obtenir des informations sur la mise au rebut de votre quipement Questo simbolo indica che i rifiuti derivanti da apparecchiature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti municipali indifferenziati e devono invece essere raccolti separatamente Per informazioni relative alle modalita di smantellamento delle apparecchiature fuori uso contattare un rappresentante autorizzato del fabbricante Este simbolo indica que el equipo el ctrico y electr nico no debe tirarse con los desechos dom sticos y debe tratarse por separado Contacte con el representante local del fabricante para obtener mas informaci n sobre la forma de desechar el equipo Denna symbol anger att elektriska och elektroniska utrustningar inte far avyttras som osorterat hushallsavfall och maste samlas in separat Var god kontakta en auktoriserad tillverkarrepresentant f r information angaende avyttring av utrustningen e pvii Gel Elektrophorese Einheit Funktion und Beschreibung Die Hoefer SE600 Serie vertikalen Plattengelelektrophoresevorrichtung sind fiir Protein und Nukleins ure Elektrophorese unter allgemein verwendeten Denaturierung und nicht denaturierenden Bedingungen bestimmt Bis zu 28 Proben k nnen auf einer einzigen Platte Gel verglichen werden Zu d
16. 18 x 16 cm 1 SE675 Inklusive 8 Glasplatten 3 Platzsparer Platten 5 F llstoff Blatt 100 Blatt Wachspapier Spacer Mate Schablone und Blindstopfen Bestell K mme und Spacer getrennt F r bis zu 10 Gele Multiple Gel Caster Kit Gele 10 18 x 16 cm 1 SE615 Inklusive 20 Glasplatten Platzsparer Platte 5 F llstoff Blatt 100 Blatt Wachspapier Spacer Mate Schablone und Blindstopfen Bestell Kamme und Spacer getrennt p36 Produkt Menge Code Klemmen und Nocken Klemmen und Cam Kit vier 16 cm und 8 Klemmen schwarz Nocken 1 SE6003UK Ersatz Daumenschrauben fiir Schellen 12 SE6003U 2 Cams schwarz fiir Klemmen mit Cam L cher 4 SE6005L Klemmen Sie Baugruppen 16 cm 2 SE6003U Klemmzangen 8 cm 2 SE6403U Glasplatten 18 x 16 cm Glasplatten 2 SE6102 Glasplatten niedrige Fluoreszenz 2 SE6102LF Glasplatte Club Sandwich Teiler gekerbt 1 SE6102D 18 x 24 cm Glasplatten 2 SE6602 Glasplatte Club Sandwich Teiler gekerbt 1 SE6602D w hlen Sie die entspre chende Spacer und Teller L nge f r Ihr Ger t Universalklemme SE6003U grundlegende Rolle SE6015 Nocken SE6005L e p37 Kamme anzahl der dicke breite vertiefungen mm mm menge code 10 0 75 8 3 1 SE511 10 75 10 1 00 8 3 1 SE511 10 1 0 10 1 50 8 3 1 SE511 10 1 5 12 0 75 7 6 1 SE511 12 75 12 1 00 7 6 1 SE511 12 1 0 12 1
17. 50 7 6 1 SE511 12 1 5 15 0 75 5 7 1 SE511 15 75 15 1 00 5 7 1 SE511 15 1 0 15 1 50 5 7 1 SE511 15 1 5 20 0 75 4 1 1 SE511 20 75 20 1 00 4 1 1 SE511 20 1 0 20 1 50 4 1 1 SE511 20 1 5 28 0 75 2 7 1 SE511 28 75 28 1 00 2 7 1 SE511 28 1 0 28 1 50 2 7 1 SE511 28 1 5 Comb Tiefe 15 mm alle anderen 25 mm Praparative Kimme Diese Kamme sind 25 mm tief einstellbar auf 10 oder 15 mm nr von Vertiefungen dicke breite mm prep ref mm prep ref menge code 1 1 0 75 121 6 1 SE511 R 75 1 1 1 00 121 6 1 SE511 R 1 0 1 1 1 50 121 6 1 SE511 R 1 5 1 2 0 75 113 6 1 SE511 DR 75 1 2 1 00 113 6 1 SE511 DR 1 0 1 2 1 50 113 6 1 SE511 DR 1 5 Einstellbare Kammriicken 1 SE511 BKA Verpflichtet eine 25 mm tief Kamm auf 10 oder 15 mm Tiefe zu konvertieren e p38 Abstandhalter Dicke mm Lange cm Breite cm Menge Code 1 00 16 1 2 SE6118 2 1 0 1 50 16 1 2 SE6118 2 1 5 0 75 16 2 2 SE6119 2 75 1 00 16 2 2 SE6119 2 1 0 1 50 16 2 2 SE6119 2 1 5 0 75 24 2 2 SE6619 2 75 1 00 24 2 2 SE6619 2 1 0 1 50 24 2 2 SE6619 2 1 5 Companion Produkte Hoefer SE100 Plate Mate Wasch und Speichereinheit 1 SE100 QuickFit Stecker weiblich 3 8 2 QF3 8 QuickFit Stecker mannlich 3 8 2 QFX3 8 e p39 Hoefer Inc 84 October Hill Road Holliston MA 01746 Toll Free 1 800 227 4750 Telefon 1 508 893 8999 Fax 1 508 893 0176 E mail support hoeferinc com Web www hoeferinc com Hoefer ist ein eingetragenes
18. G rg A et al The current state of two dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients Electrophoresis 9 531 546 1988 G rg A Two dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients current state Biochem Soc Trans 21 130 132 1993 Bjellqvist B et al Micropreparative two dimensional electrophoresis allowing the separation of samples containing milligram amounts of proteins Electrophoresis 14 1375 1378 1993 Blomberg A et al Interlaboratory reproducibility of yeast protein patterns analyzed by immobilized pH gradient two dimensional gel electrophoresis Electrophoresis 16 1935 1945 1995 e p33 Bestellinformationen Produkt Menge Code fiir 18 x 16 cm Gele SE600 Dual Cooled Vertical Unit Basic 1 SE600 Inklusive 3 S tze Glasplatten vier 16 cm Klemmzangen 6 Nocken Dual Gel Gie en Stand mit Niveauregulierung Basis und Ebene Puffer Damm Spacer Mate Schablone und Wunderkeil Plattenabstand Werkzeug Bestell Nr 2 K mme und 2 Sets von 16 cm Abstandshalter getrennt SE600 Dual gek hlte Vertikale komplett 1 SE600 15 1 5 Lieferumfang Grundger t plus zwei 15 Well K mme und 2 Distanzhalter 1 5 mm dick f r 18 x 24 cm Gele SE660 Dual Cooled Vertical Unit Basic 1 SE660 Inklusive 3 Satze Glasplatten vier 16 cm und vier 8 cm Klemmzangen 6 Nocken Dual Gel GieBen Stand mit Niveauregulierung Basis und Ebene Puffer Damm Spacer Mate Schabl
19. K nnen separat bestellt werden Alle pr parativen K mmen und die 10 12 15 und 20 auch K mme Form Brunnen die 25 mm tief sind Die 28 gut k mmen Formen Brunnen die nur 15 mm tief sind so dass Brunnen nicht zusammenbrechen wenn der Kamm entfernt wird Das Probenvolumen von jedem gut gehalten h ngt von dem Gel dick und gut Tiefe und der Anzahl der Vertiefungen pro Kamm In Tabelle 2 sind Probenvolumina von jedem gut f r alle Kimme Wunderkeil Gelplatte Trennwerkzeug Dieses Tool wird verwendet um Gel Sandwiches zu zerlegen und zu berpr fen Abstandhalter und Kamm Dicken Bedienungsanleitung Gel Elektrophorese Gie en und Verfahren zu folgen Montage beider Modelle ist identisch Inbegriffen sind Anleitungen f r Polyacrylamidgele wird mit kontinuierlichen oder diskontinuierlichen Puffer Systeme und Gradientengele Siehe Seite 31 f r die Bibliographie Bereiten Sie die Gel Sandwich Glasplatten die Distanzst cke und Spannzangens tze sind so bemessen dass die zusammengebaute Sandwich leicht ausgerichtet werden kann um die Dichtung zun chst die Gel gegossen und dann um es auszuf hren erforderlich erstellen Die besten Ergebnisse erzielen Sie besonders vorsichtig um alle Komponenten bei der Montage ausrichten Sandwiches Tabelle 1 fasst Gelgie l sung Optionen SE600 Beide Fertiggelen und selbst gewirkte Gele verwendet werden k nnen Um sich selbst gewirkte mehrere Gele kann Kits separat bestel
20. Steigung Maker AuslaB ffnung und dem anderen Ende mit einem 20 cm Kan le Die OD der Kan le muss kleiner sein als der Abstandshalterdicke Platzieren der Kaniile so dass es an der Unterseite des Sandwich in der Mitte zwischen den Abstandshaltern liegt Optional Einstellen der h herprozentigen Acrylamid L sung zu 15 w v Saccharose oder 25 v v Glycerin Schichten zu verbessern Bereiten Sie die Monomer L sung Berechnen Sie das Volumen der Monomer L sung ben tigt Teilen Sie das Gesamtvolumen in der Mitte und bereiten dieses Volumen sowohl der h heren und niedrigeren Prozentsatz Acrylamid L sungen Q Gie en der kleine L sung in die Vorratskammer die Kammer am weitesten vom Auslass ffnen Sie den Hahn zwischen den Kammern lange genug um die Luft zu verdr ngen und dann zu schlie en Gie en Sie den schweren L sung in die Mischkammer und legen Sie einen R hrstab in diese Kammer Setzen Sie den Gradienten Maker auf einem Magnetr hrer und beginnen R hren bei einer Geschwindigkeit die gut vermischt sich aber nicht vorstellen Blasen in die L sung Mischen Sie den Gradienten zu pumpen und die L sung in den Sandwich W hrend die L sung wird unter R hren Pumpen beginnen aus der Mischkammer und ffnen Sie den Hahn auf die Vorratskammer Heben Sie die Kan le als Fl ssigkeit in den Sandwich halten Sie die Spitze an der Gel Oberfl che Bereiten Sie mehr Gele je n
21. Warenzeichen von Hoefer Inc Coomassie ist ein eingetragenes Warenzeichen von ICI plc 2012 Hoefer Inc Alle Rechte vorbehalten Gedruckt in den USA Hoefer
22. ach Bedarf berlagern Gel mit einer d nnen Schicht aus wasserges ttigtem Butanol Wasser oder verd nnten Gel Puffer Gel Einwirkung von Sauerstoff zu verhindern Langsam liefern die Overlay L sung aus einer Glas Spritze mit einer 22 Gauge Nadel ausgestattet Geben Sie die L sung in der N he der Abstandshalter an einer Seite des Sandwich und lassen Sie sie ber die Oberfl che allein flie en O Lassen Sie die Gele f r mindestens 1 h polymerisieren Nach der Polymerisation gieBen Sie die integrierte numerische Tastatur und sp len Sie das Gel Oberfl che mehrmals mit destilliertem Wasser p15 NN Hinweis Die mit Coomassie Blue ist es m glich 1 pg Protein in einem einzigen Band zu erkennen Mit den empfindlicheren Silber Flecken ist es m glich weniger als 10 ng Protein nachzuweisen e p16 Bereiten Sie die Stapel Gel Monomer L sung GieBen der Stacking Gel und f hren einen Kamm in einem leichten Winkel in die Sandwichstruktur wobei darauf geachtet keine Luft zwischen den Z hnen zu fangen Lassen Sie mindestens 1 h f r das Gel zu polymerisieren Probenvorbereitung und Loading Die Probe kann entweder geladen werden w hrend das Sandwich in der Nachlauf oder nach dem oberen Pufferkammer befestigt ist Beim Laden von Proben w hrend der Verwendung Teilerplatten m ssen die Proben ohne die obere Pufferkammer an Ort und Stelle geladen werden Die Menge der Probe geladen wir
23. age to the unit Do not operate with buffer temperatures above the maximum specified technical specifications Overheating will cause irreparable damage to the unit T rke Tietoa Finnish Jos tata varusteita k ytet n tavassa ei m ritetty Hoefer Inc suojelu ehkaisty varusteille saattaa olla avuton Tama v line suunnitellaan sis laboratoriok yt lle vain Vain lis varusteet ja osat hyv ksyiv t tai toimitti Hoefer Inc oheen voi k ytt k ytt miselle valvoalle ja servicing tima tuote Vain k ytt k ytt j nnitett joka on CE merkitsi tai turvallisuus joka on todistanut aidoksi ohi joka on kansallisesti tunnustettnut testaaminen laboratoriota Turvallisuuskansi t ytyy olla paikallaan piii kaytt jannitteeseen Kiert kaikki k ytt j nnitevalvonnat ja irrottaa valtalyijyt ennen poistaminen turvallisuuskantta Kiert vain vesi tai 50 50 vesi ethylene glycol siin tapauksessa varustetun l mm nvaihtimen l pi l yhdist l amm nvaihdinta vesinapautukseen eik j hdytysnestel hteeseen miss vesipaine on unregulated Pakkasneste eik orgaaninen liuotin v lineen osassa ei esitele Koskaan Orgaaniset liuottimet aiheuttavat korvaamattoman vahingon yksikk n Ei k yt puskuria yll olevia l mp tiloja enint n m ritetyill teknisill t smennyksill Ylikuumeneminen aiheuttaa korvaamattoman vahingon yksikk n Information Importa
24. ammer K hlmittel durch den Glasr hren die mit Silikon Gummit llen befestigt sind Die W rmetauscher Anschluss Ports sind 13 mm od Der W rmetauscher ist mit maximal 0 8 Atmosph ren ber Umgebungsdruck 12 psig bewertet Schlie en Sie nur an K hlmittel Quellen mit geregeltem Druck Nicht an den Wasserhahn anschlie en Sicherheitsdeckel Die Bananen Stecker auf dem W rmetauscher verbindet sich mit dem Mennige und der Stecker auf der oberen Pufferkammer verbindet in die schwarzen Zahlen f hren Die 4 mm geh llt farbcodierten Leitungen Stecker in farbcodierte Buchsen in der Stromversorgung Engage Interlock Pins vor dem Absenken Elektrode Verbindungen auf um Bananenstecker Installieren Sie immer die Sicherheit Deckel vor Gebrauch Glasplatten Alle Platten sind 18 cm breit aber jedes Modell bietet Platz f r eine bestimmte Platte L nge Der SE600 nimmt 16 cm Platten und der SE660 nimmt 24 cm Platten Drei S tze Glasplatten werden mit jedem Ger t mitgeliefert Notched Teilerplatten separat zu bestellen Paar zwei Gel Sandwiches ein Club Sandwich bilden so dass bis zu vier Gele auf einmal ausgef hrt werden kann Schellen Zwei 16 cm Klammern werden verwendet um eine beliebige Linge Sandwich zu sichern Ein zus tzliches Paar von 8 cm Klemmen sind erforderlich um 24 cm Sandwiches zu sichern Die Klammer bar mit Schrauben eingestellt verteilt den Druck gleichm ig Casting Stand Das Casting S
25. bdichtung zu gew hrleisten Ziehen Sie alle Schrauben fest Entfernen Sie den Spacer Mate Lange Sandwiches ben tigen zwei Klemmzangen auf jeder Seite Bei der Montage von 24 cm Sandwiches richten jedes Ende getrennt Das hei t richten Sie ein Ende Finger Schrauben anziehen drehen Sie den Sandwich 180 und richten Sie das andere Ende In jedem Fall k nnen die Klemme nach unten gleiten und perfekt auszurichten mit der oberen oder unteren Rand der Glasplatten Club Sandwich A 16 oder 24 cm lang gekerbt Zentrum Teilerplatte separat bestellen paarweise zwei Sandwiches die Anzahl der Gele die gegossen und ausgef hrt werden k nnen verdoppeln Bauen Sie ein Club Sandwich in der gleichen Weise wie eine regelm ige Sandwich au er vor dem Setzen des oberen Glasplatte lag der Trennplatte und eine zweite Gruppe von Abstandshaltern auf dem Stapel Platzieren Sie die Kerbe so da es an der Spitze der Gele werden Es ist wichtig da die Abstandshalter und die Platten perfekt ausrichten um eine Abdichtung zu erzeugen F r 24 cm langen Platten die Position 8 cm Klemme entlang der Seite an der Unterseite des Sandwich aus der Kerbe weitesten entfernt ist o Entfernen Sie das Sandwich und untersuchen den Boden um sicherzustellen dass die Kanten biindig sind um eine vollst ndige Abdichtung zu gew hrleisten ausgerichtet Passen Sie wenn n tig Optional Tragen Sie eine d nne Schicht Gel Seal Verbindung nur auf
26. d h ngt von der Dicke des Gels der Empfindlichkeit des Nachweisverfahrens verwendet und der Menge der Probe in jedem Band zu erwarten In einem kontinuierlichen Puffer System sollte das Protein Probe relativ konzentriert werden da keine Stacking Gel verwendet wird In einer diskontinuierlichen Puffersystems die Zone in die jede molekulare Spezies wandert durch die Stacking Gel ist zugespitzt so da die Probe braucht nicht so konzentriert werden 0 Bereiten Sie die Wells Nehmen Sie den Kamm durch sanftes Sch tteln es einer Seite zur anderen und dann gerade nach oben um eine Besch digung der W nde gut Sp len Sie jede Kavit t mit destilliertem Wasser auf unpolymerisierten Acrylamid zu entfernen und dann abtropfen durch Invertieren des Gel Sandwich oder Nachlauf F llen Sie jede gut mit Elektrophorese Puffer Wen ij Hinweis Sobald die Proben in den Wells sind achten Sie darauf nicht erschittern die Sandwiches so dass die Proben nicht versch ttet oder gemischt Vorbereitung der Probe Erh hen fl ssigen Probe Dichte mit 10 Glycerin oder Saccharose Hinzuf gen eines Tracking Farbstoff wie Phenolrot Bromphenolblau Pyronin oder Y F r SDS Protein Gele verwenden 2X Behandlung Puffer sowohl fl ssige als auch trockene Proben in einem Reagenzglas zu denaturieren Um fl ssigen Protein L sungen ein gleiches Volumen von 2X Puffer Um Protein Proben trocknen f gen gleichen Volumina von
27. der oberen Pufferkammer zu verhindern da die Proben e Verwenden Sie nur Wasser oder 50 50 Wasser Ethylenglykol als K hlmittel Verwenden Sie niemals einen handels blichen Frostschutzmitteln oder keinen Alkohol basierte Mischung oder zu irreparablen Schaden am Warmetauscher die Folge e SchlieBen Sie den Warmetauscher an einen Wasserhahn oder einer anderen Quelle wo der Wasserdruck ist ungeregelt Hinweis Alle Gerate der Serie SE600 verwendet 18 cm breite Platten Das Gel Dicke bestimmt den Querschnitt und Strombedarf f r konstanten Strom flie t Die L nge der Platte bestimmt die Laufzeit Tabelle 3 Laemmli Puffer System Ausgangspunkt Richtlinien Geldicke 1 5 mm Strom pro Gel 25 mA Konstant stromquelle Anlaufspannung 80 90 V Finale Spannung 220 250 V Dicker oder d nner Gele ben tigen sie proportional mehr oder weniger Strom Zum Beispiel erfordert eine 0 75 mm Gel das halb so dick wie ein 1 5 mm Gel ist halb so viel Strom oder 12 5 mA Der Strom muss durch die Anzahl der Gele zu multiplizieren Zum Beispiel wenn zwei Club Sandwiches installiert sind ben tigen die vier Gele viermal so viel Strom Der Strom kann f r eine schnellere L ufe erh ht werden wenn eine aktive K hlung verwendet wird und es kann f r langsamere Nacht l uft verringert werden Bei 25 mA pro Gel Trennung der Probe Elektrophorese Parameter fiir den diskontinuierlichen Polyacrylamidg
28. e den Gel Bereiten Sie die ben tigte Menge an Monomer L sung Entl ften und f gen Sie den Initiator und Katalysator unmittelbar vor dem GieBen des Gels Pipettieren Sie die L sung in einer Ecke des Sandwich wobei darauf geachtet dass keine Luftblasen einzuf hren Weiter unten finden Sie die passende L sung Niveau entsprechend der Anwendung Kein Sammelgel Continuous System F llen L sung bis knapp unterhalb der Oberkante der oberen Plattenkante Wenn Blasen gefangen sind mit einer Pipette oder Spritze entfernen Einf hrung eines Kamms in einem leichten Winkel in jedem Sandwich dabei nicht um Luftblasen unter den Zahnen zu fangen Club Sandwich Pipettieren der L sung in beiden Sandwiches F llen jeder auf das gleiche Niveau unterhalb des gezahnten Randes Stacking Gel F llen L sung f r 3 4 cm unterhalb der Oberkante der Glasplatte Diese H he erm glicht einen 1 cm Sammelgel unter dem Brunnen Gie en Sie das Gel ein und bringen ein Overlay siehe Schritt 2 Nachdem das Gel gesetzt ist bereitet die Stacking Gel wie unten beschrieben 2 D Elektrophorese mehrteilige Proteinsystem F llen Monomerl sung bis etwa 1 cm unterhalb des Kopfes der Glasplatte zu erm glichen 4 5 mm f r die IPG Streifen oder Schlauch Gel und einer Agarose Dichtung A Sammelgel erfordert mehr Platz Verschlie en Sie den IPG Bandes oder des Schlauches Gel an Ort und Stelle mit Agarose in Laufpuffer gel st Darauf achten da
29. eine Luft zwischen den Z hnen zu fangen Lassen Sie mindestens 1 h f r das Gel zu polymerisieren e p13 Abb 6 Gie en eines Gradienten Gel Eine Pipettenspitze kann anstelle einer Kan le verwendet werden wenn die Gel L sung mit einer Geschwindigkeit die einen kontinuierlichen Strom auf der Glasoberflache halt geliefert wird Hinweis Gradient Gelen in der SE615 oder SE675 Multiple Gel Caster gegossen werden durch den Boden eingef hrt Hinweis Bei GieBen eines exponentiellen Gradienten Gel Position eines Kolbens bzw Dichtstopfen oberhalb der Fl ssigkeit in der Mischkammer um das Volumen konstant zu halten e pl4 Gradientengele Sowohl lineare und exponentielle Gradienten Gele k nnen im Dual Gel Caster gegossen werden Wir empfehlen die Verwendung eines Hoefer SG Serie Gradient Maker Gradientengele werden von der Oberseite des Zaubernden mit einer Kan le wenn ber das mitgelieferte Dual Gel Caster oder von unten wenn in einem Hoefer Multiple Gel Caster siehe beiliegende Anleitung den Zaubernden gegossen Ein Stacking Gel wird dann ber den Gradienten Gel gegossen Oo O oo o Gie en eines linearen Gradienten Gel 0 Montieren Sandwich n in die Dual Gel Rollen wie auf Seite 9 beschrieben e Richten Sie die Monomerl sung Flie weg Fihren Sie eine Ldnge von klaren Vinyl Schlauch durch eine Schlauchpumpe Ein Ende des Schlauchs an der
30. elen Gele k nnen entweder bei konstantem Strom oder konstanter Spannung Einstellungen ausgefiihrt werden Ein konstanter Strom Modus wird traditionell mit einer diskontinuierlichen Puffersystems verwendet so dass die Rate der elektrophoretischen Wanderung bleibt w hrend der Laufzeit Unter diesen Bedingungen Spannung zunimmt wenn die Erl se Lauf Eine niedrigere aktuelle Einstellung wird f r h here Aufl sung empfohlen Die optimale aktuellen Niveau muss empirisch ermittelt werden die Hauptfaktoren die ausgeglichen werden m ssen sind die Gel Konzentration und Geschwindigkeit der Migration und die daraus resultierende Joulesche Erw rmung und Band Verzerrung In Tabelle 2 sind Ausgangspunkt Richtlinien und Anpassungen f r Geldicke Anzahl der Gele der und Migration Strom bliche wirkt auf den gesamten Querschnittsfl che aller Gele da die Gele die parallel in der elektrischen Schaltung verbunden sind So ist die aktuelle Einstellung f r ein Gel ist durch die Anzahl der Gele der gleichen Querschnitt gleichzeitig ausgef hrt werden multipliziert F r ein Gel 1 5 mm dick empfehlen wir einen Ausgangspunkt aktuelle Einstellung von 25 mA Zwei 1 5 mm Gele 50 mA Hinweis K hlung erforderlich sein um Joulesche Erw rmung zu steuern Spannung Die Ausgangsspannung f r eine 1 5 mm Slab Gel mit einem Netzteil auf 25 mA betr gt gew hnlich 80 bis 90 V mit dem SE600 mit einem Laemmli Puffer f r diskontinuierl
31. em Zaubernden indem Sie alle unteren Nocken falls vorhanden Senken Sie die obere Pufferkammer auf das Gel Hinweis Nicht mit Gewalt die Nocken Wenn Sie ungew hnliche Widerstand stoBen zu zerlegen und inspizieren Klemme und Glas Ausrichtung entlang der Oberseite des Sandwich Ausrichten und neu zu installieren Hinweis Wenn die K hlung Option h ufig verwendet wird ist es zweckm ig QuickFit Anschl sse mit dem Schlauch zu befestigen Die Ventile in diesen Armaturen verhindern K hlmittel versch ttet Sandwiches in der Casting Stand Installieren Sie den Nocken Grat der Spitze nach unten in die Pufferkammer Cam L cher Spannen Sie das Sandwich an Ort und Stelle durch gleichzeitiges Drehen einer Nocke im Uhrzeigersinn und der andere gegen den Uhrzeigersinn eine volle 180 Mit einer Pipette sorgf ltig zu erf llen jedes Schlitz oberhalb des Probenvertiefungen mit Puffer zur Minimierung der St rung der Proben Dann gie en Sie 100 mi Puffer in die Kammer die Leitung der Puffer Strom in Richtung der Seitenwand Sicherstellen dass keine Puffer Lecks rund um die Dichtung Niedrigere Pufferkammer Platzieren Sie einen magnetischen Spin Bar in den unteren Pufferkammer LBC und stellen Sie das Ger t auf einem Magnetr hrer F llen Sie die untere Kammer mit bis zu 4 Liter Puffer Senken Sie den W rmetauscher in die untere Kammer der Montage der H fen in die Aussparungen in der Felge Der W r
32. en Anwendungen geh ren Proteinauftrennungen Nukleins ure Fraktionierung und die zweiten Dimension Trennung von 2 D Elektrophorese Erste Abmessung Trennung von 2 D Elektrophorese sollte immobilisierten pH Gradienten Gele durchgef hrt werden Die fokussierten Streifen leicht mit dem zweiten Slab Gel Dimension f r Gr entrennung bertragen Alle Gel Platten sind 18 cm breit Tabelle 1 auf Seite 9 sind die beiden Modelle und die entsprechende Gelplatte L nge 16 oder 24 cm Bis zu vier Gele k nnen gleichzeitig ausgef hrt werden wenn Sandwiches in gepaart sind Club Sandwiches Der W rmetauscher erm glicht Puffer Temperaturregelung in der unteren Kammer Technische Daten Gelplatte Gr Be B x H SE600 18 x 16 cm SE660 18 x 24 cm Gelgr Be SE600 14 oder 16 x 16 cm 16 cm mit 1 cm breiten Distanzscheiben 14 cm mit 2 cm breiten Distanzscheiben Gelgr Be SE660 14 oder 16 x 24 cm 16 cm mit 1 cm breiten Distanzscheiben 14 cm mit 2 cm breiten Distanzscheiben Max Wattleistung 50 W Max Spannung 1000 V Max Stromst rke 500 mA Max Temperatur 45 C Umgebungsbedingungen fir den Betrieb Verwendung im Innenbereich 4 40 C Luftfeuchtigkeit bis zu 80 H he bis zu 2000 m berspannungskategorie Il Verschmutzungsgrad Il Abmessungen B x H x T SE600 32x29x 14 cm SE660 32 x 37 x 14cm Produkt Zertifizierungen EN 61010 1 UL 61010A 1 CSA C22 2 1010 1 CE zertifiziert Die
33. er Oberseite und Unterseite des Gels Gel Konzentration Der Molekulargewichtsbereich der Probe erfordert eine Acrylamid Konzentrationsgradienten die gesamte Palette von Gr en Protein zu l sen e p29 problem verursachen Schlechte Laufbedingungen Band Aufl sung abhilfe Elektrophorese starten sobald die Probe geladen wird um Spezies mit niedrigem Molekulargewicht diffundieren zu verhindern F hren Sie den Abstand zu einem niedrigeren Strom oder Spannungs Einstellung um Joulesche Erw rmung zu reduzieren Reagenz Qualit t Verwenden Sie nur die hochwertigsten Reagenzien Schlechte Stapeln Verwenden Sie nur Gele die vor kurzem hergestellt wurden F gen Sie eine Stacking Gel oder erh hen H he des Stacking Gel Bereiten Sie das Aufl sungsverm gen Gel Oberfl che die durch erste Sp lung mit Stacking Gel Monomer vor dem Gie en des Stacking Gel um die Kontinuit t zwischen den Gelen zu gew hrleisten berpr fen Sie pH Werte der L sung und Stapel Gel L sungen Nicht zur ck titriert Puffer Unvollst ndige Gelpolymerisation Erlauben Gel vollst ndig zu polymerisieren Probenvorbereitung e p30 Bewahren Probe auf Eis bevor es denaturiert ist Dialysieren oder Entsalzung der Probe Warme Proben in SDS Probenpuffer fir nicht mehr als 1 2 min bei 100 C um die Dissoziation von Untereinheiten zu verbessern Bewahren Sie nach dem Erhitzen auf Eis Passen Sie das Probenvol
34. erstoff aus dem Gel Umgebung Degas die Monomerl sung 5 10 min vor dem Gie en und dann berlagern das Gel Oberfl che mit Wasser ges ttigtem n Butanol Temperature Adjust the gel solution temperature to a minimum of 20 C especially for low T gels e p27 problem Obere Puffer kammer Lecks Leistung supplydetects aktuelle Leck Dye vor Kurven nach oben grinst an Kanten Protein Streifen vertikal Tracking Farbstoff nicht in eine konzentrierte Zone scharfen dem Stacking Gel e p28 verursachen Teile falsch ausgerichtet abhilfe Pr fen dass die Glasplatten Abstandshalter und Schellen ausgerichtet sind und sich harmonisch in die obere Kammer Dichtung passen berpr fen Sie dass beide Dichtungen zentriert sind und dass die Positionierung Grate passen in den Rillen Verschmutzte oder besch digte Komponenten Elektrische Weg nach drau en Boden Erde Ungleichm ige W rmeverteilung berpr fen Sie dass die Dichtung nicht besch digt oder gequetscht werden Bei Bedarf austauschen Pr fen Sie ob die obere Pufferkammer nicht verzogen ist aus fr heren Exposition gegen ber berm iger Hitze F gen Sie weitere Silikonfett auf W rmetauscher sen zu versiegeln Auf Lecks berpr fen oder Risse im W rmetauscher Ersetzen verschlissener sen F llen Sie den unteren Pufferkammer auf das Niveau angemessen an den R ndern der Flucht Siehe Abb 8 Seite 20 Verwende
35. iche SDS Gelen Die endg ltige Spannung typischerweise 250 bis 400 V je nach der L nge des Gels Siehe Tabelle 3 e p23 Achtung Nach anfanglichen Uberwachung nicht verlassen das Ger t unbeaufsichtigt l nger als 1 h vor der berpr fung der Fortschritte der Bands und der Puffer Ebene e p24 Zeit Ein Lauf ist abgeschlossen wenn die Markerfarbstoff erreicht den Boden des Gels In einer 16 cm Gel SE600 einem 1 5 mm dicken Laemmli SDS Gel bei 25 mA Gel ohne K hlung ausgef hrt blicherweise 5 Stunden L ngere Gele ben tigen sie proportional mehr Zeit Trennungen in 24 cm Gelen SE660 ben tigen 8 Stunden Elektrophorese Parameter f r DNA Acrylamid Gelen DNA Gele werden in der Regel bei einer konstanten Spannung Einstellung ausgef hrt und da Puffersysteme kontinuierlich sind bleiben beide Strom und Spannungswerte ber die gesamte Auflage konstant Laufbedingungen sind in Einheiten von V cm ausgedr ckt Verlag ausgef hrt Bedingungen schwanken aber Spannungen im Bereich von 1 bis 3 V cm f r bernacht gemeinsamen l uft Im SE600 haben wir Gele bei ausgef hrt bis zu 12 5 V cm Die K hlung erfolgt bei dieser Spannung Ebene erforderlich Zeichne jeden Lauf Halten Sie eine Aufzeichnung des Strom oder Spannungs Einstellung Anzahl und Dicke der Gele Puffer System und den Ausgangs und abschlie ende Strom oder Spannung Lesungen f r jeden Lauf so dass Ergebnisse verglichen werden k nnen
36. in der Casting Stand durch die obere Pufferkammer und vorsichtig in die untere Kammer berpr fen Sie die Installation und pr fen Sie die Puffer Ebenen Obere Pufferkammer UBC Die Elektrode entlang der oberen Kammer Grat muss ca 1 cm unter Wasser liegen Diese Stufe erfordert 450 bis 600 ml Puffer gerade genug um die obere Kammer Rippen bedecken aber nicht hoch genug um die Bananenstecker kontaktieren Nicht ber UBC MAX F lllinie f llen Niedrigere Pufferkammer LBC Der untere Puffer ist abh ngig von Betriebsbedingungen und den Puffer System wie in 9 beschrieben Setzen Sie den Sicherheits Deckel auf das Ger t Schlie en Sie die farbcodierten Leitungen in die Buchsen von einem zugelassenen Stromversorgung Stecken Sie das rote Kabel in den roten Ausgang und das schwarze Kabel in die schwarze Ausgangsbuchse In den meisten Systemen die rote Leitung die mit der unteren Elektrode verbunden ist wobei die Anode und die schwarze Leitung ist die mit der oberen Elektrode die Kathode e p21 e p22 Wichtige Montagehinweise e EF Runs Der Puffer Ebene in der unteren Pufferkammer darf niemals erreichen die obere Pufferkammer halten mindestens 2 cm Abstand e F llen Sie den oberen oder unteren Kammer ber den empfohlenen Werten in Abb 8 dargestellt Entfernen Puffer in Kontakt mit den Elektrodenplatten Beitr ge e Gie en Puffer langsam und weg von den Schlitzen in
37. kraftblyet for fjerning sikkerhedl get Cirkulerer bare vand eller 50 50 vand ethylene glykol gennem varmeveksleren i sa fald udrustet Forbind ikke varmeveksleren til en vandhane O pii eller nogen kalemiddelkilde hvor vandtrykket er unregulated Introducerer Aldrig antifreeze eller noget organisk opl sningsmiddel ind i nogen del af instrumentet Organiske opl sningsmidler vil for rsage uboelig skade til enheden Driver ikke med stadpudetemperaturer over maksimummet specificerede tekniske specifications Overheding vil forarsage uboelig skade til enheden Belangrijke Informatie Dutch Indien deze uitrusting in een manier wordt gebruikt die niet door Hoefer Inc is gespecificeerd de bescherming die door de uitrusting is verzorgd kan worden geschaad Dit instrument is voor binnenlaboratoriumgebruik enkel ontworpen Enkel onderdelen en delen keurden goed of leverden door Hoefer Inc kan voor het bedienen worden gebruikt handhavend en onderhouden van dit product gebruik Enkel een netvoeding die CE is markeerde of veiligheid die door een is gecertificeerd die nationaal is herkend testene laboratorium Het veiligheidsdeksel moet in plaats voor het verbinden van de netvoeding leidt tot een netvoeding zijn Doe alle netvoedingscontroles Uit en koppel los de machtleiding voor het verwijderen van het veiligheidsdeksel Circuleer enkel water of 50 50 water ethyleenglycol door de hitte exchanger zo
38. laboratorium bescheinigte Sicherheit ist Der Sicherheitsdeckel muss im Platz vor dem Anschlie en der Energieversorgung sein f hrt zu einer Energieversorgung Alle Energieversorgungssteuerungen abdrehen und die Macht trennen f hrt vor dem Entfernen des Sicherheitsdeckels Nur Wasser oder 50 50 Glykol des Wassers thylens durch den W rmeaustauscher wenn so ausgestattet in Umlauf setzen Verbinden Sie den W rmeaustauscher mit einem Wasserklaps oder jeder K hlmittel Quelle nicht wo der Wasserdruck ungeregelt wird F hren Sie nie Frostschutzmittel oder jedes organische L sungsmittel in jeden Teil des Instrumentes ein Organische L sungsmittel werden nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Mit Puffertemperaturen ber angegebenen technischen Spezifizierungen des Maximums nicht funktionieren Die berhitzung wird nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Dulezit Informace Czech Pokud by toto zafizeni je pou ito zp sobem ktery neni podle Hoefer Inc ochrana poskytovan na z klad za zen m e byt naru ena Tento n stroj je ur en pro vnit n pou it v Z laboratoii pouze Pouze p slu enstv a sti schv len nebo poskytnut ch Hoefer Inc mohou b t pou ity pro provoz dr bu a dr b tohoto v robku zdroj nap jen pou vaj jen e je opat en ozna en m CE osv d ena nebo bezpe nost vnitrost tn uznan mi zku ebn mi lab
39. lf e L sen Sie alle Klemmschrauben und machen Platz f r die Sandwich indem Sie die Druckplatten auf den Schrauben Konstruieren Sie Gel Sandwiches F r jedes Sandwich w hlen zwei perfekt sauber unchipped Glasplatten und zwei Abstandshalter Legen Sie eine Platte auf einer ebenen Fl che lag die Spacer Mate Schablone auf die Platte breite Seite am oberen Rand der Platte platzieren Sie einen Abstandshalter entlang jeder Kante legen und die zweite Glasplatte auf der Oberseite Abb 3 Erforderliche Anzahl der Schellen Klemme Gr e 8cm 16 cm SE600 2 SE660 2 2 O lo o o o o o o ol Jo o o o o OJ e o o O o o o o o o o d o lo ol 16 cm 24 cm SE600 SE660 Abb 4 Club Sandwich Montage Side Klemmen wird Platz f r zwei Abstandshaltern bis zu 1 5 mm dick Glasplatten an den u eren Seiten der Sandwichplatte Abstandhalter gekerbt Mittelplatte Hinweis Verwenden Sie kein Silikonfett oder Vaseline auf das Sandwich zu versiegeln Diese Substanzen sind schwer zu entfernen und schlie lich Artefakte verursachen e p10 Sichern Sie das Sandwich mit Schellen Schieben Sie eine Klammer zu einem Zeitpunkt an den Sandwich Seiten Handfest anziehen einer Schraube auf jeder Klemme stellen Sie den Sandwich aufrecht auf eine ebene Fl che und l sen Sie die Schraube um den Stapel ausrichten Seien Sie besonders vorsichtig bei der Angleichung um eine A
40. lt werden der SE615 Multiple Gel Caster Kit fasst bis zu 10 Brote und der SE675 Gelgie stand Kit bietet Platz f r bis zu vier Sandwiches Siehe die beigef gten Gel Caster Handbuch f r die komplette Anleitung SE660 Die 24 cm Gele f r die SE660 erforderlich m ssen selbst gegossen werden Der Dual Gel Caster im Lieferumfang enthalten h lt zwei Gel Sandwiches Sowohl Ober und Unterseite Sandwich Kanten muss biindig mit der Schelle Fiihrungsstegen A Abb 2 Sandwich Montage Kontrollieren Glasplatten f r nicht erw hnenswert sind Verwenden Sie nur unchipped Platten auslaufen Tipp Verwenden Sie die Zauberzeit der Wiege bis das Sandwich w hrend der Ausrichtung zu halten Entfernen Sie das laminierte Dichtung von der Wiege und anstatt die Sandwich aufrecht auf eine ebene Fl che stellen Sie ihn in die Wiege Gie en Tabelle 1 Gelgie en Optionen Modell Anzahl der Gelplatte Gele zur Verf gung Gele Gr e cm und Rollen SE600 1 4 18 x 16 Dual GelgieBstand GelgieBstand Kit Multiple Gel Caster Kitt Im Handel erhaltliche Gele SE660 1 4 18 x 24 Zwei Accessoire gekerbt Teilerplatten sind erforderlich laufen 2 Extra Gele Wirkt bis zu 4 Gele Wirkt bis zu 10 Gele Dual Gelgie stand Konstruieren Sie die Gel Sandwich legen und in Zaubernden Bereiten Sie den Nachlauf und Schellen Legen Sie die Wasserwaage in den Zaubernden Zentrum und passen Sie die Stel
41. metauscher muss an Ort und Stelle f r alle L ufe sein weil die untere Elektrode in den W rmetauscher integriert ist Wenn keine K hlung erforderlich ist fahren Sie mit Schritt 3 fort Optional Verbinden Sie den W rmetauscher an ein Umw lzthermostat Slide Schlauchschellen insgesamt vier an jedem Ende zwei L ngen von 10 12 mm ID Vinyl oder Silikonschlauch Befestigen Sie ein Ende jedes St ck Schlauch mit einem W rmetauscher Anschluss Schlie en Sie die freien Enden jedes St ck Schlauch an die Thermostatenbad Ports einen mit dem Einlass und dem andere in die Steckdose Sichern Sie die Verbindungen mit den Schlauchschellen Verwenden Sie das Diagramm Abb 8 auf Seite 20 um einen Ausgangspunkt f r Thermostatenbad Temperatureinstellung zu sch tzen Passen Sie bei Bedarf f r Variablen wie Umgebungstemperatur e p19 Abb 8 Ungef hre Thermostatenbad Temperatur Einstellung Stellen Sie die Temperatur Thermostatenbad Einstellung niedriger als die gewiinschte Temperatur Lauf durch die Menge die auf dem Graphen Dies sollte an drei Stellen berpr ft werden e p20 Bad Einstellung Korrektur C 0 10 20 30 40 50 60 Stromversorgung Einstellung W Beispiel F hren Parameter 200 V 0 05 A 50 mA 1 Berechnen Sie W ob Ihr Netzteil nicht angezeigt wird Strom direkt W VxA 10 W 200 V x 0 05 A 2 Interpolieren der Anzahl von Graden von dem gew nschten La
42. mli Tank Verringern Sie die Salzkonzentration von Proben Reagenz Qualit t Entsorgen lteren Acrylamid L sungen und verwenden Sie nur Aktien von h chster Qualit t Verwenden Sie nur frisch deionisiert Harnstoff Spannung oder Strom Einstellungen Unvollst ndige Gelzubereitung und Polymerisation So erh hen oder verringern Sie die Geschwindigkeit der Migration Anpassung der Spannung oder Strom um 25 50 Degas das Stacking Gel L sung und Vermeidung von Luftblasen unter der Kammz hne Unregelm ige Schnittstelle zwischen Stapeln und l uft Gele berlagern der Trenngel mit wasserges ttigtem Butanol vor Beginn der Polymerisation zur Vermeidung der Bildung einer unebenen Oberfl che Gel Probenvorbereitung Stained Probe sammelt In der N he der Gel Konzentration Dialysieren oder Entsalzung der Probe Molek le werden nicht ausreichend durch das Trenngel Puffer vor Porengr e eingeschr nkt Erh hung der T Degradierung Proteine abgebaut werden kann durch endogene Proteasen benutzen Protease Inhibitoren bei der Isolierung Schritt Im oberen Gel Konzentration Das Gel Porengr e ist zu klein verringern Sie den T des Bereich des Gels wenn der Puffer vor hat die Talsohle erreicht Niederschlag Aufl sungsverm gens oder Stapeln Gel Das Protein wurde ausgef llt Erhitzen Sie die Probe bei einer niedrigeren Temperatur 70 C oder weniger f r 1 2 min Auf d
43. n Magnetr hrer und R hrstab zu halten Puffer gut gemischt berm ige Hitze Partikel in der Probe Circulate ext K hlmittel Verringern Sie die Strom oder Spannungs Einstellung K hlen Sie das Puffer F hren Sie das Gel in den K hlraum Zentrifuge oder Filter Probe vor dem Laden um Partikel zu entfernen berlastung Legen Sie weniger Probe Degradierung Schlechte Stapeln Protease Inhibitor wie PMSF Gie en Sie ein gr er Sammelgel F r beste Ergebnisse erm glichen eine Stacking Gel H he des 2 5 fachen der H he der Probe in den Brunnen Reagenz Qualit t Entsorgen veralteter Acrylamid L sungen und verwenden Sie nur den h chsten Grad von Acrylamid Probenvorbereitung Bei der Herstellung von Proben vermeiden den Einsatz von L sungen mit hohen Salzkonzentrationen problem Ungew hnlich langsam oder schnell laufen Bands sind schief oder verzerrt verursachen Aktuelle Leckage um Gel abhilfe Auf Lecks berpr fen alle Platten und Abstandshalter m ssen fluchten und frei von Fett und Risse Wenn verwendet muss der Puffer Damm sicher sein Probe oder die Aufbereitung des Reagenz Wenn die erforderliche pH Wert einer L sung ist berschritten nicht zur ck titriert Entsorgen Sie und bereiten frischen Puffer Pr fen Rezepte Gel Konzentrationen und Puffer verd nnt Zum Beispiel verwenden Sie nicht Tris HCI anstelle von Tris Puffer f r Laem
44. n and estimation of molecular weights of proteins by discontinuous gel electrophoresis Arch Biochem Biophys 126 155 1968 Denaturierenden Gel Systeme Laemmli U K Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T Nature 227 680 685 1970 Matsudaira P T and Burgess D R SDS microslab linear gradient polyacrylamide gel electrophoresis Anal Biochem 87 386 396 1978 Schreier M H Erni B and Stachelin T Initiation of mammalian protein synthesis I Purification and characterization of seven initiation factors J Mol Biol Nov 116 4 727 753 1977 e p31 e p32 Shapiro A L and Maizel J V Jr Molecular weight estimation of polypeptides by SDS polyacrylamide gel electrophoresis further data concerning resolving power and general considerations Anal Biochem Jun 29 3 505 514 1969 Schaegger H and Von Jagow G Tricine sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa Anal Biochem 166 368 379 1987 Weber K and Osborn M The reliability of molecular weight determinators by dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis J Biol Chem 224 4406 4412 1969 Zweidimensionalen Elektrophorese Adams L D and Gallagher S R Two Dimensional Gel Electrophoresis Using the O Farrell System Current Protocols in Molecular Biology Ausubel F A et al eds
45. nte French Si cet quipement est utilis dans une mani re pas sp cifi par Hoefer Inc la protection fourni par l quipement pourrait tre diminu e Cet instrument est con u pour l usage de laboratoire int rieur seulement Seulement les accessoires et les parties ont approuv ou ont fourni par Hoefer Inc pourrait tre utilis pour fonctionner maintenir et entretenir ce produit utilise Seulement une alimentation qui est CET a marqu ou la s curit certifi par un nationalement reconnu essayant le laboratoire Le couvercle de s curit doit tre a sa place avant connecter Valimentation mene a une alimentation Tourner tous contr les d alimentation de et debrancher les avances de pouvoir avant enlever le couvercle de s curit Circuler seulement de l eau ou 50 50 glycol d eau thyl ne par l exchanger de chaleur si si quip Ne pas connecter l exchanger de chaleur a un robinet d eau ou a la source d agent de refroidissement ou la pression d eau est non r gul e Ne Jamais introduire d antigel ou du dissolvant organique dans n importe quelle partie de l instrument Les dissolvants organiques causeront des dommages irr parables a Vunit Ne pas fonctionner avec les temp ratures de tampon au dessus du maximum a sp cifi des sp cifications techniques La surchauffe causera des dommages irr parables a Vunit Informazioni Importanti Italian Se quest appa
46. one und Wunderkeil Plattenabstand Werkzeug Bestell Nr 2 K mme und 2 Sets von 24 cm Abstandshalter getrennt SE660 Dual gek hlte Vertikale komplett 1 SE660 15 1 5 Lieferumfang Grundger t plus zwei 15 Well K mme und 2 Distanzhalter 1 5 mm dick Ersatzteile Wonder Wedge Gelplatte Trennwerkzeug 1 SE1514 Schlitz Silikon Kautschuk Dichtungen f r obere Pufferkammer 2 SE6008B Laminierte Silikonkautschuk Dichtungen zum Gie en Stand 2 SE6009 Buffer Damm 1 SE6032 Obere Pufferkammer f r SE600 SE660 1 SE6054 Deckel mit Hochspannung f hrt f r SE600 SE660 1 SE6056 Hochspannungsschutzvorrichtungen Kabelsatz 1 SE6056 HV Niedrigere Pufferkammer f r SE600 1 SE6150 W rmetauscher f r SE600 SE660 1 SE6160 e p34 Produkt Menge Code Niedrigere Pufferkammer f r SE660 1 SE6650 T llen f r W rmetauscher unteren Elektroden Einheit 4 SE6060 6 Bananenstecker Gold mit 2 Scheiben 1 SE6067 Glasrohr mit 2 sen 1 SE6160 5 f r W rmetauscher untere Elektrodenbaugruppe Wasserwaage 1 SER11 Seal Gel 1 4 oz Rohr 1 SE6070 Sicherheitsdeckel mit Kabel SE6056 obere Pufferkammer SE6054 Warmetauscher SE6160 Modell Nachbestellung SE600 SE6150 SE660 SE6650 e p35 Produkt Menge Code Gel Rollen F r 1 oder 2 Gele Dual Gel Caster Grund 2 Gele 18 cm breit 1 SE6015 Inklusive 2 leere Dichtungen f r 1 oder 2 Gele Ein im Lieferumfang jedes SE600 F r bis zu 4 Gele Gel Caster Kit 4 Gele
47. orato Bezpe nosti lid mus b t zavedena p ed p ipojen m nap jec zdroj nap jen vede k Turn ve ker nap jen kontroly vypnuto a odpojit p ed odb rem energie vede bezpe nostn v ko Rozeslat pouze voda nebo 50 50 voda ethylenglykolu prost ednictv m v m n k tepla je li to vybavena Nemaj p ipojen v m n k tepla s vodn mi set epn nebo jak koli chladic kapaliny zdroje kde tlak vody je neregulo Nikdy zav st prost edek proti zamrznut nebo jak koli organick rozpou t dla do jak koli sti z tohoto n stroje Rozpustidl m zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Nejsou provozov na s pufru teplot ch nad maxim ln stanovenou technick mi specifikacemi P eh t zp sob nenapraviteln po kozen jednotka igtig Information Danish Hvis dette udstyr bruges i en made ikke specificeret ved Hoefer Inc den beskyttelse som er blevet forsynet af udstyret kan maske svaekkes Dette instrument er designet for indendors laboratoriumbrug bare Bare tilbeh r og del godkendede eller forsynede ved Hoefer Inc kan maske bruges for drive funktionsfejl og betjening dette produkt bruger Bare en stramforsyning der er CE markerede eller sikkerhed som er blevet attesteret af en som nationalt er blevet anerkendt prove laboratorium Sikkerhedl get ma vaere pa plads for forbinding stramforsyningsblyet til en stramforsyning Drejer alle stramforsyningskontroller af og afbryder
48. pa de la seguridad debe estar en el lugar antes de conectar la alimentaci n lleva a una alimentaci n Apaga todos controles de alimentaci n y desconecta los plomos del poder antes de quitar la tapa de la seguridad Circula s lo agua o 50 50 glicol de agua etileno por el intercambiador de calor si amp se es el caso equiparon No conecte el intercambiador de calor a un toque de la agua ni cualquier fuente del liquido refrigerante donde la presi n del agua esta libre Nunca introduce anticongelante ni algun solvente organico en cualquier parte del instrumento Los solventes organicos causaran da o irreparable a la unidad No opera con temperaturas de b fer encima del maximo especific especificaciones t cnicas Recalentar causar da o irreparable a la unidad Viktig Information Swedish om denna utrustning anv nds i ett s tt som inte har specificeras av Hoefer Inc skyddet tillhandah ll vid utrustningen kan skadas Detta instrument formges f r inomhuslaboratorium anv ndning bara Bara medhj lpare och delar godk nde eller levererade vid Hoefer Inc kan anv ndas f r fungera underh lla och servicing denna produkt anv nder bara en kraft tillgang som ar CE markerade eller s kerhet intygade vid en nationellt erkand testande laboratorium S kerheten locket m ste vara pa platsen f re koppla kraften tillgangen blyen till en kraft tillgang Vander sig alla kraft tillgang kontroller av och
49. przez Hoefer Inc mog by wykorzystane do eksploatacji utrzymania i obs ugi tego produktu korzysta jedynie zasilacza e jest nosz ce oznakowanie CE lub bezpiecze stwa uwierzytelnione przez uznane na poziomie krajowym laboratorium badawcze Bezpiecze stwo lid musi by w miejsce przed pod czeniem zasilania prowadzi do zasilania Za wszystkie r d a zasilania urz dzenia steruj ce off i od czy moc prowadzi przed odbiorem bezpiecze stwa lid Kr tylko wody lub wody 50 50 ethylene glycol wymiennik ciep a poprzez je li tak wyposa one Nie nale y po czy wymiennik ciep a woda z kranu lub jakimkolwiek ch odziwo r d a je eli ci nienie wody jest nieuregulowanych Nigdy nie wprowadza rozpuszczalnika organicznego przeciw zamarzaniu lub jakichkolwiek na dowoln cz dokumentu Rozpuszczalniki organiczne spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Nie dzia aj w buforze temperatury powy ej maksymalnego okre lone specyfikacje techniczne Przegrzania spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Informac es Importantes Portuguese Se este equipamento usado numa maneira n o especificada por Hoefer Inc que a protecc o fornecida pelo equipamento pode ser comprometida Este instrumento projectado para uso de interior de laborat rio s S acess rios e partes aprovaram ou forneceu por Hoefer Inc pode ser usada para operar manter e servicing este produto
50. recchiatura usata in un modo specificato da Hoefer Inc la protezione fornito dall apparecchiatura potrebbe essere indebolita Questo strumento disegnato per l uso di laboratorio interno solo Solo gli accessori e le parti hanno approvato o hanno fornito da Hoefer Inc potrebbe essere usato per operare per mantenere e per revisionare questo prodotto usa Solo un alimentatore che CE ha marcato o la sicurezza certificato da un nazionalmente riconosciuto testando il laboratorio Il coperchio di sicurezza deve essere nel luogo prima di collegare i piombi di alimentatore a un alimentatore Spegne tutto i controlli di alimentatore e disinserisce i piombi di potere prima di togliere il coperchio di sicurezza Circola solo l acqua o 50 50 glicole di acqua etilene attraverso lo scambiatore di calore se cosi equipaggiato Non collegare lo scambiatore di calore a un rubinetto di acqua o qualunque fonte di refrigerante dove la pressione di acqua sregolata Non introduce mai l antigelo o qualunque solvente organico in qualunque parte dello strumento I solventi organici causeranno il danno irreparabile all unit Non opera con le temperature di tampone al di sopra del massimo ha specificato le descrizioni tecniche Il surriscaldamento causer il danno irreparabile all unit Viktig Informasjon Norwegian Hvis dette utstyret blir brukt i en mate ikke spesifisert ved Hoefer Inc beskyttelsen som ha
51. se Konformitatserklarung gilt nur fiir das Instrument wenn es e in Labor Standorten eingesetzt werden e verwendet wie geliefert von Hoefer Inc mit Ausnahme von nderungen in der Bedienungsanleitung beschrieben und e verbunden zu anderen CE markierte Instrumente oder Produkte zu empfehlen oder von Hoefer Inc genehmigt Fig 1 Hauptbestandteile der SE600 Serie siehe Abb 5 f r Caster Komponenten Eingeschlossen aber nicht abgebildet e Gel Seal Verbindung 1 4 oz e Spacer Mate Schablone e Glasplatten 6 e Wunderkeil Platte Trennwerkzeug e Buffer Damm Komplettger t auch Abstandshalter 4 und K mme 2 Erforderliche aber nicht im Lieferumfang enthalten e Magnetr hrer e Stromversorgung mit einem Rating von mindestens 300 V 100 mA Konstante A oder V Optional Thermostatenbad Hinweis Die Bestellung von Abschnitt sind alle Zubeh r und Ersatzteile L farbcodierten Leitungen 2 Sicherheitsdeckel obere Pufferkammer mit der oberen Elektrode Warmetauscher mit unteren Elektrode untere Pufferkammer Hinweis Bevor Sie das erste Mal Zerlegen Sie das Gerat und waschen mit einer verdiinnten L sung eines Labor Waschmittel und gut nachsp len zun chst mit Wasser und dann mit destilliertem Wasser Auspacken und Inventur Packen Sie alle Pakete sorgf ltig und vergleichen Inhalt mit der Packliste so dass sich alle angekommen Wenn ein Teil
52. ss eine blasenfreie zwischen der ersten und zweiten Dimension Gele i i Uberlagern Gel mit einer diinnen Schicht aus wassergesattigtem Butanol Wasser oder verdiinnten Gel Puffer Gel Einwirkung von Sauerstoff zu verhindern Langsam liefern die Overlay L sung aus einer Glas Spritze mit einer 22 Gauge Nadel ausgestattet Geben Sie die L sung in der N he der Abstandshalter an einer Seite des Sandwich und lassen Sie sie ber die Oberfl che allein flie en Lassen Sie das Gel f r mindestens 1h polymerisieren Stacking Gel Herstellung Gie en Sie die Stacking Gel w hrend das Sandwich ist immer noch in der Gel Caster Stacking Gel Aufl sung ist optimal wenn kurz vor der Elektrophorese gegossen Q Entfernen Sie das Overlay durch Sp len der Spitze des Gel mehrmals mit destilliertem Wasser Kehren Sie die Caster zu entw ssern Um einen reibungslosen Kontakt zwischen der L sung und Stapeln von Gelen zu gew hrleisten entfernen Restfl ssigkeit durch Abtupfen einer Ecke mit einem fusselfreien Tuch gereinigt werden Berechnen Sie die Sammelgel Monomerl sung Vol Bereiten Sie das Stacking Gel Monomer L sung entl ften und f gen Katalysator und Initiator Gie en Sie das Sammelgel auf das Trenngel mit einem Einweg oder Pasteurpipette auf ein Niveau von etwa 2 mm von der Oberseite der Platte o Einf hrung eines Kamms in einem leichten Winkel in die Sandwichstruktur wobei darauf geachtet k
53. tand h lt zusammengebaut Gel aufrecht Sandwiches zum Gie en Gele Verstellbare F e ebnen den Zaubernden Eine laminierte Dichtung in der unteren jeder Station Gie en dichtet den Boden des Sandwich wenn sie in den Stand eingespannt ist Cams Cams werden zweimal verwendet erstens um die versammelten Sandwich in der Casting Stand zu sichern und zweitens um das Sandwich an der oberen Pufferkammer zu befestigen Gummidichtungen Es gibt zwei Gruppen von zwei Dichtungen Die festen laminierte Dichtungen in die Unterseite des Gusses passen zu stehen und bilden die Dichtung zum Gie en des Gels Die geschlitzten Dichtungen unter dem oberen Pufferkammer anpasst wodurch die Dichtung zwischen den oberen und unteren Kammern Die Rippen auf der oberen Dichtung ausrichten Dichtungseinlageschlitz um einen offenen Kanal zwischen dem oberen Ende des Gels und der Puffer in der oberen Kammer aufrecht zu erhalten Abstandhalter Abstandhalter bestimmen die Dicke des Gels und sind in drei Dicken 0 75 1 0 und 1 5 mm und zwei Breiten 1 und 2 cm K nnen separat bestellt werden Spacer Mate Schablone Diese Vorlage richtet Abstandshalter w hrend der Sandwich Montage K mme K mme sind in Gr en die 10 zu bilden 12 15 20 oder 28 Vertiefungen zur Verf gung Pr parative Waben ein oder zwei Vertiefungen Bezugnahme zus tzlich auf eine pr parative gut Die meisten K mme sind in allen drei Dicken 0 75 1 0 und 1 5 mm
54. uftemperatur subtrahieren 10 W schneidet die Kurve bei etwa 1 C Wenn die gew nschte Temperatur ist 23 C stellen Sie die Badewanne zu 23 1 22 C Wenn die gew nschte Temperatur betr gt 4 C stellen Sie die Badewanne zu4 1 3 C CZD Abb 9 Pufferkammer Ebenen Ungefahre Mengen ben tigt SE600 4 5 liters SE660 7 0 liters e Niederspannung l uft e Anlagen nach dem gleichen Puffer in der oberen und unteren Kammern Obere und untere Kammer Puffer Ebenen sind gleich oder Ungef hre Mengen ben tigt SE600 4 0 liters SE660 6 0 liters e Hohe Spannung l uft e Die isoelektrische Fokussierung e Anlagen nach verschiedenen Puffern in den oberen und unteren Kammern Der Puffer Ebene sollte den gr ten Teil der Gel Sandwich um die W rmeableitung zu erm glichen sondern muss mindestens 2 cm Abstand unterhalb der oberen obere Kammer Puffer Ebene untere Kammer Puffer Ebene Ver nderungen in der Leistungsabgabe und Thermostatenbad Effizienz Wenn genaue Temperaturregelung ist entscheidend die Temperatur zu messen und bei Bedarf nachjustieren Optional k hlen Sie das Puffer Montieren Sie die obere Pufferkammer Montage in die untere Pufferkammer Verwenden Sie eine ruhige Hand zu verhindern daB die Proben Fassen Sie die Assembly
55. umen oder Konzentration F gen Sie weitere Mercaptoethanol oder Dithiothreitol berpr fen Probe Behandlung Protease Inhibitoren wie zB PMSF ggf proteolytischen Abbau der Probe zu verhindern Steigern Glycerin oder Saccharose zu Probe Dichte zu erh hen Shop Proben in Aliquots eingefroren werden um zu vermeiden wiederholtes Einfrieren und Auftauen Bewahren Sie bei 40 bis 80 C Bibliographie General Gallagher S R and Smith J A Electrophoretic separation of proteins In Current Protocols in Molecular Biology Ausubel F A eds OSC 10 2 1 10 2 21 1991 Hames B D and Rickwood D Gel Electropboresis of Proteins A Practical Approach Second edition City IRL Press 1990 Sambrook J and Russell D W Molecular Cloning A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Cold Spring Harbor NY 2001 Sasse J and Gallagher S R Staining proteins in gels Current Protocols in Molecular Biology Ausubel F A et al eds OSC 10 6 1 10 6 8 1991 SDS Polyacrylamide Gel Electrophoresis and Isoelectric Focusing Handbook 80 6013 88 Hoefer Inc 2001 Eine nicht denaturierende Gel Systeme Reisfeld R A et al Acidic buffer system for resolution of cationic proteins Nature 195 281 1962 McLellan T Electrophoresis buffers for polyacrylamide gels at various pH values Anal Biochem 126 94 1982 Hedrick J L and Smith A J Size and charge isomer separatio
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